精品解析：河北石家庄市河北辛集中学2025-2026学年高二年级下学期期中考试生物试题

河北辛集中学2025-2026学年度第二学期期中考试高二生物试题 一、单项选择题（共30小题，每小题2分，计60分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求） 1. 腐乳是利用传统发酵技术制作而成的大豆食品。下列相关叙述错误的是（ ） A. 参与腐乳发酵的菌种是混合菌种 B. 腐乳的发酵过程为固体发酵 C. 豆腐坯为菌种提供碳源、氮源等营养物质 D. 豆腐坯与腐乳的成分相同 2. 豆汁儿是老北京特色传统小吃之一，是以绿豆为原料得到的一种以酸味为主的发酵食品，具有养胃、解毒、清火的功效。其家庭制作过程为：泡豆→磨浆→沉淀→密封发酵。下列相关叙述正确的是（　　） A. 推测豆汁儿发酵过程所需的微生物主要是醋酸菌 B. “泡豆”前需要先将绿豆蒸煮以消除杂菌的干扰 C. 能为发酵菌种同时提供碳源和氮源的物质主要是蛋白质 D. “密封发酵”前可先通气培养，以增加发酵菌种的数量 3. 纤维素分解菌产生的纤维素酶能将纤维素水解成小分子物质。刚果红可与纤维素结合形成红色复合物，但不能与纤维素的水解产物反应。如图为纤维素分解菌在含刚果红的培养基中形成的透明圈。下列相关叙述错误的是（ ） A. 纤维素可为纤维素分解菌直接提供能量 B. 制备图示培养基时，需向其中加入琼脂 C. 实验时所用接种方法是稀释涂布平板法 D. 据图分析，d中菌落分解纤维素的能力较强 4. 井冈霉素是我国科学家发现的一种氨基寡糖类抗生素，它由吸水链霉菌井冈变种（JGs，一种放线菌，菌体呈丝状生长）发酵而来，在水稻病害防治等领域中得到广泛应用。下列关于JGs发酵生产井冈霉素的叙述，正确的是（ ） A. JGs可发酵生产井冈霉素，因为它含有能够编码井冈霉素的基因 B. JGs接入发酵罐前需要扩大培养，该过程不影响井冈霉素的产量 C. 提高JGs发酵培养基中营养物质的浓度，会提高井冈霉素的产量 D. 稀释涂布平板法不宜用于监控JGs发酵过程中活细胞数量的变化 5. 用纸片扩散法测定某病原菌对各种抗生素敏感性的实验，是在某病原菌均匀分布的平板上，铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养。图示2为培养的结果，其中抑菌圈是在纸片周围出现的透明区域。下列分析正确的是（ ） A. 在图示固体培养基上可用平板划线法或稀释涂布平板法接种病原菌 B. 图2中Ⅳ的抑菌圈中出现了部分菌落是病原菌与抗生素接触后发生了抗性变异 C. 接种后的平板在培养时的放置应如图1中②所示，可以防止污染 D. 不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响 6. 下列有关实验的操作中，错误的是（　　） ①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③对于不耐高温的液体，如牛奶，用巴氏消毒法消毒④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄都进行灭菌⑤培养基可采用高压蒸汽灭菌⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌⑦接种环应采用火焰灼烧的方式灭菌 A. ①③ B. ②④ C. ⑤⑦ D. ④⑥ 7. 袋装酸奶的包装上通常都会注明“胀袋勿食”。某同学选择—过期的胀袋密封酸奶，按图中的操作流程，研究其中的某微生物生长情况，有关叙述正确的是（ ） A. 使用巴氏消毒法可以杀死牛奶中的微生物和芽孢，但不破坏其营养成分 B. 酸奶胀袋是由于其中的乳酸菌无氧呼吸产生了CO2 C. 利用图示方法向培养基接种需要使用接种环，接种前和接种后都要对其进行灼烧灭菌 D. 若3个平板的平均菌落数是180个，则1mL酸奶中该微生物个数为9×106个 8. 近年来，以大面积砍伐森林用于种植咖啡树为代价，换取了全球咖啡产量的持续上升。芬兰国家技术研究中心近期利用“细胞农业”技术（即通过细胞扩大培养形成产物），成功培育出第一杯“人造咖啡”。已知“人造咖啡”中含有咖啡因、单宁酸等植物基本生命活动的非必需物质，与普通咖啡几乎没有区别。下列相关叙述错误的是（ ） A. 利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”，可减少对森林的大面积砍伐 B. 利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”体现了植物细胞具有全能性 C. “人造咖啡”的生产主要是利用促进细胞增殖的培养条件，以增加目标产物的产量 D. “人造咖啡”中的咖啡因与单宁酸属于植物细胞的次生代谢物 9. 花粉细胞壁通常分为外壁和内壁，其中外壁的主要成分是孢粉素（一种有机化合物，化学性质稳定），内壁的主要成分是果胶和纤维素。研究人员利用植物细胞杂交技术将番茄（2n=24）和马铃薯（4n=48）的花粉进行融合，经培育、筛选获得了番茄——马铃薯杂种植株，过程如下图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 过程①加入适量纤维素酶和果胶酶即可获得原生质体 B. 过程③可通过显微镜下观察染色体数目筛选杂种细胞 C. 过程④脱分化和再分化培养基中添加的植物激素种类不同 D. 杂种植株中不存在同源染色体，需经秋水仙素处理才可育 10. 下列关于体内受精过程的排序，正确的是（ ） ①受精卵第一次分裂开始 ②释放第二极体③获能后的精子与卵子相遇并释放多种酶 ④精子穿越卵细胞膜外的结构⑤雌、雄原核的形成 ⑥两个原核靠近，核膜消失 A. ①②③④⑤⑥ B. ③②④⑤⑥① C. ④⑤②①③⑥ D. ③④②⑤⑥① 11. 下列有关哺乳动物受精过程和早期胚胎发育叙述正确的是（ ） A. 在自然条件下，受精和受精卵最初的几次分裂在输卵管中完成 B. 精子需要获能才能与卵子结合，而卵子一经排出即可受精 C. 受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加，每个细胞的体积却基本保持不变 D. 囊胚期的内细胞团细胞是完全未分化的细胞，每个细胞都能够单独发育为完整个体 12. 猴的克隆胚胎在发育过程中往往出现基因的异常甲基化修饰以及胎盘发育异常，导致克隆成功率较低。我国科学家采用一定的技术手段对克隆胚胎进行处理，如图所示，提高了克隆成功率，并在2024年获得了首个活到成年的克隆猴。下列分析错误的是（　　） A. 成纤维细胞应注入去除纺锤体-染色体复合物的食蟹猴MII期卵母细胞 B. Kdm4d的mRNA和酶TSA通过影响表观遗传促进胚胎细胞的正常分化 C. 囊胚b的滋养层将发育为胎盘，为克隆胚胎提供营养并改变其遗传特性 D. 该技术在克隆具有特定疾病的模型动物以及辅助生殖等领域有广阔前景 13. 早在2018年，当最后一头雄性北白犀离世那天起，地球上就只剩下2头雌性北白犀。下列利用现代科技帮助它们产生后代的方案中不可行的是（ ） A. 将北白犀的体细胞与去核卵母细胞融合，利用胚胎移植等技术培育出新个体 B. 将北白犀的卵细胞与保存的精细胞体外受精，通过胚胎分割技术培育更多个体 C. 将北白犀的体细胞与骨髓瘤细胞融合，利用动物细胞培养技术培育出新个体 D. 将北白犀的体细胞诱导成多能干细胞，进而诱导出生殖细胞再繁衍培育新个体 14. 胚胎工程的发展让大量繁殖优良家畜品种的愿望成为现实，图1是牛胚胎移植的示意图，图2是哺乳动物胚胎的早期发育示意图。下列叙述正确的是（ ） A. 图1中的供体母牛和受体母牛不需要进行同期发情处理 B. 图1中具有优良性状的供体公牛可用本地普通牛取代，而供体母牛不能 C. 图2中的ABCDE均可作为图1中进行移植的胚胎 D. 图2中的3代表滋养层细胞，其可以用于DNA分析和性别鉴定 15. 我国科学家经多年试验成功培育出了世界首例体细胞克隆猴，其流程如图所示。相关叙述正确的是（　　） A. 采集的卵母细胞需体外培养至排出两个极体后再进行去核操作 B. 代孕猴C基本不会对植入的胚胎发生排斥反应，无需注射免疫抑制剂 C. 胚胎移植后，重构胚进一步扩大导致滋养层破裂的过程称为孵化 D. 组蛋白的甲基化和乙酰化均利于重构胚完成细胞分裂和发育过程 16. “工欲善其事，必先利其器。”下列关于基因工程操作工具的叙述，正确的是（ ） A. EcoRⅠ限制酶处理目的基因后可得到平末端 B. 大部分限制酶的识别序列由12个核苷酸组成 C. 除质粒外，部分DNA病毒也可以用作载体 D. DNA聚合酶可替代DNA连接酶用于基因工程 17. 关于DNA相关实验的叙述，正确的是（　　） A. 粗提取DNA时，离心研磨液是为加速DNA的沉淀 B. 粗提取后鉴定DNA时，将白色丝状物加入二苯胺试剂，沸水浴后冷却，出现蓝色 C. PCR扩增DNA片段时，G—C含量高的引物设置较高的复性温度可减少非特异性扩增 D. 电泳鉴定DNA时，凝胶载样缓冲液中的核酸染料能与DNA分子结合，便于在紫外灯下观察 18. 杂交技术在生物学上应用广泛，包括个体水平、细胞水平和分子水平都可以运用杂交。下列叙述正确的是（　　） A. 生产中培育香蕉脱毒苗常用植物体细胞杂交技术 B. 构建特定疾病模型的动物可用动物细胞杂交瘤技术 C. 抗原—抗体杂交可检测目的基因是否转录出了mRNA D. DNA分子杂交技术可以用来比较不同种生物DNA分子的差异 19. 结肠癌是发病率高的癌症之一，患者血清中的M蛋白含量显著降低，据此推测M基因可能是一种抑癌基因。研究人员利用数据库筛选到一种可促进M基因转录的E蛋白。推测E蛋白通过与M基因启动子区域结合，促进M基因的表达。将相应质粒分别转入两组相同的细胞中，一段时间后收集细胞裂解液，检测荧光强度。结果显示甲组荧光强度明显高于乙组，从而证实推测。请从下列选项中选择转入甲组细胞和转入乙组．细胞的表达载体（ ） A. ac af B. bc bf C. bd be D. ad ae 20. 某科研团队利用基因工程技术改造里氏木霉（工业上生产纤维素酶的重要菌株），用于生产人源溶酶体酶，流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 敲除内源纤维素酶基因的目的是避免发酵产物被降解 B. 配制转基因里氏木霉的培养基时应用纤维素作为碳源 C. 改造里氏木霉蛋白质分泌途径可以提高目标产物的分泌效率 D. 用大肠杆菌代替里氏木霉获得的目标产物分子结构完全相同 21. 为评估外源基因Vgb在菊花中的稳定性，研究人员在种植转基因菊花的第2年，随机选取转基因菊花株系提取DNA，并设计特异性引物进行扩增，凝胶电泳结果如图所示。下列叙述正确的是（ ） 注：CK表示阳性对照，1为空白对照，2～10为转基因株系。 A. 若点样孔在a端，则靠近a端的片段比靠近b端的片段小 B. 设置空白对照可排除无关变量对实验结果的影响 C. 结果表明2年内Vgb基因在菊花细胞中不稳定 D. DNA分子在凝胶中的迁移速率与凝胶浓度无关 22. 乳糖不耐症是由于乳糖酶（LCT）分泌少，不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的非感染性腹泻。科研工作者利用生物技术培育出转基因低乳糖奶牛新品种，给患乳糖不耐症患者带来福音。下图为转基因低乳糖奶牛的培育流程，下列说法正确的是（　　） A. 若想得到更多转基因低乳糖奶牛，可在胚胎发育任何阶段利用胚胎分割技术将胚胎进行分割 B. 扩增目的基因时，目的基因在PCR仪中经过4次循环，需要32个引物 C. 从分子水平上检测转基因牛细胞中LCT基因是否表达的方法是核酸分子杂交技术 D. 在转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中，可检测到的物质有LCT基因、LCTmRNA、LCT 23. 在基因工程操作过程中，科研人员利用限制酶BamHⅠ和SmaⅠ处理某DNA分子，然后将产物进行电泳处理，结果如图所示。下列有关叙述正确的是（ ） A. 限制酶能识别特定的DNA序列，并在特定部位进行切割和连接 B. 从结果无法判断该DNA分子是环状DNA还是线性DNA C. 该DNA上BamHⅠ和SmaⅠ的切割位点分别是两个和一个 D. 同时用BamHⅠ和SmaⅠ处理得到的两种DNA片段的数量比接近1∶2 24. Ti质粒的Vir基因表达产生的Vir蛋白能在T-DNA左右边界序列中产生切口，并复制出单链T-DNA从Ti质粒上释放后进入植物细胞。T-DNA左右边界序列与植物细胞DNA分子中某些序列有极强的同源性，因此可以插入植物细胞基因组中。T-DNA的生长素基因和细胞分裂素基因能使植物组织过度生长。形成瘤状组织（冠瘿），影响植物的正常生理功能。冠瘿碱合成基因使植物细胞合成并分泌冠瘿碱（一种氨基酸衍生物），为农杆菌的生长提供碳源和氮源。下列叙述不正确的是（ ） A. Ti质粒中的冠瘿碱合成基因与植物细胞染色体DNA整合后，其最终表达产物可用来催化合成冠瘿碱 B. 为保证转基因植物正常生长，Ti质粒作载体时需将生长素基因和细胞分裂素基因敲除 C. 应将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上且不能破坏左右边界序列 D. Ti质粒作为基因工程载体时，需将Vir基因替换成标记基因，用于重组DNA分子的筛选 25. 第四代试管婴儿技术解决的主要问题是女方高龄、卵细胞老化，该技术借助捐献者的优势卵泡将原本的劣势卵泡进行“换壳”，最终保证优质胚胎的形成，其过程如图所示。下列有关叙述合理的是（ ） A. 第四代试管婴儿技术给所有不孕不育患者带来福音 B. 图中新生儿因涉及三个亲代因而面临社会伦理问题 C. 获取的精子即可与核移植的体外培养成熟的卵子结合 D. 母体会对移植后的早期胚胎发生免疫排斥反应，需要注射免疫抑制剂 26. 铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一。研究人员通过培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱，过程及结果如下图。相关叙述正确的是（ ） A. 过程①获得的幼芽应先用无水乙醇灭菌30min，再用次氯酸钠溶液处理30s B. 过程③涉及的生物学原理是细胞膜的流动性 C. 过程②固体培养基中生长素与赤霉素比例适中有利于拟原球茎的形成 D. 结果表明，生物碱含量与PLBs重量成正相关，光照条件有利于PLBs的生长 27. 单个B细胞抗体技术可用于制备高亲和力、高特异性的单抗，其技术流程如下：①康复者单个B淋巴细胞的分离和筛选；②利用RT—PCR获取和扩增抗体基因；③构建基因表达载体；④将抗体基因导入动物细胞；⑤单抗的筛选和鉴定。下列叙述错误的是（　　） A. 操作①选用单个B淋巴细胞以保证最终获得纯度较高的单抗 B. 操作②使用的PCR反应体系还可用于目的基因的检测与鉴定 C. 操作③常用两种限制酶切割抗体基因和载体以防止其自身环化 D. 操作④前可用Ca2+处理受体细胞促使其主动吸收DNA分子 28. 干细胞有自我更新能力及分化潜能，小鼠成纤维细胞可被诱导成为iPS细胞，而小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞用于研究。某科研小组采用“胚胎干细胞介导法”将荧光素基因导入纯种灰色小鼠胚胎干细胞（ES细胞）中并整合到染色体上，然后将转基因的ES细胞注射到纯种黄色小鼠囊胚中培育嵌合体小鼠。下列错误的是（ ） A. 荧光素基因可用于检测子代小鼠体内由灰色小鼠胚胎发育的部分 B. iPS细胞也能由已分化的B细胞和T细胞诱导而来，用iPS细胞分化形成的器官组织治疗疾病理论上可以避免免疫排斥 C. 注入ES细胞的囊胚移植前需用激素对受体母鼠进行同期发情处理 D. 割取黄色小鼠囊胚的滋养层细胞做DNA分析或核型分析即可检测嵌合体子代鼠的性别 29. 生物经济一直是国家关注的重点行业之一，发展生物经济产业对于我国经济的转型升级具有重要意义。在2024年政府工作报告中，把生物经济中“生物制造”列为新增长引擎之一，而“生物制造”离不开生物工程。以下关于生物工程的说法正确的是（ ） A. 提取乳酸菌的单细胞蛋白并将其添加在动物饲料中可提高饲料的品质 B. 理论上，可通过基因工程和克隆技术生产出不会引起免疫排斥的猪器官 C. 利用植物细胞全能性的原理进行的细胞产物工厂化生产不受季节、天气的限制 D. 正常造血干细胞移植到病人体内可治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病 30. 下图表示基因工程所使用的一种质粒和某种目的基因的结构，其中lacZ基因表达的产物可将无色物质X-gal催化为蓝色物质，从而使受体菌的菌落呈现蓝色。下列叙述错误的是（ ） 注：kb代表碱基对，Kanr基因为卡那霉素抗性基因 A. 图中目的基因上的为DNA链的5′端、OH为DNA链的3′端 B. 为将目的基因准确插入质粒中，最好选用BamHⅠ和XmaⅠ酶切割目的基因 C. 若将重组质粒用EcoRⅠ充分酶切后，通过琼脂糖凝胶电泳分离，可得到3个条带 D. 若要准确筛选出含重组质粒的受体菌，需将其培养在添加卡那霉素和X-gal的培养基上 二、多项选择题（共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错的得0分） 31. 同种生物的细胞可在自然条件下发生融合，不同种生物的细胞也可经诱导发生融合。如图为细胞融合过程示意图。下列叙述错误的是（　　） A. 形成有性杂交后代时，a、b是生殖细胞，d是受精卵 B. 培育的体细胞杂交植株，兼具a、b的所有优良性状 C. 制备单克隆抗体时，a、b和d细胞均可进行有丝分裂 D. 培育体细胞杂交植株和制备单克隆抗体时诱导融合方法完全不同 32. 下图为借助CRISPR/Cas9基因编辑技术插入外源基因的过程图，其中PAM序列是一个短DNA序列，单链向导RNA可引导Cas9内切酶到特定的基因位点进行切割。下列叙述错误的是（　　） A. Cas9内切酶能将脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断开 B. 细菌细胞中的限制酶也能起到类似Cas9内切酶的作用 C. Cas9内切酶定点切割与向导RNA和目标DNA结合无关 D. 双链DNA的断裂修复过程需要DNA聚合酶的催化 33. 如图为利用发酵工程生产生物产品的流程图，有关叙述错误的是（　　） A. 图中①②可分别表示基因工程育种和诱变育种 B. 配制的培养基在进行③之前需严格灭菌，以防杂菌污染 C. ③为发酵工程的中心环节，该过程需及时补充氧气并搅拌 D. 若④为单细胞蛋白，可采取适当提取、分离和纯化措施获得 34. 中科院研究团队成功培育出全球首例只有双雌来源的孤雌小鼠和双雄来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图所示。已知性染色体组成为YY的胚胎不能发育，相关叙述错误的是（ ） A. 用雌激素对母鼠进行超数排卵处理可获得更多卵母细胞 B. 精子转化为ahESC的过程相当于植物组织培养中的再分化 C. 图中孤雌小鼠性染色体组成为XX，孤雄小鼠性染色体组成为XY D. 孤雄小鼠的获得利用了细胞工程、基因工程、胚胎工程相关技术 35. 某小组通过PCR（假设引物长度为8个碱基，短于实际长度）获得了含目的基因的DNA片段，用限制酶进行酶切后，再用所得片段进行基因工程后续操作。下列叙述正确的是（　　） A. 若将Spe I和Nhe I切出的末端连接形成片段，则该片段不能再被二者识别并切割 B. PCR中一个引物的序列为 5’ - TGCGCAGT - 3’，第3轮循环需消耗4个该引物 C. 步骤①所用的酶是Nhe I和Cfo I，酶切后共产生2个游离的磷酸基团 D. 酶切片段和载体连接时，仅可使用E.coli DNA连接酶催化磷酸二酯键合成 第Ⅱ卷（非选择题） 三、非选择题（共3题，共25分） 36. 卡拉胶是一种大分子聚合物硫酸多糖，溶解性较差，可被卡拉胶酶降解。降解产物具有多种生物活性，如抗炎、抗凝血等，在食品、医药等领域具有广阔的应用前景。科研人员利用腐烂的角叉菜为材料，筛选了高产卡拉胶酶的菌株，过程如下图。 （1）筛选高产卡拉胶酶菌株的培养基按物理性质是_____培养基，为检测该培养基灭菌是否彻底，应采用的检测方法是将______（填“未接种”或“接种”）的培养基放在恒温培养箱中培养，检验是否有菌落产生。 （2）培养基中的卡拉胶被卡拉胶酶降解，在菌落周围会形成______。根据上图中初筛的结果判断，欲进一步纯化培养菌株时，应挑取培养基a中的菌落_______（填字母）。 （3）结合上图分析，科研人员采用了_______法对产卡拉胶酶菌株进行了初筛。从试管⑤中分别取0.2 mL稀释液，涂布在三个上述培养基上，培养72小时后，三个培养基上的菌落数分别为：56、59、62，推测腐烂角叉菜液中菌株数为_______个/L。利用上述方法进行微生物分离计数时，通常需要用到的实验用具有_____（填下图中相应的序号）。 37. 科学家通过体外诱导黑鼠体细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），并利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如图所示。回答下列问题： （1）在培养iPS细胞的过程中，培养基中应含有细胞所需的各种营养物质，还应该清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，需要进行的操作是___________。 （2）图中重组囊胚需植入白鼠子宫内继续发育，移植后需对受体进行_______检查。若想进一步提高胚胎的利用率，可采用______技术。 （3）小鼠的胚胎干细胞可由囊胚的______分离培养获得。克隆鼠的遗传物质来自_______鼠。 38. 枣树细胞中的金属硫蛋白（MT）具有结合金属的能力，科学家利用基因工程的方法获得可吸附和耐受重金属镉的大肠杆菌用于环境领域。回答下列问题： （1）研究人员可提取枣树细胞的mRNA并进行________来获取MT基因。 （2）若用PCR的方法获取MT基因（其结构如图1所示，A链为转录的模板链），并利用图2所示质粒构建重组DNA分子（相关限制酶切位点已注明）。则PCR时应选择引物________和引物________。为实现MT基因与载体的定向连接，需在引物________（填“5”或“3”）末端分别添加限制酶________和________的识别序列。 （3）基因工程的核心步骤是________。与启动子相比，密码子特有的碱基为________（填中文名称）。 （4）将目的基因导入大肠杆菌时，需用________处理大肠杆菌。导入后，可依次用含________和________的固体培养基培养大肠杆菌（在分子水平上，可用________方法检测MT是否成功表达。此外，还可用含________的液体培养基培养大肠杆菌并检测其一段时间后的数量变化，从而选择出可吸附和耐受重金属镉的大肠杆菌。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 河北辛集中学2025-2026学年度第二学期期中考试高二生物试题 一、单项选择题（共30小题，每小题2分，计60分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求） 1. 腐乳是利用传统发酵技术制作而成的大豆食品。下列相关叙述错误的是（ ） A. 参与腐乳发酵的菌种是混合菌种 B. 腐乳的发酵过程为固体发酵 C. 豆腐坯为菌种提供碳源、氮源等营养物质 D. 豆腐坯与腐乳的成分相同 【答案】D 【解析】 【分析】腐乳发酵是多种微生物参与的过程，如毛霉、曲霉等，属于混合菌种。毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，使腐乳具有细腻的口感和独特风味。 【详解】A、腐乳发酵过程中有多种微生物参与，如毛霉、曲霉等，是混合菌种，A正确； B、腐乳发酵是在豆腐块表面进行，属于固体发酵，B正确； C、豆腐坯含有蛋白质、脂肪等物质，能为菌种提供碳源、氮源等营养物质，C正确 ； D、豆腐坯经过发酵后，在微生物产生的蛋白酶、脂肪酶等的作用下，蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪被分解成甘油和脂肪酸等，成分发生了很大变化，与豆腐坯成分不同，D错误。 故选D。 2. 豆汁儿是老北京特色传统小吃之一，是以绿豆为原料得到的一种以酸味为主的发酵食品，具有养胃、解毒、清火的功效。其家庭制作过程为：泡豆→磨浆→沉淀→密封发酵。下列相关叙述正确的是（　　） A. 推测豆汁儿发酵过程所需的微生物主要是醋酸菌 B. “泡豆”前需要先将绿豆蒸煮以消除杂菌的干扰 C. 能为发酵菌种同时提供碳源和氮源的物质主要是蛋白质 D. “密封发酵”前可先通气培养，以增加发酵菌种的数量 【答案】D 【解析】 【分析】1、发酵微生物的培养条件 培养条件：发酵微生物的培养条件包括温度、pH值、氧气供应等。不同的微生物对这些条件有不同的要求。例如，好氧性发酵需要不断地通入一定量的无菌空气，而厌氧性发酵则不需要供给空气。 2、发酵微生物的营养物质利用 营养物质利用：发酵微生物以有机物为进料来源，通过代谢转化，将其转换为有机酸、醇、酯、酸乳（酸奶）、甜醇、气体等多种物质。它们能够利用各种碳源、氮源、无机盐和辅料进行发酵代谢。 【详解】A、醋酸菌主要用于醋酸发酵，产生醋酸，而豆汁儿是以酸味为主的发酵食品，一般是乳酸菌发酵产生乳酸导致的酸味，不是醋酸菌，A错误； B、“泡豆”前若将绿豆蒸煮，会杀死绿豆中的有益微生物，同时也会影响后续发酵过程中微生物的生长和代谢，不能蒸煮，B错误； C、绿豆中富含蛋白质和淀粉等物质，蛋白质既能为发酵菌种提供碳源，也能提供氮源，但淀粉等糖类也能为微生物提供碳源，说主要是蛋白质不准确，C错误； D、如果发酵菌种是兼性厌氧型微生物（如酵母菌等，这里假设豆汁儿发酵菌种有类似特性），在“密封发酵”前先通气培养，微生物进行有氧呼吸，能快速繁殖，从而增加发酵菌种的数量，D正确。 故选D。 3. 纤维素分解菌产生的纤维素酶能将纤维素水解成小分子物质。刚果红可与纤维素结合形成红色复合物，但不能与纤维素的水解产物反应。如图为纤维素分解菌在含刚果红的培养基中形成的透明圈。下列相关叙述错误的是（ ） A. 纤维素可为纤维素分解菌直接提供能量 B. 制备图示培养基时，需向其中加入琼脂 C. 实验时所用接种方法是稀释涂布平板法 D. 据图分析，d中菌落分解纤维素的能力较强 【答案】A 【解析】 【分析】分离纤维素分解菌的原理：在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。 【详解】A、ATP可以为纤维素分解菌直接提供能量，A错误； B、该培养基从物理性质上来看属于固体培养基，制备图示培养基时，需向其中加入琼脂，B正确； C、图中用到的接种方法为稀释涂布平板法，C正确； D、据图分析，d中菌落透明圈与菌落直径的比值相对较大，因此d中菌落分解纤维素的能力较强，D正确。 故选A。 4. 井冈霉素是我国科学家发现的一种氨基寡糖类抗生素，它由吸水链霉菌井冈变种（JGs，一种放线菌，菌体呈丝状生长）发酵而来，在水稻病害防治等领域中得到广泛应用。下列关于JGs发酵生产井冈霉素的叙述，正确的是（ ） A. JGs可发酵生产井冈霉素，因为它含有能够编码井冈霉素的基因 B. JGs接入发酵罐前需要扩大培养，该过程不影响井冈霉素的产量 C. 提高JGs发酵培养基中营养物质的浓度，会提高井冈霉素的产量 D. 稀释涂布平板法不宜用于监控JGs发酵过程中活细胞数量的变化 【答案】D 【解析】 【分析】1、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。 2、 产品不同，分离提纯的方法一般不同。（1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；（2） 如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。 3、 发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。 4、 发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强， 因而可以得到较为专的产物。 【详解】A、基因表达的产物是蛋白质，而井冈霉素是JGs发酵生产的一种氨基寡糖类抗生素，A错误； B、JGs接入发酵罐前需要扩大培养，该过程会影响JGs的数量，进而影响井冈霉素的产量，B错误； C、在一定范围内提高JGs发酵培养基中营养物质的浓度，会提高井冈霉素的产量，但若浓度过大，反而会降低井冈霉素的产量，C错误； D、JGs是一种放线菌，菌体呈丝状生长，形成的菌落难以区分，因此稀释涂布平板法不宜用于监控JGs发酵过程中活细胞数量的变化，D正确。 故选D。 5. 用纸片扩散法测定某病原菌对各种抗生素敏感性的实验，是在某病原菌均匀分布的平板上，铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养。图示2为培养的结果，其中抑菌圈是在纸片周围出现的透明区域。下列分析正确的是（ ） A. 在图示固体培养基上可用平板划线法或稀释涂布平板法接种病原菌 B. 图2中Ⅳ的抑菌圈中出现了部分菌落是病原菌与抗生素接触后发生了抗性变异 C. 接种后的平板在培养时的放置应如图1中②所示，可以防止污染 D. 不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响 【答案】D 【解析】 【分析】1、微生物常见的接种的方法： （1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落； （2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落； 2、纸片扩散法是药敏实验一种常用的方法，它将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片所含的药物吸取平板中的水分溶解后便不断向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌生长被抑制，形成透明的抑菌圈。 【详解】A、图示固体培养基上需要菌液均匀分布，故在该固体培养基上采用的是稀释涂布平板法，不能使用平板划线法，A错误； B、抗性变异在抗生素选择之前就已经存在，不是选择的结果，B错误； C、倒好平板后应立即将其倒置,防止水蒸气落在培养基上造成污染，接种后的平板在培养时的放置应如图1中①所示，可以防止污染，C错误； D、纸片所含的药物吸取平板中的水分溶解后便不断向纸片周围区域扩散，不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响，D正确。 故选D。 6. 下列有关实验的操作中，错误的是（　　） ①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③对于不耐高温的液体，如牛奶，用巴氏消毒法消毒④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄都进行灭菌⑤培养基可采用高压蒸汽灭菌⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌⑦接种环应采用火焰灼烧的方式灭菌 A. ①③ B. ②④ C. ⑤⑦ D. ④⑥ 【答案】D 【解析】 【分析】使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。 【详解】①100℃煮沸5～6min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢，①正确； ②酒精灯火焰附近存在一个无菌区，为了无菌操作，接种操作要在酒精灯火焰附近进行，②正确； ③对牛奶这种不耐高温的液体可用巴氏消毒法消毒，③正确； ④利用葡萄制作葡萄酒利用的是附着于葡萄皮表面的野生型酵母菌，所以制作葡萄酒时葡萄不进行灭菌，以免杀死酵母菌，④错误； ⑤培养基通常用高压蒸汽灭菌的方法进行灭菌，⑤正确； ⑥指示剂和染料可能混有微生物，故加入培养基前需灭菌，⑥错误； ⑦接种环应采用火焰灼烧的方式灭菌，即用灼烧灭菌法进行灭菌，⑦正确。综上分析④⑥错误，ABC正确 ，D错误。 故选D。 7. 袋装酸奶的包装上通常都会注明“胀袋勿食”。某同学选择—过期的胀袋密封酸奶，按图中的操作流程，研究其中的某微生物生长情况，有关叙述正确的是（ ） A. 使用巴氏消毒法可以杀死牛奶中的微生物和芽孢，但不破坏其营养成分 B. 酸奶胀袋是由于其中的乳酸菌无氧呼吸产生了CO2 C. 利用图示方法向培养基接种需要使用接种环，接种前和接种后都要对其进行灼烧灭菌 D. 若3个平板的平均菌落数是180个，则1mL酸奶中该微生物个数为9×106个 【答案】D 【解析】 【分析】1、消毒：用温和的化学或物理方法，杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢、孢子）的过程。 2、稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、消毒只能杀死物体表面或内部的部分微生物，不能杀死芽孢，巴氏消毒法可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且不破坏牛奶的营养成分，A错误； B、乳酸菌无氧呼吸的产物只有乳酸一种，不会产生二氧化碳，B错误； C、图示采用的接种方法是稀释涂布平板法，该方法所用的接种工具是涂布器，C错误； D、分析图可知，图中接种的浓度是104，若3个平板的平均菌落数是180个，则1ml酸奶中该微生物个数为180÷0.2×104=9×106个，D正确。 故选D。 8. 近年来，以大面积砍伐森林用于种植咖啡树为代价，换取了全球咖啡产量的持续上升。芬兰国家技术研究中心近期利用“细胞农业”技术（即通过细胞扩大培养形成产物），成功培育出第一杯“人造咖啡”。已知“人造咖啡”中含有咖啡因、单宁酸等植物基本生命活动的非必需物质，与普通咖啡几乎没有区别。下列相关叙述错误的是（ ） A. 利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”，可减少对森林的大面积砍伐 B. 利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”体现了植物细胞具有全能性 C. “人造咖啡”的生产主要是利用促进细胞增殖的培养条件，以增加目标产物的产量 D. “人造咖啡”中的咖啡因与单宁酸属于植物细胞的次生代谢物 【答案】B 【解析】 【分析】植物细胞培养是在离体条件下，将愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中进行震荡培养，得到分散成游离的悬浮细胞，通过继代培养使细胞增殖，从而获得大量细胞群体的一种技术。 【详解】A 、因为多国大面积砍伐森林用于种植咖啡树，而“人造咖啡”的出现可减少对森林的依赖，从而减少对森林的大面积砍伐，A正确； B 、植物细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能，而利用“细胞农业”技术只是培养出了产物，不是发育成完整个体，不能体现细胞的全能性，B错误； C 、液体悬浮培养可以增加细胞与培养液的接触面积，有利于物质交换，从而可能增加“人造咖啡”的产量，C正确； D 、植物次生代谢产物是由次生代谢产生的一类细胞生命活动或植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，咖啡因与单宁酸属于植物细胞的次生代谢产物，D正确。 故选B。 9. 花粉细胞壁通常分为外壁和内壁，其中外壁的主要成分是孢粉素（一种有机化合物，化学性质稳定），内壁的主要成分是果胶和纤维素。研究人员利用植物细胞杂交技术将番茄（2n=24）和马铃薯（4n=48）的花粉进行融合，经培育、筛选获得了番茄——马铃薯杂种植株，过程如下图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 过程①加入适量纤维素酶和果胶酶即可获得原生质体 B. 过程③可通过显微镜下观察染色体数目筛选杂种细胞 C. 过程④脱分化和再分化培养基中添加的植物激素种类不同 D. 杂种植株中不存在同源染色体，需经秋水仙素处理才可育 【答案】B 【解析】 【分析】1、植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培育成新植株。该过程利用了细胞膜的流动性和植物细胞的全能性；在融合之前需先用纤维素酶和果胶酶去除植物的细胞壁获得原生质体，杂种细胞再生出新的细胞壁是细胞融合完成的标志。 2、植物的组织培养包括脱分化和再分化两个阶段，脱分化一般不需要光照，再分化阶段需要光照条件，培养过程中均需要加入生长素和细胞分裂素，但加入的比例和含量不同。 【详解】A、由题意可知，花粉细胞壁的成分不只有纤维素和果胶，还有孢粉素，因此过程①还需加入分解孢粉素的酶，A错误； B、番茄花粉中的染色体数目为12条，马铃薯花粉中的染色体数目为24条，二者融合后形成的杂种细胞染色体数目为36条，可通过显微镜观察染色体数目来筛选杂种细胞，B正确； C、过程④脱分化和再分化培养基中添加的植物激素一般均为生长素和细胞分裂素，但加入的比例和含量不同，C错误； D、杂种植株中含有马铃薯的两个染色体组，存在同源染色体，D错误。 故选B。 10. 下列关于体内受精过程的排序，正确的是（ ） ①受精卵第一次分裂开始 ②释放第二极体③获能后的精子与卵子相遇并释放多种酶 ④精子穿越卵细胞膜外的结构⑤雌、雄原核的形成 ⑥两个原核靠近，核膜消失 A. ①②③④⑤⑥ B. ③②④⑤⑥① C. ④⑤②①③⑥ D. ③④②⑤⑥① 【答案】D 【解析】 【分析】受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。 【详解】受精过程为：获能后的精子与卵子相遇并释放多种酶 →精子穿越卵细胞膜外的结构相继发生顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→受精卵第一次分裂开始。故过程为③④②⑤⑥①。 故选D。 11. 下列有关哺乳动物受精过程和早期胚胎发育叙述正确的是（ ） A. 在自然条件下，受精和受精卵最初的几次分裂在输卵管中完成 B. 精子需要获能才能与卵子结合，而卵子一经排出即可受精 C. 受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加，每个细胞的体积却基本保持不变 D. 囊胚期的内细胞团细胞是完全未分化的细胞，每个细胞都能够单独发育为完整个体 【答案】A 【解析】 【分析】受精是精子与卵子结合形成合子（即受精卵）的过程，包括受精前的准备阶段和受精阶段。在自然条件下，哺乳动物的受精在输卵管内完成。 【详解】AB、卵母细胞被排出后尚未成熟，进入输卵管一边向子宫移动一边成熟，精子与成熟卵母细胞在输卵管结合，完成受精后，在输卵管内即开始分裂和发育，A正确、B错误； C、胚胎发育卵裂时期细胞数量不断增加，但胚胎的总体积并不增加，因此每个细胞体积会减少，C错误； D、囊胚期的内细胞团细胞是完全未分化的细胞不能分化为胎膜和胎盘，因此不能单独发育为完整个体，D错误。 故选A。 12. 猴的克隆胚胎在发育过程中往往出现基因的异常甲基化修饰以及胎盘发育异常，导致克隆成功率较低。我国科学家采用一定的技术手段对克隆胚胎进行处理，如图所示，提高了克隆成功率，并在2024年获得了首个活到成年的克隆猴。下列分析错误的是（　　） A. 成纤维细胞应注入去除纺锤体-染色体复合物的食蟹猴MII期卵母细胞 B. Kdm4d的mRNA和酶TSA通过影响表观遗传促进胚胎细胞的正常分化 C. 囊胚b的滋养层将发育为胎盘，为克隆胚胎提供营养并改变其遗传特性 D. 该技术在克隆具有特定疾病的模型动物以及辅助生殖等领域有广阔前景 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。 【详解】A、在体细胞核移植（克隆）过程中，供体细胞（如成纤维细胞）的核需要注入去除了纺锤体-染色体复合物的MII期卵母细胞中，以确保供体细胞的基因组能够替代卵母细胞的基因组，A正确； B、Kdm4d是一种组蛋白去甲基化酶，TSA（曲古抑菌素A）是一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂。它们通过调节表观遗传（如DNA甲基化和组蛋白修饰），促进克隆胚胎的正常发育和分化，B正确； C、囊胚的滋养层确实会发育为胎盘，为胚胎提供营养，但胎盘不会改变胚胎的遗传特性，C错误； D、通过克隆技术可以创建特定疾病的动物模型，用于研究疾病机制和药物开发。此外，该技术还可能用于辅助生殖，帮助解决不孕不育等问题，D正确。 故选C。 13. 早在2018年，当最后一头雄性北白犀离世那天起，地球上就只剩下2头雌性北白犀。下列利用现代科技帮助它们产生后代的方案中不可行的是（ ） A. 将北白犀的体细胞与去核卵母细胞融合，利用胚胎移植等技术培育出新个体 B. 将北白犀的卵细胞与保存的精细胞体外受精，通过胚胎分割技术培育更多个体 C. 将北白犀的体细胞与骨髓瘤细胞融合，利用动物细胞培养技术培育出新个体 D. 将北白犀的体细胞诱导成多能干细胞，进而诱导出生殖细胞再繁衍培育新个体 【答案】C 【解析】 【分析】核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体；用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，原理是动物细胞核的全能性。 【详解】A、将北白犀的体细胞与去核卵母细胞融合，利用胚胎移植等技术培育出新个体，该过程属于克隆，方案可行，A正确； B、将北白犀的卵细胞与保存的精细胞体外受精，培养到桑椹胚（桑葚胚）或囊胚阶段后，通过胚胎分割技术培育更多个体，方案可行，B正确； C、动物细胞全能性受限制，现有技术无法将动物细胞直接培育为完整个体，C错误； D、将北白犀的体细胞诱导成多能干细胞，进而诱导出生殖细胞，由生殖细胞再繁衍培育新个体属于干细胞技术的应用，该方案可行，D正确。 故选C。 14. 胚胎工程的发展让大量繁殖优良家畜品种的愿望成为现实，图1是牛胚胎移植的示意图，图2是哺乳动物胚胎的早期发育示意图。下列叙述正确的是（ ） A. 图1中的供体母牛和受体母牛不需要进行同期发情处理 B. 图1中具有优良性状的供体公牛可用本地普通牛取代，而供体母牛不能 C. 图2中的ABCDE均可作为图1中进行移植的胚胎 D. 图2中的3代表滋养层细胞，其可以用于DNA分析和性别鉴定 【答案】D 【解析】 【分析】胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎（如桑葚胚或囊胚）移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内，使其继续发育为新个体的技术。通过胚胎移植技术可以充分发挥优良母畜的繁殖潜力，快速扩大优良品种数量。缩短供体本身的繁殖周期，提高繁殖效率（一头供体母牛一年可获得多胎后代）。   【详解】A、在胚胎移植过程中，供体母牛和受体母牛需要进行同期发情处理，使它们的生理状态相同，这样才能为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境，以利于胚胎的存活和发育，A错误； B、供体公牛和供体母牛都应该选择具有优良性状的个体，因为它们的遗传物质都会传递给后代，本地普通牛的遗传性状可能不如优良品种，所以供体公牛也不能用本地普通牛取代，B错误；  C、图1中进行移植的胚胎一般是桑葚胚或囊胚，图2中A是受精卵，B是4细胞胚胎，C是8细胞胚胎，D是16细胞胚胎，E是囊胚，只有桑葚胚或囊胚可作为图1中进行移植的胚胎，C错误； D、图2中的3代表滋养层细胞，它将来发育成胎膜和胎盘等结构，从滋养层细胞取样进行DNA分析可以用于性别鉴定等，D正确。 故选D。 15. 我国科学家经多年试验成功培育出了世界首例体细胞克隆猴，其流程如图所示。相关叙述正确的是（　　） A. 采集的卵母细胞需体外培养至排出两个极体后再进行去核操作 B. 代孕猴C基本不会对植入的胚胎发生排斥反应，无需注射免疫抑制剂 C. 胚胎移植后，重构胚进一步扩大导致滋养层破裂的过程称为孵化 D. 组蛋白的甲基化和乙酰化均利于重构胚完成细胞分裂和发育过程 【答案】B 【解析】 【分析】1、克隆动物概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 2、动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。 3、图示过程为体细胞克隆猴过程，该过程中应用了动物细胞培养（卵母细胞等的培养）、动物细胞融合（去核卵母细胞与成纤维细胞融合）和胚胎移植等技术。 【详解】A、采集的卵母细胞需体外培养至减数第二次分裂中期（MⅡ中期），此时细胞中含有一个极体，而不是排出两个极体后再进行去核操作，A错误； B、代孕猴C对植入的胚胎基本不会发生免疫排斥反应，这是因为胚胎移植时受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，所以无需注射免疫抑制剂，B正确； C、胚胎移植前，囊胚进一步扩大，导致透明带破裂的过程称为孵化，而不是滋养层破裂，C错误； D、组蛋白去甲基化酶和组蛋白脱乙酰化酶抑制剂的注入是为了使组蛋白去甲基化和乙酰化，利于重构胚完成细胞分裂和发育过程。说明正常情况下组蛋白的甲基化不利于重构胚完成细胞分裂和发育过程 ，乙酰化利于重构胚完成细胞分裂和发育过程 ，D错误。 故选B。 16. “工欲善其事，必先利其器。”下列关于基因工程操作工具的叙述，正确的是（ ） A. EcoRⅠ限制酶处理目的基因后可得到平末端 B. 大部分限制酶的识别序列由12个核苷酸组成 C. 除质粒外，部分DNA病毒也可以用作载体 D. DNA聚合酶可替代DNA连接酶用于基因工程 【答案】C 【解析】 【分析】1、限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，这种酶在原核生物中的作用是识别DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 2、DNA连接酶的作用部位是磷酸二酯键，是恢复被限制性内切酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 3、常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。 【详解】A、限制酶EcoRI识别的碱基序列是GAATTC，切割目的基因后形成的是黏性末端，A错误； B、多数限制酶识别的核苷酸序列是由6个核苷酸组成，但不是所有限制酶的识别序列都是由6个核苷酸组成的，也可能识别4、5、8个核苷酸序列，B错误； C、将外源基因导入受体细胞，常常需要将目的基因与运载体结合构建基因表达载体，常用的载体有质粒、噬菌体（DNA病毒）和动植物病毒（DNA病毒），C正确； D、DNA聚合酶连接的是DNA片段与游离的脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，而DNA连接酶连接的是两个DNA片段之间的磷酸二酯键，因此在基因工程中不能用DNA聚合酶替代DNA连接酶，D错误。 故选C。 17. 关于DNA相关实验的叙述，正确的是（　　） A. 粗提取DNA时，离心研磨液是为加速DNA的沉淀 B. 粗提取后鉴定DNA时，将白色丝状物加入二苯胺试剂，沸水浴后冷却，出现蓝色 C. PCR扩增DNA片段时，G—C含量高的引物设置较高的复性温度可减少非特异性扩增 D. 电泳鉴定DNA时，凝胶载样缓冲液中的核酸染料能与DNA分子结合，便于在紫外灯下观察 【答案】C 【解析】 【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：(1)DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的。(2)DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离。 【详解】A、粗提取DNA时，离心研磨液的目的是将细胞碎片、蛋白质等杂质沉淀，而DNA主要存在于上清液中，后续需通过冷酒精沉淀DNA。离心并非直接加速DNA沉淀，A错误； B、鉴定DNA时，需将DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中，再加入二苯胺试剂并沸水浴。若直接将白色丝状物（可能处于酒精中）与二苯胺混合，DNA未充分溶解，无法有效显色，B错误； C、PCR复性温度影响引物与模板结合。G-C碱基对含3个氢键，稳定性高，提高复性温度可增强引物与模板的特异性结合，减少非特异性扩增，C正确； D、核酸染料是在制备凝胶时加入到凝胶中的，而不是在凝胶载样缓冲液中加入，D错误。 故选C。 18. 杂交技术在生物学上应用广泛，包括个体水平、细胞水平和分子水平都可以运用杂交。下列叙述正确的是（　　） A. 生产中培育香蕉脱毒苗常用植物体细胞杂交技术 B. 构建特定疾病模型的动物可用动物细胞杂交瘤技术 C. 抗原—抗体杂交可检测目的基因是否转录出了mRNA D. DNA分子杂交技术可以用来比较不同种生物DNA分子的差异 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 【详解】A、生产中培育香蕉脱毒苗常用植物组织培养，A错误； B、动物细胞杂交瘤技术用于制备单克隆抗体，B错误； C、抗原—抗体杂交用于检测目的基因是否表达出蛋白质，C错误； D、DNA分子杂交通过碱基配对可检测不同生物DNA分子的差异，D正确。 故选D。 19. 结肠癌是发病率高的癌症之一，患者血清中的M蛋白含量显著降低，据此推测M基因可能是一种抑癌基因。研究人员利用数据库筛选到一种可促进M基因转录的E蛋白。推测E蛋白通过与M基因启动子区域结合，促进M基因的表达。将相应质粒分别转入两组相同的细胞中，一段时间后收集细胞裂解液，检测荧光强度。结果显示甲组荧光强度明显高于乙组，从而证实推测。请从下列选项中选择转入甲组细胞和转入乙组．细胞的表达载体（ ） A. ac af B. bc bf C. bd be D. ad ae 【答案】A 【解析】 【分析】胰岛素是唯一能降低血糖的激素，其作用分为两个方面：促进血糖氧化分解、合成糖原、转化成非糖类物质；抑制肝糖原的分解和非糖类物质转化。当胰岛素和其受体结合后，一方面促进葡萄糖的氧化分解、合成糖原和转化形成非糖类物质，另一方面使细胞膜上的葡萄糖转运蛋白增加，促进葡萄糖进入细胞，从而使血糖浓度降低。 【详解】验证E蛋白通过与M基因启动子区域结合，促进M基因的表达，是通过荧光强度体现的，所以实验中组成型启动子与E基因结合，M基因启动子和突变的M基因启动子是与荧光素酶基因结合，因此转入甲组细胞的表达载体有ac，而转入乙组细胞的表达载体有af，A正确，BCD错误。 故选A。 20. 某科研团队利用基因工程技术改造里氏木霉（工业上生产纤维素酶的重要菌株），用于生产人源溶酶体酶，流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 敲除内源纤维素酶基因的目的是避免发酵产物被降解 B. 配制转基因里氏木霉的培养基时应用纤维素作为碳源 C. 改造里氏木霉蛋白质分泌途径可以提高目标产物的分泌效率 D. 用大肠杆菌代替里氏木霉获得的目标产物分子结构完全相同 【答案】C 【解析】 【详解】A、纤维素酶的底物是纤维素，不会降解作为蛋白质的目的产物（人源溶酶体酶）。敲除内源纤维素酶基因的目的是减少无关内源蛋白的表达，节省表达资源、避免纤维素酶作为杂质干扰目的产物提纯，A错误； B、该菌株已经敲除纤维素酶基因，无法合成纤维素酶分解利用纤维素，因此培养基不能用纤维素作为碳源，B错误； C、改造里氏木霉的蛋白质分泌途径，可以使细胞合成的目的蛋白更高效地分泌到细胞外，提高目标产物的分泌效率，便于后续分离提取，C正确； D、大肠杆菌是原核生物，没有内质网、高尔基体等细胞器，无法对人源溶酶体酶（真核蛋白）进行正确的折叠、加工，得到的产物空间结构和里氏木霉（真核菌株）合成的不同，D错误。 21. 为评估外源基因Vgb在菊花中的稳定性，研究人员在种植转基因菊花的第2年，随机选取转基因菊花株系提取DNA，并设计特异性引物进行扩增，凝胶电泳结果如图所示。下列叙述正确的是（ ） 注：CK表示阳性对照，1为空白对照，2～10为转基因株系。 A. 若点样孔在a端，则靠近a端的片段比靠近b端的片段小 B. 设置空白对照可排除无关变量对实验结果的影响 C. 结果表明2年内Vgb基因在菊花细胞中不稳定 D. DNA分子在凝胶中的迁移速率与凝胶浓度无关 【答案】B 【解析】 【分析】据题意可知，1为空白对照，2～10 为转基因株系，图中2～10 含有Vgb基因。 【详解】A、若点样孔在a端，则靠近a端的片段大，A错误； B、为了排除实验操作等无关变量对结果的影响，需要设置空白对照，B正确； C、根据题图可推测，2年内Vgb基因在菊花细胞中较稳定，C错误； D、DNA分子在凝胶中的迁移速率与凝胶浓度有关，D错误。 故选B。 22. 乳糖不耐症是由于乳糖酶（LCT）分泌少，不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的非感染性腹泻。科研工作者利用生物技术培育出转基因低乳糖奶牛新品种，给患乳糖不耐症患者带来福音。下图为转基因低乳糖奶牛的培育流程，下列说法正确的是（　　） A. 若想得到更多转基因低乳糖奶牛，可在胚胎发育任何阶段利用胚胎分割技术将胚胎进行分割 B. 扩增目的基因时，目的基因在PCR仪中经过4次循环，需要32个引物 C. 从分子水平上检测转基因牛细胞中LCT基因是否表达的方法是核酸分子杂交技术 D. 在转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中，可检测到的物质有LCT基因、LCTmRNA、LCT 【答案】D 【解析】 【详解】A、若想得到更多转基因低乳糖奶牛，可在胚胎发育到桑葚胚或囊胚利用胚胎分割技术将胚胎进行分割，A错误； B、PCR技术大量扩增目的基因时，缓冲液中需要加入的引物个数计算公式为2n+1-2，因此若一个该DNA分子在PCR仪中经过4次循环，需要25-2=30个引物，B错误； C、LCT基因表达产生的乳糖酶（LCT）为蛋白质，故从分子水平上检测转基因牛细胞中LCT基因是否表达的方法是抗原-抗体杂交，C错误； D、由于通过基因工程把LCT基因导入牛胎儿成纤维细胞，再通过胚胎工程获得了转基因低乳糖奶牛，故牛胎儿成纤维细胞以及转基因低乳糖奶牛乳腺细胞都含有LCT基因，但是由于基因的选择性表达，只是在转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中含有LCTmRNA与LCT，在转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中，可检测到的物质有LCT基因、LCT mRNA和LCT，D正确。 23. 在基因工程操作过程中，科研人员利用限制酶BamHⅠ和SmaⅠ处理某DNA分子，然后将产物进行电泳处理，结果如图所示。下列有关叙述正确的是（ ） A. 限制酶能识别特定的DNA序列，并在特定部位进行切割和连接 B. 从结果无法判断该DNA分子是环状DNA还是线性DNA C. 该DNA上BamHⅠ和SmaⅠ的切割位点分别是两个和一个 D. 同时用BamHⅠ和SmaⅠ处理得到的两种DNA片段的数量比接近1∶2 【答案】D 【解析】 【详解】A、限制酶的作用是识别特定的DNA序列，并在特定部位进行切割，而连接DNA片段的是DNA连接酶，不是限制酶，A错误； B、假设该DNA分子是线性DNA，用BamH Ⅰ切割后若有一个切割位点应得到2个DNA片段，有两个切割位点应得到3个DNA片段等，用Sma Ⅰ切割后同理，从图中可以看出，BamH Ⅰ切割后得到1个DNA片段（1400bp），Sma Ⅰ切割后得到2个DNA片段（1000bp和400bp），这与线性DNA的切割情况不符，而如果是环状DNA，一个切割位点切割后得到1个DNA片段，两个切割位点切割后得到2个DNA片段，符合电泳结果，所以可以判断该DNA分子是环状DNA，B错误； C、因为BamH Ⅰ切割后只得到1个DNA片段（1400bp），所以该DNA上BamH Ⅰ的切割位点是一个，Sma Ⅰ切割后得到2个DNA片段（1000bp和400bp），所以该DNA上Sma Ⅰ的切割位点是两个，C错误； D、该DNA分子是环状DNA，BamH Ⅰ切割后得到1个DNA片段（1400bp），Sma Ⅰ切割后得到2个DNA片段（1000bp和400bp），同时用BamH Ⅰ和Sma Ⅰ处理，会得到三个DNA片段，分别是600bp、400 bp、400bp，共两种，数量比接近1：2，D正确。 24. Ti质粒的Vir基因表达产生的Vir蛋白能在T-DNA左右边界序列中产生切口，并复制出单链T-DNA从Ti质粒上释放后进入植物细胞。T-DNA左右边界序列与植物细胞DNA分子中某些序列有极强的同源性，因此可以插入植物细胞基因组中。T-DNA的生长素基因和细胞分裂素基因能使植物组织过度生长。形成瘤状组织（冠瘿），影响植物的正常生理功能。冠瘿碱合成基因使植物细胞合成并分泌冠瘿碱（一种氨基酸衍生物），为农杆菌的生长提供碳源和氮源。下列叙述不正确的是（ ） A. Ti质粒中的冠瘿碱合成基因与植物细胞染色体DNA整合后，其最终表达产物可用来催化合成冠瘿碱 B. 为保证转基因植物正常生长，Ti质粒作载体时需将生长素基因和细胞分裂素基因敲除 C. 应将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上且不能破坏左右边界序列 D. Ti质粒作为基因工程载体时，需将Vir基因替换成标记基因，用于重组DNA分子的筛选 【答案】D 【解析】 【详解】A、冠瘿碱合成基因整合后，表达产物是催化冠瘿碱合成的酶，可催化合成冠瘿碱，A 正确； B、生长素基因和细胞分裂素基因会使植物过度生长形成冠瘿，为保证转基因植物正常生长，需剔除这两个基因，B 正确； C、目的基因需插入 T - DNA，且不能破坏左右边界序列（保证 T - DNA 转移和整合 ），C 正确； D、Vir 基因表达的 Vir 蛋白能切割 T - DNA，不可替换，标记基因用于筛选重组 DNA，无需替换 Vir 基因，D 错误。 25. 第四代试管婴儿技术解决的主要问题是女方高龄、卵细胞老化，该技术借助捐献者的优势卵泡将原本的劣势卵泡进行“换壳”，最终保证优质胚胎的形成，其过程如图所示。下列有关叙述合理的是（ ） A. 第四代试管婴儿技术给所有不孕不育患者带来福音 B. 图中新生儿因涉及三个亲代因而面临社会伦理问题 C. 获取的精子即可与核移植的体外培养成熟的卵子结合 D. 母体会对移植后的早期胚胎发生免疫排斥反应，需要注射免疫抑制剂 【答案】B 【解析】 【详解】A、第四代试管婴儿技术主要针对女方高龄、卵细胞老化问题，不能解决所有不孕不育情况，比如男方精子问题等其他原因导致的不孕不育无法解决，A错误； B、新生儿的遗传物质主要来自母亲（核遗传物质）、父亲（精子）和捐献者（线粒体遗传物质，线粒体含少量DNA ），因涉及三个亲代的遗传物质贡献，会面临社会伦理争议，B正确； C、精子排出后需要经特殊的获能处理才能与核移植的体外培养成熟的卵子结合，C错误； D、母体对移植后的早期胚胎一般不会发生免疫排斥反应，这是胚胎移植能成功的基础之一，D错误。 26. 铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一。研究人员通过培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱，过程及结果如下图。相关叙述正确的是（ ） A. 过程①获得的幼芽应先用无水乙醇灭菌30min，再用次氯酸钠溶液处理30s B. 过程③涉及的生物学原理是细胞膜的流动性 C. 过程②固体培养基中生长素与赤霉素比例适中有利于拟原球茎的形成 D. 结果表明，生物碱含量与PLBs重量成正相关，光照条件有利于PLBs的生长 【答案】D 【解析】 【分析】1、左图分析：图示表示应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的试验流程，①是取外植体，②是脱分化，过程③拟原球茎的长大。 2、右图分析：图示表示在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化，三者均随着时间的推移逐渐增多，最终趋于稳定，且PLBs在光照下的重量明显大于在黑暗中的重量。 【详解】A、消毒的原则是既要杀死材料表面的微生物，又要减少消毒剂对细胞的伤害，故外植体消毒可先用体积分数为70%的酒精处理30s，无菌水清洗后再用次氯酸钠溶液处理30min，A错误； B、过程③拟原球茎的长大，涉及的生物学原理是细胞增殖，拟原球茎经有丝分裂而不断生长，B错误； C、过程②为脱分化，固体培养基中生长素与细胞分裂素比例适中有利于拟原球茎（类似愈伤组织）的形成，C错误； D、据右图可知，生物碱含量与PLBs重量成正相关，PLBs在光照下的重量明显大于在黑暗中的重量，说明光照条件有利于PLBs的生长，D正确。 故选D。 27. 单个B细胞抗体技术可用于制备高亲和力、高特异性的单抗，其技术流程如下：①康复者单个B淋巴细胞的分离和筛选；②利用RT—PCR获取和扩增抗体基因；③构建基因表达载体；④将抗体基因导入动物细胞；⑤单抗的筛选和鉴定。下列叙述错误的是（　　） A. 操作①选用单个B淋巴细胞以保证最终获得纯度较高的单抗 B. 操作②使用的PCR反应体系还可用于目的基因的检测与鉴定 C. 操作③常用两种限制酶切割抗体基因和载体以防止其自身环化 D. 操作④前可用Ca2+处理受体细胞促使其主动吸收DNA分子 【答案】D 【解析】 【详解】A、单个B淋巴细胞只能合成并分泌一种特异性抗体，因此操作①选用单个B淋巴细胞可保证最终获得纯度较高的单抗，A正确； B、PCR技术可通过扩增目的基因判断目的基因是否成功导入受体细胞，属于目的基因检测与鉴定的常用技术手段，因此操作②的PCR反应体系可用于目的基因的检测与鉴定，B正确； C、操作③构建基因表达载体时，使用两种不同的限制酶切割抗体基因和载体，可使二者产生不同的黏性末端，避免载体和目的基因自身环化、目的基因反向连接，C正确； D、Ca2+处理仅适用于原核生物作为受体细胞时的感受态制备，使细胞处于易于吸收周围环境中DNA分子的生理状态，该过程DNA是主动进入细胞而非主动吸收；且本题操作④的受体为动物细胞，常用显微注射法导入目的基因，不使用Ca2+处理，D错误。 28. 干细胞有自我更新能力及分化潜能，小鼠成纤维细胞可被诱导成为iPS细胞，而小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞用于研究。某科研小组采用“胚胎干细胞介导法”将荧光素基因导入纯种灰色小鼠胚胎干细胞（ES细胞）中并整合到染色体上，然后将转基因的ES细胞注射到纯种黄色小鼠囊胚中培育嵌合体小鼠。下列错误的是（ ） A. 荧光素基因可用于检测子代小鼠体内由灰色小鼠胚胎发育的部分 B. iPS细胞也能由已分化的B细胞和T细胞诱导而来，用iPS细胞分化形成的器官组织治疗疾病理论上可以避免免疫排斥 C. 注入ES细胞的囊胚移植前需用激素对受体母鼠进行同期发情处理 D. 割取黄色小鼠囊胚的滋养层细胞做DNA分析或核型分析即可检测嵌合体子代鼠的性别 【答案】D 【解析】 【分析】胚胎干细胞是早期胚胎（原肠胚期之前）或原始性腺中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境，ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。 【详解】A、荧光素基因导入到灰色小鼠胚胎，荧光素基因会表达荧光蛋白，将来检测子代小鼠有荧光蛋白的即为灰色小鼠胚胎发育而来的，据此推测荧光素基因在该实验操作中可起到检测灰色小鼠囊胚发育的部分，A正确； B、由于iPS细胞可以来源于患者自身的细胞，因此用这些细胞分化形成的器官组织进行治疗理论上可以避免免疫排斥反应，B正确； C、注入ES细胞的囊胚移植前需用促性腺激素对受体母鼠进行同期发情处理，C正确； D、嵌合体小鼠中既有纯种灰色小鼠胚胎干细胞，也有纯种黄色小鼠细胞，不能只割取黄色小鼠囊胚的滋养层细胞做DNA分析即可检测嵌合体子代鼠的性别，D错误。 故选D。 29. 生物经济一直是国家关注的重点行业之一，发展生物经济产业对于我国经济的转型升级具有重要意义。在2024年政府工作报告中，把生物经济中“生物制造”列为新增长引擎之一，而“生物制造”离不开生物工程。以下关于生物工程的说法正确的是（ ） A. 提取乳酸菌的单细胞蛋白并将其添加在动物饲料中可提高饲料的品质 B. 理论上，可通过基因工程和克隆技术生产出不会引起免疫排斥的猪器官 C. 利用植物细胞全能性的原理进行的细胞产物工厂化生产不受季节、天气的限制 D. 正常造血干细胞移植到病人体内可治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病 【答案】B 【解析】 【分析】发酵工程，是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 【详解】A、单细胞蛋白即微生物菌体，不需要从微生物细胞中提取，A错误； B、利用基因工程方法抑制或去除抗原决定基因，使抗原无法合成而避免产生免疫排斥，再结合克隆技术，可获得不会引起免疫排斥反应的转基因克隆猪器官，B正确； C、利用植物细胞工程获得细胞产物未体现出细胞的全能性，C错误； D、神经干细胞具有分裂分化能力，可治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病，D错误。 故选B。 30. 下图表示基因工程所使用的一种质粒和某种目的基因的结构，其中lacZ基因表达的产物可将无色物质X-gal催化为蓝色物质，从而使受体菌的菌落呈现蓝色。下列叙述错误的是（ ） 注：kb代表碱基对，Kanr基因为卡那霉素抗性基因 A. 图中目的基因上的为DNA链的5′端、OH为DNA链的3′端 B. 为将目的基因准确插入质粒中，最好选用BamHⅠ和XmaⅠ酶切割目的基因 C. 若将重组质粒用EcoRⅠ充分酶切后，通过琼脂糖凝胶电泳分离，可得到3个条带 D. 若要准确筛选出含重组质粒的受体菌，需将其培养在添加卡那霉素和X-gal的培养基上 【答案】C 【解析】 【详解】A、DNA链的5′端连接磷酸基团（），3′端连接羟基（OH），A正确； B、由于质粒上没有SmaⅠ位点，而EcoRⅠ位点在目的基因上，所以选用BamHⅠ和XmaⅠ两种不同限制酶切割目的基因和质粒，能避免质粒自身环化、目的基因反向连接，实现目的基因的定向插入，且可以完整切下目的基因，B正确； C、重组质粒是环状DNA，质粒本身带有1个EcoRⅠ位点，插入的目的基因中还含有1个EcoRⅠ位点，共2个EcoRⅠ位点，因此充分酶切后得到2个DNA片段，电泳只能得到2个条带，C错误； D、Kanr（卡那霉素抗性基因）未被破坏，添加卡那霉素可以筛选出获得质粒（空质粒/重组质粒）的受体菌；lacZ基因插入目的基因后会失活，空质粒lacZ完整可将X−gal催化为蓝色使菌落变蓝，重组质粒lacZ失活菌落为白色，因此添加X−gal可以区分空质粒和重组质粒，D正确。 二、多项选择题（共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错的得0分） 31. 同种生物的细胞可在自然条件下发生融合，不同种生物的细胞也可经诱导发生融合。如图为细胞融合过程示意图。下列叙述错误的是（　　） A. 形成有性杂交后代时，a、b是生殖细胞，d是受精卵 B. 培育的体细胞杂交植株，兼具a、b的所有优良性状 C. 制备单克隆抗体时，a、b和d细胞均可进行有丝分裂 D. 培育体细胞杂交植株和制备单克隆抗体时诱导融合方法完全不同 【答案】BCD 【解析】 【详解】A、产生有性杂交后代时，细胞a和细胞b是经减数分裂产生的生殖细胞，d是受精卵，A正确； B、培育的体细胞杂交植株，不一定兼具a、b的所有优良性状，因为基因会选择性表达等，B错误； C、制备单克隆抗体时，a和b细胞中，一个是骨髓瘤细胞，另一个是已免疫的B淋巴细胞，其中已免疫的B淋巴细胞属于高度分化的细胞，不能进行有丝分裂，C错误； D、培育体细胞杂交植株和制备单克隆抗体时诱导融合方法可以相同，即均可以用PEG诱导融合，D错误。 故选BCD。 32. 下图为借助CRISPR/Cas9基因编辑技术插入外源基因的过程图，其中PAM序列是一个短DNA序列，单链向导RNA可引导Cas9内切酶到特定的基因位点进行切割。下列叙述错误的是（　　） A. Cas9内切酶能将脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断开 B. 细菌细胞中的限制酶也能起到类似Cas9内切酶的作用 C. Cas9内切酶定点切割与向导RNA和目标DNA结合无关 D. 双链DNA的断裂修复过程需要DNA聚合酶的催化 【答案】CD 【解析】 【详解】A、核酸内切酶Cas9的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，故Cas9内切酶断裂的是脱氧核苷酸链特定部位的磷酸二酯键，A正确； B、核酸内切酶Cas9的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，与细菌细胞内的限制酶的作用相似，B正确； C、向导RNA通过碱基互补配对与目标DNA的单链结合，从而使Cas9内切酶可以定点切割，因此Cas9内切酶定点切割与向导RNA和目标DNA结合有关，C错误； D、双链DNA的断裂修复过程需要DNA连接酶的催化形成磷酸二酯键，D错误。 故选CD。 33. 如图为利用发酵工程生产生物产品的流程图，有关叙述错误的是（　　） A. 图中①②可分别表示基因工程育种和诱变育种 B. 配制的培养基在进行③之前需严格灭菌，以防杂菌污染 C. ③为发酵工程的中心环节，该过程需及时补充氧气并搅拌 D. 若④为单细胞蛋白，可采取适当提取、分离和纯化措施获得 【答案】CD 【解析】 【详解】A、发酵工程所用菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，A正确； B、配制的培养基严格灭菌后才能用于③（发酵罐内发酵），B正确； C、③为发酵罐内发酵，是发酵工程的中心环节，若发酵过程为无氧发酵，则该过程无须补充氧气，C错误； D、单细胞蛋白是通过发酵获得的微生物菌体，若④为单细胞蛋白，可采用过滤、沉淀等方法获得，D错误。 故选CD。 34. 中科院研究团队成功培育出全球首例只有双雌来源的孤雌小鼠和双雄来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图所示。已知性染色体组成为YY的胚胎不能发育，相关叙述错误的是（ ） A. 用雌激素对母鼠进行超数排卵处理可获得更多卵母细胞 B. 精子转化为ahESC的过程相当于植物组织培养中的再分化 C. 图中孤雌小鼠性染色体组成为XX，孤雄小鼠性染色体组成为XY D. 孤雄小鼠的获得利用了细胞工程、基因工程、胚胎工程相关技术 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、促性腺激素可促进生殖细胞的形成，因此应用促性腺激素处理母鼠进行超数排卵，以获得更多的卵母细胞，A错误； B 、精子是高度分化的细胞，转化为孤雄胚胎干细胞ahESC，相当于植物组织培养中的脱分化阶段，B错误； C、孤雄小鼠的染色体来源于两只雄鼠产生的精子，精子的性染色体为X或Y，所以其性染色体可能是XX、XY或YY（致死），C错误； D、结合题图孤雄小鼠的获得采用了动物细胞培养技术、核移植技术、基因编辑技术等，总之利用了细胞工程、基因工程、胚胎工程相关技术，D正确。 35. 某小组通过PCR（假设引物长度为8个碱基，短于实际长度）获得了含目的基因的DNA片段，用限制酶进行酶切后，再用所得片段进行基因工程后续操作。下列叙述正确的是（　　） A. 若将Spe I和Nhe I切出的末端连接形成片段，则该片段不能再被二者识别并切割 B. PCR中一个引物的序列为 5’ - TGCGCAGT - 3’，第3轮循环需消耗4个该引物 C. 步骤①所用的酶是Nhe I和Cfo I，酶切后共产生2个游离的磷酸基团 D. 酶切片段和载体连接时，仅可使用E.coli DNA连接酶催化磷酸二酯键合成 【答案】AB 【解析】 【分析】每种限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。限制酶切割的结果形成黏性末端或平末端。DNA连接酶分为E.coli DNA连接酶、T4DNA连接酶，二者都是将双连DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，但这两种酶的作用有所差别。E.coli DNA连接酶只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来，不能连接具有平末端的 DNA片段。而T4 DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，但连接平末端的效率相对比较低。 【详解】A、Spel和Nhel切割产生的黏性末端相同，因此能够被DNA连接酶相连，但连接后的片段两者都不能被Spel和Nhel识别，因此都不能被Soel和Nhel再切割，A正确； B、PCR 技术大量扩增目的基因时，第n次复制形成2n个DNA，相当于新合成2n-1个DNA分子，合成一个DNA分子需要两个引物，因此需要的引物数目为2n-1×2=2n，故PCR中一个引物的序列为5’ - TGCGCAGT - 3’，第3轮循环需消耗4个该引物，B正确； C、经一种限制酶酶切DNA后，会产生2个游离的磷酸基团，而步骤①所用的酶是Nhe I和Cfo I，每种限制酶识别不同的特定核苷酸序列，故经这两种酶酶切后共产生4个游离的磷酸基团，C错误； D、图中形成的是黏性末端，而E.coliDNA连接酶能连接黏性末端；T4DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端，D错误。 故选AB。 第Ⅱ卷（非选择题） 三、非选择题（共3题，共25分） 36. 卡拉胶是一种大分子聚合物硫酸多糖，溶解性较差，可被卡拉胶酶降解。降解产物具有多种生物活性，如抗炎、抗凝血等，在食品、医药等领域具有广阔的应用前景。科研人员利用腐烂的角叉菜为材料，筛选了高产卡拉胶酶的菌株，过程如下图。 （1）筛选高产卡拉胶酶菌株的培养基按物理性质是_____培养基，为检测该培养基灭菌是否彻底，应采用的检测方法是将______（填“未接种”或“接种”）的培养基放在恒温培养箱中培养，检验是否有菌落产生。 （2）培养基中的卡拉胶被卡拉胶酶降解，在菌落周围会形成______。根据上图中初筛的结果判断，欲进一步纯化培养菌株时，应挑取培养基a中的菌落_______（填字母）。 （3）结合上图分析，科研人员采用了_______法对产卡拉胶酶菌株进行了初筛。从试管⑤中分别取0.2 mL稀释液，涂布在三个上述培养基上，培养72小时后，三个培养基上的菌落数分别为：56、59、62，推测腐烂角叉菜液中菌株数为_______个/L。利用上述方法进行微生物分离计数时，通常需要用到的实验用具有_____（填下图中相应的序号）。 【答案】（1） ①. 固体 ②. 未接种 （2） ①. 透明圈 ②. C （3） ①. 稀释涂布平板 ②. 2.95×1012 ③. ①③④  【解析】 【小问1详解】 筛选和分离菌株需要在固体培养基上形成单菌落，便于观察和挑取。检测培养基灭菌是否彻底，需设置空白对照：将未接种的培养基放在恒温培养箱中培养，若无菌落产生，说明灭菌彻底；若出现菌落，说明灭菌不彻底。 【小问2详解】 培养基中的卡拉胶被卡拉胶酶降解后，菌落周围会形成透明圈。透明圈直径与菌落直径的比值大小与菌株产卡拉胶酶的能力正相关：比值越大，说明该菌株分解卡拉胶的能力越强（产酶量越高 / 酶活性越强）。从图中可见，菌落 C 周围的透明圈与菌落直径比值最大，因此是高产卡拉胶酶的目标菌株，需进一步纯化培养。 【小问3详解】 科研人员采用了稀释涂布平板法对菌株进行初筛。该方法通过梯度稀释菌液，将稀释液涂布在固体培养基上，使单菌落分散生长，可用于微生物的分离、纯化与计数。0.2毫升放到19.8毫升中稀释100倍，每次稀释102倍，共稀释1010倍，平均菌落数：(56+59+62)÷3=59 个，涂布体积：0.2mL，原液菌数计算公式：每mL菌数=平均菌落数÷涂布体积×稀释倍数，代入数值得：59÷0.2×1010=2.95×1012 个 /mL。稀释涂布平板法需要的用具:①酒精灯：用于操作过程的无菌环境（灼烧涂布器、试管口等）， ③培养皿：用于盛放固体培养基， ④涂布器：用于将稀释液均匀涂布在培养基表面（②为接种环，用于平板划线法，不用于稀释涂布平板法），故答案为①③④。 37. 科学家通过体外诱导黑鼠体细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），并利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如图所示。回答下列问题： （1）在培养iPS细胞的过程中，培养基中应含有细胞所需的各种营养物质，还应该清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，需要进行的操作是___________。 （2）图中重组囊胚需植入白鼠子宫内继续发育，移植后需对受体进行_______检查。若想进一步提高胚胎的利用率，可采用______技术。 （3）小鼠的胚胎干细胞可由囊胚的______分离培养获得。克隆鼠的遗传物质来自_______鼠。 【答案】（1）定期更换培养液（培养基） （2） ①. 妊娠 ②. 胚胎分割 （3） ①. 内细胞团 ②. 黑 【解析】 【小问1详解】 细胞培养过程中，细胞会不断消耗营养物质、产生代谢废物，若不及时更换培养液，代谢产物会逐渐积累，改变培养液的 pH、渗透压等环境条件，甚至对细胞产生毒性，影响细胞存活和增殖。 【小问2详解】 胚胎移植后，需要对受体进行妊娠检查，目的是确认受体母鼠是否成功受孕，保证后续能顺利完成胚胎发育和分娩。要进一步提高胚胎的利用率，可采用胚胎分割技术。通过将一个胚胎分割成多个胚胎，一次移植就能获得多个遗传特性相同的后代，大幅提升胚胎的利用效率。 【小问3详解】 小鼠的胚胎干细胞（ES 细胞）可由囊胚的内细胞团分离培养获得。囊胚分为滋养层和内细胞团，内细胞团细胞具有发育的全能性，可分化为各种组织器官，是胚胎干细胞的主要来源。克隆鼠的遗传物质来自黑鼠。流程中，iPS 细胞由黑鼠的体细胞诱导而来，细胞核中的遗传物质全部来自黑鼠，灰鼠仅提供囊胚的滋养层细胞（内细胞团不发育），白鼠仅作为代孕受体，不提供遗传物质，因此克隆鼠的遗传特性与黑鼠完全相同。 38. 枣树细胞中的金属硫蛋白（MT）具有结合金属的能力，科学家利用基因工程的方法获得可吸附和耐受重金属镉的大肠杆菌用于环境领域。回答下列问题： （1）研究人员可提取枣树细胞的mRNA并进行________来获取MT基因。 （2）若用PCR的方法获取MT基因（其结构如图1所示，A链为转录的模板链），并利用图2所示质粒构建重组DNA分子（相关限制酶切位点已注明）。则PCR时应选择引物________和引物________。为实现MT基因与载体的定向连接，需在引物________（填“5”或“3”）末端分别添加限制酶________和________的识别序列。 （3）基因工程的核心步骤是________。与启动子相比，密码子特有的碱基为________（填中文名称）。 （4）将目的基因导入大肠杆菌时，需用________处理大肠杆菌。导入后，可依次用含________和________的固体培养基培养大肠杆菌（在分子水平上，可用________方法检测MT是否成功表达。此外，还可用含________的液体培养基培养大肠杆菌并检测其一段时间后的数量变化，从而选择出可吸附和耐受重金属镉的大肠杆菌。 【答案】（1）逆转录 （2） ①. Ⅱ ②. Ⅲ ③. 5 ④. Kpn I ⑤. Pst I （3） ①. 基因表达载体的构建 ②. 尿嘧啶 （4） ①. Ca2+ ②. 氨苄青霉素 ③. 四环素 ④. 抗原—抗体杂交 ⑤. （一定浓度的重金属）镉 【解析】 【分析】1、引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。引物能使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。用于PCR的引物长度通常为20一30个核苷酸。 2、启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，位于基因的上游，紧挨转录的起始位点，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终表达出人类需要的蛋白质。 【小问1详解】 以RNA为模板合成DNA的过程为逆转录，故研究人员可提取枣树细胞的mRNA并进行逆转录来获取MT基因。 【小问2详解】 PCR过程中，引物与模板链的3'端结合，因此应当选择引物Ⅱ和引物Ⅲ，这样才能使DNA聚合酶从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。由题干可知，A链为模板链，转录的方向是沿着模板链的3'→5'，应将MT基因的右端与启动子一侧连接，由于目的基因中含有Xho I会同时破坏两个标记基因，同时为了保证MT基因正向连接到质粒上，应当在MT基因两侧连上连不同的限制酶识别序列，故添加的限制酶序列分别是Kpn Ⅰ和Pst Ⅰ限制酶序列，并且应添加在基因的外侧，才能不影响基因的序列，故添加在引物的5'端。 【小问3详解】 基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。启动子位于基因的非编码区，密码子位于mRNA上，与启动子相比，密码子特有的碱基为尿嘧啶U。 【小问4详解】 大肠杆菌是原核生物，需要Ca2+（或CaCl2）处理，使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，完成将基因表达载体导入受体细胞并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，即转化过程；由于重组质粒中氨苄青霉素抗性基因完整，而四环素抗性基因被破坏，因此可依次用含有氨苄青霉素和四环素的培养基上；在分子水平上，可用抗原—抗体杂交方法检测MT是否成功表达。此外，还可用含（一定浓度的重金属）镉的液体培养基培养大肠杆菌并检测其一段时间后的数量变化，从而选择出可吸附和耐受重金属镉的大肠杆菌。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $