内容正文:
中的接种技术。2、能够根据标本性质、培养基种类、培养目的选择不同的接种方法。2、实验器材一、标本选用大肠埃希菌或金黄色葡萄球菌的细菌培养物。2、培养基有液体肉汤培养基、半固体MIU培养基、琼脂斜面培养基、克氏双糖铁KIA培养基、固体培养基、血平板等。3、其他器材有接种环、接种针、酒精灯、记号笔、标签纸、恒温培养箱等。3、实验方法一、液体培养基接种法。液体培养基接种法主要用于肉汤、蛋白胨、水、糖发酵管等液体培养基的接种。本次实验我们需接种的对象是一根液体肉汤培养基,可以用来观察细菌的生长现象。其方法是,右手持接种黄烧灼灭菌,冷却后蘸取菌落或细菌的液体培养物。左手持装有液体培养基的试管,用右手掌与小指夹取试管硅胶塞,将试管口迅速通过火焰消毒灭菌。持沾有细菌的接种黄伸进倾斜的试管内,注意不要碰到试管壁,在接近液面的内管壁上轻轻研磨。接种完成后,试管口再次通过火焰灭菌,并将硅胶塞塞回试管。直隶是广军种,即混合于液体培养基中接种黄烧灼灭菌。接种完成后,接种环规范于试管架上将接种好的液体培养基做好标志,置于37度恒温培养箱中培养18至24小时。结果观察液体培养基中细菌的生长现象有三种,分别是均匀混浊生长、沉淀生长菌膜、生长二半。固体培养基穿刺接种法、半固体培养基接种法主要用于保存菌种、厌氧培养和观察细菌的动力等。本次实验我们用半固体培养基进行细菌的动力实验,其方法是,右手持接种针烧灼灭菌,冷却后蘸取菌落或细菌的液体培养物。左手持装有半固体培养基的试管,用右手掌与小指夹取试管的硅胶塞,将试管口迅速通过火焰灭绝。将占有细菌的接种针从培养基表面正中垂直刺入,注意不能触及管底,大约距管底4毫米,然后沿原路抽出。具体操作可以采取水平穿刺法或垂直穿刺法取出接种针。试管口再次通过火焰灭菌,将硅胶塞塞回试管,直立试管即完成接种。接种针烧灼灭菌,接种完成后,接种针规放于试管架上将接种好的半固体培养基做好标志。至于37度恒温培养箱中培养18至24小时,结果观察,如果细菌沿着穿刺线呈云雾状生长,表明细菌有动力,即有鞭毛。如果细菌沿着穿刺线直线状生长,穿刺线周围的培养基透明度无变化,表示细菌无动力,即无鞭毛。3、琼脂斜面接种法,该法主要适用于菌株的一种,以获取纯种进行鉴定和保存菌种,也可用于菌种的床单,还有KIA斜面接种可用于菌种的初步鉴定。首先进行菌种保存的操作,其方法是左手持菌种管与待接种培养管将两广并列略倾斜,琼脂斜面部均朝上,菌种广在外,待接种管在内。右手持接种黄烧灼灭菌,以右手掌与小指、小指与无名指分别拔取并夹持两管管塞,将两管口迅速通过火焰消毒灭菌,将灭菌后的接种黄探入菌种管待,冷却后刮取菌苔少许,立即移入待接种管至斜面底部向上划一直线,然后再由底部向上来回划线。接种完成后,两管管口通过火焰灭菌塞回管塞,并将接种黄烧灼灭菌。接种管做好标志后,置于37度恒温培养箱中培养18至24小时。结果观察斜面培养物一般形成均匀一致的卷胎,如表面不均匀往往表示培养物不纯。鞋面一般可观察军胎的透明度、湿润度和色泽等特征。KIA斜面接种可用于菌种的初步鉴定,具体方法如下,右手持接种针烧灼灭菌。冷却后蘸取菌落。左手持KIA试管,右手掌与小指夹取试管硅胶塞,将试管口迅速通过火焰灭菌,将沾有细菌的接种针从培养基斜面正中垂直刺向试管底部,注意不能触及管底,大约距管底4毫米,然后沿原路抽出,在斜面以Z字型划线。具体操作可以采取水平穿刺法或垂直穿刺法。接种完成后,试管口再次通过火焰灭菌,将硅胶塞塞回试管,直隶市广即完成接种,取出接种针并稍作灭绝。接种完成后,接种针规范于试管架上将接种好的KIA培养基置于37度恒温培养箱中培养18至24小时结果观察KIA实验常用于肠杆菌科细菌的初步鉴定,可以观察细菌是否发酵,葡萄糖是否发酵,乳糖是否产气,是否产硫化氢。
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