一、实验准备。四种糖发酵培养基，无菌生理盐水试管、试管架仪器架仪器、一次性劣质接种环、西头河记号笔、75%酒精棉球、塑料钢火柴、酒精灯、0.5麦氏比浊管、麦康凯、琼脂平板。2、操作过程，一、超净工作台，准备酒精棉球擦拭工作台面。点燃酒精灯。2、菌悬液的准备接种环消毒器。从麦康凯琼脂平板上挑取4到5个菌落。迅速伸入无菌生理盐水管内，在结晶液面的管壁轻轻研磨。并沾取少许生理盐水调和，使菌混合于生理盐水中，接种环在生理盐水中充分冲洗混匀。接种环灭菌后放于接种环架上。试管摇匀后，与0.5麦氏比浊管比浊与比浊管浊度一致即可。3、接种细菌，拆开4种糖发酵培养基，依次放在试管架上。从移液器架拿取一液器，把量纯调至100微升。装好吸头，将菌种管摇匀后。无菌操作，用仪器从菌种管中吸取菌液。依次加入到糖发酵试验试管中，每管100微升，每种糖做三个试验管，留一个不加菌液的做对照。加样完毕后将液器调至最大量程，垂直悬挂在移液器架上。菌种管塞和试管口灭菌后塞上试管塞。4、整理工作台，熄灭酒精灯，整理实验器材。5、温箱培养，将糖发酵试验培养基试管放入37摄氏度培养箱中，培养1到2天。6、结果观察糖发酵试验有3种结果，培养基变为黄色，表示产酸。培养基变为黄色。倒置的发酵小管里有气体，表示产酸产气。培养基不变色，和对照管一样，表示既不产酸也不产气。蔗糖管既不产酸也不产气，搁糖管是产酸产气，麦芽糖管也是产酸产气，乳糖完也是产酸产气。