精品解析：黑龙江省哈尔滨市哈三中2025-2026学年度下学期高二学年期中考试生物试题

哈三中2025—2026学年度下学期 高二学年期中考试生物试题 一、单项选择题（本题共20题，每小题2分，共40分。在每小题给出的4个选项中，只有1项符合题目要求。） 1. 下列属于细胞工程成果的是（　　） A. 利用黑曲霉制得的酱油 B. 转基因抗虫棉 C. 白菜—甘蓝杂种植株 D. 速效胰岛素类似物 【答案】C 【解析】 【详解】A、利用黑曲霉制酱油是利用黑曲霉的代谢特性进行发酵生产，属于发酵工程成果，A不符合题意； B、转基因抗虫棉是将外源抗虫基因导入棉花细胞后培育得到的，操作水平为分子水平，属于基因工程，B不符合题意； C、白菜—甘蓝杂种植株是通过植物体细胞杂交、植物组织培养技术获得的，属于植物细胞工程，C符合题意； D、速效胰岛素类似物是通过基因/蛋白质工程改造胰岛素基因后，利用工程菌表达生产得到的，属于基因工程，D不符合题意。 2. 下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是（　　） A. 二者都使用固体培养基 B. 二者的培养基都以蔗糖为碳源 C. 二者都需要定期更换培养基 D. 二者都利用细胞全能性的原理 【答案】C 【解析】 【详解】A、植物组织培养使用添加琼脂的固体培养基，动物细胞培养使用液体培养基，便于细胞接触营养物质和代谢废物扩散，A错误； B、植物组织培养的培养基以蔗糖为碳源，动物细胞不能直接利用蔗糖，其培养基以葡萄糖为碳源，B错误； C、两类培养过程中细胞都会消耗营养物质，同时产生有害代谢废物，因此都需要定期更换培养基，补充营养、去除代谢废物以保证细胞正常生长，C正确； D、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，可最终获得完整植株；动物细胞培养的原理是细胞增殖，仅获得细胞群或细胞产物，不体现细胞全能性，D错误。 3. 发酵工程正渗透到几乎所有的工农业领域，在助力解决粮食、环境、健康和能源等方面的重大问题上，做出了越来越大的贡献。下列相关叙述错误的是（　　） A. 性状优良的菌种可以通过基因工程育种获得 B. 单细胞蛋白是微生物代谢过程中产生的蛋白质 C. 利用纤维废料发酵生产酒精、乙烯等能源物质 D. 发酵工程可生产多种抗生素、激素、疫苗等 【答案】B 【解析】 【详解】A、基因工程育种可定向改造微生物的遗传特性，是获得性状优良发酵菌种的常用方法，A正确； B、单细胞蛋白指的是微生物菌体本身，而非微生物代谢过程产生的蛋白质，B错误； C、纤维废料的主要成分为纤维素，可被微生物分解后发酵生产酒精，酒精可进一步加工得到乙烯，属于发酵工程在能源领域的应用，C正确； D、发酵工程在医药领域应用广泛，可生产抗生素、药用激素、疫苗等多种医药产品，D正确。 4. “白雪公主”草莓被誉为“水果皇后”，具有广阔的市场前景和较高的经济价值。但病毒在草莓体内逐年积累会导致产量降低、品质变差。如图是育种工作者选育高品质“白雪公主”草莓的流程图。下列叙述错误的是（　　） 注：SMYELV-CP是草莓轻型黄边病毒的外壳蛋白基因 A. 方法一中甲常选用茎尖，原因是其病毒极少甚至不含病毒 B. 方法一中得到的无病毒苗没有提高对原有病毒的抵抗力 C. 判断两种选育方法的效果都应进行病毒接种实验 D. ①③过程均属于植物组织培养，体现了植物细胞全能性 【答案】C 【解析】 【详解】A、植物的茎尖部位病毒极少甚至不含病毒，所以方法一中甲常选用茎尖，通过植物组织培养可获得无病毒苗，A正确‌； B、方法一得到的无病毒苗只是通过选取含病毒少的茎尖进行组织培养获得的，并没有提高对原有病毒的抵抗力，B正确‌； C、方法一培育的是脱毒苗，不是抗病毒苗，不需要进行病毒接种实验；方法二培育的是抗病毒草莓，需要通过病毒接种实验来判断选育效果，C错误‌； D、①③过程均属于植物组织培养，将离体的组织或细胞培养成完整的植株，体现了植物细胞的全能性，D正确‌。 5. 下列对动物细胞核移植技术的描述中，错误的是（　　） A. 动物细胞核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植 B. 体细胞核移植过程中通常采用受精卵作为受体细胞 C. 重构胚具有发育成完整个体的能力 D. 经体细胞核移植生产的克隆动物不是对供核动物的100%复制 【答案】B 【解析】 【详解】A、动物细胞核移植根据提供细胞核的细胞类型，分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，其中胚胎细胞分化程度低，核移植成功率更高，A正确； B、体细胞核移植过程中通常选择去核的MⅡ期卵母细胞作为受体细胞，这类细胞体积大易操作，且含有促进细胞核全能性表达的物质，并非采用受精卵作为受体细胞，B错误； C、重构胚是供体细胞核注入去核卵母细胞后经激活形成的，具有发育全能性，可发育为完整个体，C正确； D、克隆动物的细胞核遗传物质来自供核动物，但细胞质中的遗传物质来自受体卵母细胞，同时生物性状还会受环境因素影响，因此不是供核动物的100%复制，D正确。 6. 研究发现，雪莲次生代谢物对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用，利用植物细胞培养技术生产雪莲次生代谢物的大致流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A. 通过图中过程生产雪莲次生代谢物几乎不受季节和天气等的限制 B. 利用雪莲茎尖获得雪莲次生代谢物时体现了细胞全能性 C. 在适当条件下给予适宜光照，①愈伤组织能进行光合作用 D. 植物细胞培养技术提高了单个细胞中次生代谢物的含量 【答案】A 【解析】 【详解】A‌、植物细胞培养技术是在无菌、人工控制的环境条件下进行的，因此通过图中过程生产雪莲次生代谢物几乎不受季节和天气等自然条件的限制，A正确‌； B‌、细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。利用雪莲茎尖获得雪莲次生代谢物的过程中，并没有发育成完整的个体，所以没有体现细胞的全能性，B错误‌； C‌、①为愈伤组织，它是一种未分化的细胞团，细胞内无叶绿体，即使在适当条件下给予适宜光照，也不能进行光合作用，C错误‌； D‌、植物细胞培养技术是通过大量培养植物细胞来获得次生代谢物，提高了次生代谢物的总产量，D错误‌。 7. 下列技术手段与对应优点不符合的是（　　） A. 植物体细胞杂交，实现远缘杂交育种 B. 胚胎分割，提高优质家畜胚胎利用率 C. 体外受精，可以为胚胎移植提供可用的胚胎 D. 胚胎移植，充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力 【答案】D 【解析】 【详解】A、植物体细胞杂交可克服远缘杂交不亲和的障碍，打破物种生殖隔离，实现远缘杂交育种，A不符合题意； B、胚胎分割可将1枚优质胚胎分割为多份，获得多个基因型相同的后代，大幅提高优质家畜胚胎利用率，B不符合题意； C、体外受精可在体外完成精卵结合并培育获得早期胚胎，为胚胎移植提供充足的可用供体胚胎，C不符合题意； D、胚胎移植的意义是充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，缩短优良雌性的繁殖周期，D符合题意。 8. 抗体--药物偶联物（ADC）通过将药物（如细胞毒素）与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC作用机制如图所示，下列叙述正确的是（　　） A. ADC中的单克隆抗体有特异性强的特点，能精准杀死肿瘤细胞 B. 药物具有特异性，可以与靶细胞表面的抗原发生特异性结合 C. 与使用细胞毒素类药物进行化疗相比，使用ADC的副作用更大 D. 单克隆抗体在临床上还可作为诊断试剂或单独治疗疾病 【答案】D 【解析】 【详解】A、ADC中起杀伤肿瘤细胞作用的是药物（细胞毒素），单克隆抗体的作用是特异性识别肿瘤抗原、靶向运输药物，抗体本身不能杀死肿瘤细胞，A错误； B、药物的作用是在靶细胞内发挥治疗效应，而与靶细胞表面抗原发生特异性结合的是抗体，B错误； C、与使用细胞毒素类药物进行化疗相比，使用ADC的副作用更小，因为ADC中的抗体能特异性识别靶细胞，将药物精准输送到靶细胞，减少对正常细胞的损伤，C错误； D、单克隆抗体在临床上既可以作为诊断试剂（如早孕诊断、肿瘤标志物检测），也可以单独用于治疗疾病（如抗癌、抗排斥），D正确。 9. 如图所示，a表示现代生物工程技术，b表示结果，下列相关叙述正确的是（　　） A. 若a是胚胎分割技术，可选发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割 B. 若a是体外受精技术，新采集的精子需在获能液中培养获得受精的能量 C. 若a是核移植技术，需将经过物理或化学方法激活的重构胚移入受体体内 D. 上述选项所涉及的生物工程技术中的供体动物，均需要进行超数排卵处理 【答案】C 【解析】 【详解】A、胚胎分割技术是指借助显微操作技术，将早期胚胎（如桑葚胚或囊胚）分割成2等份、4等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行均等分割，而原肠胚期细胞分化程度高，不适合分割，分割后成功率极低且容易导致发育畸形，A错误‌； B、体外受精技术中，新采集的精子需在获能液中培养，目的是使精子获得受精的能力，B错误‌； C、核移植技术是将供体细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使其重组并发育成新胚胎，在将重组胚胎移入受体体内前，需经过物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程，C正确‌； D、核移植、体外受精、胚胎分割这三种生物工程技术中的供体动物并不是均需要进行超数排卵处理，如核移植中提供体细胞细胞核的供体不需要超数排卵，D错误‌。 10. 基因工程的实施需要借助工具才能完成。下列说法正确的是（　　） A. 黏性末端之间的碱基互补配对需要DNA连接酶催化 B. T4 DNA连接酶只能催化双链DNA片段之间相连 C. 天然的Ti质粒可直接作为植物基因工程的载体 D. 常用抗生素合成基因来筛选导入重组DNA分子的细胞 【答案】B 【解析】 【详解】A、黏性末端的碱基互补配对依靠碱基间的氢键自发形成，不需要DNA连接酶催化，DNA连接酶的作用是催化相邻DNA片段间磷酸二酯键的形成，A错误； B、T4 DNA连接酶的作用底物为双链DNA片段，既可以连接双链DNA的黏性末端，也可以连接平末端，无法催化单链DNA片段连接，因此只能催化双链DNA片段之间相连，B正确； C、天然Ti质粒结构复杂，含有多余序列甚至致瘤相关序列，不符合基因工程载体的要求，需要经过人工改造后才能作为植物基因工程的载体，不能直接使用，C错误； D、筛选导入重组DNA分子的细胞时，常用抗生素抗性基因作为标记基因，依靠抗性基因使受体细胞在含抗生素的培养基上存活以完成筛选，并非使用抗生素合成基因，D错误。 11. 动物细胞工程技术在动物育种中有着广泛的应用，下列叙述正确的是（　　） A. 1过程中得到的受精卵可以直接在体外培养产生后代 B. 2过程可用于濒危动物的繁育，核心技术是动物细胞融合 C. 3过程中通常将目的基因导入到受精卵中可定向改变生物性状 D. 试管动物、克隆动物和转基因动物都是通过无性生殖方式产生 【答案】C 【解析】 【详解】A、1过程为试管动物技术，得到的受精卵需要在体外培养至桑葚胚或囊胚阶段，再移植到受体子宫内发育，不能直接在体外培养产生后代，A错误； B、2过程为克隆动物技术，可用于濒危动物的繁育，其核心技术是动物细胞核移植，而非动物细胞融合，B错误； C、3过程为转基因动物技术，通常将目的基因导入受精卵中，受精卵的全能性高，能发育为完整个体，可定向改变生物性状，C正确； D、试管动物的培育经过了体外受精过程，属于有性生殖；克隆动物属于无性生殖；转基因动物若由受精卵发育而来，其生殖方式仍为有性生殖，D错误。 故选C。 12. 为研究20μmol·L-1的柠檬苦素对小鼠体外受精后胚胎发育的影响，某研究小组进行了相关实验，结果如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A. 采集的卵母细胞需培养成熟再用于体外受精 B. 卵裂时早期胚胎细胞在透明带内进行有丝分裂 C. 胎盘、胎膜的结构全部由滋养层细胞发育而来 D. 20μmol·L-1的柠檬苦素可提高体外受精胚胎的发育潜力 【答案】C 【解析】 【详解】A、采集的卵母细胞需培养到减数第二次分裂中期才能用于体外受精，即需培养成熟，A正确‌； B、卵裂是早期胚胎细胞在透明带内进行的有丝分裂，细胞数量不断增加，B正确‌； C、胎盘、胎膜主要是由滋养层细胞发育而来，胎膜主要由滋养层和胚外中胚层发育而来，C错误‌； D、从图中实验结果可知，与柠檬苦素浓度为0μmol/L（对照组）相比，20μmol/L的柠檬苦素处理后卵裂率、囊胚率和囊胚内总细胞数均有所增加，凋亡细胞比率有所降低，说明20μmol/L的柠檬苦素可提高体外受精胚胎的发育潜力，D正确‌。 13. 下图为四种限制酶BamH I、EcoR I、HindⅢ和BglⅡ的识别序列。它们切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是 ( ) A. BamHⅠ和BglⅡ B. BamHⅠ和HindⅢ C. BamHⅠ和EcoRⅠ D. EcoRⅠ和HindⅢ 【答案】A 【解析】 【详解】A、BamHⅠ和BglⅡ切割形成的末端依次是-CTAG、-CTAG，可见两者互补配对，A正确； B、BamHⅠ和HindⅢ切割形成的末端依次是-CTAG、-TCGA，可见两者不互补配对，B错误； C、BamHⅠ和EcoRⅠ切割形成的末端依次是-CTAG、-TTAA，可见两者不互补配对，C错误； D、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端依次是-TTAA、-TCGA，可见两者不互补配对，D错误。 故选A。 14. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验原理及操作步骤，叙述正确的是（　　） A. 在DNA的粗提取时，上清液中加冷酒精后析出的白色丝状物即为蛋白质杂质 B. DNA遇二苯胺试剂显蓝色时，DNA的双螺旋结构发生改变 C. DNA片段在电泳时的迁移速率只与DNA分子量的大小和构象有关 D. DNA片段在电泳后，无需借助其他工具可直接观察到DNA条带 【答案】B 【解析】 【详解】A、DNA不溶于酒精，而蛋白质等杂质可溶于酒精，因此上清液中加冷酒精后析出的白色丝状物是粗提取的DNA，不是蛋白质杂质，A错误； B、用二苯胺试剂鉴定DNA时需要沸水浴加热，高温会使DNA的双螺旋结构解开发生变性，因此显色时DNA双螺旋结构已发生改变，B正确； C、DNA片段电泳时的迁移速率除与DNA分子量大小、构象有关外，还与凝胶浓度、电场强度等因素有关，并非只由这两个因素决定，C错误； D、DNA本身无颜色，电泳后需要经荧光染料染色，再借助紫外灯照射才能观察到DNA条带，无法直接观察，D错误。 15. 下列有关获取目的基因的叙述，错误的是（　　） A. 目的基因主要是指编码蛋白质的基因 B. 可人工合成目的基因或通过构建基因文库来获取目的基因 C. 序列数据库等的应用为找到合适的目的基因提供了更多的机会 D. PCR扩增目的基因的过程中，模板和引物的数量逐渐减少 【答案】D 【解析】 【详解】A、目的基因主要指编码蛋白质的结构基因，也可以是具有调控作用的非编码序列，A正确； B、获取目的基因的常用方法包括人工合成法、从构建的基因组文库或cDNA文库中获取等，B正确； C、基因序列数据库存储了大量已知基因的序列信息，可帮助研究者更高效筛选、定位所需目的基因，为找到合适的目的基因提供更多机会，C正确； D、PCR扩增目的基因时，模板DNA会随扩增次数增加呈指数式增多，只有引物会在反应过程中不断被消耗而数量减少，D错误。 16. HKT是分布于耐盐植物细胞膜上的一种Na+载体蛋白，能将细胞外的Na+转运进细胞内。现在利用蛋白质工程对HKT进行改造，将HKT的PD1位点的丝氨酸突变为甘氨酸，改造后的HKT可转运Na+或K+。下列叙述错误的是（　　） A. 改造后HKT的空间结构发生变化 B. 蛋白质工程和基因工程都需要构建基因表达载体 C. 通过此项研究改造后获得的性状不能遗传给后代 D. 天然HKT的合成过程按照中心法则进行，HKT的改造思路与之相反 【答案】C 【解析】 【详解】A、蛋白质的空间结构由氨基酸的种类、数目、排列顺序及肽链的盘曲折叠方式决定，改造后HKT的氨基酸种类发生改变，因此空间结构发生变化，A正确； B、蛋白质工程本质是通过改造编码目标蛋白的基因获得符合预期功能的蛋白质，最终需要将改造后的目的基因导入受体细胞中表达，因此和基因工程一样都需要构建基因表达载体，B正确； C、蛋白质工程改造的是编码HKT的基因，属于可遗传的变异，若改造后的基因整合到受体细胞的遗传物质中，获得的性状可以遗传给后代，C错误； D、天然HKT的合成遵循中心法则，流程为DNA转录为RNA，再翻译为蛋白质，而蛋白质工程的改造思路是从预期蛋白质功能出发，逆向推导并改造对应的基因，改造思路与中心法则相反，D正确。 17. 如图是利用基因工程技术培育抗除草剂作物的部分过程，其中Pst Ⅰ、Sma Ⅰ、EcoR Ⅰ、Apa Ⅰ为四种限制酶，且切割DNA分子后形成的末端均不同。下列说法错误的是（　　） A. 图示质粒分子在Sma Ⅰ切割前后分别含有0和2个游离的磷酸基团 B. 培育抗除草剂作物的核心工作是将含bar基因的表达载体导入受体细胞 C. 可利用花粉管通道法将bar基因导入植物细胞中 D. 导入重组质粒的受体细胞在含卡那霉素的培养基中能存活 【答案】B 【解析】 【详解】A、质粒是环状DNA分子，环状DNA分子中没有游离的磷酸基团，所以切割前含有0个游离的磷酸基团；Sma Ⅰ切割后形成线性DNA，线性DNA分子的每条链都含有1个游离的磷酸基团，共2个游离的磷酸基团，A正确‌； B、基因工程的核心工作是基因表达载体的构建，而不是将含bar基因的表达载体导入受体细胞，B错误‌； C、花粉管通道法是将目的基因导入植物细胞的一种常用方法，所以可利用花粉管通道法将bar基因导入植物细胞中，C正确‌； D、由图可知，质粒上含有抗卡那霉素基因，抗卡那霉素基因是标记基因，导入重组质粒的受体细胞含有抗卡那霉素基因，能在含卡那霉素的培养基中存活，D正确‌。 18. Noxa是一种促凋亡蛋白。为构建表达Noxa的工程菌，现利用PCR技术将Noxa基因连接在ClyA基因的下游，构建ClyA-Noxa融合基因，并插入P载体。两个基因及四条引物如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 为使ClyA-Noxa融合基因插入P载体，F1和R2引物设计时应引入相应的酶切位点 B. 为方便构建融合基因，F2和R1引物设计时需要引入一定长度的互补序列 C. 为筛选成功转化后的工程菌，可以使用F2和R2的引物组合进行PCR鉴定 D. 为高效准确构建含ClyA-Noxa融合基因的表达载体，需至少使用2种限制酶 【答案】C 【解析】 【详解】A‌、要将ClyA - Noxa融合基因插入P载体，需要用限制酶切割融合基因和载体，所以在F1和R2引物设计时应引入相应的酶切位点，这样才能使融合基因和载体产生相同的末端，便于DNA连接酶连接，A正确‌； B‌、为方便构建融合基因，F2和R1引物设计时需要引入一定长度的互补序列，通过PCR扩增，使ClyA基因和Noxa基因能够连接起来形成融合基因，B正确‌； C‌、成功转化后的工程菌含有ClyA - Noxa融合基因，应该使用F1和R2的引物组合进行PCR鉴定，若能扩增出相应条带，则说明工程菌构建成功；而F2和R2只能扩增Noxa基因，不能鉴定是否成功构建了融合基因，C错误‌； D‌、为高效准确构建含ClyA - Noxa融合基因的表达载体，需至少使用2种限制酶，这样可以防止载体自身环化以及保证融合基因正确插入载体，D正确‌。 19. 基因工程在农牧业、医药卫生领域、食品工业方面都有广泛的应用，以下叙述错误的是（　　） A. 将外源生长激素基因导入动物体内可提高动物生长速率 B. 将病原体的相关抗原转入适当的微生物细胞，可生产相关疫苗 C. 用基因工程技术获得的工业酶的优点：纯度高、生产成本低、生产效率高 D. 将来源于某些病毒、真菌的抗病基因导入植物中，可培育转基因抗病植物 【答案】B 【解析】 【详解】A、生长激素具有促进动物生长的作用，将外源生长激素基因导入动物受精卵培育得到的转基因动物可正常表达生长激素，进而提高生长速率，A正确； B、基因工程的核心是导入目的基因使其在受体细胞中表达，生产疫苗时需要将病原体编码抗原的基因转入微生物细胞，而非直接转入抗原（多为蛋白质类物质），抗原本身导入微生物后无法被复制、持续合成，不能用于疫苗生产，B错误； C、用基因工程培育的工程菌可特异性表达目标工业酶，相比传统从生物组织中提取酶的方法，具有纯度高、生产成本低、生产效率高的优势，C正确； D、来源于病毒的外壳蛋白基因、复制酶基因等属于抗病毒基因，部分来源于真菌的抗真菌相关功能基因也属于抗病基因，将这类基因导入植物可使植物获得相应抗病性状，培育转基因抗病植物，D正确； 20. 番茄在低温下运输、储存的过程中，容易出现冻伤，影响番茄的品质。科学家利用基因工程技术将目的基因（AFPs抗冻基因）转入番茄植株（双子叶植物），培育抗冻番茄。如图表示基因表达载体的构建过程。下列相关叙述错误的是（　　） A. 标记基因的作用是便于筛选含重组DNA的受体细胞 B. 图中目的基因插入启动子和终止子之间才能表达 C. AFPs抗冻基因可通过农杆菌转化法转移至番茄植物细胞中 D. 启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，紧挨翻译的起点 【答案】D 【解析】 【详解】A‌、标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有重组DNA的受体细胞筛选出来，A正确‌； B‌、启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，启动转录过程；终止子是转录终止的信号。目的基因只有插入启动子和终止子之间才能被正常转录和表达，B正确‌； C‌、番茄是双子叶植物，将目的基因导入双子叶植物细胞常用农杆菌转化法，所以AFPs抗冻基因可通过农杆菌转化法转移至番茄植物细胞中，C正确‌； D‌、启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，启动转录过程，而翻译的起点是mRNA上的起始密码子，启动子并不紧挨翻译的起点，D错误‌。 二、不定项选择题（本题共5题，每小题3分，共15分。在每小题给出的4个选项中，至少有1项是符合题目要求的，全部选对得3分，少选得1分，多选、错选均得0分。） 21. 下列关于传统发酵技术的说法中，不合理的是（　　） A. 腐乳发酵过程中，不能有毛霉以外的杂菌参与，因此需严格灭菌 B. 果酒、果醋、酸奶发酵中的主要菌种均无核膜为界限的细胞核 C. 泡菜制作过程中盐水没过菜料、坛沿边缘注满水，目的是制造无菌环境 D. 在果酒、果醋和泡菜制作过程中，因各种微生物的活动，pH都会下降 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、在腐乳发酵过程中，有多种微生物参与，如酵母、曲霉、毛霉等，家庭制作腐乳时，毛霉等微生物可以来自空气中的毛霉孢子等，所以不需要严格灭菌，A错误； B、果酒发酵的主要菌种是酵母菌，属于真核生物，有以核膜为界限的细胞核；果醋发酵的主要菌种是醋酸菌，酸奶发酵的主要菌种是乳酸菌，醋酸菌和乳酸菌属于原核生物，无核膜为界限的细胞核，B错误； C、泡菜制作过程中盐水没过菜料、坛沿边缘注满水，目的是制造无氧环境，因为乳酸菌是厌氧菌，无氧环境有利于乳酸菌发酵，C错误； D、在果酒制作过程中，酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，二氧化碳溶于水形成碳酸，使pH下降；果醋制作过程中，醋酸菌将酒精转化为醋酸，使pH下降；泡菜制作过程中，乳酸菌发酵产生乳酸，使pH下降，D正确。 22. 下列关于微生物培养的叙述，正确的有（　　） A. 检验某培养基灭菌是否合格可用未接种的培养基在相同且适宜的条件下对照培养 B. 为防止微生物侵入培养基，倒平板时要在酒精灯的火焰旁进行操作 C. 利用紫外线对超净工作台进行消毒前，喷洒消毒液可加强消毒效果 D. 培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、检验某培养基灭菌是否合格，可将未接种的培养基在相同且适宜的条件下进行对照培养。若有菌落出现，说明培养基灭菌不合格，可能有杂菌污染；若没有菌落出现，则说明培养基灭菌合格，A正确； B、酒精灯火焰附近存在无菌区域，为防止微生物侵入培养基，倒平板时要在酒精灯的火焰旁进行操作，这样可以减少空气中杂菌污染的机会，B正确； C、利用紫外线对超净工作台进行消毒前，喷洒消毒液可以使空气中的微生物沉降，同时也能对工作台表面进行初步消毒，可加强消毒效果，C正确； D、培养基中的营养物质浓度过高，会导致微生物细胞失水，从而抑制微生物的生长，甚至使其死亡，并不是营养物质浓度越高对微生物生长越有利，D错误。 23. “黑寡妇”蜘蛛吐出的丝强过钢丝，用其吐出的丝织成的布比制造防弹背心所用纤维的强度高很多。科学家把“黑寡妇”蜘蛛体内蜘蛛丝蛋白基因，导入到山羊细胞内，培育出转基因“蜘蛛羊”乳腺生物反应器，获得了坚韧程度极强的蜘蛛丝蛋白，取名为“生物钢”，操作过程如下。下列说法错误的是（　　） A. 常用显微注射法将基因表达载体导入山羊乳腺细胞来获得转基因山羊 B. 可用PCR技术从分子水平检测目的基因是否翻译出蜘蛛丝蛋白 C. “蜘蛛羊”乳腺生物反应器生产的“生物钢”不会造成环境污染 D. 转基因山羊中，目的基因既存在于乳腺细胞中，也存在于神经细胞中 【答案】AB 【解析】 【详解】A‌、在培育转基因动物时，通常用显微注射法将基因表达载体导入动物的受精卵，因为受精卵的全能性高，能发育成完整个体，A错误‌； B‌、从分子水平检测目的基因是否翻译出蜘蛛丝蛋白应用抗原-抗体杂交技术，B错误‌； C‌、“生物钢”是蜘蛛丝蛋白，可被生物降解，不会造成环境污染，C正确‌； D‌、转基因山羊的体细胞都是由导入目的基因的受精卵分裂、分化而来，所以目的基因既存在于乳腺细胞中，也存在于神经细胞等其他体细胞中，D正确‌。 24. “低乳糖奶牛”的诞生有望给乳糖不耐受症患者提供“放心奶”。如图是“低乳糖奶牛”的培育过程，下列叙述错误的是（　　） A. 通过图示方法获得后代的方式属于有性生殖 B. 常选择囊胚期的内细胞团细胞作DNA分析鉴定胚胎性别 C. 犊牛的遗传物质大部分来自黑白花奶牛和乳糖酶基因 D. 犊牛成年后与普通牛杂交，子代有1/2是低乳糖奶牛 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、图示方法是通过核移植等技术培育犊牛，利用的是动物体细胞核移植技术，属于无性生殖，A错误； B、常选择囊胚期的滋养层细胞作DNA分析鉴定胚胎性别，而不是内细胞团细胞，因为取内细胞团细胞会影响胚胎的进一步发育，B错误； C、犊牛的核遗传物质来自黑白花奶牛提供的细胞核以及导入的乳糖酶基因，细胞质遗传物质来自卵母细胞，所以犊牛的遗传物质大部分来自黑白花奶牛和乳糖酶基因，C正确； D、犊牛含有乳糖酶基因情况及基因位置不确定，普通牛不含乳糖酶基因，为隐性纯合子，所以不能确定犊牛成年后与普通牛杂交子代中低乳糖奶牛的比例，D错误。 25. 某科研小组通过PCR技术（假设引物长度为8个碱基短于实际长度）获得含有目的基因的DNA片段，并用限制酶（如图1）进行酶切，获得了带有黏性末端的DNA片段（如图2），再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列相关叙述，错误的是（　　） A. 限制酶SpeⅠ和限制酶NheⅠ的酶切产物具有相同的黏性末端 B. 上述PCR过程所用引物序列之一为5′-TGCGCAGTTCAT…-3′ C. 步骤①酶切中所用的酶是SpeⅠ和CfoⅠ或者NheⅠ和CfoⅠ D. 可使用E.coliDNA连接酶或T4DNA连接酶连接上述酶切片段和载体 【答案】BC 【解析】 【详解】A、限制酶SpeI的识别序列是5 ′ −ACTAGT−3 ′ ，酶切后产生的黏性末端是5 ′ −CTAG−3 ′ ；限制酶NheI的识别序列是5 ′ −GCTAGC−3 ′ ，酶切后产生的黏性末端是5 ′ −CTAG−3 ′ ，二者的酶切产物具有相同的黏性末端，A正确； B、据题意可知，引物长度为8个碱基，由于引物只能引导子链从5 ′ 端到3 ′ 端进行延伸，根据碱基互补配对原则，上述PCR过程所用引物序列之一应为5 ′ −TGCGCAGT−3 ′ ，B错误； C、根据三种酶的酶切位点以及图2中酶切后所得DNA片段两端的黏性末端分析，左侧的黏性末端是使用NheI切割形成的，右边的黏性末端是用CfoI切割形成的，所以步骤①酶切中所用的酶是NheI和CfoI，C错误； D、E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶都能连接黏性末端，图中酶切片段形成的是黏性末端，所以可使用E.coli DNA连接酶或T4 DNA连接酶连接上述酶切片段和载体，D正确。 三、非选择题（本题共5小题，共45分。） 26. 樱桃树栽培过程中容易感染真菌而影响产量和品质，研究者试图从土壤中分离某种芽孢杆菌来抑制真菌，从而提高果树产量和品质，实验流程如下图，请回答下列问题。 （1）进行③操作前，常用_____法对培养基灭菌，灭菌后冷却再倒平板。 （2）图中①步骤需要在培养瓶中加入_____mL_____对土壤中的微生物进行稀释，图中对芽孢杆菌进行分离的方法是_____。 （3）目的菌筛选时，需将一定大小的真菌菌落移置于_____（填“A”或“B”）处，而芽孢杆菌接种于另一处。检测各抗菌株发酵滤液的抑菌效果进行进一步筛选，尝试用于樱桃树腐烂病防治。与化学防治相比，该种方法的优点是_____。 （4）尝试利用传统发酵技术制樱桃酒和樱桃醋。樱桃酒如果暴露在空气中一段时间，酒味会逐渐消失而出现酸味，其原因是_____。 【答案】（1）高压蒸汽灭菌 （2） ①. 45 ②. 无菌水 ③. 稀释涂布平板法 （3） ①. A ②. 对环境的污染小（或减少农药使用、保护生态平衡等） （4）醋酸菌在有氧条件下将乙醇氧化为乙酸 【解析】 【小问1详解】 配制培养基时，培养基的灭菌应该在调pH之后，培养基的灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法。 【小问2详解】 要获得稀释了10倍的土壤悬液，应该将5g土壤加入45mL无菌水中充分振荡。由图可知在不同的稀释度下取0.1mL接种到三个平板上，这种接种方法是稀释涂布平板法。 【小问3详解】 实验目的是筛选能抑制真菌的芽孢杆菌，将真菌接种在平板中心的A处，不同芽孢杆菌接种在四周的B区，若芽孢杆菌存在抑菌作用，中心真菌的生长会被抑制，方便观察结果。与化学防治相比，该方法的优势是对环境的污染小（或减少农药使用、保护生态平衡等）。 【小问4详解】 樱桃酒如果暴露在空气中一段时间，酒味会逐渐消失而出现酸味，其原因是：在有氧条件下，醋酸菌繁殖消耗乙醇并产生大量醋酸，从而出现酸味。 27. 科研人员利用植物体细胞杂交技术培育出了含有部分拟南芥核遗传物质和全部野生油菜的核遗传物质的拟南芥—油菜杂种植株，从而使该杂种植株中表达拟南芥抗病基因和野生油菜部分基因，据图回答下列问题。 （1）取拟南芥和野生油菜组织作为外植体，经_____和次氯酸钠消毒，但是需要注意消毒时间不能过长，原因是_____。 （2）图中②步骤使用_____处理愈伤组织细胞，该过程不能在清水中操作，而是需要在一定浓度的溶液中进行，其目的是_____。 （3）图中①和④步骤所用培养基成分的主要区别是_____；步骤③可采用的化学方法有_____（写出两个）。 （4）图示异源融合原生质体能够发育成杂种植株的根本原因是_____。 （5）X射线处理拟南芥原生质体的目的是_____。 【答案】（1） ①. 酒精 ②. 消毒剂会杀死外植体细胞 （2） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 维持渗透压，防止原生质体吸水涨破 （3） ①. 植物激素（生长素和细胞分裂素）的比例 ②. 聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法 （4）植物细胞具有全能性 （5）诱导拟南芥染色体片段断裂（或诱导基因突变/染色体变异） 【解析】 【小问1详解】 取拟南芥和野生油菜组织作为外植体，先用70% 酒精快速消毒，再用次氯酸钠溶液消毒；每次消毒后必须用无菌水冲洗叶片，彻底去除残留消毒剂，但是需要注意消毒时间不能过长，因为消毒剂会杀死外植体细胞。 【小问2详解】 图中②步骤使用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织细胞，该过程不能在清水中操作，而是需要在一定浓度的溶液中进行，否则在清水中会吸水涨破，因此在一定溶液中进行原生质体的制取可以达到维持渗透压，防止原生质体吸水涨破的目的。 【小问3详解】 图中①为脱分化，④步骤为再分化过程，这两个过程的目的不同，因而所用培养基成分的主要区别是植物激素（生长素和细胞分裂素）的比例不同，前者中生长素和细胞分裂素的比值相当，后者生长素和细胞分裂素的比值偏高；步骤③是促进原生质体融合的过程可采用的化学方法有聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法。 【小问4详解】 图示异源融合原生质体能够发育成杂种植株的根本原因是植物细胞具有全能性，即细胞中有全套的遗传物质，因而能够发育成完整个体。 【小问5详解】 X射线处理拟南芥原生质体的目的是诱导拟南芥染色体片段断裂（或诱导基因突变/染色体变异），同时保留拟南芥抗病基因正常表达的功能；最终获得既带有拟南芥抗病性状、又以野生油菜遗传物质为主的杂种细胞 / 植株。 28. 西北农林科技大学团队自2018年起开展藏羊胚胎工程应用技术研究，该技术同时利用了湖羊的高繁殖力，于2024年成功实现世界首例体细胞克隆藏羊的诞生。具体流程如下，①～⑦代表操作过程，请回答下列问题。 （1）图中①过程通常用_____处理A湖羊，使其超数排卵。 （2）⑦过程的实质是_____，E后代的生殖方式属于_____。 （3）④为去核过程，此过程去除的“核”实际上是_____；经⑤过程对耳体细胞进行动物细胞培养时，通常在合成培养基中添加_____等天然成分。 （4）可用物理或化学方法，如_____（写出两种）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，最终得到的F后代性别为_____，判断的依据是_____。 【答案】（1）促性腺激素 （2） ①. 早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 ②. 有性生殖 （3） ①. 纺锤体–染色体复合物 ②. 血清 （4） ①. 电脉冲、Ca2+载体、蛋白酶合成抑制剂等（任选两个） ②. 雌性 ③. F后代的细胞核遗传物质来自C顶级欧拉藏羊（雌性），性染色体组成为XX 【解析】 【小问1详解】 图中①过程通常用促性腺激素处理A湖羊，可促使其超数排卵，这样可以获得更多的卵母细胞； 【小问2详解】 ⑦过程是胚胎移植，其实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移；E后代是由受精卵发育而来的，属于有性生殖； 【小问3详解】 去核过程去除的“核”实际上是纺锤体–染色体复合物；动物细胞培养时，通常在合成培养基中添加血清等天然成分，以补充细胞生长所需的未知营养物质； 【小问4详解】 激活重构胚的物理或化学方法有电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等；F后代的性别为雄性，判断依据是重构胚的细胞核来自C顶级欧拉藏羊♂（雄性）的耳体细胞，生物的性别由细胞核中的遗传物质决定。 29. 人乳头瘤病毒（HPV）与宫颈癌的发生有关，可利用抗HPV单克隆抗体检测是否发生HPV感染，从而有效预防宫颈癌，下图是制备抗HPV单克隆抗体的过程，请回答相关问题。 （1）制备抗HPV单克隆抗体时，首先给小鼠注射灭活的HPV，目的是让小鼠_____。 （2）利用HAT培养基能够筛选出杂交瘤细胞的原因是_____。 （3）筛选出的杂交瘤细胞还需要进一步进行_____，以便获得足量的产生高特异性抗体的杂交瘤细胞，之后将这些杂交瘤细胞注入到小鼠腹腔内增殖，将来分离出抗HPV单克隆抗体。但是利用小鼠生产的抗HPV单克隆抗体不能直接用于人体，需要改造后才可以使用，其原因是_____。 【答案】（1）产生能分泌抗HPV抗体的B淋巴细胞##产生能分泌抗HPV抗体的浆细胞 （2）未融合的亲本细胞和同种细胞融合形成的细胞（骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞、B细胞-B细胞）都不能在HAT培养基上增殖，只有杂交瘤细胞（B细胞-骨髓瘤细胞）可以增殖 （3） ①. 克隆化培养和抗体检测##克隆化培养和专一性抗体检验 ②. 小鼠抗体对人体具有免疫原性##小鼠抗体会引起人体的免疫排斥反应 【解析】 【小问1详解】 给小鼠注射的灭活的HPV是抗原，能使小鼠产生能分泌抗HPV抗体的B淋巴细胞（或浆细胞）。 【小问2详解】 HAT培养基是选择培养基，起筛选作用，在该培养基上未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞（骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞、B细胞-B细胞）都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞（B细胞-骨髓瘤细胞）才能生长。 【小问3详解】 筛选出的杂交瘤细胞需要进行克隆化培养和抗体检测，来获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞，经多次筛选，就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞。小鼠生产的抗HPV单克隆抗体对人体而言属于异源蛋白，即抗原，会引起人体的免疫反应，所以不能直接用于人体，需要改造后才可以使用。 30. 在植物遗传转化过程中，除目的基因外，标记基因等序列也会随目的基因整合到作物基因组中，应予以剔除。科学家构建了可诱导剔除标记基因的载体，并将其导入拟南芥获得无标记基因的耐盐个体，相关过程如图所示。Cre-loxP系统由Cre酶和DNA上的特殊序列loxP组成，两个同向loxP间的DNA序列可被Cre酶识别并切除。 （1）将基因1插入质粒时，切割质粒需选用的限制酶是_____。 （2）基因2插入时使用了无缝克隆技术，其流程是先对质粒进行PCR获得线性化载体，再通过PCR在目的基因两端添加与线性化载体两端相同碱基序列，然后将线性化载体与目的基因混合，在酶的作用下，从线性化载体与目的基因3′端起始切除15个核苷酸，暴露出互补的单链区域，最终促使插入片段与载体能够借助这些互补区域实现连接。 ①PCR的原理是_____，每次循环的三个步骤中温度居中的步骤是_____。PCR产物常采用_____鉴定。 ②通过PCR对质粒进行线性化时，应选用的引物序列是_____（仅表示出5′→3′的10个碱基）。 A．5′TAGCGGACTG3′ B．5′GACTCTAGAT3′ C．5′ATCTAGAGTC3′ D．5′ATCGCCTGAC3′ ③与单酶切后用DNA连接酶连接相比，无缝克隆技术的优点有_____（写出一点即可）。 （3）将卡那霉素抗性基因和耐盐基因插入质粒获得重组质粒，其中基因2应是_____基因（填“卡那霉素抗性”或“耐盐”）。然后用含重组质粒的农杆菌去侵染拟南芥。之后应先后在分别添加_____的培养基中筛选并培养得到含有耐盐基因的受体细胞。最后还需要进行个体生物学水平鉴定，其具体操作是_____。 【答案】（1）EcoR I和Sal I （2） ①. DNA双链复制 ②. 复性（退火） ③. 琼脂糖凝胶电泳 ④. CD ⑤. ③无缝连接（不引入额外序列）、效率高、无需使用限制酶等 （3） ①. 耐盐 ②. 卡那霉素、盐（NaCl或高盐） ③. 将转基因拟南芥种植在高盐环境中，观察其是否能正常生长 【解析】 【小问1详解】 结合目的基因可知，需要用限制酶Mfe I和Sal I进行酶切，为了获得相同的黏性末端，理论上质粒也需要使用限制酶Mfe I和Sal I进行酶切，但限制酶Mfe I会破坏质粒上的Cre酶基因，根据限制酶识别序列，EcoR I和Mfe I酶切形成的黏性末端是相同的，因此切割质粒需选用的限制酶是EcoR I和Sal I。 【小问2详解】 PCR（多聚酶链式反应）的核心原理是DNA双链复制，PCR每次循环包含3个步骤，变性（90~95℃，使DNA双链解旋）→ 复性（退火，50~60℃，使引物与模板链结合）→ 延伸（72℃左右，Taq酶催化子链合成）；其中温度居中的步骤是复性（退火）。PCR产物的鉴定常用方法为琼脂糖凝胶电泳，通过对比已知分子量的DNA参照物，判断PCR产物的大小是否符合预期，进而确定扩增是否成功。结合图示质粒切口的放大部分，由于模板链的碱基序列为3'TAGATCTCAG5'和3'TAGCGGACTG5'，引物应该与复制起始端互补配对，因此通过PCR对质粒进行线性化时，应选用的引物序列是5'ATCTAGAGTC3'和5'ATCGCCTGAC3'，CD正确。无缝连接无需限制酶切割，不受酶切位点限制，所以优点是这种无缝连接（不引入额外序列）、效率高、无需使用限制酶等。 【小问3详解】 Cre-loxP系统可切除两个同向loxP间的标记基因序列，所以基因1为标记基因，耐盐基因作为目的基因需保留在拟南芥基因组中。因此，基因2是耐盐基因。第一步筛选：用含卡那霉素的培养基培养侵染后的拟南芥细胞。只有导入重组质粒（含卡那霉素抗性基因）的细胞才能存活，排除未转化的细胞； 第二步筛选：诱导Cre酶表达，使两个同向loxP间的卡那霉素抗性基因（标记基因）被切除；再用含盐（NaCl或高盐）的培养基培养，只有含耐盐基因的细胞才能存活，最终获得含耐盐基因的受体细胞。个体生物学水平鉴定的核心是验证拟南芥是否具有耐盐性状，具体操作是将转基因拟南芥种植在高盐环境中，观察其是否能正常生长。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 哈三中2025—2026学年度下学期 高二学年期中考试生物试题 一、单项选择题（本题共20题，每小题2分，共40分。在每小题给出的4个选项中，只有1项符合题目要求。） 1. 下列属于细胞工程成果的是（　　） A. 利用黑曲霉制得的酱油 B. 转基因抗虫棉 C. 白菜—甘蓝杂种植株 D. 速效胰岛素类似物 2. 下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是（　　） A. 二者都使用固体培养基 B. 二者的培养基都以蔗糖为碳源 C. 二者都需要定期更换培养基 D. 二者都利用细胞全能性的原理 3. 发酵工程正渗透到几乎所有的工农业领域，在助力解决粮食、环境、健康和能源等方面的重大问题上，做出了越来越大的贡献。下列相关叙述错误的是（　　） A. 性状优良的菌种可以通过基因工程育种获得 B. 单细胞蛋白是微生物代谢过程中产生的蛋白质 C. 利用纤维废料发酵生产酒精、乙烯等能源物质 D. 发酵工程可生产多种抗生素、激素、疫苗等 4. “白雪公主”草莓被誉为“水果皇后”，具有广阔的市场前景和较高的经济价值。但病毒在草莓体内逐年积累会导致产量降低、品质变差。如图是育种工作者选育高品质“白雪公主”草莓的流程图。下列叙述错误的是（　　） 注：SMYELV-CP是草莓轻型黄边病毒的外壳蛋白基因 A. 方法一中甲常选用茎尖，原因是其病毒极少甚至不含病毒 B. 方法一中得到的无病毒苗没有提高对原有病毒的抵抗力 C. 判断两种选育方法的效果都应进行病毒接种实验 D. ①③过程均属于植物组织培养，体现了植物细胞全能性 5. 下列对动物细胞核移植技术的描述中，错误的是（　　） A. 动物细胞核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植 B. 体细胞核移植过程中通常采用受精卵作为受体细胞 C. 重构胚具有发育成完整个体的能力 D. 经体细胞核移植生产的克隆动物不是对供核动物的100%复制 6. 研究发现，雪莲次生代谢物对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用，利用植物细胞培养技术生产雪莲次生代谢物的大致流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A. 通过图中过程生产雪莲次生代谢物几乎不受季节和天气等的限制 B. 利用雪莲茎尖获得雪莲次生代谢物时体现了细胞全能性 C. 在适当条件下给予适宜光照，①愈伤组织能进行光合作用 D. 植物细胞培养技术提高了单个细胞中次生代谢物的含量 7. 下列技术手段与对应优点不符合的是（　　） A. 植物体细胞杂交，实现远缘杂交育种 B. 胚胎分割，提高优质家畜胚胎利用率 C. 体外受精，可以为胚胎移植提供可用的胚胎 D. 胚胎移植，充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力 8. 抗体--药物偶联物（ADC）通过将药物（如细胞毒素）与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC作用机制如图所示，下列叙述正确的是（　　） A. ADC中的单克隆抗体有特异性强的特点，能精准杀死肿瘤细胞 B. 药物具有特异性，可以与靶细胞表面的抗原发生特异性结合 C. 与使用细胞毒素类药物进行化疗相比，使用ADC的副作用更大 D. 单克隆抗体在临床上还可作为诊断试剂或单独治疗疾病 9. 如图所示，a表示现代生物工程技术，b表示结果，下列相关叙述正确的是（　　） A. 若a是胚胎分割技术，可选发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割 B. 若a是体外受精技术，新采集的精子需在获能液中培养获得受精的能量 C. 若a是核移植技术，需将经过物理或化学方法激活的重构胚移入受体体内 D. 上述选项所涉及的生物工程技术中的供体动物，均需要进行超数排卵处理 10. 基因工程的实施需要借助工具才能完成。下列说法正确的是（　　） A. 黏性末端之间的碱基互补配对需要DNA连接酶催化 B. T4 DNA连接酶只能催化双链DNA片段之间相连 C. 天然的Ti质粒可直接作为植物基因工程的载体 D. 常用抗生素合成基因来筛选导入重组DNA分子的细胞 11. 动物细胞工程技术在动物育种中有着广泛的应用，下列叙述正确的是（　　） A. 1过程中得到的受精卵可以直接在体外培养产生后代 B. 2过程可用于濒危动物的繁育，核心技术是动物细胞融合 C. 3过程中通常将目的基因导入到受精卵中可定向改变生物性状 D. 试管动物、克隆动物和转基因动物都是通过无性生殖方式产生 12. 为研究20μmol·L-1的柠檬苦素对小鼠体外受精后胚胎发育的影响，某研究小组进行了相关实验，结果如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A. 采集的卵母细胞需培养成熟再用于体外受精 B. 卵裂时早期胚胎细胞在透明带内进行有丝分裂 C. 胎盘、胎膜的结构全部由滋养层细胞发育而来 D. 20μmol·L-1的柠檬苦素可提高体外受精胚胎的发育潜力 13. 下图为四种限制酶BamH I、EcoR I、HindⅢ和BglⅡ的识别序列。它们切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是 ( ) A. BamHⅠ和BglⅡ B. BamHⅠ和HindⅢ C. BamHⅠ和EcoRⅠ D. EcoRⅠ和HindⅢ 14. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验原理及操作步骤，叙述正确的是（　　） A. 在DNA的粗提取时，上清液中加冷酒精后析出的白色丝状物即为蛋白质杂质 B. DNA遇二苯胺试剂显蓝色时，DNA的双螺旋结构发生改变 C. DNA片段在电泳时的迁移速率只与DNA分子量的大小和构象有关 D. DNA片段在电泳后，无需借助其他工具可直接观察到DNA条带 15. 下列有关获取目的基因的叙述，错误的是（　　） A. 目的基因主要是指编码蛋白质的基因 B. 可人工合成目的基因或通过构建基因文库来获取目的基因 C. 序列数据库等的应用为找到合适的目的基因提供了更多的机会 D. PCR扩增目的基因的过程中，模板和引物的数量逐渐减少 16. HKT是分布于耐盐植物细胞膜上的一种Na+载体蛋白，能将细胞外的Na+转运进细胞内。现在利用蛋白质工程对HKT进行改造，将HKT的PD1位点的丝氨酸突变为甘氨酸，改造后的HKT可转运Na+或K+。下列叙述错误的是（　　） A. 改造后HKT的空间结构发生变化 B. 蛋白质工程和基因工程都需要构建基因表达载体 C. 通过此项研究改造后获得的性状不能遗传给后代 D. 天然HKT的合成过程按照中心法则进行，HKT的改造思路与之相反 17. 如图是利用基因工程技术培育抗除草剂作物的部分过程，其中Pst Ⅰ、Sma Ⅰ、EcoR Ⅰ、Apa Ⅰ为四种限制酶，且切割DNA分子后形成的末端均不同。下列说法错误的是（　　） A. 图示质粒分子在Sma Ⅰ切割前后分别含有0和2个游离的磷酸基团 B. 培育抗除草剂作物的核心工作是将含bar基因的表达载体导入受体细胞 C. 可利用花粉管通道法将bar基因导入植物细胞中 D. 导入重组质粒的受体细胞在含卡那霉素的培养基中能存活 18. Noxa是一种促凋亡蛋白。为构建表达Noxa的工程菌，现利用PCR技术将Noxa基因连接在ClyA基因的下游，构建ClyA-Noxa融合基因，并插入P载体。两个基因及四条引物如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 为使ClyA-Noxa融合基因插入P载体，F1和R2引物设计时应引入相应的酶切位点 B. 为方便构建融合基因，F2和R1引物设计时需要引入一定长度的互补序列 C. 为筛选成功转化后的工程菌，可以使用F2和R2的引物组合进行PCR鉴定 D. 为高效准确构建含ClyA-Noxa融合基因的表达载体，需至少使用2种限制酶 19. 基因工程在农牧业、医药卫生领域、食品工业方面都有广泛的应用，以下叙述错误的是（　　） A. 将外源生长激素基因导入动物体内可提高动物生长速率 B. 将病原体的相关抗原转入适当的微生物细胞，可生产相关疫苗 C. 用基因工程技术获得的工业酶的优点：纯度高、生产成本低、生产效率高 D. 将来源于某些病毒、真菌的抗病基因导入植物中，可培育转基因抗病植物 20. 番茄在低温下运输、储存的过程中，容易出现冻伤，影响番茄的品质。科学家利用基因工程技术将目的基因（AFPs抗冻基因）转入番茄植株（双子叶植物），培育抗冻番茄。如图表示基因表达载体的构建过程。下列相关叙述错误的是（　　） A. 标记基因的作用是便于筛选含重组DNA的受体细胞 B. 图中目的基因插入启动子和终止子之间才能表达 C. AFPs抗冻基因可通过农杆菌转化法转移至番茄植物细胞中 D. 启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，紧挨翻译的起点 二、不定项选择题（本题共5题，每小题3分，共15分。在每小题给出的4个选项中，至少有1项是符合题目要求的，全部选对得3分，少选得1分，多选、错选均得0分。） 21. 下列关于传统发酵技术的说法中，不合理的是（　　） A. 腐乳发酵过程中，不能有毛霉以外的杂菌参与，因此需严格灭菌 B. 果酒、果醋、酸奶发酵中的主要菌种均无核膜为界限的细胞核 C. 泡菜制作过程中盐水没过菜料、坛沿边缘注满水，目的是制造无菌环境 D. 在果酒、果醋和泡菜制作过程中，因各种微生物的活动，pH都会下降 22. 下列关于微生物培养的叙述，正确的有（　　） A. 检验某培养基灭菌是否合格可用未接种的培养基在相同且适宜的条件下对照培养 B. 为防止微生物侵入培养基，倒平板时要在酒精灯的火焰旁进行操作 C. 利用紫外线对超净工作台进行消毒前，喷洒消毒液可加强消毒效果 D. 培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利 23. “黑寡妇”蜘蛛吐出的丝强过钢丝，用其吐出的丝织成的布比制造防弹背心所用纤维的强度高很多。科学家把“黑寡妇”蜘蛛体内蜘蛛丝蛋白基因，导入到山羊细胞内，培育出转基因“蜘蛛羊”乳腺生物反应器，获得了坚韧程度极强的蜘蛛丝蛋白，取名为“生物钢”，操作过程如下。下列说法错误的是（　　） A. 常用显微注射法将基因表达载体导入山羊乳腺细胞来获得转基因山羊 B. 可用PCR技术从分子水平检测目的基因是否翻译出蜘蛛丝蛋白 C. “蜘蛛羊”乳腺生物反应器生产的“生物钢”不会造成环境污染 D. 转基因山羊中，目的基因既存在于乳腺细胞中，也存在于神经细胞中 24. “低乳糖奶牛”的诞生有望给乳糖不耐受症患者提供“放心奶”。如图是“低乳糖奶牛”的培育过程，下列叙述错误的是（　　） A. 通过图示方法获得后代的方式属于有性生殖 B. 常选择囊胚期的内细胞团细胞作DNA分析鉴定胚胎性别 C. 犊牛的遗传物质大部分来自黑白花奶牛和乳糖酶基因 D. 犊牛成年后与普通牛杂交，子代有1/2是低乳糖奶牛 25. 某科研小组通过PCR技术（假设引物长度为8个碱基短于实际长度）获得含有目的基因的DNA片段，并用限制酶（如图1）进行酶切，获得了带有黏性末端的DNA片段（如图2），再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列相关叙述，错误的是（　　） A. 限制酶SpeⅠ和限制酶NheⅠ的酶切产物具有相同的黏性末端 B. 上述PCR过程所用引物序列之一为5′-TGCGCAGTTCAT…-3′ C. 步骤①酶切中所用的酶是SpeⅠ和CfoⅠ或者NheⅠ和CfoⅠ D. 可使用E.coliDNA连接酶或T4DNA连接酶连接上述酶切片段和载体 三、非选择题（本题共5小题，共45分。） 26. 樱桃树栽培过程中容易感染真菌而影响产量和品质，研究者试图从土壤中分离某种芽孢杆菌来抑制真菌，从而提高果树产量和品质，实验流程如下图，请回答下列问题。 （1）进行③操作前，常用_____法对培养基灭菌，灭菌后冷却再倒平板。 （2）图中①步骤需要在培养瓶中加入_____mL_____对土壤中的微生物进行稀释，图中对芽孢杆菌进行分离的方法是_____。 （3）目的菌筛选时，需将一定大小的真菌菌落移置于_____（填“A”或“B”）处，而芽孢杆菌接种于另一处。检测各抗菌株发酵滤液的抑菌效果进行进一步筛选，尝试用于樱桃树腐烂病防治。与化学防治相比，该种方法的优点是_____。 （4）尝试利用传统发酵技术制樱桃酒和樱桃醋。樱桃酒如果暴露在空气中一段时间，酒味会逐渐消失而出现酸味，其原因是_____。 27. 科研人员利用植物体细胞杂交技术培育出了含有部分拟南芥核遗传物质和全部野生油菜的核遗传物质的拟南芥—油菜杂种植株，从而使该杂种植株中表达拟南芥抗病基因和野生油菜部分基因，据图回答下列问题。 （1）取拟南芥和野生油菜组织作为外植体，经_____和次氯酸钠消毒，但是需要注意消毒时间不能过长，原因是_____。 （2）图中②步骤使用_____处理愈伤组织细胞，该过程不能在清水中操作，而是需要在一定浓度的溶液中进行，其目的是_____。 （3）图中①和④步骤所用培养基成分的主要区别是_____；步骤③可采用的化学方法有_____（写出两个）。 （4）图示异源融合原生质体能够发育成杂种植株的根本原因是_____。 （5）X射线处理拟南芥原生质体的目的是_____。 28. 西北农林科技大学团队自2018年起开展藏羊胚胎工程应用技术研究，该技术同时利用了湖羊的高繁殖力，于2024年成功实现世界首例体细胞克隆藏羊的诞生。具体流程如下，①～⑦代表操作过程，请回答下列问题。 （1）图中①过程通常用_____处理A湖羊，使其超数排卵。 （2）⑦过程的实质是_____，E后代的生殖方式属于_____。 （3）④为去核过程，此过程去除的“核”实际上是_____；经⑤过程对耳体细胞进行动物细胞培养时，通常在合成培养基中添加_____等天然成分。 （4）可用物理或化学方法，如_____（写出两种）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，最终得到的F后代性别为_____，判断的依据是_____。 29. 人乳头瘤病毒（HPV）与宫颈癌的发生有关，可利用抗HPV单克隆抗体检测是否发生HPV感染，从而有效预防宫颈癌，下图是制备抗HPV单克隆抗体的过程，请回答相关问题。 （1）制备抗HPV单克隆抗体时，首先给小鼠注射灭活的HPV，目的是让小鼠_____。 （2）利用HAT培养基能够筛选出杂交瘤细胞的原因是_____。 （3）筛选出的杂交瘤细胞还需要进一步进行_____，以便获得足量的产生高特异性抗体的杂交瘤细胞，之后将这些杂交瘤细胞注入到小鼠腹腔内增殖，将来分离出抗HPV单克隆抗体。但是利用小鼠生产的抗HPV单克隆抗体不能直接用于人体，需要改造后才可以使用，其原因是_____。 30. 在植物遗传转化过程中，除目的基因外，标记基因等序列也会随目的基因整合到作物基因组中，应予以剔除。科学家构建了可诱导剔除标记基因的载体，并将其导入拟南芥获得无标记基因的耐盐个体，相关过程如图所示。Cre-loxP系统由Cre酶和DNA上的特殊序列loxP组成，两个同向loxP间的DNA序列可被Cre酶识别并切除。 （1）将基因1插入质粒时，切割质粒需选用的限制酶是_____。 （2）基因2插入时使用了无缝克隆技术，其流程是先对质粒进行PCR获得线性化载体，再通过PCR在目的基因两端添加与线性化载体两端相同碱基序列，然后将线性化载体与目的基因混合，在酶的作用下，从线性化载体与目的基因3′端起始切除15个核苷酸，暴露出互补的单链区域，最终促使插入片段与载体能够借助这些互补区域实现连接。 ①PCR的原理是_____，每次循环的三个步骤中温度居中的步骤是_____。PCR产物常采用_____鉴定。 ②通过PCR对质粒进行线性化时，应选用的引物序列是_____（仅表示出5′→3′的10个碱基）。 A．5′TAGCGGACTG3′ B．5′GACTCTAGAT3′ C．5′ATCTAGAGTC3′ D．5′ATCGCCTGAC3′ ③与单酶切后用DNA连接酶连接相比，无缝克隆技术的优点有_____（写出一点即可）。 （3）将卡那霉素抗性基因和耐盐基因插入质粒获得重组质粒，其中基因2应是_____基因（填“卡那霉素抗性”或“耐盐”）。然后用含重组质粒的农杆菌去侵染拟南芥。之后应先后在分别添加_____的培养基中筛选并培养得到含有耐盐基因的受体细胞。最后还需要进行个体生物学水平鉴定，其具体操作是_____。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $