专题09 发酵工程和细胞工程（3大考点）（浙江专用）2026年高考生物二模分类汇编

**基本信息** 精选2026年浙江各地二模真题，聚焦发酵工程和细胞工程三大考点，以真实科研情境和实验流程为载体，梯度化考查核心知识与科学探究能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|27题|发酵工程（微生物培养/发酵条件）、植物细胞工程（组织培养/原生质体融合）、动物细胞工程（单克隆抗体/核移植）|以“单细胞蛋白开发”“类器官培养”等前沿情境命题，基础题（如培养基成分）与能力题（如筛选耐盐菌株流程分析）分层设计| |非选择题|4题|综合考查发酵工程流程、植物细胞培养技术、动物基因编辑与克隆|结合“青蒿素生产”“基因编辑克隆牛”等案例，融合实验设计与技术原理，匹配高考真题对科学思维与探究实践的考查趋势|

专题09发酵工程和细胞工程 3大考点概览 考点01 发酵工程 考点02 植物细胞工程 考点03 动物细胞工程 考点1 发酵工程 1．（2026·浙江宁波·二模）啤酒以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成。下列关于啤酒工业化生产的叙述，错误的是（　　） A．发酵温度和发酵时间都会影响啤酒风味 B．使用筛选后的高产优质啤酒酵母 C．酵母菌可将淀粉直接转化为酒精和CO2 D．啤酒经消毒后灌装以延长保质期 2．（2026·浙江宁波十校·二模）为解决金霉素（C22H23ClN2O8）过量使用导致的环境污染问题，科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且强降解金霉素的真菌菌株。下列叙述正确的是（　　） A．制备的培养基中金霉素为唯一碳源 B．用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面 C．培养基的pH应调整为中性偏碱以筛选出目标菌株 D．逐步提高培养基中金霉素的浓度有利于高耐受菌株变异 3．（2026·浙江稽阳联谊·二模）蓝莓不耐储存，而蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”、“口服化妆品”等。因此，果农常利用新鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋。下列叙述错误的是（    ） A．蓝莓果肉为微生物生长繁殖提供碳源、氮源 B．在氧气、糖源充足条件下可直接发酵为蓝莓醋 C．榨出的蓝莓汁需经过灭菌后才能密闭发酵 D．用蓝莓酒制醋需要将温度升高至30-35℃ 4．（2026·浙江嘉兴·二模）饮用水卫生标准规定总菌数小于100个/mL。下列检测方法合理的是（　　） A．将水样滴加到血细胞计数板上，在显微镜下计数 B．取一定量水样过滤，将滤膜贴在平板培养基上，培养后计数 C．用接种环蘸取一定量的水样，划线到平板培养基上，培养后计数 D．对水样梯度稀释，各取0.1mL稀释液涂布到平板培养基上，培养后计数 5．（2026·浙江宁波·二模）某真菌感染可引起苹果树腐烂病，影响苹果产量。研究者拟从土壤中筛选能抑制该真菌生长的芽孢杆菌进行生物防治。实验流程如图所示，下列叙述正确的是（　　） A．过程①将5g土壤加入45mL蒸馏水中得到土壤悬液 B．过程②每次吸取稀释液前均需更换移液器的枪头 C．过程③每个稀释倍数下的3个平板形成相互对照 D．④中A处接种芽孢杆菌，B处接种该致病真菌 6．（2026·浙江湖丽衢·二模）白酒生产时常用国标法检测样品中的沙门氏杆菌数目。当样品中积累了过多乙醇、乳酸及抗菌肽等抑菌物质时，会干扰检测。科研人员在此基础上优化检测方法，大大提升检出率，两种方法如下图所示。下列叙述正确的是（　　） 注：BPW主要成分为蛋白胨、磷酸盐缓冲盐、氯化钠、水等。 A．取样后直接用血细胞计数板在显微镜下计数活菌 B．可采用划线法或稀释涂布法将待测液接种至选择培养基 C．优化法中增加BPW用量的主要目的是提供更多营养物质 D．BPW培养液中的蛋白胨可为沙门氏杆菌提供碳源、氮源 7．（2026·浙江绍兴·二模）黄酒酿造的发酵工艺流程如下图。下列叙述正确的是（    ） A．酒曲和黄酒高活性干酵母均为单一菌种 B．蒸煮不仅能杀死杂菌，还促进淀粉糊化以便于菌种利用 C．主发酵时密闭以提高酵母数量，后发酵时通气以提高酒精产量 D．压榨、滤清的目的是去除代谢废物，实现产物的分离和提纯 、8．（2026·浙江新阵地联盟·二模）某研究团队从自然界分离一株能利用甲醇的毕赤酵母野生型X-33，用于开发“单细胞蛋白”。实验室分离该酵母时，最关键的培养基设计思路是（　　） A．配制甲醇作为唯一碳源的选择培养基 B．富含葡萄糖等传统碳源的完全培养基 C．含有大量氮源的蛋白胨酵母膏培养基 D．添加了青霉素等抗生素的选择培养基 1．（2026·浙江温州·二模）植物组织培养技术在农业、医药等领域应用广泛。下列叙述错误的是（　　）植物细胞工程 考点2 A．用叶片做外植体，可通过器官发生途径获得脱毒植株 B．人工种子的生产不受季节限制，可快速繁殖优良品种 C．利用植物体细胞杂交技术可实现种间遗传性状的组合 D．植物细胞培养技术可用于大规模生产有价值的天然产物 2．（2026·浙江宁波·二模）耐盐植物在盐碱地生态修复中具有重要应用价值。下图是培育耐盐植物的实验流程，下列叙述错误的是（　　） A．培养基中加入的物质X可为氯化钠 B．选择愈伤组织进行射线处理更容易诱发突变 C．利用消毒后的茎段培养的耐盐植株为脱毒苗 D．逐步提高物质X的浓度以筛选耐盐植株 3．研究人员以南瓜幼苗某部位作为外植体进行植物克隆，过程包括：外植体→愈伤组织→丛状苗→完整植株。下列叙述正确的是（    ） A．外植体用75%酒精消毒后可直接接种到培养瓶中 B．愈伤组织是转基因理想受体的最主要原因是其细胞壁薄 C．将愈伤组织转接至不含激素的培养基中可获得完整植株 D．将丛状苗转移至生长素比例较高的培养基中可促进生根 4．（2026·浙江台州·二模）【新情境-植物组培】科研人员将胡萝卜愈伤组织离散获得的小细胞团用海藻酸钠凝胶包裹，通过控制小细胞团在三维空间中的位置和密度，打印出具有精细网格的“胡萝卜形”活体结构。下列叙述正确的是（    ） A．凝胶中需添加MS培养基来调节小细胞团的生长发育 B．精细网格结构有利于提高小细胞团的光合作用效率 C．需置于黑暗环境中培养以诱导小细胞团完成脱分化过程 D．可利用添加抗生素的培养基进行后续培养以防止杂菌污染 5．（2026·浙江金丽衢十二校·二模）用植物组织培养技术快速繁殖蝴蝶兰时，所需培养基的配方如表所示。其中，B5和MS表示培养基；NAA和IBA为生长素类似物，6-BA为细胞分裂素类似物，GA3为赤霉素类似物。下列叙述错误的是（　　） 培养基 配方 作用 甲 B5+GA32.0mg/L+NAA0.1mg/L 产生愈伤组织 乙 B5+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L 分化出丛状芽 丙 MS+IBA1.2mg/L+NAA0.05mg/L 分化出根 A．B5和MS含Fe、Mn等微量元素 B．三种培养基的使用顺序是甲、乙和丙 C．蝴蝶兰的培养过程属于体细胞胚发生途径 D．根的分化是IBA、NAA和内源激素共同调节的结果 6．（2026·浙江稽阳联谊·二模）斛生物碱是铁皮石斛的次生代谢产物，具有抗炎镇痛、神经保护、镇静调压的作用，但其在铁皮石斛中含量偏低。下图是利用植物细胞培养技术大量生产石斛生物碱的流程。下列叙述错误的是（    ） A．此项技术依据的原理是细胞增殖 B．过程①需对铁皮石斛幼茎进行消毒，以防止杂菌污染 C．过程②是脱分化过程，细胞发生基因的选择性表达 D．为了获得石斛生物碱，过程④要先把细胞放在清水中进行破碎处理 7．（2026·浙江宁波十校·二模）下图展示了植物原生质体制备、分离和检测的过程。下列叙述错误的是（　　） A．①添加相应的酶液以去除细胞壁 B．②将材料放入无菌水中以彻底清洗 C．原生质体密度介于甘露醇和蔗糖溶液密度之间 D．台盼蓝检测后可选择未被染成蓝色的原生质体继续实验 8．（2026·浙江新阵地联盟·二模）植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B．过程②中可采用电刺激、离心、振荡和PEG等方法诱导原生质体融合 C．过程③融合的原生质体再生出新的细胞壁就形成了杂种细胞 D．过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素类和细胞分裂素类物质 9．（2026·浙江杭州·二模）大豆在长期的演化过程中，与根瘤菌之间形成了共生关系，根瘤菌在侵入大豆根部后会诱导根系产生根瘤供根瘤菌生长。为此，科学家开展了相关研究探索根瘤形成的机制。回答下列问题： (1)科学家分别提取根瘤细胞和正常根细胞的________并测序，将测序结果与________比较后，发现一个名为ENOD40的基因在根瘤细胞中表达，进一步研究发现其表达量显著高于正常细胞，推测该基因的表达促进根瘤形成。 (2)为验证上述推测，科学家将生长状态相同且长势良好的________大豆植株均分为2组，记为实验组和对照组。通过________法将重组质粒导入实验组植株的________器官，再采用________法确认ENOD40基因的转录水平下降后，用根瘤菌侵染实验组与对照组，此后实验过程中ENOD40基因的转录水平不再发生变化。一段时间后统计根瘤数，结果显示实验组的根瘤数显著________对照组，由此验证上述推测。 (3)豆科植物因其能与固氮菌共生的特性，所以可以在低氮土壤中种植，减少氮肥的使用。为了使得非豆科植物也能固氮，可尝试以下几种思路：①将豆科植物细胞与非豆科植物细胞通过________技术培育新品种；②克隆获得固氮基因，将其插入到T-DNA的________之间以确保固氮基因能正常表达，重组质粒导入非豆科植物愈伤组织，经筛选的愈伤组织通过________过程形成转基因植株。 10．（2026·浙江嘉兴·二模）青蒿素是一种能治疗疟疾的小分子有机物，源于短日植物黄花蒿的腺毛细胞。青蒿素可从黄花蒿提取，可从黄花蒿组织培养产物中提取，也可以由转基因酵母生产。回答下列问题： (1)植物细胞工程合成青蒿素分二步。第一步是诱导叶片脱分化产生_____，并建立悬浮细胞系进行培养和继代；第二步是改变培养液的_____，使细胞再分化并合成青蒿素。培养液中添加茉莉酸甲酯可提高产量，本质上是对基因的_____进行调控。 (2)利用酵母菌作为“细胞工厂”生产青蒿素，需将黄花蒿控制青蒿素合成的_____导入到酵母菌的基因组中。用中型发酵罐代替大型发酵罐进行试产，是从“实验室生产”过渡到“工业化生产”的重要环节，目的是寻找大规模发酵生产中的最佳控制方式，如怎样使用_____控制泡沫，同时可降低_____。 (3)目前，生产青蒿素成本最低的方式是从黄花蒿提取。已知青蒿素以扩散方式进入疟疾患者的红细胞，则提取青蒿素应选用_____（填“水溶剂”“脂溶剂”）作为溶剂。需在pH中性条件下提取的原因是_____会破坏青蒿素的结构。青蒿素含量在开花前达到最高，为_____营养生长期，应在临界时长到来时对黄花蒿进行_____处理。 考点3 动物细胞工程 1．（2026·浙江嘉兴·二模）HEK293细胞系是优秀的“病毒工厂”，其构建过程是将人5型腺病毒（Ad5）的E1A和E1B基因导入原代培养的人胚胎肾细胞中，获得亚三倍体（3n－5＝64）连续细胞系。下列叙述正确的是（　　） A．用纤维素酶处理胚胎肾组织块，制备细胞悬液进行原代培养 B．用农杆菌将E1A和E1B基因导入肾细胞，对原代细胞进行转化 C．根据连续细胞系和染色体组型特点，筛选特定细胞建立细胞系 D．若用HEK293细胞生产水痘减毒疫苗，可从培养液分离出水痘病毒和Ad5 2．（2026·浙江金丽衢十二校·二模）培养鸡成纤维细胞的过程中，涉及取材、消化、培养、鉴定等步骤。下列叙述错误的是（　　） A．取鸡胚后用酒精进行消毒，并用剪刀反复剪碎 B．胰酶液的浓度与消化的时间、消化温度呈负相关 C．可通过沉淀、过滤、离心等技术来纯化单细胞悬液 D．用胰酶液消化传代细胞时，可加入细胞培养液来终止消化 3．（2026·浙江杭州·二模）类器官指利用动物干细胞进行体外三维培养，形成的具有一定空间结构的组织类似物，能模拟特定组织、器官的功能。下列叙述错误的是（    ） A．培养类器官的过程需在无菌、无毒的环境中进行 B．类器官培养比传统细胞培养复杂且细胞种类更多 C．幼龄动物的细胞因分化程度低更难培养成类器官 D．可尝试将毛囊干细胞培养成毛囊类器官治疗秃顶 4．（2026·浙江宁波十校·二模）下图展示了猪体细胞核移植技术的操作过程。下列叙述错误的是（　　） A．①常采用显微操作处理 B．②需提供5%CO2调节培养液的pH C．③操作前需进行性别鉴定 D．激活重构胚有利于细胞分裂和发育 5．（2026·浙江稽阳联谊·二模）现代生物工程的操作常常涉及以下流程，下列叙述正确的是（    ） A．若图为试管动物的培育过程，从卵巢中获取的卵母细胞②可以直接与①融合形成③ B．若图为单克隆抗体的制备过程，形成③常用灭活的病毒直接处理①②两种细胞 C．若图为克隆羊多莉的培育过程，形成的③直接植入母体子宫进行培养可得到④ D．若图为细菌细胞杂交过程，①②两种细胞需要先用纤维素酶和果胶酶处理 6．（2026·浙江宁波·二模）利用动物细胞培养技术大规模生产针对某种抗原的单克隆抗体。下列关于单克隆抗体在杂交瘤细胞内合成及运输的叙述正确的是（　　） A．抗体的合成起始于附着在内质网上的核糖体 B．囊泡与高尔基体膜融合体现了生物膜具有流动性 C．抗体分泌过程中，细胞内ATP的含量会显著下降 D．抗体的运输依次经过内质网、高尔基体、线粒体 7．（2026·浙江绍兴·二模）肿瘤细胞的表面通常存在过量的受体EGFR，而CD3则是T细胞表面的标志性抗原。根据图示流程可制备双特异性单克隆抗体。细胞甲只有一条DNA合成途径（X途径），细胞乙和细胞丙有两条DNA合成途径（X、Y途径）。下列叙述正确的是（    ） A．双特异性抗体能够同时结合肿瘤细胞和T细胞 B．过程①和③从骨髓中获取的细胞需用胰蛋白酶分散成单细胞 C．过程②和④中使用能阻止X途径的选择培养基就能筛选出目标细胞 D．体外培养双杂交瘤细胞时需使用CO2培养箱以刺激细胞呼吸 8．（2026·浙江台州·二模）科研人员在肥大细胞表面结合了识别特定肿瘤的抗体，并在其内部装载抗肿瘤药物。改造后的肥大细胞能精准识别肿瘤细胞并有效释放药物，还能招募免疫细胞来共同对抗肿瘤细胞。下列叙述错误的是（    ） A．特异性识别肿瘤的抗体可通过单克隆抗体技术制备 B．被招募的细胞毒性T细胞活化后可特异性识别并裂解肿瘤细胞 C．若该肿瘤细胞上的抗原发生变异，可通过更换载药类型恢复精准治疗 D．该方案通过抗体介导的靶向识别，可降低抗肿瘤药物对正常细胞的损伤 9．（2026·浙江台州·二模）【新情境-胚胎工程】北方白犀牛现已野外灭绝，目前世界上仅存两头雌性北方白犀牛，且只有一头雌性具有正常排卵功能。科研团队利用多头北方白犀牛冻存的体细胞和精子，通过以下三条技术路径开展拯救计划。 下列叙述错误的是（    ） A．路径①中需要对现存雌性北方白犀牛进行同期发情处理 B．路径②在增加后代遗传多样性方面最具潜力 C．路径③依据的原理是动物细胞核具有全能性 D．及早建立基因资源库可更好的保护濒危物种 10．（2026·浙江绍兴·二模）电刺激（电脉冲）在现代生物技术的多个环节中发挥着重要作用。下列叙述错误的是（    ） A．电刺激植物愈伤组织可促进细胞融合获得多倍体细胞 B．制备单抗时电刺激可促进B细胞与骨髓瘤细胞融合 C．动物体细胞核移植时电刺激可促进重组细胞的形成并启动有丝分裂 D．基因工程中，短暂的电刺激可促进外源DNA分子进入受体细胞 11．（2026·浙江温州·二模）β-酪蛋白和乳铁蛋白是乳汁中的关键营养因子，但其在人乳与牛奶中的含量和结构有所不同，这在一定程度上限制了牛奶对人类母乳营养的完美替代。 回答下列问题： (1)牛β-酪蛋白与人β-酪蛋白的氨基酸序列相似度仅为50%，进入人体后可能引发免疫应答，诱发____________反应。牛奶中的乳铁蛋白浓度仅为人乳中的1/10。 (2)2025年9月，世界首批胚胎干细胞基因编辑克隆牛在河北培育成功，科学家利用基因工程和动物克隆技术培育了能生产“人乳化”牛奶的克隆奶牛，为批量生产能完美替代人乳的国产牛奶制品开辟新方向。其基本流程为： ①建立牛胚胎干细胞系。从母体子宫中冲洗获得____________，从中分离胚胎干细胞。建立胚胎干细胞系的关键是构建一套既能促进干细胞分裂，又能抑制干细胞____________的培养体系。胚胎干细胞可在体外无限增殖，为基因编辑提供遗传性状一致的庞大细胞库。 ②定点插入人源基因。首先构建含人β-酪蛋白基因和人乳铁蛋白基因的表达载体。将表达载体与牛胚胎干细胞充分混合后，给予短暂的电脉冲刺激，促进____________。利用基因编辑工具将两种人源基因定点插入干细胞的基因组，同时实现对牛β-酪蛋白基因的____________。 ③构建克隆胚胎。筛选基因编辑成功的牛胚胎干细胞作为核供体细胞，以____________作为核受体细胞，构建重组细胞。重组细胞可回复到类似受精卵时期的功能，根本原因是核DNA被重新编排，使得____________。 ④胚胎移植。将重组细胞培养至桑葚胚，植入____________的代孕母牛子宫角，直至小牛出生。 ⑤鉴定。基因检测：分别根据人β-酪蛋白基因、____________的核苷酸序列设计特异性引物，转基因小牛的PCR检测结果依次为阳性、阳性和阴性。牛奶成分检测：与非转基因奶牛相比，转基因奶牛分泌的牛奶具有____________等特征，说明转基因奶牛培育成功。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题09发酵工程和细胞工程 3大考点概览 考点01 发酵工程 考点02 植物细胞工程 考点03 动物细胞工程 考点1 发酵工程 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 答案 C A C B B D B A 植物细胞工程 考点2 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 答案 A C D D C D B C 9．【答案】(1) mRNA 数据库 (2) 未生长根瘤 农杆菌转化 根 PCR/核酸分子杂交 少于 (3) 植物体细胞杂交 启动子和终止子 再分化 10.【答案】(1) 愈伤组织 营养与激素比例 表达 (2) 基因 消泡剂 试验成本 (3) 脂溶剂 过酸或过碱 延长 延长日照 考点3 动物细胞工程 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 C B C C B B A C A A 11.【答案】(1)过敏 (2) 囊胚 分化 表达载体导入（牛胚胎干）细胞 敲除或破坏 （牛）去核（次级）卵母细胞 与全能性/胚胎发育/发育成完整个体有关的基因表达开关被启动/表达/处于可表达的状态 同期发情（且未配种） 人乳铁蛋白基因和牛β-酪蛋白基因 不含牛β-酪蛋白、含人β-酪蛋白、乳铁蛋白含量显著提高 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题09发酵工程和细胞工程 3大考点概览 考点01 发酵工程 考点02 植物细胞工程 考点03 动物细胞工程 考点1 发酵工程 1．（2026·浙江宁波·二模）啤酒以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成。下列关于啤酒工业化生产的叙述，错误的是（　　） A．发酵温度和发酵时间都会影响啤酒风味 B．使用筛选后的高产优质啤酒酵母 C．酵母菌可将淀粉直接转化为酒精和CO2 D．啤酒经消毒后灌装以延长保质期 【答案】C 【详解】A、发酵温度会影响酵母菌相关酶的活性，发酵时间会影响发酵产物的积累量，二者都会改变代谢产物的种类和占比，进而影响啤酒风味，A正确； B、使用筛选后的高产优质啤酒酵母，可提升发酵效率和啤酒的品质，是工业化生产的合理操作，B正确； C、酵母菌没有分解淀粉的酶，无法直接利用淀粉，需要先将大麦中的淀粉经糖化处理分解为葡萄糖等小分子糖后，酵母菌才能将其通过无氧呼吸转化为酒精和CO₂，C错误； D、啤酒消毒可以杀灭其中的杂菌，避免杂菌繁殖导致啤酒变质，能够延长保质期，D正确。 2．（2026·浙江宁波十校·二模）为解决金霉素（C22H23ClN2O8）过量使用导致的环境污染问题，科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且强降解金霉素的真菌菌株。下列叙述正确的是（　　） A．制备的培养基中金霉素为唯一碳源 B．用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面 C．培养基的pH应调整为中性偏碱以筛选出目标菌株 D．逐步提高培养基中金霉素的浓度有利于高耐受菌株变异 【答案】A 【详解】A、筛选可降解金霉素的菌株时，需制备以金霉素为唯一碳源的选择培养基，无法利用金霉素的微生物不能在该培养基上生长，可实现筛选目的，A正确； B、稀释涂布平板法使用涂布器将菌液均匀涂布在培养基表面，接种环是平板划线法的接种工具，B错误； C、真菌适宜在酸性环境下生长，筛选真菌菌株时应将培养基pH调整为酸性，中性偏碱是细菌适宜的生长pH，C错误； D、变异是不定向的，逐步提高金霉素浓度仅起选择作用，可筛选出已经产生高耐受变异的菌株，不能诱导菌株发生高耐受变异，D错误。 3．（2026·浙江稽阳联谊·二模）蓝莓不耐储存，而蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”、“口服化妆品”等。因此，果农常利用新鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋。下列叙述错误的是（    ） A．蓝莓果肉为微生物生长繁殖提供碳源、氮源 B．在氧气、糖源充足条件下可直接发酵为蓝莓醋 C．榨出的蓝莓汁需经过灭菌后才能密闭发酵 D．用蓝莓酒制醋需要将温度升高至30-35℃ 【答案】C 【详解】A、蓝莓果肉中的糖、有机酸、果胶等可提供碳源， 蛋白质、氨基酸等可为微生物生长繁殖提供氮源，A正确； B、醋酸菌在糖源和氧气充足时可直接将糖转化为醋酸，B正确； C、传统发酵依赖蓝莓皮上的野生酵母菌，无需灭菌，否则会杀死菌种，C错误； D、醋酸菌发酵的最适温度为30-35℃，D正确。 4．（2026·浙江嘉兴·二模）饮用水卫生标准规定总菌数小于100个/mL。下列检测方法合理的是（　　） A．将水样滴加到血细胞计数板上，在显微镜下计数 B．取一定量水样过滤，将滤膜贴在平板培养基上，培养后计数 C．用接种环蘸取一定量的水样，划线到平板培养基上，培养后计数 D．对水样梯度稀释，各取0.1mL稀释液涂布到平板培养基上，培养后计数 【答案】B 【详解】A、血细胞计数板计数法为直接计数法，无法区分死菌和活菌，统计结果包含死菌不符合检测要求，且饮用水中微生物浓度极低，直接计数误差极大，A错误； B、滤膜法适用于微生物含量低的水样检测，将定量水样过滤后，微生物截留到滤膜上，再将滤膜贴在培养基上培养，统计菌落数即可计算原水样的活菌数，符合饮用水检测需求，B正确； C、平板划线法的功能是分离纯化微生物，无法准确定量接种的微生物量，不能用于计数，C错误； D、稀释涂布平板法适用于微生物浓度较高的样品，饮用水总菌数小于100个/mL，本身浓度极低，梯度稀释后很难得到菌落数处于合理计数范围（30~300个）的平板，无法准确计数，D错误。 5．（2026·浙江宁波·二模）某真菌感染可引起苹果树腐烂病，影响苹果产量。研究者拟从土壤中筛选能抑制该真菌生长的芽孢杆菌进行生物防治。实验流程如图所示，下列叙述正确的是（　　） A．过程①将5g土壤加入45mL蒸馏水中得到土壤悬液 B．过程②每次吸取稀释液前均需更换移液器的枪头 C．过程③每个稀释倍数下的3个平板形成相互对照 D．④中A处接种芽孢杆菌，B处接种该致病真菌 【答案】B 【详解】A、制备土壤悬液时，为了防止外来杂菌污染，需要将土壤加入无菌水，A错误； B、过程②为梯度稀释，每次吸取不同稀释度的稀释液前更换移液器枪头，可避免交叉污染，保证稀释浓度的准确性，B正确； C、每个稀释倍数设置3个平板是为了设置平行重复实验，取平均值减小实验误差，不是相互对照，C错误； D、由实验目的可知，应在④中A处接种该致病真菌，B处接种芽孢杆菌，观察芽孢杆菌对致病真菌生长的抑制情况，D错误。 6．（2026·浙江湖丽衢·二模）白酒生产时常用国标法检测样品中的沙门氏杆菌数目。当样品中积累了过多乙醇、乳酸及抗菌肽等抑菌物质时，会干扰检测。科研人员在此基础上优化检测方法，大大提升检出率，两种方法如下图所示。下列叙述正确的是（　　） 注：BPW主要成分为蛋白胨、磷酸盐缓冲盐、氯化钠、水等。 A．取样后直接用血细胞计数板在显微镜下计数活菌 B．可采用划线法或稀释涂布法将待测液接种至选择培养基 C．优化法中增加BPW用量的主要目的是提供更多营养物质 D．BPW培养液中的蛋白胨可为沙门氏杆菌提供碳源、氮源 【答案】D 【详解】A、血细胞计数板在显微镜下计数不能区分死菌和活菌，无法直接统计活菌数目，A错误； B、平板划线法只能用于分离微生物，不能用于计数，要统计活菌数目只能用稀释涂布平板法，B错误； C、题干说明样品中原本过多的乙醇、乳酸、抗菌肽等抑菌物质会干扰检测，增加BPW用量的主要目的是稀释样品中的抑菌物质，降低其浓度，减小抑菌作用，不是为了提供更多营养，C错误； D、蛋白胨含有多种有机物，可为微生物（沙门氏杆菌）提供碳源、氮源，D正确。 7．（2026·浙江绍兴·二模）黄酒酿造的发酵工艺流程如下图。下列叙述正确的是（    ） A．酒曲和黄酒高活性干酵母均为单一菌种 B．蒸煮不仅能杀死杂菌，还促进淀粉糊化以便于菌种利用 C．主发酵时密闭以提高酵母数量，后发酵时通气以提高酒精产量 D．压榨、滤清的目的是去除代谢废物，实现产物的分离和提纯 【答案】B 【详解】A、酒曲是多种微生物的混合体系，包含酵母菌、霉菌等多种菌种；黄酒高活性干酵母一般为酿酒酵母，属于单一菌种，A错误； B、蒸煮糯米的过程，一方面可以高温杀死糯米中的杂菌，避免杂菌污染发酵过程；另一方面可以使糯米中的淀粉发生糊化，更易被菌种产生的淀粉酶分解为葡萄糖，供酵母菌利用，B正确； C、酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下进行无氧呼吸，产生酒精。主发酵阶段需要先通气让酵母菌大量繁殖，再密闭进行无氧发酵产酒；后发酵阶段也需要密闭无氧环境，持续产生酒精，提高酒精产量，C错误； D、压榨、滤清的目的是去除发酵液中的酒糟、菌体等固体杂质，实现酒液与固体残渣的分离，D错误。 8．（2026·浙江新阵地联盟·二模）某研究团队从自然界分离一株能利用甲醇的毕赤酵母野生型X-33，用于开发“单细胞蛋白”。实验室分离该酵母时，最关键的培养基设计思路是（　　） A．配制甲醇作为唯一碳源的选择培养基 B．富含葡萄糖等传统碳源的完全培养基 C．含有大量氮源的蛋白胨酵母膏培养基 D．添加了青霉素等抗生素的选择培养基 【答案】A 【详解】A、配制甲醇作为唯一碳源的选择培养基，只有能利用甲醇的微生物才能在这种培养基上利用甲醇作为碳源生长繁殖，不能利用甲醇的微生物因缺乏碳源无法生长，从而可以筛选出能利用甲醇的毕赤酵母野生型X - 33，A符合题意； B、富含葡萄糖等传统碳源的完全培养基，不能利用甲醇但能利用葡萄糖等传统碳源的微生物也能生长，无法起到筛选能利用甲醇的毕赤酵母的作用，B不符合题意； C、含有大量氮源的蛋白胨酵母膏培养基，重点在于氮源，不能针对能否利用甲醇进行筛选，不能达到分离目的，C不符合题意； D、添加了青霉素等抗生素的选择培养基，是用于筛选对青霉素等抗生素有抗性的微生物，与能否利用甲醇无关，不能用于分离能利用甲醇的毕赤酵母，D不符合题意。 故选A。 植物细胞工程 考点2 1．（2026·浙江温州·二模）植物组织培养技术在农业、医药等领域应用广泛。下列叙述错误的是（　　） A．用叶片做外植体，可通过器官发生途径获得脱毒植株 B．人工种子的生产不受季节限制，可快速繁殖优良品种 C．利用植物体细胞杂交技术可实现种间遗传性状的组合 D．植物细胞培养技术可用于大规模生产有价值的天然产物 【答案】A 【详解】A、获得脱毒苗需要选择茎尖等病毒浓度很低甚至不带病毒的结构作为外植体，一般不选叶片做外植体，A错误； B、人工种子是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽等为材料，经人工薄膜包装得到，生产过程在室内完成不受季节限制，且属于无性繁殖，可保留亲本优良性状、实现快速繁殖，B正确； C、植物体细胞杂交技术可打破生殖隔离、克服远缘杂交不亲和的障碍，将不同物种的遗传物质整合到同一杂种细胞中，最终培育出同时具备两个物种遗传性状的杂种植株，实现种间遗传性状的组合，C正确； D、植物细胞培养技术可通过工厂化大规模培养特定植物细胞，从细胞代谢产物中提取紫杉醇、药用生物碱等有价值的天然产物，生产效率高，D正确。 2．（2026·浙江宁波·二模）耐盐植物在盐碱地生态修复中具有重要应用价值。下图是培育耐盐植物的实验流程，下列叙述错误的是（　　） A．培养基中加入的物质X可为氯化钠 B．选择愈伤组织进行射线处理更容易诱发突变 C．利用消毒后的茎段培养的耐盐植株为脱毒苗 D．逐步提高物质X的浓度以筛选耐盐植株 【答案】C 【详解】A、本实验目标是筛选耐盐植株，培养基中加入物质X用于筛选耐盐突变体，X可以是氯化钠，A正确； B、愈伤组织细胞分裂旺盛，DNA复制时更容易发生基因突变，因此对愈伤组织进行诱变处理更容易诱发突变，B正确； C、脱毒苗是利用植物茎尖分生区（该部位几乎不含病毒）培养得到的植株；普通消毒的茎段若本身携带病毒，培养得到的植株仍会带毒，不属于脱毒苗，C错误； D、逐步提高物质X（盐）的浓度，能淘汰耐盐性弱的细胞/植株，最终筛选出耐盐性强的植株，D正确。 3．研究人员以南瓜幼苗某部位作为外植体进行植物克隆，过程包括：外植体→愈伤组织→丛状苗→完整植株。下列叙述正确的是（    ） A．外植体用75%酒精消毒后可直接接种到培养瓶中 B．愈伤组织是转基因理想受体的最主要原因是其细胞壁薄 C．将愈伤组织转接至不含激素的培养基中可获得完整植株 D．将丛状苗转移至生长素比例较高的培养基中可促进生根 【答案】D 【详解】A、外植体经75%酒精消毒后，还需经过无菌水冲洗、次氯酸钠消毒、无菌水多次冲洗的步骤才可接种，直接接种会导致杂菌污染，A错误； B、愈伤组织是转基因理想受体的最主要原因是其全能性较高，容易诱导再分化形成完整植株，细胞壁薄不是核心原因，B错误； C、愈伤组织再分化形成根、芽需要培养基中含有适宜比例的生长素和细胞分裂素，不含激素的培养基无法诱导分化，不能获得完整植株，C错误； D、植物组织培养中，生长素与细胞分裂素的比值较高时有利于根的分化，因此将丛状苗转移至生长素比例较高的培养基中可促进生根，D正确。 4．（2026·浙江台州·二模）【新情境-植物组培】科研人员将胡萝卜愈伤组织离散获得的小细胞团用海藻酸钠凝胶包裹，通过控制小细胞团在三维空间中的位置和密度，打印出具有精细网格的“胡萝卜形”活体结构。下列叙述正确的是（    ） A．凝胶中需添加MS培养基来调节小细胞团的生长发育 B．精细网格结构有利于提高小细胞团的光合作用效率 C．需置于黑暗环境中培养以诱导小细胞团完成脱分化过程 D．可利用添加抗生素的培养基进行后续培养以防止杂菌污染 【答案】D 【详解】A、MS 培养基是植物组织培养的基础培养基，为细胞提供营养，但MS 培养基本身不直接 “调节” 细胞的生长发育，调节细胞脱分化、再分化的是植物激素（生长素、细胞分裂素等）A错误； B、用于打印的小细胞团来自愈伤组织，愈伤组织是未分化的细胞团，不含叶绿体，不能进行光合作用，精细网格与提高小细胞团的光合作用效率无关，其作用是利于气体交换、营养物质和代谢废物的运输，B错误； C、小细胞团本身就是脱分化形成的愈伤组织离散得到的，已经完成了脱分化过程，无需再诱导脱分化，若要诱导其再分化，通常还需要给予适宜光照，C错误； D、抗生素可抑制细菌等杂菌的生长繁殖，在培养基中添加抗生素能有效减少后续培养过程中的杂菌污染，D正确。 5．（2026·浙江金丽衢十二校·二模）用植物组织培养技术快速繁殖蝴蝶兰时，所需培养基的配方如表所示。其中，B5和MS表示培养基；NAA和IBA为生长素类似物，6-BA为细胞分裂素类似物，GA3为赤霉素类似物。下列叙述错误的是（　　） 培养基 配方 作用 甲 B5+GA32.0mg/L+NAA0.1mg/L 产生愈伤组织 乙 B5+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L 分化出丛状芽 丙 MS+IBA1.2mg/L+NAA0.05mg/L 分化出根 A．B5和MS含Fe、Mn等微量元素 B．三种培养基的使用顺序是甲、乙和丙 C．蝴蝶兰的培养过程属于体细胞胚发生途径 D．根的分化是IBA、NAA和内源激素共同调节的结果 【答案】C 【详解】A、B₅和MS是植物组织培养常用的培养基，都含有Fe、Mn、Zn、Cu等微量元素，用于满足植物细胞生长的需求，A正确； B、植物组织培养的流程是脱分化（甲培养基，产生愈伤组织）→再分化形成芽（乙培养基，分化出丛状芽）→再分化形成根（丙培养基，分化出根），所以使用顺序是甲→乙→丙，B正确； C、体细胞胚发生途径是指体细胞直接发育为胚状体再形成完整植株的过程，本题培养过程是先形成愈伤组织，再依次分化出芽、根，属于器官发生途径，不属于体细胞胚发生途径，C错误； D、根的分化既受到培养基中外源激素（IBA、NAA）的调节，也受到植物自身内源激素的共同作用，D正确。 6．（2026·浙江稽阳联谊·二模）斛生物碱是铁皮石斛的次生代谢产物，具有抗炎镇痛、神经保护、镇静调压的作用，但其在铁皮石斛中含量偏低。下图是利用植物细胞培养技术大量生产石斛生物碱的流程。下列叙述错误的是（    ） A．此项技术依据的原理是细胞增殖 B．过程①需对铁皮石斛幼茎进行消毒，以防止杂菌污染 C．过程②是脱分化过程，细胞发生基因的选择性表达 D．为了获得石斛生物碱，过程④要先把细胞放在清水中进行破碎处理 【答案】D 【详解】A、这项技术是植物细胞培养，原理是细胞增殖，通过细胞分裂增加细胞数量，从而获得更多代谢产物，A正确； B、过程①是获取外植体，需要对铁皮石斛幼茎进行消毒，避免杂菌污染培养物，B正确； C、过程②是脱分化，已经分化的细胞失去特有的结构和功能，这个过程存在基因的选择性表达，C正确； D、石斛生物碱是铁皮石斛细胞的次生代谢产物，但细胞有细胞壁，故只能通过研磨破碎，而不能用吸水胀破法，D错误。 7．（2026·浙江宁波十校·二模）下图展示了植物原生质体制备、分离和检测的过程。下列叙述错误的是（　　） A．①添加相应的酶液以去除细胞壁 B．②将材料放入无菌水中以彻底清洗 C．原生质体密度介于甘露醇和蔗糖溶液密度之间 D．台盼蓝检测后可选择未被染成蓝色的原生质体继续实验 【答案】B 【详解】A、①步骤是去除植物细胞壁，需要添加纤维素酶和果胶酶，A正确； B、原生质体没有细胞壁的保护，若放入无菌水中会因渗透作用吸水涨破，所以不能用无菌水清洗，应该用等渗溶液清洗，B错误； C、结合图示可知原生质体处于甘露醇和蔗糖溶液之间，因而可推测原生质体的密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间，C正确； D、台盼蓝染色时，活的原生质体不会被染成蓝色（因为细胞膜具有选择透过性），死细胞会被染成蓝色，所以可选择未被染成蓝色的原生质体继续实验，D正确。 8．（2026·浙江新阵地联盟·二模）植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B．过程②中可采用电刺激、离心、振荡和PEG等方法诱导原生质体融合 C．过程③融合的原生质体再生出新的细胞壁就形成了杂种细胞 D．过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素类和细胞分裂素类物质 【答案】C 【详解】A、据图可知，过程①表示去壁获取原生质体的过程，酶解是为了去除植物细胞的细胞壁，该过程酶处理的时间不同，说明两种亲本的细胞壁结构可能有差异，A正确； B、据图可知，过程②表示人工诱导原生质体融合，常用电融合法、离心法等物理方法和PEG等化学方法诱导原生质体融合，B正确； C、据图可知，过程③融合的原生质体再生出新的细胞壁说明原生质体融合成功，但未必都是杂种细胞，还需要进行筛选，C错误； D、据图可知，过程④表示脱分化形成愈伤组织，过程⑤表示再分化以及个体发育形成植株丙的过程。过程④脱分化和⑤再分化的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素，但在两个过程中比例不同，D正确。 故选C。 9．（2026·浙江杭州·二模）大豆在长期的演化过程中，与根瘤菌之间形成了共生关系，根瘤菌在侵入大豆根部后会诱导根系产生根瘤供根瘤菌生长。为此，科学家开展了相关研究探索根瘤形成的机制。回答下列问题： (1)科学家分别提取根瘤细胞和正常根细胞的________并测序，将测序结果与________比较后，发现一个名为ENOD40的基因在根瘤细胞中表达，进一步研究发现其表达量显著高于正常细胞，推测该基因的表达促进根瘤形成。 (2)为验证上述推测，科学家将生长状态相同且长势良好的________大豆植株均分为2组，记为实验组和对照组。通过________法将重组质粒导入实验组植株的________器官，再采用________法确认ENOD40基因的转录水平下降后，用根瘤菌侵染实验组与对照组，此后实验过程中ENOD40基因的转录水平不再发生变化。一段时间后统计根瘤数，结果显示实验组的根瘤数显著________对照组，由此验证上述推测。 (3)豆科植物因其能与固氮菌共生的特性，所以可以在低氮土壤中种植，减少氮肥的使用。为了使得非豆科植物也能固氮，可尝试以下几种思路：①将豆科植物细胞与非豆科植物细胞通过________技术培育新品种；②克隆获得固氮基因，将其插入到T-DNA的________之间以确保固氮基因能正常表达，重组质粒导入非豆科植物愈伤组织，经筛选的愈伤组织通过________过程形成转基因植株。 【答案】(1) mRNA 数据库 (2) 未生长根瘤 农杆菌转化 根 PCR/核酸分子杂交 少于 (3) 植物体细胞杂交 启动子和终止子 再分化 【详解】（1）要研究基因的表达情况，需提取根瘤细胞和正常根细胞的mRNA并测序，因为基因表达是转录为RNA，再翻译为蛋白质。将测序结果与基因组数据库比较，从而发现差异基因。 （2）为验证推测，实验材料应选用未生长根瘤的大豆植株，保证实验材料的一致性。将重组质粒导入植物细胞常用农杆菌转化法，大豆植株的根是根瘤菌侵入的器官，所以导入到根器官。确认基因转录水平下降采用PCR或核酸分子杂交法。若推测正确，抑制ENOD40基因表达后，根瘤形成受影响，实验组根瘤数会显著少于对照组。 （3）将豆科植物细胞与非豆科植物细胞培育新品种可通过植物体细胞杂交技术，该技术能克服远缘杂交不亲和障碍。 构建基因表达载体时，需将固氮基因插入到T-DNA的启动子和终止子之间，以确保其正常表达。重组质粒导入非豆科植物愈伤组织后，经筛选的愈伤组织通过再分化过程形成转基因植株，再分化是愈伤组织形成胚状体或芽等器官进而发育成植株的过程。 10．（2026·浙江嘉兴·二模）青蒿素是一种能治疗疟疾的小分子有机物，源于短日植物黄花蒿的腺毛细胞。青蒿素可从黄花蒿提取，可从黄花蒿组织培养产物中提取，也可以由转基因酵母生产。回答下列问题： (1)植物细胞工程合成青蒿素分二步。第一步是诱导叶片脱分化产生_____，并建立悬浮细胞系进行培养和继代；第二步是改变培养液的_____，使细胞再分化并合成青蒿素。培养液中添加茉莉酸甲酯可提高产量，本质上是对基因的_____进行调控。 (2)利用酵母菌作为“细胞工厂”生产青蒿素，需将黄花蒿控制青蒿素合成的_____导入到酵母菌的基因组中。用中型发酵罐代替大型发酵罐进行试产，是从“实验室生产”过渡到“工业化生产”的重要环节，目的是寻找大规模发酵生产中的最佳控制方式，如怎样使用_____控制泡沫，同时可降低_____。 (3)目前，生产青蒿素成本最低的方式是从黄花蒿提取。已知青蒿素以扩散方式进入疟疾患者的红细胞，则提取青蒿素应选用_____（填“水溶剂”“脂溶剂”）作为溶剂。需在pH中性条件下提取的原因是_____会破坏青蒿素的结构。青蒿素含量在开花前达到最高，为_____营养生长期，应在临界时长到来时对黄花蒿进行_____处理。 【答案】(1) 愈伤组织 营养与激素比例 表达 (2) 基因 消泡剂 试验成本 (3) 脂溶剂 过酸或过碱 延长 延长日照 【详解】（1）植物组织培养的第一步是脱分化，诱导叶片脱分化形成愈伤组织（一团薄壁的未分化细胞），为后续培养做准备。脱分化形成的悬浮细胞，需要改变培养基的营养成分和植物激素比例（如生长素 / 细胞分裂素的比值），诱导细胞再分化，合成青蒿素。茉莉酸甲酯提高产量，本质是通过信号通路调控基因的表达（转录和翻译），从而合成更多青蒿素。 （2）将黄花蒿控制青蒿素合成的目的基因（基因）导入酵母菌基因组，实现异源表达，让酵母菌生产青蒿素。 中型发酵罐进行工业化试产时，微生物代谢会产生大量泡沫，需使用消泡剂消除泡沫，保证发酵正常进行。 用中型罐替代大型罐试产，主要目的是控制试验规模，降低试验成本，寻找最佳参数。 （3）题干指出青蒿素以扩散方式进入红细胞（脂溶性物质易通过细胞膜），说明其脂溶性强，因此提取应选用脂溶剂。青蒿素是有机物，化学性质不稳定，过酸或过碱的环境会破坏其分子结构，因此需在中性条件下提取。青蒿素含量在开花前达到最高，开花前属于营养生长期，需延长营养生长期，保证青蒿素积累。 临界时长指植物开花的光周期临界值。为了延长营养生长期、推迟开花，应给予延长日照（长日照处理），抑制植物开花转生殖生长。 考点3 动物细胞工程 1．（2026·浙江嘉兴·二模）HEK293细胞系是优秀的“病毒工厂”，其构建过程是将人5型腺病毒（Ad5）的E1A和E1B基因导入原代培养的人胚胎肾细胞中，获得亚三倍体（3n－5＝64）连续细胞系。下列叙述正确的是（　　） A．用纤维素酶处理胚胎肾组织块，制备细胞悬液进行原代培养 B．用农杆菌将E1A和E1B基因导入肾细胞，对原代细胞进行转化 C．根据连续细胞系和染色体组型特点，筛选特定细胞建立细胞系 D．若用HEK293细胞生产水痘减毒疫苗，可从培养液分离出水痘病毒和Ad5 【答案】C 【详解】A、动物细胞没有细胞壁，处理动物组织块制备细胞悬液需使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，纤维素酶用于分解植物细胞壁，无法处理动物组织，A错误； B、农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞的常用方法，不适用于动物细胞，将目的基因导入动物细胞常用显微注射法等，B错误； C、构建HEK293细胞系时，需要筛选成功导入E1A、E1B基因，且符合亚三倍体染色体组型的可连续传代的特定细胞，进而建立稳定细胞系，C正确； D、HEK293细胞仅整合了Ad5的E1A和E1B基因，没有Ad5的完整基因组，无法合成完整的Ad5，因此培养液中只能分离出水痘病毒，不会分离出Ad5，D错误。 2．（2026·浙江金丽衢十二校·二模）培养鸡成纤维细胞的过程中，涉及取材、消化、培养、鉴定等步骤。下列叙述错误的是（　　） A．取鸡胚后用酒精进行消毒，并用剪刀反复剪碎 B．胰酶液的浓度与消化的时间、消化温度呈负相关 C．可通过沉淀、过滤、离心等技术来纯化单细胞悬液 D．用胰酶液消化传代细胞时，可加入细胞培养液来终止消化 【答案】B 【详解】A、动物细胞培养取材时，对鸡胚用酒精消毒可避免杂菌污染，剪碎组织便于后续胰酶消化分散细胞，操作正确，A正确； B、胰酶活性受温度影响，在最适温度前随温度升高活性升高，超过最适温度后随温度升高活性下降，因此胰酶浓度与消化温度不呈负相关，B错误； C、消化后的粗制细胞悬液中含有未充分消化的组织块等杂质，可通过沉淀、过滤去除大块杂质，通过离心分离纯化细胞，获得单细胞悬液，C正确； D、细胞培养液中通常含有血清，血清中存在胰蛋白酶抑制剂，可中和胰酶活性，终止消化，避免细胞被过度消化损伤，D正确。 3．（2026·浙江杭州·二模）类器官指利用动物干细胞进行体外三维培养，形成的具有一定空间结构的组织类似物，能模拟特定组织、器官的功能。下列叙述错误的是（    ） A．培养类器官的过程需在无菌、无毒的环境中进行 B．类器官培养比传统细胞培养复杂且细胞种类更多 C．幼龄动物的细胞因分化程度低更难培养成类器官 D．可尝试将毛囊干细胞培养成毛囊类器官治疗秃顶 【答案】C 【详解】A、动物细胞体外培养的首要条件是无菌、无毒的环境，避免微生物污染或有毒物质损伤细胞，A正确； B、传统细胞培养多为二维平面的单一类型细胞培养，类器官是三维培养的、具有特定空间结构、能模拟器官功能的组织类似物，包含的细胞种类更多，培养过程更复杂，B正确； C、幼龄动物的细胞分化程度低，细胞分裂、分化的能力更强，反而更容易培养成类器官，C错误； D、毛囊干细胞具有分化为毛囊相关细胞的潜能，可通过体外培养获得毛囊类器官，用于秃顶的治疗，D正确。 4．（2026·浙江宁波十校·二模）下图展示了猪体细胞核移植技术的操作过程。下列叙述错误的是（　　） A．①常采用显微操作处理 B．②需提供5%CO2调节培养液的pH C．③操作前需进行性别鉴定 D．激活重构胚有利于细胞分裂和发育 【答案】C 【详解】A、①是去核，常采用显微操作法，A正确； B、②需提供95%和5%CO2的混合气体环境，CO2的作用是调节培养液的pH，B正确； C、③胚胎移植前不需要进行性别鉴定，性别由供体体细胞核决定，C错误； D、激活重构胚有利于细胞分裂和发育，D正确。 故选C。 5．（2026·浙江稽阳联谊·二模）现代生物工程的操作常常涉及以下流程，下列叙述正确的是（    ） A．若图为试管动物的培育过程，从卵巢中获取的卵母细胞②可以直接与①融合形成③ B．若图为单克隆抗体的制备过程，形成③常用灭活的病毒直接处理①②两种细胞 C．若图为克隆羊多莉的培育过程，形成的③直接植入母体子宫进行培养可得到④ D．若图为细菌细胞杂交过程，①②两种细胞需要先用纤维素酶和果胶酶处理 【答案】B 【详解】A、试管动物的培育过程，从卵巢中获取的卵母细胞②需成熟处理才能与①融合形成③，A 错误； B、若图为单克隆抗体的制备过程，形成③杂交瘤细胞常用灭活的病毒处理①（B淋巴细胞）和②（骨髓瘤细胞）两种细胞，促使两种细胞融合，B正确； C、克隆羊多莉培育过程，形成的③是在体外培养至早期胚胎才植入母体子宫进行培养可得到④，C错误； D、细菌的细胞壁成分不是纤维素和果胶，故用纤维素酶和果胶酶处理无法去除其细胞壁，D错误。 6．（2026·浙江宁波·二模）利用动物细胞培养技术大规模生产针对某种抗原的单克隆抗体。下列关于单克隆抗体在杂交瘤细胞内合成及运输的叙述正确的是（　　） A．抗体的合成起始于附着在内质网上的核糖体 B．囊泡与高尔基体膜融合体现了生物膜具有流动性 C．抗体分泌过程中，细胞内ATP的含量会显著下降 D．抗体的运输依次经过内质网、高尔基体、线粒体 【答案】B 【详解】A、抗体属于分泌蛋白，其合成起始于游离的核糖体，合成一段信号序列后核糖体才附着到内质网上完成后续合成过程，A错误； B、囊泡膜与高尔基体膜都属于生物膜，二者的融合过程依赖生物膜的流动性这一结构特点，B正确； C、抗体分泌过程需要消耗ATP，但细胞内ATP与ADP的转化速率极快，可及时补充消耗的ATP，因此细胞内ATP含量会维持动态平衡，不会显著下降，C错误； D、抗体的运输路径为：核糖体合成后进入内质网初步加工，再经囊泡运输到高尔基体进一步修饰加工，最终通过囊泡运输到细胞膜分泌到细胞外，线粒体仅为该过程提供能量，并不参与运输路径，D错误。 7．（2026·浙江绍兴·二模）肿瘤细胞的表面通常存在过量的受体EGFR，而CD3则是T细胞表面的标志性抗原。根据图示流程可制备双特异性单克隆抗体。细胞甲只有一条DNA合成途径（X途径），细胞乙和细胞丙有两条DNA合成途径（X、Y途径）。下列叙述正确的是（    ） A．双特异性抗体能够同时结合肿瘤细胞和T细胞 B．过程①和③从骨髓中获取的细胞需用胰蛋白酶分散成单细胞 C．过程②和④中使用能阻止X途径的选择培养基就能筛选出目标细胞 D．体外培养双杂交瘤细胞时需使用CO2培养箱以刺激细胞呼吸 【答案】A 【详解】A、由题意和题图可知，该双特异性抗体可分别结合肿瘤细胞表面的EGFR、T细胞表面的CD3，因此能同时结合肿瘤细胞和T细胞，A正确； B、过程①③是从小鼠脾脏中获取已免疫的B淋巴细胞，不是骨髓，B错误； C、阻止X途径的选择培养基仅能筛选出融合的杂交细胞，还需要通过克隆化培养和抗体检测才能筛选出能产生所需特异性抗体的目标细胞，C错误； D、体外培养时，CO2培养箱中CO2的作用是维持培养液的pH，不是刺激细胞呼吸，D错误。 8．（2026·浙江台州·二模）科研人员在肥大细胞表面结合了识别特定肿瘤的抗体，并在其内部装载抗肿瘤药物。改造后的肥大细胞能精准识别肿瘤细胞并有效释放药物，还能招募免疫细胞来共同对抗肿瘤细胞。下列叙述错误的是（    ） A．特异性识别肿瘤的抗体可通过单克隆抗体技术制备 B．被招募的细胞毒性T细胞活化后可特异性识别并裂解肿瘤细胞 C．若该肿瘤细胞上的抗原发生变异，可通过更换载药类型恢复精准治疗 D．该方案通过抗体介导的靶向识别，可降低抗肿瘤药物对正常细胞的损伤 【答案】C 【详解】A、单克隆抗体技术可制备出特异性强、灵敏度高的抗体，能够特异性识别肿瘤抗原，因此识别特定肿瘤的抗体可通过该技术制备，A正确； B、被招募的细胞毒性T细胞活化后可特异性识别作为靶细胞的肿瘤细胞，通过细胞膜接触使肿瘤细胞裂解死亡，B正确； C、该方案的精准识别依靠抗体和肿瘤抗原的特异性结合，若肿瘤细胞抗原发生变异，原抗体将无法识别变异后的肿瘤细胞，此时需要更换对应识别功能的抗体，仅更换载药类型无法恢复精准识别，也就无法恢复精准治疗，C错误； D、该方案通过抗体特异性识别肿瘤抗原实现靶向给药，可减少抗肿瘤药物与正常细胞的接触，降低药物对正常细胞的损伤，D正确。 9．（2026·浙江台州·二模）【新情境-胚胎工程】北方白犀牛现已野外灭绝，目前世界上仅存两头雌性北方白犀牛，且只有一头雌性具有正常排卵功能。科研团队利用多头北方白犀牛冻存的体细胞和精子，通过以下三条技术路径开展拯救计划。 下列叙述错误的是（    ） A．路径①中需要对现存雌性北方白犀牛进行同期发情处理 B．路径②在增加后代遗传多样性方面最具潜力 C．路径③依据的原理是动物细胞核具有全能性 D．及早建立基因资源库可更好的保护濒危物种 【答案】A 【详解】A、路径①需要对现存雌性南方白犀牛进行同期发情，A错误； B、路径②进行了重编程，在增加后代遗传多样性方面最具潜力，B正确； C、路径③为核移植，依据的原理是动物细胞核具有全能性，C正确； D、及早建立基因资源库，可更好的保护濒危物种，D正确。 10．（2026·浙江绍兴·二模）电刺激（电脉冲）在现代生物技术的多个环节中发挥着重要作用。下列叙述错误的是（    ） A．电刺激植物愈伤组织可促进细胞融合获得多倍体细胞 B．制备单抗时电刺激可促进B细胞与骨髓瘤细胞融合 C．动物体细胞核移植时电刺激可促进重组细胞的形成并启动有丝分裂 D．基因工程中，短暂的电刺激可促进外源DNA分子进入受体细胞 【答案】A 【详解】A、植物细胞的细胞壁会阻碍细胞融合，植物细胞融合前需先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体，才能通过电刺激促进原生质体融合，愈伤组织细胞含有完整细胞壁，直接电刺激无法促进细胞融合，A错误； B、诱导动物细胞融合的方法包含电刺激等物理法，制备单克隆抗体时，可通过电刺激促进B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，B正确； C、动物体细胞核移植过程中，电刺激一方面可以促进供体细胞与去核卵母细胞融合形成重组细胞，另一方面可以激活重组细胞，启动其进行有丝分裂完成发育进程，C正确； D、基因工程中，短暂电刺激的电穿孔法可增大受体细胞膜的通透性，帮助外源DNA分子进入受体细胞，是导入目的基因的常用方法之一，D正确。 11．（2026·浙江温州·二模）β-酪蛋白和乳铁蛋白是乳汁中的关键营养因子，但其在人乳与牛奶中的含量和结构有所不同，这在一定程度上限制了牛奶对人类母乳营养的完美替代。 回答下列问题： (1)牛β-酪蛋白与人β-酪蛋白的氨基酸序列相似度仅为50%，进入人体后可能引发免疫应答，诱发____________反应。牛奶中的乳铁蛋白浓度仅为人乳中的1/10。 (2)2025年9月，世界首批胚胎干细胞基因编辑克隆牛在河北培育成功，科学家利用基因工程和动物克隆技术培育了能生产“人乳化”牛奶的克隆奶牛，为批量生产能完美替代人乳的国产牛奶制品开辟新方向。其基本流程为： ①建立牛胚胎干细胞系。从母体子宫中冲洗获得____________，从中分离胚胎干细胞。建立胚胎干细胞系的关键是构建一套既能促进干细胞分裂，又能抑制干细胞____________的培养体系。胚胎干细胞可在体外无限增殖，为基因编辑提供遗传性状一致的庞大细胞库。 ②定点插入人源基因。首先构建含人β-酪蛋白基因和人乳铁蛋白基因的表达载体。将表达载体与牛胚胎干细胞充分混合后，给予短暂的电脉冲刺激，促进____________。利用基因编辑工具将两种人源基因定点插入干细胞的基因组，同时实现对牛β-酪蛋白基因的____________。 ③构建克隆胚胎。筛选基因编辑成功的牛胚胎干细胞作为核供体细胞，以____________作为核受体细胞，构建重组细胞。重组细胞可回复到类似受精卵时期的功能，根本原因是核DNA被重新编排，使得____________。 ④胚胎移植。将重组细胞培养至桑葚胚，植入____________的代孕母牛子宫角，直至小牛出生。 ⑤鉴定。基因检测：分别根据人β-酪蛋白基因、____________的核苷酸序列设计特异性引物，转基因小牛的PCR检测结果依次为阳性、阳性和阴性。牛奶成分检测：与非转基因奶牛相比，转基因奶牛分泌的牛奶具有____________等特征，说明转基因奶牛培育成功。 【答案】(1)过敏 (2) 囊胚 分化 表达载体导入（牛胚胎干）细胞 敲除或破坏 （牛）去核（次级）卵母细胞 与全能性/胚胎发育/发育成完整个体有关的基因表达开关被启动/表达/处于可表达的状态 同期发情（且未配种） 人乳铁蛋白基因和牛β-酪蛋白基因 不含牛β-酪蛋白、含人β-酪蛋白、乳铁蛋白含量显著提高 【详解】（1）牛β-酪蛋白与人β-酪蛋白的氨基酸序列相似度仅为50%，进入人体后可能引发免疫应答，诱发过敏反应。 （2）①建立牛胚胎干细胞系。胚胎干细胞需从胚胎中获取，因此从母体子宫中冲洗获得囊胚，从中分离胚胎干细胞。建立胚胎干细胞系的关键是构建一套既能促进干细胞分裂，又能抑制干细胞分化的培养体系。 ②定点插入人源基因。首先构建含人β-酪蛋白基因和人乳铁蛋白基因的表达载体。将表达载体与牛胚胎干细胞充分混合后，给予短暂的电脉冲刺激，促进表达载体导入牛胚胎干细胞。利用基因编辑工具将两种人源基因定点插入干细胞的基因组，同时实现对牛β-酪蛋白基因的敲除，此目的是减少牛源蛋白所引发的过敏风险，并且提升乳汁中营养因子的含量。 ③构建克隆胚胎。筛选基因编辑成功的牛胚胎干细胞作为核供体细胞，以牛去核的次级卵母细胞作为核受体细胞，构建重组细胞。重组细胞可回复到类似受精卵时期的功能，根本原因是核DNA被重新编排，使得与全能性/胚胎发育/发育成完整个体有关的基因表达开关被启动/表达/处于可表达的状态。 ④胚胎移植。将重组细胞培养至桑葚胚，植入进行同期发情处理（且未配种）的代孕母牛子宫角，直至小牛出生。 ⑤鉴定。基因检测：分别根据人β-酪蛋白基因、人乳铁蛋白基因以及被敲除的牛β-酪蛋白基因的核苷酸序列设计特异性引物，转基因小牛的PCR检测结果依次为阳性、阳性和阴性。牛奶成分检测：与非转基因奶牛相比，转基因奶牛分泌的牛奶具有不含牛β-酪蛋白、含人β-酪蛋白、乳铁蛋白含量显著提高等特征，说明转基因奶牛培育成功。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $