精品解析：黑龙江佳木斯市桦南县一中2025—2026学年度第二学期期中考试 生物学

2025—2026学年度第二学期桦南一中期中考试 生物学 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求的。 1. 下列工具组合中，可用于构建基因表达载体的是（ ） A. 限制酶、DNA聚合酶、质粒 B. 限制酶、DNA连接酶、噬菌体 C. 解旋酶、DNA连接酶、动植物病毒 D. 逆转录酶、限制酶、质粒 【答案】B 【解析】 【详解】构建基因表达载体时，需用限制酶切割目的基因和载体，再用DNA连接酶将二者连接，噬菌体可作为基因工程的载体，该组合可用于构建基因表达载体，B正确。 2. 人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列叙述错误的是（ ） A. 细胞融合前应去除细胞壁 B. 聚乙二醇试剂可促进细胞融合 C. 融合的细胞即为杂交细胞 D. 杂交细胞可能具有生长快速的优势 【答案】C 【解析】 【详解】A、植物细胞的细胞壁会阻碍细胞间的融合，因此融合前需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体，再进行融合操作，A正确； B、聚乙二醇（PEG）是诱导植物原生质体融合的常用化学试剂，可通过改变细胞膜通透性促进细胞融合，B正确； C、细胞融合过程中会出现三类融合产物：人参细胞-人参细胞同核融合体、胡萝卜细胞-胡萝卜细胞同核融合体、人参细胞-胡萝卜细胞异核融合体，仅异核融合体是所需的杂交细胞，因此融合后的细胞需要经过筛选才能得到杂交细胞，并非所有融合细胞都是杂交细胞，C错误； D、杂交细胞兼具两个亲本的遗传特性，胡萝卜细胞本身具有生长快速的特点，因此杂交细胞可能保留该生长优势，同时具备合成人参皂苷的能力，实现人参皂苷产率的提升，D正确。 3. 将目的基因导入不同受体细胞时，需采用不同的方法。下列导入方法与受体细胞的对应关系错误的是（ ） A. 农杆菌转化法——棉花细胞 B. 显微注射法——小鼠受精卵 C. Ca2+处理法——大肠杆菌细胞 D. 花粉管通道法——噬菌体 【答案】D 【解析】 【详解】A、农杆菌转化法是将目的基因导入双子叶植物细胞的常用方法，棉花属于双子叶植物，可通过该方法导入目的基因，A正确； B、显微注射法是将目的基因导入动物细胞的专用方法，小鼠受精卵作为动物受体细胞，常用该方法完成目的基因导入，B正确； C、将目的基因导入原核微生物细胞时，常用Ca2+处理法使大肠杆菌处于感受态，提高其吸收外源DNA的能力，C正确； D、花粉管通道法是导入植物细胞的特有方法，噬菌体是病毒，不属于植物细胞，不能用该方法导入目的基因，D错误。 4. 下列关于基因表达载体构建的叙述，正确的是（ ） A. 启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，位于目的基因下游 B. 标记基因的作用是筛选含有目的基因的受体细胞，不能用于筛选含有重组载体的细胞 C. 终止子的作用是终止转录过程，使RNA聚合酶从DNA上脱离 D. 目的基因与载体的连接必须通过限制酶切割产生的黏性末端实现 【答案】C 【解析】 【详解】A、启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，能够启动目的基因的转录过程，其位于目的基因的上游，A错误； B、标记基因的作用是筛选出成功导入重组载体（含目的基因）的受体细胞，可用于筛选含有重组载体的细胞，B错误； C、终止子位于目的基因下游，作用是终止转录过程，使RNA聚合酶从模板DNA上脱离，停止转录，C正确； D、目的基因与载体的连接既可以通过限制酶切割产生的黏性末端实现，也可以通过平末端实现，D错误。 5. 某生物兴趣小组为验证“错误存放口罩会增加口罩上的微生物数量”，小组同学在实验室中将直接存放在书包中的口罩剪下一小块，用无菌镊子轻轻放置在平板培养基上，然后取走小块，一段时间后观察菌落的数目。下列叙述正确的是（　　） A. 实验中的培养基应为液体培养基，要进行严格灭菌处理 B. 实验还应设置“剪取无菌包装口罩上等大的小块”进行对照实验 C. 可以根据菌落数大致推测出活菌数，而菌落数往往大于活菌数 D. 实验进行前需对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌 【答案】B 【解析】 【分析】培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。微生物培养基需要为微生物繁殖提供碳源、氮源、水、无机盐等营养物质，此外还要满足微生物对特殊营养物质，pH和O2的需求。培养基按照其物理状态可以分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基。培养基按照功能可以分为选择培养基、鉴别培养基等。利用稀释涂布平板法得到数值往往偏小，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。消毒和灭菌是两个不同的概念，消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法杀死物体表面或内部的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 【详解】A、只有固体培养基上才能长出菌落利用活菌计数法用于计数，故本实验所需培养基为固体培养基，要进行严格灭菌处理，A错误； B、本实验自变量是口罩的存放方式，实验组是直接存放于书包中的口罩，对照组应该是存放在无菌包装中的口罩，因此还应该设置“剪取无菌包装口罩上等大的小块”进行对照实验，B正确； C、采用平板计数法获得的菌落有可能是由多个细菌形成的，所以菌落数往往小于实际的活菌数，C错误； D、对实验操作的空间、操作者的衣着和手，应进行清洁和消毒，不应进行灭菌操作，D错误。 故选B。 6. 某质粒载体复制原点（ori）、四环素抗性基因（tetr）、氨苄青霉素抗性基因（ampr），其中ampr中含Hind Ⅲ切割位点，tetr中含Bgl Ⅱ切割位点。下列关于该质粒作为基因工程载体的叙述，错误的是（ ） A. ori的存在保证质粒能在受体细胞中复制 B. 导入该质粒的受体细胞可在含四环素的培养基中存活 C. 若用Hind Ⅲ切割质粒，会破坏ampr的功能 D. 该质粒具备基因工程载体的基本条件 【答案】B 【解析】 【详解】A、ori是复制原点，是质粒在受体细胞中自主复制的起点，其存在可保证质粒在受体细胞中稳定复制，A正确； B、若使用Bgl Ⅱ切割该质粒构建重组载体，目的基因会插入四环素抗性基因（tetr）内部，导致tetr结构被破坏而失活，此时导入重组载体的受体细胞无法在含四环素的培养基中存活，B错误； C、由题干可知，Hind Ⅲ的切割位点位于氨苄青霉素抗性基因（ampr）内部，用该酶切割质粒会破坏ampr的完整结构，使其丧失抗性功能，C正确； D、该质粒含有复制原点、抗性标记基因、多个限制酶切割位点，满足基因工程载体的基本要求，D正确。 7. 琼脂糖凝胶电泳常用于核酸样品的分析，样品1～4的电泳结果如图所示（“+”“-”分别代表电泳槽的阳极和阴极）。已知样品1和2中的DNA分子分别是甲和乙，甲只有限制酶R的一个酶切位点，样品3和4中有一个样品是甲的酶切产物。下列叙述错误的是（ ） A. 配制琼脂糖凝胶时需选用适当的缓冲溶液 B. 该实验条件下甲、乙两种DNA分子均带负电荷 C. 甲、乙两种DNA分子所含碱基对的数量可能不同 D. 据图推测样品3可能是甲被酶R完全酶切后的产物 【答案】D 【解析】 【分析】限制酶酶切其基本原理是利用限制酶对DNA上特定序列的识别，来确定切割位点并实现切割，从而获得所需的特定序列。 【详解】A、配制琼脂糖凝胶时选用适当缓冲溶液，可维持电泳过程中体系的pH稳定，保证核酸分子正常泳动，A正确； B、电泳时，样品向+极移动，说明在该实验条件下甲、乙两种 DNA 分子均带负电荷，符合核酸分子在电泳中的带电特性，B正确； C、电泳中，DNA分子的迁移速率与分子大小、电荷的多少等多种因素有关。甲、乙电泳条带位置虽然相同，但影响DNA分子的迁移速率的因素很多，所以碱基对的数量可能不同，C正确； D、甲只有限制酶R的一个酶切位点，若被酶R完全酶切，只会得到2种DNA片段（2个条带），这两个条带的碱基数量比甲要少，电泳跑的距离要比甲更远，所以据图推测样品4才是甲被酶R完全酶切后的产物，D 错误。 故选D。 8. 下列关于动物细胞培养及干细胞的应用的叙述，正确的是（　　） A. 细胞在贴壁生长的过程中会出现接触抑制现象，但不影响细胞分裂 B. CO2培养箱中含有95%O2和5%CO2，CO2的主要作用是刺激细胞呼吸 C. 胚胎干细胞具有全能性，主要存在于早期胚胎、骨髓和脐带血中 D. iPS细胞有细胞周期，它分化形成的神经细胞一般不具有细胞周期 【答案】D 【解析】 【详解】A、接触抑制现象指细胞在贴壁生长至相互接触时停止分裂，此时细胞分裂会停止，A错误； B、CO2培养箱中CO2的主要作用是维持培养液pH，而非刺激细胞呼吸（细胞呼吸依赖O2），且实际95%的空气，B错误； C、胚胎干细胞主要存在于早期胚胎（如囊胚内细胞团），而骨髓和脐带血中的是造血干细胞（成体干细胞），C错误； D、iPS细胞可分裂，具有细胞周期；神经细胞高度分化后失去分裂能力，无细胞周期，D正确。 故选D。 9. 下列有关无菌技术的说法，其中正确的有几项（　　） ①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物 ②煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子 ③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，所以不能在常温长期保存 ④用紫外线消毒前，适量喷洒苯酚或煤酚皂，可以加强消毒效果 ⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌 ⑥培养皿、吸管可用干热灭菌法灭菌 A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项 【答案】C 【解析】 【详解】①无菌技术的关键是防止杂菌的污染，①错误； ②煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟只能杀死部分生活状态的微生物细胞，不能杀死芽孢、孢子，②错误； ③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，还含有微生物的芽孢和孢子，所以不能在常温长期保存，③正确； ④用紫外线照射30 min，可以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可以加强消毒效果，④正确； ⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧（温度更高），可以迅速彻底地灭菌，⑤正确； ⑥培养皿、吸管等玻璃器皿可用干热灭菌法灭菌，⑥正确。 10. 营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。下图是科研人员利用影印法（用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上）初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。下列叙述错误的是（ ） A. ①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养 B. 进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至完全培养基上，再“复印”至基本培养基上 C. 氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上对应位置有的菌落中挑选 D. ①过程接种方法统计出的菌落数往往比活菌的实际数目多，因此统计结果用菌落数而不是用活菌数表示 【答案】D 【解析】 【详解】A、据图分析，接种后的菌落均匀分布，据此推测该过程接种的方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养，A正确； B、进行②过程培养时，为了防止将完全培养基中特定营养成分带入基本培养基，应将丝绒布先转印至基本培养基上再“复印”至完全培养基上，B正确； C、在基本培养基中氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，比较基本培养基和完全培养基中的菌落可知氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上对应位置有的菌落中挑选，C正确； D、①过程接种方法的稀释涂布平板法，由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以稀释涂布平板法统计出的菌落数往往比活菌的实际数目少，D错误。 11. 下图是“三亲婴儿”培育过程示意图，相关叙述错误的是（ ） A. 透明带反应和卵细胞膜反应是过程①形成二倍体受精卵的保障 B. 应用该技术可阻断血友病女性患者致病基因遗传给后代 C. 捐献者卵母细胞受精更有利于重组受精卵的分裂分化 D. 雌雄原核的融合是受精完成的标志 【答案】B 【解析】 【详解】A、透明带反应和卵细胞膜反应是过程①受精作用形成二倍体受精卵的保障，因为这是防止多精入卵的两道屏障，A正确； B、血友病是伴X隐性遗传病，该基因位于细胞核内的染色体上，患者的细胞核仍然保留，因此该基因能遗传给后代，B错误； C、捐献者卵母细胞受精更有利于重组受精卵的分裂分化，即受精后的卵细胞质中含有的物质更有利于重组受精卵的分裂分化，C正确； D、受精的标志是在透明带和卵细胞膜之间看到两个极体，而雌雄原核的融合是受精完成的标志，D正确。 12. 幽门螺旋杆菌于2017年被世界卫生组织列入一类致癌物。幽门螺旋杆菌主要寄生于人体胃中，是引起很多消化道疾病的首要致病细菌。体检时可通过13C尿素呼气试验来检测幽门螺旋杆菌感染情况。受试者口服13C标记的尿素胶囊后，尿素可被幽门螺旋杆菌产生的脲酶催化分解为NH3和13CO2。定时收集受试者吹出的气体并测定其中是否含有13CO2。以下叙述正确的是（　　） A. 幽门螺旋杆菌属于原核生物，代谢类型是自养型 B. 受试者吹出的气体中不含有13CO2说明感染幽门螺杆菌的风险较高 C. 幽门螺旋杆菌可以产生脲酶，但不具有内质网和高尔基体 D. 幽门螺旋杆菌不适宜在酸性条件下生存 【答案】C 【解析】 【分析】1、由原核细胞构成的生物叫原核生物，由真核细胞构成的生物叫真核生物；原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核，没有核膜、核仁和染色体，原核细胞只有核糖体一种细胞器，但原核生物含有细胞膜、细胞质等结构，也含有核酸和蛋白质等物质。 2、细胞生物（包括原核生物和真核生物）的细胞中含有DNA和RNA两种核酸、其中DNA是遗传物质，非细胞生物（病毒）中含有DNA或RNA一种核酸、其遗传物质是DNA或RNA。 【详解】A、幽门螺旋杆菌不能利用无机物制造有机物，其同化类型是异养型，A错误； B、通过题干信息可知，体验者口服含有13C标记的尿素胶囊，如果受试者胃里有幽门螺旋杆菌，则会被幽门螺旋杆菌产生的脲酶分解成13CO2和NH3，若受试者吹出的气体中不含有13CO2，说明感染幽门螺杆菌的风险较低，B错误； C、幽门螺旋杆菌虽然可以产生脲酶，但幽门螺旋杆菌为原核生物，细胞中只有游离的核糖体一种细胞器，不具有内质网和高尔基体，C正确； D、幽门螺旋杆菌主要寄生在人体胃中，而胃中是酸性环境，因此幽门螺旋杆菌适宜在酸性条件下生存，D错误。 故选C。 13. 应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效益。如图表示培育生物新品种的过程，请据图判断下列叙述中正确的是（ ） A. 图中①过程需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶和载体 B. 图中⑤过程需要的培养基中只需加入无机营养和植物激素 C. 将prG导入细胞I，细胞I是B淋巴细胞 D. 可用相应抗原进行抗原—抗体杂交，检测抗虫基因是否成功表达 【答案】C 【解析】 【详解】A、①表示基因表达载体的构建，该过程需要的工具酶是限制酶和DNA连接酶，载体不是工具酶，A错误； B、⑤表示采用植物组织培养技术将转基因植物细胞培育成转基因植株，该过程需要的培养基中含有植物激素、无机营养、有机营养、琼脂等，B错误； C、将prG导入到细胞Ⅰ形成的重组细胞能产生单克隆抗体，prG能无限增殖，则Ⅰ是B淋巴细胞，能产生抗体，C正确； D、检测抗虫基因是否成功表达，应检测是否产生了相应的抗虫蛋白，可通过抗原—抗体杂交的方法，用相应抗体进行抗原—抗体杂交，D错误。 故选C。 14. 我国是全球最大的发酵产品生产国，下图为发酵工程的基本环节，其中①～④代表不同的过程。下列叙述错误的是（　　） A. ①过程也可用基因工程或人工诱变选育菌种，是发酵工程的中心环节 B. 啤酒发酵和果醋发酵时，②过程中均需通入无菌空气进行扩大培养 C. 在③过程中，发酵罐与配制好的培养基都必须经过严格的灭菌处理 D. 如果要获得单细胞蛋白，④过程中可用过滤、沉淀等方法获得产品 【答案】A 【解析】 【详解】A、①过程所需菌种可从自然界分离菌种，也可用基因工程或人工诱变选育菌种，发酵罐内发酵是发酵过程的中心环节，A错误； B、②过程为扩大培养，酵母菌为兼性厌氧生物，大量增殖时进行有氧呼吸，需要通入无菌空气，醋酸菌为好氧细菌，扩大培养时也要通入无菌空气，B正确； C、③过程为发酵罐内发酵，该过程所需要的培养基和发酵设备均需进行严格的灭菌处理，C正确； D、发酵工程中，如果发酵产品是单细胞蛋白，可在发酵结束后，④过程中可用过滤、沉淀等方法获得产品，D正确。 15. 马铃薯在生长期易受多种病毒侵染而严重减产。科研人员通过农杆菌介导法，将4种病毒CP融合基因导入马铃薯，获得多抗转基因马铃薯，有效解决了多种病毒的侵染问题。其转化中所涉及的CP融合基因、Ti质粒部分结构如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） 注∶ClaⅠ、BamHⅠ、HindⅢ、KpnⅠ、SacⅠ为相应限制酶的识别位点，Kan片段为卡那霉素抗性基因片段 A. 具体操作过程中CP融合基因需先经PCR扩增，再进行凝胶电泳加以分离和鉴定 B. 为了使CP融合基因能在马铃薯叶细胞中表达，可从马铃薯任何部位细胞中获取启动子1 C. 应选择BamHⅠ和SacⅠ同时处理CP融合基因所在的DNA分子和Ti质粒 D. 若经限制酶处理的CP融合基因与Ti质粒反向连接，会导致CP融合基因不能正常表达 【答案】B 【解析】 【详解】A、将4种病毒CP融合基因导入马铃薯前，需要对CP融合基因进行扩增，即进行PCR扩增，再进行凝胶电泳加以分离和鉴定，A正确； B、为了使CP融合基因能在马铃薯叶细胞中表达，启动子1应为来源于叶细胞中特异性表达的启动子，B错误； C、在构建重组质粒时为了避免目的基因自身环化等，通常采用两种限制酶，根据题图可知，应选择BamHⅠ和SacⅠ同时处理CP融合基因所在的DNA分子和Ti质粒，C正确； D、经限制酶处理的CP融合基因虽然带有相应的启动子1，但要利用T-DNA的终止子，若与Ti质粒反向连接，可能因缺失相应的终止子或相关的终止子位置改变，导致CP融合基因不能表达或不能正确表达出相应的mRNA，D正确。 故选B。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 16. 为培育具有市场竞争力的无籽柑橘，研究者设计如下流程。相关叙述正确的是（ ） A. 过程①需使用胰蛋白酶处理 B. 实现过程②依赖膜的流动性 C. 过程③需应用植物组培技术 D. 三倍体植株可产生无籽柑橘 【答案】BCD 【解析】 【分析】分析图示可知，①过程为原生质体的制备过程，需要纤维素酶和果胶酶，②过程为原生质体的融合过程，需要诱导剂诱导融合，③过程为植物组织培养的过程。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理，A错误； B、②过程为细胞融合过程，该过程依赖膜的流动性，B正确； C、过程③以杂种细胞为外植体，需应用植物组培技术将杂种细胞培养形成个体，C正确； D、三倍体植株含有三个染色体组，减数分裂时联会紊乱，可产生无籽柑橘，D正确。 故选BCD。 17. 科学家通过将细胞核尚未融合的小鼠受精卵中的雄原核移除后，获得了孤雌单倍体囊胚，并从中获得孤雌单倍体胚胎干细胞（haESCs）。该细胞具有胚胎干细胞的特征和发育潜能。科研人员将haESCs注入同种小鼠卵细胞中获得了“双母”小鼠。下列说法错误的是（　　） A. 通过显微操作法去除受精卵中的雄原核时可观察到两个极体 B. haESCs可以取自孤雌单倍体囊胚的内细胞团或滋养层 C. haESCs具备自我更新能力和分化为其他类型细胞的能力 D. “双母”小鼠的体细胞中遗传物质的含量多于普通小鼠 【答案】B 【解析】 【详解】A、受精卵形成时，精子进入卵子后形成雄原核，此时卵子已完成减数分裂，释放出两个极体（第一极体和第二极体），因此显微操作移除雄原核时可观察到两个极体，A正确； B、胚胎干细胞（haESCs）通常来源于囊胚的内细胞团，滋养层细胞分化为胎膜和胎盘，不具备多能性，因此haESCs不能取自滋养层，B错误； C、haESCs作为胚胎干细胞，具有自我更新能力并能分化为多种细胞类型，C正确； D、“双母”小鼠的核DNA含量与普通小鼠相同（均为二倍体），但细胞质中的遗传物质（如线粒体DNA）来自两个母源，因此总遗传物质含量多于普通小鼠，D正确。 故选B。 18. 长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图，图2是科研人员通过杂交-杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产双特异性单克隆抗体的部分过程。下列叙述正确的有（　　） A. 与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是灭活病毒诱导法 B. 过程②选用的骨髓瘤细胞具有无限增殖的特点，该细胞产生原因是抑癌基因发生突变 C. 双特异性单克隆抗体能将长春碱定向带到癌细胞所在位置，对人体的副作用较小 D. 过程①⑤步骤分别注射癌胚抗原和长春碱的目的是刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、图2中过程②是诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。诱导原生质体融合的方法有电融合法、聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法等；诱导动物细胞融合的常用方法有电融合法、PEG融合法、灭活病毒诱导法等。可见，与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是灭活病毒诱导法，A正确； B、癌变的发生并不是单一基因突变的结果，而是一系列的原癌基因与抑癌基因的变异逐渐积累的结果，过程②选用的骨髓瘤细胞具有无限增殖的特点，该细胞产生的原因不一定仅是抑癌基因发生突变，B错误； C、双特异性单克隆抗体能将长春碱定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，对人体的副作用较小，C正确； D、过程①⑤步骤分别注射癌胚抗原和长春碱的目的是使小鼠体内发生相应的免疫反应，进而产生产生相应的B淋巴细胞，D正确。 故选ACD。 19. “低乳糖奶牛”的诞生有望给乳糖不耐受症患者提供“放心奶”。如图是“低乳糖奶牛”的培育过程，下列叙述正确的是（ ） A. 重组细胞1培养后可以不取核，直接注入去核卵母细胞 B. 胚胎成纤维细胞分化程度高，核移植难度高于体细胞核移植 C. 犊牛的遗传物质不完全来自黑白花奶牛和乳糖酶基因 D. 犊牛成年后与普通牛杂交，子代有1/2是低乳糖奶牛 【答案】AC 【解析】 【详解】A、据图可知，重组细胞1培养后可以不取核，直接注入去核卵母细胞，A正确； B、胚胎成纤维细胞分化程度低，核移植难度低于体细胞核移植，B错误； C、犊牛的核遗传物质来自黑白花奶牛提供的细胞核再加上导入的乳糖酶基因，犊牛的细胞质遗传物质来自卵母细胞，C正确； D、犊牛含有乳糖酶基因个数及基因位置不确定，普通牛不含乳糖酶基因，为隐性纯合子，故犊牛成年后与普通牛杂交，子代低乳糖奶牛无法确定，D错误。 20. 甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质，某科研人员采用农杆菌转化法将甜蛋白基因（含有1178个碱基对）导入番茄，希望能提高番茄甜味，改善果实品质。甜蛋白基因和Ti质粒上限制酶切位点如图1、2所示；提取培育出的转基因番茄细胞中的DNA，依据甜蛋白基因两端的特异性序列设计引物，进行PCR扩增，对扩增产物进行电泳，结果如图3。下列叙述错误的是（ ） A. PCR扩增甜蛋白基因时，应该根据基因两端的3'端序列设计引物 B. 选择限制酶XbaI和EcoRI切割质粒和含有甜蛋白基因的DNA片段 C. 可用含有卡那霉素的培养基对成功导入表达载体的农杆菌进行筛选 D. 仅由图3电泳结果不能判断1、2、3、4号转基因番茄是否培育成功 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、PCR扩增时，引物需与模板链的3'端结合以启动子链沿延伸，因此应根据基因两端的3'端序列设计引物，A正确； B、若选择XbaⅠ和EcoRⅠ切割：甜蛋白基因会被完整切割（XbaⅠ切左侧，EcoRⅠ切右侧），但质粒中XbaⅠ和EcoRⅠ的切割位点位于启动子和终止子之间，切割后插入目的基因会导致目的基因反接，无法正常转录，正确选择应为XbaⅠ和HindⅢ，能使目的基因与载体正确连接，B错误； C、Ti质粒含卡那霉素抗性基因，可作为标记基因，成功导入表达载体的农杆菌能在含卡那霉素的培养基上存活，从而实现筛选，C正确； D、图3电泳结果仅能说明转基因番茄中含有甜蛋白基因片段，但无法证明该基因是否转录和翻译（即是否表达出甜蛋白），因此不能直接判断培育成功，D正确。 故选B。 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。 回答下列问题： （1）在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是______。 （2）采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，通常可采用______法对培养基进行灭菌。 （3）酵母菌扩大培养的过程中，利用血细胞计数板进行计数，发现血细胞计数板每个小方格平均含有9个酵母菌，则对应的酵母菌种群密度是______个/mL。将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是______。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，目的是______。发酵液中的乙醇可用______溶液检测。 （4）本实验收集的淋洗液中的______可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点有______（写出两点）。 【答案】（1）菌T能够分泌纤维素酶 （2）高压蒸汽灭菌法（湿热灭菌法） （3） ①. 3.6×107 ②. 制造无氧环境 ③. 排出二氧化碳 ④. 酸性的重铬酸钾溶液 （4） ①. 葡萄糖 ②. 节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本低、原料来源广 【解析】 【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18~30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。 【小问1详解】 菌T能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素最终分解为葡萄糖，因此在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解。 【小问2详解】 通常采用高压蒸汽灭菌法（湿热灭菌法）对培养基进行灭菌。 【小问3详解】 血细胞计数板1个大方格（400小格）体积=0.1mm3=10⁻4 mL，种群密度=（每小格菌数×400）÷10⁻4 mL=9×400÷10⁻4 =3.6×107个/mL。果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，将酵母菌接种到灭菌后的培养基中进行酒精发酵，酒精发酵需要在无氧的条件下进行，此时拧紧瓶盖的主要目的是制造无氧环境。酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，在发酵过程中密闭，所以需要根据发酵进程适时拧松瓶盖放出二氧化碳，酒精可用酸性重铬酸钾溶液来检测，该物质与酒精反应呈现灰绿色。 【小问4详解】 本实验收集的淋洗液中的葡萄糖可以作为酵母菌生产乙醇的原料，即酵母菌可以利用葡萄糖将葡萄糖分解成乙醇，与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，利用纤维素为原料生产乙醇具有节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本低、原料来源广等优点。 22. 两只克隆小猴“中中”和“华华”是世界首例非人灵长类动物的体细胞克隆猴，这是我国的研究成果。一年后5只世界首例生物节律紊乱的体细胞克隆猴诞生。下图为培育克隆猴的流程，回答问题： （1）在“中中”“华华”之前，科学家已培育了胚胎细胞克隆猴，胚胎细胞核移植难度明显低于体细胞核移植的原因是________。 （2）科学家首先将采集的卵母细胞培养至________期，然后去核，这里的“去核”实际上是指去除________。核移植过程中用灭活的仙台病毒进行了短暂处理，其目的是________。体外培养重构胚时，需提供适宜的营养及环境条件，推测环境条件包括________。（答出两点）。最后将胚胎移植到经过________处理的代孕母猴体内，最终产出克隆小猴。 （3）我国科研团队采集一只睡眠紊乱最明显的BMAL1基因敲除的猕猴的体细胞，通过核移植技术获得了5只克隆猴，理论上这5只克隆猴之间的细胞核基因型________（填“相同”或“不相同”或“不一定相同”）。为验证上述5只基因敲除猕猴存在昼夜节律紊乱问题，科学家用检测设备监测实验猴，通过行为学分析检测其是否明显表现出睡眠紊乱的症状，对照组的设置应为________。 【答案】（1）胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易 （2） ①. MⅡ（或减数第二次分裂中期） ②. 纺锤体-染色体复合物 ③. 诱导细胞融合  ④. 无菌、无毒的环境，温度、pH、渗透压，气体环境 ⑤. 同期发情 （3） ①. 相同 ②.  与克隆猴生理状态相同的正常个体 【解析】 【小问1详解】 体细胞分化程度高，表现全能性困难，而胚胎细胞分化程度低，表现全能性容易，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。 【小问2详解】 去核前应保证采集的卵母细胞在体外培养至减数分裂II中期；去核是指去除纺锤体—染色体复合物；核移植前需用灭活的仙台病毒对体细胞进行短暂处理，在此过程中，灭活的仙台病毒的作用是诱导体细胞与去核卵母细胞融合。目前动物细胞核移植技术普遍使用的去核方法是显微操作法，核移植的具体操作是将体细胞注入去核卵母细胞，从而得到重构胚，使其具有发育成完整个体的能力；体外培养重构胚时，培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外，通常需要加入动物血清等一些天然成分，并将其置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱中培养，培养过程中需要定期更换培养基，并创造无菌、无毒环境。胚胎移植前还需对代孕母猴进行同期发情处理，这样可以使移植的胚胎获得相同的生理环境，以保证胚胎能够继续发育。 【小问3详解】 通过核移植技术获得了5只克隆猴，理论上这5只克隆猴之间的细胞核基因型相同，细胞质基因来源于受体细胞；为了验证这5只基因敲除猕猴是否存在昼夜节律紊乱问题，科学家给猴子们佩戴了检测设备，可以随时监测到它们的昼夜活动情况，通过行为学分析检测其是否明显表现出类似精神分裂症的症状。对照组的设置应为与克隆猕猴生理状态相同的正常的猕猴个体(不存在BMAL1缺失）。 23. 白菜（AA，2n=20）、甘蓝（CC，2n=18）是人们餐桌上的常见蔬菜，营养价值高、染色体数目少。研究人员通过植物体细胞杂交技术培育了甘蓝型油菜（流程如图），并展开了深入研究。请回答下列问题： （1）甘蓝型油菜的叶肉细胞中含有____条染色体，含有____个染色体组。 （2）进行上述杂交过程前，应使用____酶去除植物细胞壁，再用____（试剂名称）处理白菜和甘蓝的原生质体进行膜融合。获得杂种细胞后进行植物组织培养，脱分化阶段的光照条件为____，再分化过程的影响因素有____（请写出两点）。 （3）甘蓝型油菜有平展叶和上卷叶两种叶形，研究人员分别测定12叶期幼苗单株的叶绿素含量、光合速率、气孔导度等，其结果如下表： 组别 叶绿素a （mg/g） 叶绿素b （mg/g） 净光合速率 （umolCO2/m2·s） 气孔导度（molH2O/m2·s） 胞间CO2浓度 （umolCO2/mol） 平展叶 4.2 2.7 8.7 0.18 461.0 上卷叶 6.7 3.5 12.6 0.21 397.5 ①叶绿素存在于叶绿体的_____（场所名称），主要吸收可见光中的_____光。 ②在两组植株呼吸速率相同的情况下，据表中数据分析，上卷叶净光合速率大于平展叶的原因是_____（答2点）。 【答案】（1） ①. 38 ②. 4 （2） ①. 纤维素酶和果胶 ②. 聚乙二醇 ③. 避光 ④. 生长素和细胞分裂素的比例及光照 （3） ①. 类囊体 ②. 红光和蓝紫 ③. 叶绿素含量高，光反应强；气孔导度大，吸收利用CO2多，暗反应强 【解析】 【分析】光合作用包括光反应和暗反应阶段： 1、光反应阶段是在类囊体的薄膜上进行的。叶绿体中光合色素吸收的光能将水分解为氧和H+，氧直接以氧分子的形式释放出去，H+与氧化型辅酶Ⅱ（NADP+）结合，形成还原型辅酶Ⅱ（NADPH）。还原型辅酶Ⅱ作为活泼的还原剂，参与暗反应阶段的化学反应，同时也储存部分能量供暗反应阶段利用；在有关酶的催化作用下，提供能量促使ADP与Pi反应形成ATP。 2、暗反应在叶绿体基质中进行，在特定酶的作用下，二氧化碳与五碳化合物结合，形成两个三碳化合物。在有关酶的催化作用下，三碳化合物接受ATP和NADPH释放的能量，并且被NADPH还原。一些接受能量并被还原的三碳化合物，在酶的作用下经过一系列的反应转化为糖类；另一些接受能量并被还原的三碳化合物，经过一系列变化，又形成五碳化合物。 【小问1详解】 白菜（AA，2n=20 ） 、甘蓝（CC，2n=18 ），通过体细胞杂交获得的甘蓝型油菜染色体数为二者之和，即 20+18=38条 。白菜是二倍体（AA 表示 2 个染色体组 ），甘蓝是二倍体（CC 表示 2 个染色体组 ），体细胞杂交后甘蓝型油菜含 2+2=4个染色体组 。 【小问2详解】 植物细胞壁主要成分是纤维素和果胶，所以用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体 。诱导原生质体融合常用聚乙二醇（PEG ）试剂 。脱分化阶段一般要避光培养，利于愈伤组织形成；再分化过程受多种因素影响，如生长素和细胞分裂素的比例（调控细胞分化方向，生长素 / 细胞分裂素比值高利于根分化，低利于芽分化 ）、光照（影响叶绿体形成等 ）、温度（影响酶活性 ）等 。 【小问3详解】 ①叶绿素存在于叶绿体的类囊体薄膜上，是光合色素的重要分布场所；叶绿素主要吸收可见光中的红光和蓝紫光 。 ②净光合速率 = 实际光合速率 - 呼吸速率，两组植株呼吸速率相同情况下，上卷叶净光合速率大，结合表格看：一是上卷叶叶绿素a、叶绿素b含量高，能吸收更多光能，促进光反应，为暗反应提供更多NADPH和ATP ；二是上卷叶气孔导度大，进入细胞的CO2多，为暗反应提供充足原料，促进暗反应进行 。 24. 重组质粒构建及导入流程：目的基因（人胰岛素基因）→与含氨苄青霉素抗性基因、四环素抗性基因的质粒（含EcoR I、BamH I酶切位点）→双酶切后连接→导入大肠杆菌→筛选培养。胰岛素是治疗糖尿病的重要药物，科学家利用基因工程技术生产人胰岛素的部分流程如下。 回答下列问题： （1）获取人胰岛素基因时，可从人体胰岛B细胞中提取mRNA，通过逆转录获得cDNA，该方法的优点是______。 （2）构建重组表达载体时，用EcoR I和BamH I两种限制酶对目的基因和质粒进行双酶切，与单酶切相比，双酶切的优势是______（答出两点）。 （3）将重组质粒导入大肠杆菌时，需用Ca²+处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，感受态细胞的特点是______。 （4）筛选含重组质粒的大肠杆菌时，将转化后的菌液接种到含氨苄青霉素的培养基上，长出的菌落______（填“一定”或“不一定”）含重组质粒，原因是______若要进一步筛选，可采用的方法是_____（答出一种即可）。 【答案】（1）可直接获得编码蛋白质的基因，不含内含子 （2）防止目的基因自身环化、防止质粒自身环化、保证目的基因与质粒定向连接 （3）细胞膜的通透性改变，能吸收周围环境中的DNA分子 （4） ①. 不一定 ②. 未连接目的基因的空质粒也含氨苄青霉素抗性基因，会在该培养基上生长 ③. DNA分子杂交技术##抗原-抗体杂交技术##PCR技术 【解析】 【小问1详解】 获取人胰岛素基因时，从人体胰岛B细胞中提取mRNA，通过逆转录获得cDNA。因为胰岛B细胞中胰岛素基因表达，能提取到胰岛素基因的mRNA，所以该方法的优点是可直接获得编码蛋白质的基因，不含内含子。 【小问2详解】 构建重组表达载体时，用EcoR I和BamH I两种限制酶对目的基因和质粒进行双酶切，与单酶切相比，双酶切时，由于两种限制酶识别序列不同，可防止目的基因自身环化、防止质粒自身环化、保证目的基因与质粒定向连接。 【小问3详解】 将重组质粒导入大肠杆菌时，用Ca2+处理大肠杆菌使其成为感受态细胞，感受态细胞的特点是细胞膜的通透性改变，能吸收周围环境中的DNA分子。 【小问4详解】 将转化后的菌液接种到含氨苄青霉素的培养基上，长出的菌落不一定含重组质粒，原因是未连接目的基因的空质粒也含氨苄青霉素抗性基因，会在该培养基上生长，若要进一步筛选，可采用的方法是DNA分子杂交技术（或抗原-抗体杂交技术，或PCR技术）。 25. 将天然Ti质粒改造成含有Vir基因的辅助质粒（作用为辅助T-DNA转移）和不含有Vir基因、含有T-DNA的穿梭质粒，共同转入农杆菌，可提高转化效率。细菌和棉花对密码子偏好不同，为提高翻译效率，增强棉花抗病虫害能力，进行如下操作。回答下列问题。 （1）从苏云金杆菌提取DNA时，需加入蛋白酶，其作用是_____。提取过程中加入体积分数为95%的预冷酒精，其目的是______。 （2）本操作中获取目的基因的方法是_____和______。 （3）穿梭质粒中p35s为启动子，驱动目的基因转录，插入两个p35s启动子，其目的可能是_____。 （4）根据图中穿梭质粒上的KanR和HygBR两个标记基因的位置，用_____基因对应的抗生素初步筛选转化的棉花愈伤组织。 （5）为检测棉花植株是否导入目的基因，提取棉花植株染色体DNA作模板，进行PCR，应选用的引物是_____和_____。 （6）本研究采用的部分生物技术属于蛋白质工程，理由是_____。 A. 通过含有双质粒的农杆菌转化棉花细胞 B. 将苏云金杆菌Bt基因导入棉花细胞中表达 C. 将1-1362基因序列改变为棉花细胞偏好密码子的基因序列 D. 用1-1362合成基因序列和1363-1848天然基因序列获得改造的抗虫蛋白 【答案】（1） ①. 除去蛋白质杂质 ②. 溶解蛋白质等物质，析出不溶于酒精的DNA （2） ①. PCR技术扩增 ②. 人工合成 （3）增强目的基因的表达 （4）HygBR （5） ①. F3 ②. R2 （6）D 【解析】 【小问1详解】 从苏云金杆菌提取DNA时，需加入蛋白酶，其作用是水解蛋白质，使得DNA与蛋白质分离。提取过程中加入体积分数为95%的预冷酒精，其目的是溶解蛋白质等物质，析出不溶于酒精的DNA，该过程依据DNA不溶于酒精的原理实现。 【小问2详解】 本操作中获取目的基因的方法是PCR技术扩增和人工合成。 【小问3详解】 穿梭质粒中p35s为启动子，驱动目的基因转录，插入两个p35s启动子，其目的是保证目的基因的转录，增强目的基因的表达。 【小问4详解】 结合基因表达载体的示意图可知，图中穿梭质粒上有KanR和HygBR两个标记基因的位置，HygBR位于T-DNA上，用HygBR基因对应的抗生素初步筛选转化的棉花愈伤组织。标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的受体细胞筛选出来。 【小问5详解】 为检测棉花植株是否导入目的基因，拼接重组的DNA片段是由人工合成的1-1362基因序列和1363-1848基因序列组成，引物应在目的基因的两端，因此提取棉花植株染色体DNA作模板，进行PCR，应选用的引物是F3和R2。 【小问6详解】 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求，本研究采用的部分生物技术属于蛋白质工程，理由是用1-1362合成基因序列和1363-1848天然基因序列获得改造的抗虫蛋白，将1-1362基因序列改变为棉花细胞偏好密码子的基因序列，未产生新的蛋白质，不属于蛋白质工程，D正确，ABC错误。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025—2026学年度第二学期桦南一中期中考试 生物学 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求的。 1. 下列工具组合中，可用于构建基因表达载体的是（ ） A. 限制酶、DNA聚合酶、质粒 B. 限制酶、DNA连接酶、噬菌体 C. 解旋酶、DNA连接酶、动植物病毒 D. 逆转录酶、限制酶、质粒 2. 人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列叙述错误的是（ ） A. 细胞融合前应去除细胞壁 B. 聚乙二醇试剂可促进细胞融合 C. 融合的细胞即为杂交细胞 D. 杂交细胞可能具有生长快速的优势 3. 将目的基因导入不同受体细胞时，需采用不同的方法。下列导入方法与受体细胞的对应关系错误的是（ ） A. 农杆菌转化法——棉花细胞 B. 显微注射法——小鼠受精卵 C. Ca2+处理法——大肠杆菌细胞 D. 花粉管通道法——噬菌体 4. 下列关于基因表达载体构建的叙述，正确的是（ ） A. 启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，位于目的基因下游 B. 标记基因的作用是筛选含有目的基因的受体细胞，不能用于筛选含有重组载体的细胞 C. 终止子的作用是终止转录过程，使RNA聚合酶从DNA上脱离 D. 目的基因与载体的连接必须通过限制酶切割产生的黏性末端实现 5. 某生物兴趣小组为验证“错误存放口罩会增加口罩上的微生物数量”，小组同学在实验室中将直接存放在书包中的口罩剪下一小块，用无菌镊子轻轻放置在平板培养基上，然后取走小块，一段时间后观察菌落的数目。下列叙述正确的是（　　） A. 实验中的培养基应为液体培养基，要进行严格灭菌处理 B. 实验还应设置“剪取无菌包装口罩上等大的小块”进行对照实验 C. 可以根据菌落数大致推测出活菌数，而菌落数往往大于活菌数 D. 实验进行前需对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌 6. 某质粒载体复制原点（ori）、四环素抗性基因（tetr）、氨苄青霉素抗性基因（ampr），其中ampr中含Hind Ⅲ切割位点，tetr中含Bgl Ⅱ切割位点。下列关于该质粒作为基因工程载体的叙述，错误的是（ ） A. ori的存在保证质粒能在受体细胞中复制 B. 导入该质粒的受体细胞可在含四环素的培养基中存活 C. 若用Hind Ⅲ切割质粒，会破坏ampr的功能 D. 该质粒具备基因工程载体的基本条件 7. 琼脂糖凝胶电泳常用于核酸样品的分析，样品1～4的电泳结果如图所示（“+”“-”分别代表电泳槽的阳极和阴极）。已知样品1和2中的DNA分子分别是甲和乙，甲只有限制酶R的一个酶切位点，样品3和4中有一个样品是甲的酶切产物。下列叙述错误的是（ ） A. 配制琼脂糖凝胶时需选用适当的缓冲溶液 B. 该实验条件下甲、乙两种DNA分子均带负电荷 C. 甲、乙两种DNA分子所含碱基对的数量可能不同 D. 据图推测样品3可能是甲被酶R完全酶切后的产物 8. 下列关于动物细胞培养及干细胞的应用的叙述，正确的是（　　） A. 细胞在贴壁生长的过程中会出现接触抑制现象，但不影响细胞分裂 B. CO2培养箱中含有95%O2和5%CO2，CO2的主要作用是刺激细胞呼吸 C. 胚胎干细胞具有全能性，主要存在于早期胚胎、骨髓和脐带血中 D. iPS细胞有细胞周期，它分化形成的神经细胞一般不具有细胞周期 9. 下列有关无菌技术的说法，其中正确的有几项（　　） ①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物 ②煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子 ③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，所以不能在常温长期保存 ④用紫外线消毒前，适量喷洒苯酚或煤酚皂，可以加强消毒效果 ⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌 ⑥培养皿、吸管可用干热灭菌法灭菌 A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项 10. 营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。下图是科研人员利用影印法（用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上）初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。下列叙述错误的是（ ） A. ①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养 B. 进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至完全培养基上，再“复印”至基本培养基上 C. 氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上对应位置有的菌落中挑选 D. ①过程接种方法统计出的菌落数往往比活菌的实际数目多，因此统计结果用菌落数而不是用活菌数表示 11. 下图是“三亲婴儿”培育过程示意图，相关叙述错误的是（ ） A. 透明带反应和卵细胞膜反应是过程①形成二倍体受精卵的保障 B. 应用该技术可阻断血友病女性患者致病基因遗传给后代 C. 捐献者卵母细胞受精更有利于重组受精卵的分裂分化 D. 雌雄原核的融合是受精完成的标志 12. 幽门螺旋杆菌于2017年被世界卫生组织列入一类致癌物。幽门螺旋杆菌主要寄生于人体胃中，是引起很多消化道疾病的首要致病细菌。体检时可通过13C尿素呼气试验来检测幽门螺旋杆菌感染情况。受试者口服13C标记的尿素胶囊后，尿素可被幽门螺旋杆菌产生的脲酶催化分解为NH3和13CO2。定时收集受试者吹出的气体并测定其中是否含有13CO2。以下叙述正确的是（　　） A. 幽门螺旋杆菌属于原核生物，代谢类型是自养型 B. 受试者吹出的气体中不含有13CO2说明感染幽门螺杆菌的风险较高 C. 幽门螺旋杆菌可以产生脲酶，但不具有内质网和高尔基体 D. 幽门螺旋杆菌不适宜在酸性条件下生存 13. 应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效益。如图表示培育生物新品种的过程，请据图判断下列叙述中正确的是（ ） A. 图中①过程需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶和载体 B. 图中⑤过程需要的培养基中只需加入无机营养和植物激素 C. 将prG导入细胞I，细胞I是B淋巴细胞 D. 可用相应抗原进行抗原—抗体杂交，检测抗虫基因是否成功表达 14. 我国是全球最大的发酵产品生产国，下图为发酵工程的基本环节，其中①～④代表不同的过程。下列叙述错误的是（　　） A. ①过程也可用基因工程或人工诱变选育菌种，是发酵工程的中心环节 B. 啤酒发酵和果醋发酵时，②过程中均需通入无菌空气进行扩大培养 C. 在③过程中，发酵罐与配制好的培养基都必须经过严格的灭菌处理 D. 如果要获得单细胞蛋白，④过程中可用过滤、沉淀等方法获得产品 15. 马铃薯在生长期易受多种病毒侵染而严重减产。科研人员通过农杆菌介导法，将4种病毒CP融合基因导入马铃薯，获得多抗转基因马铃薯，有效解决了多种病毒的侵染问题。其转化中所涉及的CP融合基因、Ti质粒部分结构如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） 注∶ClaⅠ、BamHⅠ、HindⅢ、KpnⅠ、SacⅠ为相应限制酶的识别位点，Kan片段为卡那霉素抗性基因片段 A. 具体操作过程中CP融合基因需先经PCR扩增，再进行凝胶电泳加以分离和鉴定 B. 为了使CP融合基因能在马铃薯叶细胞中表达，可从马铃薯任何部位细胞中获取启动子1 C. 应选择BamHⅠ和SacⅠ同时处理CP融合基因所在的DNA分子和Ti质粒 D. 若经限制酶处理的CP融合基因与Ti质粒反向连接，会导致CP融合基因不能正常表达 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 16. 为培育具有市场竞争力的无籽柑橘，研究者设计如下流程。相关叙述正确的是（ ） A. 过程①需使用胰蛋白酶处理 B. 实现过程②依赖膜的流动性 C. 过程③需应用植物组培技术 D. 三倍体植株可产生无籽柑橘 17. 科学家通过将细胞核尚未融合的小鼠受精卵中的雄原核移除后，获得了孤雌单倍体囊胚，并从中获得孤雌单倍体胚胎干细胞（haESCs）。该细胞具有胚胎干细胞的特征和发育潜能。科研人员将haESCs注入同种小鼠卵细胞中获得了“双母”小鼠。下列说法错误的是（　　） A. 通过显微操作法去除受精卵中的雄原核时可观察到两个极体 B. haESCs可以取自孤雌单倍体囊胚的内细胞团或滋养层 C. haESCs具备自我更新能力和分化为其他类型细胞的能力 D. “双母”小鼠的体细胞中遗传物质的含量多于普通小鼠 18. 长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图，图2是科研人员通过杂交-杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产双特异性单克隆抗体的部分过程。下列叙述正确的有（　　） A. 与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是灭活病毒诱导法 B. 过程②选用的骨髓瘤细胞具有无限增殖的特点，该细胞产生原因是抑癌基因发生突变 C. 双特异性单克隆抗体能将长春碱定向带到癌细胞所在位置，对人体的副作用较小 D. 过程①⑤步骤分别注射癌胚抗原和长春碱的目的是刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞 19. “低乳糖奶牛”的诞生有望给乳糖不耐受症患者提供“放心奶”。如图是“低乳糖奶牛”的培育过程，下列叙述正确的是（ ） A. 重组细胞1培养后可以不取核，直接注入去核卵母细胞 B. 胚胎成纤维细胞分化程度高，核移植难度高于体细胞核移植 C. 犊牛的遗传物质不完全来自黑白花奶牛和乳糖酶基因 D. 犊牛成年后与普通牛杂交，子代有1/2是低乳糖奶牛 20. 甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质，某科研人员采用农杆菌转化法将甜蛋白基因（含有1178个碱基对）导入番茄，希望能提高番茄甜味，改善果实品质。甜蛋白基因和Ti质粒上限制酶切位点如图1、2所示；提取培育出的转基因番茄细胞中的DNA，依据甜蛋白基因两端的特异性序列设计引物，进行PCR扩增，对扩增产物进行电泳，结果如图3。下列叙述错误的是（ ） A. PCR扩增甜蛋白基因时，应该根据基因两端的3'端序列设计引物 B. 选择限制酶XbaI和EcoRI切割质粒和含有甜蛋白基因的DNA片段 C. 可用含有卡那霉素的培养基对成功导入表达载体的农杆菌进行筛选 D. 仅由图3电泳结果不能判断1、2、3、4号转基因番茄是否培育成功 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。 回答下列问题： （1）在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是______。 （2）采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，通常可采用______法对培养基进行灭菌。 （3）酵母菌扩大培养的过程中，利用血细胞计数板进行计数，发现血细胞计数板每个小方格平均含有9个酵母菌，则对应的酵母菌种群密度是______个/mL。将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是______。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，目的是______。发酵液中的乙醇可用______溶液检测。 （4）本实验收集的淋洗液中的______可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点有______（写出两点）。 22. 两只克隆小猴“中中”和“华华”是世界首例非人灵长类动物的体细胞克隆猴，这是我国的研究成果。一年后5只世界首例生物节律紊乱的体细胞克隆猴诞生。下图为培育克隆猴的流程，回答问题： （1）在“中中”“华华”之前，科学家已培育了胚胎细胞克隆猴，胚胎细胞核移植难度明显低于体细胞核移植的原因是________。 （2）科学家首先将采集的卵母细胞培养至________期，然后去核，这里的“去核”实际上是指去除________。核移植过程中用灭活的仙台病毒进行了短暂处理，其目的是________。体外培养重构胚时，需提供适宜的营养及环境条件，推测环境条件包括________。（答出两点）。最后将胚胎移植到经过________处理的代孕母猴体内，最终产出克隆小猴。 （3）我国科研团队采集一只睡眠紊乱最明显的BMAL1基因敲除的猕猴的体细胞，通过核移植技术获得了5只克隆猴，理论上这5只克隆猴之间的细胞核基因型________（填“相同”或“不相同”或“不一定相同”）。为验证上述5只基因敲除猕猴存在昼夜节律紊乱问题，科学家用检测设备监测实验猴，通过行为学分析检测其是否明显表现出睡眠紊乱的症状，对照组的设置应为________。 23. 白菜（AA，2n=20）、甘蓝（CC，2n=18）是人们餐桌上的常见蔬菜，营养价值高、染色体数目少。研究人员通过植物体细胞杂交技术培育了甘蓝型油菜（流程如图），并展开了深入研究。请回答下列问题： （1）甘蓝型油菜的叶肉细胞中含有____条染色体，含有____个染色体组。 （2）进行上述杂交过程前，应使用____酶去除植物细胞壁，再用____（试剂名称）处理白菜和甘蓝的原生质体进行膜融合。获得杂种细胞后进行植物组织培养，脱分化阶段的光照条件为____，再分化过程的影响因素有____（请写出两点）。 （3）甘蓝型油菜有平展叶和上卷叶两种叶形，研究人员分别测定12叶期幼苗单株的叶绿素含量、光合速率、气孔导度等，其结果如下表： 组别 叶绿素a （mg/g） 叶绿素b （mg/g） 净光合速率 （umolCO2/m2·s） 气孔导度（molH2O/m2·s） 胞间CO2浓度 （umolCO2/mol） 平展叶 4.2 2.7 8.7 0.18 461.0 上卷叶 6.7 3.5 12.6 0.21 397.5 ①叶绿素存在于叶绿体的_____（场所名称），主要吸收可见光中的_____光。 ②在两组植株呼吸速率相同的情况下，据表中数据分析，上卷叶净光合速率大于平展叶的原因是_____（答2点）。 24. 重组质粒构建及导入流程：目的基因（人胰岛素基因）→与含氨苄青霉素抗性基因、四环素抗性基因的质粒（含EcoR I、BamH I酶切位点）→双酶切后连接→导入大肠杆菌→筛选培养。胰岛素是治疗糖尿病的重要药物，科学家利用基因工程技术生产人胰岛素的部分流程如下。 回答下列问题： （1）获取人胰岛素基因时，可从人体胰岛B细胞中提取mRNA，通过逆转录获得cDNA，该方法的优点是______。 （2）构建重组表达载体时，用EcoR I和BamH I两种限制酶对目的基因和质粒进行双酶切，与单酶切相比，双酶切的优势是______（答出两点）。 （3）将重组质粒导入大肠杆菌时，需用Ca²+处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，感受态细胞的特点是______。 （4）筛选含重组质粒的大肠杆菌时，将转化后的菌液接种到含氨苄青霉素的培养基上，长出的菌落______（填“一定”或“不一定”）含重组质粒，原因是______若要进一步筛选，可采用的方法是_____（答出一种即可）。 25. 将天然Ti质粒改造成含有Vir基因的辅助质粒（作用为辅助T-DNA转移）和不含有Vir基因、含有T-DNA的穿梭质粒，共同转入农杆菌，可提高转化效率。细菌和棉花对密码子偏好不同，为提高翻译效率，增强棉花抗病虫害能力，进行如下操作。回答下列问题。 （1）从苏云金杆菌提取DNA时，需加入蛋白酶，其作用是_____。提取过程中加入体积分数为95%的预冷酒精，其目的是______。 （2）本操作中获取目的基因的方法是_____和______。 （3）穿梭质粒中p35s为启动子，驱动目的基因转录，插入两个p35s启动子，其目的可能是_____。 （4）根据图中穿梭质粒上的KanR和HygBR两个标记基因的位置，用_____基因对应的抗生素初步筛选转化的棉花愈伤组织。 （5）为检测棉花植株是否导入目的基因，提取棉花植株染色体DNA作模板，进行PCR，应选用的引物是_____和_____。 （6）本研究采用的部分生物技术属于蛋白质工程，理由是_____。 A. 通过含有双质粒的农杆菌转化棉花细胞 B. 将苏云金杆菌Bt基因导入棉花细胞中表达 C. 将1-1362基因序列改变为棉花细胞偏好密码子的基因序列 D. 用1-1362合成基因序列和1363-1848天然基因序列获得改造的抗虫蛋白 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $