3.2基因工程的基本操作程序知识点清单 2025-2026学年高二下学期生物人教版选择性必修3

该高中生物学高考复习知识清单聚焦基因工程基本操作程序，涵盖目的基因筛选与获取、基因表达载体构建、目的基因导入受体细胞、检测与鉴定四大核心模块，细化PCR技术、载体组成、导入方法等关键知识点。 清单采用问答式呈现与答案对照设计，突出核心步骤标注，如“基因表达载体构建”为核心步骤，包含PCR扩增计算、农杆菌转化法等应用实例，培养科学思维与探究实践素养。分点明确且关联紧密，助力学生系统梳理知识，教师可据此精准指导复习。

3.2 基因工程的基本操作程序（1） 班级 姓名 1.基因工程的基本操作程序： 、 、 、 。其中核心步骤是 。 2.目的基因是用于改变受体细胞 或获得预期表达 等的基因，主要是指 的基因。 3.Bt基因编码的Bt抗虫蛋白能破坏鳞翅目昆虫的 来杀死棉铃虫。 4.筛选目的基因较为有效的方法之一是从相关的 的基因中进行筛选。 获取目的基因的方法有：用DNA合成仪 ；利用 获取和扩增；通过构建 来获取。 5.PCR的全称是 。它是根据 和 的原理，在体外提供参与DNA复制的 与 ，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。 6.PCR反应的基本条件是 7.PCR反应缓冲液中一般要添加 ，目的是 。PCR扩增目的基因时， 是否需要知道目的基因的全部碱基序列，但必须要知道目的基因 的碱基序列，目的是 。 8.引物是一小段能与DNA母链的 端碱基互补配对，是一小段短单链 ，长度通常为 个核苷酸。 9.DNA聚合酶可将4种脱氧核苷酸加到引物的 端，因此子链的合成方向是 端→ 端。 10.PCR可使目的基因以 形式扩增，约为 ，其中n为扩增循环次数。在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。循环n次，共需要消耗 对引物。循环n次，得到两条脱氧核苷酸链等长的DNA分子数 ，得到两条链不等长的DNA分子数 。 11.PCR每次循环可分为 、 、 三步，相应温度分别是 、 、 。 12.PCR扩增设备是 ，常采用 来鉴定PCR的产物。 13.构建基因表达载体的目的是 ； 。 14.基因表达载体的组成 、 、 、 、 。 15.启动子和终止子都是一段有特殊序列结构的 ，分别位于基因的 游和 游， 是 识别和结合的部位，它们能驱动和终止基因的 过程。 16.起始密码子和终止密码子是 上三个相邻的碱基组成，它们是驱动和终止 过程。 3.2 基因工程的基本操作程序（1）答案 1.目的基因的筛选与获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 基因表达载体的构建 2.性状 产物 编码蛋白质 3.消化系统 4.已知结构和功能清晰 人工合成 PCR 基因文库 5.聚合酶链式反应 DNA半保留复制 热变性 各种组分 反应条件 6.DNA模板、4种脱氧核苷酸、2种引物、耐高温的DNA聚合酶、缓冲液 7.Mg2+ 激活DNA聚合酶 不 两端 设计引物 8.3' DNA 20-30 9.3' 5' 3' 10.指数 2n 3 2n-1 2n-2n 2n 11.变性 复性 延伸 90℃以上 50℃ 72℃ 12.PCR扩增仪 琼脂糖凝胶电泳 13.使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代 使目的基因能够表达和发挥作用 14.启动子 终止子 目的基因 标记基因 复制原点 15.DNA片段 上 下 RNA聚合酶 转录 16.mRNA 翻译 3.2 基因工程的基本操作程序（2） 班级 姓名 17.构建基因表达载体时，首先用一定的 切割载体，使它出现一个切口；然后用 限制酶或 限制酶切割含目的基因的DNA片段；再利用 将目的基因片段拼接到载体的切口处。 18.将目的基因导入植物细胞常用的方法是 ，还有我国科学家独创的方法是 。 19.农杆菌在自然条件下侵染 植物和 植物，而对大多数 植物没有侵染能力。当它侵染植物细胞后，能将 上的 转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的 上。 根据农杆菌的这种特点，如果将目的基因插入 ，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞。 20.将目的基因导入动物细胞最常用的方法是 ，受体细胞是 。 21.将目的基因导入微生物细胞常用的方法 ，使细胞处于 的生理状态。 22.目的基因的检测与鉴定：分子水平检测：①通过 和DNA分子杂交等技术检测受体细胞的染色体DNA上是否插入目的基因；②通过 和分子杂交等技术检测目的基因是否转录出了 ；③从转基因植物中提取 ，用相应的抗体进行 ，检测目的基因是否翻译成 。 个体生物学水平的鉴定：对转基因生物进行 接种实验，以确定是否具有抗性以及抗性程度；基因工程产品的功能活性需要与天然产品进行比较。 23.DNA分子具有 的基团，在一定的 下，这些集团带上正电荷或者负电荷，在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷 的电极移动，这个过程就是 。 24.PCR的产物一般通过 来鉴定，在凝胶中DNA分子的迁移速度与 、 等有关。凝胶中DNA通过染色，可以在波长300nm的 下被检测出来。 25.为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行 处理。缓冲液和酶应分装成小份，并在 储存。使用前，将所需试剂从冰箱拿出，放在冰块上 融化。添加反应组分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须 。 26.凝胶电泳时，通常DNA的迁移方向是由 极向 极迁移；DNA片段越短，迁移速度越 。 3.2 基因工程的基本操作程序（2）答案 17.限制酶 同种 能产生相同黏性末端 DNA连接酶 18.农杆菌转化法 花粉管通道法 19.双子叶 裸子 单子叶 Ti质粒 T-DNA 染色体DNA TI质粒的T-DNA上 20.显微注射法 受精卵 21.Ca2+处理法 一种能吸收周围环境中DNA分子 22.PCR PCR mRNA 蛋白质 抗原-抗体杂交 蛋白质 抗性 23.可解离的基团 pH 相反 电泳 24.琼脂糖凝胶电泳 凝胶的浓度 DNA分子的大小和构象 紫外灯 25.高压灭菌 -20℃ 缓慢 更换 26.负 正 快 学科网（北京）股份有限公司 $