学易金卷：高二生物下学期第三次月考（广东专用）

**基本信息** 以人教版选择性必修3为核心，融合科技前沿（如CRISPR/Cas9系统、脑修复凝胶）、文化传承（客家糯米酒酿造技艺）等真实情境，通过选择与非选择梯度设计，考查生命观念、科学思维及探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|16题/40分|发酵工程、植物组织培养、生物技术安全性等|原创题（第1题发酵工程环节）、社会热点（第3题生物技术伦理）| |非选择题|5题/60分|基因工程操作、胚胎工程、发酵技术应用等|综合题（18题CRISPR/Cas9编辑tetx基因）、实验设计（17题奶啤发酵酵母计数）|

2025-2026学年高二生物下学期第三次月考卷 参考答案 一、选择题：题共16个小题，第1-12小题，每小题2分，第13-16小题，每小题4分，共40分。 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 答案 D B A B D C C D 题号 9 10 11 12 13 14 15 16 答案 C A C A C D D D 二、非选择题：本部分共5小题，共60分。 17．（12分，除特殊说明外，每空2分） (1) 淀粉酶（α-淀粉酶）（1分） 糖化（1分） (2)醋酸菌是好氧细菌，在无氧条件下不能存活，而乳酸菌是厌氧细菌，在有氧条件下不能存活 (3) 当样品的稀释倍数足够高时，培养基表面生长的一个单菌落来源于样品稀释液中的一个活菌 1.22×1010（1分） (4) 延长（1分） 环境条件不仅影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成 灭菌处理或巴氏消毒（1分） (5)较小（1分） 18．（12分，除特殊说明外，每空2分） (1) 限制（或限制性内切核酸）（1分） Cas9蛋白需要sgRNA引导才能靶向结合到目的基因的特定区域并进行切割，而限制性内切核酸酶能自己识别双链DNA分子的特定核苷酸序列并进行切割 (2) NdeI（1分） BamHI（1分） 30（1分） (3)使目的基因在受体细胞内稳定表达并能遗传给子代 (4) 发酵罐内发酵（1分） 菌体（1分） 是原核生物，无生物膜系统（内质网和高尔基体）对蛋白质进行加工，无法直接生产有功能的蛋白质 19．（12分，除特殊说明外，每空2分） (1) 平（1分） 537bp、790bp、661bp（1分） (2) 自我复制 一至多个限制酶切割位点 (3) b（1分） 质粒P（1分） (4) 噬菌体 动植物病毒 20．（12分，除特殊说明外，每空2分） (1) （脱氧）核苷酸（1分） （琼脂糖）凝胶电泳（1分） (2) DNA连接酶（1分） Hem1基因/5-ALA合成酶基因（1分） RNA聚合酶（1分） 感受态（1分） (3) 5（1分） 后期培养过程中农杆菌过度增殖伤害外植体 (4) 转录（1分） 5-ALA迅速转变成其他重要物质/5-ALA迅速合成其他重要物质 21．（12分，除特殊说明外，每空2分） (1) 精子获能（1分） 两个极体（或雌、雄原核）（1分） 内细胞团（1分） (2) 脱分化（1分） 免疫排斥 (3) 有害代谢产物积累，营养物质缺乏 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） A8301和DMH1能够抑制TGF-β和BMP信号通路，抑制类胚体分化为内胚层和中胚层，促进类胚体分化为外胚层，进而分化成神经干细胞 / 学科网（北京）股份有限公司 $2025-2026学年高二生物下学期第三次月考卷 生物·答题卡 姓 名： 准考证号： 贴条形码区 注意事项 1.答题前，考生先将自己的姓名，准考证号填写清楚，并认真核准 考生禁填： 缺考标记 口 条形码上的姓名、准考证号，在规定位置贴好条形码。 违纪标记 ▣ 2.选择题必须用2B铅笔填涂：非选择题必须用0.5m黑色签字笔 以上标志由监考人员用2B铅笔填涂 答题，不得用铅笔或圆珠笔答题；字体工整、笔迹清晰。 3.请按题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出区域书写的答案 选择题填涂样例： 无效：在草稿纸、试题卷上答题无效。 正确填涂■ 4. 保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破。 错误填涂[×]【1【/] 选择题：本题共16个小题，第1-12小题，每小题2分，第13-16小题，每小题4分，共40分。 每小题只有一个选项符合题目要求。 1[AJ[BIICJID] 6[A][BIICJ[D] 11[AJ[BJICJID] 16.[AI[BI[CI[D] 2.[AJIB]IC]ID] 7AJIBJICJID] 12.[AJ[BJIC][D] 3.[AJ[B][C][D] 8[A][BJIC][D] 13.[A][B][C][D] 4[AJ[B][C][D] 9[A][B][C][D] 14[AJ[B][C][D] 二、 非选择题。（本部分共5小题，共计60分） 17. (12分，除特殊说明外，每空2分) (1) (1分) (1分) (2) (3) (1分) (4) (1分) (1分) (5) (1分) 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效！ 18. (12分，除标记外，每空2分) (1) (1分) (2) (1分) (1分) (1分) (3) (4) (1分) (1分) 19. (12分，除特殊说明外， 每空2分) (1) (1分) (1分) (2) (3) (1分) (1分) (4) 20. (12分，除特殊说明外， 每空2分) (1) (1分) (1分) (2) (1分) (1分) (1分) (1分) (3) (1分) (4) (1分) 21. (12分，除特殊说明外， 每空2分) (1) (1分) (1分) (1分) (2) (1分) (3)………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… 此卷只装订不密封 ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… … 学校：______________姓名：_____________班级：_______________考号：______________________ 2025-2026学年高二生物下学期第三次月考卷 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．测试范围：人教版选择性必修3全册。 5．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题：本题共16个小题，第1-12小题，每小题2分，第13-16小题，每小题4分，共40分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1．（原创题）下列关于发酵工程基本环节的叙述，正确的是（　） A.发酵工程中所用的菌种都需通过基因工程构建 B.培养基在配制后可直接接入菌种进行发酵 C.发酵工程的中心环节是菌种的扩大培养 D.发酵过程中需严格控制温度、pH和溶解氧等条件 2．（改编题）我国科学家发现，植物体细胞在特定条件下可进入一种名为“GMC-auxin”的过渡状态，该状态的细胞重新获得了分裂和分化的能力，可像受精卵一样最终发育成完整植株。在植物组织培养中，与这种“过渡状态”对应的关键步骤是（　） A.获取离体的植物器官或组织 B.外植体经诱导形成愈伤组织的过程 C.愈伤组织经诱导形成芽和根的过程 D.试管苗移栽后逐渐长成完整植株的过程 3．（社会热点）20世纪70年代以后，一大批生物技术成果进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用，甚至利用分子遗传学等知识和技术把改造生命的幻想变成现实。生物技术的发展在造福人类的同时也可能带来潜在的危害。下列有关生物技术的安全性与伦理问题的描述，正确的是（    ） A．将目的基因导入叶绿体基因组可以有效地防止基因污染 B．经济、文化和伦理道德观念的不同不会影响人们对转基因技术的看法 C．生殖性克隆和治疗性克隆的结果本质是相同的，都不会面临伦理问题 D．人体不会对转基因技术制造的具有超强的传染性和致病性的新型病原体产生免疫反应 4．惠州客家糯米酒酿造技艺是广东省非物质文化遗产，其制作流程主要包括浸米、蒸饭、摊凉、拌曲、落缸发酵、压榨、炙烤等步骤。下列叙述正确的是（    ） A．蒸饭后摊凉，目的是防止高温导致微生物中的蛋白质肽键断裂 B．拌曲时，加入的酒曲含有的糖化菌能将淀粉分解为葡萄糖 C．落缸发酵后期，缸内酒精浓度升高促进了酵母菌的种群数量增加 D．炙烤时，使酒液保持90℃ 1～2小时，可彻底杀灭其中的微生物 5．我国是全球最大的发酵产品生产国，图为发酵工程的基本环节，其中①～④代表不同的过程。下列叙述错误的是（    ） A．扩大培养时常用液体培养基，有利于微生物的增殖 B．通过发酵工程可以生产多种抗生素、氨基酸、激素和疫苗等 C．发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节，果醋发酵时需不断通入无菌空气 D．如果要获得单细胞蛋白，可采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品 6．科研人员从粘质沙雷氏菌中分离获得了限制酶SmaⅠ，其识别并切割的DNA序列为5´-CCC↓GGG-3´。下列叙述正确的是（　　） A．限制酶的活性不受外界温度影响 B．该限制酶可破坏磷酸二酯键和氢键 C．该限制酶切割DNA分子后形成平末端 D．沙雷氏菌中的SmaⅠ可破坏自身DNA分子 7．下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（    ） A．选择新鲜洋葱或猪肝等作为实验材料 B．95%的酒精预冷能加快DNA的析出 C．DNA在2mol/L NaCl溶液中溶解度低 D．实验组和对照组都需加二苯胺来鉴定 8．某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A．步骤①所代表的过程是逆转录 B．步骤③可用处理大肠杆菌 C．检验Q蛋白是否生成，可用禽流感康复的鸡的血清进行抗原—抗体杂交 D．可以在培养基中直接培养禽流感病毒 9．如图表示蛋白质工程的操作过程，下列相关说法不正确的是（　　） A．a、b过程分别是转录、翻译 B．蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作 C．蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术 D．蛋白质工程中可能构建出一种全新的基因 10．植物细胞工程在很多方面有着广泛的应用。下列相关叙述错误的是（　　） A．微型繁殖技术能高效繁殖种苗，但不利于保持优良品种的遗传特性 B．作物脱毒一般选择植物顶端分生区进行组织培养 C．植物细胞培养不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制 D．单倍体植株可以作为体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料 11．如图是制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列说法错误的是（    ） A．步骤①给小鼠注射IL-6后，应从脾中分离筛选B淋巴细胞 B．步骤②在脾组织中加入胰蛋白酶处理后，用培养液制成细胞悬液 C．步骤③只能采用灭活病毒诱导法诱导细胞融合 D．步骤④筛选得到的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体 12．如图为烟草植物组织培养过程的流程图，下列有关叙述错误的是（    ） A．过程③发生脱分化，其实质是基因的选择性表达 B．过程②应根据要求使用适宜的培养基，在避光的环境中进行 C．对过程①获取的根组织块应做消毒处理 D．植物组织培养的理论基础是植物细胞一般具有全能性 13．蜡样芽孢杆菌是潜伏在餐桌上的常见食源性致病菌，呕吐毒素是其分泌到胞外的一种环肽，该毒素极耐高温。下列叙述错误的是（　　） A．呕吐毒素是蜡样芽孢杆菌产生的一种次生代谢物 B．呕吐毒素极耐高温的特性可能与其环状结构相关 C．呕吐毒素的环状结构与内质网、高尔基体的加工有关 D．剩饭常温冷却后放入冰箱会增加蜡样芽孢杆菌的污染 14．杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，成为受广大消费者喜欢的绵羊品种。科研工作者通过胚胎工程技术快速繁殖杜泊羊，流程如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．给雌性杜泊羊注射促性腺激素可获得多枚卵母细胞 B．体外培养卵母细胞至减数分裂Ⅱ中期才具备受精能力 C．检测卵母细胞外是否出现两个极体判断受精是否成功 D．收集发育良好的原肠胚移植到发情期的普通绵羊子宫内 15．在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。相关叙述正确的是（　　） A．巴氏消毒法可以杀死牛奶中绝大多数的微生物，并且不会破坏牛奶中的蛋白质 B．消毒是用强烈的理化方法杀死物体内外的所有微生物 C．配制好培养基后，先高压蒸汽灭菌，后定容 D．采用紫外线照射消毒前，适量喷洒石炭酸，可强化消毒效果 16．我国科学家研发的“脑修复凝胶”可激活患者脑内的内源性神经干细胞，使其分化为成熟神经元，并建立功能连接，帮助脑卒中患者恢复运动功能。下列相关叙述错误的是（　　） A．激活的内源性神经干细胞可发生定向分化，体现了干细胞的分化潜能 B．与传统的药物保护相比，“主动再生”策略更侧重于重建神经通路结构 C．该研究表明成年哺乳动物中枢神经系统仍保留一定程度的可塑性 D．神经元死亡后，可通过残存神经元的分裂增殖实现受损区域的修复 第Ⅱ卷二、非选择题：共5小题，共60分。 17．奶啤是一种含牛奶的啤酒，是通过微生物发酵将麦汁中的麦芽糖和其他糖类转化为乙酸和乳酸，配以一定比例的原料乳，再经过酒精发酵制作而成，工艺流程如图所示。请回答下列问题： (1)酵母不能直接利用淀粉，可用赤霉素溶液浸泡大麦种子，诱导种子无需发芽也能产生__________酶，同时粉碎过程有利于大麦粉与酶的充分接触，以缩短图中所示的__________过程的时间。 (2)接种醋酸菌和乳酸菌制作发酵乳，促进前期酸味的形成。醋酸菌和乳酸菌在同一容器中进行发酵时，不能同时产生乙酸和乳酸，原因是___________。 (3)主发酵阶段在菌种活化的过程中，需定时取样，检测酵母的生长状况。可利用稀释涂布平板法检测酵母菌的数量，其原理是__________。也可以利用显微镜直接统计计数，若某次样品经3次10倍稀释后，在25×16型血细胞计数板上统计的5个中格中的细胞数为244个，该样品中酵母细胞的密度为__________个/mL。 (4)主发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期应__________（填“延长”或“缩短”）排气时间间隔。在发酵过程中，要严格控制发酵条件，原因是_________。从食品安全的角度考虑，上述工艺流程图中①的操作应该是_________。 (5)敲除酿酒酵母中的某个蛋白酶基因，减少发酵液中蛋白的水解，有助于增强啤酒泡沫的稳定性。用蛋白固体培养基筛选敲除了该基因的酵母菌，野生型可以水解酪蛋白，在菌落周围形成透明圈。筛选时，应选择透明圈__________（“较大”或“较小”）的菌落。 18．CRISPR/Cas9系统通过具有序列特异性的向导RNA（sgRNA）引导Cas9蛋白靶向结合到目的基因的特定区域，并在特定位置切断DNA双链，相关机制如图1所示。环境中常被检出四环素类抗生素的残留，为获得能高效降解四环素的菌株，科研人员利用CRISPR/Cas9系统编辑获得了高表达的四环素降解酶基因（tetx），并利用基因工程构建出一种能高效降解四环素的工程菌，相关过程如图2所示，其中不同限制酶切割形成的末端不同。请回答下列问题： (1)Cas9蛋白与基因工程中使用的________酶功能相似，二者的区别主要是________。 (2)为了将tetx基因准确地整合到质粒的插入位点，在对tetx基因进行PCR扩增时，需在引物F1和F2的5'端分别添加限制酶________和________的识别序列。将1个tetx基因经过PCR扩增完成4轮循环，理论上至少加入引物的数量是________个。 (3)图2中重组基因表达载体构建的目的是________。 (4)利用发酵工程生产四环素降解酶时，其中心环节是________；培养过程中可定期取样并使用血细胞计数板对________（填“菌体”或“菌落”）进行直接计数，以评估增殖情况。在工程菌选择上，选用酵母菌而不选用大肠杆菌，原因是大肠杆菌________。 19．图1表示含有目的基因的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示质粒P的部分结构，其中Tetr为四环素抗性基因，Ampr为氨苄青霉素抗性基因。已知BamH Ⅰ和Sma Ⅰ限制酶切割的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC和CCC↓GGG。请回答下列问题： (1)若用限制酶Sma Ⅰ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是_______末端，其产物长度为_______。 (2)图2中质粒具有一些特征，如质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能_______；质粒DNA分子上有_______，便于外源DNA插入。 (3)影印接种是将灭菌绒布按到图3培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到图4培养基上培养，图4中空圈表示与图3对照无菌落的位置，推测可能导入了重组质粒的菌落是_______（用字母表示）。图4结果显示，多数大肠杆菌导入的是_______。 (4)在基因工程中使用的载体除质粒外，还有_______、_______等。 20．5-ALA是一种非蛋白氨基酸，是多种重要物质合成的关键前体，外源施用5-ALA可以提高多种农作物的光合速率。研究人员将酿酒酵母菌的5-ALA合成酶基因（Heml）和拟南芥HemA1启动子重组，构建了重组基因（YHem1），然后转入草莓体内，获得了3株转基因草莓植株，为草莓新品种的选育创造了条件。（说明：农杆菌过度增殖、卡那霉素浓度过高均会限制植物细胞的正常生长。）请分析回答： (1)拟南芥HemA1启动子和酿酒酵母菌Hem1的克隆：查阅基因数据库获取拟南芥HemA1启动子的_______序列，设计引物进行PCR扩增，通过_______鉴定并（切胶）回收扩增产物。用同样的方法获取Hem1基因。 (2)重组表达载体的构建：分别将拟南芥HemA1启动子、酿酒酵母菌Hem1和表达载体进行酶切处理，利用___________连接，获得重组表达载体。得到的重组表达载体含有卡那霉素（Km）抗性基因、拟南芥启动子、____________、终止子、复制原点等，拟南芥启动子是___________识别和结合的部位，决定了Hem1基因表达的效率。将得到的重组表达载体转化处于___________的农杆菌，筛选得到成功转化的农杆菌。 (3)草莓外植体的转化和培养：将叶段外植体放入含有YHem1的根癌农杆菌悬液中进行不同时间的侵染，黑暗条件下培养一段时间，检测不定芽再生率，结果如图： 根据实验结果，侵染时间应选择________分钟。侵染时间过长，叶段外植体容易死亡，主要原因是__________，可通过在培养基中适当添加一些抗生素解决。 (4)转基因草莓鉴定：以草莓DNA为模板进行PCR扩增YHem1，发现3株草莓为转YHem1基因株系，再提取3株草莓的总RNA，通过RT-PCR技术（逆转录PCR技术，以RNA为模板逆转录形成cDNA，再进行PCR扩增）均扩增出了目的条带，说明YHem1基因能在这3株草莓成功________。3株草莓都合成了有活性的5-ALA合成酶，但草莓细胞中的5-ALA含量并没有明显增加，原因最可能是______________。 21．帕金森病是一种常见的神经系统退行性疾病。科学研究证实，干细胞在治疗帕金森领域有很大潜力。通过干细胞再生，移植到患者体内，补充缺失或缺损的神经细胞，有望从根本上治疗帕金森。 (1)胚胎干细胞存在于早期胚胎，通过体外受精、体外培养获得早期胚胎。 ①精子获得受精能力的生理现象称为__________。常以观察到____________作为受精的标志。 ②可以从受精卵培养得到的桑葚胚或囊胚的________中获得胚胎干细胞。 (2)从早期胚胎中获得人胚胎干细胞存在伦理问题。研究人员把病人的体细胞通过体外诱导，获得类似胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞（简称iPS），该过程类似于植物组织培养中的_________（过程）。这不仅解决了伦理问题，也避免了异体移植导致的_________问题。 (3)人iPS经体外培养诱导出神经干细胞的过程如图： ①悬浮培养的细胞因为____________而停止分裂。贴壁培养的细胞需要用_________（答1种酶）处理使之分散成单个细胞，再进行传代培养。 ②研究者在培养基中加入小分子化合物A8301和DMH1，这两种物质能够促进神经干细胞的形成，据图分析最可能的原因是_______。 试题 第7页（共8页） 试题 第8页（共8页） 试题 第1页（共8页） 试题 第2页（共8页） 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年高二生物下学期第三次月考卷 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．测试范围：人教版选择性必修3全册。 5．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题：本题共16个小题，第1-12小题，每小题2分，第13-16小题，每小题4分，共40分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1．（原创题）下列关于发酵工程基本环节的叙述，正确的是（　） A.发酵工程中所用的菌种都需通过基因工程构建 B.培养基在配制后可直接接入菌种进行发酵 C.发酵工程的中心环节是菌种的扩大培养 D.发酵过程中需严格控制温度、pH和溶解氧等条件 2．（改编题）我国科学家发现，植物体细胞在特定条件下可进入一种名为“GMC-auxin”的过渡状态，该状态的细胞重新获得了分裂和分化的能力，可像受精卵一样最终发育成完整植株。在植物组织培养中，与这种“过渡状态”对应的关键步骤是（　） A.获取离体的植物器官或组织 B.外植体经诱导形成愈伤组织的过程 C.愈伤组织经诱导形成芽和根的过程 D.试管苗移栽后逐渐长成完整植株的过程 3．（社会热点）20世纪70年代以后，一大批生物技术成果进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用，甚至利用分子遗传学等知识和技术把改造生命的幻想变成现实。生物技术的发展在造福人类的同时也可能带来潜在的危害。下列有关生物技术的安全性与伦理问题的描述，正确的是（    ） A．将目的基因导入叶绿体基因组可以有效地防止基因污染 B．经济、文化和伦理道德观念的不同不会影响人们对转基因技术的看法 C．生殖性克隆和治疗性克隆的结果本质是相同的，都不会面临伦理问题 D．人体不会对转基因技术制造的具有超强的传染性和致病性的新型病原体产生免疫反应 4．惠州客家糯米酒酿造技艺是广东省非物质文化遗产，其制作流程主要包括浸米、蒸饭、摊凉、拌曲、落缸发酵、压榨、炙烤等步骤。下列叙述正确的是（    ） A．蒸饭后摊凉，目的是防止高温导致微生物中的蛋白质肽键断裂 B．拌曲时，加入的酒曲含有的糖化菌能将淀粉分解为葡萄糖 C．落缸发酵后期，缸内酒精浓度升高促进了酵母菌的种群数量增加 D．炙烤时，使酒液保持90℃ 1～2小时，可彻底杀灭其中的微生物 5．我国是全球最大的发酵产品生产国，图为发酵工程的基本环节，其中①～④代表不同的过程。下列叙述错误的是（    ） A．扩大培养时常用液体培养基，有利于微生物的增殖 B．通过发酵工程可以生产多种抗生素、氨基酸、激素和疫苗等 C．发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节，果醋发酵时需不断通入无菌空气 D．如果要获得单细胞蛋白，可采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品 6．科研人员从粘质沙雷氏菌中分离获得了限制酶SmaⅠ，其识别并切割的DNA序列为5´-CCC↓GGG-3´。下列叙述正确的是（　　） A．限制酶的活性不受外界温度影响 B．该限制酶可破坏磷酸二酯键和氢键 C．该限制酶切割DNA分子后形成平末端 D．沙雷氏菌中的SmaⅠ可破坏自身DNA分子 7．下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（    ） A．选择新鲜洋葱或猪肝等作为实验材料 B．95%的酒精预冷能加快DNA的析出 C．DNA在2mol/L NaCl溶液中溶解度低 D．实验组和对照组都需加二苯胺来鉴定 8．某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A．步骤①所代表的过程是逆转录 B．步骤③可用处理大肠杆菌 C．检验Q蛋白是否生成，可用禽流感康复的鸡的血清进行抗原—抗体杂交 D．可以在培养基中直接培养禽流感病毒 9．如图表示蛋白质工程的操作过程，下列相关说法不正确的是（　　） A．a、b过程分别是转录、翻译 B．蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作 C．蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术 D．蛋白质工程中可能构建出一种全新的基因 10．植物细胞工程在很多方面有着广泛的应用。下列相关叙述错误的是（　　） A．微型繁殖技术能高效繁殖种苗，但不利于保持优良品种的遗传特性 B．作物脱毒一般选择植物顶端分生区进行组织培养 C．植物细胞培养不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制 D．单倍体植株可以作为体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料 11．如图是制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列说法错误的是（    ） A．步骤①给小鼠注射IL-6后，应从脾中分离筛选B淋巴细胞 B．步骤②在脾组织中加入胰蛋白酶处理后，用培养液制成细胞悬液 C．步骤③只能采用灭活病毒诱导法诱导细胞融合 D．步骤④筛选得到的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体 12．如图为烟草植物组织培养过程的流程图，下列有关叙述错误的是（    ） A．过程③发生脱分化，其实质是基因的选择性表达 B．过程②应根据要求使用适宜的培养基，在避光的环境中进行 C．对过程①获取的根组织块应做消毒处理 D．植物组织培养的理论基础是植物细胞一般具有全能性 13．蜡样芽孢杆菌是潜伏在餐桌上的常见食源性致病菌，呕吐毒素是其分泌到胞外的一种环肽，该毒素极耐高温。下列叙述错误的是（　　） A．呕吐毒素是蜡样芽孢杆菌产生的一种次生代谢物 B．呕吐毒素极耐高温的特性可能与其环状结构相关 C．呕吐毒素的环状结构与内质网、高尔基体的加工有关 D．剩饭常温冷却后放入冰箱会增加蜡样芽孢杆菌的污染 14．杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，成为受广大消费者喜欢的绵羊品种。科研工作者通过胚胎工程技术快速繁殖杜泊羊，流程如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．给雌性杜泊羊注射促性腺激素可获得多枚卵母细胞 B．体外培养卵母细胞至减数分裂Ⅱ中期才具备受精能力 C．检测卵母细胞外是否出现两个极体判断受精是否成功 D．收集发育良好的原肠胚移植到发情期的普通绵羊子宫内 15．在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。相关叙述正确的是（　　） A．巴氏消毒法可以杀死牛奶中绝大多数的微生物，并且不会破坏牛奶中的蛋白质 B．消毒是用强烈的理化方法杀死物体内外的所有微生物 C．配制好培养基后，先高压蒸汽灭菌，后定容 D．采用紫外线照射消毒前，适量喷洒石炭酸，可强化消毒效果 16．我国科学家研发的“脑修复凝胶”可激活患者脑内的内源性神经干细胞，使其分化为成熟神经元，并建立功能连接，帮助脑卒中患者恢复运动功能。下列相关叙述错误的是（　　） A．激活的内源性神经干细胞可发生定向分化，体现了干细胞的分化潜能 B．与传统的药物保护相比，“主动再生”策略更侧重于重建神经通路结构 C．该研究表明成年哺乳动物中枢神经系统仍保留一定程度的可塑性 D．神经元死亡后，可通过残存神经元的分裂增殖实现受损区域的修复 第Ⅱ卷二、非选择题：共5小题，共60分。 17．奶啤是一种含牛奶的啤酒，是通过微生物发酵将麦汁中的麦芽糖和其他糖类转化为乙酸和乳酸，配以一定比例的原料乳，再经过酒精发酵制作而成，工艺流程如图所示。请回答下列问题： (1)酵母不能直接利用淀粉，可用赤霉素溶液浸泡大麦种子，诱导种子无需发芽也能产生__________酶，同时粉碎过程有利于大麦粉与酶的充分接触，以缩短图中所示的__________过程的时间。 (2)接种醋酸菌和乳酸菌制作发酵乳，促进前期酸味的形成。醋酸菌和乳酸菌在同一容器中进行发酵时，不能同时产生乙酸和乳酸，原因是___________。 (3)主发酵阶段在菌种活化的过程中，需定时取样，检测酵母的生长状况。可利用稀释涂布平板法检测酵母菌的数量，其原理是__________。也可以利用显微镜直接统计计数，若某次样品经3次10倍稀释后，在25×16型血细胞计数板上统计的5个中格中的细胞数为244个，该样品中酵母细胞的密度为__________个/mL。 (4)主发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期应__________（填“延长”或“缩短”）排气时间间隔。在发酵过程中，要严格控制发酵条件，原因是_________。从食品安全的角度考虑，上述工艺流程图中①的操作应该是_________。 (5)敲除酿酒酵母中的某个蛋白酶基因，减少发酵液中蛋白的水解，有助于增强啤酒泡沫的稳定性。用蛋白固体培养基筛选敲除了该基因的酵母菌，野生型可以水解酪蛋白，在菌落周围形成透明圈。筛选时，应选择透明圈__________（“较大”或“较小”）的菌落。 18．CRISPR/Cas9系统通过具有序列特异性的向导RNA（sgRNA）引导Cas9蛋白靶向结合到目的基因的特定区域，并在特定位置切断DNA双链，相关机制如图1所示。环境中常被检出四环素类抗生素的残留，为获得能高效降解四环素的菌株，科研人员利用CRISPR/Cas9系统编辑获得了高表达的四环素降解酶基因（tetx），并利用基因工程构建出一种能高效降解四环素的工程菌，相关过程如图2所示，其中不同限制酶切割形成的末端不同。请回答下列问题： (1)Cas9蛋白与基因工程中使用的________酶功能相似，二者的区别主要是________。 (2)为了将tetx基因准确地整合到质粒的插入位点，在对tetx基因进行PCR扩增时，需在引物F1和F2的5'端分别添加限制酶________和________的识别序列。将1个tetx基因经过PCR扩增完成4轮循环，理论上至少加入引物的数量是________个。 (3)图2中重组基因表达载体构建的目的是________。 (4)利用发酵工程生产四环素降解酶时，其中心环节是________；培养过程中可定期取样并使用血细胞计数板对________（填“菌体”或“菌落”）进行直接计数，以评估增殖情况。在工程菌选择上，选用酵母菌而不选用大肠杆菌，原因是大肠杆菌________。 19．图1表示含有目的基因的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示质粒P的部分结构，其中Tetr为四环素抗性基因，Ampr为氨苄青霉素抗性基因。已知BamH Ⅰ和Sma Ⅰ限制酶切割的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC和CCC↓GGG。请回答下列问题： (1)若用限制酶Sma Ⅰ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是_______末端，其产物长度为_______。 (2)图2中质粒具有一些特征，如质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能_______；质粒DNA分子上有_______，便于外源DNA插入。 (3)影印接种是将灭菌绒布按到图3培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到图4培养基上培养，图4中空圈表示与图3对照无菌落的位置，推测可能导入了重组质粒的菌落是_______（用字母表示）。图4结果显示，多数大肠杆菌导入的是_______。 (4)在基因工程中使用的载体除质粒外，还有_______、_______等。 20．5-ALA是一种非蛋白氨基酸，是多种重要物质合成的关键前体，外源施用5-ALA可以提高多种农作物的光合速率。研究人员将酿酒酵母菌的5-ALA合成酶基因（Heml）和拟南芥HemA1启动子重组，构建了重组基因（YHem1），然后转入草莓体内，获得了3株转基因草莓植株，为草莓新品种的选育创造了条件。（说明：农杆菌过度增殖、卡那霉素浓度过高均会限制植物细胞的正常生长。）请分析回答： (1)拟南芥HemA1启动子和酿酒酵母菌Hem1的克隆：查阅基因数据库获取拟南芥HemA1启动子的_______序列，设计引物进行PCR扩增，通过_______鉴定并（切胶）回收扩增产物。用同样的方法获取Hem1基因。 (2)重组表达载体的构建：分别将拟南芥HemA1启动子、酿酒酵母菌Hem1和表达载体进行酶切处理，利用___________连接，获得重组表达载体。得到的重组表达载体含有卡那霉素（Km）抗性基因、拟南芥启动子、____________、终止子、复制原点等，拟南芥启动子是___________识别和结合的部位，决定了Hem1基因表达的效率。将得到的重组表达载体转化处于___________的农杆菌，筛选得到成功转化的农杆菌。 (3)草莓外植体的转化和培养：将叶段外植体放入含有YHem1的根癌农杆菌悬液中进行不同时间的侵染，黑暗条件下培养一段时间，检测不定芽再生率，结果如图： 根据实验结果，侵染时间应选择________分钟。侵染时间过长，叶段外植体容易死亡，主要原因是__________，可通过在培养基中适当添加一些抗生素解决。 (4)转基因草莓鉴定：以草莓DNA为模板进行PCR扩增YHem1，发现3株草莓为转YHem1基因株系，再提取3株草莓的总RNA，通过RT-PCR技术（逆转录PCR技术，以RNA为模板逆转录形成cDNA，再进行PCR扩增）均扩增出了目的条带，说明YHem1基因能在这3株草莓成功________。3株草莓都合成了有活性的5-ALA合成酶，但草莓细胞中的5-ALA含量并没有明显增加，原因最可能是______________。 21．帕金森病是一种常见的神经系统退行性疾病。科学研究证实，干细胞在治疗帕金森领域有很大潜力。通过干细胞再生，移植到患者体内，补充缺失或缺损的神经细胞，有望从根本上治疗帕金森。 (1)胚胎干细胞存在于早期胚胎，通过体外受精、体外培养获得早期胚胎。 ①精子获得受精能力的生理现象称为__________。常以观察到____________作为受精的标志。 ②可以从受精卵培养得到的桑葚胚或囊胚的________中获得胚胎干细胞。 (2)从早期胚胎中获得人胚胎干细胞存在伦理问题。研究人员把病人的体细胞通过体外诱导，获得类似胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞（简称iPS），该过程类似于植物组织培养中的_________（过程）。这不仅解决了伦理问题，也避免了异体移植导致的_________问题。 (3)人iPS经体外培养诱导出神经干细胞的过程如图： ①悬浮培养的细胞因为____________而停止分裂。贴壁培养的细胞需要用_________（答1种酶）处理使之分散成单个细胞，再进行传代培养。 ②研究者在培养基中加入小分子化合物A8301和DMH1，这两种物质能够促进神经干细胞的形成，据图分析最可能的原因是_______。 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年高二生物下学期第三次月考卷 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．测试范围：人教版选择性必修3全册。 5．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题：本题共16个小题，第1-12小题，每小题2分，第13-16小题，每小题4分，共40分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1．（原创题）下列关于发酵工程基本环节的叙述，正确的是（　） A.发酵工程中所用的菌种都需通过基因工程构建 B.培养基在配制后可直接接入菌种进行发酵 C.发酵工程的中心环节是菌种的扩大培养 D.发酵过程中需严格控制温度、pH和溶解氧等条件 【答案】D 【详解】A、发酵工程的菌种来源包括自然界筛选、诱变育种和基因工程构建等多种方式，并不是所有菌种都必须通过基因工程获得，A错误； B、培养基配制后，必须进行严格的灭菌操作，以杀灭杂菌，避免对后续发酵造成污染，不能直接接入菌种，B错误； C、发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵过程；菌种的扩大培养属于发酵前的准备环节，并非中心环节，C错误； D、在发酵过程中，温度、pH和溶解氧等环境条件直接影响菌种的生长和代谢产物的合成，需要严格监测和控制，D正确； 2．（改编题）我国科学家发现，植物体细胞在特定条件下可进入一种名为“GMC-auxin”的过渡状态，该状态的细胞重新获得了分裂和分化的能力，可像受精卵一样最终发育成完整植株。在植物组织培养中，与这种“过渡状态”对应的关键步骤是（　） A.获取离体的植物器官或组织 B.外植体经诱导形成愈伤组织的过程 C.愈伤组织经诱导形成芽和根的过程 D.试管苗移栽后逐渐长成完整植株的过程 【答案】B 【详解】A、外植体获取仅是物理分离，细胞仍保持原有的分化状态，A错误； B、再分化是全能性的表达与器官建成的过程，而非“重获全能性”，B正确； C、愈伤组织经诱导形成芽和根属于再分化，再分化是全能性的表达与器官建成的过程，C错误； D、试管苗移栽后逐渐长成完整植株属于植株的正常生长发育，D错误； 3．（社会热点）20世纪70年代以后，一大批生物技术成果进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用，甚至利用分子遗传学等知识和技术把改造生命的幻想变成现实。生物技术的发展在造福人类的同时也可能带来潜在的危害。下列有关生物技术的安全性与伦理问题的描述，正确的是（    ） A．将目的基因导入叶绿体基因组可以有效地防止基因污染 B．经济、文化和伦理道德观念的不同不会影响人们对转基因技术的看法 C．生殖性克隆和治疗性克隆的结果本质是相同的，都不会面临伦理问题 D．人体不会对转基因技术制造的具有超强的传染性和致病性的新型病原体产生免疫反应 【答案】A 【详解】A、叶绿体基因组属于细胞质基因，植物花粉中的精子几乎不含细胞质，因此将目的基因导入叶绿体基因组后，目的基因不会随花粉传播扩散到其他植物，可有效防止基因污染，A正确； B、经济发展水平、文化背景、伦理道德观念的不同，会导致不同人群对转基因技术的安全性、应用价值等方面的看法存在较大差异，B错误； C、生殖性克隆的目的是培育完整个体（克隆人），严重违反人类伦理道德，我国明令禁止；治疗性克隆的目的是获取可用于疾病治疗的干细胞、组织或器官，二者本质不同，且生殖性克隆面临严重的伦理争议，C错误； D、转基因技术制造的新型病原体本质属于抗原，进入人体后会被免疫系统识别并引发免疫反应，因为该病原体传染性、致病性较强，可能出现免疫反应不足以清除病原体的情况，D错误。 4．惠州客家糯米酒酿造技艺是广东省非物质文化遗产，其制作流程主要包括浸米、蒸饭、摊凉、拌曲、落缸发酵、压榨、炙烤等步骤。下列叙述正确的是（    ） A．蒸饭后摊凉，目的是防止高温导致微生物中的蛋白质肽键断裂 B．拌曲时，加入的酒曲含有的糖化菌能将淀粉分解为葡萄糖 C．落缸发酵后期，缸内酒精浓度升高促进了酵母菌的种群数量增加 D．炙烤时，使酒液保持90℃ 1～2小时，可彻底杀灭其中的微生物 【答案】B 【详解】A、高温会使微生物的蛋白质空间结构被破坏而变性失活，但不会断裂肽键，摊凉的目的是防止高温杀死酒曲中的功能微生物，A错误； B、糯米的主要成分为淀粉，酒曲中的糖化菌可合成淀粉酶，将淀粉分解为葡萄糖，为后续酵母菌发酵提供底物，B正确； C、酒精对酵母菌有毒害作用，发酵后期酒精浓度升高会抑制酵母菌的繁殖，甚至导致酵母菌死亡，其种群数量会下降，C错误； D、90℃处理1~2小时仅能杀死大部分微生物，无法杀灭芽孢和孢子，不能实现彻底灭菌，D错误。 5．我国是全球最大的发酵产品生产国，图为发酵工程的基本环节，其中①～④代表不同的过程。下列叙述错误的是（    ） A．扩大培养时常用液体培养基，有利于微生物的增殖 B．通过发酵工程可以生产多种抗生素、氨基酸、激素和疫苗等 C．发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节，果醋发酵时需不断通入无菌空气 D．如果要获得单细胞蛋白，可采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品 【答案】D 【详解】A、扩大培养菌种时，液体培养基可让微生物充分接触营养物质，更利于微生物增殖，A正确； B、发酵工程可生产多种类型产品，包括抗生素、氨基酸、激素、疫苗等，B正确； C、发酵罐内的发酵是发酵工程产生目的产物的核心环节，属于中心环节；果醋发酵的菌种醋酸菌是好氧菌，发酵过程需要不断通入无菌空气，C正确； D、单细胞蛋白本身就是微生物菌体，获得单细胞蛋白通过过滤、沉淀等方法分离收集菌体，D错误。 6．科研人员从粘质沙雷氏菌中分离获得了限制酶SmaⅠ，其识别并切割的DNA序列为5´-CCC↓GGG-3´。下列叙述正确的是（　　） A．限制酶的活性不受外界温度影响 B．该限制酶可破坏磷酸二酯键和氢键 C．该限制酶切割DNA分子后形成平末端 D．沙雷氏菌中的SmaⅠ可破坏自身DNA分子 【答案】C 【详解】A、限制酶的化学本质是蛋白质，酶的活性受温度、pH等外界环境因素的影响，A错误； B、限制酶的作用是切割DNA分子中的磷酸二酯键，不破坏碱基对之间的氢键，B错误； C、该限制酶的切割位点位于识别序列的中轴线处，切割后DNA两条链的末端没有单链突出，形成平末端，C正确； D、沙雷氏菌自身的DNA分子中该限制酶的识别序列会经过甲基化等修饰，不会被自身的SmaⅠ切割破坏，D错误。 7．下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（    ） A．选择新鲜洋葱或猪肝等作为实验材料 B．95%的酒精预冷能加快DNA的析出 C．DNA在2mol/L NaCl溶液中溶解度低 D．实验组和对照组都需加二苯胺来鉴定 【答案】C 【详解】A、新鲜洋葱、猪肝细胞中DNA含量丰富，适合作为DNA粗提取的实验材料，A正确； B、预冷的95%酒精可降低DNA溶解度，还能抑制核酸酶活性减少DNA降解，能加快DNA析出、提高DNA纯度，B正确； C、DNA在0.14mol/L NaCl溶液中溶解度最低，在2mol/L NaCl溶液中溶解度很高，C错误； D、DNA鉴定遵循对照原则，实验组（含DNA的溶液）和对照组（不含DNA的空白溶液）都需加入二苯胺试剂沸水浴加热，通过颜色对比验证DNA的显色反应，D正确。 8．某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A．步骤①所代表的过程是逆转录 B．步骤③可用处理大肠杆菌 C．检验Q蛋白是否生成，可用禽流感康复的鸡的血清进行抗原—抗体杂交 D．可以在培养基中直接培养禽流感病毒 【答案】D 【详解】A、步骤①是以禽流感病毒的RNA为模板合成DNA，该过程是逆转录，A正确； B、步骤③是将重组质粒转入到受体细胞大肠杆菌中，常使用CaCl2处理，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，B正确； C、Q蛋白是禽流感病毒的抗原，禽流感康复鸡的血清中含有针对Q蛋白的抗体，因此可用抗原-抗体杂交检验Q蛋白是否生成，C正确； D、病毒无细胞结构，必须寄生在活细胞内才能完成增殖，不能在普通培养基中直接培养，D错误。 9．如图表示蛋白质工程的操作过程，下列相关说法不正确的是（　　） A．a、b过程分别是转录、翻译 B．蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作 C．蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术 D．蛋白质工程中可能构建出一种全新的基因 【答案】C 【详解】A、a过程是以DNA的一条链为模板合成mRNA的转录过程，b过程是以mRNA为模板合成具有一定氨基酸顺序的多肽链的翻译过程，A正确； B、蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求，因此蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作，B正确； C、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，C错误； D、蛋白质工程中，可能根据已经明确的蛋白质的结构构建出一种全新的基因，D正确。 10．植物细胞工程在很多方面有着广泛的应用。下列相关叙述错误的是（　　） A．微型繁殖技术能高效繁殖种苗，但不利于保持优良品种的遗传特性 B．作物脱毒一般选择植物顶端分生区进行组织培养 C．植物细胞培养不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制 D．单倍体植株可以作为体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料 【答案】A 【详解】A、微型繁殖技术的本质是植物无性繁殖，遗传物质与亲本完全一致，可稳定保持优良品种的遗传特性，A错误； B、植物顶端分生区细胞分裂旺盛，病毒极少甚至无病毒，因此作物脱毒一般选择该区域进行组织培养，B正确； C、植物细胞培养是在实验室无菌人工环境中利用培养基完成，不需要占用耕地，几乎不受季节、天气等自然条件限制，C正确； D、单倍体植株的细胞中仅含一套染色体组，一旦发生基因突变（包括隐性突变）可直接在性状上表现出来，因此是体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料，D正确。 11．如图是制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列说法错误的是（    ） A．步骤①给小鼠注射IL-6后，应从脾中分离筛选B淋巴细胞 B．步骤②在脾组织中加入胰蛋白酶处理后，用培养液制成细胞悬液 C．步骤③只能采用灭活病毒诱导法诱导细胞融合 D．步骤④筛选得到的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体 【答案】C 【详解】A、用特定的抗原IL-6对小鼠进行免疫，从小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，A正确； B、步骤②需要在组织中加入胰蛋白酶，使其分散成单细胞，进而用培养液制成悬液，B正确； C、步骤③是诱导细胞融合过程，诱导动物细胞的常用方法有PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法，C错误； D、④为第一次筛选，得到多种杂交瘤细胞，经⑤第二次筛选后，才能得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，D正确。 12．如图为烟草植物组织培养过程的流程图，下列有关叙述错误的是（    ） A．过程③发生脱分化，其实质是基因的选择性表达 B．过程②应根据要求使用适宜的培养基，在避光的环境中进行 C．对过程①获取的根组织块应做消毒处理 D．植物组织培养的理论基础是植物细胞一般具有全能性 【答案】A 【详解】A、②将植物组织块培养成愈伤组织是脱分化，③将愈伤组织培养成胚状体是再分化，A错误； B、不同植物对培养基，pH、温度、光照的要求往往不同，在外植体形成愈伤组织的过程中，即②脱分化不需要光照，B正确； C、对过程①获取的根组织块应做消毒处理，防止杂菌污染，C正确； D、植物组织培养将植物细胞培养成植物个体，体现了细胞的全能性，D正确。 13．蜡样芽孢杆菌是潜伏在餐桌上的常见食源性致病菌，呕吐毒素是其分泌到胞外的一种环肽，该毒素极耐高温。下列叙述错误的是（　　） A．呕吐毒素是蜡样芽孢杆菌产生的一种次生代谢物 B．呕吐毒素极耐高温的特性可能与其环状结构相关 C．呕吐毒素的环状结构与内质网、高尔基体的加工有关 D．剩饭常温冷却后放入冰箱会增加蜡样芽孢杆菌的污染 【答案】C 【详解】A、次生代谢物是微生物生长到一定阶段产生的、并非其生长繁殖所必需的物质，呕吐毒素属于蜡样芽孢杆菌分泌的毒素类物质，属于次生代谢物，A正确； B、肽类的热稳定性和空间结构有关，环状肽的结构比链状肽更稳定，因此呕吐毒素极耐高温的特性可能与其环状结构相关，B正确； C、蜡样芽孢杆菌是原核生物，仅含有核糖体一种细胞器，无内质网、高尔基体等具膜细胞器，因此呕吐毒素的加工不可能与内质网、高尔基体有关，C错误； D、剩饭常温冷却过程中温度适宜蜡样芽孢杆菌大量繁殖，即使后续放入冰箱仅能抑制其增殖，已存在的大量菌体仍会增加污染风险，D正确。 14．杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，成为受广大消费者喜欢的绵羊品种。科研工作者通过胚胎工程技术快速繁殖杜泊羊，流程如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．给雌性杜泊羊注射促性腺激素可获得多枚卵母细胞 B．体外培养卵母细胞至减数分裂Ⅱ中期才具备受精能力 C．检测卵母细胞外是否出现两个极体判断受精是否成功 D．收集发育良好的原肠胚移植到发情期的普通绵羊子宫内 【答案】D 【详解】A、用促性腺激素（如FSH）处理雌性杜泊羊，可诱导其超数排卵，从而获得更多卵母细胞，A正确； B、卵母细胞需从卵巢中采集后培养至MⅡ期（减数第二次分裂中期）才能进行受精，B正确； C、当在卵母细胞外观察到两个极体（第一极体和第二极体）时，说明受精成功，这是判断受精完成的标志之一，C正确； D、胚胎移植的最佳阶段是桑葚胚或囊胚，而非原肠胚阶段。牛、羊的胚胎移植通常选择囊胚，而小鼠、家兔则在桑葚胚前移植，D错误。 15．在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。相关叙述正确的是（　　） A．巴氏消毒法可以杀死牛奶中绝大多数的微生物，并且不会破坏牛奶中的蛋白质 B．消毒是用强烈的理化方法杀死物体内外的所有微生物 C．配制好培养基后，先高压蒸汽灭菌，后定容 D．采用紫外线照射消毒前，适量喷洒石炭酸，可强化消毒效果 【答案】D 【详解】A、巴氏消毒法采用相对较低的温度处理牛奶，可杀死绝大多数微生物，仅会少量破坏牛奶中的蛋白质，最大程度保留营养，并非完全不破坏蛋白质，A错误； B、消毒是用温和的理化方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子），使用强烈理化方法杀死物体内外所有微生物（含芽孢、孢子）的操作是灭菌，B错误； C、配制培养基的正确顺序是计算、称量、溶化、定容、调pH、高压蒸汽灭菌、倒平板，若先灭菌后定容会引入杂菌，且无法保证培养基浓度准确，C错误； D、紫外线的穿透能力较弱，消毒前适量喷洒石炭酸等消毒剂，既可以促进空气中悬浮的微生物沉降，也可协同紫外线发挥杀菌作用，强化消毒效果，D正确。 16．我国科学家研发的“脑修复凝胶”可激活患者脑内的内源性神经干细胞，使其分化为成熟神经元，并建立功能连接，帮助脑卒中患者恢复运动功能。下列相关叙述错误的是（　　） A．激活的内源性神经干细胞可发生定向分化，体现了干细胞的分化潜能 B．与传统的药物保护相比，“主动再生”策略更侧重于重建神经通路结构 C．该研究表明成年哺乳动物中枢神经系统仍保留一定程度的可塑性 D．神经元死亡后，可通过残存神经元的分裂增殖实现受损区域的修复 【答案】D 【详解】A、内源性神经干细胞属于多能干细胞，被激活后可定向分化为成熟神经元，体现了干细胞具备分化为特定功能细胞的分化潜能，A正确； B、传统药物保护的核心是减少神经元损伤、留存现有神经组织，而“主动再生”策略通过诱导干细胞分化为神经元并建立功能连接，更侧重重建神经通路结构，B正确； C、该研究可激活成年个体脑内的神经干细胞分化产生新的功能神经元，说明成年哺乳动物中枢神经系统仍保留一定程度的可塑性，C正确； D、神经元是高度分化的终末细胞，已经丧失分裂增殖的能力，无法通过残存神经元的分裂增殖实现受损区域的修复，D错误。 第Ⅱ卷 二、非选择题：共5小题，共60分。 17．（12分，除特殊说明外，每空2分）奶啤是一种含牛奶的啤酒，是通过微生物发酵将麦汁中的麦芽糖和其他糖类转化为乙酸和乳酸，配以一定比例的原料乳，再经过酒精发酵制作而成，工艺流程如图所示。请回答下列问题： (1)酵母不能直接利用淀粉，可用赤霉素溶液浸泡大麦种子，诱导种子无需发芽也能产生__________酶，同时粉碎过程有利于大麦粉与酶的充分接触，以缩短图中所示的__________过程的时间。 (2)接种醋酸菌和乳酸菌制作发酵乳，促进前期酸味的形成。醋酸菌和乳酸菌在同一容器中进行发酵时，不能同时产生乙酸和乳酸，原因是___________。 (3)主发酵阶段在菌种活化的过程中，需定时取样，检测酵母的生长状况。可利用稀释涂布平板法检测酵母菌的数量，其原理是__________。也可以利用显微镜直接统计计数，若某次样品经3次10倍稀释后，在25×16型血细胞计数板上统计的5个中格中的细胞数为244个，该样品中酵母细胞的密度为__________个/mL。 (4)主发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期应__________（填“延长”或“缩短”）排气时间间隔。在发酵过程中，要严格控制发酵条件，原因是_________。从食品安全的角度考虑，上述工艺流程图中①的操作应该是_________。 (5)敲除酿酒酵母中的某个蛋白酶基因，减少发酵液中蛋白的水解，有助于增强啤酒泡沫的稳定性。用蛋白固体培养基筛选敲除了该基因的酵母菌，野生型可以水解酪蛋白，在菌落周围形成透明圈。筛选时，应选择透明圈__________（“较大”或“较小”）的菌落。 【答案】(1) 淀粉酶（α-淀粉酶）（1分） 糖化（1分） (2)醋酸菌是好氧细菌，在无氧条件下不能存活，而乳酸菌是厌氧细菌，在有氧条件下不能存活 (3) 当样品的稀释倍数足够高时，培养基表面生长的一个单菌落来源于样品稀释液中的一个活菌 1.22×1010（1分） (4) 延长（1分） 环境条件不仅影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成 灭菌处理或巴氏消毒（1分） (5)较小（1分） 【详解】（1）酵母不能直接利用淀粉，可用赤霉素溶液浸泡大麦种子，诱导种子无需发芽也能产生淀粉酶（α-淀粉酶），同时粉碎过程有利于大麦粉与酶的充分接触，以缩短图中所示的糖化（淀粉酶将淀粉分解成糖浆）过程的时间。 （2）接种醋酸菌和乳酸菌制作发酵乳，促进前期酸味的形成。醋酸菌和乳酸菌在同一容器中进行发酵时，不能同时产生乙酸和乳酸，原因是醋酸菌是好氧细菌，在无氧条件下不能存活，而乳酸菌是厌氧细菌，在有氧条件下不能存活。 （3）主发酵阶段在菌种活化的过程中，需定时取样，检测酵母的生长状况。可利用稀释涂布平板法检测酵母菌的数量，该操作的原理是当样品的稀释倍数足够高时，培养基表面生长的一个单菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，这样可根据菌落的数目判断样液中的活菌数；在25×16型血细胞计数板上共有25个中格，5个中格中的细胞数为244个，该样品中活酵母细胞的密度为244÷5×25×103×104=1.22×1010个细胞/mL。 （4）主发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期反应速率变慢，应延长排气时间间隔。在发酵过程中，要严格控制发酵条件，如温度、溶解氧，发酵液的浓度等，这是因为环境条件不仅影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。从食品安全的角度考虑，上述工艺流程图中①的操作应该是从食品安全的角度考虑，在上市或入库前应进行①灭菌处理或巴氏消毒处理。 （5）用酪蛋白固体培养基筛选敲除某个蛋白酶基因的酿酒酵母，野生型可以水解酪蛋白，在菌落周围形成透明圈。因此需要筛选透明圈较小的菌落，表明其蛋白酶活性较低，这样的酵母菌能减少发酵液中蛋白的水解，有助于增强啤酒泡沫的稳定性，从而改善啤酒的品质。 18．（12分，除特殊说明外，每空2分）CRISPR/Cas9系统通过具有序列特异性的向导RNA（sgRNA）引导Cas9蛋白靶向结合到目的基因的特定区域，并在特定位置切断DNA双链，相关机制如图1所示。环境中常被检出四环素类抗生素的残留，为获得能高效降解四环素的菌株，科研人员利用CRISPR/Cas9系统编辑获得了高表达的四环素降解酶基因（tetx），并利用基因工程构建出一种能高效降解四环素的工程菌，相关过程如图2所示，其中不同限制酶切割形成的末端不同。请回答下列问题： (1)Cas9蛋白与基因工程中使用的________酶功能相似，二者的区别主要是________。 (2)为了将tetx基因准确地整合到质粒的插入位点，在对tetx基因进行PCR扩增时，需在引物F1和F2的5'端分别添加限制酶________和________的识别序列。将1个tetx基因经过PCR扩增完成4轮循环，理论上至少加入引物的数量是________个。 (3)图2中重组基因表达载体构建的目的是________。 (4)利用发酵工程生产四环素降解酶时，其中心环节是________；培养过程中可定期取样并使用血细胞计数板对________（填“菌体”或“菌落”）进行直接计数，以评估增殖情况。在工程菌选择上，选用酵母菌而不选用大肠杆菌，原因是大肠杆菌________。 【答案】(1) 限制（或限制性内切核酸）（1分） Cas9蛋白需要sgRNA引导才能靶向结合到目的基因的特定区域并进行切割，而限制性内切核酸酶能自己识别双链DNA分子的特定核苷酸序列并进行切割 (2) NdeI（1分） BamHI（1分） 30（1分） (3)使目的基因在受体细胞内稳定表达并能遗传给子代 (4) 发酵罐内发酵（1分） 菌体（1分） 是原核生物，无生物膜系统（内质网和高尔基体）对蛋白质进行加工，无法直接生产有功能的蛋白质 【详解】（1）根据图示分析可知，Cas9蛋白可切开DNA分子的磷酸二酯键，这与基因工程中限制性内切核酸酶的功能相似。根据题意可知，Cas9蛋白需要sgRNA引导才能靶向结合到目的基因的特定区域并进行切割，而限制性内切核酸酶能自己识别双链DNA分子的特定核苷酸序列并进行切割。 （2）由于BamHI和NdeI位于启动子和终止子之间，所以在引物F1和F2的5'端分别添加限制酶BamHI和NdeI的识别序列。将1个tetx基因扩增4次，将得到24=16个DNA分子，增加了16-1=15个DNA分子，每新增1个DNA需要消耗2个引物，所以共需要消耗引物为（16-1）×2=30（个）。 （3）表达载体上有启动子和终止子，构建重组基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞内稳定表达并能遗传给子代。 （4）利用发酵工程生产四环素降解酶时，发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节；由于培养过程中使用的是液体培养液，不能形成菌落，所以培养过程中可定期取样并使用血细胞计数板对菌体进行计数，在工程菌选择上，由于大肠杆菌是原核生物，无生物膜系统（内质网和高尔基体）对蛋白质进行加工，无法直接生产有功能的蛋白质，所以选用酵母菌。 19．（12分，除特殊说明外，每空2分）图1表示含有目的基因的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示质粒P的部分结构，其中Tetr为四环素抗性基因，Ampr为氨苄青霉素抗性基因。已知BamH Ⅰ和Sma Ⅰ限制酶切割的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC和CCC↓GGG。请回答下列问题： (1)若用限制酶Sma Ⅰ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是_______末端，其产物长度为_______。 (2)图2中质粒具有一些特征，如质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能_______；质粒DNA分子上有_______，便于外源DNA插入。 (3)影印接种是将灭菌绒布按到图3培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到图4培养基上培养，图4中空圈表示与图3对照无菌落的位置，推测可能导入了重组质粒的菌落是_______（用字母表示）。图4结果显示，多数大肠杆菌导入的是_______。 (4)在基因工程中使用的载体除质粒外，还有_______、_______等。 【答案】(1) 平（1分） 537bp、790bp、661bp（1分） (2) 自我复制 一至多个限制酶切割位点 (3) b（1分） 质粒P（1分） (4) 噬菌体 动植物病毒 【详解】（1）Sma Ⅰ酶切位点是CCC↓GGG，所以产生末端是平末端，根据图1中的酶切位点，可判断用限制酶Sma Ⅰ完全切割该DNA片段，左边534+3=537bp，中间796-6=790bp，右边658+3=661bp三个片段。 （2）质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能自我复制；质粒DNA分子上有一至多个限制酶切割位点，通过不同的限制酶对质粒进行切割，以便插入外源DNA。 （3）由图3、4可知，a、b都是对氨苄青霉素有抗性的大肠杆菌，说明都是成功导入质粒的大肠杆菌，图2显示重组质粒中的四环素抗性基因被破坏，故导入重组质粒的大肠杆菌不具有对四环素的抗性，故在含有四环素培养基上生长的菌落是导入质粒P的大肠杆菌，图4中的b菌落没有长出，说明该菌落不具有对四环素的抗性，故b可能是导入重组质粒的大肠杆菌。图4结果显示，多数大肠杆菌导入的是质粒P。 （4）在基因工程中使用的载体除质粒外，还有噬菌体、动植物病毒等。 20．（12分，除特殊说明外，每空2分）5-ALA是一种非蛋白氨基酸，是多种重要物质合成的关键前体，外源施用5-ALA可以提高多种农作物的光合速率。研究人员将酿酒酵母菌的5-ALA合成酶基因（Heml）和拟南芥HemA1启动子重组，构建了重组基因（YHem1），然后转入草莓体内，获得了3株转基因草莓植株，为草莓新品种的选育创造了条件。（说明：农杆菌过度增殖、卡那霉素浓度过高均会限制植物细胞的正常生长。）请分析回答： (1)拟南芥HemA1启动子和酿酒酵母菌Hem1的克隆：查阅基因数据库获取拟南芥HemA1启动子的_______序列，设计引物进行PCR扩增，通过_______鉴定并（切胶）回收扩增产物。用同样的方法获取Hem1基因。 (2)重组表达载体的构建：分别将拟南芥HemA1启动子、酿酒酵母菌Hem1和表达载体进行酶切处理，利用___________连接，获得重组表达载体。得到的重组表达载体含有卡那霉素（Km）抗性基因、拟南芥启动子、____________、终止子、复制原点等，拟南芥启动子是___________识别和结合的部位，决定了Hem1基因表达的效率。将得到的重组表达载体转化处于___________的农杆菌，筛选得到成功转化的农杆菌。 (3)草莓外植体的转化和培养：将叶段外植体放入含有YHem1的根癌农杆菌悬液中进行不同时间的侵染，黑暗条件下培养一段时间，检测不定芽再生率，结果如图： 根据实验结果，侵染时间应选择________分钟。侵染时间过长，叶段外植体容易死亡，主要原因是__________，可通过在培养基中适当添加一些抗生素解决。 (4)转基因草莓鉴定：以草莓DNA为模板进行PCR扩增YHem1，发现3株草莓为转YHem1基因株系，再提取3株草莓的总RNA，通过RT-PCR技术（逆转录PCR技术，以RNA为模板逆转录形成cDNA，再进行PCR扩增）均扩增出了目的条带，说明YHem1基因能在这3株草莓成功________。3株草莓都合成了有活性的5-ALA合成酶，但草莓细胞中的5-ALA含量并没有明显增加，原因最可能是______________。 【答案】(1) （脱氧）核苷酸（1分） （琼脂糖）凝胶电泳（1分） (2) DNA连接酶（1分） Hem1基因/5-ALA合成酶基因（1分） RNA聚合酶（1分） 感受态（1分） (3) 5（1分） 后期培养过程中农杆菌过度增殖伤害外植体 (4) 转录（1分） 5-ALA迅速转变成其他重要物质/5-ALA迅速合成其他重要物质 【详解】（1）基因数据库中含有各种基因信息，可以通过查阅基因数据库知晓拟南芥HemA1启动子（脱氧）核苷酸序列，PCR产物可以通过（琼脂糖）凝胶电泳鉴定，切下含有目标条带的胶块回收目的DNA，用于后续载体构建。 （2）构建重组表达载体时，将拟南芥HemA1启动子、酿酒酵母菌Hem1和表达载体经酶切处理后，利用DNA连接酶连接。重组表达载体应包含卡那霉素（Km）抗性基因、拟南芥启动子、Hem1基因（或5-ALA合成酶基因）、终止子、复制原点等。拟南芥启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，决定Hem1基因表达效率。将重组载体转化进根癌农杆菌之前，需要用Ca2+处理根癌农杆菌，增大细胞壁的通透性，使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，即处于感受态细胞。 （3）由图可知，侵染5分钟时，不定芽再生率较高，因此侵染时间应该选择5分钟。侵染时间过长，外植体上会吸附较多农杆菌，后期培养过程中农杆菌过度增殖伤害外植体，外植体不定芽再生率下降。 （4）以草莓DNA为模板进行PCR扩增YHem1，发现3株草莓为转YHem1基因株系，再提取3株草莓的总RNA，通过RT-PCR技术均扩增出了目的条带，说明YHem1基因能在这3株草莓成功转录。3株草莓都合成了有活性的5-ALA合成酶，但草莓细胞中的5-ALA含量并没有明显增加，原因最可能是5-ALA迅速转变成其他重要物质（或5-ALA迅速合成其他重要物质），导致其在细胞中的含量没有明显增多。 21．（12分，除特殊说明外，每空2分）帕金森病是一种常见的神经系统退行性疾病。科学研究证实，干细胞在治疗帕金森领域有很大潜力。通过干细胞再生，移植到患者体内，补充缺失或缺损的神经细胞，有望从根本上治疗帕金森。 (1)胚胎干细胞存在于早期胚胎，通过体外受精、体外培养获得早期胚胎。 ①精子获得受精能力的生理现象称为__________。常以观察到____________作为受精的标志。 ②可以从受精卵培养得到的桑葚胚或囊胚的________中获得胚胎干细胞。 (2)从早期胚胎中获得人胚胎干细胞存在伦理问题。研究人员把病人的体细胞通过体外诱导，获得类似胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞（简称iPS），该过程类似于植物组织培养中的_________（过程）。这不仅解决了伦理问题，也避免了异体移植导致的_________问题。 (3)人iPS经体外培养诱导出神经干细胞的过程如图： ①悬浮培养的细胞因为____________而停止分裂。贴壁培养的细胞需要用_________（答1种酶）处理使之分散成单个细胞，再进行传代培养。 ②研究者在培养基中加入小分子化合物A8301和DMH1，这两种物质能够促进神经干细胞的形成，据图分析最可能的原因是_______。 【答案】(1) 精子获能（1分） 两个极体（或雌、雄原核）（1分） 内细胞团（1分） (2) 脱分化（1分） 免疫排斥 (3) 有害代谢产物积累，营养物质缺乏 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） A8301和DMH1能够抑制TGF-β和BMP信号通路，抑制类胚体分化为内胚层和中胚层，促进类胚体分化为外胚层，进而分化成神经干细胞 【详解】（1）精子在雌性生殖道（或体外获能液）中发生生理变化，获得穿透卵子透明带、完成受精的能力，这个过程就是 “获能”。次级卵母细胞完成减数第二次分裂，释放第二极体，此时透明带与卵细胞膜间隙出现第一、第二极体，标志着受精作用完成；也可以用雌雄原核的形成作为受精完成的标志。囊胚分为滋养层细胞（将来发育为胎膜和胎盘）和内细胞团（将来发育为胎儿的各种组织），内细胞团细胞具有发育的全能性，是胚胎干细胞的主要来源；桑葚胚阶段的细胞也具有全能性，同样可以分离胚胎干细胞。 （2）体细胞是高度分化的细胞，通过体外诱导回到类似胚胎干细胞的未分化状态，和植物细胞脱分化（分化的细胞恢复分裂能力，形成愈伤组织）的本质一致，都是让分化的细胞恢复全能性 / 多能性。异体移植时，受体的免疫系统会识别供体细胞的 MHC 分子，引发免疫排斥；而 iPS 细胞来自患者自身的体细胞，诱导分化后移植回患者体内，细胞表面的抗原与自身一致，不会引发免疫排斥反应。 （3）悬浮培养的细胞因为有害代谢产物积累，营养物质缺乏而停止分裂。细胞悬浮培养时，随着培养时间延长，培养液中的营养物质（如氨基酸、葡萄糖）被消耗，同时细胞代谢产生的废物（如乳酸、氨）不断积累，导致环境恶化，细胞分裂受到抑制，因此需要定期更换培养液。贴壁细胞会附着在培养瓶壁上生长，且会发生接触抑制，需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）分解细胞间的蛋白质（如胶原蛋白），使细胞分散成单个，才能继续传代培养。 分析图2可知，小分子化合物A8301和DMH1，这两种物质能够促进神经干细胞的形成，而TGF-β促进分化形成内胚层，BMP促进中胚层的形成，所以可以推测信号通路A8301和DMH1能够抑制TGF-β和BMP信号通路，抑制类胚体分化为内胚层和中胚层，从而促进类胚体分化为外胚层，进而分化成神经干细胞。 / 学科网（北京）股份有限公司 $2025-2026学年高二生物下学期第三次月考卷 生物答题卡 姓 名： 准考证号： 贴条形码区 注意事项 ==▣===-====。。=-。====-。一=▣。■ 1.答题前，考生先将自己的姓名，准考证号填写清楚，并认真核准 考生禁填： 缺考标记 条形码上的姓名、准考证号，在规定位置贴好条形码。 违纪标记 2.选择题必须用2B铅笔填涂；非选择题必须用0.5mm黑色签字笔 以上标志由监考人员用2B铅笔填涂 答题，不得用铅笔或圆珠笔答题；字体工整、笔迹清晰。 3.请按题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出区域书写的答案 选择题填涂样例： 无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。 正确填涂■ 4. 保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破。 错误填涂[凶][][/] 、 选择题：本题共16个小题，第1-12小题，每小题2分，第1316小题，每小题4分，共40分。 每小题只有一个选项符合题目要求。 1[A][B][C][D] 6.[A][BJ[C][D] 11.[A][B][CJ[D] 16.A][B][C][D] 2.[AJ[B][C][D] 7.AJ[B][C][D] 12.[A][B][C][D] 3.[A][B][C][D] 8.[A][BJ[C][D] 13.[A][B][CJ[D] 4.[AJ[B][C][D] 9[A][B]IC][D] 14.[A][B1[C1[D] ----一---- --·--一----一- 二、 非选择题。 (本部分共5小题，共计60分) 17. (12分，除特殊说明外，每空2分) (1) (1分) (1分) (2) (3) (1分) (4) (1分) (1分) (5) (1分) 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效！ 18. (12分，除标记外，每空2分) (1) (1分) (2) (1分) (1分) (1分) (3) (4) (1分) (1分) 19.(12分， 除特殊说明外，每空2分) (1) (1分) (1分) (2) (3) (1分) (1分) (4) 20. （12分，除特殊说明外，每空2分) (1) (1分) (1分) (2) (1分) (1分) (1分) (1分) (3) (1分) (4) (1分) 21. (12分，除特殊说明外，每空2分) (1) (1分) (1分) (1分) (2) (1分) (3)