精品解析：内蒙古自治区巴彦淖尔市一中2025-2026学年第二学期高二5月期中考试生物试题

2025-2026学年第二学期高二5月期中考试 生物试题 时间：75分钟 分值：100分 一、单选题（每题2分，共25题50分） 1. 下列有关发酵的叙述，正确的是（　　） A. 植物细胞无氧呼吸产生酒精的过程属于发酵 B. 乳酸菌无氧呼吸产生乳酸的过程属于发酵 C. 发酵过程中的相关反应都是在微生物的细胞内进行的 D. 发酵特指微生物细胞进行无氧呼吸的过程 【答案】B 【解析】 【详解】A、发酵是人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的 代谢转化为人类所需要的产物的过程，植物不属于微生物，其无氧呼吸产生酒精的过程不属于发酵，A错误； B、乳酸菌是厌氧型微生物，其无氧呼吸产生乳酸的过程属于乳酸发酵，B正确； C、发酵过程中的相关反应，有在微生物细胞内进行的，也有在微生物细胞外进行的，如腐乳制作的过程中，蛋白质和脂肪的水解反应发生在微生物细胞外，C错误； D、发酵既包含微生物的无氧呼吸过程（如酒精发酵、乳酸发酵），也包含有氧呼吸过程（如醋酸发酵、谷氨酸发酵），并非特指无氧呼吸，D错误。 2. 某醋厂生产的老陈醋风味独特，这源于其采用的独特分层固体发酵法——该方法使得成品中乳酸含量较高，从而形成了与众不同的风味特征。如图1是分层固体发酵法示意图，图2为发酵过程中检测的醋酸杆菌密度。酒醅是经蒸煮糊化后的粮食原料拌入糖化剂（如曲粉）和酒曲，正在进行酒精发酵的固态物料。醋醅是含有酒精的液态或固态物料（通常由酒醅发酵后的酒液等）拌入疏松材料（如谷壳、麸皮）和醋酸菌种后，正在进行醋酸发酵的固态物料。下列说法错误的是（ ） A. 发酵过程中，接种醋酸杆菌后，需将发酵缸置于30-35℃条件下培养 B. 发酵过程中，发酵缸中上层醋醅有利于乳酸菌繁殖和发酵，积累乳酸 C. 据图2分析，A、B层颠倒后B层醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是氧气浓度 D. 分层固体发酵过程中氧气分布差异显著影响了醋酸菌在不同层次的生长状况 【答案】B 【解析】 【详解】A、醋酸杆菌是好氧细菌，在醋酸发酵阶段需要充足的氧气，醋酸杆菌发酵的适宜温度是30 - 35℃，接种醋酸杆菌后，需将发酵缸置于30-35℃条件下培养，A正确； B、乳酸菌是厌氧菌，发酵缸中上层氧气含量高，不利于乳酸菌繁殖和发酵，B错误； C、醋酸杆菌是好氧菌，A、B层颠倒后，B层由下层变为上层，氧气浓度增加，所以B层醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是氧气浓度，C正确； D、分层固体发酵过程中，不同层次的氧气分布差异显著（上层氧气多，下层氧气少 ），而醋酸菌是好氧菌，氧气分布差异显著影响了醋酸菌在不同层次的生长状况，从图2中A、B层颠倒后醋酸杆菌密度的变化也可以看出这一点，D正确。 3. 嵌合体是指由两种或两种以上不同核型的细胞系组成的个体，包括同源嵌合体和异源嵌合体两类。如图表示构建嵌合体小鼠的实验，下列叙述错误的是（　　） A. 卵裂期的细胞数目不断增加，但胚胎总体积并不增加 B. 胚胎在囊胚阶段开始分化，其中的滋养层细胞将发育成胎膜和胎盘 C. 嵌合体幼鼠的一个细胞中同时有白鼠和黑鼠的基因 D. 囊胚中可分离出胚胎干细胞，iPS细胞是与之相类似的一种细胞 【答案】C 【解析】 【详解】A、卵裂期细胞不断分裂，细胞数目增加，但胚胎总体积并不增加或略有缩小，A正确； B、胚胎在囊胚阶段开始分化，其中的滋养层细胞发育成胎膜和胎盘，内细胞团发育成完整的胚胎，B正确； C、嵌合体幼鼠是由两种受精卵合并（但没有融合）发育而来的，体内同时存在来自白鼠和黑鼠的细胞，故一个细胞中只含白鼠或黑鼠其中一种的基因，不会两种基因同时存在，C错误； D、囊胚的内细胞团可分离出胚胎干细胞，iPS细胞（诱导多能干细胞）与胚胎干细胞类似，具有多向分化潜能，D正确。 4. 花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果如图2所示。下列叙述正确的是（　　） A. 花椰菜和紫罗兰的原生质体能融合，说明两种植株间不存在生殖隔离 B. 图1培育出的杂种植株减数分裂时的细胞中最多含有64条染色体 C. 图1培育杂种植株所用的技术体现了细胞膜具有一定流动性原理、染色体变异和植物细胞具有全能性原理 D. 可将病菌悬浮液均匀喷施于图2中的1和5植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，筛选出抗病性强的杂种植株 【答案】C 【解析】 【详解】A、生殖隔离的定义是：不同物种之间在自然状态下不能相互交配，或交配后不能产生可育后代。花椰菜（2n=18）和紫罗兰（2n=14）属于不同物种，自然状态下存在生殖隔离，A错误； B、花椰菜体细胞染色体数为18，紫罗兰体细胞染色体数为14，经植物体细胞杂交获得的杂种细胞染色体数为18+14=32。减数分裂过程中，染色体数目变化为：间期复制后染色体数仍为32（2n），减数第一次分裂结束后子细胞染色体数变为16（n），减数第二次分裂后期着丝点分裂，染色体数暂时恢复为16，随后末期又变为8。因此减数分裂时细胞中最多含有32条染色体，而非64条，B错误； C 图1为植物体细胞杂交过程：步骤①为原生质体融合，体现细胞膜具有一定流动性的原理；杂种细胞的染色体数为两个物种体细胞染色体数之和，属于染色体数目变异；​ 步骤②为植物组织培养，将杂种细胞培育成完整植株，体现植物细胞具有全能性的原理，C正确； D、根据图谱分析4号和5号个体含有紫罗兰和花椰菜两种类型的蛋白质，是杂种植株，可将病菌悬浮液均匀喷施于4、5号杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，筛选出抗病性强的杂种植株，但图2中的1植株为花椰菜，不是杂种植株，D错误。  5. 基因工程中常用土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞。某科研团队拟将抗除草剂基因导入某双子叶植物，以培育抗除草剂植株。下列有关分析错误的是（　　） A. PCR扩增的产物常通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定 B. 要将抗除草剂基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA片段内 C. 将抗除草剂基因导入植物时，常用受精卵作为受体细胞 D. 可用抗原-抗体杂交法来检测抗除草剂基因是否表达出蛋白质 【答案】C 【解析】 【详解】A、PCR扩增后需通过琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段，依据条带位置和大小鉴定扩增产物，A正确； B、农杆菌Ti质粒的T-DNA片段可转移至植物细胞并整合到染色体上，因此目的基因必须插入T-DNA内才能被携带和转移，B正确； C、植物基因工程中常用体细胞或愈伤组织作为受体细胞，受精卵主要用于动物基因工程，C错误； D、抗原-抗体杂交法通过特异性结合检测目的基因表达的蛋白质产物，是验证基因表达的常用手段，D正确。 故选C。 6. ①～⑤是高中生物学的实验或探究。下列相关叙述正确的是（ ） ①观察细胞质的流动 ②绿叶中色素的提取和分离 ③性状分离比的模拟 ④探究培养液中酵母菌的种群数量变化 ⑤DNA的粗提取与鉴定 A. ①④实施过程中的细胞均要保持生命活性 B. ②⑤均可选用新鲜洋葱的根系为实验材料 C. ③的两个小桶中D小球的数量可以不同 D. ①⑤均须利用无菌技术以防止杂菌污染 【答案】C 【解析】 【详解】A、①观察细胞质流动需用活细胞（如黑藻叶片），④探究培养液中酵母菌的种群数量变化的实验中，有酵母菌的死亡，A错误； B、②绿叶中色素提取需选用富含叶绿体的新鲜绿叶（如菠菜），洋葱根系（白色）不含叶绿素，不适用；⑤DNA提取可用洋葱鳞茎（含DNA丰富），但根系DNA含量低且难提取，通常不选，B错误； C、③性状分离比模拟实验中，两个小桶分别模拟雌雄生殖器官，桶内小球代表配子。若模拟一对等位基因分离，每个桶内D/d小球比例须相同（如1:1），但两桶小球总数（即配子数量）可不同（如雄配子多于雌配子），故D小球数量可不同，C正确； D、①观察细胞质流动直接取材新鲜组织，无需无菌操作；⑤DNA粗提取在常温下进行，无需无菌技术；仅④酵母菌培养需无菌操作防杂菌干扰，D错误。 故选C。 7. 生物技术的进步在给人类带来福祉的同时，会引起人们对它安全性的关注，也会与伦理道德发生碰撞。下列关于生物技术安全性与伦理问题的叙述，错误的是（ ） A. 为了避免转基因农产品带来的危害，应减少相关技术的研发 B. 基因编辑技术具有重要的医疗价值，但也会导致伦理问题 C. 我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验 D. 用转基因新型致病菌制造的生物武器具有极大的危害性 【答案】A 【解析】 【分析】1、转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全 （对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响），对待转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。 2、中国政府：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。 【详解】A、对转基因农产品的研发要大胆创新，但是要进行严格的监管以保证其安全性，A错误； B、基因编辑技术可用于治疗人类遗传病，具有重要的医疗价值，但也会导致基因歧视等伦理问题，B正确； C、我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验，避免对人类道德、伦理造成冲击，C正确； D、转基因新型致病菌可能具有超强的传染性和致病性，可能具有民族特异性，让大批感染者突然发病又无药可医，因此，用转基因致病菌制造的生物武器具有极大的危害性，D正确。 故选A。 8. 制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。醋酸菌属于好氧型原核生物，常用于食用醋的发酵。下列叙述错误的是（ ） A. 食用醋的酸味主要来源于乙酸 B. 醋酸菌不适宜在无氧条件下生存 C. 醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶 D. 葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内 【答案】D 【解析】 【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、食用醋的酸味主要来自醋酸，醋酸学名乙酸，A正确； B、醋酸菌是好氧型细菌，不适宜在无氧的条件下生存，B正确； C、在制醋时，缺失原料的情况下，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，因此醋酸菌体内含有催化乙醇氧化成乙酸的酶，C正确； D、醋酸菌属于细菌，没有核膜包被的细胞核和众多细胞器，因此没有线粒体，D错误。 故选D。 9. 下列关于传统发酵食品制作的叙述，正确的是（　　） A. 制作葡萄酒时，需对葡萄汁和发酵装置进行高压蒸汽灭菌，以防止杂菌污染 B. 制作腐乳时，发酵过程中有多种微生物参与，其中起主要作用的是毛霉 C. 制作泡菜时，泡菜坛口的水封结构可营造有氧环境，满足乳酸菌的代谢需求 D. 制作红枣醋时，酒精发酵完成后无须通气即可将酒精转化为醋酸 【答案】B 【解析】 【详解】A、制作葡萄酒的核心菌种是葡萄皮上附着的野生型酵母菌，若对葡萄汁进行高压蒸汽灭菌会杀死目标菌种，无法完成酒精发酵，A错误； B、制作腐乳的发酵过程有毛霉、酵母菌、青霉等多种微生物参与，其中起主要分解作用的是毛霉，B正确； C、乳酸菌是厌氧型微生物，泡菜坛口的水封结构是为了隔绝空气，营造无氧环境满足乳酸菌的发酵需求，C错误； D、将酒精转化为醋酸的菌种是好氧型醋酸菌，酒精发酵完成后需要持续通气才能保证醋酸菌正常代谢产生醋酸，不通气会导致醋酸菌死亡，无法完成醋酸发酵，D错误。 10. 下列有关无菌技术的说法，其中正确的是（　　） ①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物 ②煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子 ③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，所以不能在常温长期保存 ④用紫外线消毒前，适量喷洒苯酚或煤酚皂，可以加强消毒效果 ⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌 ⑥培养皿、吸管可用干热灭菌法灭菌 A. ①②③⑤ B. ①③④⑤ C. ③④⑤⑥ D. ②③⑤⑥ 【答案】C 【解析】 【详解】①无菌技术的核心是防止杂菌污染，而非杀灭实验室中所有微生物，①错误； ②煮沸消毒法100℃煮沸5-6分钟仅能杀死微生物的营养细胞，无法杀灭全部芽孢和孢子，②错误； ③巴氏消毒法只能杀灭绝大多数有害微生物，剩余少量耐热微生物或芽孢会在常温下繁殖，因此处理后的食品不能在常温长期保存，③正确； ④紫外线消毒前适量喷洒苯酚或煤酚皂等消毒剂，可使微生物蛋白质变性，能有效加强消毒效果，④正确； ⑤酒精灯火焰充分燃烧层（外焰）温度最高，接种环在此处灼烧可迅速彻底灭菌，⑤正确； ⑥培养皿、吸管等玻璃器皿耐高温且需保持干燥，可使用干热灭菌法灭菌，⑥正确； 故选C。 11. 细胞工程在医疗、动物物种繁殖等方面有着广泛的应用。下列相关叙述正确的是（ ） A. 从动物体内取出组织，用酶处理后直接培养的细胞称为传代细胞 B. 核移植技术与干细胞诱导技术结合，可用于修补人体损伤的器官 C. 采用胚胎分割技术克隆动物时，可选用细胞未发生分化的囊胚 D. 胚胎移植后，经受体孕育的后代，其遗传特性与受体保持基本一致 【答案】B 【解析】 【详解】A、从动物体内取出组织经酶处理后直接初次培养的细胞是原代细胞，传代细胞是原代培养长满后分瓶进一步培养的细胞，A错误； B、将患者体细胞核移植到去核卵母细胞中构建重构胚，从中获取胚胎干细胞后诱导分化为目标器官，可避免免疫排斥反应，用于修补人体损伤的器官，B正确； C、囊胚阶段细胞已经发生分化，出现了内细胞团和滋养层的细胞差异，桑葚胚阶段的细胞才未发生分化，C错误； D、胚胎移植中受体仅为胚胎提供发育的场所和营养，不提供遗传物质，后代遗传特性与供体基本一致，与受体无关，D错误。 12. 2025年某科研团队利用mRNA工程技术改造来源于骨髓的异体间充质干细胞（MSC），在肿瘤治疗中展现出良好作用前景。下列关于MSC的生物学特性及培养的叙述，正确的是（　　） A. 培养MSC时需要定期更换培养液以清除代谢物，同时倒置培养皿以减少水分蒸发 B. 体外培养MSC时需通入5%CO2+95%氧气，通入CO2的目的是刺激细胞呼吸 C. MSC体外培养过程中会出现接触抑制现象，细胞铺满培养皿底后会停止分裂增殖 D. MSC类似于胚胎干细胞，可分化为动物体内所有类型的细胞，因此具备极高的临床应用潜力 【答案】C 【解析】 【详解】A、培养MSC时定期更换培养液可清除代谢物，避免代谢物积累毒害细胞，但动物细胞培养无需倒置培养皿，倒置是微生物平板培养的操作，目的是防止冷凝水滴落污染培养基，A错误； B、体外培养MSC的气体环境为5%CO2+95%空气，而非95%氧气，高浓度氧气会造成细胞氧化损伤；且通入CO2的作用是维持培养液的pH，不是刺激细胞呼吸，B错误； C、MSC是正常动物体细胞，体外培养存在接触抑制现象，当细胞铺满培养皿底、细胞间相互接触后，会停止分裂增殖，C正确； D、MSC属于成体多能干细胞，仅能分化为多种特定类型的细胞，不具备分化为动物体内所有类型细胞的能力，只有胚胎干细胞才具有发育的全能性，可分化为所有类型细胞，D错误。 13. 下列关于单克隆抗体制备的正确叙述是（ ） A. 将抗原反复注入小鼠体内，从小鼠血清中可分离出单克隆抗体 B. 与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞的是浆细胞 C. 选择培养基筛选出的杂交瘤细胞均能稳定分泌所需抗体 D. 进行亲子鉴定时利用的单克隆抗体能识别DNA特定序列 【答案】B 【解析】 【详解】A、单克隆抗体是由杂交瘤细胞产生的，将抗原反复注入小鼠体内，从小鼠血清中获得的是多种抗体的混合物，不是单克隆抗体，A‌错误‌； B、在单克隆抗体制备过程中，与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞的是经过特定抗原免疫的浆细胞，B正确； C、选择培养基筛选出的杂交瘤细胞，还需要进行克隆化培养和抗体检测，才能筛选出能稳定分泌所需抗体的杂交瘤细胞，C‌错误‌； D、进行亲子鉴定时利用的是DNA分子杂交技术，是依据DNA分子碱基互补配对原则，D错误‌。 14. 某科研团队欲将抗虫基因（Bt基因）导入棉花细胞，培育抗虫棉。现有以下两种导入方案：①用农杆菌转化法将Bt基因导入棉花细胞；②在棉花授粉后，将含Bt基因的溶液注入花粉管通道。 下列叙述错误的是（　　） A. 方案①需要经过两次拼接才能将Bt基因整合到棉花细胞的染色体DNA上 B. 方案①将Bt基因随机插入Ti质粒后，要先将重组质粒转入农杆菌 C. 方案②中Bt基因需要构建基因表达载体，才能进入受体细胞并表达 D. 相比方案①，方案②的优势是无需进行植物组织培养即可得到抗虫棉 【答案】B 【解析】 【详解】A、方案①农杆菌转化法中，首先需将Bt基因拼接至Ti质粒的T-DNA区段完成第一次拼接，农杆菌侵染棉花细胞时，T-DNA会携带Bt基因整合到棉花染色体DNA上，完成第二次拼接，A正确； B、Ti质粒中只有T-DNA片段可转移并整合到宿主细胞染色体DNA上，因此Bt基因必须精准插入Ti质粒的T-DNA区段内，不能随机插入，B错误； C、目的基因本身不具备启动子、终止子等表达调控元件，无论采用哪种导入方法，都需要先构建基因表达载体，才能在受体细胞中稳定存在并表达，C正确； D、方案①将Bt基因导入棉花体细胞后，需经过植物组织培养才能获得完整植株；方案②中Bt基因可通过花粉管通道进入受精卵，受精卵可直接发育为种子，萌发后即可得到抗虫棉，无需进行植物组织培养，D正确。 15. 科学家利用基因编辑技术，定向删除猪胚胎中控制特定器官发育的关键基因，使胚胎无法自主形成该器官。然后选取患者的体细胞通过诱导形成iPS细胞，并将人类iPS细胞注入已处理的猪的囊胚中形成人——动物嵌合体胚胎。将该嵌合胚胎导入受体猪的子宫中，通过控制发育进程可获得相应的器官。该项技术可为器官移植提供潜在供体。下列叙述或推测正确的是（　　） A. 嵌合胚胎的获得运用了核移植技术 B. 应该将iPS细胞注入猪囊胚的滋养层中 C. 通过该技术获得的器官可能含有人和猪的基因 D. 该技术没有冲击现有的伦理道德，可大力推广 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，并使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。 【详解】A、核移植技术是将体细胞核移入去核卵母细胞，而嵌合胚胎是将人类iPS细胞注入猪囊胚，未涉及核移植，A错误； B、应该将人类PS细胞注入猪囊胚的内细胞团中，而不是滋养层中，B错误； C、由于是将人类PS细胞注入猪囊胚形成嵌合胚胎，所以通过该技术获得的器官可能含有人和猪的基因，C正确； D、人一动物嵌合体胚胎技术涉及人类细胞 和动物胚胎的结合，必然会存在社会伦理道德问题，不能大力推广，D错误。 故选C。 16. 下列有关生物技术安全和伦理问题的观点合理的是（ ） A. 若转基因植物的外源基因来自自然界，则不会引发安全问题 B. 将目的基因导入叶绿体基因组中能防止目的基因随花粉扩散 C. 生殖性克隆的核心争议在于可能导致人类基因多样性降低 D. 生殖性克隆涉及核移植技术，治疗性克隆不涉及核移植技术 【答案】B 【解析】 【详解】A、外源基因即使来自自然界，转入其他生物后仍可能引发基因污染或生态风险，例如影响原有物种或破坏生态平衡，A错误； B、叶绿体基因组属于细胞质遗传，花粉中不含叶绿体，因此将目的基因导入叶绿体可有效防止基因通过花粉传播扩散，B正确； C、生殖性克隆的核心争议在于伦理问题（如人权、个体独特性等），而非基因多样性降低（克隆仅复制个体基因，不影响种群基因库），C错误； D、治疗性克隆需通过核移植技术获得胚胎干细胞以培养组织器官，而生殖性克隆同样依赖核移植技术，两者均涉及该技术，D错误。 故选B。 17. 《诗经·七月》中有“十月获稻，为此春酒”，记录了古人用新收获下来的稻谷酿酒的习俗。要酿造米酒主要有三步：蒸米、拌曲和发酵。酒曲主要含有的微生物有霉菌和酵母菌等，霉菌的主要功能是将稻米中的淀粉糖化，转化为葡萄糖。下列叙述错误的是（ ） A. 霉菌细胞内含有淀粉酶，代谢过程中可能将其分泌到胞外 B. 蒸米步骤完成后需立刻开始加入酒曲搅拌，防止杂菌污染 C. 在酒精发酵过程中，霉菌的淀粉糖化能力逐渐下降 D. 酿造完成后，可通过打开盖子并适度升高温度酿造米醋 【答案】B 【解析】 【详解】A、霉菌需要将胞外的淀粉分解为葡萄糖才能吸收利用，因此其细胞内合成的淀粉酶可分泌到胞外发挥作用，A正确； B、蒸米完成后温度较高，若立刻加入酒曲，高温会杀死酒曲中的霉菌和酵母菌等发酵菌种，需冷却至适宜温度后再加酒曲搅拌，B错误； C、酒精发酵为无氧环境，且发酵过程中会产生酒精、pH逐渐降低，不适宜霉菌生存，因此霉菌的淀粉糖化能力逐渐下降，C正确； D、米醋制作的菌种为醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，适宜生长温度高于酒精发酵的温度，因此酿造完成后打开盖子提供氧气、适度升高温度，可将酒精转化为醋酸酿造米醋，D正确。 故选B。 18. 科学家以水稻（2n=24）和稗草（2n=54）为材料，利用植物体细胞杂交技术获得了具有稗草抗逆性（如耐盐、抗除草剂）的水稻，流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A. 植物体细胞杂交是将不同来源的植物体细胞融合成杂种细胞的技术 B. 可以用离心法或灭活病毒诱导两种原生质体融合 C. 两种细胞均需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 D. 杂种细胞重新形成细胞壁与高尔基体的活动有关 【答案】D 【解析】 【详解】A、植物体细胞杂交技术不仅包含将不同来源的植物体细胞融合成杂种细胞的步骤，还需将杂种细胞培育成杂种植株，A错误； B、诱导植物原生质体融合的方法有离心法、电融合法、PEG融合法等，灭活病毒是诱导动物细胞融合的方法，不能用于植物原生质体融合，B错误； C、植物细胞的细胞壁主要成分是纤维素和果胶，去除细胞壁需要用纤维素酶和果胶酶，而胰蛋白酶或胶原蛋白酶是用于处理动物细胞的，C错误； D、高尔基体与植物细胞壁的形成有关，所以杂种细胞重新形成细胞壁与高尔基体的活动有关，D正确。 19. 关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验，下列叙述正确的是（ ） A. PCR扩增DNA片段时DNA双链的解聚原理与细胞内相同 B. 耐高温的DNA聚合酶可直接在模板链的3′端从头合成子链 C. 电泳可鉴定不同长度的DNA分子是因为它们在凝胶中的迁移速率不同 D. 染色后的凝胶条带的位置可以反映DNA分子碱基序列的组成 【答案】C 【解析】 【详解】A、细胞内DNA双链解聚依赖解旋酶断裂氢键，PCR扩增时DNA双链解聚依赖高温使氢键断裂，二者原理不同，A错误； B、耐高温的DNA聚合酶不能从头合成子链，只能从引物的3′端开始延伸子链，反应体系中需要加入引物才能启动子链合成，B错误； C、DNA分子带负电，在电场作用下向正极迁移，不同长度的DNA分子在凝胶中的迁移速率不同（分子量越小迁移速率越快），因此可通过电泳分离鉴定不同长度的DNA分子，C正确； D、染色后的凝胶条带的位置仅反映DNA分子的分子量（长度）大小，无法反映DNA分子的碱基序列组成，D错误。 20. 从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确的是（ ） A. 传代培养时，培养皿需密封防止污染 B. 选取①的细胞进行传代培养比②更合理 C. 直接用离心法收集细胞进行传代培养 D. 细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养需要的条件有：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO2；动物细胞培养技术主要应用在：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质等。 【详解】A、传代培养时培养器皿容许内部气体和培养箱中的气体进行交换，A错误； B、选取②的细胞进行传代培养比①更合理，②时细胞增长开始变得缓慢，B错误； C、对于贴壁生长的细胞进行传代培养时，先需要用胰蛋白酶等处理，使之分散为单个细胞，然后再用离心法收集，C错误； D、细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大、细胞间产生接触抑制有关，D正确。 故选D。 21. 谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，通过以下代谢途径发酵生产L-谷氨酰胺。下列叙述正确的是（ ） A. 发酵工程的菌种只能直接来自自然界 B. 发酵初期控制pH为7.0，后调为5.6，有利于提高L-谷氨酰胺产量 C. 必须要借助显微镜观察才能初步判断发酵过程中是否发生球状细菌污染 D. 发酵结束后，采用过滤、沉淀的方法将菌体分离和干燥即可获得产品 【答案】B 【解析】 【详解】A、发酵工程的菌种不只能直接来自自然界，还可以通过诱变育种、基因工程育种等方法改造获得，A错误； B、谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，谷氨酰胺合成酶最适pH为5.6，因此发酵初期控制pH为7.0，有利于增加谷氨酸棒状杆菌的数量，后调为5.6，有利于提高谷氨酰胺合成酶的活性，进而提高L-谷氨酰胺产量，B正确； C、球状细菌污染会导致发酵液浑浊、pH 异常等，可通过观察发酵液外观初步判断，并非必须借助显微镜，C错误； D、L-谷氨酰胺是胞外产物，发酵结束后需先分离去除菌体，再通过萃取、离子交换、结晶等方法纯化产品，仅过滤、沉淀菌体无法直接获得产品，D错误。 故选B。 22. 某科研团队在培育铁皮石斛新品种并提取石斛多糖时，分别采用了以下方法：①将铁皮石斛（2n=38）与抗寒的细茎石斛（2n=38）体细胞杂交获得杂种植株；②利用铁皮石斛愈伤组织进行液体悬浮培养规模化提取石斛多糖；③通过农杆菌转化法将冷响应基因导入铁皮石斛愈伤组织获得转基因植株。下列叙述正确的是（　　） A. 方法①获得的杂种植株是含有76条染色体的二倍体，可通过减数分裂产生正常配子 B. 方法②需控制培养基中的激素比例，以利于愈伤组织增殖和石斛多糖合成 C. 方法③需筛选含重组Ti质粒的愈伤组织，经再分化获得抗寒转基因植株 D. 三种方法均依赖植物细胞的全能性，为铁皮石斛品种改良提供了新方案 【答案】B 【解析】 【详解】A、方法①是植物体细胞杂交，获得的杂种植株同时含有铁皮石斛和细茎石斛的两个染色体组，属于染色体数为76的异源四倍体，可通过减数分裂产生正常配子，A错误； B、方法②为愈伤组织液体悬浮培养，培养基中生长素和细胞分裂素的比例会调控愈伤组织的增殖和代谢活动，因此需控制激素比例，保证愈伤组织高效增殖和石斛多糖合成，B正确； C、农杆菌转化法中，仅重组Ti质粒上的T-DNA片段会整合到愈伤组织细胞的染色体DNA中，愈伤组织细胞内不存在完整的重组Ti质粒，需筛选的是成功整合并表达目的基因的愈伤组织，C错误； D、细胞全能性指已分化的细胞发育成完整个体的潜能，方法②仅培养到愈伤组织阶段，未培育为完整植株，不依赖细胞全能性，D错误。 23. 下列关于现代生物技术及生物学实验的叙述，正确的是（　　） A. 琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的过程中，琼脂糖融化后应立即加入核酸染料，以免凝胶凝固导致染料分布不均 B. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 C. DNA粗提取实验中，研磨液中的EDTA（蛋白质变性剂）可抑制DNA酶活性，防止研磨过程中DNA被水解 D. 凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置 【答案】C 【解析】 【详解】A、琼脂糖融化后需冷却至50~60℃左右再加入核酸染料，若立即加入，高温会导致染料降解，部分易挥发的核酸染料（如EB）还会挥发造成污染，A错误； B、单细胞蛋白指发酵获得的微生物菌体本身，无需从微生物细胞中提取，直接收集菌体即可得到单细胞蛋白，B错误； C、DNA酶的活性依赖二价金属阳离子作为辅因子，EDTA可螯合二价阳离子，进而抑制DNA酶活性，防止研磨过程中DNA被水解，C正确； D、凝胶载样缓冲液中的指示剂（如溴酚蓝）作用是指示电泳迁移进度，避免样品跑出凝胶，DNA分子的具体位置需要通过核酸染料显色后才能确定，D错误。 24. 朋友圈中经常有一些与生物学有关的说法，有些有一定的科学依据，有些违反生物学原理。以下说法中有科学依据的是（ ） A. 烹饪过程中高温会破坏蛋白质的空间结构，降低其营养价值 B. 癌细胞主要进行无氧呼吸，会消耗大量葡萄糖，可以通过饥饿来治疗癌症 C. 转基因食品中含有外源基因，食用后能进入人体细胞并改变人体遗传物质 D. 添加了蛋白酶的加酶洗衣液，用于蚕丝制品的洗涤时会对衣物造成损伤 【答案】D 【解析】 【分析】转基因食品中的外源基因不会因为使用而整合到人的DNA上；酶具有专一性、高效性和作用条件温和的特性。 【详解】A、蛋白质的营养价值取决于必需氨基酸的种类和数量，蛋白质变性，氨基酸的种类和数量不发生变化，故营养价值没有降低，A错误； B、癌细胞主要进行无氧呼吸会消耗大量葡萄糖，但饥饿也会影响其他正常细胞的生命活动，因此不适宜通过饥饿来治疗癌症，B错误； C、转基因食品中的外源基因，在食用后在消化道中被彻底水解为小分子，不会改变人体的遗传物质，C错误； D、蚕丝制品的主要成分是蛋白质，故加入蛋白酶洗涤时会对衣物造成损伤，D正确。 故选D。 25. 研究人员将脂肪酶外环上的天冬氨酸定点突变为碱性赖氨酸，成功将其最适 pH 从 7.0 提高到 9.0，从而提高了其在碱性环境下的稳定性，该过程中直接操作的对象是（ ） A. 蛋白质 B. 氨基酸 C. 基因 D. mRNA 【答案】C 【解析】 【详解】研究人员将脂肪酶外环上的天冬氨酸定点突变为碱性赖氨酸，成功将其最适 pH 从 7.0 提高到 9.0，从而提高了其在碱性环境下的稳定性，该过程是通过蛋白质工程实现的，在生物体内蛋白质的合成是受到基因控制的，因此为了获得符合人类要求的蛋白质，需要设计蛋白质的结构，进而推测相应的氨基酸序列，进而获得相关基因的碱基序列，实现对基因的改造，通过对基因的修饰和改造可实现对蛋白质的改造，因而蛋白质工程被称为第二代基因工程，即上述蛋白质的改造需要直接对基因进行操作，C正确。 故选C。 二、不定项选择题（每题3分，多选错选不得分，少选得1分，全选对得3分，共5题15分） 26. 尿素是一种重要的农业肥料，尿素分解菌可合成脲酶，利用以尿素为唯一氮源的选择培养基可从土壤中分离尿素分解菌并进行计数，科研人员取0.1 g土壤分别稀释103~107倍，将0.1 mL不同稀释倍数的土壤稀释液接种在固体培养基上， 在相同的培养条件下得到如表数据。下列叙述正确的是（　　） 稀释倍数 103 104 105 106 107 菌落 数/个 1号平板 478 367 270 26 5 2号平板 496 354 268 20 8 3号平板 509 332 272 29 3 A. 利用稀释涂布平板法可将稀释液中的菌体完全分离，一个菌落对应一个菌体 B. 每克土壤中尿素分解菌的数量是2.7×108个 C. 以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌均为尿素分解菌 D. 若在显微镜下利用细菌计数板直接计数，则统计结果一般比实际活菌数多 【答案】BD 【解析】 【详解】A、利用稀释涂布平板法不能将稀释液中的菌体完全分离，可能会出现两个或多个菌体连在一起，A错误； B、为减小误差一般统计菌落数为30～300的平板，该实验中稀释倍数为105的平板最适合用来统计活菌数，则每克土壤中尿素分解菌的数量=（270+268+272）÷3÷0.1×105=2.7×108个，B正确； C、以尿素为唯一氮源的选择培养基上，能生长的菌大多为尿素分解菌，但并非全部，少数固氮微生物可利用空气中的氮气作为氮源，也能在该培养基上生长，C错误； D、若在显微镜下利用细菌计数板直接计数，不能区分活菌和死菌，则统计结果一般比实际活菌数多，D正确。 27. 成纤维细胞生长因子20（FGF20）可作为肿瘤标记物，为制备抗FGF20单克隆抗体以用于癌症早期诊断筛查，科研人员设计的流程如图所示。下列分析正确的是（　　） A. 抗原甲为FGF20，一般从正常人体细胞的细胞表面获取 B. ①过程获得的B淋巴细胞均能合成抗FGF20抗体 C. ③过程的选择培养基对于未融合的亲本细胞和融合的同种核细胞的生长有抑制作用 D. 将抗FGF20单克隆抗体与抗原甲进行杂交，可以用于检测该单克隆抗体的特异性 【答案】CD 【解析】 【详解】A、成纤维细胞生长因子20(FGF20)可作为肿瘤标记物，抗原甲为FGF20，一般从肿瘤患者人体细胞的细胞表面获取，A错误； B、①过程获得的B淋巴细胞有的能合成抗FGF20抗体，有的B淋巴细胞不能合成，B错误； C、③过程是筛选杂交瘤细胞，所用的选择培养基会抑制未融合的亲本细胞（B淋巴细胞、骨髓瘤细胞）和融合的同种核细胞（B-B融合细胞、骨髓瘤-骨髓瘤融合细胞）的生长，只允许杂交瘤细胞生长，C正确； D、抗原与相应的抗体能特异性结合，将抗FGF20单克隆抗体与抗原甲进行杂交，可以用于检测该单克隆抗体的特异性，D正确。 28. 天然胰岛素易形成多聚体，导致皮下注射后起效缓慢。为获得速效胰岛素，科研人员采用易错PCR技术（通过提高PCR中的碱基错配率，从而得到随机突变的多种基因）对胰岛素基因进行改造并定向筛选，最终利用大肠杆菌生产出不易聚合的速效胰岛素。下列叙述正确的是（　　） A. 易错PCR技术可以定向改造胰岛素基因 B. 该技术操作过程中需要耐高温的解旋酶 C. 速效胰岛素的研发运用了蛋白质工程技术 D. 大肠杆菌生产速效胰岛素时遵循中心法则 【答案】CD 【解析】 【详解】A、易错PCR技术是通过调整反应条件来提高PCR过程中的碱基错配率，这种错配是随机发生的，而不是定向改造基因技术，A错误； B、在PCR技术中，高温会使DNA双链解旋为单链，无需解旋酶的作用，B错误； C、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求，速效胰岛素的研发属于蛋白质工程技术，C正确； D、大肠杆菌生产速效胰岛素的过程，首先需要将人工改造的胰岛素基因导入大肠杆菌细胞内。然后，该基因会在大肠杆菌内进行转录和翻译。这两个过程正是中心法则的核心内容，D正确。 故选CD。 29. 用A和B两种限制酶分别处理同一DNA片段(限制酶在对应切点一定能切开)，电泳分离结果如图1和图2所示。下列叙述正确的是（　　） A. 图1中X代表的碱基对数为4500，Y是限制酶A的酶切位点 B. 用酶A和酶B同时处理图1中DNA片段可增加6个游离的磷酸基团 C. 若用酶A和酶B同时处理该DNA片段，则电泳后得到5种产物 D. 电泳缓冲液配制的琼脂糖溶液中加入的核酸染料能与DNA结合，便于在紫外灯下观察 【答案】ABD 【解析】 【分析】限制酶酶切，是一项基于DNA限制酶的基因工程技术，其基本原理是利用限制酶对DNA上特定序列的识别，来确定切割位点并实现切割，从而获得所需的特定序列。 【详解】A、图2的结果①得到的碱基对数分别是500、3500、6000，结果②得到的碱基对数分别是2000、8000，结合图1可推测Y是限制酶A的酶切位点，X代表的碱基对数为4500，即图1中有两个限制酶A的酶切位点，切割完后得到三个长度的片段：3500、（4500+1500）、500，正好与图2的酶①结果相符，A正确； B、限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，用A和B两种限制酶同时处理图中同一DNA片段，可断开6个磷酸二酯键，最终得到6个游离的磷酸基团，B正确； C、由题干信息限制酶在对应切点一定能切开，可知用酶A和酶B同时处理该DNA可以得到4个DNA片段，电泳后得到4种产物，C错误； D、用电泳缓冲液配制的琼脂糖溶液中加入的核酸染料能与DNA分子结合，便于在紫外灯下观察条带，D正确。 故选ABD。 30. 某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是（ ） A. 在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品 B. 将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测 C. 将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落 D. 判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小 【答案】CD 【解析】 【分析】1、获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技 术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。 2、稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来 统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养 基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活 菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含 有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数为30〜300 的平板进行计数。 【详解】A、题干信息：某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，故在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从未感病植株上采集样品，A错误； B、获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染；将采集的样品充分消毒后，用无菌水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测，B错误； C、题图可知，样品研磨后进行了稀释涂布，可见将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落，C正确； D、题图抗性检测可知，判断内生菌的抗性效果需设置对照组和实验组，对照组不接种内生菌得到病原菌菌斑，实验组接种内生菌得到病原菌菌斑，然后比较对照组和实验组的菌斑大小，实验组病原菌菌斑越小表明内生菌抗性效果越好，D正确。 故选CD。 三、非选择题（共4题35分） 31. 下图为果酒与果醋发酵装置示意图，请据图回答下列问题。 （1）酿造葡萄酒时，在榨汁前，要先对葡萄进行_________ （填“先去除枝梗后清洗”“先清洗后去除枝梗”），该步骤可以避免去除枝梗时引起葡萄破损，增加被_________污染的机会。 （2）用体积分数为_____对上述装置进行_______后，在装入葡萄汁，将发酵装置放在18~30 的环境中，每天拧开气阀b多次，排出发酵过程产生的大量 _________。装置中排气口设计成弯曲形状的目的______。 （3）10d之后，利用酸性条件下的_______对出料口c 取样的物质进行检验。若呈________色，则说明产生了酒精。 （4）产生酒精后，在发酵液中加入醋酸菌，然后将装置放在________℃的环境中，适时打开气阀 向发酵液中充气。充气的原因是_______，此时发生的主要变化是_______。（用化学反应式的形式表达） 【答案】（1） ①. 先清洗后去除枝梗 ②. 杂菌 （2） ①. 70 %的酒精 ②. 消毒 ③. 二氧化碳 ④. 防止排气时空气中杂菌污染 （3） ①. 重铬酸钾 ②. 灰绿色 （4） ①. 30-35℃ ②. 醋酸菌是好氧菌酒精转变为乙酸需要氧气 ③. C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O 【解析】 【分析】果酒制作过程中的相关实验操作：（1）材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。（2）灭菌：①榨汁机要清洗干净，并晾干；②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。（3）榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。（4）发酵：①将葡萄汁装入发酵瓶，要留要大约13的空间，并封闭充气口；②制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18℃～30℃，时间控制在10～12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行，及时的监测。 【小问1详解】 酿造葡萄酒时，在葡萄榨汁前，葡萄要先进行冲洗，然后再除去枝梗，可以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。 【小问2详解】 榨汁机要清洗干净，并晾干，发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒，再装入葡萄汁，将发酵装置放在18-30℃环境中，发酵过程中由于酵母菌无氧呼吸会产生二氧化碳，因此每天拧开气阀b多次，排出发酵过程产生的大量二氧化碳。装置中d处设计成弯曲形状利用了巴斯德的鹅颈瓶的原理，即为了防止排气时空气中微生物的污染。 【小问3详解】 酵母菌发酵的产物中会产生酒精，利用用酸性条件下的重铬酸钾可以检测酒精的存在，酒精遇到橙色的重铬酸钾会变为灰绿色，说明产生了酒精。 【小问4详解】 温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右最适合酵母菌繁殖，因此需要将温度控制在其最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为30℃～35℃，因此要将温度控制在30℃～35℃。酵母菌酒精发酵不需要氧气，醋酸菌是好氧菌，在将酒精变为醋酸时需要氧气才能进行，因此要适时向发酵装置中充气，需要打开气阀a通入空气。在这个过程中醋酸菌将酒精转变为乙酸和水，化学反应式为C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O。 32. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其产生的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程进行培养，具体过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。请回答下列相关问题。 （1）进行①过程前要对狼爪瓦松植株甲幼嫩的叶进行消毒处理，所用的试剂为体积分数为70%的_____和质量分数为5%左右的_____溶液。图中通过②③培养获得植株乙所利用技术的细胞学原理是_____，选用植株甲幼嫩的叶进行过程②③的原因是_________。过程②③的接种操作必须在_______旁进行，且每次使用后的器械都要_____。 （2）培养中的愈伤组织细胞一直处于___（填“增殖”或“分化”）的状态，可用于④诱导产生突变体植株。 （3）⑤过程需要用____酶进行处理，形成植株丁的过程中，PEG的作用是_____，若要达到此作用，除了利用PEG之外，还可采用___________法（写2种）处理。 （4）通过植物细胞工程对狼爪瓦松培养，获得药物黄酮类化合物，下列相关叙述错误的是______。 A. 过程③通常先在生长素与细胞分裂素比例高的培养基中培养 B. 过程④常用射线或化学物质处理后即可获得大量目的植株 C. 所得三种植株中乙和丙的遗传信息与甲相同，植株丁和甲是同一物种 【答案】（1） ①. 酒精 ②. 次氯酸钠 ③. 植物细胞的全能性 ④. 幼嫩的叶细胞分化程度低，全能性高，易培养 ⑤. 酒精灯火焰 ⑥. 灭菌 （2）增殖 （3） ①. 纤维素酶、果胶酶 ②. 促进原生质体融合 ③. 电融合法、离心法、高Ca2+-高pH融合法 （4）ABC 【解析】 【小问1详解】 进行外植体消毒时，常用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液。过程②③是植物组织培养，原理是植物细胞的全能性（细胞包含发育成完整植株的全套遗传物质）。选用幼嫩的叶是因为其细胞分化程度低，全能性高，易培养。接种操作需在酒精灯火焰旁进行，每次使用后的器械都要灭菌，避免杂菌污染。 【小问2详解】 愈伤组织细胞一直处于增殖的状态，细胞分裂旺盛，DNA复制过程中更容易发生突变，因此可用于诱导产生突变体植株。 【小问3详解】 ⑤表示去除细胞壁获得原生质体，该过程需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。培育形成植株丁的过程中，PEG的作用是促进原生质体融合。除PEG外，还可采用电融合法、离心法、高Ca²⁺-高pH法处理来促进原生质体融合。 【小问4详解】 A、生长素与细胞分裂素比值高时，利于生根，该比值低时，利于生芽。过程③是再分化，需先生芽再生根，所以需要先在生长素与细胞分裂素比例低的培养基中培养，A错误； B、过程④为诱变育种，常用射线或化学物质处理的是愈伤组织，经筛选并进一步培养才能获得大量所需的突变体植株丙，B错误； C、植株乙是植物组织培养得到的，遗传信息与甲相同，植株丙是诱变得到的，遗传信息与甲不同，植株丁是原生质体融合得到的，染色体数目发生了改变，和甲不一致，所以不是同一物种，C错误。 33. 类胡萝卜素具有预防、改善夜盲症和延缓衰老的功能。番茄红素β-环化酶（LCYB）是类胡萝卜素生物合成途径中的关键酶，在桂花中该酶的含量较高。某科研团队将“堰虹桂”（桂花品种）的LCYB基因转入烟草，获得了高产类胡萝卜素烟草。图1表示扩增LCYB基因的引物序列，图2表示XhoI和SmaI的识别序列和酶切位点。回答下列问题： 引物名称 引物序列（5'～3'） LCYB-F ATGGATACTTTGCTGAAAACTCAT LCYB-R TCATTCTTATCCTGTACTAAATTG 图1 SmaI XhoI 图2 注：限制酶酶切位点 （1）LCYB基因克隆。提取“堰虹桂”的总RNA，经_______得到cDNA，利用PCR技术扩增LCYB基因，若在PCR反应体系中加入1个LCYB基因和其他充足的原料，经过40个循环，共有_______个引物参与LCYB基因的合成。经该方法获得的目的基因片段缺乏________，因此不能直接在受体细胞中表达。 （2）构建基因表达载体。将扩增的目的基因插入质粒的XhoI和SmaI酶切位点之间，为保证目的基因与质粒准确连接，应对目的基因进行的操作是_______。选用两种限制酶分别处理质粒和含目的基因的DNA片段的目的是_______（答两点）。 （3）将目的基因导入受体细胞。为获得仅在烟草叶肉细胞中特异性表达LCYB基因的烟草，应将LCYB基因与_______等调控元件重组在一起，选择_______法完成烟草的转化，利用植物组织培养技术，将含LCYB基因的烟草体细胞培育成烟草植株的过程中调整培养基中生长素和细胞分裂素的_______。 （4）为探究低温处理对“堰虹桂”花瓣中类胡萝卜素含量和LCYB基因表达的影响，可在花期检测花瓣中_______的含量。若低温条件下，LCYB基因的表达量增加，提出在生产上的一种应用：_______。 【答案】（1） ①. 逆转录 ②. 241-2 ③. 启动子和终止子 （2） ①. 在PCR引物5'端分别引入与载体对应的SmaI和XhoI酶识别序列 ②. 使目的基因两端产生不同末端，实现定向连接，并降低载体自连、目的基因自连、目的基因与载体反向连接的概率 （3） ①. 叶肉（叶片）特异性启动子 ②. 农杆菌转化 ③. 浓度和比例 （4） ①. 类胡萝卜素和番茄红素β-环化酶 ②. 对转基因烟草进行低温处理以提高类胡萝卜素的含量、在花期采取适度低温（控温/冷凉管理）以提高花瓣类胡萝卜素积累、增强花色与品质（或筛选/优化低温处理条件用于提升桂花观赏与加工品质） 【解析】 【分析】1、基因工程步骤：（1）目的基因的分离或合成（2）将目的基因与载体DNA连接，构建重组表达载体（3）将重组DNA分子导入受体细胞，并获得具有外源基因的个体（4）转基因生物的检测与鉴定。 2、PCR（聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60℃左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72℃左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖（5'-3'）的方向合成互补链。 【小问1详解】 提取“堰虹桂”的总RNA，利用RNA合成cDNA的过程是逆转录。若在PCR反应体系中加入1个LCYB基因和其他充足的原料，经过40个循环，生成的240个DNA分子中共有241个脱氧核苷酸链，其中亲本的2条链不需要引物，共有241-2个引物参与合成LCYB基因。经过该方法合成的LCYB基因缺少启动子和终止子，不能直接在受体细胞中表达。 【小问2详解】 构建基因表达载体。将扩增的目的基因插入质粒的XhoI和SmaI酶切位点之间，为保证目的基因与质粒准确连接，需要在PCR引物5'端分别引入与载体对应的SmaI和XhoI酶识别序列。由于两种限制酶切割产生的末端不同，因此用两种限制酶分别处理质粒和含目的基因的DNA片段的目的是防止质粒、目的基因的自身环化，保证目的基因的正向连接。 【小问3详解】 为获得仅在烟草叶肉细胞中特异性表达LCYB基因的烟草，应将LCYB基因与烟草叶肉细胞中特异性表达的基因的启动子等调控元件重组在一起，以保证目的基因仅在烟草叶肉细胞中特异性表达，此后采用农杆菌转化法完成对烟草的转化，将含LCYB基因的烟草体细胞培育成烟草植株采用的技术是植物组织培养，该过程包括脱分化和再分化阶段，需要调整生长素和细胞分裂素的浓度和比例。 【小问4详解】 为探究低温条件对“堰虹桂”花瓣中类胡萝卜素含量和LCYB基因表达的影响，可在花期检测花瓣中类胡萝卜素和番茄红素β-环化酶的含量，若低温条件下，LCYB基因的表达量增加，可在生产上通过花期适度低温调控，促进LCYB基因表达，以提高花瓣类胡萝卜素积累、增强花色与品质。 34. 如图为A、B不同物种间体细胞杂交示意图，请回答下列问题。 (1)去除细胞壁而不损伤细胞可用______________、________处理。在用促融剂处理时，使用的促融剂主要有________________。 (2)融合细胞中可能包括________种类型，其中杂种细胞的遗传物质组成是_________________________________________________。 (3)由杂种细胞经人工诱导培养，经__________分裂增加细胞数目并不断分化，逐渐发育成C植株。该植株的性状与D亲本植物的性状区别是______________________________________________________。 (4)整个培养过程应用了细胞工程的__________和_____________两大技术，这种培育杂种植株的意义是________________________。 【答案】 ①. 纤维素酶 ②. 果胶酶 ③. PEG(或聚乙二醇) ④. 3 ⑤. A和B植物的遗传物质之和 ⑥. 有丝 ⑦. 具有A和B两种植物的性状 ⑧. 体细胞杂交 ⑨. 植物组织培养 ⑩. 克服生物远缘杂交不亲和的障碍 【解析】 【详解】分析图形可知该题考查植物细胞工程，涉及了细胞融合，植物细胞需要先去除细胞壁获得原生质体，然后用物理或化学的方法促进融合。融合后的细胞用植物组织培养技术进行培养。 （1）因为植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性，所以用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁获得原生质体。在促进细胞融合时通常用化学方法加入PEG即可。 （2）融合的细胞可能会有A-A、B-B和A-B的融合3种类型，而杂种细胞的遗传物质应是A和B植物的遗传物质之和。 （3）杂种细胞经过人工诱导培养，要使细胞数目增加需要通过细胞分裂，同时还有细胞分化而发育成C杂种植株，其拥有A和B另种植物的性状，而D植株只有亲本类型的表现型。 （4）整个过程涉及到了细胞工程中的体细胞杂交和植物组织培养技术，体细胞杂交培育出杂种植株的最大优点是克服生物远缘杂交不亲和的障碍。 点睛：植物细胞工程主要包括植物组织培养和体细胞杂交，植物因为有支持和保护作用的细胞壁，所以融合前必须用纤维素酶和果胶酶去除掉细胞壁获得原生质体，依赖细胞膜的流动性才能进行融合。而植物组织培养利用的是植物细胞的全能性。本题的易错点是通过不同方式培养成植株的区别，杂种植株是融合了亲本植株A和亲本植株B的遗传物质，后代会出现两种亲本性状的融合，而亲本类型只是原来各自亲本的遗传物质，表现的也只有亲本的性状。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年第二学期高二5月期中考试 生物试题 时间：75分钟 分值：100分 一、单选题（每题2分，共25题50分） 1. 下列有关发酵的叙述，正确的是（　　） A. 植物细胞无氧呼吸产生酒精的过程属于发酵 B. 乳酸菌无氧呼吸产生乳酸的过程属于发酵 C. 发酵过程中的相关反应都是在微生物的细胞内进行的 D. 发酵特指微生物细胞进行无氧呼吸的过程 2. 某醋厂生产的老陈醋风味独特，这源于其采用的独特分层固体发酵法——该方法使得成品中乳酸含量较高，从而形成了与众不同的风味特征。如图1是分层固体发酵法示意图，图2为发酵过程中检测的醋酸杆菌密度。酒醅是经蒸煮糊化后的粮食原料拌入糖化剂（如曲粉）和酒曲，正在进行酒精发酵的固态物料。醋醅是含有酒精的液态或固态物料（通常由酒醅发酵后的酒液等）拌入疏松材料（如谷壳、麸皮）和醋酸菌种后，正在进行醋酸发酵的固态物料。下列说法错误的是（ ） A. 发酵过程中，接种醋酸杆菌后，需将发酵缸置于30-35℃条件下培养 B. 发酵过程中，发酵缸中上层醋醅有利于乳酸菌繁殖和发酵，积累乳酸 C. 据图2分析，A、B层颠倒后B层醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是氧气浓度 D. 分层固体发酵过程中氧气分布差异显著影响了醋酸菌在不同层次的生长状况 3. 嵌合体是指由两种或两种以上不同核型的细胞系组成的个体，包括同源嵌合体和异源嵌合体两类。如图表示构建嵌合体小鼠的实验，下列叙述错误的是（　　） A. 卵裂期的细胞数目不断增加，但胚胎总体积并不增加 B. 胚胎在囊胚阶段开始分化，其中的滋养层细胞将发育成胎膜和胎盘 C. 嵌合体幼鼠的一个细胞中同时有白鼠和黑鼠的基因 D. 囊胚中可分离出胚胎干细胞，iPS细胞是与之相类似的一种细胞 4. 花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果如图2所示。下列叙述正确的是（　　） A. 花椰菜和紫罗兰的原生质体能融合，说明两种植株间不存在生殖隔离 B. 图1培育出的杂种植株减数分裂时的细胞中最多含有64条染色体 C. 图1培育杂种植株所用的技术体现了细胞膜具有一定流动性原理、染色体变异和植物细胞具有全能性原理 D. 可将病菌悬浮液均匀喷施于图2中的1和5植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，筛选出抗病性强的杂种植株 5. 基因工程中常用土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞。某科研团队拟将抗除草剂基因导入某双子叶植物，以培育抗除草剂植株。下列有关分析错误的是（　　） A. PCR扩增的产物常通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定 B. 要将抗除草剂基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA片段内 C. 将抗除草剂基因导入植物时，常用受精卵作为受体细胞 D. 可用抗原-抗体杂交法来检测抗除草剂基因是否表达出蛋白质 6. ①～⑤是高中生物学的实验或探究。下列相关叙述正确的是（ ） ①观察细胞质的流动 ②绿叶中色素的提取和分离 ③性状分离比的模拟 ④探究培养液中酵母菌的种群数量变化 ⑤DNA的粗提取与鉴定 A. ①④实施过程中的细胞均要保持生命活性 B. ②⑤均可选用新鲜洋葱的根系为实验材料 C. ③的两个小桶中D小球的数量可以不同 D. ①⑤均须利用无菌技术以防止杂菌污染 7. 生物技术的进步在给人类带来福祉的同时，会引起人们对它安全性的关注，也会与伦理道德发生碰撞。下列关于生物技术安全性与伦理问题的叙述，错误的是（ ） A. 为了避免转基因农产品带来的危害，应减少相关技术的研发 B. 基因编辑技术具有重要的医疗价值，但也会导致伦理问题 C. 我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验 D. 用转基因新型致病菌制造的生物武器具有极大的危害性 8. 制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。醋酸菌属于好氧型原核生物，常用于食用醋的发酵。下列叙述错误的是（ ） A. 食用醋的酸味主要来源于乙酸 B. 醋酸菌不适宜在无氧条件下生存 C. 醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶 D. 葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内 9. 下列关于传统发酵食品制作的叙述，正确的是（　　） A. 制作葡萄酒时，需对葡萄汁和发酵装置进行高压蒸汽灭菌，以防止杂菌污染 B. 制作腐乳时，发酵过程中有多种微生物参与，其中起主要作用的是毛霉 C. 制作泡菜时，泡菜坛口的水封结构可营造有氧环境，满足乳酸菌的代谢需求 D. 制作红枣醋时，酒精发酵完成后无须通气即可将酒精转化为醋酸 10. 下列有关无菌技术的说法，其中正确的是（　　） ①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物 ②煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子 ③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，所以不能在常温长期保存 ④用紫外线消毒前，适量喷洒苯酚或煤酚皂，可以加强消毒效果 ⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌 ⑥培养皿、吸管可用干热灭菌法灭菌 A. ①②③⑤ B. ①③④⑤ C. ③④⑤⑥ D. ②③⑤⑥ 11. 细胞工程在医疗、动物物种繁殖等方面有着广泛的应用。下列相关叙述正确的是（ ） A. 从动物体内取出组织，用酶处理后直接培养的细胞称为传代细胞 B. 核移植技术与干细胞诱导技术结合，可用于修补人体损伤的器官 C. 采用胚胎分割技术克隆动物时，可选用细胞未发生分化的囊胚 D. 胚胎移植后，经受体孕育的后代，其遗传特性与受体保持基本一致 12. 2025年某科研团队利用mRNA工程技术改造来源于骨髓的异体间充质干细胞（MSC），在肿瘤治疗中展现出良好作用前景。下列关于MSC的生物学特性及培养的叙述，正确的是（　　） A. 培养MSC时需要定期更换培养液以清除代谢物，同时倒置培养皿以减少水分蒸发 B. 体外培养MSC时需通入5%CO2+95%氧气，通入CO2的目的是刺激细胞呼吸 C. MSC体外培养过程中会出现接触抑制现象，细胞铺满培养皿底后会停止分裂增殖 D. MSC类似于胚胎干细胞，可分化为动物体内所有类型的细胞，因此具备极高的临床应用潜力 13. 下列关于单克隆抗体制备的正确叙述是（ ） A. 将抗原反复注入小鼠体内，从小鼠血清中可分离出单克隆抗体 B. 与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞的是浆细胞 C. 选择培养基筛选出的杂交瘤细胞均能稳定分泌所需抗体 D. 进行亲子鉴定时利用的单克隆抗体能识别DNA特定序列 14. 某科研团队欲将抗虫基因（Bt基因）导入棉花细胞，培育抗虫棉。现有以下两种导入方案：①用农杆菌转化法将Bt基因导入棉花细胞；②在棉花授粉后，将含Bt基因的溶液注入花粉管通道。 下列叙述错误的是（　　） A. 方案①需要经过两次拼接才能将Bt基因整合到棉花细胞的染色体DNA上 B. 方案①将Bt基因随机插入Ti质粒后，要先将重组质粒转入农杆菌 C. 方案②中Bt基因需要构建基因表达载体，才能进入受体细胞并表达 D. 相比方案①，方案②的优势是无需进行植物组织培养即可得到抗虫棉 15. 科学家利用基因编辑技术，定向删除猪胚胎中控制特定器官发育的关键基因，使胚胎无法自主形成该器官。然后选取患者的体细胞通过诱导形成iPS细胞，并将人类iPS细胞注入已处理的猪的囊胚中形成人——动物嵌合体胚胎。将该嵌合胚胎导入受体猪的子宫中，通过控制发育进程可获得相应的器官。该项技术可为器官移植提供潜在供体。下列叙述或推测正确的是（　　） A. 嵌合胚胎的获得运用了核移植技术 B. 应该将iPS细胞注入猪囊胚的滋养层中 C. 通过该技术获得的器官可能含有人和猪的基因 D. 该技术没有冲击现有的伦理道德，可大力推广 16. 下列有关生物技术安全和伦理问题的观点合理的是（ ） A. 若转基因植物的外源基因来自自然界，则不会引发安全问题 B. 将目的基因导入叶绿体基因组中能防止目的基因随花粉扩散 C. 生殖性克隆的核心争议在于可能导致人类基因多样性降低 D. 生殖性克隆涉及核移植技术，治疗性克隆不涉及核移植技术 17. 《诗经·七月》中有“十月获稻，为此春酒”，记录了古人用新收获下来的稻谷酿酒的习俗。要酿造米酒主要有三步：蒸米、拌曲和发酵。酒曲主要含有的微生物有霉菌和酵母菌等，霉菌的主要功能是将稻米中的淀粉糖化，转化为葡萄糖。下列叙述错误的是（ ） A. 霉菌细胞内含有淀粉酶，代谢过程中可能将其分泌到胞外 B. 蒸米步骤完成后需立刻开始加入酒曲搅拌，防止杂菌污染 C. 在酒精发酵过程中，霉菌的淀粉糖化能力逐渐下降 D. 酿造完成后，可通过打开盖子并适度升高温度酿造米醋 18. 科学家以水稻（2n=24）和稗草（2n=54）为材料，利用植物体细胞杂交技术获得了具有稗草抗逆性（如耐盐、抗除草剂）的水稻，流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A. 植物体细胞杂交是将不同来源的植物体细胞融合成杂种细胞的技术 B. 可以用离心法或灭活病毒诱导两种原生质体融合 C. 两种细胞均需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 D. 杂种细胞重新形成细胞壁与高尔基体的活动有关 19. 关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验，下列叙述正确的是（ ） A. PCR扩增DNA片段时DNA双链的解聚原理与细胞内相同 B. 耐高温的DNA聚合酶可直接在模板链的3′端从头合成子链 C. 电泳可鉴定不同长度的DNA分子是因为它们在凝胶中的迁移速率不同 D. 染色后的凝胶条带的位置可以反映DNA分子碱基序列的组成 20. 从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确的是（ ） A. 传代培养时，培养皿需密封防止污染 B. 选取①的细胞进行传代培养比②更合理 C. 直接用离心法收集细胞进行传代培养 D. 细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关 21. 谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，通过以下代谢途径发酵生产L-谷氨酰胺。下列叙述正确的是（ ） A. 发酵工程的菌种只能直接来自自然界 B. 发酵初期控制pH为7.0，后调为5.6，有利于提高L-谷氨酰胺产量 C. 必须要借助显微镜观察才能初步判断发酵过程中是否发生球状细菌污染 D. 发酵结束后，采用过滤、沉淀的方法将菌体分离和干燥即可获得产品 22. 某科研团队在培育铁皮石斛新品种并提取石斛多糖时，分别采用了以下方法：①将铁皮石斛（2n=38）与抗寒的细茎石斛（2n=38）体细胞杂交获得杂种植株；②利用铁皮石斛愈伤组织进行液体悬浮培养规模化提取石斛多糖；③通过农杆菌转化法将冷响应基因导入铁皮石斛愈伤组织获得转基因植株。下列叙述正确的是（　　） A. 方法①获得的杂种植株是含有76条染色体的二倍体，可通过减数分裂产生正常配子 B. 方法②需控制培养基中的激素比例，以利于愈伤组织增殖和石斛多糖合成 C. 方法③需筛选含重组Ti质粒的愈伤组织，经再分化获得抗寒转基因植株 D. 三种方法均依赖植物细胞的全能性，为铁皮石斛品种改良提供了新方案 23. 下列关于现代生物技术及生物学实验的叙述，正确的是（　　） A. 琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的过程中，琼脂糖融化后应立即加入核酸染料，以免凝胶凝固导致染料分布不均 B. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 C. DNA粗提取实验中，研磨液中的EDTA（蛋白质变性剂）可抑制DNA酶活性，防止研磨过程中DNA被水解 D. 凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置 24. 朋友圈中经常有一些与生物学有关的说法，有些有一定的科学依据，有些违反生物学原理。以下说法中有科学依据的是（ ） A. 烹饪过程中高温会破坏蛋白质的空间结构，降低其营养价值 B. 癌细胞主要进行无氧呼吸，会消耗大量葡萄糖，可以通过饥饿来治疗癌症 C. 转基因食品中含有外源基因，食用后能进入人体细胞并改变人体遗传物质 D. 添加了蛋白酶的加酶洗衣液，用于蚕丝制品的洗涤时会对衣物造成损伤 25. 研究人员将脂肪酶外环上的天冬氨酸定点突变为碱性赖氨酸，成功将其最适 pH 从 7.0 提高到 9.0，从而提高了其在碱性环境下的稳定性，该过程中直接操作的对象是（ ） A. 蛋白质 B. 氨基酸 C. 基因 D. mRNA 二、不定项选择题（每题3分，多选错选不得分，少选得1分，全选对得3分，共5题15分） 26. 尿素是一种重要的农业肥料，尿素分解菌可合成脲酶，利用以尿素为唯一氮源的选择培养基可从土壤中分离尿素分解菌并进行计数，科研人员取0.1 g土壤分别稀释103~107倍，将0.1 mL不同稀释倍数的土壤稀释液接种在固体培养基上， 在相同的培养条件下得到如表数据。下列叙述正确的是（　　） 稀释倍数 103 104 105 106 107 菌落 数/个 1号平板 478 367 270 26 5 2号平板 496 354 268 20 8 3号平板 509 332 272 29 3 A. 利用稀释涂布平板法可将稀释液中的菌体完全分离，一个菌落对应一个菌体 B. 每克土壤中尿素分解菌的数量是2.7×108个 C. 以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌均为尿素分解菌 D. 若在显微镜下利用细菌计数板直接计数，则统计结果一般比实际活菌数多 27. 成纤维细胞生长因子20（FGF20）可作为肿瘤标记物，为制备抗FGF20单克隆抗体以用于癌症早期诊断筛查，科研人员设计的流程如图所示。下列分析正确的是（　　） A. 抗原甲为FGF20，一般从正常人体细胞的细胞表面获取 B. ①过程获得的B淋巴细胞均能合成抗FGF20抗体 C. ③过程的选择培养基对于未融合的亲本细胞和融合的同种核细胞的生长有抑制作用 D. 将抗FGF20单克隆抗体与抗原甲进行杂交，可以用于检测该单克隆抗体的特异性 28. 天然胰岛素易形成多聚体，导致皮下注射后起效缓慢。为获得速效胰岛素，科研人员采用易错PCR技术（通过提高PCR中的碱基错配率，从而得到随机突变的多种基因）对胰岛素基因进行改造并定向筛选，最终利用大肠杆菌生产出不易聚合的速效胰岛素。下列叙述正确的是（　　） A. 易错PCR技术可以定向改造胰岛素基因 B. 该技术操作过程中需要耐高温的解旋酶 C. 速效胰岛素的研发运用了蛋白质工程技术 D. 大肠杆菌生产速效胰岛素时遵循中心法则 29. 用A和B两种限制酶分别处理同一DNA片段(限制酶在对应切点一定能切开)，电泳分离结果如图1和图2所示。下列叙述正确的是（　　） A. 图1中X代表的碱基对数为4500，Y是限制酶A的酶切位点 B. 用酶A和酶B同时处理图1中DNA片段可增加6个游离的磷酸基团 C. 若用酶A和酶B同时处理该DNA片段，则电泳后得到5种产物 D. 电泳缓冲液配制的琼脂糖溶液中加入的核酸染料能与DNA结合，便于在紫外灯下观察 30. 某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是（ ） A. 在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品 B. 将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测 C. 将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落 D. 判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小 三、非选择题（共4题35分） 31. 下图为果酒与果醋发酵装置示意图，请据图回答下列问题。 （1）酿造葡萄酒时，在榨汁前，要先对葡萄进行_________ （填“先去除枝梗后清洗”“先清洗后去除枝梗”），该步骤可以避免去除枝梗时引起葡萄破损，增加被_________污染的机会。 （2）用体积分数为_____对上述装置进行_______后，在装入葡萄汁，将发酵装置放在18~30 的环境中，每天拧开气阀b多次，排出发酵过程产生的大量 _________。装置中排气口设计成弯曲形状的目的______。 （3）10d之后，利用酸性条件下的_______对出料口c 取样的物质进行检验。若呈________色，则说明产生了酒精。 （4）产生酒精后，在发酵液中加入醋酸菌，然后将装置放在________℃的环境中，适时打开气阀 向发酵液中充气。充气的原因是_______，此时发生的主要变化是_______。（用化学反应式的形式表达） 32. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其产生的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程进行培养，具体过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。请回答下列相关问题。 （1）进行①过程前要对狼爪瓦松植株甲幼嫩的叶进行消毒处理，所用的试剂为体积分数为70%的_____和质量分数为5%左右的_____溶液。图中通过②③培养获得植株乙所利用技术的细胞学原理是_____，选用植株甲幼嫩的叶进行过程②③的原因是_________。过程②③的接种操作必须在_______旁进行，且每次使用后的器械都要_____。 （2）培养中的愈伤组织细胞一直处于___（填“增殖”或“分化”）的状态，可用于④诱导产生突变体植株。 （3）⑤过程需要用____酶进行处理，形成植株丁的过程中，PEG的作用是_____，若要达到此作用，除了利用PEG之外，还可采用___________法（写2种）处理。 （4）通过植物细胞工程对狼爪瓦松培养，获得药物黄酮类化合物，下列相关叙述错误的是______。 A. 过程③通常先在生长素与细胞分裂素比例高的培养基中培养 B. 过程④常用射线或化学物质处理后即可获得大量目的植株 C. 所得三种植株中乙和丙的遗传信息与甲相同，植株丁和甲是同一物种 33. 类胡萝卜素具有预防、改善夜盲症和延缓衰老的功能。番茄红素β-环化酶（LCYB）是类胡萝卜素生物合成途径中的关键酶，在桂花中该酶的含量较高。某科研团队将“堰虹桂”（桂花品种）的LCYB基因转入烟草，获得了高产类胡萝卜素烟草。图1表示扩增LCYB基因的引物序列，图2表示XhoI和SmaI的识别序列和酶切位点。回答下列问题： 引物名称 引物序列（5'～3'） LCYB-F ATGGATACTTTGCTGAAAACTCAT LCYB-R TCATTCTTATCCTGTACTAAATTG 图1 SmaI XhoI 图2 注：限制酶酶切位点 （1）LCYB基因克隆。提取“堰虹桂”的总RNA，经_______得到cDNA，利用PCR技术扩增LCYB基因，若在PCR反应体系中加入1个LCYB基因和其他充足的原料，经过40个循环，共有_______个引物参与LCYB基因的合成。经该方法获得的目的基因片段缺乏________，因此不能直接在受体细胞中表达。 （2）构建基因表达载体。将扩增的目的基因插入质粒的XhoI和SmaI酶切位点之间，为保证目的基因与质粒准确连接，应对目的基因进行的操作是_______。选用两种限制酶分别处理质粒和含目的基因的DNA片段的目的是_______（答两点）。 （3）将目的基因导入受体细胞。为获得仅在烟草叶肉细胞中特异性表达LCYB基因的烟草，应将LCYB基因与_______等调控元件重组在一起，选择_______法完成烟草的转化，利用植物组织培养技术，将含LCYB基因的烟草体细胞培育成烟草植株的过程中调整培养基中生长素和细胞分裂素的_______。 （4）为探究低温处理对“堰虹桂”花瓣中类胡萝卜素含量和LCYB基因表达的影响，可在花期检测花瓣中_______的含量。若低温条件下，LCYB基因的表达量增加，提出在生产上的一种应用：_______。 34. 如图为A、B不同物种间体细胞杂交示意图，请回答下列问题。 (1)去除细胞壁而不损伤细胞可用______________、________处理。在用促融剂处理时，使用的促融剂主要有________________。 (2)融合细胞中可能包括________种类型，其中杂种细胞的遗传物质组成是_________________________________________________。 (3)由杂种细胞经人工诱导培养，经__________分裂增加细胞数目并不断分化，逐渐发育成C植株。该植株的性状与D亲本植物的性状区别是______________________________________________________。 (4)整个培养过程应用了细胞工程的__________和_____________两大技术，这种培育杂种植株的意义是________________________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $