内蒙古自治区鄂尔多斯市东胜区鄂尔多斯市第一中学2025-2026学年高二下学期5月期中生物试题

**基本信息** 聚焦生物技术前沿与实验实践，通过25道单选、5道不定项及4道综合题，全面考查高二生物核心知识与科学探究能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|25/50|发酵工程（第2题）、植物细胞工程（第3题）、基因工程（第6题）|结合灭菌消毒（第1题）、生物武器（第7题）等实际情境| |不定项选择题|5/15|微生物培养（第26题）、蛋白质工程（第29题）|考查培养基灭菌（第26题）、基因连接方向（第28题）等细节| |非选择题|4/35|微生物筛选计数（31题）、单克隆抗体制备（32题）、基因工程应用（34题）|综合实验设计（31题PE降解菌筛选）与前沿技术（34题启动子功能研究）|

2025-2026学年下学期高二5月期中考试 33.（共7分） （1） （2） （3） 34.（共10分） （1） （2） （3） （4） 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 31.（共10分） （1） （2） （3） 32.（共8分） （1） （2） （3） 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 生物答题纸 姓 名 班 级 考 场 座位号 条形码粘贴处 贴条形码区域 注 意 事 项 1.选择题部分必须使用2B铅笔填涂；非选择题部分必须使用0.5毫米的黑色签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。 2.请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。 3.保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破，禁用涂改液，涂改胶条。 填涂样例 正确填涂 $ 错误填涂 %^&* 缺考标记 ` 是否借读 ` 是否作弊 ` 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 客观题（请用2B铅笔填涂） 1 A B C D 6 A B C D 11 A B C D 2 A B C D 7 A B C D 12 A B C D 3 A B C D 8 A B C D 13 A B C D 4 A B C D 9 A B C D 14 A B C D 5 A B C D 10 A B C D 15 A B C D 16 A B C D 21 A B C D 26 A B C D 17 A B C D 22 A B C D 27 A B C D 18 A B C D 23 A B C D 28 A B C D 19 A B C D 24 A B C D 29 A B C D 20 A B C D 25 A B C D 30 A B C D 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年第二学期高二5月期中考试 生物试题 时间：75分钟 分值：100分 命题人：王一新 一、单选题（每题2分，共25题50分） 1．灭菌、消毒是生物学实验中常见的无菌操作。下列叙述正确的是（　　） A．牛奶要用100℃的沸水进行高温消毒10分钟 B．微生物培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染 C．制作果酒的发酵瓶在清洗干净后还需用70%的酒精消毒处理 D．牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后蛋白质变性失活不利于培养微生物 2．发酵工程在食品工业、医药工业和农牧业等许多领域得到了广泛的应用，形成了规模庞大的发酵工业。下列叙述正确的是（　　） A．黑曲霉可进行发酵生产谷氨酸，谷氨酸经过一系列处理能制成味精 B．通过发酵工程从微生物细胞中提取出的单细胞蛋白，可制成微生物饲料 C．菌落的形态、大小、颜色等肉眼可见的特征可作为菌种鉴定的依据 D．啤酒制作中，主发酵主要是酵母菌繁殖，后发酵侧重代谢产物的生成 3．科研人员通过植物体细胞杂交技术，利用甲种花卉（2N=18）和乙种花卉（2N=24）培育出兼具二者优良性状的新品种。下列叙述正确的是（　　） A．可用电融合法、PEG融合法或灭活的病毒诱导原生质体融合 B．对两种动物细胞进行相似的操作也可在体外诱导多倍体产生 C．整个培育过程需要无菌操作，故不需要更换培养基 D．该过程利用了细胞的全能性和细胞膜的流动性 4．某研究团队以濒危植物华盖木的茎段为外植体，通过植物组织培养技术进行快速繁殖（如图所示）。脱分化阶段需对培养基中的植物激素进行精细调控。下列叙述正确的是（　　） A．过程①中细胞通过减数分裂增加数量，遗传物质会发生重组 B．过程①中细胞失去其特有结构功能，形成具有分生能力的薄壁组织团块 C．与过程①相关的植物激素使其脱分化形成胚状体，进而长出芽和根 D．过程②③发生了细胞分化，无需每日给予适当时间和强度的光照 5．用高通量筛选技术可快速、高效从大量微生物群体中筛选出具有特定功能或表型的菌株，高通量筛选石油降解菌的流程主要是样品采集与预处理→微型化高通量培养与单细胞分离→高通量检测“降解活性”→自动挑菌、复筛和鉴定。下列相关叙述错误的是（　　） A．配制含有石油的培养基进行选择培养，以提高目标菌株的比例 B．高通量培养需开发适宜培养基，培养基添加胰蛋白酶可获得单细胞菌体 C．显色底物经微生物降解后发生颜色变化，可用于高通量检测“降解活性” D．复筛可用于筛选高效降解菌，可通过检测目标基因的序列对菌株进行鉴定 6．某基因表达载体部分结构如图所示，F1、F2、R1、R2表示不同的引物。下列相关叙述错误的是（　　） A．启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点 B．该基因表达载体至少还包含复制原点和标记基因 C．PCR检测目的基因插入方向是否正确时，引物可选择F2和R2 D．若引物F1与a链相应部位序列相同，则b链为转录的模板链 7．2022年12月16日，《禁止生物武器公约》第九次审议大会在日内瓦闭幕，此次审议大会及其成果标志着全球生物安全治理取得重要进展。下列关于生物武器的叙述，错误的是（　　） A．由转基因微生物制成的生物武器具有难以预防和难以治疗的特点 B．生物武器包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等 C．经过基因改造的微生物可能使某些特定人群感染，而其他人群不易感染 D．与常规武器相比，生物武器具有传染性强、不易被发现、不受自然条件影响等特点 8．下列发生了细胞分化且能体现体细胞全能性的生物学过程是 A．玉米种子萌发长成新植株 B．小鼠骨髓造血干细胞形成各种血细胞 C．小麦花粉经离体培养发育成单倍体植株 D．胡萝卜根韧皮部细胞经组织培养发育成新植株 9．已知固体培养基会因碳酸钙存在而呈乳白色，且乳酸菌能分解培养基中的碳酸钙。某同学尝试用含有碳酸钙的固体培养基从新鲜的泡菜滤液中分离纯化乳酸菌，下列叙述错误的是（　　） A．该同学所用的培养基属于选择培养基，且碳酸钙作为唯一碳源 B．分离纯化所用的培养基都要进行灭菌处理 C．需要用无菌水对泡菜滤液进行稀释 D．应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌 10．牛奶是微生物的良好培养基，故饮用前需要对牛奶进行消毒。牛奶也可以被加工成酸奶。某生物兴趣小组探究某品牌酸奶中乳酸菌数量时的实验操作如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．采用巴氏消毒法对牛奶进行消毒的优点是基本不破坏牛奶的营养成分 B．应统计a、b、c三个平板中菌落数的平均值，使实验结果更加准确可靠 C．该方法统计的结果往往较实际结果偏低 D．过程①②表示对酸奶样品进行梯度稀释，过程③利用了平板划线法 11．某新型禽类病毒AIV主要侵害免疫器官，导致接种疫苗失效，对养殖业危害极大。该病毒的某种衣壳蛋白（CP蛋白）在其生命周期中含量丰富且高度保守。研究者拟以CP蛋白为抗原免疫小鼠，制备特异性单克隆抗体，以期快速检测该病毒，主要实验流程如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A．本实验中，小鼠注射的特定抗原应为该病毒的CP蛋白 B．图中筛选1中，融合的细胞都可以在选择培养基上正常增殖 C．图中筛选2所依据的基本原理是抗原与抗体的反应具有特异性 D．制备单细胞悬液时需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等处理 12．猪细小病毒（PPV）会导致猪崽繁殖障碍性传染病。VP2蛋白是PPV的主要结构蛋白，可诱导机体产生特异性中和抗体。某科研小组为开发基于VP2蛋白的PPV免疫学检测产品，设计实验流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A．①过程取小鼠脾脏组织剪碎加入培养液即可制成细胞悬液 B．②过程可通过聚乙二醇诱导细胞融合，得到3种以上杂交细胞 C．③过程需进行克隆化培养，传代培养过程中会发生贴壁和接触抑制 D．④过程可将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔进行培养 13．某遗传病家系的系谱图如图甲所示，已知该遗传病由正常基因A突变成A1或A2引起，且A1对A和A2为显性，A对A2为显性。为确定家系中某些个体的基因型，分别根据A1和A2两种基因的序列，设计鉴定该遗传病基因的引物进行PCR扩增，电泳结果如图乙所示。下列叙述正确的是（　　） A．电泳结果相同的个体基因型相同，表型相同的个体电泳结果相同 B．若Ⅲ1与正常女子结婚生了1个患病的后代，则可能是A2导致的 C．若Ⅲ5的电泳结果仅有1条条带，则Ⅱ6的基因型只有1种可能 D．若Ⅱ3的电泳结果有2条条带，则Ⅱ2和Ⅲ3基因型相同的概率为1/3 14．集落刺激因子CSF是一类可刺激造血干细胞增殖分化的细胞因子，在免疫调节中起重要作用。某科研团队将编码人CSF的基因导入大肠杆菌，大量生产CSF。下列相关叙述错误的是（　　） A．基因工程操作属分子水平，其原理为基因重组 B．基因表达载体中的启动子能驱动目的基因转录出mRNA C．CSF基因的表达产物无法在大肠杆菌中进行盘曲折叠加工后具有生物活性 D．从转基因大肠杆菌中提取mRNA直接进行PCR可鉴定目的基因是否转录 15．下列关于培养技术及应用的叙述，错误的是（    ） A．采用茎尖组织培养技术培育脱毒草莓 B．可用无机盐、琼脂和石油配制的培养基筛选石油降解菌 C．可用基因组编辑技术进行“设计完美婴儿”生殖性克隆人研究 D．可用PEG诱导骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合成杂交瘤细胞 16．基因工程在操作过程中需要限制酶、DNA连接酶、载体三种工具。以下有关基本工具的叙述，正确的是 A．所有限制酶的识别序列均由6个核苷酸组成 B．所有DNA连接酶均能连接黏性末端和平末端 C．真正被用作载体的质粒都是天然质粒 D．原核生物内的限制酶可切割入侵的DNA分子而保护自身 17．产黄青霉菌能产生青霉素，青霉素发酵是一个高耗氧过程，产黄青霉菌生产青霉素的发酵流程图如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．青霉素的发酵过程是高耗氧过程，发酵过程中应通入灭菌的空气 B．由于青霉素具有杀菌功能，因此无论是培养基还是发酵罐均无需灭菌 C．图中①②过程培养在固体培养基中，③过程接种到液体培养基中 D．图中④⑤过程均可采用过滤、沉淀的方法来获得菌种和青霉素 18．云南昆明花卉产业基地、山东寿光果蔬基地广泛应用植物细胞工程技术，大幅提升经济效益，以下技术和相应优点的对应关系中，正确的是（　　） A．微型繁殖技术——打破生殖隔离 B．单倍体育种技术——利于获得突变体 C．植物体细胞杂交技术——精准控制成体性状 D．植物细胞培养——不占用耕地，几乎不受季节限制 19．中国科学院研究团队利用相关生物学技术，成功培育出世界上首例只有双雌来源的孤雌小鼠和双雄来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图所示。下列描述错误的是（　　）    A．通过以上生殖方式产生的孤雌或孤雄小鼠均为二倍体生物 B．孤雌小鼠的后代均为雌性，孤雄小鼠的后代均为雄性 C．孤雄小鼠的获得利用了动物细胞工程、基因工程、胚胎工程 D．上述技术为拯救仅存单一性别的濒危哺乳动物提供了可能性 20．医学和农业生产上经常应用胚胎工程技术，相关叙述正确的是（    ） A．为使雌性动物超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素 B．可以使用雄性动物新鲜的精子与处于MⅡ期卵母细胞完成受精作用 C．我国政府允许在医学上应用生殖性克隆人胚胎解决不育不孕 D．为提高胚胎利用率，可采用胚胎分割等繁殖技术 21．为了调查某河流的水质情况，某研究小组利用两种不同方法对该河流水样中的细菌进行分离，结果分别如图甲、乙所示。下列叙述正确的是（　　） A．图甲对应平板划线法，连续划线操作未将聚集的菌种稀释 B．图乙对应涂布平板法，若想要获得图乙所示结果，则一般要对水样进行稀释 C．若采用图甲对应方法对细菌进行计数，则应选择菌落数为30～300的平板进行统计 D．图乙中的一个菌落由一个活菌生长发育而来，统计结果用活菌数表示 22．2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请，其培育过程可选用如下技术路线。下列叙述错误的是（　　） A．母亲携带的红绿色盲基因不会遗传给“三亲婴儿” B．采集的精子必须经过获能处理后，才能用于体外受精 C．由图可知，三亲婴儿的培育采用了动物细胞核移植技术、动物细胞培养等技术 D．“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因 23．基因X编码的蛋白X能够与核基因Y的启动子区域结合，进而显著增强基因Y的表达。基因Y的表达产物可促进植物开花。下列叙述正确的是（　　） A．蛋白X在细胞核内合成后，可直接作用于基因Y的启动子 B．通过基因工程技术敲除基因X，会延迟植物的开花时间 C．在基因Y缺失突变体中，过量表达基因X仍能促进植物开花 D．蛋白X可能通过帮助DNA聚合酶识别基因Y的启动子而发挥作用 24．生物技术就像一把“双刃剑”，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜在的危害。下列叙述错误的是（    ） A．生物武器包括两类，病毒类和生化毒剂类 B．研究转基因农作物时应采取多种方法防止转基因花粉的传播，避免基因污染 C．反对设计试管婴儿的原因之一是避免有人滥用此技术选择性设计婴儿 D．干细胞培养在临床医学等领域前景广泛，但也存在肿瘤发生的风险 25．研究人员利用CRISPR/Cas9敲除小鼠受精卵中前脑发育关键基因，培育出异种嵌合小鼠（如图所示）。该小鼠体内发育出结构与功能正常、尺寸及发育进程与宿主小鼠保持同步的大鼠源性前脑。下列叙述错误的是（　　） A．用显微注射技术将CRISPR/Cas9重组质粒导入小鼠受精卵 B．大鼠干细胞经诱导与小鼠囊胚细胞融合后才能参与组织发育 C．胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境下空间位置的转移 D．异种组织发育过程中器官大小和发育速度受到宿主小鼠的调控 二、不定项选择题（每题3分，多选错选不得分，少选得1分，全选对得3分，共5题15分） 26．从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述不正确的是（　　） A．制备的培养基可用干热灭菌法进行灭菌 B．将土样加入无菌水并混匀，梯度稀释后取悬液加入平板再涂布 C．连续划线时，从上次划线的起始端开始划线 D．鉴定后的致病菌可接种在斜面培养基上，并在室温下长期保存 27．下图为农作物新品种的育种方式，下列说法错误的是（　　） A．①过程细胞融合的标志是再生出细胞壁 B．筛选出的杂种细胞含有两个细胞的遗传物质，所以体细胞杂交属于有性生殖 C．②过程表示脱分化，需提供无机营养成分、有机营养成分和植物激素等 D．③过程应将愈伤组织先转移到生长素与细胞分裂素比例高的生芽培养基上培养，待长出芽后，再将其转接到比例低的生根培养基上培养 28．某目的基因的两端含有限制酶EcoRI识别和切割的位点，使用单酶切割容易产生目的基因与质粒反向连接现象。用于扩增、检测目的基因是否正确连接的相关引物1～引物5如图所示。下列叙述错误的是（    ）    A．EcoRI酶切可使目的基因两端产生不同的黏性末端 B．目的基因与质粒反向连接会改变mRNA合成的方向 C．扩增目的基因时，选用的引物是1、5或引物2、3 D．检测目的基因与质粒是否正确连接时，可选用引物2、4 29．蛋白质工程是指根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行分子设计、生产的过程。下面是蛋白质工程的基本途径，据图分析下列叙述正确的是（　　） A．过程a所需原料是脱氧核苷酸，过程b所需原料是氨基酸 B．参与过程c的细胞器有核糖体、内质网、高尔基体、线粒体等 C．过程d的主要依据是每种氨基酸都有其对应的密码子 D．通过蛋白质工程可以获得人类需要的蛋白质 30．为有效防范由各类生物因子、生物技术误用滥用等引起的生物性危害，生物安全已纳入国家安全体系。下列不符合生物技术的安全性和伦理问题的是（　　） A．利用生物技术改造工程菌获得大量的抗生素 B．克隆技术可应用到器官移植但不能进行人体克隆 C．中国反对生物武器，但在特殊情况下可以生产生物武器 D．基因编辑技术的不断成熟并不意味着大家可以随意选择和定制孩子 三、非选择题（共4题35分） 31．合成塑料难以被微生物降解。但研究发现，某些昆虫的肠道内存在PE（一种合成塑料）降解细菌。现欲从昆虫的肠道中筛选能够降解PE的菌株。回答下列问题： (1)筛选过程中，应该将昆虫的肠道内容物加入以__________作为唯一碳源的培养基，从功能上看，这种培养基属于__________培养基。对所用的培养基和玻璃器皿进行灭菌，可采用的方法分别是__________和__________。 (2)菌种的划线纯化过程要始终在超净工作台上的____________附近进行，第二次及以后的划线总是从上一次划线的末端开始，其目的是____________。 (3)对筛选出的菌种进行培养并计数时，选用104、105、106三个不同稀释倍数的菌液，各取0．2mL涂布，每个稀释度作三次重复，经24h恒温培养后结果如下。由表可知，菌液中塑料分解菌的密度为_______个/mL。 稀释倍数 104 105 106 平板编号 A1 A2 A3 B1 B2 B3 C1 C2 C3 菌落数 315 298 302 45 54 51 12 9 11 32．随着单克隆抗体(单抗)理论不断丰富，生产工艺不断成熟，单抗类药物将为患者带来更多康复的曙光。下图显示单克隆抗体制备过程及部分应用场景，回答下列问题。 (1)培养骨髓瘤细胞的基本条件除细胞所需要的各种营养物质外，还需要___________(答出1点即可)等条件。B细胞不能通过体外培养获得，主要原因是在体外培养条件下，B细胞___________。 (2)第一次选择得到杂交瘤细胞，对杂交瘤细胞进行传代培养，结果不是单克隆，原因是___________。第二次选择时，使用多孔培养板进行单克隆培养，用特定试剂检测后，选择___________的单克隆进行大规模培养，并从培养液中获取单克隆抗体，与血清抗体相比，其优点是___________(答出2点即可)。 (3)抗体-药物偶联物(ADC)是通过靶向递送细胞毒素类药物，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，在制备ADC单抗时利用的抗原是___________。 33．科学家利用动物乳腺生物反应器生产的某病毒的N蛋白，可用于制备该病毒的疫苗，基本流程如图所示。回答下列问题： (1)从羊驼体内采集到的精子需要进行______处理，同时采集到的卵母细胞一般需要培养到_____期，才能用于体外受精。卵（母）细胞受精的标志是______。 (2)进行过程③之前，需要用激素对代孕母羊驼进行______处理。为获得转基因母羊驼，需要选择囊胚期的______细胞对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定。若选择该时期的雌性胚胎进行______，则可获得多个雌性个体，进行此操作时应注意将______均等分割。 (3)将早期胚胎移植到代孕母羊驼体内时，一般______（填“需要”或“不需要”）使用免疫抑制剂处理代孕母羊驼，这是因为______。 34．大豆是重要的粮油作物，提高大豆产量是我国农业领域的重要任务。我国研究人员发现，基因S在大豆品种DN（种子较大）中的表达量高于品种TL（种子较小），然后克隆了该基因（两品种中基因S序列无差异）及其上游的启动子序列，并开展相关研究。 (1)基因S启动子的基本组成单位是____________。 (2)通过基因工程方法,将DN克隆的“启动子D+基因S”序列导入无基因S的优质大豆品种YZ。根据题19图所示信息（不考虑未标明序列）判断构建重组表达载体时，为保证目标序列的完整性，不宜使用的限制酶是____________；此外，不宜同时选用酶SpeⅠ和XbaⅠ。原因是____________。 (3)为验证“启动子D+基因S”是否连接在表达载体上，可用限制酶对重组表达载体酶切后进行电泳。电泳时，对照样品除指示分子大小的标准参照物外，还应有______________。经验证的重组表达载体需转入农杆菌，检测转入是否成功的技术是______________。 (4)用检测后的农杆菌转化品种YZ所得再生植株YZ-1的种子变大。同时将从TL克隆的“启动子T+基因S”序列成功导入YZ，所得再生植株YZ-2的种子也变大，但小于YZ-1。综合分析，大豆品种DN较TL种子大的原因是_______________。 第 1 页 共 4 页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年第二学期高二5月期中考试 生物试题答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 C C D B B C D D A D 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 B B D D C D A D B D 题号 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 答案 B A B A B ACD BD ABC CD CD 1．C 【详解】A、牛奶通常采用巴氏消毒法处理，该方法可在杀灭有害微生物的同时减少牛奶营养成分损失，若用100℃沸水消毒10分钟会大量破坏牛奶的营养物质，A错误； B、抗生素会抑制细菌等原核微生物的生长，若培养的目标微生物为细菌，添加抗生素会导致目标菌死亡，因此并非所有微生物培养基都需要添加抗生素，B错误； C、果酒制作依赖葡萄皮表面的野生型酵母菌，发酵瓶不能进行高压灭菌，清洗干净后用70%的酒精消毒既可杀灭杂菌，又不会影响后续发酵，C正确； D、牛肉膏蛋白胨培养基经高压蒸汽灭菌后，部分蛋白质发生变性，但变性蛋白质仍可被微生物分解利用，作为碳源、氮源等营养物质，不会影响微生物培养，D错误。 2．C 【详解】A、黑曲霉可用于生产柠檬酸，谷氨酸由谷氨酸棒状杆菌发酵获得，A错误； B、单细胞蛋白指微生物菌体本身，直接作为生物饲料，B错误； C、菌落具有种类特异性，因此菌落特征（如大小、形状、颜色）可用于菌种的初步鉴定，C正确； D、啤酒主发酵阶段主要是酵母菌繁殖和代谢产物的生成，后发酵侧重形成澄清、成熟的啤酒，D错误。 3．D 【详解】A、诱导植物原生质体融合的方法包括物理法（如电融合法）、化学法（如PEG融合法），灭活的病毒是诱导动物细胞融合的特有方法，不能用于植物原生质体融合，A错误； B、动物体细胞的全能性受到严格限制，即使进行细胞融合操作，也无法像植物杂种细胞那样培育为完整个体，不能获得多倍体动物，B错误； C、植物体细胞杂交的培育过程包含原生质体培养、脱分化、再分化等多个阶段，不同阶段对营养物质、植物激素的比例需求不同，即使全程无菌操作也需要更换培养基，C错误； D、原生质体融合过程依赖细胞膜的流动性，将杂种细胞培育为完整植株利用了植物细胞的全能性，D正确。 4．B 【详解】A、过程①脱分化阶段细胞通过有丝分裂增殖，遗传物质保持稳定，不会发生重组（重组发生在减数分裂过程中），A错误； B、过程①在一定激素和营养等条件的诱导下，已经分化的细胞可以经过脱分化失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块，即为愈伤组织，B正确； C、过程②③将愈伤组织接种到含有特定激素的培养基上，就可以诱导其再分化成胚状体，长出芽和根，进而发育成完整的植株，C错误； D、过程①诱导愈伤组织期间一般不需要光照，但在后续的培养过程②③中，每日需要给予适当时间和强度的光照，D错误。 5．B 【详解】A、配制含石油的培养基进行选择培养，可抑制非降解菌生长，使目标菌株（石油降解菌）富集，提高其在菌群中的比例，A正确； B、高通量培养需开发适宜培养基，但添加胰蛋白酶主要用于动物组织消化，微生物单细胞分离通常采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，胰蛋白酶不适用于微生物单细胞菌体制备，B错误； C、显色底物（如含染色剂的石油类似物）被微生物降解后，底物颜色变化可指示降解活性，便于高通量检测，C正确； D、复筛可评估菌株降解效率以筛选高效菌株，通过PCR扩增目标基因（如烃类降解酶基因）并测序，可进行菌株分子鉴定，D正确。 故选B。 6．C 【详解】A、启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，A正确； B、图中有启动子和终止子等，因此质粒还需具备的结构有限制酶的切割位点、标记基因、复制原点等，B正确； C、引物F2与R1或F1与R2结合部位包含目的基因的碱基序列，因此推测为了确定目的基因连接到质粒中且插入方向正确，进行PCR检测时，若仅用一对引物，应选择图甲中的引物F2和R1或F1与R2，C错误； D、若引物F1与a链相应部位序列相同，根据转录时碱基互补配对原则，那么b链为转录的模板链，D正确。 故选C。 7．D 【分析】生物武器的种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。 【详解】A、生物武器具有不易被发现和鉴定、隐秘性强的特点，因此由转基因微生物制成的生物武器具有目前人类难以预防和治疗的特点，A正确； B、生物武器包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等，B正确； C、基因工程能定向改造生物的性状，经过基因改造的微生物可能使某些特定人群感染，而其他人群不易感染，C正确； D、与常规武器相比，生物武器具有传染性强、不易被发现等特点，但容易受风速、气温等多种自然条件的影响，D错误。 故选D。 8．D 【分析】全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完成个体的潜能．细胞的全能性以产生个体为标志，若无个体产生，不能体现全能性．细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。 【详解】A、玉米种子萌发长成新植株过程中发生了细胞分化，但没有体现细胞的全能性，A错误； B、小鼠骨髓造血干细胞形成各种血细胞是细胞分化形成的，但该过程没有体现细胞的全能性，B错误； C、小麦花粉是生殖细胞，不是体细胞，C错误； D、胡萝卜根韧皮部细胞经组织培养发育成新植株过程中发生了细胞分化，该过程也体现了体细胞（胡萝卜根韧皮部细胞）的全能性，D正确。 故选D。 9．A 【详解】A、培养基中需添加有机碳源，碳酸钙的作用是作为鉴别物质，便于筛选产酸的乳酸菌，是鉴别培养基，且乳酸菌不能利用碳酸钙，需要添加其他有机碳源，A错误； B、为防止杂菌污染影响分离纯化结果，所有分离纯化所用的培养基都必须进行灭菌处理，B正确； C、新鲜泡菜滤液中乳酸菌浓度较高，直接涂布难以得到单菌落，因此需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，C正确； D、乳酸菌代谢产生乳酸，可分解菌落周围的碳酸钙使乳白色培养基消失，形成透明圈，因此应挑选具有透明圈的菌落作为候选的乳酸菌，D正确。 10．D 【详解】A、巴氏消毒法使用较低温度（通常72-85℃）杀死病原微生物，同时最大限度地保留牛奶的营养成分和风味，A正确； B、重复实验并取平均值可以减少随机误差，提高实验的准确性和可靠性，B正确； C、在平板计数中，当两个或多个细菌聚集在一起时，平板上只能看到一个菌落，导致计数偏低，C正确； D、过程①②：将1 mL酸奶样品加入9 mL无菌水中，重复操作，属于梯度稀释；过程③：取0.1 mL稀释液倒入平板，进行培养计数，这是稀释涂布平板法，而非平板划线法，D错误。 11．B 【详解】A、抗体与抗原的结合具有特异性，本实验目的是制备针对该病毒CP蛋白的特异性单克隆抗体，因此给小鼠注射的特定抗原就是该病毒的CP蛋白，A正确； B、图中筛选1是第一次筛选，目的是获得杂交瘤细胞，在该选择培养基中，未融合的细胞、同种细胞融合的细胞（如B淋巴细胞自身融合、骨髓瘤细胞自身融合的细胞）都不能正常增殖，只有杂交瘤细胞能正常存活增殖，B错误； C、筛选2是筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，原理是抗原与抗体的特异性结合，C正确； D、制备动物单细胞悬液时，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织，分解细胞间的蛋白质使细胞分散，D正确。 12．B 【详解】A、①过程取小鼠脾脏组织剪碎用胰蛋白酶处理，使细胞分散开来，然后加入培养液可制成单细胞悬液，A错误； B、②过程可通过聚乙二醇诱导细胞融合，得到3种以上杂交细胞，脾细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、脾细胞和骨髓瘤细胞融合细胞以及多细胞融合的细胞，B正确； C、③筛选得到的杂交瘤细胞需进行克隆化培养，杂交瘤细胞在传代培养过程中不会发生贴壁和接触抑制，C错误； D、④过程利用的是抗原—抗体杂交原理，可将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔进行培养，D错误。 13．D 【详解】A、已知该遗传病由正常基因A突变成A1或A2引起，且A1对A和A2为显性，A对A2为显性。因为PCR是根据A1和A2设计的引物，I1是2个条带，基因型为A1A2，I2和Ⅱ4都是1个条带，且表型正常，因此基因型均为AA2，由此可知上面的条带对应A1基因，下面的条带对应A2基因，如果电泳结果只有下面1个条带，基因型可能是AA2（正常）或A2A2（患病），由此可知电泳结果相同的个体表型不一定相同，A错误； B、根据A项分析可知，Ⅱ1无电泳条带且表型正常，Ⅱ1基因型为AA，Ⅱ2基因型为A1A2或A2A2或A1A，但Ⅲ1患病，因此Ⅲ1基因型只能为A1A，因此Ⅲ1与正常女子结婚，生了一个患病后代，只能是A1导致的，B错误； C、Ⅱ5基因型为A1A2或A2A2或A1A，Ⅲ5只有1个条带且患病，Ⅲ5基因型为A1A或A1A1或A2A2，而Ⅱ6没患病，Ⅲ5不可能是A1A1，因此Ⅱ6基因型AA2或AA，C错误； D、I1和Ⅱ3都是2个条带，基因型均为A1A2，I2和Ⅱ4都是1个条带，且表型正常，因此基因型均为AA2，Ⅱ2的基因型可能为A1A2或A2A2或A1A，Ⅱ1没有条带，表现正常，因此Ⅱ1基因型为AA，而Ⅲ1是患病的，基因型为A1A，因此Ⅱ2的基因型不能为A2A2，可能为A1A2或A1A，且各占1/2，Ⅲ3的基因型可能是A1A2或A2A2或A1A，且各占1/3，因此Ⅱ2和Ⅲ3的基因型相同的概率为1/2×1/3+1/2×1/3=1/3，D正确。 故选D。 14．D 【详解】A、基因工程的操作对象是DNA分子，属于分子水平的技术，其操作原理为基因重组，A正确； B、基因表达载体中的启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，能够驱动目的基因转录产生mRNA，B正确； C、大肠杆菌是原核生物，没有内质网、高尔基体等可对真核分泌蛋白进行加工的细胞器，CSF基因的表达产物是多肽链，无法在大肠杆菌中完成盘曲折叠等加工过程，因此不具有生物活性，C正确； D、PCR技术的模板是DNA，mRNA属于RNA，无法直接作为PCR的反应模板，需先将mRNA逆转录得到cDNA后才能进行PCR，以此鉴定目的基因是否转录，D错误。 15．C 【分析】现代生物技术的应用中，有许多技术是需要筛选和检测的，如制备单克隆抗体时，需要用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，还需要进行抗体阳性检测得到能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞；植物体细胞杂交过程中，需要筛选出杂种细胞进行组织培养；转基因技术中，需要筛选重组子和检测目的基因是否导入和表达。 【详解】A、植物的茎尖部位病毒极少甚至无病毒，采用茎尖组织培养技术可以培育脱毒草莓，A正确； B、石油降解菌能利用石油作为碳源，用无机盐、琼脂和石油配制的培养基，只有能分解石油的微生物才能在其上生长，所以可以筛选石油降解菌 ，B正确； C、“设计完美婴儿”生殖性克隆人研究严重违反人类伦理道德，同时也可能带来一系列的社会、法律和伦理问题，是被严格禁止的，C错误； D、PEG（聚乙二醇）可以诱导动物细胞融合，所以可用PEG诱导骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合成杂交瘤细胞，D正确。 故选C。 16．D 【详解】A、多数限制酶识别的核苷酸序列是由6个核苷酸组成，但不是所有限制酶的识别序列都是由6个核苷酸组成的，A错误； B、DNA连接酶分为E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶，前者只能连接黏性末端，后者主要连接平末端，B错误； C、真正被用作载体的质粒都是被改造过的质粒，C错误； D、原核生物内的限制酶可切割入侵的DNA分子而保护自身，一般不切割自身的DNA分子，D正确。 故选D。 17．A 【详解】A、青霉素的发酵过程是高耗氧过程，发酵过程中应通入灭菌的空气，A正确； B、青霉素虽有杀菌功能，但并不能杀灭所有微生物，因此仍需对培养基和发酵罐进行灭菌处理，B错误； C、无论是扩大培养还是发酵罐内发酵，均在液体培养基中进行，C错误； D、获得菌种可选用过滤、沉淀的方法，青霉素属于代谢物，选用适当的提取、分离和纯化措施，D错误。 故选A。 18．D 【详解】A、微型繁殖技术的本质是植物无性繁殖，优点是保持亲本优良性状、快速大量繁殖种苗，无法打破生殖隔离，打破生殖隔离是植物体细胞杂交技术的特点，A错误； B、单倍体育种技术的核心优点是明显缩短育种年限，快速获得稳定遗传的纯合子，而突变体多是在植物组织培养过程中，利用分生细胞易发生突变的特点筛选获得，并非单倍体育种的优势，B错误； C、植物体细胞杂交技术的优点是克服远缘杂交不亲和的障碍，打破物种间生殖隔离，但杂种细胞包含两个物种的全套遗传物质，基因表达调控复杂，无法精准控制成体性状，C错误； D、植物细胞培养是在无菌人工容器中，控制温度、营养等条件培养细胞或组织，不需要在耕地种植，几乎不受季节、气候等自然条件限制，D正确。 19．B 【详解】A、根据图示可知，甲是只有双雌来源（两个卵细胞结合）的孤雌小鼠，乙是只有双雄来源（两个精子结合）的孤雄小鼠，因此甲和乙中均含有两个染色体组，均为二倍体，A正确； B、卵细胞内的性染色体只有X，而精子中的性染色体为X或Y，故孤雌小鼠的性染色体组成为XX，与XY杂交的后代有XX、XY，即孤雌小鼠的后代既有雌性又有雄性，同理孤雄小鼠的性染色体组成为XX或XY或YY，与XX杂交的后代有XX、XY，即孤雄小鼠的后代有雄性，也有雌性，B错误； C、由图可知，孤雄小鼠的获得利用了动物细胞培养、基因编辑、早期胚胎培养、胚胎移植等技术，即利用了动物细胞工程、基因工程、胚胎工程相关技术，C正确； D、结合题干该技术可成功培育出世界上首例只有双雌来源的孤雌小鼠和双雄来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，未来为拯救仅存单一性别的濒危哺乳动物提供了可能性，有利于相关科学研究发展，D正确。 故选B。 20．D 【分析】囊胚期细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层的细胞将来发育成胎盘和胎膜。进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹（葚）胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 【详解】A、促性腺激素属于蛋白质类激素，在饲料中添加的促性腺激素，因在动物的消化道中被分解而失去促进超数排卵的作用，A错误； B、雄性动物新鲜的精子获能后才具备受精能力，B错误； C、我国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验，我国允许应用试管婴儿技术解决不育不孕，C错误； D、为提高胚胎利用率，可采用胚胎分割、移植等无性繁殖技术实现，D正确。 故选D。 21．B 【详解】A、平板划线法的原理就是通过连续划线，逐步将聚集的菌种稀释，最终得到单菌落，该操作已经实现了菌种的稀释，A错误； B、涂布平板法（图乙）接种前，需要对高浓度的水样进行梯度稀释，才能得到分散均匀的单菌落，B正确； C、平板划线法（图甲）只能分离纯化菌种，不能用于细菌计数，只有稀释涂布平板法可用于计数，计数时才需要选择菌落数为30～300的平板统计，C错误； D、稀释涂布平板法中，可能多个活菌聚集在一起，最终只形成一个菌落，因此图乙的一个菌落不一定由一个活菌生长发育而来，统计结果往往比实际活菌数偏低，D错误。 22．A 【详解】A、红绿色盲基因位于X染色体上，属于细胞核基因。 母亲卵母细胞提供了细胞核，所以母亲携带的红绿色盲基因会通过细胞核遗传给“三亲婴儿”，A错误； B、刚采集的精子不能直接受精，需要在体外进行获能处理（如培养获能、化学诱导获能），获得受精能力后，才能与卵子完成体外受精，B正确； C、从图中可以看到，先将捐献者卵母细胞去核，再把母亲卵母细胞的细胞核移植到去核的捐献者卵母细胞中，这运用了动物细胞核移植技术。 之后对重组细胞进行体外培养，使其发育到MⅡ期卵母细胞，这运用了动物细胞培养技术。所以三亲婴儿的培育采用了动物细胞核移植技术、动物细胞培养等技术，C正确； D、“三亲婴儿”的细胞核基因一半来自父亲（精子提供），一半来自母亲（母亲卵母细胞的细胞核提供）。 细胞质基因来自卵母细胞捐献者（去核卵母细胞提供细胞质），所以“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因，D正确。 23．B 【详解】A、蛋白质的合成场所是核糖体，所以蛋白X是在细胞质中的核糖体上合成的，需要通过核孔进入细胞核后才能作用于基因Y的启动子，A错误； B、基因X的表达产物可增强基因Y的表达，而基因Y的表达产物可促进植物开花，因此敲除基因X会导致基因Y的表达水平下降，从而延迟植物的开花时间，B正确； C、基因Y的表达产物是开花过程中的关键执行者，如果基因Y本身缺失，无论其上游调控因子基因X如何过量表达，都无法产生促进开花的效应，C错误； D、转录起始阶段是RNA聚合酶识别启动子，蛋白X作为转录激活因子，通常是帮助RNA聚合酶识别并结合启动子，或者稳定转录起始复合物，而不是帮助DNA聚合酶（负责DNA复制）发挥作用，D错误。 故选B。 24．A 【分析】生物技术安全性问题包括食物安全、生物安全、环境安全三个方面。伦理问题主要在克隆人的问题上出现争议。 【详解】A、生物武器是指利用致病菌类、病毒类和生化毒剂类等作为战争武器，危害极大，可见生物武器不只包括两类，A错误； B、研究转基因农作物时应采取多种方法防止转基因花粉的传播，避免基因污染，提高转基因产品的安全性，B正确； C、反对设计试管婴儿的原因之一是避免有人滥用此技术选择性设计婴儿，而且可能引起基因歧视等诸多问题，C正确； D、干细胞培养在临床医学等领域前景广泛，比如用于治疗一些疑难疾病，但由于干细胞的分化和增殖能力较强，也可能面临安全性问题，如免疫排斥、肿瘤形成等，D正确。 故选A。 25．B 【详解】A、将重组质粒导入动物细胞（如小鼠受精卵）常用的方法是显微注射技术，A正确； B、由图可知，大鼠干细胞直接注入小鼠囊胚中就能参与组织发育，并非经诱导与小鼠囊胚细胞融合后才参与，B错误； C、胚胎移植的实质就是早期胚胎在相同生理环境下空间位置的转移，C正确； D、根据题意“该小鼠体内发育出结构与功能正常、尺寸及发育进程与宿主小鼠保持同步的大鼠源性前脑”，可知异种组织发育过程中器官大小和发育速度受到宿主小鼠的调控，D正确。 故选B。 26．ACD 【详解】A、制备的培养基需用高压蒸汽灭菌法灭菌，A错误； B、将土样加入无菌水制成悬液，经梯度稀释后，取各稀释度菌液涂布于培养基表面，分离并计数，B正确； C、连续划线时，每次应从上次划线的末端开始，以逐步稀释菌体，若从起始端开始无法有效分离单菌落，C错误； D、斜面培养基保存菌种需置于4℃短期保存，长期保存应使用甘油管保藏法，室温下无法长期保存，D错误。 27．BD 【详解】A、①过程细胞融合的标志是再生出细胞壁，A正确； B、筛选出的杂种细胞含有两个细胞的遗传物质，但该过程不涉及精卵结合，所以体细胞杂交属于无性生殖，B错误； C、②是新细胞形成愈伤组织的过程，表示脱分化，需提供无机营养成分、有机营养成分和植物激素等，C正确； D、同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向，生长素用量与细胞分裂素用量的比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长，D错误。 故选BD。 28．ABC 【详解】A、经过相同的酶切割后，会产生相同的黏性末端，A错误； B、mRNA的合成方向是从5'3'端，所以无论时正向连接，还是反向连接，不会改变mRNA的合成方向，B错误； C、扩增目的基因时，是从子链的5'3'端，所以扩增目的基因时，选用的引物是2、3，C错误； D、依据DNA的复制方向及经过切割后所产生的末端进行连接时，可知，引物可选择2、4，D正确。 故选ABC。 29．CD 【分析】1、蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。 2、蛋白质工程的过程：（1）根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）；（2）蛋白质工程最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。 【详解】A、过程a为转录，合成mRNA的过程，原料是核糖核苷酸，A错误； B、图中过程c为多肽链的加工与折叠，参与过程c的细胞器有内质网、高尔基体、线粒体等，核糖体是合成多肽链的场所，B错误； C、过程d为DNA合成，主要依据是每种氨基酸都有其对应的密码子，C正确； D、蛋白质工程的目的就是通过对基因的修饰和改造或者合成新的基因，从而获得人类需要的蛋白质，D正确。 故选CD。 30．CD 【详解】A、利用生物技术，即基因工程改造工程菌获得大量的抗生素，该技术符合生物技术的安全性和伦理问题，A不符合题意； B、克隆技术是可以克隆器官的，但是不可以进行人体克隆，禁止生殖性克隆人，B不符合题意； C、中国声明：在任何情况下，不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，这不涉及生物技术的安全性和伦理问题，C符合题意； D、基因编辑技术的不断成熟并不意味着大家可以随意选择和定制孩子，该过程不涉及生物技术的安全性和伦理问题，D符合题意。 故选CD。 31．(1) PE 选择 湿热灭菌 干热灭菌 (2) 酒精灯火焰 使细菌的数目随划线次数的增加而逐渐减少，最终得到单个菌落 (3)2．5×107 【分析】平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 【详解】（1）在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基，本实验要筛选出PE（一种合成塑料）降解细菌，因此所使用的培养基中应加入PE作为唯一碳源。所用的培养基用湿热灭菌或者高压蒸汽灭菌，玻璃器皿进行干热灭菌。 （2）菌种的划线纯化过程要始终在超净工作台上的酒精灯火焰附近进行，划线纯化过程中，接种环在每次划线前都要进行灼烧灭菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是使细菌的数目随划线次数的增加而逐渐减少，最终分离得到单个菌落。 （3）根据菌落计数规则，应选取菌落数在30~300之间的平板进行计数。稀释倍数为10^5的三个平板菌落数分别为45、54、51，平均值为50。涂布量为0.2 mL，因此每毫升菌液中的塑料分解菌密度为：50/0.2×105=250×105=2.5×107个/mL。 32．(1) 无菌无毒；适宜的温度、pH、渗透压；适宜的气体条件 不能无限增殖 (2) 传代培养是多种细胞分裂的结果(不是一个细胞分裂得到的细胞群体；增殖形成的新细胞群体来源于多个细胞) 抗原抗体特异性结合呈阳性 能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 (3)肿瘤细胞特有的抗原 【详解】（1）培养动物细胞的基本条件除了营养物质外，还需要无菌、无毒的环境（防止杂菌污染和有害代谢产物积累对细胞的伤害）、适宜的温度和 pH（温度一般为 36.5±0.5℃，pH 一般为 7.2 - 7.4 ，以维持细胞内酶的活性）、气体环境（95%空气和 5%CO₂ ，氧气是细胞代谢所必需的，二氧化碳可维持培养液的 pH ）等；在体外培养条件下，B 细胞不能无限增殖，所以 B 细胞不能通过体外培养获得。 （2）第一次选择得到的杂交瘤细胞是多种杂交瘤细胞的混合物，传代培养是多种细胞分裂的结果（不是一个细胞分裂得到的细胞群体；增殖形成的新细胞群体来源于多个细胞），因此，结果不是单克隆；第二次选择时，使用多孔培养板进行单克隆培养，用特定试剂检测后，选择能产生所需抗体（抗原抗体特异性结合呈阳性）的单克隆进行大规模培养；与血清抗体相比，单克隆抗体具有单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备等优点。 （3）抗体 - 药物偶联物（ADC）要实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，在制备 ADC 单抗时利用的抗原是肿瘤细胞特有的抗原（这样制备出的单克隆抗体才能特异性地识别肿瘤细胞，从而将细胞毒素类药物靶向递送到肿瘤细胞）。 33．(1) 获能 MⅡ 在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体（第一极体和第二极体）或雄原核、雌原核 (2) 同期发情 滋养层 胚胎分割 内细胞团 (3) 不需要 代孕母羊驼基本上不会对移植的胚胎发生免疫排斥反应 【详解】（1）从羊驼体内采集的精子需要经过获能处理（如培养法或化学诱导法），才能具备受精能力。采集的卵母细胞需培养至减数第二次分裂中期（MⅡ 期），此时卵母细胞才具备受精能力。在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体（第一极体和第二极体）或雄原核、雌原核：这是判断卵（母）细胞受精的重要标志。 （2）过程③为胚胎移植，移植前需用激素对代孕母羊驼进行同期发情处理，使供体和受体的生理状态一致，便于胚胎着床。囊胚期的滋养层细胞可用于性别鉴定。对囊胚期胚胎分割时，需将内细胞团均等分割，避免因内细胞团不均等导致胚胎发育能力差异。 （3）早期胚胎移植到代孕母羊驼体内时，不需要使用免疫抑制剂。原因：受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，这是胚胎移植成功的生理基础之一。 34．(1)脱氧核糖核苷酸（脱氧核苷酸） (2) EcoRⅠ 酶切后形成的片段黏性末端相同，易自我环化；不能保证目标片段与载体正向链接（可能会反向链接） (3) 酶切后的空载体片段，启动子D+基因S片段      PCR (4)品种DN的基因S上游启动子效应比TL强，使得基因S表达量更高，种子更大 【分析】【关键能力】 （1）信息获取与加工 题干关键信息 所学知识 信息加工 启动子的基本组成单位 基因的结构 启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，用于启动DNA的转录，是一段DNA片段，其基本组成单位是四种脱氧核糖核苷酸 电泳时，对照样品除指示分子大小的标准参照物外，还应有哪些成分 PCR及琼脂糖凝胶电泳 电泳可以分离不同大小的DNA片段，用限制酶对重组表达载体酶切后的产物不仅有“启动子D+基因S”片段，还有酶切后的空载体片段，因此电泳时，对照样品除指示分子大小的标准参照物外，还应有酶切后的空载体片段和“启动子D+基因S”片段 检测转入是否成功的技术 检测目的基因是都导入受体细胞的方法 在分子水平上检测目的基因是否转入成功可通过PCR等技术检测受体细胞的DNA上是否插入目的基因或目的基因是否转录出mRNA （2）逻辑推理与论证 【详解】（1）启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，用于启动DNA的转录，是一段DNA片段，其基本组成单位是四种脱氧核糖核苷酸。 （2）①根据图示信息可知，“启动子D＋基因S”的DNA序列上存在EcoR Ⅰ的识别序列，若使用限制酶EcoR Ⅰ，会使目的基因序列被破坏； ②根据图中限制酶的识别序列可知，酶Spe Ⅰ和Xba Ⅰ切割产生的黏性末端相同，若用这两种限制酶切割，形成的DNA片段在构建基因表达载体时，容易出现自我环化，以及无法保证目的基因片段与载体片段单向连接，影响目的基因在受体细胞中的表达。 （3）①DNA电泳可以分离不同大小的DNA片段，用限制酶对重组表达载体酶切后的产物不仅有“启动子D+基因S”片段，还有酶切后的空载体片段，因此电泳时，对照样品除指示分子大小的标准参照物外，还应有酶切后的空载体片段和“启动子D+基因S”片段； ②在分子水平上检测目的基因是否转入成过可通过PCR等技术检测受体细胞的DNA上是否插入目的基因或目的基因是否转录出mRNA。 （4）根据（4）题目信息可知，再生植株YZ-1导入的目的基因为取自品种DN的“启动子D＋基因S”序列，再生植株YZ-2导入的目的基因为取自品种TL的“启动子T＋基因S”序列，结合题干信息“两品种中基因S序列无差异”可推测：品种DN的基因S上游的启动子D的效应强于品种TL的启动子T，启动子D使基因S表达量更高，因而种子更大。 学科网（北京）股份有限公司 $