内容正文:
发酵工程
1.传统发酵技术:直接利用原材料中天然存在的微生物,或利用前一次发酵保留下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行发酵,制作食品的技术。(以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主)
2. 腐乳味道鲜美是因为:毛霉(真核生物)产生蛋白酶将蛋白质分解成小分子肽和氨基酸;脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
3.泡菜制作
菌种:乳酸菌(原核生物,异养厌氧型,分裂方式为二分裂)
原理:
1) 食盐浓度过高会抑制乳酸发酵,口味不佳;
浓度过低,杂菌易繁殖,泡菜变质。
2) 菜料装至八成满原因:
在泡菜发酵初期,酵母菌等较为活跃,发酵产物
中有较多的CO2,防止发酵液溢出坛外;
防止因装太满使盐水未完全淹没菜料而导致菜料
变质;留有一定空间,也更方便拿取泡菜。
3) 创造无氧环境的操作:盐水全部没过菜料;坛
盖边沿水槽注满水等。
4)泡菜“咸而不酸”原因:可能是食盐浓度不合
适、发酵温度过低等原因导致泡菜未能正常发酵。
5)加陈泡菜水的原因:“陈泡菜水”中含有纯度较高
的乳酸菌,可快速发酵产生乳酸。
6)泡菜表面的白膜为酵母菌。
4.果酒(18-30℃)与果醋(30-35℃)的制作
果酒制作菌种:酵母菌(真核生物,异养兼性厌氧型)
原理:有氧条件下,酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖:
无氧条件下,产生酒精:
果醋制作菌种:醋酸菌(原核生物,异养需氧型)
原理:当O2、糖源都充足时:
当缺少糖源、氧气充足时:
装置:
1)排气口胶管长而弯曲的原因:防止空气中微生物的污染。
2)装置改进:可以在充气口填充棉花或者安装过滤装置,以防止充入的气体携带外来杂菌污染发酵液等。
5. 微生物培养基主要含有碳源(构成细胞结构物质和一些代谢产物;有机碳既是碳源又是能源物质)、氮源(是微生物合成蛋白质、核酸等物质的元素)、水(溶剂,维持生物大分子结构的稳定)和无机盐(调节PH,维持渗透压)四类物质。除此之外往往还需加入生长因子、调节PH等。加入琼脂则为固体培养基。加入抗生素可抑制细菌生长。
6. 培养基按作用(功能)分为:选择培养基和鉴别培养基;按物理属性分为:固体培养基和液体培养基。 补充:液体培养基可以用来快速扩繁微生物;而纯化和计数必须用固体培养基。 注意:获得纯净微生物的关键是无菌技术(防止杂菌污染)。
7. 消毒是杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法包括:煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学试剂消毒法、紫外线消毒法。
8. 灭菌是指用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
9. 培养基用高压蒸汽灭菌(湿热灭菌);接种环用灼烧灭菌;玻璃器皿用干热灭菌。
10. 倒平板:灭菌后的培养基冷却到50°C左右时,在酒精灯火焰旁倒平板;平板冷却凝固后要倒置(防止培养皿盖上冷凝的水珠落入培养基,造成污染)。
11. 菌落:指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。
12. 微生物的纯化方法:平板划线法和稀释涂布平板法。纯化的目的:获得单菌落。
1)平板划线法操作过程及注意事项
注意事项:接种环只蘸取1次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次;划线首尾不能 相接;每次划线前灼烧接种环进行灭菌;划线操作结束后,仍需灼烧接种环,培养皿倒置培养(培养时需要放一个倒置的空白平板做空白对照,以确定培养基是否灭菌彻底)。
2)在作第二次以及其后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线的原因:使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,以便获得单个菌落。
13.微生物的计数方法
14. 稀释涂布平板法计数注意点:
1)计数时,每个稀释浓度一般涂布3个平板;
2)计数所用平板中的菌落在30-300之间;
3)计算统计的菌落数不是活菌数;
4)统计值比实际值偏小。
15. 若要检测培养基是否合格,可选用多个空白培养基培养。若要排除其他因素对培养基计数造成的干扰,可设置对照组,即选用多个培养基,用无菌水涂布后培养。
16.分离鉴定分解尿素的细菌方法:以尿素为唯一氮源的培养基,并加入酚红指示剂。该菌合成脲酶将尿素分解成氨,PH值会升高,指示剂会变红。
植物细胞工程
1.细胞具有全能性的原因:高度分化的细胞仍具有发育成完整个体所需要的全套基因。(哺乳动物成熟的红细胞、植物成熟的筛管细胞不具有全能性,因为没有细胞核)
2.植物体细胞杂交技术
1)植物细胞融合
原理:细胞膜的流动性
1 去除植物细胞壁---酶解法:纤维素酶和果胶酶(为了维持原生质体的形态正常,需要在酶溶液中添加一些无机盐离子和甘露醇)
②细胞融合---物理方法(电融合法和离心法)和化学方法(聚乙二醇融合法和高Ca2+—高PH融合法)
2)植物组织培养
原理:植物细胞的全能性
④脱分化:离体条件下已分化的细胞经过诱导失去特有的结构和功能,重新获得分裂能力。
条件:不需要光;生长素和细胞分裂素比值≈1
⑤再分化:诱导愈伤组织再分化出芽和根,形成试管苗。
诱导生芽:需要光(诱导叶绿素的形成,促进光合作用);生长素和细胞分裂素比值<1
诱导生根:生长素和细胞分裂素比值>1
先诱导生芽后生根的原因:根的质地较硬,更换培养基时可能会导致根的损伤或断裂;先生芽有利于导管、筛管等的对接和形成,为后续生根过程中物质的运输和分配提供便利。
注意:外植体接种时不要倒插,形态学上端朝上。试管苗移栽前要先炼苗。
3)细胞融合完成的标志:再长出新的细胞壁,得到杂种细胞。
4)植物细胞杂交完成的标志:培育成新植株。
5)意义:打破生殖隔离,实现远缘杂交。
3.植物细胞工程的应用
植物细胞产物的工厂化生产:
(通过提高细胞数量从而使细胞产物增多,未提高单个细胞产生次生代谢物的含量。)
4.初生代谢:生物生长和生存所必需的代谢活动。产物主要是糖类、脂质、蛋白质和核酸等。
5.次生代谢:不是生物生长所必需的,一般在特定的组织和器官中,并在一定的环境和时间条件下才进行。产物是一类小分子有机化合物(如酚类、萜类和含氮化合物等)。
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