精品解析：安徽合肥一中2025-2026学年高二第二学期期中生物学测试试题

合肥一中2023级高二第二学期期中生物学测试试题 时长：75分钟 满分：100分 一、单项选择题（共25题，每题2分，共50分） 1. 传统发酵技术通常是家庭式或作坊式的，豆豉一般以黄豆为原料，通过微生物群落共同发酵而成。利用传统发酵技术制作风味豆豉的主要工艺流程如下图。下列叙述正确的是（ ） A. 传统方法制作豆豉，以混合菌种的液体发酵为主 B. 煮熟黄豆的主要目的是消毒和软化黄豆，利于发酵 C. 添加盐可抑制杂菌生长，白酒和香辛料只是调味 D. 参与前期发酵、后期发酵过程中的菌种代谢类型一致 【答案】B 【解析】 【详解】A、传统发酵是以混合菌种的固体或半固体发酵为主，A错误； B、蛋白质在高温条件下空间结构改变而变性，黄豆煮熟的目的主要是破坏黄豆内部结构，使其软化，同时起到消毒的作用，利于发酵，B正确； C、调味过程中添加盐可抑制杂菌生长，白酒和香辛料既可以调节口味也可以抑制杂菌生长，C错误； D、结合图示可知，参与前期发酵的菌种需要氧气，后发酵过程密封发酵，是厌氧型，故代谢不一致，D错误。 2. 以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是（ ） A. 泡菜制作过程中加入的“陈泡菜水”需要进行灭菌处理 B. ①中“冷却”主要是为了防止蔬菜表面的醋酸杆菌被杀死 C. ④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低 D. 泡菜咸而不酸可能是食盐浓度高或发酵温度低引起 【答案】D 【解析】 【详解】A、加入陈泡菜水的目的是提供高活性的乳酸菌菌种，若对其进行灭菌处理会杀死乳酸菌，无法起到加快发酵的作用，A错误； B、泡菜发酵的核心菌种是乳酸菌，①中沸盐水冷却的目的是避免高温杀死乳酸菌，醋酸杆菌是果醋制作的菌种，与泡菜发酵无关，B错误； C、泡菜完整发酵过程中，亚硝酸盐含量呈先升高后降低的趋势，C错误； D、食盐浓度过高会抑制乳酸菌的生命活动，发酵温度过低会降低乳酸菌细胞内酶的活性，二者都会导致乳酸合成量不足，出现泡菜咸而不酸的情况，D正确。 3. 下列对发酵工程及其应用的叙述，错误的是（ ） A. 培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌 B. 发酵过程的中心环节是发酵罐内发酵 C. 发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物及菌体本身 D. 可通过发酵工程从微生物细胞中提取单细胞蛋白 【答案】D 【解析】 【详解】A、发酵工程需严格防控杂菌污染，避免杂菌与目的菌种竞争营养、产生有害代谢产物，因此培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌，A正确； B、发酵工程的流程包括菌种选育、扩大培养、培养基配制与灭菌、接种、发酵罐内发酵、产品分离提纯等，其中发酵罐内发酵是控制发酵条件、获得目标产物的中心环节，B正确； C、发酵工程的产品主要包含两类，一类是微生物的各类代谢产物（如抗生素、有机酸等），另一类是微生物菌体本身，C正确； D、单细胞蛋白即微生物菌体，不需要从微生物细胞中提取，D错误。 4. 某醋厂和啤酒厂的工艺流程如图所示。酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌；醋醅含有醋酸菌；糖化即淀粉水解过程。下列相关叙述错误的是（ ） A. 糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的是利于糖化和减少杂菌污染 B. 制醋和酿酒分别是利用真菌的无氧呼吸与细菌的有氧呼吸 C. 醋酸发酵过程中经常翻动发酵物可改善通气状况 D. 啤酒酿造流程中适当增加溶解氧可缩短发酵时间 【答案】B 【解析】 【详解】A、糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”有利于灭菌，减少杂菌污染，同时可以进行糖化过程，利于发酵，A正确； B、制醋主要利用的微生物是醋酸菌，为原核生物，进行的是有氧呼吸，酿酒主要利用的微生物是酵母菌，酵母菌主要进行无氧呼吸过程完成酿酒的过程，B错误； C、醋酸发酵过程中利用了醋酸菌的有氧呼吸，在发酵过程中经常翻动发酵物，有利于散热，可控制发酵温度和改善通气状况，C正确； D、啤酒酿造流程中利用的原理是酵母菌的无氧呼吸产生酒精的过程，若适当增加溶解氧有利于酵母菌有氧呼吸产生更多的能量满足酵母菌自身增殖的需要，因而可缩短发酵时间，D正确。 5. 高二某班生物学兴趣小组开展了微生物培养探究实验。他们在配制培养大肠杆菌的培养基时，加入了蛋白胨等成分；配制培养酵母菌的培养基时，加入了麦芽汁等成分。下列相关叙述错误的是（ ） A. 大肠杆菌和酵母菌生长对pH的需求不同，灭菌后需要将培养基调至适宜的pH B. 蛋白胨能为大肠杆菌提供碳源、氮源，麦芽汁也能为酵母菌提供碳源、氮源 C. 大肠杆菌和酵母菌需要的营养成分不同，可能是因为细胞中酶的种类存在差异 D. 若需要比较不同微生物形成的菌落差异，配制培养基时还需添加适量的琼脂 【答案】A 【解析】 【详解】A、调节培养基pH应在灭菌操作前完成，若灭菌后再调节pH会引入外来杂菌，造成培养基污染，A错误； B、蛋白胨含有糖类、有机氮等物质，可为大肠杆菌提供碳源、氮源，麦芽汁含有糖类、氨基酸等成分，也能为酵母菌提供碳源、氮源，B正确； C、酶具有专一性，不同微生物细胞内酶的种类存在差异，可利用的营养物质种类不同，因此二者需要的营养成分存在差异，C正确； D、菌落是微生物在固体培养基表面生长形成的肉眼可见的子细胞群体，观察菌落需使用固体培养基，琼脂是常用的凝固剂，因此配制培养基时需添加琼脂，D正确。 6. 在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法是常用的获取纯培养物的方法。下列叙述错误的是（ ） A. 适量喷洒消毒液之后再对接种室用紫外线照射30min后，可以增强消毒效果 B. 若要检测培养基是否被污染，可将未接种的培养基在相同条件下进行培养 C. 纯化的核心是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度 D. 用平板划线法接种，灼烧接种环的次数与划线次数相同 【答案】D 【解析】 【详解】A、接种室消毒时，先喷洒消毒液可使部分微生物蛋白质变性失活，再用紫外线照射30min杀灭残留的微生物，能显著增强消毒效果，A正确； B、检测培养基是否被污染的方法为，将未接种的空白培养基放在和接种组相同的条件下培养，若空白培养基上长出菌落，说明培养基被污染，反之则未被污染，B正确； C、微生物纯化的核心是避免杂菌混入，保证最终获得的培养物仅由目标微生物繁殖而来，保证培养物的纯度，C正确； D、平板划线操作时，每次划线前都需要灼烧接种环以杀死上次划线残留的菌种，划线操作全部结束后还需要额外灼烧一次接种环，避免残留的菌种污染环境、感染操作者，因此灼烧接种环的次数=划线次数+1，二者并不相同，D错误。 7. 养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（ ） A. ①通常在充分稀释后用平板划线法获取单个菌落 B. ②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C. ③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D. 粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 【答案】C 【解析】 【详解】A、平板划线法无需稀释，A错误； B、由图可知，②筛选不能在尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验，B错误； C、所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂，所以③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙，C正确； D、由图可知，甲不产生脲酶而乙可以产生脲酶，且乙同时分泌脲酶抑制剂，粪便中可能还含有其他能产生脲酶的菌株使甲能够产生NH3，所以粪便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的减少，D错误。 8. 营养缺陷型菌株是由基因突变后导致酶被破坏，从而使代谢过程中某些合成反应不能进行。下图是科研人员利用影印法（用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上）初检组氨酸缺陷型菌株的过程。下列叙述不正确的是（ ） A. ①过程采用的是稀释涂布平板法 B. “复印”操作相当于微生物培养中的接种操作 C. 过程②应先将丝绒布转印至完全培养基上再转印到基本培养基上 D. 应从基本培养基上没有，而完全培养基上对应位置有的菌落中挑选目的菌株 【答案】C 【解析】 【分析】图中首先利用稀释涂布平板法分离菌株，然后运用“影印法”将分离的菌株接种到两种培养基中：基本培养基、完全培养基。在基本培养基中，组氨酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中组氨酸缺陷型菌株能够生长，因此可以选择出组氨酸缺陷型菌株。 【详解】A、题图显示，待测培养皿中的菌落均匀分布，据此推测①过程采用的接种方法为稀释涂布平板法，A正确； B、用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上，因此“复印”操作相当于微生物培养中的接种操作，B正确； C、进行②过程培养时，为了防止将完全培养基中特定营养成分带入基本培养基中，应先将丝绒布转印至基本培养基上再转印到完全培养基上，C错误； D、在基本培养基中组氨酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，比较基本培养基和完全培养基中的菌落可知：组氨酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、而完全培养基上对应位置有的菌落中挑选目的菌株，D正确。 故选C。 9. 用含有不同植物生长调节剂配比的培养基诱导草莓茎尖形成不定芽，研究结果如下表。下列叙述错误的是（ ） 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 6-BA（mg·L-1） 1 NAA（mg·L-1） 0．05 0．1 0．2 0．3 0．5 - - - - - 2，4-D（mg·L-1） - - - - - 0．05 0．1 0．2 0．3 0．5 不定芽诱导率（%） 68 75 77 69 59 81 92 83 70 61 注：诱导率=出不定芽的外植体数/接种的外植体数×100% A. 培养基中NAA/6-BA比例过高，不利于不定芽的诱导 B. 推断6-BA应为细胞分裂素类植物生长调节剂 C. 该研究的结果可指导草莓脱毒苗的生产 D. 相同条件下，NAA诱导草莓茎尖形成不定芽的效果优于2，4-D 【答案】D 【解析】 【分析】分析题表：自变量为植物生长调节剂种类和配比，因变量为不定芽诱导率；培养基中NAA/6-BA比例逐渐增大时，不定芽诱导率先上升后降低，培养基中2，4-D/6-BA比例逐渐增大时，不定芽诱导率先上升后降低，相同的NAA/6-BA和2，4-D/6-BA的配比下，培养基中使用2，4-D/6-BA更有利于诱导形成不定芽。 【详解】A、由题表可知，培养基中NAA/6-BA比例逐渐增大时，不定芽诱导率先上升后降低，且当NAA/6-BA比例为0.5/1时，不定芽诱导率最低；故培养基中NAA/6-BA比例过高，不利于不定芽的诱导，A正确； B、不定芽的形成需要细胞分裂素和生长素，题表中NAA和2，4-D属于生长素类植物生长调节剂，故推断6-BA应为细胞分裂素类植物生长调节剂，B正确； C、草莓脱毒苗的生产过程中需要诱导形成不定芽，故该研究的结果可指导草莓脱毒苗的生产，C正确； D、由题表相关数据可知：相同条件下，2，4-D诱导草莓茎尖形成不定芽的效果优于NAA，D错误。 故选D。 10. 两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如下图所示。下列说法正确的是（ ） A. 过程①需使用纤维素酶和蛋白酶处理细胞 B. 过程②的目的是使普通小麦细胞的染色体断裂 C. 过程③中常用灭活的病毒诱导原生质体融合 D. 耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段 【答案】D 【解析】 【详解】A、过程①为原生质体的获取，需要使用纤维素酶和果胶酶处理细胞，去除细胞壁，A错误； B、过程②用不同剂量的紫外线照射中间偃麦草原生质体，目的是使中间偃麦草细胞的染色体断裂，B错误； C、灭活的病毒诱导动物细胞融合，植物细胞原生质体的融合不能用灭活的病毒诱导，C错误； D、上述图示的目的是获得耐盐小麦新品种，为此用不同剂量的紫外线照射中间偃麦草原生质体，使其染色体断裂，最终实现耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段，D正确。 11. 我国科学家利用人的体细胞制备多能干细胞，再用小分子TH34成功诱导衍生成胰岛B细胞。下列相关叙述错误的是（ ） A. 基因选择性表达被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞 B. 在小分子TH34诱导下，多能干细胞发生基因突变，获得胰岛素基因 C. 衍生的胰岛B细胞在葡萄糖的诱导下能表达胰岛素，才可用于移植治疗糖尿病 D. 若衍生的胰岛B细胞中凋亡基因能正常表达，细胞会发生程序性死亡 【答案】B 【解析】 【分析】诱导多能干细胞（iPS细胞）：通过特定的因子导入和培养条件，可以从人的皮肤等体细胞出发，诱导其成为具有无限增殖能力并可分化为人体各种组织脏器的多能干细胞。 在正常情况下，胰岛B细胞对血糖水平的变化非常敏感，能够根据血糖水平的高低调节胰岛素的分泌。当血糖水平升高时，胰岛B细胞会增加胰岛素的分泌，帮助降低血糖水平；反之，当血糖水平降低时，则减少胰岛素的分泌，以避免低血糖。 细胞凋亡指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病理条件下，自体损伤的一种现象，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。 【详解】A、被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞 这个说法是正确的。体细胞可以通过特定的因子导入和培养条件，基因的调控和表达模式的改变，使得原本专一功能的体细胞去分化成为多能干细胞，A正确； B、小分子药物通常是通过调节现有的生物通路和基因表达来实现其功能，而胰岛素基因在人体所有细胞中都存在，但只有在胰岛细胞中才会表达‌，所以多能干细胞在诱导分化的过程中不会突然发生基因突变获得胰岛素基因，B错误； C、胰岛B细胞在较高的血糖浓度下分泌胰岛素，降低血糖，所以衍生的胰岛B细胞需在葡萄糖的诱导下成功表达胰岛素，以确保衍生的胰岛B细胞能够正常发挥功能，才可用于移植治疗糖尿病，C正确； D、凋亡基因的正常表达会导致衍生的胰岛B细胞发生程序性死亡，也就是发生细胞凋亡，D正确。 故选B。 12. 下列关于哺乳动物体内受精作用、早期胚胎发育和胚胎工程的叙述正确的是（ ） A. 精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜会迅速发生反应，阻止其他精子进入 B. 受精卵开始卵裂后，首先发育为囊胚，之后依次是桑椹胚、原肠胚 C. 胚胎移植前，需要对供体、受体母牛进行同期发情处理和超数排卵处理 D. 为获得同卵双胞胎，可在桑椹胚或囊胚阶段进行胚胎分割，再进行胚胎移植 【答案】D 【解析】 【详解】A、精子触及卵细胞膜的瞬间首先发生透明带反应，是第一道屏障；卵细胞膜反应是精子进入卵细胞膜后发生的第二道屏障，A错误； B、早期胚胎发育顺序为受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚，B错误； C、胚胎移植前，供体和受体母牛都需要进行同期发情处理，保证二者生理状态一致；仅需对供体母牛进行超数排卵处理以获得更多卵母细胞，C错误； D、桑椹胚和囊胚期的细胞分化程度低，因此要获得同卵双胞胎，可在桑椹胚或囊胚阶段进行胚胎分割，再移植到受体母牛子宫内发育，D正确。 13. 某奶牛场有一头高产奶牛，年产奶量达30.8t，而一头普通奶牛年产奶量3～4t。某研究人员从该高产奶牛的耳上取体细胞并进行培养，利用核移植技术获得了高产奶牛，流程如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 小牛d是对体细胞供体动物奶牛b进行了100%的复制 B. 小牛d的性状与代孕个体母牛c的性状基本无关 C. 体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植 D. 用物理或化学方法激活重构胚，使其完成生长发育进程 【答案】A 【解析】 【详解】A、小牛d的核遗传物质来自奶牛b，细胞质遗传物质来自奶牛a，因此小牛d并没有对体细胞供体动物奶牛b进行了100%的复制，A错误； B、小牛d的遗传物质来自于奶牛b和奶牛a，因此小牛d的性状与代孕个体母牛c的性状基本无关，B正确； C、体细胞全能性表达能力弱于胚胎细胞，因此体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，C正确； D、核移植获取的重构胚需要用物理或化学方法激活，使其完成生长发育进程，D正确。 14. 第三代试管婴儿技术（PGD/PGS）是对早期胚胎细胞进行基因诊断和染色体检测后再进行胚胎移植，流程如图所示。图中检测包括PGD、PGS（PGD是指胚胎植入前的基因诊断，PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测）。下列叙述正确的是（ ） A. 受精前需要将采集的卵子培养至MI期，并使精子在获能液中获能 B. PGD和PGS技术可分别用于筛查血友病和21三体综合征 C. 胚胎移植前需对夫妻双方进行免疫检查，以防止移植后出现免疫排斥 D. “理想胚胎”需培养至桑葚胚或原肠胚才能移植入子宫 【答案】B 【解析】 【详解】A、体外受精时，需要将所采集到的卵母细胞在体外培养至MⅡ期，精子在含Ca2+载体的获能液中获能，才可以完成受精作用，A错误； B、PGD是指胚胎植入前的基因诊断，PGD可用于筛查血友病，PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测，PGS可用于筛查21三体综合征，B正确； C、胚胎移植一般不会出现免疫排斥反应，C错误； D、“理想胚胎”需培养至桑葚胚或囊胚才能植入子宫，D错误。 15. 用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述正确的是（ ） A. 图1中两种酶识别的核苷酸序列相同 B. 图2中酶切产物不能用于构建重组DNA C. 泳道②中是用XhoⅠ处理得到的酶切产物 D. 图中被酶切的DNA片段是单链DNA 【答案】C 【解析】 【详解】A、限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列，不同的限制酶能识别不同的核苷酸序列，电泳结果不相同，说明两种酶识别的序列不同，A错误； B、同种限制酶切割出的DNA片段，具有相同的黏性末端，再用DNA连接酶进行连接，可以构成重组DNA，B错误； C、Sal I将DNA片段切成4段，Xho I将DNA片段切成3段，根据电泳结果可知泳道①为Sal I，泳道②为Xho I，C正确； D、限制酶切割双链DNA，酶切后的DNA片段仍然是双链DNA，D错误。 16. 下列关于“DNA 粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A. 实验中如果将研磨液更换为蒸馏水，DNA提取的效率会降低 B. 利用DNA和蛋白质在酒精中的溶解度差异，可初步分离DNA C. DNA在不同浓度NaC1溶液中溶解度不同，该原理可用于纯化DNA粗提物 D. 将溶解的DNA粗提物与二苯胺试剂反应，可检测溶液中是否含有蛋白质杂质 【答案】D 【解析】 【分析】DNA粗提取和鉴定的原理： （1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。 （2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 【详解】A、研磨液有利于DNA的溶解，换为蒸馏水，DNA提取的效率会降低，A正确； B、DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精，可分离DNA，B正确； C、DNA在NaCl溶液中的溶解度随着NaCl浓度的变化而改变，因此可用不同浓度的NaCl溶液对DNA进行粗提取，C正确； D、在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，二苯胺试剂用于鉴定DNA，D错误。 故选D。 17. 下列关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验操作的叙述，全部正确的一项是（ ） ①PCR实验所需的微量移液器、枪头等都必须进行灼烧灭菌 ②PCR反应组分都加入微量离心管后，通过瞬时离心使反应液集中在管的底部 ③PCR仪中设置的PCR反应程序通常包括预变性、30次循环等 ④琼脂糖凝胶浓度的选择需考虑待分离DNA片段的大小 ⑤将得到的PCR产物进行凝胶电泳，加样前应先接通电源 ⑥凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置 A. ①②③ B. ②③④ C. ③④⑤ D. ④⑤⑥ 【答案】B 【解析】 【详解】①PCR实验的枪头多为塑料制品，灼烧灭菌会导致其熔化，一般采用高压蒸汽灭菌或使用一次性无菌枪头，微量移液器不能灼烧灭菌，①错误； ②PCR反应组分全部加完后，瞬时离心可避免反应液挂壁，使反应液集中在管底，保证反应充分进行，②正确； ③PCR反应程序通常先进行预变性使模板DNA充分解旋，再设置30次左右的变性、复性、延伸循环完成扩增，③正确； ④琼脂糖凝胶浓度决定孔径大小，分离不同大小的DNA片段需要选择对应浓度：小片段DNA用较高浓度凝胶，大片段用低浓度凝胶，因此浓度选择需考虑待分离DNA片段大小，④正确； ⑤凝胶电泳时需先完成加样再接通电源，若先接通电源，加样过程中DNA会提前发生迁移，影响实验结果，⑤错误； ⑥凝胶载样缓冲液中的指示剂仅能指示电泳的迁移进度，无法指示DNA分子的具体位置，⑥错误。 综上，正确的是②③④，B正确。 18. 某同学拟用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA连接酶为工具，将目的基因（两端含相应限制酶的识别序列和切割位点）和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示。 下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是（ ） A. 质粒和目的基因都用酶3切割，用E. coli DNA连接酶连接 B. 质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接 C. 质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA连接酶连接 D. 质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E. coli DNA连接酶连接 【答案】C 【解析】 【分析】DNA连接酶： （1）根据酶的来源不同分为两类：E.coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。 （2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 【详解】A、酶3切割后得到的是平末端，应该用T4 DNA连接酶连接，A错误； B、质粒用酶3切割后得到平末端，目的基因用酶1切割后得到的是黏性末端，二者不能连接，B错误； C、质粒和目的基因都用酶1和酶2切割后得到黏性末端，用T4 DNA连接酶连接后，还能保证目的基因在质粒上的连接方向，此重组表达载体的构建方案最合理且高效，C正确； D、若用酶2和酶4切割质粒和目的基因，会破坏质粒上的抗生素抗性基因，连接形成的基因表达载体缺少标记基因，无法进行后续的筛选，D错误。 故选C。 19. 大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因，其编码的产物β­半乳糖苷酶在X－gal和IPTG同时存在时，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。如图为利用该质粒进行的转基因过程，请据图菌落①②③的颜色分别是（ ） A. 蓝色　 白色　 白色 B. 蓝色　 蓝色　 白色 C. 蓝色　 白色　 蓝色 D. 白色　 蓝色　 白色 【答案】B 【解析】 【分析】分析题图：用限制酶EcoRI切割质粒时，会破坏质粒上的lacZ基因，但切割后的质粒自身环化后，lacZ基因又被修复，其编码的产物β­半乳糖苷酶在X－gal和IPTG存在时，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，所以菌落①②呈现蓝色；菌落③导入的是重组质粒，其lacZ基因被破坏，不能表达产生β­半乳糖苷酶，在X－gal和IPTG 存在时，菌落颜色为白色。 【详解】根据分析可知，菌落①②呈现蓝色，菌落③呈现白色，B正确。 故选B。 【点睛】本题结合题图，考查基因工程的相关知识，意在考查考生分析题图提取有效信息的能力；能理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力。 20. 运用转基因技术培养的单细胞“工程硅藻”，可把光合作用合成的有机物以脂质形式储存起来。科学家计划在海水中大量培养“工程硅藻”，捕捞后从中提炼“生物柴油”。与矿物柴油相比，使用这种“生物柴油”的优点是（ ） ①可以再生②不显著增加碳排放③减少排放含硫废气④不会对生态环境造成负面影响 A. ①②③ B. ①③④ C. ①②④ D. ②③④ 【答案】A 【解析】 【详解】①可以再生：工程硅藻可通过人工大规模培养持续获得，其合成的脂质可不断用于生产生物柴油，属于可再生能源，而矿物柴油是不可再生的化石能源，①正确； ②不显著增加碳排放：工程硅藻通过光合作用固定大气中的CO₂合成脂质，生物柴油燃烧释放的CO₂基本等同于其生长阶段固定的CO₂，不会显著提升大气碳排放量，而矿物柴油燃烧会释放地质时期储存的碳，大幅增加大气碳含量，②正确； ③减少排放含硫废气：矿物柴油含有大量硫化物，燃烧会排放含硫废气引发酸雨等污染，生物柴油由硅藻合成的脂质制成，含硫量极低，可有效减少含硫废气排放，③正确； ④不会对生态环境造成负面影响：在海水环境中大规模培养转基因工程硅藻，可能引发生物入侵，挤占本土物种生存空间，破坏海洋生态系统的结构和稳定性，存在生态风险，④错误。 A正确，BCD错误。 21. 胰岛素的研发走过了：动物提取—化学合成—重组胰岛素—生产胰岛素类似物生产等历程。有关叙述错误的是（ ） A. 动物体内胰岛素由胰岛B细胞合成并胞吐出细胞 B. 氨基酸是化学合成胰岛素的原料 C. 用大肠杆菌和乳腺生物反应器生产胰岛素需相同的启动子 D. 利用蛋白质工程可生产速效胰岛素等胰岛素类似物 【答案】C 【解析】 【分析】胰岛素是由胰脏内的胰岛B细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一种蛋白质激素。胰岛素是机体内唯一降低血糖的激素，同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成。外源性胰岛素主要用来治疗糖尿病。 【详解】A、胰岛素在动物体内由胰岛B细胞合成后，经过胞吐作用释放出细胞，A正确； B、胰岛素属于蛋白质激素，所以化学合成胰岛素的原料是氨基酸，B正确； C、用大肠杆菌和乳腺生物反应器生产胰岛素不需要使用相同的启动子，因为两者属于不同的表达系统，大肠杆菌是原核生物表达系统，而乳腺生物反应器属于真核生物表达系统，启动子要求不同，C错误； D、利用蛋白质工程技术可以对胰岛素进行改造，生成具有不同作用特性的胰岛素类似物，包括速效胰岛素，D正确。 故选C。 22. 从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1。目前科研人员想在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是（ ） A. 合成编码目的肽的目的基因序列 B. 依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽 C. 构建含目的肽DNA片段的表达载体 D. 筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽 【答案】B 【解析】 【详解】A、合成编码目的肽的目的基因序列，需要先明确目的肽的氨基酸序列后才能进行，不是首要步骤，A错误； B、研发改造后的多肽，首先需要依据原有多肽P₁的氨基酸序列设计多条可能符合“抗菌性强、溶血性弱”要求的模拟肽，属于蛋白质工程中设计预期蛋白质结构的环节，是第一步操作，B正确； C、构建含目的肽DNA片段的表达载体，是获得目的基因后才进行的基因工程操作，C错误； D、筛选具有优良活性的模拟肽，需要先设计出多条模拟肽后才能开展，位于设计步骤之后，D错误。 23. 生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是（ ） A. 开展风险评估、预警跟踪和风险管理是保障转基因生物安全的前提 B. 我国已经对转基因食品和转基因农产品强制实施了产品标识制度 C. 反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿 D. 生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力 【答案】D 【解析】 【详解】A、开展风险评估、预警跟踪和风险管理可以提前预判、防范转基因生物可能带来的安全风险，是保障转基因生物安全的前提，A正确； B、为保障消费者的知情权和选择权，我国已经对转基因食品和转基因农产品强制实施产品标识制度，B正确； C、设计试管婴儿技术若被滥用，会出现人为选择性设计婴儿性别、性状等违反伦理道德的情况，这是反对设计试管婴儿的原因之一，C正确； D、生物武器包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等，干扰素是具有免疫调节作用的细胞因子，不具备致病杀伤能力，不属于生物武器，D错误。 阅读下列材料，回答下列小题 为提高转基因抗虫棉的抗虫持久性，可采取如下措施： ①基因策略：包括提高杀虫基因的表达量、向棉花中转入多种杀虫基因等。例如，早期种植的抗虫棉转入了一种Bt毒蛋白基因，抗虫机制比较单一；现在经常将两种或两种以上Bt基因同时转入棉花。 ②田间策略：主要是为棉铃虫提供庇护所。例如我国新疆棉区，在转基因棉田周围种植一定面积的非转基因棉花，为棉铃虫提供专门的庇护所；长江、黄河流域棉区多采用将转基因抗虫棉与高粱和玉米等其他棉铃虫寄主作物混作的方式，为棉铃虫提供天然的庇护所。 ③国家宏观调控政策：如实施分区种植管理等。 24. 关于上述基因策略，下列叙述正确的是（ ） A. 提高Bt基因的表达量，不能降低抗虫棉区的棉铃虫的种群密度 B. 转入棉花植株的两种Bt基因的遗传，一定遵循基因的自由组合定律 C. 若两种Bt基因插入同一个T - DNA并转入棉花植株，则两种基因互为等位基因 D. 转入多种Bt基因能提高抗虫持久性，是因为棉铃虫基因突变的频率低且不定向 25. 关于上述田间策略，下列叙述错误的是（ ） A. 转基因棉田周围种植非抗虫棉，可降低棉铃虫抗性基因突变率 B. 混作提高抗虫棉的抗虫持久性，体现了物种多样性的重要价值 C. 为棉铃虫提供庇护所，可使敏感棉铃虫在种群中维持一定比例 D. 为棉铃虫提供庇护所，可使棉铃虫种群抗性基因频率增速放缓 【答案】24. D 25. A 【解析】 【24题详解】 A、提高Bt基因的表达量可使棉花合成更多Bt毒蛋白，杀虫效果增强，能够降低棉铃虫种群密度，A错误； B、只有两种Bt基因插入棉花细胞的非同源染色体上时，其遗传才遵循基因自由组合定律，若插入到同一条染色体上则不遵循该定律，B错误； C、等位基因是位于同源染色体相同位置、控制相对性状的基因，两种Bt基因插入同一个T-DNA转入棉花，位于同一条染色体的相同位置，不属于等位基因，C错误； D、基因突变具有低频性和不定向性，棉铃虫同时产生针对多种Bt毒蛋白的抗性突变的概率极低，因此转入多种Bt基因能提高抗虫持久性，D正确。 【25题详解】 A、基因突变率由生物自身遗传特性和诱变因素决定，种植非抗虫棉仅能降低抗性基因的选择压力，无法降低棉铃虫抗性基因的突变率，A错误； B、抗虫棉与其他作物混作利用了物种多样性，提升抗虫持久性，体现了物种多样性的间接价值，B正确； C、庇护所区域无Bt毒蛋白的选择作用，对Bt毒蛋白敏感的棉铃虫可正常存活，能维持敏感型个体在种群中的比例，C正确； D、敏感棉铃虫大量存活可与抗性棉铃虫交配，降低抗性纯合子的比例，减缓棉铃虫种群抗性基因频率上升的速度，D正确。 二、 非选择题（共4题，共50分） 26. 自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。某同学试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。 （1）该同学采用显微镜直接计数法和菌落计数法分别测定同一样品的细菌数量，发现测得的细菌数量前者大于后者，其原因是__________。 （2）该同学从100mL细菌原液中取1mL加入无菌水中得到10mL稀释菌液，再从稀释菌液中取200μL涂布平板，菌落计数的结果为100，据此推算细菌原液中细菌浓度为________个/mL。 （3）对培养基进行灭菌通常采用的方法是_________。 （4）为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量较高的湖泊水样稀释后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现____。采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P菌。 （5）为探究P菌溶解破坏A菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下材料和设备加以验证（主要实验材料和设备：P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱）。假设：______。 【答案】（1）显微镜直接计数法统计的是视野中观察到的细菌，死菌和活菌都会被计数，而菌落计数法是活菌在适宜培养基和培养条件下形成菌落，死菌无法形成菌落 （2）5×103 （3）高压蒸汽灭菌法 （4）溶菌圈 （5）假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂 【解析】 【小问1详解】 显微镜直接计数法统计的是视野中观察到的细菌，死菌和活菌都会被计数，而菌落计数法是活菌在适宜培养基和培养条件下形成菌落，只有活的且能在该条件下生长繁殖的细菌才能形成菌落，所以死菌无法形成菌落，导致测得的细菌数量前者大于后者。 【小问2详解】 从100mL细菌原液中取1mL加入无菌水中得到10mL稀释菌液，此为10倍稀释，再从稀释菌液中取200μL（即0.2mL）涂布平板，菌落计数结果为100，根据公式，细菌原液中细菌浓度=菌落数÷涂布体积×稀释倍数，即100÷0.2×10=5×103个/mL。 【小问3详解】 对培养基进行灭菌通常采用的方法是高压蒸汽灭菌法，这种方法能在高温高压条件下杀灭培养基中的所有微生物，包括芽孢和孢子等耐高温的结构。 【小问4详解】 因为该细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出，所以能溶解A菌的菌落周围，由于A菌被破坏，细胞内容物释出，会出现溶菌圈。 【小问5详解】 根据实验材料和设备，圆形滤纸小片可用于吸收某种物质，离心机可用于分离菌体和细菌分泌物，为探究P菌溶解破坏A菌的方式，可假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂。 27. CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如下流程进行了实验。请回答下列问题： 实验组：抗CD47单克隆抗体+巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系，测定巨噬细胞的吞噬指数。 对照组：__________，测定巨噬细胞的吞噬指数。 （注：巨噬细胞的吞噬指数=被吞噬的颗粒总数/巨噬细胞总数） （1）以小鼠的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要操作流程：___________。 （2）步骤②用特定的培养基进行筛选，____________细胞会死亡，其中步骤③筛选的目的是______。 （3）培养杂交瘤细胞时需提供CO2的主要作用是____________。 （4）上述实验流程中，对照组应设置为_________，按照科学家的推测，实验组的巨噬细胞的吞噬指数______（选填“高于”或“低于”）对照组，理由是_____________。 【答案】（1）取小鼠的脾脏组织进行处理（机械方法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理）一段时间后，将组织分散成单个细胞，然后用培养液将细胞制成悬液 （2） ①. 同型融合细胞和未融合 ②. 选择出能产生所需特定抗体的杂交瘤细胞 （3）维持培养液的pH （4） ①. 不加单克隆抗体的巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系 ②. 高于 ③. 具有抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，巨噬细胞的吞噬作用加强 【解析】 【小问1详解】 以小鼠的脾脏为材料制备单细胞悬液的流程为，取小鼠的脾脏组织进行处理（机械方法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理）一段时间后，将组织分散成单个细胞，然后用培养液将细胞制成悬液。 【小问2详解】 步骤②用特定的培养基（HAT培养基）进行筛选，同型融合细胞和未融合细胞会死亡，获得杂交瘤细胞，然后经过克隆化培养，利用抗原-抗体特异性结合的原理进行抗体检测，实现二次筛选（步骤③），选择出能产生所需特定抗体的杂交瘤细胞。 【小问3详解】 培养杂交瘤细胞所需要的气体条件是95%空气和5%CO2，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【小问4详解】 依据题干信息，实验的原理是抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，所以自变量应为含有抗CD47的单克隆抗体的巨噬细胞，因变量为巨噬细胞的吞噬指数。所以，当实验组为（具有抗CD47的单克隆抗体的）巨噬细胞+肿瘤细胞培养系，对照组为不加单克隆抗体的巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系，由于具有抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，所以实验组的巨噬细胞的吞噬作用加强，实验组的吞噬指数高于对照组。 28. 某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活（Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因）。有人将此质粒载体用BamHⅠ酶切后，与用BamHⅠ酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题： （1）质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有__________、________（答出两点即可）。而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。 （2）如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是①_____________；并且②__________________和③______________的细胞也是不能区分的，其原因是④______________。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用⑤_____________的固体培养基。 【答案】（1） ①. 能自我复制 ②. 具有标记基因（有一个或多个限制酶切割位点） （2） ①. 二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长 ②. 含有质粒载体 ③. 含有插入了目的基因的重组质粒（或答含有重组质粒） ④. 二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长 ⑤. 含有四环素 【解析】 【分析】基因工程的过程：（1）目的基因的获取：①直接分离法②PCR扩增目的基因③逆转录法。（2）基因表达载体的构建：基因表达载体的组成包括启动子、终止子、目的基因、标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：①导入植物细胞的方法有基因枪法、花粉管通道法、农杆菌转化法。②导入动物细胞的方法有显微注射法。③导入微生物的方法是用Ca2+处理，使其成为感受态细胞。（4）目的基因的检测和鉴定：分子水平的鉴定：①检测是否导入：DNA分子杂交法。②检测是否转录：分子杂交法。③检测是否翻译：抗原—抗体杂交法。个体水平的鉴定：对转基因生物进行抗虫或抗病的接种实验。 【小问1详解】 质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有：能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点等。 【小问2详解】 依题意可知，目的基因插入后，导致四环素抗性基因(Tetr )失活，而氨苄青霉素抗性基因(Ampr)仍能行使正常功能。如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞，因二者均不含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上都不能生长，所以是不能区分的；含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞，因二者都含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上都能生长，因此也是不能区分的。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有四环素的固体培养基，因目的基因插入后，导致四环素抗性基因(Tetr )失活，含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌在该培养基中不能生长，而含有质粒载体的则能正常生长。 29. 北极比目鱼中有抗冻基因，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图。请回答下列问题。 （1）据图分析过程中使用的工具酶包括_________。（至少答出2种） （2）图中哪些过程属于植物组织培养技术_________（填标号）。可选取抗冻番茄的茎尖作为外植体培育无病毒幼苗，理由是___________。 （3）通过抗冻实验从培养出的番茄植株中筛选出了抗冻个体，可利用______扩增技术快速获得大量抗冻基因，与比目鱼体内的抗冻基因比较，该基因__________。 （4）研究表明，此抗冻基因编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因_______（能/不能）得到抗冻性增强的抗冻蛋白，理由是_________。 【答案】（1）逆转录酶、限制酶、DNA连接酶 （2） ①. ④⑤ ②. 植物分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒 （3） ①. PCR ②. 没有内含子、启动子和终止子等序列 （4） ①. 不能 ②. 该新基因表达出的抗冻蛋白中11个氨基酸的重复序列的重复次数不会增多 【解析】 【小问1详解】 基因工程中常用的工具酶有限制性核酸内切酶，DNA连接酶，本题中通过逆转录法获得目的基因，还需用到逆转录酶。 【小问2详解】 图中属于植物组织培养技术的有④⑤；选取抗冻番茄的茎尖作为外植体培育无病毒幼苗原因是因为分生组织分裂快，很少被病毒侵染，甚至无病毒。 【小问3详解】 快速获得大量抗冻基因可通过PCR体外扩增技术实现；过程①获取的目的基因是从mRNA逆转录得来的，因此与比目鱼体内的抗冻基因比较，不含有内含子，不含启动子和终止子等序列。 【小问4详解】 将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因并不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白，理由是该新基因表达出的抗冻蛋白中11个氨基酸的重复序列的重复次数不会增多。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 合肥一中2023级高二第二学期期中生物学测试试题 时长：75分钟 满分：100分 一、单项选择题（共25题，每题2分，共50分） 1. 传统发酵技术通常是家庭式或作坊式的，豆豉一般以黄豆为原料，通过微生物群落共同发酵而成。利用传统发酵技术制作风味豆豉的主要工艺流程如下图。下列叙述正确的是（ ） A. 传统方法制作豆豉，以混合菌种的液体发酵为主 B. 煮熟黄豆的主要目的是消毒和软化黄豆，利于发酵 C. 添加盐可抑制杂菌生长，白酒和香辛料只是调味 D. 参与前期发酵、后期发酵过程中的菌种代谢类型一致 2. 以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是（ ） A. 泡菜制作过程中加入的“陈泡菜水”需要进行灭菌处理 B. ①中“冷却”主要是为了防止蔬菜表面的醋酸杆菌被杀死 C. ④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低 D. 泡菜咸而不酸可能是食盐浓度高或发酵温度低引起 3. 下列对发酵工程及其应用的叙述，错误的是（ ） A. 培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌 B. 发酵过程的中心环节是发酵罐内发酵 C. 发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物及菌体本身 D. 可通过发酵工程从微生物细胞中提取单细胞蛋白 4. 某醋厂和啤酒厂的工艺流程如图所示。酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌；醋醅含有醋酸菌；糖化即淀粉水解过程。下列相关叙述错误的是（ ） A. 糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的是利于糖化和减少杂菌污染 B. 制醋和酿酒分别是利用真菌的无氧呼吸与细菌的有氧呼吸 C. 醋酸发酵过程中经常翻动发酵物可改善通气状况 D. 啤酒酿造流程中适当增加溶解氧可缩短发酵时间 5. 高二某班生物学兴趣小组开展了微生物培养探究实验。他们在配制培养大肠杆菌的培养基时，加入了蛋白胨等成分；配制培养酵母菌的培养基时，加入了麦芽汁等成分。下列相关叙述错误的是（ ） A. 大肠杆菌和酵母菌生长对pH的需求不同，灭菌后需要将培养基调至适宜的pH B. 蛋白胨能为大肠杆菌提供碳源、氮源，麦芽汁也能为酵母菌提供碳源、氮源 C. 大肠杆菌和酵母菌需要的营养成分不同，可能是因为细胞中酶的种类存在差异 D. 若需要比较不同微生物形成的菌落差异，配制培养基时还需添加适量的琼脂 6. 在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法是常用的获取纯培养物的方法。下列叙述错误的是（ ） A. 适量喷洒消毒液之后再对接种室用紫外线照射30min后，可以增强消毒效果 B. 若要检测培养基是否被污染，可将未接种的培养基在相同条件下进行培养 C. 纯化的核心是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度 D. 用平板划线法接种，灼烧接种环的次数与划线次数相同 7. 养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（ ） A. ①通常在充分稀释后用平板划线法获取单个菌落 B. ②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C. ③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D. 粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 8. 营养缺陷型菌株是由基因突变后导致酶被破坏，从而使代谢过程中某些合成反应不能进行。下图是科研人员利用影印法（用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上）初检组氨酸缺陷型菌株的过程。下列叙述不正确的是（ ） A. ①过程采用的是稀释涂布平板法 B. “复印”操作相当于微生物培养中的接种操作 C. 过程②应先将丝绒布转印至完全培养基上再转印到基本培养基上 D. 应从基本培养基上没有，而完全培养基上对应位置有的菌落中挑选目的菌株 9. 用含有不同植物生长调节剂配比的培养基诱导草莓茎尖形成不定芽，研究结果如下表。下列叙述错误的是（ ） 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 6-BA（mg·L-1） 1 NAA（mg·L-1） 0．05 0．1 0．2 0．3 0．5 - - - - - 2，4-D（mg·L-1） - - - - - 0．05 0．1 0．2 0．3 0．5 不定芽诱导率（%） 68 75 77 69 59 81 92 83 70 61 注：诱导率=出不定芽的外植体数/接种的外植体数×100% A. 培养基中NAA/6-BA比例过高，不利于不定芽的诱导 B. 推断6-BA应为细胞分裂素类植物生长调节剂 C. 该研究的结果可指导草莓脱毒苗的生产 D. 相同条件下，NAA诱导草莓茎尖形成不定芽的效果优于2，4-D 10. 两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如下图所示。下列说法正确的是（ ） A. 过程①需使用纤维素酶和蛋白酶处理细胞 B. 过程②的目的是使普通小麦细胞的染色体断裂 C. 过程③中常用灭活的病毒诱导原生质体融合 D. 耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段 11. 我国科学家利用人的体细胞制备多能干细胞，再用小分子TH34成功诱导衍生成胰岛B细胞。下列相关叙述错误的是（ ） A. 基因选择性表达被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞 B. 在小分子TH34诱导下，多能干细胞发生基因突变，获得胰岛素基因 C. 衍生的胰岛B细胞在葡萄糖的诱导下能表达胰岛素，才可用于移植治疗糖尿病 D. 若衍生的胰岛B细胞中凋亡基因能正常表达，细胞会发生程序性死亡 12. 下列关于哺乳动物体内受精作用、早期胚胎发育和胚胎工程的叙述正确的是（ ） A. 精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜会迅速发生反应，阻止其他精子进入 B. 受精卵开始卵裂后，首先发育为囊胚，之后依次是桑椹胚、原肠胚 C. 胚胎移植前，需要对供体、受体母牛进行同期发情处理和超数排卵处理 D. 为获得同卵双胞胎，可在桑椹胚或囊胚阶段进行胚胎分割，再进行胚胎移植 13. 某奶牛场有一头高产奶牛，年产奶量达30.8t，而一头普通奶牛年产奶量3～4t。某研究人员从该高产奶牛的耳上取体细胞并进行培养，利用核移植技术获得了高产奶牛，流程如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 小牛d是对体细胞供体动物奶牛b进行了100%的复制 B. 小牛d的性状与代孕个体母牛c的性状基本无关 C. 体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植 D. 用物理或化学方法激活重构胚，使其完成生长发育进程 14. 第三代试管婴儿技术（PGD/PGS）是对早期胚胎细胞进行基因诊断和染色体检测后再进行胚胎移植，流程如图所示。图中检测包括PGD、PGS（PGD是指胚胎植入前的基因诊断，PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测）。下列叙述正确的是（ ） A. 受精前需要将采集的卵子培养至MI期，并使精子在获能液中获能 B. PGD和PGS技术可分别用于筛查血友病和21三体综合征 C. 胚胎移植前需对夫妻双方进行免疫检查，以防止移植后出现免疫排斥 D. “理想胚胎”需培养至桑葚胚或原肠胚才能移植入子宫 15. 用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述正确的是（ ） A. 图1中两种酶识别的核苷酸序列相同 B. 图2中酶切产物不能用于构建重组DNA C. 泳道②中是用XhoⅠ处理得到的酶切产物 D. 图中被酶切的DNA片段是单链DNA 16. 下列关于“DNA 粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A. 实验中如果将研磨液更换为蒸馏水，DNA提取的效率会降低 B. 利用DNA和蛋白质在酒精中的溶解度差异，可初步分离DNA C. DNA在不同浓度NaC1溶液中溶解度不同，该原理可用于纯化DNA粗提物 D. 将溶解的DNA粗提物与二苯胺试剂反应，可检测溶液中是否含有蛋白质杂质 17. 下列关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验操作的叙述，全部正确的一项是（ ） ①PCR实验所需的微量移液器、枪头等都必须进行灼烧灭菌 ②PCR反应组分都加入微量离心管后，通过瞬时离心使反应液集中在管的底部 ③PCR仪中设置的PCR反应程序通常包括预变性、30次循环等 ④琼脂糖凝胶浓度的选择需考虑待分离DNA片段的大小 ⑤将得到的PCR产物进行凝胶电泳，加样前应先接通电源 ⑥凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置 A. ①②③ B. ②③④ C. ③④⑤ D. ④⑤⑥ 18. 某同学拟用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA连接酶为工具，将目的基因（两端含相应限制酶的识别序列和切割位点）和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示。 下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是（ ） A. 质粒和目的基因都用酶3切割，用E. coli DNA连接酶连接 B. 质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接 C. 质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA连接酶连接 D. 质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E. coli DNA连接酶连接 19. 大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因，其编码的产物β­半乳糖苷酶在X－gal和IPTG同时存在时，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。如图为利用该质粒进行的转基因过程，请据图菌落①②③的颜色分别是（ ） A. 蓝色　 白色　 白色 B. 蓝色　 蓝色　 白色 C. 蓝色　 白色　 蓝色 D. 白色　 蓝色　 白色 20. 运用转基因技术培养的单细胞“工程硅藻”，可把光合作用合成的有机物以脂质形式储存起来。科学家计划在海水中大量培养“工程硅藻”，捕捞后从中提炼“生物柴油”。与矿物柴油相比，使用这种“生物柴油”的优点是（ ） ①可以再生②不显著增加碳排放③减少排放含硫废气④不会对生态环境造成负面影响 A. ①②③ B. ①③④ C. ①②④ D. ②③④ 21. 胰岛素的研发走过了：动物提取—化学合成—重组胰岛素—生产胰岛素类似物生产等历程。有关叙述错误的是（ ） A. 动物体内胰岛素由胰岛B细胞合成并胞吐出细胞 B. 氨基酸是化学合成胰岛素的原料 C. 用大肠杆菌和乳腺生物反应器生产胰岛素需相同的启动子 D. 利用蛋白质工程可生产速效胰岛素等胰岛素类似物 22. 从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1。目前科研人员想在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是（ ） A. 合成编码目的肽的目的基因序列 B. 依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽 C. 构建含目的肽DNA片段的表达载体 D. 筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽 23. 生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是（ ） A. 开展风险评估、预警跟踪和风险管理是保障转基因生物安全的前提 B. 我国已经对转基因食品和转基因农产品强制实施了产品标识制度 C. 反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿 D. 生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力 阅读下列材料，回答下列小题 为提高转基因抗虫棉的抗虫持久性，可采取如下措施： ①基因策略：包括提高杀虫基因的表达量、向棉花中转入多种杀虫基因等。例如，早期种植的抗虫棉转入了一种Bt毒蛋白基因，抗虫机制比较单一；现在经常将两种或两种以上Bt基因同时转入棉花。 ②田间策略：主要是为棉铃虫提供庇护所。例如我国新疆棉区，在转基因棉田周围种植一定面积的非转基因棉花，为棉铃虫提供专门的庇护所；长江、黄河流域棉区多采用将转基因抗虫棉与高粱和玉米等其他棉铃虫寄主作物混作的方式，为棉铃虫提供天然的庇护所。 ③国家宏观调控政策：如实施分区种植管理等。 24. 关于上述基因策略，下列叙述正确的是（ ） A. 提高Bt基因的表达量，不能降低抗虫棉区的棉铃虫的种群密度 B. 转入棉花植株的两种Bt基因的遗传，一定遵循基因的自由组合定律 C. 若两种Bt基因插入同一个T - DNA并转入棉花植株，则两种基因互为等位基因 D. 转入多种Bt基因能提高抗虫持久性，是因为棉铃虫基因突变的频率低且不定向 25. 关于上述田间策略，下列叙述错误的是（ ） A. 转基因棉田周围种植非抗虫棉，可降低棉铃虫抗性基因突变率 B. 混作提高抗虫棉的抗虫持久性，体现了物种多样性的重要价值 C. 为棉铃虫提供庇护所，可使敏感棉铃虫在种群中维持一定比例 D. 为棉铃虫提供庇护所，可使棉铃虫种群抗性基因频率增速放缓 二、 非选择题（共4题，共50分） 26. 自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。某同学试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。 （1）该同学采用显微镜直接计数法和菌落计数法分别测定同一样品的细菌数量，发现测得的细菌数量前者大于后者，其原因是__________。 （2）该同学从100mL细菌原液中取1mL加入无菌水中得到10mL稀释菌液，再从稀释菌液中取200μL涂布平板，菌落计数的结果为100，据此推算细菌原液中细菌浓度为________个/mL。 （3）对培养基进行灭菌通常采用的方法是_________。 （4）为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量较高的湖泊水样稀释后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现____。采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P菌。 （5）为探究P菌溶解破坏A菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下材料和设备加以验证（主要实验材料和设备：P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱）。假设：______。 27. CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如下流程进行了实验。请回答下列问题： 实验组：抗CD47单克隆抗体+巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系，测定巨噬细胞的吞噬指数。 对照组：__________，测定巨噬细胞的吞噬指数。 （注：巨噬细胞的吞噬指数=被吞噬的颗粒总数/巨噬细胞总数） （1）以小鼠的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要操作流程：___________。 （2）步骤②用特定的培养基进行筛选，____________细胞会死亡，其中步骤③筛选的目的是______。 （3）培养杂交瘤细胞时需提供CO2的主要作用是____________。 （4）上述实验流程中，对照组应设置为_________，按照科学家的推测，实验组的巨噬细胞的吞噬指数______（选填“高于”或“低于”）对照组，理由是_____________。 28. 某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活（Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因）。有人将此质粒载体用BamHⅠ酶切后，与用BamHⅠ酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题： （1）质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有__________、________（答出两点即可）。而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。 （2）如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是①_____________；并且②__________________和③______________的细胞也是不能区分的，其原因是④______________。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用⑤_____________的固体培养基。 29. 北极比目鱼中有抗冻基因，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图。请回答下列问题。 （1）据图分析过程中使用的工具酶包括_________。（至少答出2种） （2）图中哪些过程属于植物组织培养技术_________（填标号）。可选取抗冻番茄的茎尖作为外植体培育无病毒幼苗，理由是___________。 （3）通过抗冻实验从培养出的番茄植株中筛选出了抗冻个体，可利用______扩增技术快速获得大量抗冻基因，与比目鱼体内的抗冻基因比较，该基因__________。 （4）研究表明，此抗冻基因编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因_______（能/不能）得到抗冻性增强的抗冻蛋白，理由是_________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $