四川南充市阆中中学校2026春高2024级期中教学质量检测生物试题

阆中中学校2026春高2024级期中教学质量检测 生物试题 (时间：75分钟满分：100分命题人：宋政审题人：李蕊希) 一、选择题（每题只有一个答案最符合题意，请把它选出来，填涂到规定的地方。每题 2分，共50分) 1.如图为利用蚕豆瓣发酵生产豆瓣曲的流程，下列说法错误的是() 蚕豆瓣 沸水漂浸3min、、 蚕豆与面接种菌种，盖上纱布，保温2-3天 豆瓣曲 沥干水分、冷却粉混合物 12h翻拌一次 A.沸水浸泡蚕豆的主要目的是灭菌 B.冷却是避免高温伤害后续接种的菌种 C.蚕豆与面粉混合物可提供碳源、氮源等 D.好氧微生物是接种的主要菌种 2.下列关于传统发酵技术及发酵工程应用的叙述，错误的是() A.利用乳酸菌制作酸奶的过程中应严格进行密封发酵 B.果酒和果醋制作过程中发酵液的pH均会逐渐降低 C.与传统发酵技术相比，发酵工程获得的发酵产物成分更复杂 D.发酵工程生产谷氨酸所用的培养基属于液体培养基，使用前需灭菌 3.科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素(C22H23CIN2O8)能力强 的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是() A.以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基 B.逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株 C.配制选择培养基时，需确保pH满足实验要求 D.用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面 4.大肠杆菌是人和动物肠道寄生菌，在一定条件下会引起胃肠道等局部组织感染。检 验水样中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准，常用滤膜法测定，其操作流 程如图。大肠杆菌的代谢产物能与伊红一亚甲蓝(EMB培养基的指示剂)反应，使 菌落呈深紫色。下列对实验操作的分析，错误的是( 滤腹上的落 滤杯 无药摄子 流膜 37℃培光 装E 24h 水样 滤瓶 EMB培养基 培养后的平板 A.测定前，滤杯、滤膜和滤瓶均需要进行灭菌处理 B.过滤操作要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌污染 C.将过滤完的滤膜紧贴在EMB培养基上，完成大肠杆菌的接种操作 D.EMB培养基属于选择培养基，只有大肠杆菌能正常生长并形成深紫色菌落 5.下列有关发酵的叙述，正确的是() A.植物细胞无氧呼吸产生酒精的过程属于发酵 B.乳酸菌无氧呼吸产生乳酸的过程属于发酵 C.动物细胞无氧呼吸产生乳酸的过程属于发酵 D.发酵特指微生物细胞进行无氧呼吸的过程 第1页共8页 6.除草剂莠去津是一种含氮的有机物，长期使用易对土壤造成污染。从土壤中筛选莠 去津降解菌的过程如下图所示（含过量莠去津的固体培养基不透明）。下列叙述错 误的是( 无氨培养液+过量莠去津 琼脂 无透明 差架锅里冀 ⊙可丁带菌蒂再纯化 ●⊙十有透明 带菌落 壤浸出液 适宜条件 振荡培 固体培养基 当时 A,从A瓶到C瓶的目的是逐步稀释培养液中的目的菌 B.选择固体培养基甲中出现的有透明带菌落进行再纯化 C.图中进行再纯化的接种过程至少需要灼烧6次接种环 D.整个实验过程中需设置未接种的选择培养基作为空白对照 7. 珙桐为珍稀濒危植物，其特有黄酮苷具有较强的抗氧化、抗炎等效果。研究人员以 珙桐茎尖为材料开展了育苗和黄酮苷提取的实验，流程如图所示。下列说法正确的 是() 共桐茎尖0，愈伤组织@，®你细织网®，共桐幼蔺 割扩大培养 工厂化细胞培养 黄酮苷 A.过程①中需同时用酒精和次氯酸钠对茎尖进行消毒处理 B.除培养基中激素比例不同外，过程①③的其他条件相同 C.过程③中需先诱导生芽，再转移至生根培养基上进行培养 D.过程④需通过改变培养条件以提高单个细胞中黄酮苷产量 8. 直肠癌是全球范围内常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率均较高。为研究直肠 癌细胞通过其微环境诱导肝星状细胞分化进而促进肿瘤生长和转移的机制，研究人 员进行了相关实验（实验细胞均贴壁生长，所用培养基中添加500如L的青链霉素）。 下列说法错误的是() A.培养基中添加青链霉素的目的是抑制细菌增殖 B.对直肠癌细胞进行传代培养时，可直接用离心法收集细胞 C.直肠癌细胞应置于含95%空气和5%C02混合气体、37C的恒温培养箱中培养 D.收集直肠癌细胞培养上清液，与肝星状细胞共培养，可判断其是否有诱导作用 9. 中国克隆牛“康康”的培育流程如下：将良种肉牛的体细胞直接注入去核卵母细胞 中，经诱导融合形成重构胚；对重构胚人工激活与体外培养后，筛选合格胚胎移植 至代孕母牛子宫内，使其完成胚胎发育。下列说法错误的是( ) A.“康康”的细胞质基因来源于受体细胞和供体细胞 B.利用梯度离心法可不穿透透明带去除纺锤体一染色体复合物 C.可用电刺激或Ca2+载体激活重构胚，使其完成分裂和发育进程 D.将重构胚培养至囊胚期，取内细胞团细胞进行DNA分析后方可移植 10.我国科学家利用如下图所示的液态厌氧发酵工艺，实现了高效产出乙醇和乙醇梭菌 蛋白。下列叙述正确的是( 乙醇梭菌 工业尾气 预处理 乙醇 硫、脱氧 ① ,乙醇梭菌②→乙醇梭菌 氨水 厌氧发酵 发酵液 单细胞蛋白 第2页共8页 A.乙醇梭菌菌种扩大培养是该发酵工程的中心环节 B.乙醇和乙醇梭菌单细胞蛋白都属于乙醇梭菌的次生代谢产物 C.通过该工艺高效生产清洁能源乙醇，可以降低生态足迹 D.发酵完成后，可通过提取、分离、纯化等方法获得单细胞蛋白 11.下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，错误的是( ImL ImL ImL 0.ImL 充分摇匀 进一步 鉴定 10g土样 212个 230个 218个 90mL无菌水 土壤悬浮液 9mL无菌水 菌落 菌落 菌落 ① ② ① (4 (5 ⑥ A.配制培养基时，需先调节pH,再进行高压蒸汽灭菌 B.该选择培养基上只有尿素分解菌能生长 C.平均每克土壤中分解尿素的细菌数约为2.2×108个 D.利用该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少 12.某研究小组探究了某观赏植物茎段的组织培养条件和植株再生能力，过程如图所示。 下列有关叙述正确的是() 悬浮原生质体 愈伤组织 从生芽 A.可用酒精对获得的叶片等外植体进行30min消毒 B.过程①要在无菌清水中用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞 C.过程③要给予适宜强度的光照以培育出叶绿体 D.过程②与③培养基中两种植物激素用量的比例相同 13.病毒PEDV会使猪患流行性腹泻，在制备抗PEDV的单克隆抗体时加入不同浓度维 生素C(VC),杂交瘤细胞增殖情况及抗体分泌情况如图和表格所示。相关叙述正 确的是( 25H VC/(ng'mL-) 抗体效价 0 1:4000 10 5 1:4000 10 1:8000 0 51020 20 1:2000 VC浓度/(ngmL) 注：抗体效价指经系列稀释后，能检测出抗原抗体反应的血清最高稀释度的倒数 A.制备单克隆抗体过程中，涉及到动物细胞融合、动物细胞培养等技术 B.诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞进行融合，可采用高Ca2+-高pH融合法 C.应在5至10ngmL-1VC之间设置更小的浓度梯度来确定其最适浓度 D.据图表推测，20ng·mL-1VC可通过抑制细胞增殖降低抗体效价 第3页共8页 14.下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种高产奶牛，供体2 是本地黄牛，下列相关叙述错误的是( 供体1 应用1 然降 w 受 细胞A细胞B ©精应用2心早期胚胎 供体2 卵 心囊胚 重构胚 应用3 受体 留 二分胚 小牛 早期胚胎 A.应用2中，需要两次检查，一次是检查胚胎质量，一次是对受体进行妊娠检查 B.进行胚胎移植前，无需对供体和受体进行免疫检查，基本不发生免疫排斥反应 C.应用1中普遍使用的去核方法是显微操作法，去的“核”是纺锤体染色体复合物 D.为了提高奶牛的遗传多样性，可以采用应用1、3方式进行人工繁育 15.下图为实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作步骤，下列说法正确的是() ① ② ③ 4 A.③到④的过程中，每次划线后都需要蘸取菌种 B.④的操作过程中，接种环共灼烧了5次 C.①步骤待培养基冷却至50℃左右，在酒精灯火焰附近倒平板 D.④步骤操作时划完一个区域后需灼烧立即划下一个区域 16.下列高中生物学实验操作可以达成其目的的是( ) A.在含DNA的滤液中加入2mol/L的NaCI溶液，去除杂质并析出DNA B.用高浓度蔗糖溶液处理成熟植物细胞观察质壁分离 C.向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无菌环境 D.对外植体进行消毒以杜绝接种过程中的微生物污染 17.紫杉醇是存在于珍稀植物红豆杉体内的一种高效抗癌物质。由于红豆杉是濒危植物， 因此紫杉醇的供应严重不足。为满足临床需求，科学家尝试利用植物细胞工程生产 紫杉醇。下列相关叙述正确的是() A.紫杉醇是红豆杉属体内的一种高效抗癌物质，属于初级代谢产物 B.野生红豆杉的数量很多，也可以从红豆杉的树皮和树叶中大量提取 C.该方法主要利用促进细胞生长的培养条件，提高单个细胞中紫杉醇的含量 D.利用植物细胞工程生产紫杉醇，体现了生物多样性的直接价值 18.黑胫病对甘蓝型油菜的危害十分 (2m6,BB)@,叶肉细胞X射线 。黑芥 严重，黑芥能抗黑胫病，两者不 ”原生质体破环染色体义 抗黑胫病基因 能直接杂交。为解决该问题，科 1② 研人员通过下图所示过程获得抗 莒辣袭@微尘朝限②，难食神原⑨®拉麻 原生质体 生质体 含有黑胫病菌 植株 病品系。据图分析，下列相关叙 致病毒素 述不正确的是( A.黑芥与甘蓝型油菜存在生殖隔离 B.过程①可使用纤维素酶和果胶酶，过程②可利用PEG进行诱导 C.过程③发生脱分化，过程④体现出植物细胞具有全能性 D.最终获得的抗病植株具有完整的甘蓝型油菜和黑芥的遗传信息 第4页共8页 19.植物细胞工程在植物繁殖新途径等方面都有广泛的应用，并取得了显著的社会效益 和经济效益。下图表示植物细胞工程应用的相关操作，相关叙述正确的是() A.A途径中发生的可遗传变异有基因 突变和基因重组 D◆田→脱毒植株 B.经B途径得到的大多数植株的隐性 快速繁殖←一 性状容易显现 优良如倍单倍体 B◆由一→次生代谢产物 C.B途径得到的优良品种一般高度不 品种选择纷苗一 育，可无性繁殖获得后代 突变植株←一田C D.上述应用得到的植株体细胞中的染 紫外线 8入0一袋要 色体数均相同 20.下列有关受精及胚胎早期发育的叙述错误的是( A.动物排出的卵子可能是初级或次级卵母细胞 B.观察到两个极体或雌雄原核是受精的标志 C.桑葚胚和囊胚的任意一个细胞都能发育成完整个体 D.囊胚期如果不能正常孵化，胚胎就无法继续发育 21.下列关于基因工程的叙述，错误的是() A.目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B.限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C.DNA重组技术的原理是基因重组 D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 22.下列关于DNA重组技术基本工具的说法，正确的是() A.DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键 B.限制酶切割DNA后一定能产生黏性末端 C.T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低 D.微生物中的限制酶对自身DNA有损害作用 23.如图表示基因工程中两种工具酶的作用。下列叙述正确的是() 880d D①D08YX大8ⅫD① A.表示限制酶，不同限制酶识别序列不同，产生的末端也不同 B.b表示DNA连接酶，其与DNA聚合酶催化的底物完全相同 C.a的识别序列越长，该序列在DNA中出现的概率就越小 D.欲将图示中的切口“缝合”起来，必须使用E.coliDNA连接酶 24.科学家为扩大大熊猫繁育数量，选择出生天折的大熊猫与家免巧妙构建出大熊猫一 兔重构胚，实验及结果如下图所示。下列叙述正确的是() 1201个数/个 口处理的初始重构胚 □激活后发育的重构胚 100 80 40 20 CB Colc CB+Colc DMSO 注：CB为细胞松弛素，Co|c为秋水仙素，各组使用时均用DMS0溶剂溶解 A.可用外源促性腺激素处理家兔，以获得大量成熟的卵细胞 B.重构胚可用电刺激、PEG或者Ca2+载体激活，完成细胞分裂和发育进程 C.由题图可知，DMSO组对核移植成功率有显著抑制作用 D.由题图可知，CB组的核移植成功率高于其他组 第5页共8页 25.某野生型细菌能通过图1途径合成色氨酸，在不含色氨酸的培养基上能生长繁殖， 其突变株则不能。色氨酸合成途径中涉及到的酶均不能进出细胞，但中间产物积累 到一定程度可分泌到细胞外。将突变株TpG、TrpM、TpE(均仅为图1中的某 步受阻)分别接种在图2培养基的I、Ⅱ、Ⅱ区域，培养短时间内三个区域均有少 量细菌生长增殖，继续培养后发现I区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续能生长 增殖，而区域菌株不再生长。下列叙述错误的是() A.该培养基中含有少量色氨酸 B.B.图2中的接种方法是划线法 C.TpE的代谢异常发生于③处分支酸巴邻氨基苯甲酸②，吲噪恩色氨酸 D.D.Ⅱ区域能继续生长的是左 图1 下端 图2 二、非选择题（本题共4个小题，共50分） 26.(12分)土壤中的磷大多数以难溶性磷酸盐[如C3(PO4)2]的形式存在，不利于植 物吸收。科研人员尝试从土壤中筛选将难溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌（可 形成溶磷圈)，主要流程如图甲。请回答下列问题： 0.5mL0.5mL0.1mL 振荡 20 min 0.5 min ① ② 取果园 90mL无菌水土壤悬浮液 土壤10g 4.5mL无菌水 ③ ④ ⑤ 甲 (1)步骤②需充分振荡20min,主要目的是 步骤③将土壤悬浮液稀释 了 倍。 (2)步骤④中培养基的成分：葡萄糖、(NH4)2SO4、NaC1、MgSO4·7H2O、KCI、 FeSO4·7H2O、MnSO4、Ca3(PO4)琼脂粉等。该培养基中的氮源是 步骤④使用的接种工具为 (3)步骤⑤使用接种环挑取步骤④培养基中的 菌落（选填图中的字母)， 采用 的方法在培养基表面接种，目的是 (4)将得到的高效解磷菌接入己灭菌的含难溶磷的液体培养基中培养，每天取样测 定溶磷量和pH变化情况，结果如图乙所示。 口溶磷量 -pH 6.0 55 600 400 200 15 40 2 3 4 6 时间/d ①结果表明，高效解磷菌分解难溶磷的能力呈现 的趋势。 ②根据培养液的pH变化情况，推测高效解磷菌的溶磷原理为 (2分)。 (5)请预期该高效解磷菌在农业生产方面可能的应用是 (答出1点即可) (2分)。 第6页共8页 27.(14分)在太空长期飞行时，航天员需要一个能自给自足的“生命维持系统”（简 称BLS$)。这个系统就像一个微型生态圈，能独立提供氧气、水和食物，保障航天 员的基本生存需求。在这个系统中，高等植物不仅能通过光合作用释放氧气，还能 通过蒸腾作用帮助制造饮用水，同时自身也能作为新鲜食物被食用。由于太空环境 特殊，科学家在选择植物时会非常谨慎。综合考虑生长效率、营养价值、种植难度 和空间占用等因素后，马铃薯脱颖而出，是构建BLSS的理想选择。 科研人员利用植物组织培养技术进行脱毒苗的快速繁殖，以马铃薯茎尖外植体 为材料，在MS培养基中添加不同浓度的6-BA(细胞分裂素类)和NAA（生长素类)， 培养30天后统计增殖倍数（即一个芽诱导分化出的丛生芽数量）。请回答下列问题： 植物组织培养的培养基中，除了MS培养基提供的大量元素、微量元素和有机 营养外，植物生长调节剂的种类和比例是决定细胞分裂、脱分化和再分化的关键。 (1)在进行马铃薯茎尖脱毒培养时，通常选用茎尖分生组织作为外植体，原因是该 部位 (2)根据植物激素的作用原理，当培养基中细胞分裂素（如6-BA)含量较高，而 生长素（如NAA)含量较低时，有利于 ；反之，生长 素含量较高则有利于 研究人员进行了四组实验，数据如下表所示： 组别 6-BA NAA 增殖倍数（个 平均芽长 (mg/L) (mg/L) /芽) (cm） A组 0 0.1 1.0 4.5 B组 1.0 0.1 3.8 2.1 C组 2.0 0.1 5.2 1.5 D组 2.0 0.5 2.0 3.0 (3)对比A、B、C三组数据，可以得出的结论是： (4)对比C组和D组数据，说明在6-BA浓度一定的情况下，适当提高NAA浓度 会 (填“促进”或“抑制”)（1分)芽的增殖，但会 (填 “促进”或“抑制”)(1分)芽的伸长生长。 在实际的工厂化育苗中，为了防止试管苗徒长，使幼苗更加健壮，便于后续的 移栽驯化，常需使用生长延缓剂。B9是一种常用的生长延缓剂，它能抑制植物体内 赤霉素的合成。 (5)结合所学知识推测，B9对植物茎秆生长的作用效果与赤霉素 （填“相 似”或“相反”)。 (6)若马铃薯是构建受控生态生命保障系统(BLS$)的理想候选植物之一。若未 来在太空站利用该系统种植马铃薯，除了控制光照、温度外，你认为通过调节 培养基中的哪些激素配比可以优化植株形态，使其更适应空间站有限空间的生 长？请提出一个假设： 28.(12分)2018年《细胞》期刊报道，中国科学家率先成功应用体细胞对非人灵长类 动物进行克隆，获得两只克隆小猴一“中中”和“华华”。下图是该项技术的流 程图，据图下列问题。 第7页共8页 Kdm4d的 用灭活的仙台 mRNA 取出 胎猴 体细胞 病毒短暂处理 注入 融合，重构胚 移入代孕生出克隆 采集 去核「去核卵 培养 母猴 小猴 母猴 卵母细胞 母细胞 (1)科学家曾成功培育出胚胎细胞克隆猴，但“中中”和华华”的出生仍然轰动 世界，这是因为体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，其原因是 (2)体细胞核移植需借助去核的 细胞，因其细胞质中含有促进核基因 的物质。 (3)体外培养胎猴体细胞时，需定期更换培养液的原因是 (4)体细胞克隆猴的另外一个技术难点是胚胎发育率低。研究人员将组蛋白去甲基 化酶Kdm4d的mRNA注入重构胚，可使胚胎的发育率明显提高，推测可能的 原因是 (5)若获得的克隆动物与核供体动物性状不完全相同，分析其原因可能是 (答出一点)。 29.(12分)癌症的免疫疗法是指重新激活抗癌细胞的免疫细胞，进而克服癌细胞的免 疫逃逸。研究发现，当T细胞表面的PD-1被活化后，与正常细胞表面的PD-L1结 合，T细胞即可“认清”对方为正常细胞，不触发免疫反应，而癌细胞可通过过量表达 PD-L1来逃避免疫系统的追杀”。科研人员使用PD-L1或PD-1的单克隆抗体阻断 这一信号通路（如图1），以恢复T细胞的活性，用于癌症治疗。PD-L1和PD-1的 单克隆抗体制备过程如图2。请分析回答问题： 注射特定多种B淋 癌细胞 食的抗原 巴细胞 癌细胞 PD-LI PD-LI PD-1 >抗体 ADC 接头 PD-1 培养骨骨髓瘤细胞 髓瘤细胞 图1 图2 (1)在单克隆抗体的制备过程中，运用到的动物细胞工程技术有（答2项即可） (2)图2中，过程①与植物体细胞杂交相比，特有的诱导方法是：过程③借助 多孔细胞培养板，利用 原理对杂交瘤细胞进行第二次筛选，选出能分泌所 需抗体的杂交瘤细胞。 (3)图2中的ADC为科研人员设计的抗体一化疗药物偶联物，其中，化疗药物是 ADC中的 (填a”或b”)部分。现有两种ADC,第一种是将化疗药物与 PD-1单克隆抗体结合；第二种是将化疗药物与PD-L1单克隆抗体结合。将两 种ADC用于肿瘤模型小鼠的治疗，发现第二种偶联物的疗效更好，请你分析 原因是 (4)某些癌细胞能分泌吸引特定细胞靠近的信号物质A,为使细胞毒性T细胞响应 此信号，可在T细胞中导入基因并进行细胞培养，再将基因改造后的T细 胞回输到患者体内，从而进一步提高治疗效果。 第8页共8页 阆中中学校2026年春高2024级期中学习质量检测 生物参考答案 一、选择题（每题2分，共50分） 1.【答案】A【详解】A、沸水浸泡蚕豆3分钟，主要目的是杀死蚕豆表面的杂菌，同时也 能让蚕豆吸水软化，便于后续与面粉混合，并促进微生物附着，A错误：B、冷却操作是为了 避免高温伤害后续接种的菌种，防止菌种在高温下失活，B正确：C、蚕豆中含有丰富的蛋白 质（提供氮源），面粉中含有大量淀粉（提供碳源），二者的混合物可以为菌种生长提供碳源、 氮源等营养物质，C正确：D、流程中提到“盖上纱布，保温2-3天，12翻拌一次”，纱布可以 保证通气，翻拌也能增加氧气供应，说明接种的主要菌种是好氧微生物，D正确。 2.【答案】C【详解】A、乳酸菌为厌氧菌，用乳酸菌制作酸奶的过程中应严格进行密封发 酵，A正确：B、果醋制作过程中，醋酸杆菌会产生醋酸，使溶液H逐渐降低。果酒制作过程 中酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳，二氧化碳溶于水形成碳酸，随着二氧化碳浓度的增加，溶液 的pH逐渐降低，B正确：C、与传统发酵技术相比，发酵工程获得的发酵产物成分更简单（单 一)，C错误：D、谷氨酸由谷氨酸棒状杆菌发酵而来，为获得大量谷氨酸，应用液体培养基 培养谷氨酸棒状杆菌，培养基在使用前，需进行灭菌处理，D正确。故选C。 3【答案】D【详解】A、以金霉素为唯一碳源的选择培养基，仅允许能利用金霉素的微生 物生长（其他无法利用金霉素的微生物被抑制），符合选择培养基的设计原理，A正确；B、 逐步提高金霉素浓度可模拟环境胁迫，筛选出耐受性更强的菌株（类似驯化”过程），B正确： C、培养基的pH需根据目标微生物的生长需求调整（如细菌通常中性偏碱，真菌偏酸性），是 配制培养基的基本要求，C正确：D、稀释涂布平板法需用涂布器将菌液均匀涂布在培养基表 面，而接种环用于平板划线法（分离单菌落）。用接种环涂布无法保证菌液均匀，D错误。故 选D。 4.【答案】D【解析】大肠杆菌的代谢能与伊红美蓝(EMB培养基的指示剂)反应，菌落 呈黑色，因此可以制备EMB培养基来鉴别大肠杆菌。在实验室进行微生物培养的时候都需要 进行严格的无菌操作，尽量减少杂菌的污染。【详解】A、测定前，对滤杯、滤膜和滤瓶进行 灭菌，防止杂菌的污染，A正确：B、在酒精灯火焰附近操作可以减少空气中的杂菌污染，B 正确；C、由于过滤完后细菌粘附在滤膜上，将滤膜紧贴在EMB培养基上可以将粘附的菌种接 种在培养基上，C正确；D、EMB培养基属于鉴别培养基，没有选择作用，D错误。故选D。 5.【答案】B【解析】发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的 代谢转化为人类所需要的产物的过程。【详解】A、植物细胞无氧呼吸产生酒精是无氧呼吸的 一种类型，不属于发酵，A错误；B、通常利用乳酸菌无氧呼吸制造乳酸为人们所利用，属于 发酵，B正确：C、动物细胞无氧呼吸产生乳酸是无氧呼吸的一种类型，不属于发酵，C错误： D、发酵是人们利用微生物无氧呼吸制造所需的其他产物的过程，D错误。故选B。 6.【答案】A【详解】A、从A、B、C瓶是在无氮培养液中进行的富集培养，其主要目的 是增加目的菌的浓度，而不是单纯的稀释，A错误；B、固体培养基甲中含有过量莠去津，不 透明。能降解莠去津的细菌会在菌落周围分解莠去津，形成透明带，因此，应选择有透明带的 菌落进行再纯化，B正确；C、图乙展示的是平板划线法纯化菌种，划线5次，每次划线前都 要灼烧接种环，最后一次划线结束后也要灼烧接种环，共需要灼烧5+1=6次，C正确：D、整 个实验过程中，需设置未接种的选择培养基作为空白对照，以检验培养基是否被污染，D正确。 故选A。 7.【答案】C【详解】A、过程①中需依次用酒精和次氯酸钠对茎尖进行消毒处理，防止杂 菌污染，A错误；B、除培养基中激素比例不同外，过程①③的其他条件也有差别，如过程③ 诱导芽出现的时候需要光照条件，而过程①不需要，B错误；C、过程③中需先诱导生芽，再 转移至生根培养基上进行培养，该培养基中生长素比例高，有利于生根，C正确；D、过程④ 需通过改变培养条件以提高培养液中黄酮苷产量，但不能提高单个细胞中黄酮苷的产量，D错 误。故选C。 8.【答案】B【详解】A、青链霉素属于抗生素，动物细胞培养时添加青链霉素可抑制细菌 增殖，避免杂菌污染培养体系，A正确：B、题干明确说明实验细胞均贴壁生长，传代培养时 首先需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理，使贴壁细胞从培养瓶壁上脱落下来，再用离心法 收集细胞，B错误：C、动物细胞培养的适宜条件为：温度控制在37℃左右，气体环境为95% 空气（为细胞有氧呼吸提供氧气）和5%CO2(维持培养液的pH稳定)，C正确：D、若直肠 癌细胞可分泌相关物质诱导肝星状细胞分化，则其培养上清液会含有该类物质，将上清液与肝 星状细胞共培养，观察肝星状细胞的分化情况即可验证诱导作用是否存在，实验设计合理，D 正确。 9.【答案】D【详解】A、该培育流程是将完整供体细胞注入去核卵母细胞，供体细胞的细 胞质含部分细胞质基因，去核卵母细胞的细胞质也含细胞质基因，因此“康康”的细胞质基因来 源于两者，A正确；B、梯度离心法是利用纺锤体一染色体复合物密度较小的特点，使其移动 到透明带附近后去除，无需穿透透明带，B正确：C、电刺激、Ca+载体、乙醇等均是常用的重 构胚激活方法，可诱导重构胚完成分裂和发育进程，C正确：D、囊胚的内细胞团将来发育为 胎儿的各种组织，若取内细胞团细胞进行DNA分析会损伤胚胎正常发育，应取滋养层细胞进 行检测，D错误。 10.【答案】C【详解】A、发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵过程，而不是菌种扩大 培养，A错误：B、乙醇是乙醇梭菌的次生代谢产物，但乙醇梭菌单细胞蛋白是菌体本身，不 属于次生代谢产物，B错误：C、该工艺利用工业尾气生产乙醇，乙醇属于清洁能源，能减少 化石能源的使用，从而降低生态足迹，C正确：D、单细胞蛋白是乙醇梭菌的菌体，发酵完成 后，可通过过滤、沉淀等方法获得，而不是提取、分离、纯化（这是提取代谢产物的方法）， D错误。 11.【答案】B【解析】A、配制培养基的操作流程是先调节pH,再进行高压蒸汽灭菌，若 灭菌后调pH会重新引入杂菌，A正确：B、该选择培养基以尿素为唯一氮源，能筛选出尿素分 解菌，但并非只有尿素分解菌能生长：例如可固氮的微生物，能利用空气中的氮气作为氮源， 也可以在该培养基上生长，B错误：C、平均菌落数=(212+230+218)÷3=220个：稀释过程：10g 土加入90mL无菌水，稀释为10倍，后续共4次梯度十倍稀释，总稀释倍数为105，涂布体积 为0.1mL;每克土壤中菌落数=220：0.1×105=2.2×108个，C正确；D、稀释涂布平板法统计菌落 数时，若两个或多个活菌连在一起，培养基上只形成一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌 实际数目少，D正确。 12.【答案】C【解析】A、对外植体消毒时，70%酒精的消毒时间仅为30秒左右，消毒30 分钟会导致外植体失活，A错误：B、原生质体无细胞壁，过程①获取原生质体时，若放在清 水中，原生质体会吸水涨破，B错误；C、过程③是再分化形成丛生芽，需要给予适宜强度的 光照，诱导叶绿体形成，满足后续光合作用的需求，C正确：D、②为脱分化，③为诱导芽分 化的再分化过程，培养基中生长素和细胞分裂素的用量比例不同：细胞分裂素比例高时促进芽 分化，因此二者激素比例不同，D错误。 13.【答案】A【解析】A、单克隆抗体的制备过程中，需要将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞进 行融合（动物细胞融合技术），之后对杂交瘤细胞进行培养（动物细胞培养技术）等，A正确： B、诱导动物细胞（骨髓瘤细胞和B淋巴细胞）融合的方法有电融合法、PEG融合法和灭活病 毒诱导法等，B错误：C、分析表可知，在20 ng'mL-VC时抗体效价都低于10ngmL,最适浓 度也可能在5~10 ng'mL-VC、或者l0-20ngmL-1VC之间，所以应在5~20ngmL-lVC之间设置 更小的浓度梯度来确定其最适浓度，C错误；D、从柱形图看，20gmL1VC组的细胞密度仍高 于0ngmL-1和5ngmL1组，说明该浓度下细胞增殖未被抑制，仅根据现有图表，不能得出 20gmL-1VC是通过抑制细胞增殖降低抗体效价的，可能还有其他机制影响抗体效价，D错误。 14.【答案】D【解析】A、应用2是体外受精后进行早期胚胎培养，随后将早期胚胎移植 到受体中。在胚胎移植前，需要对早期胚胎进行质量检查，以确保其适合移植；此外，移植后 需要对受体进行妊娠检查，确认是否怀孕成功，A正确：B、在胚胎移植中，供体和受体之间 不存在免疫排斥问题，受体对移入的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，因此，无需对供体和 受体进行免疫学检测，B正确：C、应用1涉及核移植技术，在核移植中，通常使用显微操作 法去除卵母细胞核，减数分裂Ⅱ中期卵母细胞中的“核”其实是纺锤体-染色体复合物，C正确： D、应用1是核移植技术，应用3是胚胎分割技术，均属于无性繁殖，若要提高奶牛遗传多样 性，应采用有性生殖，应用2，D错误。 15.【答案】C【解析】A、平板划线法中，只有第一次划线前需要蘸取菌种，之后每次划 线从上一次划线的末端获得菌种，不需要每次划线都蘸取菌种，③到④过程中，不需要重新蘸 取菌液，A错误；B、图中④共划了5个区域，平板划线法中，每次划线前后都需要灼烧接种 环，因此接种环共灼烧了5+1=6次，B错误；C、①步骤为倒平板，培养基冷却到50C时，在 酒精灯火焰附近倒平板，C正确；D、划完一个区域灼烧接种环后，需要待接种环冷却后，才 能划下一个区域，若立即划线，高温会杀死酵母菌，D错误。 16.【答案】B【分析】成熟的植物细胞有一大液泡。当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度 时，细胞液中的水分就透过原生质层进入到外界溶液中，由于原生质层比细胞壁的伸缩性大， 当细胞不断失水时，液泡逐渐缩小，原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来，即发生了质壁分离。 当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，外界溶液中的水分就透过原生质层进入到细胞液中， 液泡逐渐变大，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，即发生了质壁分离复原。【详解】 A、在含DNA的滤液中加入2mol/L的NaC1溶液，DNA会溶解，不会析出，A错误；B、成熟的植 物细胞有中央大液泡，用高浓度蔗糖溶液处理，细胞会失水，成熟植物细胞能发生质壁分离， 因此用高浓度蔗糖溶液处理成熟植物细胞观察质壁分离，B正确：C、向泡菜坛盖边沿的水槽中 注满水形成内部无氧环境，不能创造无菌环境，C错误；D、对外植体进行消毒可以减少外植体 携带的微生物，但不能杜绝接种过程中的微生物污染，D错误。故选B。 17.【答案】D【详解】A、外植体消毒需使用体积分数约70%的乙醇和适宜浓度的次氯酸 钠处理，A错误；B、诱导外植体形成愈伤组织的阶段为脱分化阶段，该阶段不需要光照，B 错误；C、该生产方式是通过优化培养条件促进愈伤组织细胞大量增殖，提升细胞总数量进而 提高紫杉醇总产量，C错误：D、生物多样性的直接价值包括药用、工业原料等实用价值，利 用植物细胞工程生产紫杉醇作为抗癌药物，体现了生物多样性的直接价值，D正确。 18.【答案】D【解析】A、根据题意可知，黑芥与甘蓝型油菜不能直接杂交，说明两者存 在生殖隔离，A正确：B、过程①表示去除细胞壁的过程，可以用纤维素酶和果胶酶处理：过 程②表示诱导原生质体融合的过程，可利用PEG进行诱导，B正确：C、融合后的原生质体经 过诱导长出细胞壁，经过程③发生脱分化和过程④后形成抗病植株，由杂种细胞培育成完整植 株的过程体现出植物细胞具有全能性，C正确：D、黑芥的叶肉细胞原生质体经X射线照射后 发生部分染色体结构破坏，因而最终获得的抗病植株不具有完整的黑芥的遗传信息，D错误。 19.【答案】B【解析】A、A途径是植物组织培养进行快速繁殖，该过程主要是有丝分裂， 有丝分裂过程中可能发生基因突变，但不会发生基因重组（基因重组一般发生在减数分裂过程 中)，A错误：BC、B途径是通过花药离体培养获得单倍体幼苗，再经染色体加倍得到纯合子， 单倍体中基因成单存在，经染色体加倍后得到的纯合子，其隐性性状容易显现出来；B途径得 到的优良品种可育，可有性繁殖获得后代，B正确，C错误：D、通过植物组织培养（如A途 径)得到的植株体细胞染色体数与原植株相同：通过单倍体育种(B途径)，先得到单倍体， 其染色体数是原植株的一半，再经染色体加倍后与原植株相同：植物体细胞杂交(F途径)得 到的植株体细胞中的染色体数是两融合细胞染色体数之和，与原植株不同，所以上述应用得到 的植株体细胞中的染色体数并不都相同，D错误。 20.【答案】C【解析】A、不同动物排卵时卵子成熟程度不同，部分动物排出初级卵母细 胞，部分排出次级卵母细胞，均需发育至减数第二次分裂中期才具备受精能力，A正确：B、 当在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体，或观察到雌雄原核形成时，可作为受精的标志， B正确；C、桑葚胚阶段细胞未分化，均具有发育全能性，可发育为完整个体，但囊胚阶段细 胞已经分化为滋养层细胞和内细胞团，仅内细胞团细胞具有发育全能性，滋养层细胞只能发育 为胎膜和胎盘，无法发育为完整个体，C错误：D、囊胚期透明带破裂、胚胎从透明带中伸展 出来的过程为孵化，只有完成孵化胚胎才能继续发育，若不能正常孵化则胚胎发育停滞，D正 确。 21.【答案】D【分析】1、基因工程的工具：(1)限制酶：能够识别双链DNA分子的某种 特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。(2)DNA 连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。(3)运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体 的衍生物、动植物病毒。2、基因工程技术的基本步骤：(1)目的基因的获取：方法有从基因 文库中获取、利用PC技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步 骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细 胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化 法、基因枪法和花粉管通道法：将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法：将目的 基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测： ①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因一DNA分子杂交技术；②检测日的基因是否 转录出了RNA一分子杂交技术：③检测目的基因是否翻译成蛋白质一抗原-抗体杂交技术。个 体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】A、目的基因和受体细胞均可来 自动、植物或微生物，A正确；B、限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶，B正 确；C、DNA重组技术的原理是基因重组，C正确：D、载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA 的细胞，但不能促进目的基因的表达，D错误。 22.【答案】C【分析】基因工程的工具：(1)限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定 核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成产生黏性 末端或平末端两种。(2)DNA连接酶：据酶的来源不同分为两类：E.co1iDNA连接酶、T4DNA 连接酶。这二者都能连接黏性未端，此外T4DNA连接酶还可以连接平未端，但连接平未端时的 效率比较低。(3)运载体：最常用的载体类型：质粒。除此之外，还有噬菌体、动植物病毒。 【详解】A、DNA连接酶可催化相邻的脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键，A错误；B、限制酶切 割DNA后形成产生黏性末端或平末端两种，B错误；C、T4DNA连接酶既可以连接黏性末端，又 可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低，C正确；D、微生物中的限制酶可以切割外源 DNA、使之失效，以保证自身安全，D错误。故选C。 23.【答案】C【分析】关于限制酶，考生可以从以下几方面把握：(1)来源：主要从原核 生物中分离纯化出来。(2)特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每 一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。(3)结果：形成黏性末端或平末端。 注意：用限制酶切割DNA时，每切开一个切口需要水解两个磷酸二酯键。A、据图可知，a表示 限制酶，b表示DNA连接酶。通常情况下，不同限制酶识别双链DNA分子特定的核苷酸序列， 切割产生不同的末端，有时不同限制酶虽然识别的序列不同，但是可以产生相同的末端，例如， B阳m7和Sau3A7的识别序列及切割位点分别是，AC六_，3PA_<1: 八Un1uJ -J11一5 产生的黏性末端都是5'-GATC-3',A错误；B、DNA连接酶和DNA聚合酶都能连接磷酸二酯键， 但是DNA连接酶是将两个片段之间的磷酸二酯键连接起来，而DNA聚合酶需要依赖DNA作模板 将单个的脱氧核苷酸与片段的3'一OH末端连接形成磷酸二酯键，二者催化的底物不同，B错 误；C、限制酶的识别序列越长，该序列在DNA中出现的概率就越小，C正确：D、E.coliDNA 连接酶和T4DNA连接酶都能够连接黏性末端，D错误。故选C。 24.【答案】D【解析】A、实验过程中需要用外源促性腺激素处理家兔，使家兔超数排卵， 以获得大量处于MⅡ期的卵母细胞，为核移植提供更多的实验材料，A错误； B、PEG(聚乙二醇)是诱导细胞融合的试剂，不能用于激活重构胚，重构胚的激活一般用电 刺激、Ca+载体、乙醇等方法，B错误；C、DMSO组的作用是作为对照，其目的是排除DMSO 溶剂本身对核移植成功率的影响，根据实验中的数据不能得出D$O溶剂本身对核移植成功率 有显著抑制的结论，C错误；D、实验数据显示，CB组的细胞数高于其他实验组和对照组，表 明CB能够提高核移植成功率，D正确。 25.【答案】D【解析】A、突变株无法自主合成色氨酸，若培养基完全不含色氨酸，突变 株初始就无法生长。题干明确“短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”，说明培养基中存在 少量色氨酸，供突变株完成初始增殖：当少量色氨酸耗尽后，仅能利用其他菌株分泌的中间产 物的菌株才能继续生长，A正确：B、图2的接种方式为平板划线法：通过划线将菌株接种在 不同区域，符合微生物分离、接种的划线法特征，可用于观察菌株间的互补生长现象，B正确： C、Ⅲ区菌株全程无法继续生长：说明它的缺陷步骤在最后一步（③），无法将吲哚转化为色 氨酸，C正确：D、Ⅱ区菌株缺陷在②（无法合成吲哚），需要依赖Ⅲ区菌株分泌的吲哚才能生 长。图2中，Ⅱ区与Ⅲ区的相邻端为右上端，左下端与区相邻(I区菌株分泌的是邻氨基苯甲酸， 无法被Ⅱ区菌株利用，因为Ⅱ区缺陷在②，无法将邻氨基苯甲酸转化为吲引哚)。因此区能继续 生长的是右上端，D错误。故选D。 二、非选择题（本题共4个小题，共50分。) 26.（12分，除备注外每空1分) (1) 使土壤中的微生物充分释放到无菌水中 1000 (2) (NH4)2S04 涂布器 (3) a 平板划线 获得单菌落 (4) 先上升后下降 溶磷菌可能通过产生酸性代谢物分解难溶磷(2分) (5)可将其制成微生物菌肥促进植物对磷元素的吸收(2分) 27.【答案】 (1)病毒极少，甚至无病毒 (2)诱导芽的分化（或丛芽的形成） 诱导根的分化（或根的形成） (3)在NAA浓度一定的条件下，随着6-BA浓度的升高，马铃薯芽的增殖倍数增加（或6-BA 能促进芽的增殖) (4)抑制促进 (5)相反 (6)适当添加B9等生长延缓剂，抑制赤霉素合成，从而控制马铃薯植株高度，使其更适应 狭小的太空舱环境。（符合优化空间利用合理即可） 【详解】(1)植物顶端分生区附近，如茎尖，病毒极少，甚至无病毒。 (2)细胞分裂素/生长素比例高，利于芽的分化：细胞分裂素/生长素比例低，利于根的分 化；细胞分裂素/生长素比例适中，只分裂不分化（形成愈伤组织）。 (3)A、B、C三组中，NAA浓度固定，只有6-BA浓度在变。随着6-BA增加，增殖倍数变 大。因此，在NAA浓度一定的条件下，适当增加6-BA浓度能促进芽的增殖（或提高增殖倍数）。 (4)对比C组和D组数据，说明在6-BA浓度一定的情况下，适当提高NAA浓度会抑制芽 的增殖，但会促进芽的伸长生长。 (5)赤霉素(GA)的作用是促进茎的伸长生长，B9能抑制赤霉素的合成。所以B9的作 用与赤霉素相反。 (6)太空微重力环境，空间有限，需要植株紧凑、不易倒伏，需要抑制茎的过度伸长。可 以适当提高培养基中生长延缓剂（如B9)的含量，或者降低促进伸长的激素（如赤霉素）的含 量，以控制株高，优化空间利用。 28.【答案】 (1)体细胞分化程度高，全能性表现困难 (2) 卵母 重新表达 (3)清除代谢废物，补充营养物质，维持细胞正常代谢 (4)该mRNA能够使细胞表达组蛋白去甲基化酶Kdm4d,进而促进组蛋白去甲基化，使相 关基因表达，从而提高胚胎的发育率 (5)卵母细胞质中的遗传物质影响性状；环境因素导致表型差异 【详解】(1)体细胞分化程度高，表现全能性困难，而胚胎细胞分化程度低，表现全能性 容易，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。 (2)体细胞核移植需借助去核的卵（母）细胞。卵（母）细胞的细胞质中含有促进核基因 重新表达的物质，能激发细胞核的全能性，使重组细胞能发育成完整的个体。 (3)在体外培养细胞时，细胞会进行新陈代谢，产生一些代谢废物，如二氧化碳等。定期 更换培养液可以清除代谢废物，补充营养物质，维持细胞正常代谢，为细胞提供一个相对稳定 的生存环境，有利于细胞的生长和增殖。 (4)我国科学家将组蛋白去甲基化酶(Kdm4d)的mRNA注入重构胚，注入Kdm4d的 mRNA可表达出Kdm4d,降低组蛋白的甲基化水平，调节相关基因的表达，使其完成细胞分裂 和发育进程，提高了胚胎的发育率。 (5)若获得的克隆动物与核供体动物性状不完全相同，这可能是因为卵母细胞的细胞质中 的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响（或克隆动物有部分遗传物质来自卵母细胞），也可 能是环境会对克隆小猴的性状产生影响。 29.(1)动物细胞融合、动物细胞培养 (2) ①.用灭活的病毒处理 ②.抗原抗体特异性结合 (3) (1.b ②.PD-L1在肿瘤细胞表面高表达，将化疗药物与PD-L1单克隆抗 体结合，能使化疗药物更精准地作用于肿瘤细胞(4)信号物质A的受体 6