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对药物的敏感性实验称为药敏实验。细菌对药物的敏感性实验主要是通过比较来筛选某种细菌的敏感性药物。对合理选用抗菌药物,及时有效控制感染,避免滥用抗生素,防止耐药菌株的出现具有重要的临床意义。下面我给大家示范操作细菌对药物敏感性实验。首先准备好细菌药敏实验所需要的试剂材料,包括氯酯药物、小青霉素瓶、平板营养琼脂培养基、接种环、细菌培养物、记号笔、恒温培养箱。操作方法一药敏纸片的制备制作纸片选用优质滤纸,用打孔器将滤纸打成直径约为6毫米的圆纸片,取原纸片100片,放于清洁干燥的小青霉素空瓶中。121.3摄氏度高压蒸汽灭菌15分钟,60摄氏度烘箱中烘干备用。抗菌药物的稀释抗菌药物稀释最终浓度,青霉素类200单位每毫升,其他抗生素2毫克每毫升,磺胺类药物十毫克每毫升,中草药制剂一克每毫升。中草药煎两次,药液混合后,小火浓缩为一克每毫升药液。禁药,每100片无菌烘干滤纸片加稀释好的药物一毫升。浸泡1到2小时,37摄氏度,烘干2小时,保存备用。如果急用也可用湿药敏片。2、制备平板营养琼脂培养基按照前面给大家介绍的方法制备平板营养琼脂培养基。3、细菌对药物敏感性实验操作。一、用灭菌接种环勾取细菌菌落。均匀地涂在普通营养琼脂培养基表面。2、背面用记号笔对需要贴的药敏纸片做好位置标记。3、用灭菌镊子夹取禁用药物的干燥滤纸片,按标记位置轻轻贴在已接种好细菌的琼脂培养基表面,要一次放好,不得移动。两个纸片之间的距离大于24毫米,与平面边缘距离大于15毫米。4、在37摄氏度温箱内培养18到24小时后取出观察并记录结果。用卡尺或直尺测量抑菌圈直径,根据纸片周围有无抑菌圈及直径大小,按下表标准确定细菌对各种抗生素的敏感度,最后确定细菌对各种抗生素的敏感度。注意事项,一、接种时均匀密集涂布。2、贴片时用无菌镊子轻轻触压药物纸片,使其与培养基充分接触,贴片后不能再更改纸片位置。3、捏取样敏纸片时,一单掉到培养基表面则继续保持其位置,切勿捏起重新放置,以防不同抗生素交叉影响。4、整个贴片过程。
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