首先准备好材料，包括细菌纯培养物、接种环、载玻片、酒精灯、染色缸、染色架、生理盐水、格兰仕碘液、草酸铵、结晶紫染液、95%乙醇石碳酸、复红纱布、吸水纸。操作方法，一、插片再拨片过火。使之类融化后，再用纱布擦干净。2、图片取一滴生盐水于载玻片的中央。接种环在灭菌后，挑取一个菌落，于生理盐水中混匀。均匀涂布成适当大小的薄层。3、干燥，自然风干。天气较冷时，可用酒精灯上方火焰30到40厘米，适当加热干燥。4、固定火焰固定，将干燥好的载玻片、涂面朝上以及背面在酒精灯上来回通过数次，略作加热，以不烫手背为宜。5、在以干燥固定好的图片上滴加适当的草酸铵结晶，止染色1到2分钟。用洗瓶冲洗载玻片上端，将剩余的染色剂冲洗干净。6、加格兰仕碘液，作用1到2分钟。水洗。7、加95%乙醇脱色0.5到1分钟。水洗。8、加石碳酸复红染液复染0点5分钟。水洗。9、吸干，加标签，用吸水纸将载玻片上多余的水分吸干。在这波片一端贴标签，注明培养物名称、日期以及姓名。10、显微镜镜检用显微镜油镜观察细菌的形态、大小、排列方式及染色特性等。染色后，格兰仕阳性菌呈蓝色，格兰是阴性菌呈红色。注意事项，一、操作过程注意无菌操作，接种环使用前后要灭菌。2、细菌图片不能太厚涂成圆形薄片。