假期必刷30 PCR技术-【快乐假期】2025-2026学年高二生物暑假必刷题

三0022. 基因型是XY,当其和该雌鼠XY杂交，由于YY致死，所 4.D[第一次细胞分裂完成后形成的细胞中，DNA双链均是一 以F,中XX:XY:XY=1:1:1,雌性：雄性为2：1，当 条链含有2P,另一条链不含即P,第二次细胞分裂的间期，染色体 F1杂交，雌性产生配子及比例3X:1Y,雄性产生的配子1X 复制后每条染色体上都是一条染色单体含2P,一条染色单体不 :1Y5,随机交配后，3XX:3XY:1XY:1YY(致死)，所 含”P,有丝分裂后期，姐妹染色单体分离，如果含”P的20条子 以雌性：雄性=4：3：如果雄鼠的基因型是XY,当其和该 染色体同时移向细胞的一极，不含2P的20条子染色体同时移 雌鼠XY杂交，F,中XX:XY:XY=1:1:1,雄性：雌 向细胞的另一极，则产生的子细胞中被即P标记的染色体数分 性=2：1，雄性可以产生的配子及比例为1X:2X:1Y,雌 别是20条和0条：如果移向细胞两极的20条子染色体中既有 性产生的配子及比例1X:1Y,随机结合后，1XX:1XY: 含P的，也有不含P的，则形成的子细胞中被2P标记的染色 2XX:2XY:1XY:1YY,雌性：雄性=3：4。如果雄鼠 体数大于0条小于20条。] 的基因型是XX,当其和该雌鼠XY杂交，F中XX:XY 5.C[甲第一个细胞周期结束形成的2个子细胞的每个DNA :XX:XY=1:1:1:1,雌性：雄性=1：1，随机交配，雌 分子都有一条链含有2P,另一条链含有1P。在第二个细胞 性产生的配子3X:1Y,雄性产生的配子2X:1X:1Y,随 周期中，DNA分子又进行了一次半保留复制，则形成的8个 机结合后，6XX:2XY:3XX:1XY:3XY:1YY(致死)， DNA分子中，有4个DNA分子是一条链含有2P,另一条链 雄性：雌性=8：7。故选ABD] 含有引P,另外4个DNA分子都只含1P,甲细胞第二次有丝 假期必刷29 分裂中期带有2P标记的DNA分子数、染色单体数、染色体 数比为1：1：1：A错误；在有丝分裂后期，姐妹染色单体分 1.B[一个细胞周期中DNA分子只进行一次半保留复制，因 开后随机移向两极，因此甲在第2个细胞周期后，有2个或 此甲在第1个细胞周期后，全部细胞均含2P,且每个细胞中 3个或4个细胞含2P,且每个细胞含有2P的染色体数为 的每条染色体都含有”P,即每个细胞中含有2P的染色体数 0~4,B错误；乙细胞进行减数分裂，DNA复制一次，形成的 为4，A错误；第一个细胞周期结束形成的2个子细胞的每 DNA分子的2个染色单体都均带有标记，减数分裂Ⅱ中期 个DNA分子都有一条链含有2P,另一条链含有1P。在第 着丝粒没有断裂，每条染色体的两条姐妹染色单体均带有 二个细胞周期中，DNA分子又进行了一次半保留复制，则形 2P标记，C正确；由于减数分裂过程中DNA分子进行一次 成的8个DNA分子中，有4个DNA分子是一条链含有2P, 半保留复制，所以分别对减数分裂产生的四个精子的DNA 另一条链含有1P,另外4个DNA分子都只含1P,而在有丝 进行密度梯度离心，其结果一致均为中带，D错误。] 分裂后期，姐妹染色单体分开后随机移向两极，因此甲在第 6.ABD[若2个S基因插入到同一条染色体上，该精原细胞 2个细胞周期后，有2个或3个或4个细胞含P,且每个细 进行两次有丝分裂，结合DNA的半保留复制和有丝分裂特 胞含有32P的染色体数为0一4，B正确：减数分裂前的间期 点，第一次有丝分裂产生的两个子细胞均含有2P,经第二次 DNA分子只进行一次半保留复制，因此乙经过减数分裂I 有丝分裂，则可能出现2个子细胞中含2P,2个子细胞中不 后，形成的2个细胞均含P,且每个细胞中的每条染色体都 含2P的情况，A正确：若两个S基因插入到两条非同源染 含有P,在减数分裂Ⅱ前期和中期，有2条染色体含有2P, 色体中，该精原细胞进行两次有丝分裂，结合DNA的半保 在减数分裂Ⅱ后期和末期，有4条染色体含有2P,即每个细 留复制和有丝分裂特点，第一次有丝分裂产生的两个子细胞 胞中含有2P的染色体数为2或4，C错误：乙在减数分裂Ⅱ 均含有”P,经第二次有丝分裂，由于姐蛛染色单体分开后随 后，将形成4个精细胞，每条染色体含有2P,故4个细胞均 机进入两个子细胞，可能出现4个子细胞中均含”P或3个子细 含2P,D错误。] 胞中含2P,1个子细胞中不含P或2个子细胞中含2P、2个子 2.C[据题意分析第一个细胞周期的每条染色体的染色单体 细胞不含P的情况，B正确，C错误；若两个S基因插入到两条 都只有一条链含有BrdU,故呈深蓝色，A正确；第二个细胞 染色体中，则共有4条DNA单链被标记，该精原细胞进行两次 周期的每条染色体复制之后，每条染色体上的两条染色单体 有丝分裂或减数分裂，含2P的染色体共有4条，则4个子细胞 均为一条单体双链都含有BrdU呈浅蓝色，一条单体只有一 中被标记染色体的总条数为4条，若2个S基因插入到同一条 条链含有BrdU呈深蓝色，故着色都不同，B正确：第二个细 染色体上，则4个子细胞中被标记染色体的总条数为2条，D 胞周期结束后，不同细胞中含有的带有双链都含有BdU的 正确。] 染色体和只有一条链含有BrdU的染色体的数目是不确定 的，故第三个细胞周期的细胞中染色单体着色不同的染色体 假期必刷30 比例不能确定，C错误：根尖分生区知胞可以持续进行有丝 1.B[引物是一小段单链DNA或RNA,可与DNA母链通过 分裂，且DNA复制为半保留复制，所以不管经过多少个细 碱基互补配对进行结合，A错误；扩增一个DNA分子至少 胞周期，依旧可以观察到一条链含有BrdU的染色单体，成 需要的引物数目等于新合成的DNA子链数目，B正确：引物 深蓝色，D正确。] 与DNA母链通过碱基互补配对进行结合，两种引物之间不 3.D[在普通培养液中第一次有丝分裂产生子细胞的DNA 能发生碱基互补配对，两引物参与构成子链，不能反复利用， 分子中仅有1条链被标记，故第二次有丝分裂中期时，每条 C错误：DNA聚合酶只能从引物的3′端连接脱氧核苷酸， 染色体的2条姐妹染色单体中仅有1条具有放射性，在有丝 D错误。] 分裂后期时姐妹染色单体分开形成两条子染色体随机移向 2.C[PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变 细胞两极，即第二次有丝分裂产生的子细胞中具有放射性的 性、复性和延伸三步，引物与模板链的结合属于复性过程， 染色体数目不能确定，所以在第三次有丝分裂中期的细胞中 A错误；变性过程的温度一般要高于复性过程，变性的目的 有的染色体仅有1条姐妹染色单体具有放射性，有的染色体 是使DNA解旋成为单链，B错误；题意显示，引物与其模板 无放射性，但二者之和肯定为12。] 链形成的杂合分子的解链温度称为引物的T值，复性过程 93 飞受快乐假朝 90M= 的温度应设置为略低于Tm值，否则会导致解螺旋发生， 扩增所需要的目的基因片段，B正确；转化时需用CaCl2处 C正确：引物的Tm值越接近，引物之间越不容易结合，因为 理大肠杆菌细胞，使其处于能吸收周围DNA分子的生理状 该温度下氢键不容易形成，D错误。 态（感受态），以提高转化效率，C正确；用EcoR I和PuitⅡ 3.D[用PCR方法扩增目的基因时，要有一段已知目的基因 两种限制酶切割质粒会获得一大一小两个片段，且由题干信 的核苷酸序列，以便根据这一序列合成（两种）引物，但不必 息可知，h2基因大小约为0.9kb,能对应3号质粒的一个 知道基因的全部序列，A正确；复性的目的是使两种引物通 条带，故图2中的3号质粒符合上述要求，有可能是含有目 过碱基互补配对与两条DNA单链结合，因此复性温度过高 的基因的重组质粒，D正确。] 可能引起两种引物不能与两条DNA单链结合，进而导致 3.C[泳道2与泳道1相比较，条带2变窄，条带1变宽，说明 PCR反应得不到任何扩增产物，C正确；DNA复制为半保留 O,蛋白与指示探针结合，二者结合的越多，条带1就会越 复制，第四轮循环即DNA复制4次，共形成2=16个DNA 宽，条带2就会越窄，由于无荧光标记的P和突变体(M、 分子，其中含有最初模板链的2个DNA分子含有引物A或 M2、M)会竞争指示探针与O2蛋白结合，从而使条带2变 引物B,其余14个DNA分子均含有引物A和引物B,所以 宽，条带1变窄，且与O2蛋白的结合能力越强，条带1会越 第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段 窄，条带2越宽，条带1越宽说明O。蛋白与指示探针的结合 所占的比例为14/16=7/8，D错误。] 越强，探针与待测物的结合越弱，所以显示条带2说明全部 4,D[利用PCR技术将DNA分子中的A片段进行扩增，当 或部分探针未结合O2蛋白，即说明O,蛋白与P可以结合， 引物与母链通过碱基互补配对结合后，子链延伸的方向总是 AB错误；M,的电泳条带与片段P的电泳条带大体一致，说 从5端到3'端，据此依题意和图示分析可知，A、B、C均错 明了M的突变位点几乎不影响O,蛋白的结合，C正确： 误，D正确。] M2和M的电泳条带不同，说明其与O2蛋白的结合强度不 5.C[在基因工程中，目前获取目的基因的常用方法有从基 同，D错误。] 因文库中获取、PCR技术扩增、利用化学方法人工合成，A 4.D[分析系谱图：1号和2号（或5号和6号）都正常，但他 正确；引物是根据目的基因合成的，一般是一段短的DNA 们的女儿患病，即“无中生有为隐性，隐性遗传看女病，女病 单链，B正确；GC之间形成3个氢键，GC含量高的DNA更 男正非伴性”，说明该病为常染色体隐性遗传病。该家系中 稳定，更难变性，但是对复性过程影响不大，C错误；由于每 1一4号个体中，只有4号个体患病，是隐性纯合子，只含有 扩增1个DNA分子，就有一个荧光分子形成，经次循环后 一种基因（致病基因）。基因检测结果中：编号、b和d均含 共有2"个DNA,跟初始相比，新增2”一1个DNA,所以需要 有条带1和2，均为杂合子，编号c只含有条带2，只含有一 TaqMan荧光探针2”-1个，D正确。] 种基因，是纯合子。图中4号为常染色体隐性遗传病患者， 6.ABD[染料法中“染料能够与DNA双链结合从而发光”， 属于隐性纯合子，对应于表格中的c,A项正确；分析系谱图 探针法中“两种基团分开后产生荧光”，荧光强度和DNA含 可知1、2号都是杂合子，分析表格：对1一4号个体分别进行 量成正相关，A正确；染料法中，染料不与单链DNA链结 基因检测，4号为隐性纯合子，对应编号c,而表格中a、b和 合，只要掺入DNA双链中就可以发光。探针法中，只有探 d均为杂合子，则1、2、3号可以对应其中之一，所以3号也 针结合的片段上发生扩增才能发光，探针法的特异性更强， 为杂合子，则条带2的DNA片段含有该遗传病致病基因， B正确；适当延长引物长度，和引物互补配对的特定DNA序 B项正确：相关基因用A、表示，根据图2可知，3号的基因 列更长，能提高荧光PCR的特异性，降低复性温度，则引物 型为Aa,根据图1可知，8号的基因型及概率为AA(1/3)或 和DNA序列更容易结合，可能发生错误配对，降低荧光 Aa(2/3),因此两者相同的概率为2/3，C项正确：9号的基因 PCR的特异性，C错误；新冠病毒的遗传物质是RNA,染料 型及概率为AA(1/3)或Aa(2/3),他与一个携带者(Aa)结 法和探针法都是检测DNA,检测人体是否感染新冠病毒前 婚，孩子患病的概率为2/3×1/4=1/6，D项错误。] 需要先进行逆转录，以病毒RNA为模板来合成DNA, 5,ACD[对牛胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的滋养层细 D正确。] 胞，A正确：本实验利用PCR技术进行DNA复制，因此需 要设计2对引物，PCR过程一般是预变性→变性复性→延 假期必刷31 伸，B错误；在胚胎移植前需要对受体牛进行同期发情处理， 1.D[DNA在冷酒精中溶解度很低，提取DNA时加入酒精， 以保证胚胎移植入相同的生理环境，C正确；题中利用PCR 是为了让DNA析出，蛋白质等物质溶解，A正确：将提取的 技术同时扩增Y染色体上雄性决定基因(SRY)和常染色体 DNA溶于2mol/L NaCl溶液后，可用二苯胺试剂在沸水条 上的酪蛋白基因(CSN1S1)并进行电泳，雌性个体没有 件进行鉴定，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，B正确；DNA SRY,只有一条条带，雄性有两条条带，因此根据结果可以确 带负电，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所 定A为CSN1S1,1、2、4是雌性，3、5是雄性，D正确。] 带电荷相反的电极移动的原理，C正确；因为质粒的本质是 6.ABC[肾上腺一脑白质营养不良(ALD)是伴X染色体隐 环状的DNA,限制酶I和Ⅱ处理后电泳只有一条条带，可能 性遗传病（致病基因用a表示），女性杂合子的基因型为 是该质粒上有一个切割位点，也可能没有切割位点， XX,正常女性细胞核内两条X染色体中的一条会随机失 D错误。] 活，浓缩形成染色较深的巴氏小体，所以杂合子患ALD的原 2.A[目的基因应该导入启动子和终止子之间，图1中启动 因很可能是X这条染色体失活，其上基因无法正常表达， 子和终止子之间有三种限制酶切点，但是由于KpI在质 X”表达后表现为患病，A正确：据图示分析可知，Ⅱ一3个 粒上存在不止一个酶切点（两个），所以应该选择EcoR I和 体的基因型是XX,据题可知其父亲I一2基因型为XY, PutⅡ两种不同的限制酶的识别序列，A错误；PCR技术扩 故其X4来自父亲，X来自母亲，但含X的Ⅱ一3表现为患 增ph2基因，需要一段已知的核苷酸序列作为引物，特异性 病，故推测其患ALD的原因可能是来自父方的X染色体失 94三022 5.用2P标记马蛔虫(2N=4)甲、乙两个精原 细胞的核DNA双链，接着将细胞置于不 含32P的培养液中培养，在特定的条件下甲 细胞连续进行两次有丝分裂、乙细胞进行减 数分裂。下列叙述正确的是 () A.甲细胞第二次有丝分裂中期带有32P标 记的DNA分子数、染色单体数、染色体 数比为2：2：1 B.甲的4个子细胞中有50%含32P,且每个 细胞含32P的染色体数量为0~4条 C.乙细胞减数分裂Ⅱ中期每条染色体的两 条姐妹染色单体均带有2P标记 D.分别对乙的4个子细胞的核DNA进行 密度梯度离心，结果不一致 假期必刷30PCR技 1.下列有关PCR技术中引物的叙述，正确 的是 ( A.引物是一小段DNA分子或双链RNA 分子 B.扩增一个DNA分子至少需要的引物数 目等于新合成的DNA子链数目 C.两种引物之间能够发生碱基互补配对， 两引物分别是子链延伸的起点，并可以 反复利用 D.DNA聚合酶只能从引物的5'端连接脱 氧核苷酸 2.PCR技术的每轮循环可以分为变性、复性、 延伸三步。引物与其模板链形成的杂合分 子的解链温度称为引物的Tm值。下列叙 述正确的是 51 富二生物学觉 6.(不定项)将两条单链均被32P标记的S基因 导入某动物的精原细胞中（该细胞不含32P 标记)，选取染色体中插入2个S基因的精 原细胞，再置于不含32P的培养液中培养，得 到4个子细胞，检测子细胞中的标记情况。 若不考虑互换和染色体变异，则下列叙述正 确的是 ( A.可能出现2个子细胞中含32P,2个子细 胞中不含32P的情况 B.可能出现3个子细胞中含32P,1个子细胞 中不含32P的情况 C.若4个子细胞中均含32P,则精原细胞一 定进行了减数分裂 D.4个子细胞中被标记染色体的总条数最 多为4条，最少为2条 不积跬步，无以至千里。 术 完成日期： 分 A.引物与模板链的结合属于延伸过程 B.变性过程的温度一般要低于复性过程 C.复性过程的温度应设置为略低于Tm值 D.引物的Tm值越接近，引物之间越容易 结合 3.利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细 胞内DNA复制类似（如图所示）。图中引 物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的 基础。下列叙述错误的是 ) "IIIΠ. 变性 第一轮循环 复性 引物·←一引物歌 八延伸 Tmm. Π。 变性 飞曼陕乐慨阴 0M-= A.用PCR方法扩增目的基因时不必知道 A.在基因工程中，目前获取目的基因的常 基因的全部序列 用方法有从基因文库中获取、PCR技术 B.设计引物时需要避免引物之间形成碱基 扩增等 互补配对而造成引物自连 B.引物的化学本质是DNA单链 C.复性温度过高可能导致PCR反应得不到 C.引物中的GC含量比探针中的略高，这有利 任何扩增产物 于保证退火时引物先与模板DNA结合 D.第四轮循环产物中同时含有引物A和引 D.若最初反应体系中只有一个病毒DNA 物B的DNA片段所占的比例为15/16 分子，经n次循环后，需要消耗TaqMan 4.用PCR技术将DNA分子中的A,片段 荧光探针2”一1个 进行扩增，设计了引物I、Ⅱ，其连接部 6.(不定项)荧光PCR法根据化学发光原理可以 位如图所示，X为某限制酶识别序列。 分为染料法和探针法。染料法中特殊染料本 扩增后得到的绝大部分DNA片段是图 身不发光，但是当PCR扩增的时候，染料能够 中的 与DNA双链结合从而发光，如图1所示。探 x 针法中除了引物外另外设置了一个探针，在探 A片段 针的两端分别带上发光基团和淬灭基团，此时 I 皿 mmmm 了 IⅢ 发光基团并不发光，但是当DNA通过引物合 —A 一A1 -A1 A B D 成的时候，探针被酶切降解释放出发光基团和 5.锦鲤疱疹病毒是一种双链DNA病毒。如 淬灭基团，两种基团分开后产生荧光，如图2 图为TaqMan荧光探针技术的原理示意图， 所示。下列说法正确的是 探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬 探针 灭基团吸收；PCR扩增时该探针被Taq酶 到物 0°日0炎光物质 引物 发光基团⑧灭基团 L山月标DNA LLLL山目标DNA 切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分 离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号， 宏 亭、 HHHH心 即每扩增1个DNA分子，就有一个荧光分 图1 图2 子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产 A.两种方法均可用于目标DNA的定量 物形成完全同步。下列有关叙述不正确 分析 的是 ( B.与染料法相比，探针法的特异性更强 TaqMan⑨ C.通过适当延长引物长度和降低复性温度 5正向引物®探针 5 5,模板DNA 3' ®报告荧光基团 可提高荧光PCR的特异性 反向引物 ⑨淬灭荧光基团 ⑨ D.用荧光PCR法检测人体是否感染新冠病 5 的荧光信号 毒前需要先进行逆转录 52