学易金卷：高二生物下学期第三次月考·提升卷（人教版）

**基本信息** 聚焦人教版选择性必修三及必修一前三章，以新情境（如抗菌剂检测、细胞划痕实验）和传统文化（如甘草黄酮生产、云南油糕饵块）为载体，考查学生生命观念与科学思维。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|25题/50分|细胞工程、微生物培养、细胞结构等|结合科技前沿（如基因编辑风险）和文化素材（如传统发酵）设题| |非选择题|5题/50分|单克隆抗体制备、传统发酵、蛋白质降解等|综合考查实验设计（如26题杂交瘤技术）与数据分析（如29题荧光重合率）|

2025-2026学年高二生物下学期第三次月考卷 生物答题卡 姓 名： 准考证号： 贴条形码区 注意事项 1.答题前，考生先将自己的姓名，准考证号填写清楚，并认真核准 考生禁填：缺考标记 ▣ 条形码上的姓名、准考证号，在规定位置贴好条形码。 违纪标记 □ 2.选择题必须用2B铅笔填涂；非选择题必须用0.5mm黑色签字笔 以上标志由监考人员用2B铅笔填涂 答题，不得用铅笔或圆珠笔答题；字体工整、笔迹清晰。 3.请按题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出区域书写的答案 选择题填涂样例： 无效：在草稿纸、试题卷上答题无效。 正确填涂■ 4. 保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破。 错误填涂×1I11/1 一、选择题：本题共25个小题，每小题2分，共50分。 1[AIIB]ICIID] 6.[A][BIIC]ID] 11.A1[B1[C1[DJ 16.[A][BIICIID] 2.1AIIBIICIIDI 7.1AI[BIICJIDI 12.[A][BIICIID] 17.[A][BIIC]ID] 3.[AIIBIICI[DI 8[A][BIIC]ID] 13.[A][BIICI[D] 18[A]IBIICIID] 4.JAIIBIICIDI 9.[A][BI[CIID] 14.1AI[BIICI[D] 19.[A][BIICIID] 5.IAIIBIICIID] 10.[AIIBIIC]ID] 15.[A]IBIICIID] 20.IAJIBIICIID] 21.1AIIBIICIID] 22.1AIIB]ICIID] 23.[AI[B]ICI[D] 241AIIBIICIID] 25.1AI[BIICIIDI 二、 非选择题。 (本分共5小题，共计50分) 26. (10分，每空1分) (1) (2) (3) (4) (5) 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效！ 27. (9分，除标注外每空1分) (1) (2) (3) (2分) (4) 28. (13分，每空1分) (1) (2) (3) (4) (5) (6) 29. (8分，除标注外每空1分) (1) (2分) (2) (2分) (3) 30. (10分，除标注外每空1分) (1) (2) (3) (2分) (4) (2分) (5) 2025-2026学年高二生物下学期第三次月考卷 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．测试范围：人教版选择性必修三及必修一前三章。 5．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题：本题共25个小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1．（新情境）为高效检测抗菌剂的抗菌效果，研究人员构建了能够表达外源荧光素酶的重组菌Q，将其接种到有足量荧光素的液体培养基中，一段时间后添加待测抗菌剂，定时检测培养液的荧光强度。下列有关该实验的叙述，正确的是（　　） A．培养基中只需要添加水、碳源、氮源和无机盐 B．实验过程中所用的培养基是一种选择培养基 C．在重组菌Q胞内的荧光素酶可催化荧光素水解 D．培养液的荧光强度变化可作为抗菌效果的判断依据 2．（传统文化）甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。有同学提出利用现代生物技术生产黄酮的两条技术路径，如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．获得黄酮的两条途径都利用了植物细胞的全能性 B．过程①②的培养条件和培养基中激素比例均不同，但都需要添加蔗糖等营养物质 C．路径二添加果胶酶的目的是获得原生质体，使用纤维素酶也可以达成该目的 D．黄酮属于植物体产生的次生代谢物，在整个生命过程中一直都在生成 3．（新情境）细胞划痕实验可用于研究癌细胞的迁移能力。在癌细胞长成单层状态时，人为制造一个空白区域（划痕），然后观察、测量划痕边缘的细胞进入空白区域的速率，以此评估细胞的迁移能力。为探究姜黄素对癌细胞迁移的影响，研究人员进行了划痕实验，结果如图。下列叙述错误的是（　　） A．并非所有动物细胞都适合划痕实验 B．姜黄素可通过提高癌细胞之间的黏着性来降低其迁移能力 C．实验培养用具和试剂都要进行高压蒸汽灭菌处理，并在无菌环境下操作 D．细胞贴壁生长时发生的接触抑制现象体现了细胞膜进行细胞间信息交流的功能 4．（新考法）19世纪30年代，科学家曾在肺结核、天花和麻疹等患者的病理组织中观察到多核细胞。下列有关解释合理的是（　　） A．体内的病毒抑制了细胞内纺锤体的形成 B．患者体内的病毒能诱导多个体细胞融合 C．病毒破坏了细胞结构而细胞核保持完整 D．病毒含有的核酸整合到细胞后发挥作用 5．（传统文化）油糕饵块是云南昭通地区的传统早点，主要由油糕和饵块两部分构成。油糕以稀米粉包裹土豆泥用菜籽油炸制而成，饵块则选用优质大米经加工烘烤后涂抹辣椒酱、花生酱等配料，两者结合形成酥脆与软糯兼具的口感。下列相关叙述正确的是（    ） A．花生中脂肪含量较高，可导致发胖，日常饮食中应避免摄入含脂肪类食物 B．饵块中的淀粉能与斐林试剂反应生成砖红色沉淀 C．饱和脂肪酸构成的菜籽油，室温时呈液态 D．就蛋白质而言，饵块烘烤过程不会改变蛋白质中肽键的数量 6．（新情境）去垢剂是一端亲水、一端疏水的两性小分子，可与膜蛋白疏水部分结合并使其与膜分离。下列有关叙述错误的是（    ） A．胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分，在人体中还参与血液中磷的运输 B．磷脂与去垢剂的分子结构特点类似，也是一端亲水、一端疏水的两性小分子 C．细胞膜上蛋白质中的肽链的折叠错误可能导致人类疾病，如囊性纤维化 D．构成膜的磷脂分子可以侧向自由移动，膜中的蛋白质大多也能运动 7．（新考法）细胞骨架是由微管、微丝和中间纤维等蛋白质纤维组成的网架结构。科研人员用细胞松弛素（破坏微丝）和秋水仙素（破坏微管）分别处理动物细胞和植物细胞，观察细胞形态的变化，结果如下表。下列分析正确的是（　　） 处理 动物细胞形态 植物细胞形态 对照组 正常 正常 细胞松弛素处理 形态异常，表面起泡 基本正常 秋水仙素处理 形态异常，变圆 基本正常 A．动物细胞的形态维持主要依赖微丝，植物细胞的形态维持主要依赖微管 B．细胞松弛素能特异性破坏动物细胞的细胞骨架，对植物细胞无影响 C．植物细胞的形态在药物处理后基本正常，说明其细胞骨架的功能不如动物细胞的重要 D．动物细胞的形态易受药物影响，与其缺乏细胞壁的保护作用有关 8．下列高中生物学实验的部分操作，错误的是（　　） 选项 实验名称 实验操作 A 酵母菌纯培养 每次划线前接种环都需要灼烧 B 探究抗生素对细菌的选择作用 培养基平板涂菌后，放入含抗生素的纸片 C DNA片段的扩增及电泳鉴定 接通电源后，看到指示剂前沿迁移至凝胶边缘时，停止电泳 D DNA的粗提取与鉴定 洋葱研磨液的上清液加入冷酒精后，经离心从上清液中提取DNA A．A B．B C．C D．D 9．在细胞质中有许多不停忙碌的“部门”，它们统称为细胞器。下列有关细胞器之间分工、合作的说法正确的是（　　） A．线粒体是细胞中进行有氧呼吸的唯一细胞器，没有线粒体的细胞不能进行有氧呼吸 B．叶绿体内膜上分布着光合色素和酶，可将光能转化为ATP和NADPH中活跃的化学能 C．在胰岛素的形成过程中，参与的具膜细胞器有核糖体、内质网、高尔基体和线粒体 D．在细胞吞噬细菌的过程中，细胞膜的结构和成分通过囊泡运输的方式转移至溶酶体 10．质粒P含有2个EcoRI、1个SacI和1个BamHI的限制酶切割位点。已知BamHI位点位于2个EcoRI位点的正中间，用上述3种酶切割该质粒，酶切产物的凝胶电泳结果如图，其中泳道①条带是未酶切的质粒P，泳道②③④条带为3种单酶切产物，泳道⑤⑥⑦条带为双酶切产物。下列叙述正确的是（　　） A．DNA分子的迁移方向是从电源正极到负极 B．可确认泳道②③条带分别是SacI和EcoRI的单酶切产物 C．泳道⑤条带是SacI和EcoRI的双酶切产物 D．泳道①②说明质粒的碱基在酶切后部分丢失 11．下列叙述中与染色体变异无关的是（　　） A．通过连续自交获得纯合品系的水稻 B．通过产前诊断预防21三体综合征 C．通过多倍体育种获得无子西瓜 D．通过植物体细胞杂交获得白菜—甘蓝 12．科研人员在富营养化水体中分离到一种真核单细胞生物——眼虫，其细胞质中存在一种含单层膜的“储蓄泡”，能摄入乳酸、乙醇等，并在泡内将这些物质转化为葡萄糖。下列叙述正确的是（    ） A．眼虫的遗传物质是RNA，其基本单位是核糖核苷酸 B．眼虫具有核膜结构，核膜的主要成分是脂质和蛋白质 C．眼虫具有细胞骨架，其主要成分是纤维素和果胶 D．眼虫的“储蓄泡”内含有多种酶，其合成与核糖体无关 13．人细胞内的锌可与蛋白质中的半胱氨酸()和组氨酸()结合，构成一种特定的指状突起结构，即锌指蛋白，该蛋白缺乏或功能异常会扰乱基因调控。下列说法正确的是（　　） A．铁、锌、镁等微量元素参与组成细胞内的重要化合物 B．人体细胞内参与组成锌指蛋白的元素至少有6种 C．锌指蛋白中的锌主要以游离态存在于氨基酸的侧链基团中 D．若锌指蛋白肽链折叠错误，不会影响该蛋白质的功能 14．微管和微丝是细胞骨架的关键结构之一，下列相关叙述正确的是（　　） A．细胞骨架在光学显微镜下清晰可见 B．微管和微丝在核糖体上合成 C．微管结构稳定且不易变化，这有利于支撑并维持细胞形态 D．在洋葱根尖分生区细胞中可以发生微管蛋白组装成中心粒的过程 15．某科学家通过基因工程技术，将细胞核内某种DNA结合蛋白的信号序列，连接到原本只在细胞质基质中发挥作用的糖酵解酶上，并在真核细胞中表达出序列正常的融合蛋白。下列推测最合理的是（    ） A．该融合蛋白会在游离核糖体上合成，最终仍留在细胞质基质 B．该融合蛋白会进入内质网和高尔基体进行加工后分泌到细胞外 C．该融合蛋白合成后会被定向转运进入细胞核 D．该融合蛋白因序列异常无法正确折叠，最终被溶酶体降解 16．下列关于生物工程技术的叙述，错误的是（　　） A．获取马铃薯脱毒苗常选取茎尖进行组织培养 B．为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射性激素以促进超数排卵 C．单克隆抗体制备过程中需用特定培养基筛选得到杂交瘤细胞 D．生产转基因农作物时，需防止转基因花粉的传播，避免基因污染 17．基因编辑技术可通过DNA片段的插入、缺失或替换来改变生物体的遗传信息和表型特征，在持续引发研究热潮的同时，其潜在的风险也引起了人们对生物安全的关注，下列叙述正确的是（　　） A．基因的碱基序列改变，一定会导致表达的蛋白质失去活性 B．基因编辑技术不涉及磷酸二酯键的断裂与形成 C．基因编辑技术改造的微生物可能具有超强的感染性和致病性 D．纠正单个碱基突变的基因编辑技术可用于治疗21三体综合征 18．为了在实验室条件下更加快速高效提取真菌DNA，某团队研究出了一种利用NaOH裂解细胞并快速提取DNA的方法，主要操作步骤如下图。下列叙述错误的是（    ） A．将真菌经液氮冷冻后进行研磨，可使真菌菌体更易破碎 B．利用NaOH溶液提取DNA，可省去低温下冷藏静置和用冷却酒精析出DNA等步骤 C．NaOH溶液提取DNA的时间不宜过长且不能剧烈振荡，以免造成DNA损伤断裂 D．缓冲液除了中和碱性物质之外，还具有维持DNA酶活性、促进微生物生长等功能 19．酵母干重的50%左右都是蛋白质，含有9种人体必需的氨基酸。生产酵母蛋白的酵母菌，经挑选、培育，蛋白质含量可高达80%。而酿酒过程中筛选出的优良菌种具有高效的产酒精能力与高酒精耐受性。下列关于酵母菌的说法，正确的是（    ） A．由于酵母菌蛋白质含量高，其菌体可用于单细胞蛋白的生产 B．进行酿酒酵母扩大培养的过程中，需要先有氧后无氧的环境 C．对酵母菌进行显微镜直接计数时，需选用细菌计数板 D．由酿制葡萄酒转为酿制果醋的过程中，需要通入无菌空气并降低温度 20．蛋白质是目前已知的结构最复杂、功能最多样的分子。下列关于蛋白质功能的叙述，错误的是（    ） A．蛋白质与某种核酸结合形成细胞核的重要结构之一 B．含Fe的氨基酸脱水缩合形成血红蛋白参与O2的运输 C．由蛋白质纤维构成的细胞骨架可以维持细胞形态 D．细胞膜的外表面有糖类分子，可与蛋白质结合成糖蛋白 21．细胞中含有多种简单或复杂的化合物分子。下列叙述错误的是（　　） A．各种RNA分子中储存着遗传信息 B．氨基酸的中央碳原子通常连接着氨基和羧基 C．淀粉、糖原和纤维素的基本单位都是葡萄糖 D．脂肪有储能作用，在动物体内还能起防震作用 22．某研究小组将合成的必需基因导入去除DNA的支原体中，构建出具有最小基因组且能正常生长和分裂的细胞。下列关于该细胞的叙述，错误的是（    ） A．含有细胞壁，能支持和保护细胞 B．含有核糖体，能合成所需蛋白质 C．没有染色体，不能进行有丝分裂 D．没有线粒体，但能合成所需ATP 23．利用谷氨酸棒状杆菌（好氧菌）发酵可以得到谷氨酸，进一步处理就能制成谷氨酸钠（味精）。下列关于谷氨酸的发酵生产，叙述错误的是（    ） A．发酵罐内发酵是发酵过程的中心环节，这一阶段需严格灭菌 B．发酵过程中维持中性或弱碱性的pH有利于提高谷氨酸的产量 C．发酵后期溶解氧急剧上升可能与菌种活力下降或大量死亡有关 D．发酵结束后可采取提取、分离和纯化等措施以获得谷氨酸 24．关于植物细胞工程的应用，下列相关叙述错误的是（    ） A．微型繁殖技术可高效、快速实现种苗大量繁殖并保持优良品种的遗传特性 B．花粉离体培养得到的单倍体幼苗不能用于体细胞诱变育种和研究遗传突变 C．经化学或物理诱变处理愈伤组织可得到有用的突变体进而培育成新品种 D．工厂化生产紫草宁的过程中不需要有再分化形成完整紫草植株的过程 25．下列生物工程技术中，不需要用到胚胎移植技术的是（　　） A．利用成纤维细胞等培养出可供移植的皮肤 B．利用乳腺生物反应器生产珍贵的医用蛋白 C．利用本地黄牛快速大量繁殖引进的良种奶牛 D．利用试管婴儿技术帮助有生育困难的夫妇 第Ⅱ卷 二、非选择题（5小题，共50分） 26．（10分，每空1分）请回答细胞工程的相关问题： I.利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，用以制造单克隆抗体，单克隆抗体在医药领域占有重要的地位，图1为单克隆抗体的制备过程。 (1)A抗原注入小鼠后，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是________。 (2)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是________，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得________，再将其注入小鼠体内培养，从小鼠腹水中提取到大量的抗A抗原的单克隆抗体。 (3)抗体药物偶联物（ADC）通常是由单克隆抗体和细胞毒性药物共价连接形成，能够实现对癌细胞的精确高效清除而不伤害正常细胞，成为抗癌药物研发的热点之一。图2为ADC杀伤癌细胞过程的示意图，据图分析，ADC发挥作用的过程中，抗体的作用是_______，药物使癌细胞死亡的机理是________。 Ⅱ.百岁兰是一种独特的裸子植物，依据现有的植物学分类没有近亲，它被誉为植物界的“活化石”，已被列入《濒危物种公约》。现在可通过一定的方法实现百岁兰的快速与稳定繁殖。 (4)________技术成为植物种质资源保存和快速繁殖的重要工具，该技术依据的生物学原理是________。 (5)以消毒的外植体为材料获得愈伤组织的过程称为________；该过程中通常需要向MS培养基中加入一定浓度的________这两类植物激素，并通过调整其比例来调控培育过程；同时愈伤组织的形成和生长还受到外界环境因素的影响。图3、图4为两种处理因素对愈伤组织生长状况的影响曲线，实验结果表明：________。 27．（9分，除标注外每空1分）中国人的五味，“酸甜苦辣咸”，“酸”置于五味之首，因为酸是人类烹饪最古老的调味。（一）《诗经》中有“中田有庐，疆场有瓜，是剥是菹，献之皇祖”的诗句。“剥”和“菹”是腌渍加工的意思。古方中腌渍蔬菜的方法记录如下：“收菜时，即择取好者，作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内瓮中，酵数日得酸汤。”回答下列问题： (1)制作菹所利用的微生物主要是指__________，代谢类型为__________，酸汤发酵初期，亚硝酸盐的含量逐渐增加，亚硝酸盐在适宜的pH、温度和一定的微生物作用等特定条件下，才会转变成致癌物__________。 (2)现代大规模生产时，需先获得优质的菌种，若要从陈汤中分离、纯化得到单一菌落，需在液体培养基中加入______（填物质名称）实现菌种的分离；再将获得的菌种在适宜的液体培养基中大量培养，采用稀释涂布平板法计数培养液中的活菌数，每隔24h统计一次菌落数目，应选取__________________时的记录作为结果，这样可以防止_________。 （二）《尚书》中提到“若作酒醴，尔惟曲蘖；若作和羹，尔惟盐梅”这一传统酿醋工艺，酿制的米醋不但含有丰富的营养成分，还有增强食欲、保护肠胃等功能。回答下列问题： (3)根据醋酸菌的代谢特点，米醋酿制过程需控制适宜的环境条件，如______（答两点，2分）。 (4)在米醋的酿制的早期，醋酸菌与其他微生物的种间关系是______。在米醋的酿制的中后期，一般不会有其他杂菌干扰，其原因是___________。 28．（13分，每空1分）根据题意，回答下列问题： Ⅰ．科学家从牛的胰腺中分离出由76个氨基酸组成的一条多肽链（Ub）。研究发现：Ub在细胞自我检测和去除某些“不适用蛋白质”（即：靶蛋白）的机制中扮演着重要角色。如果某个蛋白被贴上Ub这个标签，就会被运送到细胞内的蛋白酶体处被水解掉，过程如图所示。 请回答下列问题： (1)Ub含有________个肽键，其合成场所是________。 (2)①过程说明Ub的作用是识别________并与之结合；由图可知细胞中去除“不适用蛋白质”的过程需要________、________和Ub、蛋白酶体等条件。 (3)被降解的蛋白质产生的氨基酸可以用于________或________。 Ⅱ．2008年9月“三鹿”婴幼儿奶粉受污染事件震惊全国，部分食用了受污染奶粉的婴幼儿产生肾结石病症。究其原因是因为在奶粉中掺入非食用的三聚氰胺（C、N、H）冒充蛋白质。三聚氰胺是“含氮之王”，在小分子有机化合物中，它含有的最高，达到66.7%，而一般蛋白质中含量为16%。400奶粉中加入了1三聚氰胺，相当于增加4．1蛋白质的含氮量，这对人体及婴幼儿非常有害。某研究性学习小组想用实验方法鉴定市场某奶粉的各种成分是否符合标准。 (4)如果该奶粉中含有葡萄糖，则用________试剂检验，会出现________沉淀。 (5)如果该奶粉中含有脂肪，则用________检验，会出现________色颗粒。 (6)如果该奶粉中含有蛋白质，则用试剂________检验，会出现________色反应。 29．（8分，除标注外每空1分）脂肪是细胞内良好的储能物质，当生命活动需要时可以分解利用；脂滴是存储和转运脂肪的细胞器。回答下列问题： (1)脂肪是由脂肪酸和______发生反应而形成的酯，除了供能，其在生物体内的作用还有__________（答出2点）（2分）。 (2)糖类代谢异常时，脂肪可分解为脂肪酸为机体供能。为研究脂肪酸供能的转运路径，科研人员让小鼠成纤维细胞摄入红色荧光标记的外源脂肪酸后，分别置于细胞培养液和无机盐缓冲液中培养，用绿色荧光、蓝色荧光分别标记细胞的脂滴和线粒体，分析荧光重合率，结果如表所示。 处理时间 重合率/% 培养液类型 0h 24h 红绿荧光重合 红蓝荧光重合 红绿荧光重合 红蓝荧光重合 细胞培养液 97 3 97 3 无机盐缓冲液 97 3 38 62 ①在上述实验中，细胞供能充足的条件下，脂肪一般不会参与供能，据表分析，依据是______。（2分） ②无机盐缓冲液中培养24h后，红蓝荧光重合率显著升高，说明________。产生这种变化的生理意义是______。 (3)在营养匮乏状态下，有些细胞的细胞质基质中会出现游离脂肪酸的过量堆积，导致脂毒性的发生。细胞出现脂毒性的原因可能是______（多选）。 A．线粒体膜上的脂肪酸转运蛋白功能缺陷 B．内质网合成脂滴的能力增强 C．细胞膜上脂肪酸摄入通道关闭 D．脂肪酸无法及时转运到脂滴 30．（10分，除标注外每空1分）磷脂酸（PA）是调节植物生长发育和逆境响应的重要信使物质。为了解植物细胞中PA的动态变化，研究人员利用重叠延伸PCR（重叠链相互搭桥、互为模板而延伸，最终将不同来源的DNA片段拼接起来）将高度专一的PA结合蛋白（PABD）基因与绿色荧光蛋白（GFP）基因融合，构建有效监测细胞PA变化的荧光探针，并测定拟南芥细胞内PA含量。利用重叠延伸PCR获取融合基因的基本过程如图1所示，所用的Ti质粒如图2所示，请回答下列问题： 注：Nco Ⅰ、BamH Ⅰ、Sac Ⅰ、Sal Ⅰ为限制酶酶切位点。启动子1、2属于真核细胞表达系统，Sm+是链霉素抗性基因，Amp+是氨苄青霉素抗性基因，GUS基因编码的酶能将无色物质X-Gluc分解，使植物细胞呈蓝色。 (1)PCR反应中的每次循环一般分为变性、______、延伸三步。 (2)图1中的PCR1和PCR2不能置于一个PCR体系中同时进行，原因是______。为了重叠链顺利延伸，杂交的两条链分别为______（从字母“a”“b”“c”“d”中选）。获得融合基因后，用引物1和4继续进行PCR大量扩增该序列。 (3)根据图2中Ti质粒的结构及后续筛选的需要分析，在设计引物1和4时需分别加入限制酶___（2分）的识别序列。经过相应酶切处理后，将融合基因与该质粒在DNA连接酶作用下形成重组质粒。为了提高重组质粒导入农杆菌的效率，一般要用______处理农杆菌。 (4)用农杆菌侵染拟南芥后，为了将被侵染的拟南芥细胞进行脱菌处理以及筛选含有融合基因的拟南芥细胞，培养基上需要添加______（2分）。然后，通过______技术可培育出完整的转基因拟南芥植株。 (5)通过观测转基因拟南芥根尖细胞中______，了解PA的分布和含量。 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年高二生物下学期第三次月考卷 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．测试范围：人教版选择性必修三及必修一前三章。 5．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题：本题共25个小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1．（新情境）为高效检测抗菌剂的抗菌效果，研究人员构建了能够表达外源荧光素酶的重组菌Q，将其接种到有足量荧光素的液体培养基中，一段时间后添加待测抗菌剂，定时检测培养液的荧光强度。下列有关该实验的叙述，正确的是（　　） A．培养基中只需要添加水、碳源、氮源和无机盐 B．实验过程中所用的培养基是一种选择培养基 C．在重组菌Q胞内的荧光素酶可催化荧光素水解 D．培养液的荧光强度变化可作为抗菌效果的判断依据 【答案】D 【知识点】培养基的类型及其应用、培养基的成分及其功能 【详解】A、微生物培养基的基本成分除水、碳源、氮源、无机盐外，通常还需要添加生长因子等特殊营养物质，且本实验培养基还需额外添加荧光素，A错误； B、重组菌Q已构建成功，实验目的是检测抗菌效果，所用培养基含足量荧光素，属于鉴定培养基，B错误； C、荧光素位于胞外，荧光素酶在胞内，两者无法直接接触反应。只有当菌体裂解后酶释放至胞外，才能催化荧光素与氧气发生化学反应，C错误； D、抗菌剂有效时，菌体死亡裂解，荧光素酶释放催化荧光素，荧光强度显著增加；无效时，菌体存活，酶滞留胞内，荧光强度变化小。因此，荧光强度变化可直接反映抗菌效果，D正确。 2．（传统文化）甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。有同学提出利用现代生物技术生产黄酮的两条技术路径，如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．获得黄酮的两条途径都利用了植物细胞的全能性 B．过程①②的培养条件和培养基中激素比例均不同，但都需要添加蔗糖等营养物质 C．路径二添加果胶酶的目的是获得原生质体，使用纤维素酶也可以达成该目的 D．黄酮属于植物体产生的次生代谢物，在整个生命过程中一直都在生成 【答案】B 【知识点】细胞的全能性、植物细胞工程的实际应用、植物组织的培养及基本过程 【详解】A、植物细胞全能性是指已分化细胞发育为完整个体或分化为各种细胞的潜能，路径二仅培养到细胞阶段，没有利用植物细胞全能性，A错误； B、①是脱分化，②是再分化，二者的培养条件（如光照要求）、培养基中生长素和细胞分裂素的比例均不同，植物组织培养的两个过程都需要添加蔗糖，蔗糖可提供碳源、维持培养基渗透压，B正确； C、路径二添加果胶酶的目的是分解细胞间的果胶，使愈伤组织细胞分散，便于悬浮培养，C错误； D、黄酮是植物次生代谢产物，次生代谢产物不是植物生长发育必需的，一般在植物生长到一定阶段才合成，并非整个生命过程一直生成，D错误。 3．（新情境）细胞划痕实验可用于研究癌细胞的迁移能力。在癌细胞长成单层状态时，人为制造一个空白区域（划痕），然后观察、测量划痕边缘的细胞进入空白区域的速率，以此评估细胞的迁移能力。为探究姜黄素对癌细胞迁移的影响，研究人员进行了划痕实验，结果如图。下列叙述错误的是（　　） A．并非所有动物细胞都适合划痕实验 B．姜黄素可通过提高癌细胞之间的黏着性来降低其迁移能力 C．实验培养用具和试剂都要进行高压蒸汽灭菌处理，并在无菌环境下操作 D．细胞贴壁生长时发生的接触抑制现象体现了细胞膜进行细胞间信息交流的功能 【答案】C 【知识点】细胞膜的功能、无菌技术、动物细胞培养技术 【详解】A、划痕实验的前提是细胞能贴壁生长、形成致密的单层细胞。悬浮生长的细胞（如血液中的淋巴细胞）无法形成单层，不适合该实验；迁移能力极弱、无法向划痕区域移动的细胞也不适用，因此并非所有动物细胞都适合，A正确； B、从题图曲线可知，姜黄素处理组的细胞迁移速率低于对照组，说明姜黄素降低了细胞的迁移能力，因此姜黄素可通过提高癌细胞之间的黏着性来降低其迁移能力，B正确； C、动物细胞培养的核心要求是无菌、无毒的环境，所有培养用具要严格灭菌，但试剂通常采用过滤除菌，而非灭菌，否则会破坏营养成分或活性因子，C错误； D、接触抑制是正常细胞的重要特征：当细胞贴壁生长到相互接触时，会通过细胞膜上的受体识别相邻细胞的信号分子，停止分裂增殖，避免过度堆叠。该过程依赖细胞间的信息交流，体现了细胞膜的信息传递功能，D正确。 4．（新考法）19世纪30年代，科学家曾在肺结核、天花和麻疹等患者的病理组织中观察到多核细胞。下列有关解释合理的是（　　） A．体内的病毒抑制了细胞内纺锤体的形成 B．患者体内的病毒能诱导多个体细胞融合 C．病毒破坏了细胞结构而细胞核保持完整 D．病毒含有的核酸整合到细胞后发挥作用 【答案】B 【知识点】细胞是基本的生命系统、病毒结构、分类和增殖 【详解】A、抑制纺锤体形成会导致有丝分裂过程中姐妹染色单体分开后无法移向细胞两极，细胞不能完成分裂，最终形成染色体数目加倍的单核细胞，不会产生多核细胞，A不符合题意； B、部分病毒可作为诱导因子促进多个体细胞发生融合，融合后的细胞会含有多个来自原来不同细胞的细胞核，可形成多核细胞，B符合题意； C、若病毒破坏细胞结构，细胞会发生裂解、解体，无法维持完整的细胞形态，不能形成具有多个细胞核的完整细胞，C不符合题意； D、病毒核酸整合到宿主细胞的基因组中，通常会改变宿主细胞的基因表达，如可能引发细胞癌变等，但不会直接导致细胞内出现多个细胞核，D不符合题意。 5．（传统文化）油糕饵块是云南昭通地区的传统早点，主要由油糕和饵块两部分构成。油糕以稀米粉包裹土豆泥用菜籽油炸制而成，饵块则选用优质大米经加工烘烤后涂抹辣椒酱、花生酱等配料，两者结合形成酥脆与软糯兼具的口感。下列相关叙述正确的是（    ） A．花生中脂肪含量较高，可导致发胖，日常饮食中应避免摄入含脂肪类食物 B．饵块中的淀粉能与斐林试剂反应生成砖红色沉淀 C．饱和脂肪酸构成的菜籽油，室温时呈液态 D．就蛋白质而言，饵块烘烤过程不会改变蛋白质中肽键的数量 【答案】D 【知识点】脂质的种类及功能、蛋白质的变性、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 【详解】A、脂肪是人体重要的营养物质，日常饮食需适量摄入脂肪，A错误； B、斐林试剂仅可与还原糖在水浴加热条件下反应生成砖红色沉淀，淀粉属于非还原糖，无法与斐林试剂发生该颜色反应，B错误； C、菜籽油属于植物油脂，大多由不饱和脂肪酸构成，室温下呈液态，C错误； D、饵块烘烤过程中，蛋白质发生高温变性，仅破坏蛋白质的空间结构，不会断裂肽键，肽键数量不变，D正确。 6．（新情境）去垢剂是一端亲水、一端疏水的两性小分子，可与膜蛋白疏水部分结合并使其与膜分离。下列有关叙述错误的是（    ） A．胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分，在人体中还参与血液中磷的运输 B．磷脂与去垢剂的分子结构特点类似，也是一端亲水、一端疏水的两性小分子 C．细胞膜上蛋白质中的肽链的折叠错误可能导致人类疾病，如囊性纤维化 D．构成膜的磷脂分子可以侧向自由移动，膜中的蛋白质大多也能运动 【答案】A 【知识点】细胞膜的成分、生物膜的流动镶嵌模型、脂质的种类及功能、生物膜的结构特点 【详解】A、胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分，在人体中参与的是血液中脂质的运输，而非血液中磷的运输，A错误； B、磷脂分子具有亲水的头部和疏水的尾部，属于一端亲水、一端疏水的两性小分子，和题干中去垢剂的结构特点类似，B正确； C、囊性纤维化的致病机理是细胞膜上转运氯离子的CFTR蛋白肽链折叠错误，导致其结构和功能异常，属于膜蛋白折叠错误引发的人类疾病，C正确； D、细胞膜的结构特点是具有一定的流动性，构成膜的磷脂分子可以侧向自由移动，膜中的大多数蛋白质也可以运动，D正确。 7．（新考法）细胞骨架是由微管、微丝和中间纤维等蛋白质纤维组成的网架结构。科研人员用细胞松弛素（破坏微丝）和秋水仙素（破坏微管）分别处理动物细胞和植物细胞，观察细胞形态的变化，结果如下表。下列分析正确的是（　　） 处理 动物细胞形态 植物细胞形态 对照组 正常 正常 细胞松弛素处理 形态异常，表面起泡 基本正常 秋水仙素处理 形态异常，变圆 基本正常 A．动物细胞的形态维持主要依赖微丝，植物细胞的形态维持主要依赖微管 B．细胞松弛素能特异性破坏动物细胞的细胞骨架，对植物细胞无影响 C．植物细胞的形态在药物处理后基本正常，说明其细胞骨架的功能不如动物细胞的重要 D．动物细胞的形态易受药物影响，与其缺乏细胞壁的保护作用有关 【答案】D 【知识点】细胞骨架、验证性实验与探究性实验、细胞壁的成分及功能 【详解】分析表格可知：利用细胞松弛素破坏微丝后，动物细胞形态异常，表面起泡，而植物细胞形态基本正常；利用秋水仙素破坏微管后，动物细胞形态异常，变圆，植物细胞形态仍基本正常。这表明动物细胞的形态维持同时依赖微丝和微管，而植物细胞的形态在两种药物处理后基本正常，主要是因为植物细胞有细胞壁的支持和保护作用，细胞壁是维持植物细胞形态的主要结构，ABC错误，D正确。 8．下列高中生物学实验的部分操作，错误的是（　　） 选项 实验名称 实验操作 A 酵母菌纯培养 每次划线前接种环都需要灼烧 B 探究抗生素对细菌的选择作用 培养基平板涂菌后，放入含抗生素的纸片 C DNA片段的扩增及电泳鉴定 接通电源后，看到指示剂前沿迁移至凝胶边缘时，停止电泳 D DNA的粗提取与鉴定 洋葱研磨液的上清液加入冷酒精后，经离心从上清液中提取DNA A．A B．B C．C D．D 【答案】D 【知识点】PCR扩增的原理与过程、DNA的粗提取及鉴定、微生物的接种方法、无菌技术 【详解】A、酵母菌纯培养中，每次划线前灼烧接种环可实现灭菌以确保每次划线的菌种来自前一次划线的末端，A正确； B、探究抗生素对细菌的选择作用时，需先涂布细菌形成菌层，再放置含抗生素纸片以观察抑菌圈，操作顺序正确，B正确； C、DNA电泳中，指示剂（如溴酚蓝）用于指示电泳前沿，若迁移至凝胶边缘时停止，可防止DNA条带溢出凝胶，操作合理，C正确； D、DNA粗提取时，加入冷酒精（预冷乙醇）使DNA析出沉淀，此时DNA存在于沉淀物中，需离心后取沉淀而非上清液，题干中“从上清液中提取DNA”违反该原理，D错误。 故选D。 9．在细胞质中有许多不停忙碌的“部门”，它们统称为细胞器。下列有关细胞器之间分工、合作的说法正确的是（　　） A．线粒体是细胞中进行有氧呼吸的唯一细胞器，没有线粒体的细胞不能进行有氧呼吸 B．叶绿体内膜上分布着光合色素和酶，可将光能转化为ATP和NADPH中活跃的化学能 C．在胰岛素的形成过程中，参与的具膜细胞器有核糖体、内质网、高尔基体和线粒体 D．在细胞吞噬细菌的过程中，细胞膜的结构和成分通过囊泡运输的方式转移至溶酶体 【答案】D 【知识点】细胞器之间的协调配合、细胞器的结构、功能及分离方法、真核细胞与原核细胞 【详解】A、线粒体是真核细胞进行有氧呼吸的主要场所，部分原核生物没有线粒体，但含有有氧呼吸相关酶，也可进行有氧呼吸，A错误； B、光合色素和光反应相关酶分布在叶绿体的类囊体薄膜上，并非叶绿体内膜，B错误； C、胰岛素属于分泌蛋白，核糖体是其合成场所，但核糖体无膜结构，因此参与胰岛素形成的具膜细胞器是内质网、高尔基体、线粒体，C错误； D、细胞吞噬细菌的过程属于胞吞，细胞膜内陷形成包裹细菌的囊泡，囊泡与溶酶体融合，该过程中细胞膜的结构和成分通过囊泡运输转移至溶酶体，D正确。 10．质粒P含有2个EcoRI、1个SacI和1个BamHI的限制酶切割位点。已知BamHI位点位于2个EcoRI位点的正中间，用上述3种酶切割该质粒，酶切产物的凝胶电泳结果如图，其中泳道①条带是未酶切的质粒P，泳道②③④条带为3种单酶切产物，泳道⑤⑥⑦条带为双酶切产物。下列叙述正确的是（　　） A．DNA分子的迁移方向是从电源正极到负极 B．可确认泳道②③条带分别是SacI和EcoRI的单酶切产物 C．泳道⑤条带是SacI和EcoRI的双酶切产物 D．泳道①②说明质粒的碱基在酶切后部分丢失 【答案】C 【知识点】电泳鉴定、DNA重组技术的基本工具 【详解】A、因为DNA分子带负电，在凝胶中会向电源正极迁移，所以其迁移方向是从电源负极到正极，A错误； B、P质粒有两个EcoRI限制酶的切割位点，单酶切后的产物最小，电泳时迁移速度较快，可推知③条带可能是EcoRI的单酶切产物（单酶切产生2个片段大小相同），泳道②条带和泳道④条带位置一致，无法区分泳道②条带是SacI还是BamHI的单酶切产物，B错误； C、EcoRI有2个酶切位点，单酶切会产生2个片段，SacI有1个酶切位点，单酶切会产生1个线性片段。SacI和EcoRI双酶切，会产生3个片段，观察电泳图谱，泳道⑤有3个条带，可推测泳道⑤为SacI和EcoRI酶切产物，C正确； D、酶切只是将质粒的环状结构切开，变成线性等结构，碱基总数不会改变，D错误。 11．下列叙述中与染色体变异无关的是（　　） A．通过连续自交获得纯合品系的水稻 B．通过产前诊断预防21三体综合征 C．通过多倍体育种获得无子西瓜 D．通过植物体细胞杂交获得白菜—甘蓝 【答案】A 【知识点】多倍体育种、植物体细胞杂交技术、染色体数目的变异、基因分离定律的实质和应用 【详解】A、连续自交获得纯合水稻品系的原理基因重组，培育过程中没有发生染色体结构或数目的改变，与染色体变异无关，A符合题意； B、21三体综合征的病因是患者体细胞内21号染色体比正常人多1条，属于染色体数目变异中的个别染色体增加，与染色体变异有关，B不符合题意； C、无子西瓜的多倍体育种原理是染色体数目以染色体组为单位成倍增加，属于染色体数目变异，与染色体变异有关，C不符合题意； D、植物体细胞杂交获得的白菜—甘蓝，体细胞中同时包含白菜和甘蓝两个物种的染色体，染色体数目发生改变，属于染色体数目变异，与染色体变异有关，D不符合题意。 12．科研人员在富营养化水体中分离到一种真核单细胞生物——眼虫，其细胞质中存在一种含单层膜的“储蓄泡”，能摄入乳酸、乙醇等，并在泡内将这些物质转化为葡萄糖。下列叙述正确的是（    ） A．眼虫的遗传物质是RNA，其基本单位是核糖核苷酸 B．眼虫具有核膜结构，核膜的主要成分是脂质和蛋白质 C．眼虫具有细胞骨架，其主要成分是纤维素和果胶 D．眼虫的“储蓄泡”内含有多种酶，其合成与核糖体无关 【答案】B 【知识点】真核细胞与原核细胞 【详解】A、眼虫是真核生物，真核生物的遗传物质为DNA，基本单位是脱氧核糖核苷酸，A错误； B、眼虫属于真核生物，存在核膜包被的细胞核，核膜属于生物膜，主要成分是脂质（磷脂）和蛋白质，B正确； C、细胞骨架的主要成分是蛋白质纤维，纤维素和果胶是植物细胞壁的主要组成成分，C错误； D、储蓄泡内发挥催化作用的酶本质多为蛋白质，核糖体是蛋白质的合成场所，因此这类酶的合成与核糖体有关，D错误。 13．人细胞内的锌可与蛋白质中的半胱氨酸()和组氨酸()结合，构成一种特定的指状突起结构，即锌指蛋白，该蛋白缺乏或功能异常会扰乱基因调控。下列说法正确的是（　　） A．铁、锌、镁等微量元素参与组成细胞内的重要化合物 B．人体细胞内参与组成锌指蛋白的元素至少有6种 C．锌指蛋白中的锌主要以游离态存在于氨基酸的侧链基团中 D．若锌指蛋白肽链折叠错误，不会影响该蛋白质的功能 【答案】B 【知识点】细胞中的无机盐、蛋白质的结构及多样性、蛋白质的基本组成单位--氨基酸、组成细胞的元素 【详解】A、细胞中的元素分为大量元素和微量元素，镁属于大量元素，不属于微量元素，A错误； B、锌指蛋白属于蛋白质，本身含C、H、O、N四种基本元素，半胱氨酸含有S元素，再加上结合的Zn元素，因此参与组成锌指蛋白的元素至少有6种，B正确； C、根据题干信息，锌与半胱氨酸、组氨酸结合构成锌指蛋白结构，因此锌以结合态存在，C错误； D、蛋白质的功能依赖其特定的空间结构，肽链折叠错误会改变蛋白质的空间结构，会影响该蛋白质的功能，D错误。 14．微管和微丝是细胞骨架的关键结构之一，下列相关叙述正确的是（　　） A．细胞骨架在光学显微镜下清晰可见 B．微管和微丝在核糖体上合成 C．微管结构稳定且不易变化，这有利于支撑并维持细胞形态 D．在洋葱根尖分生区细胞中可以发生微管蛋白组装成中心粒的过程 【答案】B 【知识点】细胞器的结构、功能及分离方法、细胞骨架 【详解】A、细胞骨架是亚显微结构，光学显微镜下无法清晰观察，需要借助电子显微镜才能观察到，A错误； B、微管和微丝的化学本质是蛋白质，核糖体是蛋白质的合成场所，因此二者在核糖体上合成，B正确； C、微管结构不稳定，可根据细胞生命活动需求发生组装和解聚，比如细胞分裂过程中纺锤体（由微管组成）的形成和消失就依赖微管的动态变化，并非稳定不易变化，C错误； D、洋葱是高等植物，高等植物细胞中不存在中心体（中心粒），因此不会发生微管蛋白组装成中心粒的过程，D错误。 15．某科学家通过基因工程技术，将细胞核内某种DNA结合蛋白的信号序列，连接到原本只在细胞质基质中发挥作用的糖酵解酶上，并在真核细胞中表达出序列正常的融合蛋白。下列推测最合理的是（    ） A．该融合蛋白会在游离核糖体上合成，最终仍留在细胞质基质 B．该融合蛋白会进入内质网和高尔基体进行加工后分泌到细胞外 C．该融合蛋白合成后会被定向转运进入细胞核 D．该融合蛋白因序列异常无法正确折叠，最终被溶酶体降解 【答案】C 【知识点】细胞核的结构、细胞器之间的协调配合、细胞器的结构、功能及分离方法 【详解】A、该融合蛋白携带DNA结合蛋白的核定位信号，会被定向转运，不会留在细胞质基质，A错误； B、进入内质网、高尔基体加工后分泌到细胞外的是分泌蛋白，需具备内质网靶向的信号肽，该融合蛋白无分泌相关信号，不会被分泌到胞外，B错误； C、DNA结合蛋白的信号序列为核定位信号，可引导融合蛋白在细胞质游离核糖体合成后，定向转运进入细胞核，C正确； D、题干明确说明表达出的融合蛋白序列正常，不存在序列异常无法正确折叠的情况，D错误。 16．下列关于生物工程技术的叙述，错误的是（　　） A．获取马铃薯脱毒苗常选取茎尖进行组织培养 B．为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射性激素以促进超数排卵 C．单克隆抗体制备过程中需用特定培养基筛选得到杂交瘤细胞 D．生产转基因农作物时，需防止转基因花粉的传播，避免基因污染 【答案】B 【知识点】植物组织培养技术综合、动物细胞融合与单克隆抗体的制备、胚胎移植技术、转基因生物安全性 【详解】A、植物茎尖属于分生区，细胞分裂速度快，病毒极少甚至无病毒，因此选取茎尖进行组织培养可获得马铃薯脱毒苗，A正确； B、要促进供体绵羊超数排卵，需注射促性腺激素，若注射性激素，会通过负反馈调节抑制垂体分泌促性腺激素，反而不利于排卵，B错误； C、单克隆抗体制备过程中，细胞融合后会存在未融合的亲本细胞、同种细胞融合的细胞，只有杂交瘤细胞能在特定的选择培养基上存活，因此需用该培养基筛选得到杂交瘤细胞，C正确； D、转基因农作物的花粉中可能携带插入的目的基因，若传播到近缘野生植物中会造成基因污染，因此生产时需采取措施防止转基因花粉传播，D正确。 17．基因编辑技术可通过DNA片段的插入、缺失或替换来改变生物体的遗传信息和表型特征，在持续引发研究热潮的同时，其潜在的风险也引起了人们对生物安全的关注，下列叙述正确的是（　　） A．基因的碱基序列改变，一定会导致表达的蛋白质失去活性 B．基因编辑技术不涉及磷酸二酯键的断裂与形成 C．基因编辑技术改造的微生物可能具有超强的感染性和致病性 D．纠正单个碱基突变的基因编辑技术可用于治疗21三体综合征 【答案】C 【知识点】基因编辑技术、转基因生物安全性、人类遗传病的类型及实例、基因突变 【详解】A、密码子具有简并性，若基因碱基序列改变后转录出的mRNA对应的密码子仍编码同一种氨基酸，或突变发生在基因的非编码区、内含子区域，都不会改变蛋白质的结构和功能，因此基因碱基序列改变不一定导致表达的蛋白质失去活性，A错误； B、基因编辑进行DNA片段的插入、缺失或替换时，需要切割DNA链以及重新连接DNA片段，该过程涉及磷酸二酯键的断裂与形成，B错误； C、基因编辑可能赋予微生物原本不具备的性状，改造后的微生物可能拥有超强的感染性和致病性，存在潜在生物安全风险，C正确； D、21三体综合征是21号染色体多一条导致的染色体数目异常遗传病，并非单个碱基突变导致，因此纠正单个碱基突变的基因编辑技术无法治疗该病，D错误。 18．为了在实验室条件下更加快速高效提取真菌DNA，某团队研究出了一种利用NaOH裂解细胞并快速提取DNA的方法，主要操作步骤如下图。下列叙述错误的是（    ） A．将真菌经液氮冷冻后进行研磨，可使真菌菌体更易破碎 B．利用NaOH溶液提取DNA，可省去低温下冷藏静置和用冷却酒精析出DNA等步骤 C．NaOH溶液提取DNA的时间不宜过长且不能剧烈振荡，以免造成DNA损伤断裂 D．缓冲液除了中和碱性物质之外，还具有维持DNA酶活性、促进微生物生长等功能 【答案】D 【知识点】DNA的粗提取及鉴定 【详解】A、液氮冷冻可使真菌细胞内的水分形成冰晶，破坏细胞膜结构，研磨时能更充分地破碎细胞，释放细胞内的DNA，A正确； B、传统DNA提取中，低温冷藏静置和冷却酒精析出的目的是使DNA沉淀。NaOH溶液呈碱性，可能通过破坏细胞膜和细胞壁快速释放DNA，从而省去这些步骤，B正确； C、DNA分子结构不稳定，长时间接触NaOH溶液或剧烈震荡可能导致其磷酸二酯键断裂，造成DNA损伤。因此，提取时间不宜过长且需避免剧烈振荡，C正确； D、缓冲液的主要作用是中和NaOH的碱性，维持溶液pH稳定。DNA酶的作用是分解DNA，实验中需抑制其活性以防止DNA被降解；同时，提取的DNA需避免微生物污染，缓冲液不具有促进微生物生长的功能，D错误。 19．酵母干重的50%左右都是蛋白质，含有9种人体必需的氨基酸。生产酵母蛋白的酵母菌，经挑选、培育，蛋白质含量可高达80%。而酿酒过程中筛选出的优良菌种具有高效的产酒精能力与高酒精耐受性。下列关于酵母菌的说法，正确的是（    ） A．由于酵母菌蛋白质含量高，其菌体可用于单细胞蛋白的生产 B．进行酿酒酵母扩大培养的过程中，需要先有氧后无氧的环境 C．对酵母菌进行显微镜直接计数时，需选用细菌计数板 D．由酿制葡萄酒转为酿制果醋的过程中，需要通入无菌空气并降低温度 【答案】A 【知识点】果酒和果醋的制作流程及实验分析、果酒和果醋的制作原理、其他微生物的分离与计数、微生物的接种方法 【详解】A、单细胞蛋白指微生物菌体本身，题干说明酵母菌蛋白质含量高且富含人体必需氨基酸，因此其菌体可用于单细胞蛋白的生产，A正确； B、酿酒酵母扩大培养的目的是快速增加酵母菌种群数量，酵母菌只有在有氧条件下才能大量繁殖，因此扩大培养需要全程有氧环境，B错误； C、细菌计数板适用于个体更小的细菌计数，酵母菌细胞体积远大于细菌，显微镜直接计数酵母菌需选用血球计数板，C错误； D、果醋发酵依靠醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，最适发酵温度为30~35℃，高于果酒发酵的18~30℃，因此由酿酒转果醋时需要通入无菌空气并升高温度，D错误。 20．蛋白质是目前已知的结构最复杂、功能最多样的分子。下列关于蛋白质功能的叙述，错误的是（    ） A．蛋白质与某种核酸结合形成细胞核的重要结构之一 B．含Fe的氨基酸脱水缩合形成血红蛋白参与O2的运输 C．由蛋白质纤维构成的细胞骨架可以维持细胞形态 D．细胞膜的外表面有糖类分子，可与蛋白质结合成糖蛋白 【答案】B 【知识点】细胞骨架、细胞核的结构、细胞膜的功能、蛋白质的基本组成单位--氨基酸 【详解】A、细胞核内的染色质主要由蛋白质和DNA（核酸的一种）结合形成，属于细胞核的重要结构，A正确； B、Fe是血红蛋白的组成成分，但Fe并不是氨基酸的组成部分，而是在血红蛋白合成后，结合在血红蛋白的特定位点上。因此，不是“含 Fe 的氨基酸脱水缩合形成血红蛋白”，B错误； C、细胞骨架是由蛋白质纤维构成的网架结构，能够维持细胞形态、锚定并支撑细胞器，C正确； D、细胞膜的外表面的糖类分子可与蛋白质结合形成糖蛋白，与细胞识别、信息传递等功能有关，D正确。 21．细胞中含有多种简单或复杂的化合物分子。下列叙述错误的是（　　） A．各种RNA分子中储存着遗传信息 B．氨基酸的中央碳原子通常连接着氨基和羧基 C．淀粉、糖原和纤维素的基本单位都是葡萄糖 D．脂肪有储能作用，在动物体内还能起防震作用 【答案】A 【知识点】蛋白质的基本组成单位--氨基酸、核酸的种类及分布、糖类的种类及分布、脂质的种类及功能 【详解】A、细胞生物的遗传物质是DNA，遗传信息储存在DNA中，细胞内的tRNA、rRNA等RNA不储存遗传信息，仅部分以RNA为遗传物质的病毒的RNA才携带遗传信息，并非各种RNA都储存遗传信息，A错误； B、组成生物体蛋白质的氨基酸的结构通式中，中心碳原子至少连接1个氨基、1个羧基、1个氢原子和1个R基，因此氨基酸的中央碳原子通常连接着氨基和羧基，B正确； C、淀粉、糖原、纤维素都属于多糖，三者的基本组成单位均为葡萄糖，C正确； D、脂肪是细胞内良好的储能物质，动物体内分布在内脏器官周围的脂肪还具有缓冲、减压的防震作用，此外脂肪还有保温功能，D正确。 22．某研究小组将合成的必需基因导入去除DNA的支原体中，构建出具有最小基因组且能正常生长和分裂的细胞。下列关于该细胞的叙述，错误的是（    ） A．含有细胞壁，能支持和保护细胞 B．含有核糖体，能合成所需蛋白质 C．没有染色体，不能进行有丝分裂 D．没有线粒体，但能合成所需ATP 【答案】A 【知识点】真核细胞与原核细胞 【详解】A、支原体是唯一不具有细胞壁的原核生物，因此该细胞不含细胞壁，A错误； B、原核细胞仅含有核糖体一种细胞器，核糖体是蛋白质的合成场所，因此该细胞可通过核糖体合成所需蛋白质，B正确； C、原核细胞无核膜包被的细胞核，不存在染色体，有丝分裂是真核细胞特有的分裂方式，原核细胞进行二分裂，因此该细胞不能进行有丝分裂，C正确； D、原核细胞没有线粒体，但可在细胞质基质中通过呼吸作用合成生命活动所需的ATP，D正确。 23．利用谷氨酸棒状杆菌（好氧菌）发酵可以得到谷氨酸，进一步处理就能制成谷氨酸钠（味精）。下列关于谷氨酸的发酵生产，叙述错误的是（    ） A．发酵罐内发酵是发酵过程的中心环节，这一阶段需严格灭菌 B．发酵过程中维持中性或弱碱性的pH有利于提高谷氨酸的产量 C．发酵后期溶解氧急剧上升可能与菌种活力下降或大量死亡有关 D．发酵结束后可采取提取、分离和纯化等措施以获得谷氨酸 【答案】A 【知识点】无菌技术、发酵工程的基本环节、发酵工程的应用 【详解】A、发酵罐内发酵是发酵过程的中心环节，但严格灭菌是发酵前对培养基、发酵罐等设备的预处理要求，发酵阶段仅需进行无菌操作防止杂菌污染，A错误； B、谷氨酸发酵过程中，酸性条件下易积累副产物乙酰谷氨酰胺，维持中性或弱碱性的pH有利于谷氨酸的合成，可提高谷氨酸产量，B正确； C、谷氨酸棒状杆菌为好氧菌，正常发酵过程中会持续消耗溶解氧，若菌种活力下降或大量死亡，耗氧量会大幅降低，会导致溶解氧急剧上升，C正确； D、谷氨酸是谷氨酸棒状杆菌的代谢产物，发酵结束后需要经过提取、分离和纯化等步骤，才能获得符合要求的谷氨酸，D正确。 24．关于植物细胞工程的应用，下列相关叙述错误的是（    ） A．微型繁殖技术可高效、快速实现种苗大量繁殖并保持优良品种的遗传特性 B．花粉离体培养得到的单倍体幼苗不能用于体细胞诱变育种和研究遗传突变 C．经化学或物理诱变处理愈伤组织可得到有用的突变体进而培育成新品种 D．工厂化生产紫草宁的过程中不需要有再分化形成完整紫草植株的过程 【答案】B 【知识点】植物细胞工程的实际应用 【详解】A、微型繁殖技术依托植物组织培养技术实现，属于无性繁殖，可高效快速实现种苗扩繁，且子代能保持优良品种的遗传特性，A正确； B、花粉离体培养得到的单倍体幼苗，一般细胞中无同源染色体，发生突变后相应性状可直接表现，非常适合用于体细胞诱变育种和遗传突变研究，B错误； C、愈伤组织细胞分裂旺盛，易受诱变因素影响发生基因突变，经化学或物理诱变处理后可筛选出具有优良性状的突变体，进一步培育成新品种，C正确； D、工厂化生产紫草宁只需培养至愈伤组织阶段，直接从愈伤组织细胞中提取产物即可，不需要经过再分化形成完整紫草植株的过程，D正确。 25．下列生物工程技术中，不需要用到胚胎移植技术的是（　　） A．利用成纤维细胞等培养出可供移植的皮肤 B．利用乳腺生物反应器生产珍贵的医用蛋白 C．利用本地黄牛快速大量繁殖引进的良种奶牛 D．利用试管婴儿技术帮助有生育困难的夫妇 【答案】A 【知识点】动物细胞培养技术、胚胎移植技术、克隆 【详解】A、利用成纤维细胞培养可供移植的皮肤，仅涉及动物细胞培养技术，只需获得皮肤组织，无需发育为完整动物个体，不需要胚胎移植，A符合题意； B、构建乳腺生物反应器需要先获得导入药用蛋白基因的早期胚胎，再通过胚胎移植将胚胎移入代孕母体内发育为转基因动物，需要用到胚胎移植，B不符合题意； C、快速大量繁殖良种奶牛，需要将良种奶牛的早期胚胎移植到本地代孕黄牛体内发育，需要用到胚胎移植，C不符合题意； D、试管婴儿技术需要将体外受精得到的早期胚胎，移植到母体子宫内继续发育，需要用到胚胎移植，D不符合题意。 第Ⅱ卷 二、非选择题（5小题，共50分） 26．（10分，每空1分）请回答细胞工程的相关问题： I.利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，用以制造单克隆抗体，单克隆抗体在医药领域占有重要的地位，图1为单克隆抗体的制备过程。 (1)A抗原注入小鼠后，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是________。 (2)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是________，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得________，再将其注入小鼠体内培养，从小鼠腹水中提取到大量的抗A抗原的单克隆抗体。 (3)抗体药物偶联物（ADC）通常是由单克隆抗体和细胞毒性药物共价连接形成，能够实现对癌细胞的精确高效清除而不伤害正常细胞，成为抗癌药物研发的热点之一。图2为ADC杀伤癌细胞过程的示意图，据图分析，ADC发挥作用的过程中，抗体的作用是_______，药物使癌细胞死亡的机理是________。 Ⅱ.百岁兰是一种独特的裸子植物，依据现有的植物学分类没有近亲，它被誉为植物界的“活化石”，已被列入《濒危物种公约》。现在可通过一定的方法实现百岁兰的快速与稳定繁殖。 (4)________技术成为植物种质资源保存和快速繁殖的重要工具，该技术依据的生物学原理是________。 (5)以消毒的外植体为材料获得愈伤组织的过程称为________；该过程中通常需要向MS培养基中加入一定浓度的________这两类植物激素，并通过调整其比例来调控培育过程；同时愈伤组织的形成和生长还受到外界环境因素的影响。图3、图4为两种处理因素对愈伤组织生长状况的影响曲线，实验结果表明：________。 【答案】(1)聚乙二醇/PEG (2) 乙、丙 能产生所需（或抗A抗原的）抗体的杂交瘤细胞 (3) 特异性识别癌细胞 诱导了癌细胞内与凋亡相关基因的表达 (4) 植物组织培养 植物细胞具有全能性 (5) 脱分化 生长素和细胞分裂素 昼夜节律显著促进了愈伤组织的生长 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备、植物组织培养技术综合 【分析】植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。其具体流程为：接种外植体→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→移栽成活。 【详解】（1）诱导动物细胞融合常用的化学诱导因素是聚乙二醇（PEG）。 （2）甲过程是融合细胞，①是选择培养基筛选，②是克隆化培养和专一抗体检验阳性，故通过筛选只含杂交瘤细胞的是乙和丙；②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，目的是筛选获得能产生特异性抗体（或抗A抗原的抗体）的杂交瘤细胞。 （3）抗体的作用是特异性识别并结合癌细胞表面抗原，发挥靶向定位功能，引导ADC精准结合癌细胞；药物使癌细胞死亡的机理是诱导了癌细胞内与凋亡相关基因的表达。 （4）植物组织培养依据的生物学原理是植物细胞的全能性，根本原因是植物细胞具有该物种生长发育的全部遗传信息。 （5）植物组织培养通过离体的植物组织、器官或细胞，在无菌条件下经脱分化、再分化等过程，发育成完整植株，该过程中通常需要向培养基中加入一定浓度的生长素和细胞分裂素来调控培育过程；对比图3（暗处理）和图4（昼夜节律处理），相同时间下，昼夜节律处理的愈伤组织质量增幅更大，表明昼夜节律更利于愈伤组织的生长。 27．（9分，除标注外每空1分）中国人的五味，“酸甜苦辣咸”，“酸”置于五味之首，因为酸是人类烹饪最古老的调味。（一）《诗经》中有“中田有庐，疆场有瓜，是剥是菹，献之皇祖”的诗句。“剥”和“菹”是腌渍加工的意思。古方中腌渍蔬菜的方法记录如下：“收菜时，即择取好者，作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内瓮中，酵数日得酸汤。”回答下列问题： (1)制作菹所利用的微生物主要是指__________，代谢类型为__________ (2)现代大规模生产时，需先获得优质的菌种，若要从陈汤中分离、纯化得到单一菌落，需在液体培养基中加入______（填物质名称）实现菌种的分离；再将获得的菌种在适宜的液体培养基中大量培养，采用稀释涂布平板法计数培养液中的活菌数，每隔24h统计一次菌落数目，应选取__________________时的记录作为结果，这样可以防止_________。 （二）《尚书》中提到“若作酒醴，尔惟曲蘖；若作和羹，尔惟盐梅”这一传统酿醋工艺，酿制的米醋不但含有丰富的营养成分，还有增强食欲、保护肠胃等功能。回答下列问题： (3)根据醋酸菌的代谢特点，米醋酿制过程需控制适宜的环境条件，如______（答两点）（2分）。 (4)在米醋的酿制的早期，醋酸菌与其他微生物的种间关系是______。在米醋的酿制的中后期，一般不会有其他杂菌干扰，其原因是___________。 【答案】(1) 乳酸菌 异养厌氧型 (2) 琼脂 菌落数目稳定 因培养时间不足导致遗漏菌落的数目 (3)氧气充足、温度为30~35℃（2分） (4) （种间）竞争 醋酸菌产生的醋酸是酸性，抑制其他微生物生长 【知识点】泡菜的腌制、果酒和果醋的制作原理、其他微生物的分离与计数、培养基的类型及其应用 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】（1）分析题意，制作菹所利用的微生物要能够产酸，主要是指乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型；亚硝酸盐本身不致癌，亚硝酸盐在适宜的pH、温度和一定的微生物作用等特定条件下，才会转变成致癌物亚硝胺。 （2）要分离菌种所需培养基是固体培养基，若要从陈汤中分离、纯化得到单一菌落，需在液体培养基中加入凝固剂，如琼脂；为防止因培养时间不足导致遗漏菌落的数目，每隔24h统计一次菌落数目，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果。 （3）醋酸菌是需氧生物，根据醋酸菌的代谢特点，米醋酿制过程需控制适宜的环境条件，如氧气充足、温度为30~35℃。 （4）在米醋的酿制的早期，醋酸菌与其他微生物会竞争养分和空间资源，故种间关系是（种间）竞争；由于醋酸菌产生的醋酸是酸性，抑制其他微生物生长，故在米醋的酿制的中后期，一般不会有其他杂菌干扰。 28．（13分，每空1分）根据题意，回答下列问题： Ⅰ．科学家从牛的胰腺中分离出由76个氨基酸组成的一条多肽链（Ub）。研究发现：Ub在细胞自我检测和去除某些“不适用蛋白质”（即：靶蛋白）的机制中扮演着重要角色。如果某个蛋白被贴上Ub这个标签，就会被运送到细胞内的蛋白酶体处被水解掉，过程如图所示。 请回答下列问题： (1)Ub含有________个肽键，其合成场所是________。 (2)①过程说明Ub的作用是识别________并与之结合；由图可知细胞中去除“不适用蛋白质”的过程需要________、________和Ub、蛋白酶体等条件。 (3)被降解的蛋白质产生的氨基酸可以用于________或________。 Ⅱ．2008年9月“三鹿”婴幼儿奶粉受污染事件震惊全国，部分食用了受污染奶粉的婴幼儿产生肾结石病症。究其原因是因为在奶粉中掺入非食用的三聚氰胺（C、N、H）冒充蛋白质。三聚氰胺是“含氮之王”，在小分子有机化合物中，它含有的最高，达到66.7%，而一般蛋白质中含量为16%。400奶粉中加入了1三聚氰胺，相当于增加4．1蛋白质的含氮量，这对人体及婴幼儿非常有害。某研究性学习小组想用实验方法鉴定市场某奶粉的各种成分是否符合标准。 (4)如果该奶粉中含有葡萄糖，则用________试剂检验，会出现________沉淀。 (5)如果该奶粉中含有脂肪，则用________检验，会出现________色颗粒。 (6)如果该奶粉中含有蛋白质，则用试剂________检验，会出现________色反应。 【答案】(1) 75 核糖体 (2) 靶蛋白 多种酶 ATP提供能量 (3) 合成新的蛋白质 氧化分解释放能量 (4) 斐林 砖红色 (5) 苏丹III 橘黄色 (6) 双缩脲 紫 【知识点】细胞器的结构、功能及分离方法、与蛋白质相关的计算、蛋白质的功能、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 【分析】生物组织中化合物的鉴定：（1）斐林试剂可用于鉴定还原糖，在水浴加热的条件下，溶液的颜色变化为砖红色（沉淀）。（2）蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应。（3）脂肪可用苏丹Ⅲ染液鉴定，呈橘黄色。（4）淀粉遇碘液变蓝。 【详解】（1）多肽中肽键的数目=氨基酸数目-肽链数，Ub含有76-1=75个肽键；核糖体是蛋白质的合成车间，故Ub合成场所是核糖体。 （2）①过程中Ub与靶蛋白结合后形成Ub-靶蛋白，说明Ub的作用是识别靶蛋白并与之结合；由图可知细胞中去除“不适用蛋白质”的过程需要多种酶、ATP提供能量和Ub、蛋白酶体等条件。 （3）氨基酸是蛋白质的基本组成单位，也可在适宜条件下作为能源物质，故被降解的蛋白质产生的氨基酸可以用于合成新的蛋白质、氧化分解释放能量。 （4）葡萄糖属于还原糖，可用斐林试剂进行检测，两者在水浴条件下生成砖红色沉淀。 （5）脂肪可用苏丹III检验，会出现橘黄色颗粒。 （6）如果该奶粉中含有蛋白质，则用试剂双缩脲检验，会出现紫色反应。 29．（8分，除标注外每空1分）脂肪是细胞内良好的储能物质，当生命活动需要时可以分解利用；脂滴是存储和转运脂肪的细胞器。回答下列问题： (1)脂肪是由脂肪酸和______发生反应而形成的酯，除了供能，其在生物体内的作用还有__________（答出2点，2分）。 (2)糖类代谢异常时，脂肪可分解为脂肪酸为机体供能。为研究脂肪酸供能的转运路径，科研人员让小鼠成纤维细胞摄入红色荧光标记的外源脂肪酸后，分别置于细胞培养液和无机盐缓冲液中培养，用绿色荧光、蓝色荧光分别标记细胞的脂滴和线粒体，分析荧光重合率，结果如表所示。 处理时间 重合率/% 培养液类型 0h 24h 红绿荧光重合 红蓝荧光重合 红绿荧光重合 红蓝荧光重合 细胞培养液 97 3 97 3 无机盐缓冲液 97 3 38 62 ①在上述实验中，细胞供能充足的条件下，脂肪一般不会参与供能，据表分析，依据是______。（2分） ②无机盐缓冲液中培养24h后，红蓝荧光重合率显著升高，说明________。产生这种变化的生理意义是______。 (3)在营养匮乏状态下，有些细胞的细胞质基质中会出现游离脂肪酸的过量堆积，导致脂毒性的发生。细胞出现脂毒性的原因可能是______（多选）。 A．线粒体膜上的脂肪酸转运蛋白功能缺陷 B．内质网合成脂滴的能力增强 C．细胞膜上脂肪酸摄入通道关闭 D．脂肪酸无法及时转运到脂滴 【答案】(1) 甘油 保温、缓冲和减压（2分） (2) 在细胞培养液中培养24h后，红绿荧光重合率仍保持97%，而红蓝荧光重合率仅为3%，说明脂肪酸主要储存在脂滴中，未向线粒体转运供能（2分） 脂肪酸从脂滴向线粒体的转运增强 在营养缺乏时，可通过分解脂肪为细胞提供能量，维持生命活动 (3)AD 【知识点】脂质的种类及功能、验证性实验与探究性实验 【分析】脂质包括脂肪、磷脂和固醇，固醇包括胆固醇、性激素和维生素D，脂肪是良好的储能物质、胆固醇是构成细胞膜的重要成分、在人体内还参与血液中脂质的运输，性激素能促进人和动物生殖器官的发育以及生殖细胞的形成，维生素D能有效地促进人和动物肠道对钙和磷的吸收。 【详解】（1）脂肪是由脂肪酸和甘油发生反应而形成的酯，脂肪在生物体内具有储能、保温、缓冲和减压等功能。 （2）①细胞供能充足的条件下，脂肪一般不会参与供能，根据题表可知，培养24h后，红绿荧光重合率仍保持97%，而红蓝荧光重合率仅为3%，说明脂肪酸主要储存在脂滴中，未向线粒体转运供能。 ②无机盐缓冲液中培养24h后，红蓝荧光重合率显著升高，说明脂肪酸从脂滴向线粒体的转运增强。在营养缺乏时，可通过分解脂肪为细胞提供能量，维持生命活动。 （3）从脂肪酸转运路径的角度推测，细胞出现脂毒性的原因可能是①脂肪酸无法及时转运到脂滴（或脂肪酸无法及时转运到线粒体），导致细胞质基质中游离脂肪酸不能及时被转运到线粒体供能而过量堆积，②线粒体膜上的脂肪酸转运蛋白功能缺陷，细胞膜上脂肪酸摄入通道关闭，均会导致细胞出现脂毒性，AD正确，BC错误。 故选AD。 30．（10分，除标注外每空1分）磷脂酸（PA）是调节植物生长发育和逆境响应的重要信使物质。为了解植物细胞中PA的动态变化，研究人员利用重叠延伸PCR（重叠链相互搭桥、互为模板而延伸，最终将不同来源的DNA片段拼接起来）将高度专一的PA结合蛋白（PABD）基因与绿色荧光蛋白（GFP）基因融合，构建有效监测细胞PA变化的荧光探针，并测定拟南芥细胞内PA含量。利用重叠延伸PCR获取融合基因的基本过程如图1所示，所用的Ti质粒如图2所示，请回答下列问题： 注：Nco Ⅰ、BamH Ⅰ、Sac Ⅰ、Sal Ⅰ为限制酶酶切位点。启动子1、2属于真核细胞表达系统，Sm+是链霉素抗性基因，Amp+是氨苄青霉素抗性基因，GUS基因编码的酶能将无色物质X-Gluc分解，使植物细胞呈蓝色。 (1)PCR反应中的每次循环一般分为变性、______、延伸三步。 (2)图1中的PCR1和PCR2不能置于一个PCR体系中同时进行，原因是______。为了重叠链顺利延伸，杂交的两条链分别为______（从字母“a”“b”“c”“d”中选）。获得融合基因后，用引物1和4继续进行PCR大量扩增该序列。 (3)根据图2中Ti质粒的结构及后续筛选的需要分析，在设计引物1和4时需分别加入限制酶______（2分）的识别序列。经过相应酶切处理后，将融合基因与该质粒在DNA连接酶作用下形成重组质粒。为了提高重组质粒导入农杆菌的效率，一般要用______处理农杆菌。 (4)用农杆菌侵染拟南芥后，为了将被侵染的拟南芥细胞进行脱菌处理以及筛选含有融合基因的拟南芥细胞，培养基上需要添加______（2分）。然后，通过______技术可培育出完整的转基因拟南芥植株。 (5)通过观测转基因拟南芥根尖细胞中______，了解PA的分布和含量。 【答案】(1)复性 (2) 引物2和引物3中存在互补配对的片段，置于同一反应体系时，它们会发生结合而失去作用 a、d (3) NcoⅠ、BamH Ⅰ（2分） Ca2+ (4) 链霉素、X-Gluc（2分） 植物组织培养 (5)绿色荧光点的分布与含量 【知识点】目的基因的检测与鉴定、将目的基因导入受体细胞、PCR扩增的原理与过程 【详解】（1）PCR反应需要的成分包括：模板DNA、引物、4种脱氧核苷酸、热稳定Taq酶、Mg²⁺、缓冲液等，题目要求答两点，填模板DNA和Taq酶即可；PCR的循环步骤为变性→复性（退火）→延伸。 （2）PCR1的引物2和PCR2的引物3设计了互补的重叠序列，若放在同一PCR体系中，引物2和3会相互结合，无法正常扩增出PABD基因和GFP基因；a链和d链都是5′→3′正向链，3′端有互补重叠序列，能配对搭桥并被酶延伸；其他链方向或末端不匹配，无法重叠延伸。 （3）融合基因需插入启动子2与终止子之间的T-DNA 区，且要破坏GUS基因便于筛选，因此只能选用Nco Ⅰ 和BamH Ⅰ，因此引物两端需要分别添加这两种酶的识别序列；将重组质粒导入农杆菌时，需要用氯化钙（Ca²⁺）处理农杆菌，使其成为感受态细胞，提高转化效率。 （4）农杆菌侵染后，脱菌需要添加抗生素（链霉素）杀死农杆菌；融合基因插入替换了GUS基因，含融合基因的细胞不能表达GUS，结合题目信息，添加X-Gluc可筛选出含目的基因的细胞；植物细胞具有全能性，通过植物组织培养技术可将转基因细胞培育为完整植株。 （5）PA结合蛋白与GFP融合表达，PA分布在哪里，探针就结合在哪里，PA含量越高，绿色荧光强度越强，因此通过观察绿色荧光的分布和强度，即可了解PA的分布和含量。 / 学科网（北京）股份有限公司 $2025-2026学年高二生物下学期第三次月考卷 生物·答题卡 姓 名： 准考证号： 贴条形码区 注意事项 1.答题前，考生先将自己的姓名，准考证号填写清楚，并认真核准 考生禁填： 缺考标记 ▣ 条形码上的姓名、准考证号，在规定位置贴好条形码。 违纪标记 ▣ 2.选择题必须用2B铅笔填涂：非选择题必须用0.5m黑色签字笔 以上标志由监考人员用2B铅笔填涂 答题，不得用铅笔或圆珠笔答题；字体工整、笔迹清晰。 3.请按题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出区域书写的答案 选择题填涂样例： 无效：在草稿纸、试题卷上答题无效。 正确填涂■ 保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破。 错误填涂[×1【1【/1 、 选择题：本题共25个小题，每小题2分，共50分。 1A][B]IC][D] 6.[A]IB]IC]ID] 11[A][B]IC][D] 16.[A][B][C][D] 2[A][BJIC][D] 7A][BIICJID] 12[AJ[BJ[CJ[D] 17A][BIICIID] 3.[A][B]IC][D] 8[A][B][C][D] 13A[B][C][D] 18.[A[B][C]ID] 4A][B]IC][D] 9[A][B][C][D] 14[A][B][C][D] 19.[A]IB]ICJ[D] 5[A][B][C][D] 10.[AJ[B][C][D] 15[AJ[BJIC][D] 20.A1[B1[C1[D1 21[A][B][CJID] 22[A][BJ[CI[D] 23.[A][B][C]ID] 24[AJ[B][C][D] 25[A][B][CI[D] 二、非选择题。（本分共5小题，共计50分） 26. (10分，每空1分) (1) (2 3 5 ■ 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效！ 27. (9分，除标注外每空1分》 (1) (2) (3) (2分) (4) 28. (13分，每空1分) (1) (2) (3) (4) (5) (6) 29. (8分，除标注外每空1分) (1) (2分) (2) (2分) (3) 30. (10分，除标注外每空1分) (1) (2) (3) (2分) (4) (2分) 2025-2026学年高二生物下学期第三次月考卷 参考答案 一、选择题：本题共25个小题，每小题2分，共50分。 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 D B C B D A D D D C 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 A B B B C B C D A B 题号 21 22 23 24 25 答案 A A A B A 二、非选择题（本部分共5小题，共计50分） 26．（10分，每空1分） 【答案】(1)聚乙二醇/PEG (2) 乙、丙 能产生所需（或抗A抗原的）抗体的杂交瘤细胞 (3) 特异性识别癌细胞 诱导了癌细胞内与凋亡相关基因的表达 (4) 植物组织培养 植物细胞具有全能性 (5) 脱分化 生长素和细胞分裂素 昼夜节律显著促进了愈伤组织的生长27．（9分，除标注外每空1分） 【答案】(1) 乳酸菌 异养厌氧型 (2) 琼脂 菌落数目稳定 因培养时间不足导致遗漏菌落的数目 (3)氧气充足、温度为30~35℃（2分） (4) （种间）竞争 醋酸菌产生的醋酸是酸性，抑制其他微生物生长 28．（13分，每空1分） 【答案】(1) 75 核糖体 (2) 靶蛋白 多种酶 ATP提供能量 (3) 合成新的蛋白质 氧化分解释放能量 (4) 斐林 砖红色 (5) 苏丹III 橘黄色 (6) 双缩脲 紫 29．（8分，除标注外每空1分） 【答案】(1) 甘油 保温、缓冲和减压（2分） (2) 在细胞培养液中培养24h后，红绿荧光重合率仍保持97%，而红蓝荧光重合率仅为3%，说明脂肪酸主要储存在脂滴中，未向线粒体转运供能（2分） 脂肪酸从脂滴向线粒体的转运增强 在营养缺乏时，可通过分解脂肪为细胞提供能量，维持生命活动 (3)AD 30．（10分，除标注外每空1分） 【答案】(1)复性 (2) 引物2和引物3中存在互补配对的片段，置于同一反应体系时，它们会发生结合而失去作用 a、d (3) NcoⅠ、BamH Ⅰ（2分） Ca2+ (4) 链霉素、X-Gluc（2分） 植物组织培养 (5)绿色荧光点的分布与含量 / 学科网（北京）股份有限公司 $………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… 此卷只装订不密封 ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… … 学校：______________姓名：_____________班级：_______________考号：______________________ 2025-2026学年高二生物下学期第三次月考卷 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．测试范围：人教版选择性必修三及必修一前三章。 5．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题：本题共25个小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1．（新情境）为高效检测抗菌剂的抗菌效果，研究人员构建了能够表达外源荧光素酶的重组菌Q，将其接种到有足量荧光素的液体培养基中，一段时间后添加待测抗菌剂，定时检测培养液的荧光强度。下列有关该实验的叙述，正确的是（　　） A．培养基中只需要添加水、碳源、氮源和无机盐 B．实验过程中所用的培养基是一种选择培养基 C．在重组菌Q胞内的荧光素酶可催化荧光素水解 D．培养液的荧光强度变化可作为抗菌效果的判断依据 2．（传统文化）甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。有同学提出利用现代生物技术生产黄酮的两条技术路径，如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．获得黄酮的两条途径都利用了植物细胞的全能性 B．过程①②的培养条件和培养基中激素比例均不同，但都需要添加蔗糖等营养物质 C．路径二添加果胶酶的目的是获得原生质体，使用纤维素酶也可以达成该目的 D．黄酮属于植物体产生的次生代谢物，在整个生命过程中一直都在生成 3．（新情境）细胞划痕实验可用于研究癌细胞的迁移能力。在癌细胞长成单层状态时，人为制造一个空白区域（划痕），然后观察、测量划痕边缘的细胞进入空白区域的速率，以此评估细胞的迁移能力。为探究姜黄素对癌细胞迁移的影响，研究人员进行了划痕实验，结果如图。下列叙述错误的是（　　） A．并非所有动物细胞都适合划痕实验 B．姜黄素可通过提高癌细胞之间的黏着性来降低其迁移能力 C．实验培养用具和试剂都要进行高压蒸汽灭菌处理，并在无菌环境下操作 D．细胞贴壁生长时发生的接触抑制现象体现了细胞膜进行细胞间信息交流的功能 4．（新考法）19世纪30年代，科学家曾在肺结核、天花和麻疹等患者的病理组织中观察到多核细胞。下列有关解释合理的是（　　） A．体内的病毒抑制了细胞内纺锤体的形成 B．患者体内的病毒能诱导多个体细胞融合 C．病毒破坏了细胞结构而细胞核保持完整 D．病毒含有的核酸整合到细胞后发挥作用 5．（传统文化）油糕饵块是云南昭通地区的传统早点，主要由油糕和饵块两部分构成。油糕以稀米粉包裹土豆泥用菜籽油炸制而成，饵块则选用优质大米经加工烘烤后涂抹辣椒酱、花生酱等配料，两者结合形成酥脆与软糯兼具的口感。下列相关叙述正确的是（    ） A．花生中脂肪含量较高，可导致发胖，日常饮食中应避免摄入含脂肪类食物 B．饵块中的淀粉能与斐林试剂反应生成砖红色沉淀 C．饱和脂肪酸构成的菜籽油，室温时呈液态 D．就蛋白质而言，饵块烘烤过程不会改变蛋白质中肽键的数量 6．（新情境）去垢剂是一端亲水、一端疏水的两性小分子，可与膜蛋白疏水部分结合并使其与膜分离。下列有关叙述错误的是（    ） A．胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分，在人体中还参与血液中磷的运输 B．磷脂与去垢剂的分子结构特点类似，也是一端亲水、一端疏水的两性小分子 C．细胞膜上蛋白质中的肽链的折叠错误可能导致人类疾病，如囊性纤维化 D．构成膜的磷脂分子可以侧向自由移动，膜中的蛋白质大多也能运动 7．（新考法）细胞骨架是由微管、微丝和中间纤维等蛋白质纤维组成的网架结构。科研人员用细胞松弛素（破坏微丝）和秋水仙素（破坏微管）分别处理动物细胞和植物细胞，观察细胞形态的变化，结果如下表。下列分析正确的是（　　） 处理 动物细胞形态 植物细胞形态 对照组 正常 正常 细胞松弛素处理 形态异常，表面起泡 基本正常 秋水仙素处理 形态异常，变圆 基本正常 A．动物细胞的形态维持主要依赖微丝，植物细胞的形态维持主要依赖微管 B．细胞松弛素能特异性破坏动物细胞的细胞骨架，对植物细胞无影响 C．植物细胞的形态在药物处理后基本正常，说明其细胞骨架的功能不如动物细胞的重要 D．动物细胞的形态易受药物影响，与其缺乏细胞壁的保护作用有关 8．下列高中生物学实验的部分操作，错误的是（　　） 选项 实验名称 实验操作 A 酵母菌纯培养 每次划线前接种环都需要灼烧 B 探究抗生素对细菌的选择作用 培养基平板涂菌后，放入含抗生素的纸片 C DNA片段的扩增及电泳鉴定 接通电源后，看到指示剂前沿迁移至凝胶边缘时，停止电泳 D DNA的粗提取与鉴定 洋葱研磨液的上清液加入冷酒精后，经离心从上清液中提取DNA A．A B．B C．C D．D 9．在细胞质中有许多不停忙碌的“部门”，它们统称为细胞器。下列有关细胞器之间分工、合作的说法正确的是（　　） A．线粒体是细胞中进行有氧呼吸的唯一细胞器，没有线粒体的细胞不能进行有氧呼吸 B．叶绿体内膜上分布着光合色素和酶，可将光能转化为ATP和NADPH中活跃的化学能 C．在胰岛素的形成过程中，参与的具膜细胞器有核糖体、内质网、高尔基体和线粒体 D．在细胞吞噬细菌的过程中，细胞膜的结构和成分通过囊泡运输的方式转移至溶酶体 10．质粒P含有2个EcoRI、1个SacI和1个BamHI的限制酶切割位点。已知BamHI位点位于2个EcoRI位点的正中间，用上述3种酶切割该质粒，酶切产物的凝胶电泳结果如图，其中泳道①条带是未酶切的质粒P，泳道②③④条带为3种单酶切产物，泳道⑤⑥⑦条带为双酶切产物。下列叙述正确的是（　　） A．DNA分子的迁移方向是从电源正极到负极 B．可确认泳道②③条带分别是SacI和EcoRI的单酶切产物 C．泳道⑤条带是SacI和EcoRI的双酶切产物 D．泳道①②说明质粒的碱基在酶切后部分丢失 11．下列叙述中与染色体变异无关的是（　　） A．通过连续自交获得纯合品系的水稻 B．通过产前诊断预防21三体综合征 C．通过多倍体育种获得无子西瓜 D．通过植物体细胞杂交获得白菜—甘蓝 12．科研人员在富营养化水体中分离到一种真核单细胞生物——眼虫，其细胞质中存在一种含单层膜的“储蓄泡”，能摄入乳酸、乙醇等，并在泡内将这些物质转化为葡萄糖。下列叙述正确的是（    ） A．眼虫的遗传物质是RNA，其基本单位是核糖核苷酸 B．眼虫具有核膜结构，核膜的主要成分是脂质和蛋白质 C．眼虫具有细胞骨架，其主要成分是纤维素和果胶 D．眼虫的“储蓄泡”内含有多种酶，其合成与核糖体无关 13．人细胞内的锌可与蛋白质中的半胱氨酸()和组氨酸()结合，构成一种特定的指状突起结构，即锌指蛋白，该蛋白缺乏或功能异常会扰乱基因调控。下列说法正确的是（　　） A．铁、锌、镁等微量元素参与组成细胞内的重要化合物 B．人体细胞内参与组成锌指蛋白的元素至少有6种 C．锌指蛋白中的锌主要以游离态存在于氨基酸的侧链基团中 D．若锌指蛋白肽链折叠错误，不会影响该蛋白质的功能 14．微管和微丝是细胞骨架的关键结构之一，下列相关叙述正确的是（　　） A．细胞骨架在光学显微镜下清晰可见 B．微管和微丝在核糖体上合成 C．微管结构稳定且不易变化，这有利于支撑并维持细胞形态 D．在洋葱根尖分生区细胞中可以发生微管蛋白组装成中心粒的过程 15．某科学家通过基因工程技术，将细胞核内某种DNA结合蛋白的信号序列，连接到原本只在细胞质基质中发挥作用的糖酵解酶上，并在真核细胞中表达出序列正常的融合蛋白。下列推测最合理的是（    ） A．该融合蛋白会在游离核糖体上合成，最终仍留在细胞质基质 B．该融合蛋白会进入内质网和高尔基体进行加工后分泌到细胞外 C．该融合蛋白合成后会被定向转运进入细胞核 D．该融合蛋白因序列异常无法正确折叠，最终被溶酶体降解 16．下列关于生物工程技术的叙述，错误的是（　　） A．获取马铃薯脱毒苗常选取茎尖进行组织培养 B．为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射性激素以促进超数排卵 C．单克隆抗体制备过程中需用特定培养基筛选得到杂交瘤细胞 D．生产转基因农作物时，需防止转基因花粉的传播，避免基因污染 17．基因编辑技术可通过DNA片段的插入、缺失或替换来改变生物体的遗传信息和表型特征，在持续引发研究热潮的同时，其潜在的风险也引起了人们对生物安全的关注，下列叙述正确的是（　　） A．基因的碱基序列改变，一定会导致表达的蛋白质失去活性 B．基因编辑技术不涉及磷酸二酯键的断裂与形成 C．基因编辑技术改造的微生物可能具有超强的感染性和致病性 D．纠正单个碱基突变的基因编辑技术可用于治疗21三体综合征 18．为了在实验室条件下更加快速高效提取真菌DNA，某团队研究出了一种利用NaOH裂解细胞并快速提取DNA的方法，主要操作步骤如下图。下列叙述错误的是（    ） A．将真菌经液氮冷冻后进行研磨，可使真菌菌体更易破碎 B．利用NaOH溶液提取DNA，可省去低温下冷藏静置和用冷却酒精析出DNA等步骤 C．NaOH溶液提取DNA的时间不宜过长且不能剧烈振荡，以免造成DNA损伤断裂 D．缓冲液除了中和碱性物质之外，还具有维持DNA酶活性、促进微生物生长等功能 19．酵母干重的50%左右都是蛋白质，含有9种人体必需的氨基酸。生产酵母蛋白的酵母菌，经挑选、培育，蛋白质含量可高达80%。而酿酒过程中筛选出的优良菌种具有高效的产酒精能力与高酒精耐受性。下列关于酵母菌的说法，正确的是（    ） A．由于酵母菌蛋白质含量高，其菌体可用于单细胞蛋白的生产 B．进行酿酒酵母扩大培养的过程中，需要先有氧后无氧的环境 C．对酵母菌进行显微镜直接计数时，需选用细菌计数板 D．由酿制葡萄酒转为酿制果醋的过程中，需要通入无菌空气并降低温度 20．蛋白质是目前已知的结构最复杂、功能最多样的分子。下列关于蛋白质功能的叙述，错误的是（    ） A．蛋白质与某种核酸结合形成细胞核的重要结构之一 B．含Fe的氨基酸脱水缩合形成血红蛋白参与O2的运输 C．由蛋白质纤维构成的细胞骨架可以维持细胞形态 D．细胞膜的外表面有糖类分子，可与蛋白质结合成糖蛋白 21．细胞中含有多种简单或复杂的化合物分子。下列叙述错误的是（　　） A．各种RNA分子中储存着遗传信息 B．氨基酸的中央碳原子通常连接着氨基和羧基 C．淀粉、糖原和纤维素的基本单位都是葡萄糖 D．脂肪有储能作用，在动物体内还能起防震作用 22．某研究小组将合成的必需基因导入去除DNA的支原体中，构建出具有最小基因组且能正常生长和分裂的细胞。下列关于该细胞的叙述，错误的是（    ） A．含有细胞壁，能支持和保护细胞 B．含有核糖体，能合成所需蛋白质 C．没有染色体，不能进行有丝分裂 D．没有线粒体，但能合成所需ATP 23．利用谷氨酸棒状杆菌（好氧菌）发酵可以得到谷氨酸，进一步处理就能制成谷氨酸钠（味精）。下列关于谷氨酸的发酵生产，叙述错误的是（    ） A．发酵罐内发酵是发酵过程的中心环节，这一阶段需严格灭菌 B．发酵过程中维持中性或弱碱性的pH有利于提高谷氨酸的产量 C．发酵后期溶解氧急剧上升可能与菌种活力下降或大量死亡有关 D．发酵结束后可采取提取、分离和纯化等措施以获得谷氨酸 24．关于植物细胞工程的应用，下列相关叙述错误的是（    ） A．微型繁殖技术可高效、快速实现种苗大量繁殖并保持优良品种的遗传特性 B．花粉离体培养得到的单倍体幼苗不能用于体细胞诱变育种和研究遗传突变 C．经化学或物理诱变处理愈伤组织可得到有用的突变体进而培育成新品种 D．工厂化生产紫草宁的过程中不需要有再分化形成完整紫草植株的过程 25．下列生物工程技术中，不需要用到胚胎移植技术的是（　　） A．利用成纤维细胞等培养出可供移植的皮肤 B．利用乳腺生物反应器生产珍贵的医用蛋白 C．利用本地黄牛快速大量繁殖引进的良种奶牛 D．利用试管婴儿技术帮助有生育困难的夫妇 第Ⅱ卷 二、非选择题（5小题，共50分） 26．（10分，每空1分）请回答细胞工程的相关问题： I.利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，用以制造单克隆抗体，单克隆抗体在医药领域占有重要的地位，图1为单克隆抗体的制备过程。 (1)A抗原注入小鼠后，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是________。 (2)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是________，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得________，再将其注入小鼠体内培养，从小鼠腹水中提取到大量的抗A抗原的单克隆抗体。 (3)抗体药物偶联物（ADC）通常是由单克隆抗体和细胞毒性药物共价连接形成，能够实现对癌细胞的精确高效清除而不伤害正常细胞，成为抗癌药物研发的热点之一。图2为ADC杀伤癌细胞过程的示意图，据图分析，ADC发挥作用的过程中，抗体的作用是_______，药物使癌细胞死亡的机理是________。 Ⅱ.百岁兰是一种独特的裸子植物，依据现有的植物学分类没有近亲，它被誉为植物界的“活化石”，已被列入《濒危物种公约》。现在可通过一定的方法实现百岁兰的快速与稳定繁殖。 (4)________技术成为植物种质资源保存和快速繁殖的重要工具，该技术依据的生物学原理是________。 (5)以消毒的外植体为材料获得愈伤组织的过程称为________；该过程中通常需要向MS培养基中加入一定浓度的________这两类植物激素，并通过调整其比例来调控培育过程；同时愈伤组织的形成和生长还受到外界环境因素的影响。图3、图4为两种处理因素对愈伤组织生长状况的影响曲线，实验结果表明：________。 27．（9分，除标注外每空1分）中国人的五味，“酸甜苦辣咸”，“酸”置于五味之首，因为酸是人类烹饪最古老的调味。（一）《诗经》中有“中田有庐，疆场有瓜，是剥是菹，献之皇祖”的诗句。“剥”和“菹”是腌渍加工的意思。古方中腌渍蔬菜的方法记录如下：“收菜时，即择取好者，作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内瓮中，酵数日得酸汤。”回答下列问题： (1)制作菹所利用的微生物主要是指__________，代谢类型为__________，酸汤发酵初期，亚硝酸盐的含量逐渐增加，亚硝酸盐在适宜的pH、温度和一定的微生物作用等特定条件下，才会转变成致癌物__________。 (2)现代大规模生产时，需先获得优质的菌种，若要从陈汤中分离、纯化得到单一菌落，需在液体培养基中加入______（填物质名称）实现菌种的分离；再将获得的菌种在适宜的液体培养基中大量培养，采用稀释涂布平板法计数培养液中的活菌数，每隔24h统计一次菌落数目，应选取__________________时的记录作为结果，这样可以防止_________。 （二）《尚书》中提到“若作酒醴，尔惟曲蘖；若作和羹，尔惟盐梅”这一传统酿醋工艺，酿制的米醋不但含有丰富的营养成分，还有增强食欲、保护肠胃等功能。回答下列问题： (3)根据醋酸菌的代谢特点，米醋酿制过程需控制适宜的环境条件，如______（答两点，2分）。 (4)在米醋的酿制的早期，醋酸菌与其他微生物的种间关系是______。在米醋的酿制的中后期，一般不会有其他杂菌干扰，其原因是___________。 28．（13分，每空1分）根据题意，回答下列问题： Ⅰ．科学家从牛的胰腺中分离出由76个氨基酸组成的一条多肽链（Ub）。研究发现：Ub在细胞自我检测和去除某些“不适用蛋白质”（即：靶蛋白）的机制中扮演着重要角色。如果某个蛋白被贴上Ub这个标签，就会被运送到细胞内的蛋白酶体处被水解掉，过程如图所示。 请回答下列问题： (1)Ub含有________个肽键，其合成场所是________。 (2)①过程说明Ub的作用是识别________并与之结合；由图可知细胞中去除“不适用蛋白质”的过程需要________、________和Ub、蛋白酶体等条件。 (3)被降解的蛋白质产生的氨基酸可以用于________或________。 Ⅱ．2008年9月“三鹿”婴幼儿奶粉受污染事件震惊全国，部分食用了受污染奶粉的婴幼儿产生肾结石病症。究其原因是因为在奶粉中掺入非食用的三聚氰胺（C、N、H）冒充蛋白质。三聚氰胺是“含氮之王”，在小分子有机化合物中，它含有的最高，达到66.7%，而一般蛋白质中含量为16%。400奶粉中加入了1三聚氰胺，相当于增加4．1蛋白质的含氮量，这对人体及婴幼儿非常有害。某研究性学习小组想用实验方法鉴定市场某奶粉的各种成分是否符合标准。 (4)如果该奶粉中含有葡萄糖，则用________试剂检验，会出现________沉淀。 (5)如果该奶粉中含有脂肪，则用________检验，会出现________色颗粒。 (6)如果该奶粉中含有蛋白质，则用试剂________检验，会出现________色反应。 29．（8分，除标注外每空1分）脂肪是细胞内良好的储能物质，当生命活动需要时可以分解利用；脂滴是存储和转运脂肪的细胞器。回答下列问题： (1)脂肪是由脂肪酸和______发生反应而形成的酯，除了供能，其在生物体内的作用还有__________（答出2点）（2分）。 (2)糖类代谢异常时，脂肪可分解为脂肪酸为机体供能。为研究脂肪酸供能的转运路径，科研人员让小鼠成纤维细胞摄入红色荧光标记的外源脂肪酸后，分别置于细胞培养液和无机盐缓冲液中培养，用绿色荧光、蓝色荧光分别标记细胞的脂滴和线粒体，分析荧光重合率，结果如表所示。 处理时间 重合率/% 培养液类型 0h 24h 红绿荧光重合 红蓝荧光重合 红绿荧光重合 红蓝荧光重合 细胞培养液 97 3 97 3 无机盐缓冲液 97 3 38 62 ①在上述实验中，细胞供能充足的条件下，脂肪一般不会参与供能，据表分析，依据是______。（2分） ②无机盐缓冲液中培养24h后，红蓝荧光重合率显著升高，说明________。产生这种变化的生理意义是______。 (3)在营养匮乏状态下，有些细胞的细胞质基质中会出现游离脂肪酸的过量堆积，导致脂毒性的发生。细胞出现脂毒性的原因可能是______（多选）。 A．线粒体膜上的脂肪酸转运蛋白功能缺陷 B．内质网合成脂滴的能力增强 C．细胞膜上脂肪酸摄入通道关闭 D．脂肪酸无法及时转运到脂滴 30．（10分，除标注外每空1分）磷脂酸（PA）是调节植物生长发育和逆境响应的重要信使物质。为了解植物细胞中PA的动态变化，研究人员利用重叠延伸PCR（重叠链相互搭桥、互为模板而延伸，最终将不同来源的DNA片段拼接起来）将高度专一的PA结合蛋白（PABD）基因与绿色荧光蛋白（GFP）基因融合，构建有效监测细胞PA变化的荧光探针，并测定拟南芥细胞内PA含量。利用重叠延伸PCR获取融合基因的基本过程如图1所示，所用的Ti质粒如图2所示，请回答下列问题： 注：Nco Ⅰ、BamH Ⅰ、Sac Ⅰ、Sal Ⅰ为限制酶酶切位点。启动子1、2属于真核细胞表达系统，Sm+是链霉素抗性基因，Amp+是氨苄青霉素抗性基因，GUS基因编码的酶能将无色物质X-Gluc分解，使植物细胞呈蓝色。 (1)PCR反应中的每次循环一般分为变性、______、延伸三步。 (2)图1中的PCR1和PCR2不能置于一个PCR体系中同时进行，原因是______。为了重叠链顺利延伸，杂交的两条链分别为______（从字母“a”“b”“c”“d”中选）。获得融合基因后，用引物1和4继续进行PCR大量扩增该序列。 (3)根据图2中Ti质粒的结构及后续筛选的需要分析，在设计引物1和4时需分别加入限制酶___（2分）的识别序列。经过相应酶切处理后，将融合基因与该质粒在DNA连接酶作用下形成重组质粒。为了提高重组质粒导入农杆菌的效率，一般要用______处理农杆菌。 (4)用农杆菌侵染拟南芥后，为了将被侵染的拟南芥细胞进行脱菌处理以及筛选含有融合基因的拟南芥细胞，培养基上需要添加______（2分）。然后，通过______技术可培育出完整的转基因拟南芥植株。 (5)通过观测转基因拟南芥根尖细胞中______，了解PA的分布和含量。 试题 第7页（共8页） 试题 第8页（共8页） 试题 第1页（共8页） 试题 第2页（共8页） 学科网（北京）股份有限公司 $