四川省南充市西充中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题

**基本信息** 试卷围绕微生物发酵、细胞工程、基因工程等核心内容，融合《齐民要术》酿醋工艺与CRISPR-Cas9等古今生物技术情境，强化生命观念建构与科学探究能力考查。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单项选择题|25/50|微生物培养、发酵技术、胚胎工程等|基础概念与情境应用结合，如第2题传统酿醋工艺分析| |非选择题|4/50|生物技术实践、现代生物科技|实验设计与综合应用并重，如27题动物细胞培养实验步骤完善，28题ADC药物构建体现科学思维与态度责任|

四川省西充中学2025-2026学年度下学期期中考试高2024级生物试题 时间:75分钟 满分：100分 一、单项选择题（每小题只有一个正确答案，每小题2分，共50分） 1．在果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作过程中，用到的微生物分别是（　） A．酵母菌、酵母菌、毛霉、乳酸菌 B．酵母菌、醋酸菌、毛霉、乳酸菌 C．毛霉、醋酸菌、乳酸菌、酵母菌 D．酵母菌、乳酸菌、毛霉、醋酸菌 2．《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列有关叙述错误的（　） A．该方法的原理是醋酸菌在缺少糖源时可将乙醇最终转化为乙酸 B．加水的目的是对酒进行稀释，避免酒精浓度过高杀死酵母菌 C．“衣”位于变酸的酒表面，是由醋酸菌大量繁殖形成的 D．挠搅有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧 3．为了从土壤中筛选对抗生素有抗性、能高效降解淀粉的微生物，研究人员利用土壤浸出液进行了如图所示操作。下列说法不正确的是（　　） A．在X培养基上接种的方法为平板划线法 B．X培养基含有淀粉和抗生素，Y培养基是不含琼脂的液体培养基 C．菌落①可能是硝化细菌，因不能产生淀粉酶所以无透明圈 D．图中降解淀粉最高效的是菌落⑤，可根据菌落特征初步判断微生物类型 4．传统食醋酿造过程中，发酵液表面产生的凝胶状膜主要为细菌纤维素，研究人员通过 实验研究了细菌纤维素生产过程中各种指标的变化情况，获得的参数曲线如下图。下列有 关叙述正确的是 （  ） A．食醋酿造过程中的主要菌种为醋酸菌，能在缺少糖源和氧气时将酒精转化为醋酸 B．传统食醋酿造过程中，发酵液表面的细菌纤维素来自细菌的高尔基体 C．菌体的密度检测用的是抽样检测法 D．随着发酵的进行，发酵液pH 下降，后期应只有醋酸菌在繁殖 5．灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是(　) A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行 B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染 C.为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌 D.可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌 6．为了解病原微生物对四种抗生素的敏感程度，某研究小组进行了相关药敏实验，图1为部分实验器材。将含有相同浓度的抗生素Ⅰ～Ⅳ四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的平板上，实验结果如图2。下列相关叙述正确的是(　　) A.为获得长满测试菌的平板，需要使用图1中器材①②③ B.图2中Ⅱ形成的抑菌圈较小，可能是病原微生物对药物较敏感 C.图2抑菌圈中的菌落可能是在抗生素Ⅳ作用下产生了突变株 D.不同抗生素在平板上的扩散速度不同会影响实验结果 7．菌株甲为大肠杆菌的甲硫氨酸（Met）营养缺陷型，菌株乙为苏氨酸（Thr）营养缺陷型，分别受 a、 b 基因控制，在基本培养基（M）上不能生长，但可在添加相应氨基酸的培养基上生长。将上述 两菌株的菌液混合一段时间后，从中筛选出 4 种菌株，4 种菌株在不同培养基上的培养结果见表。下列分析不合理的是（　　）注：“＋”表示能生长，“－”表示不能生长。 菌株 培养基 M M＋Met M＋Thr M＋Met＋Thr 菌株Ⅰ － ＋ － ＋ 菌株Ⅱ － － － ＋ 菌株Ⅲ － － ＋ ＋ 菌株Ⅳ ＋ ＋ ＋ ＋ A．菌株甲可能缺少合成甲硫氨酸的酶 B．菌株Ⅰ和菌株Ⅲ分别为菌株甲和菌株乙 C．菌株Ⅳ可能来自菌株甲或菌株乙的基因突变但不可能发生基因重组 D．菌株Ⅱ和菌株Ⅳ的基因型可能分别为 ab、AB 8．甘蔗榨糖后的废弃液——糖蜜中含有较多蔗糖，为了提高甘蔗的整体利用价值，中国科学家运用生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌，以糖蜜为原料，通过发酵工程生产 PHA 等新型高附加值可降解材料。嗜盐单胞菌产生的 PHA 在营养物质丰富时会贮存在细胞中，营养物质不足则被分解以维持细胞代谢。以下说法正确的是（  ） A．用于发酵工程的菌种，可以从自然界中筛选，也可以通过单倍体育种获得 B．选育好的菌种需要经扩大培养后再接种至发酵罐中 C．发酵过程糖蜜浓度越高越有利于嗜盐单胞菌的生长繁殖 D．直接将培养液过滤即可以从滤液中获得 PHA 9．巴氏杀菌乳是以生牛（羊）乳为原料，经巴氏杀菌等工序制得的液体产品，根据国家标准（GB19645-2010）每毫升合格巴氏杀菌乳中细菌总数不得超过50 000个。某兴趣小组进行了新鲜牛奶合适的消毒温度的探究，下列相关实验操作不合理的是（  ） A．配制牛肉膏蛋白胨培养基并在121 ℃、100 kPa条件下处理15～30 min B．将等量的新鲜牛奶分别置于60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃恒温水浴锅中处理15 min C．对处理后的牛奶进行梯度稀释后，利用稀释涂布平板法接种在平板上并在30～37 ℃下培养1～2 d D．统计培养基上全部菌落数，以菌落数最少组的处理温度作为最适消毒温度 10．如图所示亲本植株体细胞染色体数为2n，甲、乙、丙、丁表示以亲本植株为材料进行的四种人工与育种过程。下列叙述错误的是（ ） A．四种人工育种过程都用到了植物组织培养技术 B．子代植株基因型与亲本基因型相同的是乙、丙 C．过程①培养基中生长素与细胞分裂素比值较小时，有利于根的分化 D．与传统的杂交育种相比，丁过程的优点是克服远缘杂交不亲和的障碍 11.中药材怀菊含有多种活性物质，具有清热、明目等功效。植物组织培养技术可用于怀菊的脱毒和快速繁殖。下列叙述正确的是(　　) A.怀菊中含有的次生代谢物通常是怀菊基本生命活动所必需的 B.怀菊快速繁殖过程中产生的体细胞突变可通过无性生殖遗传 C.利用怀菊的茎段作为外植体，通过植物组织培养可获得脱毒苗 D.生芽培养基中细胞分裂素与生长素的比值比生根培养基中的小 12.不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，让其与未经射线照射的受体细胞融合成杂种细胞的技术。所得融合细胞含受体的全部遗传物质及供体的部分遗传物质。研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，期望培育能产生紫杉醇的柴胡。科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，结果如下： 后代植株类型 染色体数目及形态 DNA分子标记鉴定 甲 12，与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段 乙 12，与柴胡染色体相似 无红豆杉DNA片段 丙 12，与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段和新的DNA片段 下列叙述错误的是（  ） A．红豆杉与柴胡融合前需进行细胞去壁处理，且需对柴胡的原生质体进行射线处理 B．可用高Ca2+--高pH融合法、离心法等方法诱导原生质体融合 C．后代乙类型一定不是所需植株，后代甲和丙类型不一定能够产生紫杉醇 D．红豆杉亲本的遗传物质可能是以DNA片段的方式整合进柴胡的基因组 13.下列关于细胞工程的的相关“检测”的叙述，正确的是（    ） A．“作物脱毒”是否成功可以接种一定的病毒来检测 B．传代培养的成纤维细胞是否癌变可通过核中的染色体分析而确定 C．植物体细胞杂交过程中“去壁”过程是否充分，可取样用低渗溶液鉴定 D．单克隆抗体制备获得的杂交瘤细胞是否满足生产需求，可用HAT选择培养基鉴定 14.细胞悬浮培养是将细胞接种于液体培养基中并保持良好分散状态的培养方式，细胞悬浮培养常在发酵罐等生物反应器中进行。下列叙述错误的是（ ） A．在动物细胞的悬浮培养过程中，可以适当添加抗生素来保持无菌的培养环境 B．利用发酵罐生产单细胞蛋白时，可以直接对细胞悬液进行过滤、离心得到产品 C．细胞产物的工厂化生产中，植物细胞培养也属于细胞悬浮培养 D．悬浮培养的动物细胞在传代培养过程中需用胰蛋白酶处理 15．科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原，制备出了单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（　　） A．利用该单克隆抗体可以诊断是否感染SARS病毒 B．体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体 C．将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 D．将纯化的核衣壳反复注射到小鼠体内，从小鼠血清中分离出的抗体为单克隆抗体 16.胚胎工程技术的迅速发展实现了优良家畜品种的大量繁殖，能显著提高畜产品质量改善人民生活，还可以解决濒危动物繁育的问题。下列有关哺乳动物胚胎工程的叙述，正确的是(　　) A. 体外受精需加入聚乙二醇等诱导精卵结合 B.在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体，标志着卵子受精 C.卵裂在透明带内进行，此时胚胎细胞数量和总体积不断增加 D. 排卵就是排出成熟卵细胞的过程，采用胚胎分割技术不可对囊胚或桑葚胚进行无限次分割 17．某牧场引进一只产肉性能优异的良种公羊，为了在短时间内获得具有该公羊优良性状的大量后代，该牧场利用胚胎工程技术进行了相关操作。下列叙述正确的是(　　) A.采集到的精子需用高浓度的ATP溶液进行获能处理 B.在雌性个体饲料中添加促性腺激素有利于超数排卵 C.产生的受精卵在原肠胚阶段会发生有丝分裂和细胞分化 D.分割体外受精得到的胚胎所产生的子代表型完全相同 18.首次实现哺乳动物体外受精：从兔子的子宫回收获能的精子在体外同卵子结合，然后根据同步化的原理，将早期胚胎移植到另一只假孕雌兔的子宫中，经过“借体怀胎”繁殖出世界上第一只通过体外受精培育成功的仔兔。下列叙述错误的是（　　） A．为防止受体对移植的胚胎发生免疫排斥，供体和受体要进行同期发情处理 B．由桑葚胚到囊胚期细胞的核质比逐渐增大 C．囊胚期透明带会破裂，胚胎从中伸展出来的过程叫孵化 D．在自然条件下，哺乳动物的受精过程和早期胚胎的发育均在输卵管中完成 19.精子载体法是以精子作为外源基因载体携带外源基因进入卵细胞，如图表示用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列叙述正确的是(　　) A.①过程需将成熟的精子放入ATP溶液中进行获能处理 B.②采用体外受精技术，受精卵中的遗传物质来自父母双方 C.②③过程所用培养液的成分相同且都加入动物血清 D.题述过程中，需要对代孕母鼠用相关激素进行同期发情处理 20．Leigh氏综合征患者中20%~25%是由线粒体基因突变导致的。一位母亲约有1/4的线粒体携带这种线粒体突变基因，她的前两个孩子因患有该病而死亡。她的第三个孩子因为接受了另一名女性捐赠的健康基因而成为全球首个拥有“三个父母”的男婴。下图表示该男婴的孕育过程，下列说法错误的是（  ）。 A．该健康男婴孕育过程中使用了动物细胞培养、核移植、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术 B．图示过程中代表该母亲卵母细胞的是卵母细胞A C．若卵母细胞B的提供者是红绿色盲患者，则这个男婴一定是红绿色盲患者 D．体外受精获得的早期胚胎，可培养至桑葚胚或囊胚阶段进行胚胎移植 21．下列关于基因表达载体构建的描述，正确的是（    ） A．构建基因表达载体需要限制酶和DNA聚合酶 B．基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止密码子、标记基因等组件 C．培育膀胱生物反应器应将药物蛋白基因与乳腺细胞特异表达的启动子等控件重组构建表达载体 D．标记基因的作用是便于重组DNA分子的筛选 22．下列关于生物工程相关知识的叙述，正确的项数是（　　） ①植物组织培养过程中愈伤组织的代谢类型是自养需氧型 ②B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，在聚乙二醇的诱导下，融合成的细胞只有杂交瘤细胞 ③基因治疗是把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的 ④PCR技术需要利用限制性核酸内切酶打开DNA双链 ⑤牛早期胚胎发育的历程是：受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚 ⑥利用植物茎尖培养脱毒苗时，全程都需要光照 A．2项 B．3项 C．4项 D．5项 23.如图是三种限制酶的脱氧核苷酸识别序列和切割位点示意图(↓表示切点)。下列相关分析错误的是（ ） A．这三种限制酶切割出的DNA片段末端都是黏性末端 B．不同限制酶切割DNA所得的黏性末端可能相同 C．能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割 D．同一个DNA分子经限制酶1和限制酶3分别切割后所得片段数一定相等 24．下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。下列说法正确的是（　　） 限制酶 BamHI HindⅢ EcoRI SmaI 识别序列及切割位点 G↓GATCC CCTAG↑G A↓AGCTT TTCGA↑A G↓AATTC CTTAA↑G CCC↓GGG GGG↑CCC A．一个图1所示的质粒分子经SmaI切割前后，分别含有1、2个游离的磷酸基团 B．若对图中质粒进行改造，插入的SmaI酶切位点越多，质粒的热稳定性越低 C．与只使用EcoRI相比较，使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒和外源DNA可以防止质粒和含目的基因的DNA自身环化 D．为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在只含蔗糖的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测 25．通过设计引物，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。下图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2的5′端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。下列有关叙述正确的是（ ） A．在PCR反应体系中还需要加入4种游离脱氧核糖核苷酸、ATP、Taq DNA聚合酶等 B．第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/4 C．引物中设计两种限制酶识别位点有利于DNA聚合酶识别和结合 D．第2轮PCR，引物2能与图中模板结合并且形成两条链等长的突变基因 26.聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为获得高产磷脂酶的微生物，研究人员试验了2种方法。回答下列问题： (1)方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇胺(一种磷脂类物质)为唯一碳源制备________培养基，可提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有______________（答三种）等营养物质。 (2)方法2采用________ 技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基因外，该技术还需要________、________、________等“分子工具”。 (3)除了上述2种方法之外，还可以通过________技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物。 27．“苹果酸/天冬氨酸穿梭”途径(MAS)广泛存在于动物细胞中，影响着细胞的能量代谢。MAS抑制剂MAS途径进而抑制细胞增殖，为癌症的治疗提供了新思路。下表为研究MAS抑制剂对黑色素瘤细胞增殖影响的实验步骤和操作过程，请完成表格： 实验步骤 简要操作过程 配制动物细胞培养液 用蒸馏水、无机盐、葡萄糖、氨基酸及维生素等制备合成培养基，还需添加适量的① 等天然成分，按配方经计算、称量、溶解等步骤配制动物细胞培养液 防止培养过程中杂菌污染 动物细胞培养液要添加适量的② 配制不同浓度MAS抑制剂溶液 用③ 作溶剂，配制具有一定浓度梯度的MAS抑制剂溶液 ④ 将黑色素瘤细胞接种到动物细胞培养液中，在适宜条件下培养，获取处于对数生长期的细胞 将细胞培养至分裂高峰 将培养瓶置于96孔培养板中培养24小时，水平晃动培养瓶，使⑤ ，再继续培养48小时 对照组处理 将黑色素瘤细胞适度稀释后接种到96孔培养板中，培养24h后观察到正常贴壁，弃去原培养液，加入新鲜培养液 实验组处理 ⑥ 实验结果统计 在培养24、48和72h后，用合适方法分别统计各组黑色素瘤细胞的增殖率 28.为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如图1所示。 （1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自 　 　。 （2）步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和 　 　才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在采用体外培养时，首先应保证 其处于 　 　的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件是 　 与5%二氧化碳的混合气体。在使用合成培养基时通常需加入血清，血清的作用是 　 　。 （3）研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。 ①单单克隆抗体是ADC中的 　 　（填“a”或“b”）部分。克隆抗体除了运载药物外，还有 　 　等作用。 ②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致 　 　 。 ③ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，是因为单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，该过程依赖于 　 原理。 29.CRISPP/Ces9是一种高效的基因编辑技术，通过切割DNA双链以敲除目标基因或插入新的基因。科学家构建了如图所示的两种质粒，并包埋于脂质体中，然后将脂质体加入含受体细胞的培养皿中，实现了基因转移。回答下列问题： （1）研究发现CRISPR﹣Cas9系统广泛存在于细菌细胞内，类似限制酶，不会破坏自身DNA,原因： 　 。CRISPR﹣Cas系统中 Cas9蛋白具有内切酶活性，水解目标DNA的 　 　 （填化学键）。 （2）实验中利用脂质体能实现基因转移的原理 　 。24 h后在培养皿中添加 　 筛选并进行单细胞培养，经检测后即可得到基因编辑后的细胞。此过程须在37℃，气体环境为95%空气+5% CO2的装置中进行。 （3）转染好的细胞用裂解液消化后，使用RNA提取试剂盒提取总RNA，使用反转试剂盒选行逆转录，最终得到 　 　，再进行PCR。进行PCR时，a个双链DNA经过n轮扩增，理论上至少需要的引物数量为 　 。 高2024级期中测试卷---生物科 班级： 姓名： 一、单项选择题（每小题只有一个正确答案，每小题2分，共50分） 题 号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 答 案 题 号 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 答 案 26.（除标注外，每空1分，共,8分） (1) ________， ________________________ (2) 、 、 (3) （2分） 27．（每空2分，共12分） ① ________， ② ③ ④ ⑤ ⑥ 。 28. （每空2分，共18分） （1）　 　 （2）　 　 　 　 　 　 　 （3） ①　 　 　 　 ②　 　 ③　 29. （每空2分，共12分） （1）　 。　 　 。 （2）　 。　 　。 （3）　 　 ， 　 。 参考答案 1-25.BBACD D CBDC BACDA BCADB DADCB 26.答案　(1)选择　氮源　水　无机盐　(2)转基因(或重组DNA或基因工程)　限制酶　DNA连接酶　载体　(3)诱变育种 27.【答案】 动物血清 抗生素 动物细胞培养液 黑色素瘤细胞的培养 细胞与培养液充分接触 按照对照组方法处理，弃去原培养液后分别加入等量的不同浓度MAS抑制剂 28.（1）人的乳腺癌细胞（3）抗体检测 无菌无毒 95%空气 为动物细胞培养提供未知生长因子 （5） ① a 作为诊断试剂 ②癌细胞凋亡 ③抗原﹣抗体杂交 29.（1）细菌DNA 上没有该限制酶的识别序列 磷酸二酯键 （2）生物膜具有一定的流动性 抗生素G418和嘌呤霉素 （3）cDNA （2n+1﹣2）a 1 学科网（北京）股份有限公司 $