辽宁省实验中学2025-2026学年度下学期期中考试 高二 生物学试卷

期中生物答案 1-5 DCBBC 6-10ACADB 11-15 BCBBD 16.AB 17.BCD 18.BD 19.ACD 20.ABC 21.(8分，除特殊标记每空1分) (1) 代谢 选育菌种 (2) 缺失敲除 不含 (3)与菌株乙相比，菌株丙的内源酶基因2替换为B基因，不受负反馈抑制，可以更快消耗 α酸合成更多异亮氨酸，因此菌株丙的酸含量比菌株乙低，异亮氨酸含量比菌株乙高。(2 分) (4)改造菌株，使其能利用比葡萄糖更经济的原料（如分解纤维素）：转入异亮氨酸外转运蛋 白，从发酵液中直接提取异亮氨酸等(2分) 22.(7分，除特殊标记每空1分) (1)碳源、氮源（合理即可） 湿热（高压蒸汽） (2)消耗细胞内的H (3)谷氨酸 梯度稀释 通过最适pH培养获得的菌落检测pH-4.6培养基中菌株的存活率(2分) 23.（12分，每空2分) (1)高纤维素酶和果胶酶聚乙二醇PEG)融合法、高Ca2+-高pH融合法 (2)3 既有红色荧光又有绿色荧光 (3)打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 24.（14分，每空2分) (1)促性腺激素 MII 同期发情 (2)流动 动物体细胞核移植 胚胎移植（转基因） (3)桑葚胚或囊胚 25.(14分，每空2分) (1)使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 ③ (2)PCR扩增（合理即可） (3)21B 目的基因两端的同源臂与线性化载体两端的序列特异性同源，可通过 同源交换定向连接目的基因，避免了自身环化和反向连接 (4)3961bp辽宁省实验中学2025-2026学年度下学期期中考试 高二生物学试卷 考试时间：75分钟试卷满分：100分 命题人、校对人：王楠、单羽 一、选择题（本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目 要求的。) 1,下列有关传统发酵叙述正确的是() A.制作果酒时开始便持续向装置中通入适量氧气将导致酵母菌大量死亡，酒精减产 B.果酒应密封保存，否则醋酸菌可利用酒精直接转化为乙酸影响口感 C.与制作果酒相比，果醋的制作需在较低温度条件下进行 D.豆腐中的蛋白质经毛霉等微生物的发酵分解成小分子的肽和氨基酸，味道鲜美 2.幽门螺杆菌（含有脲酶）感染是慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成 菌液后，进行分离培养。下列有关叙述正确的是() A.鉴别幽门螺杆菌时应在培养基中加入酚红指示剂和缓冲液 B.若空白对照组长出了菌落，则应将实验组的菌落数减去空白对照组的菌落数 C.分离纯化幽门螺杆菌时可以使用以尿素为唯一氮源的培养基 D.对幽门螺杆菌进行分离和计数可用平板划线法或稀释涂布平板法 3.某种嗜盐细菌合成的聚羟基脂肪酸酯(PHA),可用于制造无污染的绿色塑料'。下图是从咸水湖中寻 找PHA的高产菌种的过程。下列叙述错误的是() ①取湖水一→O,一→⑧培养一④势素美禁一⑤棉具一⊙跟 分别扩大培养 A.配制步骤②③④的培养基时，需要相对高浓度的盐溶液 B.最终获得的目标菌株，具有细菌数量与PHA含量的比值大的特征 C.步骤③要使用固体培养基培养细菌，才能获得单菌落并纯化菌株 D.若从土壤中寻找菌种，可能在②之前要对土壤浸出液进行梯度稀释 4.下列关于植物细胞工程技术的叙述正确的是() A.利用花药离体培养获得单倍体植株的过程不涉及植物组织培养技术 B.植物细胞工程技术可用于对进行无性繁殖的作物进行脱毒苗的培育 C.在有光照的条件下进行植物组织培养，培养基中不需添加有机碳源 D.细胞产物的工厂化生产，主要是通过提高单个细胞的次生代谢物的产量来实现的 5,铁皮石斛是我国特有的名贵珍稀频危中药材，生物碱是铁皮石斛的有效成分之一。研究人员应用组织 培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs,类似愈伤组织）生产生物碱。在固体培养基上，PLBs质量、 生物碱含量随培养时间的变化如图所示。下列相关叙述正确的是() 试卷第1页，共10页 PLBs质量（光照） 生物碱含量（光照） 0.040 年10 PLBs质量（黑暗） 0.035 0.030 亨 0.025 6 /0.020 0.005 0102030405060 培养时间(d) A.培养过程中需把赤霉素生长素的比值控制在适宜范围内 B.图示结果表明生物碱的产量会随PLBs质量增加而不断增加 C.常选用野生铁皮石斛的茎尖作为外植体是因为茎尖几乎不含病毒 D.图示结果表明光照条件只影响LBs质量而不影响生物碱产量 6.花椰菜(2n=18)种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰(2=14)具有一定的抗病性。科研人员 利用植物体细胞杂交技术培育了具有抗病性状的花椰菜新品种（过程如图1所示），并进一步通过蛋白质 电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果如图2所示。下列有关叙述错误的是( I Π12345 花椰菜胚轴 ① I花椰菜 ② Ⅱ紫罗兰 >网+愈伤组织→植株 紫罗兰叶片 图1 图2 A.图1过程应保持在无菌、无毒和5%C02环境条件下培养 B.图2中属于杂种植株的是4和5,1可能是花椰菜 C.图1培育杂种植株利用了植物细胞全能性和细胞膜流动性原理 D.将病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上，一段时间后测定病斑面积占叶片总面积的百分比，可筛选 抗病性强的杂种植株 7.下列关于动物细胞培养及干细胞的应用的叙述，正确的是（) A.人体内的干细胞有ES细胞、成体干细胞、PS细胞三类 B.动物细胞培养需要CO2,CO2的主要作用是刺激细胞呼吸 C.PS细胞可在适当诱导条件下定向分化，PS细胞类似胚胎干细胞 D.动物细胞培养时，可以用胃蛋白酶将组织分散成单个细胞 8.为降低宫颈癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物(ADC), 以便精准治疗，其生理过程如图所示。以下叙述正确的是() 试卷第2页，共10页 注射特 多种B 飞定的抗，原淋巴细胞 ④ ① 一接斗 识别 并结合 培养骨 骨髓瘤细胞 髓瘤细胞 药物释放到 》细胞核细脆质基庆 胞吞 溶酶体 正常细胞 乳腺癌细胞 A.ADC依靠b最终作用于细胞核，a起靶向识别肿瘤细胞的作用 B.小鼠的骨髓瘤细胞在培养过程中通常会出现接触抑制现象 C.制备ADC中的单克隆抗体应用了体细胞核移植、动物细胞培养等技术 D.过程②筛选的杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生所需的特异性抗体 9.我国科学家成功地用PS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基 化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是() 小分子化合物 小鼠成纤① →PS细胞 Kdm4d的mRNA 维细胞 ③，重构胚④→克隆鼠 卵母细胞②去核卵母细胞 TSA A.组蛋白脱乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程 B.③过程中使用有活性的病毒处理的目的是诱导细胞融合 C.①过程的小分子化合物诱导小鼠成纤维细胞突变为PS细胞 D.用电刺激、C+载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 10.下列有关胚胎工程理论基础的叙述，正确的是() A.胚胎分时通常分离内细胞团细胞做DNA分析，鉴定性别 B.在透明带内的卵裂过程，细胞数目不断增多，但胚胎总体积基本不变 C.囊胚期的细胞开始出现了分化，透明带发育成胎盘和胎膜 D.孵化是指原肠胚细胞突破卵细胞的过程 11.我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌 小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如图所示，下列叙述正确的是() ⊙澈活暗养：转化， 基因编辑 之 具精子细胞核 甲 孤雌小鼠 卵细 孤雌胚胎干细胞 (phESC) 特点的phESC ⊙ -> 激活、培养、转化 基因编辑 之2 .-© 孤雄小鼠 精子 孤雄胚胎干细胞 具卵细胞细胞核 (ahESC) 特点的ahESC 试卷第3页，共10页 A.重构胚通常要发育到原肠胚阶段才进行胚胎移植 B.卵细胞转化成pESC相当于植物组织培养中的脱分化过程 C.不考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成为XX,XY D.利用胚胎分割的方法对甲进行处理得到了多只孤雌小鼠遗传物质不同 12.Bt基因是培育转基因抗虫棉较为合适的目的基因，筛选Bt基因后可以利用PCR技术对其进行大量扩 增，下图为抗虫棉的培育过程，下列相关叙述错误的是() 苏云金 基因 转入 杆菌 农杆菌 O 构建基因 T-DNA 表达载体 感染 T质粒 月的装因 组织 体DNA用 培养 抗虫棉 棉珠细胞 A.以上导入目的基因的方法是农杆菌转化法，农杆菌中Ti质粒上的T-DNA可转移 B.如果把目的基因整合到线粒体DNA或叶绿体DNA上，可能导致后代目的基因丢失 C.PCR扩增Bt基因需要知道Bt基因的全部核苷酸序列 D.检测目的基因是否成功表达所用的分子水平上的方法之一为抗原一抗体杂交 13.TP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将TP9基因转到玉 米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中HP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙 述错误的是() 终止子 启动子 BamH I EcoR I Mfe I HindⅢ BamH I Mfe I 氨苄青霉素 5' -31 抗性基因 -EcoR I 一HindⅢ 引物1 引物2 启动子 Kpn I 引物3 引物4 终止子 3' 1 EcoR I Kpn I THP9基因 EcoRI BamHI KpnI Mfel HindΠI 5-GIAATTC-3' 5-GLGATCC-3 5-GIGTACC-3' 5-CLAATTG-3 5-ALAGCTT-3 3-CTTAA↑G5' 3-CCTAG↑G-5' 3'-CCATG↑G-5 3'-GTTAA↑C-5' 3-TTCGA↑A-5 A.TP9基因有2个游离的磷酸基团，而且游离的磷酸基团在5端 B.利用PCR技术获取THP9基因时应选择引物1和引物4 C.构建基因表达载体时，用MfeI、HindIII切割质粒，用EcoRI、HindIII切割目的基因 D.PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Mg+用于激活DNA聚合酶 试卷第4页，共10页 14.基因PC定点突变是蛋白质工程的重要技术，该技术需要设计含有非特异性配对碱基的引物，再通过 PCR将突变位点引入到产物中。重叠延伸PCR是发展最早的定点突变技术，其操作流程如下图所示。下 列分析错误的是() 拟突变位点 -31 5 1① 引物2引物4 ③ 人二 33 引物1引物3 A.蛋白质工程可以创造新的、自然界中不存在的蛋白质 B.步骤④使用DNA聚合酶可对杂交分子甲和乙进行延伸 C.应将引物1、2与引物3、4置于两个独立的反应体系中 D.步骤⑤中如果完成6轮循环一共需要消耗63个引物1 15.某兴趣小组为探究手机屏幕表面细菌的分布状况，采集手机屏幕上的细菌样本并制成菌液，随后进行 了如下实验。在初步筛选后，将平板B上的菌落通过“影印”方法接种至含有链霉素的C培养基上培养，使 C培养基上呈现出与平板B对应位置完全相同的菌落。随后用伊红-亚甲蓝染液对平板C进行染色，得到 平板D的结果。再用同样的操作方法，影印至含有青霉素的F培养基上培养得到菌落。下列相关叙述错误 的是() 深紫色，并有金属光泽 /1°●2 3影印 染色 获取的手机 屏幕菌液 B D F A.对菌液进行系列梯度稀释，菌落数为30300时适合进行计数 B.通过对平板B、C、D的比较，可以判定平板B中只有菌落3是大肠杆菌的菌落 C.使用稀释涂布平板法计数的结果往往比直接对采集的细菌样本计数结果偏小 D.根据实验现象推测，菌落2具有链霉素抗性，菌落4则具有两种抗生素的抗性 二、选择题（本小题共5个小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或者多项 是符合题目要求的，全部选对得3分，选对但选不全得1分，选错得0分) 16.下列有关DNA粗提取与鉴定DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述正确的是() A.取洋葱研磨液离心后的上清液，加入等体积的95%的冷酒精可析出DNA B.电泳时，DNA分子的迁移速率与琼脂糖凝胶浓度有关 C.随着PCR的进行，DNA聚合酶和模板DNA的分子数量在逐渐减少 D.在琼脂糖凝固前加入指示剂，待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，停止电泳 17.科研人员为统计牛瘤胃内的液体中纤维素分解菌的数量并挑选出能高效分解纤维素的目的菌，进行了 试卷第5页，共10页 如下实验。平板①、②、③上菌落数的最大值分别为60、63、66个，下列叙述正确的是() 1mL1mL1mL 1ml 门透明圈、 ① 重复2次 ② 刚果红 菌落甲 9mL 染液 菌落乙 无菌水 ③ 牛瘤胃内的液体101102 105 各接种0.2mL A.为了利于挑选出目的菌，培养箱内应氧气充足、温度适宜 B.该牛瘤胃内的液体中纤维素分解菌的密度约为3.15×107个mL C.从菌落甲中更有可能得到高效分解纤维素的目的菌 D.上述实验用到的各平板中，纤维素是唯一的碳源 18.如图，核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径。正常细胞内含有补救合成途径所 必需的转化酶和激酶。制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞缺乏转化酶。现用加入H、A、T三种物质的 “HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。下列关于筛选原理的叙述，正确的是() 全合成途径：糖和 氨基酸 A(阻断) →核苷酸→DNA 转化酶和激酶 补救合成途径：H、T A.免疫的B淋巴细胞及其相互融合细胞因全合成途径被A阻断，在HAT培养基上不能增殖 B.骨髓瘤细胞及其相互融合细胞因无法进行上述两个途径，而在HAT培养基上不能增殖 C.杂交瘤细胞因为可进行上述两个途径，能在HAT培养基上大量增殖 D.从功能上划分，单克隆抗体制备过程使用的AT培养基属于选择培养基 19.下列有关哺乳动物受精作用的叙述错误的是() A.精子穿越透明带时，透明带迅速反应，阻止后来的精子进入透明带 B.获能的精子与发育至MⅢ期的卵子相遇时，才可发生受精作用 C.精子的细胞膜与卵细胞膜融合，卵细胞膜迅速反应，拒绝其他精子再入卵 D.在胚胎工程操作中，常以观察到两个第二极体或雌、雄原核作为受精的标志 20.基因工程中，使用单个限制酶酶切构建的表达载体易出现连接方向错误和重复插入目的基因片段等现 象，可通过酶切及筛选标记鉴定出符合预期的重组载体。研究小组选用的载体P和目的基因CDS片段特 征如图，将CDS片段插入载体P的SacⅡ位点后对重组载体进行扩增、筛选和检测。下列叙述正确的是 () 试卷第6页，共10页 Sae 110.5kb EcoR I SacIⅡ P -SacⅡ (4.2kb) PstI 2.6kb CDS 注：LcZ基因表达产物为β-半乳糖苷酶，X-gal会被B-半乳糖苷酶分解，产生蓝色产物，X-gal没被分解时， 菌落表现为白色 A.含重组载体的宿主细胞在含X-gal的培养基上，菌落颜色为白色 B.重组载体被PstI充分酶切后电泳可能会获得长度为9.4 KbDNA片段 C.用EcoRI与PstI充分酶切重组载体，可判断CDS片段的连接方向 D.用EcoRI与SacⅡ充分酶切重组载体，可得到2个长度的DNA片段 三、非选择题（本题共5个小题，共55分） 21.异亮氨酸是一种必需氨基酸，可用作食品添加剂。研究者希望利用大肠杆菌实现异亮氨酸的高效发酵 生产。 (1)发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的 转化为人类所需要的产物 的过程。为大量生产异亮氨酸，相应的发酵工程一般包括 、扩大培养、培养基的配制和灭菌、 接种、发酵罐内发酵和产物的分离提纯等方面。 (2)C酶是异亮氨酸合成途径的关键酶，若失去功能，细菌不能合成异亮氨酸。为了获得催化效率更高的C 酶，研究者对C基因进行随机诱变，将诱变后的基因分别转入C基因」 的大肠杆菌，在 (含不含)异亮氨酸的固体培养基上进行培养，选择最适的菌株命名为菌株甲。 (3)自然条件下，菌株甲通过图1途径产生异亮氨酸，但是异亮氨酸不会分泌到细胞外，细胞内的异亮氨酸 会反馈作用于内源基因1和内源基因2，限制产量。 内源基因1内源基因2 葡萄糖→→《酸→→异亮氨酸 图1 为解除该限制，研究者对菌株甲进行改造，用外源的不受反馈调节影响的A基因、B基因替代大肠杆菌 对应的内源合成基因，获得菌株乙和菌株丙，如下表所示。 g ■x酸 51 ☐异亮氨酸 菌种 相关基因 菌株甲 内源基因1 内源基因2 菌株乙 基因A 内源基因2 1 菌株丙 基因A 基因B 菌株甲 菌株乙 菌株丙 图2 试卷第7页，共10页 完成替换后，研究者检测对应菌株的α酸和异亮氨酸含量，结果如图2。解释菌株乙和菌株丙中α酸和异亮 氨酸含量产生差异的原因 0 (4)研究者希望用更经济的原料、更简单的分离提纯手段获得发酵产物。请在上述研究基础上，提出一个对 现有菌株继续进行优化改造的研究方向 0 22.琥珀酸是一种天然有机酸，广泛应用于制药、食品等行业。产琥珀酸放线杆菌(SW)生长的最适pH 为7.0，能利用糖类发酵生产琥珀酸，但耐酸能力较弱。 (1)培养SW的培养基包含水、NaCl、KPO4、葡萄糖、蛋白胨等成分，其中蛋白胨为SW提供等， 培养基经 灭菌。 (2)有些微生物进化出由GadC和GadB组成的Gad系统以抵抗酸胁迫。研究人员将编码Gad系统的基因导 入SW中，拟获得耐酸性强的重组菌株GSW(如图1)。当外界环境pH降低时，启动Gad系统，运到细 胞内的谷氨酸(Gu)转化为Y-氨基丁酸(GABA)运出细胞，此过程 导致运出细胞的H 也减少，从而缓解酸胁迫。 Glu GABA 葡萄糖 c w SW菌株 GSW菌株 YYN9X0YY1 109 10-1 10-2 100101 102 ATPGIU GABA 葡萄糖 H FHa C02 PEP丙酮酸 4 ADP+Pi 琥珀酸乙酸乳酸 努 路 等副产物 注：“+“”分别表示添加和不添加某种物质 72 T D0444 *8 图2 图1琥珀酸 (3)研究人员对SW、GSW进行耐酸性实验测定。 ①首先将等量菌液分为两组，分别接种到含和不含且pH为4.6的液体培养基中扩大培养1.5。 ②将上述菌液进行后，依次分别涂布于pH为7的固体培养基上，37℃培养24h,图2所示结果说 明GSW菌株耐酸能力明显提高。此步骤配制的固体培养基pH为7而非4.6，目的是 23.龙牙蕉香味浓郁，但植株易感染枯萎病。某科研团队将贡蕉抗枯萎病的性状整合到龙牙蕉品种中，培 育出抗病龙牙蕉新品种，部分技术流程如图所示。回答下列问题： 龙才 细胞 原生质体 正在融合的 母→恩 原生质存 -￥ 贡蕉细胞 贡蕉 原生质体 习愈伤组织杂种植株 抗病龙牙蕉 杂种细胞 (1)用酶解法制备原生质体时，需要先用较 (填高'或低”)渗透压的溶液处理植物细胞，使细 胞处于微弱的质壁分离状态，然后用 酶去除细胞壁，以获得原生质体。诱导原生质体融合常用 试卷第8页，共10页 的化学方法有 (答出2点)。 (2)科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记龙牙蕉和贡蕉的原生质体膜上的蛋白质，在鉴定杂种原生质体 时，根据细胞膜表面荧光的不同，可观察到 种不同的原生质体（只考虑细胞两两融合的情况）， 当观察到融合细胞的表面 时，可判断该原生质体是由龙牙蕉细胞和贡蕉细胞融合而成的。 (3)与传统杂交育种相比，植物体细胞杂交技术育种的优势主要是 24.科研人员为获得可用于生产基因工程的疫苗，将病毒外壳蛋白基因导入猪体细胞中，然后通过核移植 技术培育转基因猪，具体操作过程如图所示。回答下列问题： 收集A细胞 过程① 1号 回导入病毒蛋白外壳基因 猪体细胞 过程② 移植 公产仔 胚胎 2号 3号 (1)在收集A细胞时需要用 处理1号猪，在体外培养到 时期。为了使胚胎能够成功 移植到2号猪子宫内，需要对2号猪进行 处理。 (2)过程②体现了细胞膜的 性，该转基因猪的培育过程运用了动物细胞培养、 和 等技术。 (3)若想要对移植的胚胎进行分割，应选择 期进行操作。 25.辣椒遗传转化的成功率低，筛选难度大，研究人员以甜菜红素合成基因RUBY为核心构建了可视化载 体pKSE-RUBY,使重组细胞在愈伤组织阶段即可表现出肉眼可见的红色，大幅提高了辣椒转化、筛选的效 率。载体构建过程如下图所示： (引物与邻近单链配对) ① ② EcoR I EcoR I oh RUBY■ RUBY HO- 扩增 RUBY ③ ④ 左同源臂帆， 右同源臂M 转录方向 pKSE-RUBY 同源重组 5'..-CAATTGATTGACACGAATTCGTAATCATGTCATAG.3' (表示省略部分序列) RUBY EcoRI 启动子 终止子 卡那霉素 EcoR I 抗性基因 pKSE 补平 (EcoR I的识别序列及切 割位点是5-G+AATTC3) 线性化载体 试卷第9页，共10页 根据图中信息回答以下问题： (1)扩增基因：基因扩增时需要引物，引物的作用是；扩增RUBY时，上游引物应选择引物（填 序号)。 (2)处理载体：线性化的载体能提高同源重组的效率，图中以EcoRI切开质粒pKSE,再用DNA聚合酶将 黏性末端补平，获得线性化载体。另外，用的方法也能获得线性化载体。 (3)同源重组：由于目的基因与线性化载体的同源区段可发生交换，因此在RUBY两侧需引入同源臂。 ①同源臂包含限制酶识别序列及15个碱基对组成的特异性序列，为保证EcoRI能在重组质粒上RUBY基 因两侧进行切割，下游引物的5'端需添加个核苷酸，选出下游引物额外添加序列中3端的10个碱基： 53' A.GAATTCGTAA B.TTACGAATTC C.ACATGATTAC ②常规的基因表达载体构建过程会用到两种不同的限制酶，图中同源重组的过程中只用到EcoI一种限制 酶，但仍能高效地构建重组质粒，且目的基因能正确连接，原因是。 (4)鉴定质粒：已知pKSE的全长为16441bp,RUBY基因全长为3951bp,则重组质粒经EcoRI切割后，再 将黏性末端补平，会得到长度为的含RUBY基因的片段。 试卷第10页，共10项