黑龙江佳木斯市桦南县一中2025—2026学年度第二学期期中考试 生物学

**基本信息** 以基因工程、细胞融合、克隆技术等现代生物技术为核心，通过“三亲婴儿”“低乳糖奶牛”等科技前沿情境，考查生命观念与科学思维，注重探究实践与态度责任的融合。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选|15题/30分|基因表达载体构建、细胞融合、无菌技术|如第1题考查限制酶与载体组合，第5题结合口罩微生物检测实验，强化科学探究| |多选|5题/15分|细胞融合、核移植、单克隆抗体|如第16题无籽柑橘培育涉及植物组培，第18题双特异性抗体结合肿瘤治疗，体现技术应用| |非选择|5题/55分|发酵工程、克隆技术、基因工程|如第21题秸秆乙醇发酵实验设计，第24题重组质粒构建流程，综合考查实验操作与分析能力，贴近高考命题趋势|

2025一2026学年度第二学期桦南一中期中考试 生物答案 1-5、BCDCB6-10、BDDCD 11-15、BCCAB 16、BCD17、ACD18、ABD19、AC20、B 21(10分)【答案】 (1)菌T能够分泌纤维素酶 (2)高压蒸汽灭菌法（湿热灭菌法） (3)3.6×107(2分) 制造无氧环境 排出二氧化碳 酸性的重铬酸钾 溶液 (4) 葡萄糖 节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本 低、原料来源广(2分) 22(10分)【答案】 (1)胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易 (2)MⅢ（或减数第二次分裂中期)纺锤体-染色体复合物 诱导细胞融合 无菌、无毒的环境：温度、pH、渗透压；气体环境同期发情 (3) 相同 与克隆猴生理状态相同的正常个体(2分) 23(10分)【答案】 (1) 38 4 (2)纤维素酶和果胶酶 避光 生长素和细胞分裂素的比例及光照(2分) (3)类囊体 红光和蓝紫 叶绿素含量高，光反应强：气孔导度大，吸收利 用CO2多，暗反应强 24（12分)【答案】 (1)可直接获得编码蛋白质的基因，不含内含子(2分) (②)防止目的基因自身环化、防止质粒自身环化、保证目的基因与质粒定向连接 (2分其他合理答案也可给分) (3)细胞膜的通透性改变，能吸收周围环境中的DNA分子(2分) (4)不一定(2分)未连接目的基因的空质粒也含氨苄青霉素抗性基因，会在 该培养基上生长(2分) DNA分子杂交技术（或抗原·抗体杂交技术，或 PCR技术)(2分) 25(13分)【答案】 (1)除去蛋白质杂质 溶解蛋白质等物质，析出不溶于酒精的DNA (2)PCR技术扩增 人工合成 (3)增强目的基因的表达(2分) (4)HygBR (5)F3(2分) R2(2分) (6)D(2分) 2025—2026学年度第二学期桦南一中期中考试 生物学 命题：马光玉 校对：孙婉莹 1、 选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项 中，只有一项符合题目要求的。 1．下列工具组合中，可用于构建基因表达载体的是（    ） A．限制酶、DNA聚合酶、质粒 B． 限制酶、DNA连接酶、噬菌体 C．解旋酶、DNA连接酶、动植物病毒 D．逆转录酶、限制酶、质粒 2．人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈 伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列叙述错误的是（    ） A．细胞融合前应去除细胞壁 B．聚乙二醇试剂可促进细胞融合 C．融合的细胞即为杂交细胞 D．杂交细胞可能具有生长快速的优势 3．将目的基因导入不同受体细胞时，需采用不同的方法。下列导入方法与受体细 胞的对应关系错误的是（　　） A．农杆菌转化法----棉花细胞 B．显微注射法---小鼠受精卵 C． Ca2+处理法---大肠杆菌细胞 D．花粉管通道法---噬菌体 4．下列关于基因表达载体构建的叙述，正确的是 A．启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，位于目的基因下游 B．标记基因的作用是筛选含有目的基因的受体细胞，不能用于筛选含有重组载体的细胞 C．终止子的作用是终止转录过程，使RNA聚合酶从DNA上脱离 D．目的基因与载体的连接必须通过限制酶切割产生的黏性末端实现r 5．某生物兴趣小组为验证“错误存放口罩会增加口罩上的微生物数量”,小组同学 在实验室中将直接存放在书包中的口罩剪下一小块，用无菌镊子轻轻放置在平板 培养基上，然后取走小块，一段时间后观察菌落的数目。下列叙述正确的是（　　） A．实验中的培养基应为液体培养基，要进行严格灭菌处理 B．实验还应设置“剪取无菌包装口罩上等大的小块”进行对照实验 C．可以根据菌落数大致推测出活菌数，而菌落数往往大于活菌数 D．实验进行前需对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌 6．某质粒载体复制原点(ori)、四环素抗性基因(tetr)、氨苄青霉素抗性基因 (ampr),其中ampr中含HindIII切割位点， tetr中含BglII切割位点 A．ori的存在保证质粒能在受体细胞中复制 B．导入该质粒的受体细胞可在含四环素的培养基中存活 C．若用HindII切割质粒，会破坏ampr的功能 D．该质粒具备基因工程载体的基本条件 7．琼脂糖凝胶电泳常用于核酸样品的分析，样品1～4的电泳结果如图所示（“+”“-”分别代表电泳槽的阳极和阴极）。已知样品1和2中的DNA分子分别是甲和乙，甲只有限制酶R的一个酶切位点，样品3和4中有一个样品是甲的酶切产物。下列叙述错误的是（    ） A．配制琼脂糖凝胶时需选用适当的缓冲溶液 B．该实验条件下甲、乙两种DNA分子均带负电荷 C．甲、乙两种DNA分子所含碱基对的数量可能不同 D．据图推测样品3可能是甲被酶R完全酶切后的产物 8．下列关于动物细胞培养及干细胞的应用的叙述，正确的是（　　） A．细胞在贴壁生长的过程中会出现接触抑制现象，但不影响细胞分裂 B．CO2培养箱中含有95%O2和5%CO2，CO2的主要作用是刺激细胞呼吸 C．胚胎干细胞具有全能性，主要存在于早期胚胎、骨髓和脐带血中 D．iPS细胞有细胞周期，它分化形成的神经细胞一般不具有细胞周期 9．下列有关无菌技术的说法，其中正确的有几项（　　） ①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物 ②煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子 ③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，所以不能在常温长期保存 ④用紫外线消毒前，适量喷洒苯酚或煤酚皂，可以加强消毒效果 ⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌 ⑥培养皿、吸管可用干热灭菌法灭菌 A．2项 B．3项 C．4项 D．5项 10．营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能 进行的菌株。下图是科研人员利用影印法(用无菌绒布轻盖在己长好菌落的原培 养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上)初检某种氨基酸缺陷型 菌株的过程。下列叙述错误的是（    ）    A．①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养 B．进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至完全培养基上，再“复印”至基本培养基上 C．氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上对应位置有的菌落中挑选 D．①过程接种方法统计出的菌落数往往比活菌的实际数目多，因此统计结果用 菌落数而不是用活菌数表示 11．下图是“三亲婴儿”培育过程示意图，相关叙述错误的是（    ） A．透明带反应和卵细胞膜反应是过程①形成二倍体受精卵的保障 B．应用该技术可阻断血友病女性患者致病基因遗传给后代 C．捐献者卵母细胞受精更有利于重组受精卵的分裂分化 D．雌雄原核的融合是受精完成的标志 12．幽门螺旋杆菌于 2017年被世界卫生组织列入一类致癌物。幽门螺旋杆菌主要寄生于人体胃中，是引起很多消化道疾病的首要致病细菌。体检时可通过13C 尿素呼气试验来检测幽门螺旋杆菌感染情况。受试者口服13C标记的尿素胶囊后，尿素可被幽门螺旋杆菌产生的脲酶催化分解为 NH3和13CO2。定时收集受试者吹出的气体并测定其中是否含有13CO2。以下叙述正确的是（　　） A．幽门螺旋杆菌属于原核生物，代谢类型是自养型 B．受试者吹出的气体中不含有13CO2说明感染幽门螺杆菌的风险较高 C．幽门螺旋杆菌虽然可以产生脲酶，但是不具有内质网和高尔基体 D．幽门螺旋杆菌不适宜在酸性条件下生存 13．应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效益。如图表示培育生物新品种的过程，请据图判断下列叙述中正确的是（    ） A．图中①过程需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶和载体 B．图中⑤过程需要的培养基中只需加入无机营养和植物激素 C．将prG导入细胞I，细胞I是B淋巴细胞 D．可用相应抗原进行抗原—抗体杂交，检测抗虫基因是否成功表达 14．我国是全球最大的发酵产品生产国，下图为发酵工程的基本环节，其中①~④代表不同的过程。下列叙述错误的是（    ） A．①过程也可用基因工程或人工诱变选育菌种，是发酵工程的中心环节 B．啤酒发酵和果醋发酵时，②过程中均需通入无菌空气进行扩大培养 C．在③过程中，发酵罐与配制好的培养基都必须经过严格的灭菌处理 D．如果要获得单细胞蛋白，④过程中可用过滤、沉淀等方法获得产品 15．马铃薯在生长期易受多种病毒侵染而严重减产。科研人员通过农杆菌介导法，将4种病毒CP融合基因导入马铃薯，获得多抗转基因马铃薯，有效解决了多种病毒的侵染问题。其转化中所涉及的CP融合基因、Ti质粒部分结构如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） 注∶ClaⅠ、BamHⅠ、HindⅢ、KpnⅠ、SacⅠ为相应限制酶的识别位点，Kan片段为卡那霉素抗性基因片段 A．具体操作过程中CP融合基因需先经PCR扩增，再进行凝胶电泳加以分离和鉴定 B．为了使CP融合基因能在马铃薯叶细胞中表达，可从马铃薯任何部位细胞中获取启动子1 C．应选择BamHⅠ和SacⅠ同时处理CP融合基因所在的DNA分子和Ti质粒 D．若经限制酶处理的CP融合基因与Ti质粒反向连接，会导致CP融合基因不能正常表达 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中， 有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0 分。 16．（多选）为培育具有市场竞争力的无籽柑橘，研究者设计如下流程。相关叙述正确的是（    ）    A．过程①需使用胰蛋白酶处理 B．实现过程②依赖膜的流动性 C．过程③需应用植物组培技术 D．三倍体植株可产生无籽柑橘 17．科学家通过将细胞核尚未融合的小鼠受精卵中的雄原核移除后，获得了孤雌单倍体囊胚，并从中获得孤雌单倍体胚胎干细胞（haESCs）。该细胞具有胚胎干细胞的特征和发育潜能。科研人员将haESCs注入同种小鼠卵细胞中获得了“双母”小鼠。下列说法错误的是（　　） A．通过显微操作法去除受精卵中的雄原核时可观察到两个极体 B．haESCs可以取自孤雌单倍体囊胚的内细胞团或滋养层 C．haESCs具备自我更新能力和分化为其他类型细胞的能力 D．“双母”小鼠的体细胞中遗传物质的含量多于普通小鼠 18．（多选）长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图，图2是科研人员通过杂交-杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产双特异性单克隆抗体的部分过程。下列叙述正确的有（　　） A．与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是灭活病毒诱导法 B．双特异性单克隆抗体能将长春碱定向带到癌细胞所在位置，对人体的副作用较小 C．过程②选用的骨髓瘤细胞具有无限增殖的特点，该细胞产生原因是抑癌基因发生突变 D．过程①⑤步骤分别注射癌胚抗原和长春碱的目的是刺激小鼠产生相应的B 淋巴细胞 19．（多选）“低乳糖奶牛”的诞生有望给乳糖不耐受症患者提供“放心奶”。如图是“低乳糖 奶牛”的培育过程，下列叙述正确的是（　　） A．重组细胞1培养后可以不取核，直接注入去核卵母细胞 B．胚胎成纤维细胞分化程度高，核移植难度高于体细胞核移植 C．犊牛的遗传物质不完全来白黑白花奶牛和乳糖酶基因 D．犊牛成年后与普通牛杂交，子代有1/2是低乳糖奶牛 20．甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质，某科研人员采用农杆菌转化法将甜蛋白基因（含有1178个碱基对）导入番茄，希望能提高番茄甜味，改善果实品质。甜蛋白基因和Ti质粒上限制酶切位点如图1、2所示；提取培育出的转基因番茄细胞中的DNA，依据甜蛋白基因两端的特异性序列设计引物，进行PCR扩增，对扩增产物进行电泳，结果如图3。下列叙述错误的是（    ） A．PCR扩增甜蛋白基因时，应该根据基因两端的3'端序列设计引物 B．选择限制酶XbaI和EcoRI切割质粒和含有甜蛋白基因的DNA片段 C．可用含有卡那霉素的培养基对成功导入表达载体的农杆菌进行筛选 D．仅由图3电泳结果不能判断1、2、3、4号转基因番茄是否培育成功 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21．(10分)某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示 (1)在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是________。 (2)采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，通常可采用________法对培养基进行灭菌。 (3)酵母菌扩大培养的过程中，利用血细胞计数板进行计数，发现血细胞计数板每 个小方格平均含有9个酵母菌，则对应的酵母菌种群密度是________个/mL。将酵母 菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖________的主要目的是________。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，目的是________。发酵液中的乙醇可用_______溶液检测。 (4)本实验收集的淋洗液中的________可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是________。(写出两点) 22．(10分)两只克隆小猴“中中”和“华华”是世界首例非人灵长类动物的体细胞克隆猴，这是我国的研究成果。一年后5只世界首例生物节律紊乱的体细胞克隆猴诞生。下图为培育克隆猴的流程，回答下列问题： (1)在“中中”“华华”之前，科学家已培育了胚胎细胞克隆猴，胚胎细胞核移植难度明显低于体细胞核移植的原因是_____。 (2)科学家首先将采集的卵母细胞培养至____期，然后去核，这里的“去核”实际上是指去除____。核移植过程中用灭活的仙台病毒进行了短暂处理，其目的是_____。体外培养重构胚时，需提供适宜的营养及环境条件，推测环境条件包括_____（答出2点）。最后将胚胎移植到经过_____处理的代孕母猴体内，最终产出克隆小猴。 (3)我国科研团队采集一只睡眠紊乱最明显的BMAL1基因敲除的猕猴的体细胞，通过核移植技术获得了5只克隆猴，理论上这5只克隆猴之间的细胞核基因型_____（填“相同”“不相同”或“不一定相同”）。为验证上述5只基因敲除猕猴存在昼夜节律紊乱问题，科学家用检测设备监测实验猴，通过行为学分析检测其是否明显表现出睡眠紊乱的症状，对照组的设置应为_____。 23． (10分)白菜（AA，2n=20）、甘蓝（CC，2n=18）是人们餐桌上的常见蔬菜，营养价值高、染色体数目少。研究人员通过植物体细胞杂交技术培育了甘蓝型油菜（流程如图），并展开了深入研究。请回答下列问题： (1)甘蓝型油菜的叶肉细胞中含有____条染色体，含有____个染色体组。 (2)进行上述杂交过程前，应使用____酶去除植物细胞壁，再用____（试剂名称）处理白菜和甘蓝的原生质体进行膜融合。获得杂种细胞后进行植物组织培养，脱分化阶段的光照条件为____，再分化过程的影响因素有____（请写出两点）。 (3)甘蓝型油菜有平展叶和上卷叶两种叶形，研究人员分别测定12叶期幼苗单株的叶绿素含量、光合速率、气孔导度等，其结果如下表： 组别 叶绿素a （mg/g） 叶绿素b （mg/g） 净光合速率 （umolCO2/m2·s） 气孔导度（molH2O/m2·s） 胞间CO2浓度 （umolCO2/mol） 平展叶 4.2 2.7 8.7 0.18 461.0 上卷叶 6.7 3.5 12.6 0.21 397.5 ①叶绿素存在于叶绿体的_____（场所名称），主要吸收可见光中的_____光。 ②在两组植株呼吸速率相同的情况下，据表中数据分析，上卷叶净光合速率大于平展叶的原因是_____（答2点）。 24． (12分)重组质粒构建及导入流程：目的基因(人胰岛素基因) → 与含氨苄 青霉素抗性基因、四环素抗性基因的质粒(含EcoRI、BamHI酶切位点) → 双酶 切后连接 → 导入大肠杆菌 → 筛选培养。 胰岛素是治疗糖尿病的重要药物，科学家利用基因工程技术生产人胰岛素的部分流程如下。 回答下列问题： (1)获取人胰岛素基因时，可从人体胰岛B细胞中提取mRNA,通过逆转录 获得cDNA,该方法的优点是______ (2)构建重组表达载体时，用EcoRI和BamHI两种限制酶对目的基因和质粒进 行双酶切，与单酶切相比，双酶切的优势是______。(答 出 两 点 ) 。 (3)将重组质粒导入大肠杆菌时，需用Ca²+处理大肠杆菌，使其成为感受态细 胞，感受态细胞的特点是______。 (4)筛选含重组质粒的大肠杆菌时，将转化后的菌液接种到含氨苄青霉素的培养基上，长出的菌落______(填“一定”或“不一定”)含重组质粒，原因是________若要进一步筛选，可采用的方法是______________(答出一种即可) 25．(13分)将天然Ti质粒改造成含有Vir基因的辅助质粒(作用为辅助T-DNA转移)和不含有Vir基因、含有T-DNA的穿梭质粒，共同转入农杆菌，可提高转化效率。细菌和棉花对密码子偏好不同，为提高翻译效率，增强棉花抗病虫害能力，进行如下操作。回答下列问题。    (1)从苏云金杆菌提取DNA时，需加入蛋白酶，其作用是___________。提取过程中加入体积分数为95%的预冷酒精，其目的是___________。 (2)本操作中获取目的基因的方法是_____和______。 (3)穿梭质粒中p35s为启动子，驱动目的基因转录，插入两个p35s启动子， 其目的可能是___________。 (4)根据图中穿梭质粒上的KanR和HygBR两个标记基因的位置，用___________基因对应的抗生素初步筛选转化的棉花愈伤组织。 (5)为检测棉花植株是否导入目的基因，提取棉花植株染色体DNA作模板，进行PCR，应选用的引物是___________和___________。 (6)本研究采用的部分生物技术属于蛋白质工程，理由是______。 A.通过含有双质粒的农杆菌转化棉花细胞 B.将苏云金杆菌Bt基因导入棉花细胞中表达 C.将1-1362基因序列改变为棉花细胞偏好密码子的基因序列 D.用1-1362合成基因序列和1363-1848天然基因序列获得改造的抗虫蛋白 试卷第1页，共3页 试卷第1页，共3页 学科网（北京）股份有限公司 $