内容正文:
河南省实验中学2025—2026学年高二年级下期月考一
生物
CBBBD DBBAB CBDCD CBBBD
21.(9分)(1)高压蒸汽灭菌 琼脂 选择
(2)104(2分)
(3)S的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长(2分)
(4)取淤泥加入无菌水中,涂布(或稀释涂布)到乙培养基上,培养后计数(2分)
22.(12分)(1)便于重组DNA分子的筛选(2分) 双分子层中
(2)病毒的核酸和蛋白质(2分)
(3)胰蛋白酶或胶原蛋白 CO2培养箱
(4)克隆化 抗原抗体杂交 细胞培养液
(5)抗体-药物偶联物/ADC(2分)
23.(16分)(1)逆转录(2分) 引物1和引物3(2分)
(2)起搭桥作用的两个引物的5’端存在部分可以碱基互补配对的序列(2分) 可沿着杂交分子互补区域的3’端继续延伸(2分) H3(2分)
(3)BamH Ⅰ和Xma Ⅰ(2分) Sau3A Ⅰ和Xma Ⅰ(2分)
(4)能在含卡那霉素培养基上生长但不能在含四环素培养基上生长(2分)
24.(13分)(1)碳源、氮源(2分)
(2)PT7、PBAD和PBAD(3分)
基因2和3正常表达无活性产物,被蓝光激活后再启动基因1表达(2分)
(3)抑制杂菌;去除丢失质粒的菌株(2分)
(4)该处细胞中T7RNAP激活,酪氨酸酶表达并合成黑色素(2分)
(5)将酪氨酸酶替换成催化其他色素合成的酶(或将酪氨酸酶替换成不同颜色蛋白)(2分)
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河南省实验中学2025—2026学年高二年级下期月考一
生物
考试时间:75分钟 分值:100分
一、选择题(本大题共20小题,每题只有一个正确答案,每小题2.5分,共50分)
1.基于我国传统酿醋工艺,一种以果汁为原料进行液态发酵生产果醋流程如图。下列叙述错误的是( )
果汁酒精发酵→醋酸发酵果醋
A.制取果汁时添加果胶酶可提高果汁产量,处理①加糖可增加碳源
B.醋酸发酵阶段通入充足的氧气有利于微生物将乙醇转化为乙酸
C.酒精发酵和醋酸发酵的微生物呼吸方式相同,最适生长温度不同
D.发酵生产结束后,处理②需根据果醋保存时间选择消毒或灭菌方法
2.塑化剂(DEHP,化学式为C24H38O4)被很多国家认定为毒性化学物质。下图为某实验小组从土壤中筛选可降解DEHP细菌的过程。下列叙述错误的是( )
A.振荡培养可增加溶液中的溶解氧,以满足降解菌细胞呼吸的需求
B.初选之前需对培养基、培养皿和覆盖过塑料薄膜的土壤样品均进行湿热灭菌
C.图中固体培养基以DEHP为唯一碳源,从功能的角度来看属于选择培养基
D.培养若干天后,应选择DEHP含量低的培养液进行接种以进一步扩增目的菌
3.尿素在高温下易分解,也能被脲酶分解,分解产物能使酚红指示剂变红。为从土壤中筛选出尿素分解菌,实验人员配制不含氮源的培养基(添加酚红指示剂),向其中加入过滤除菌的尿素后用HCl调至橙黄色,然后倒平板。将1g土壤样品溶于99mL无菌水后再稀释104倍,取菌液0.1mL涂布于上述平板并培养,统计平均菌落数为120个。下列说法不正确的是( )
A.制备培养基时,应先对培养基灭菌再加入尿素
B.该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目多
C.红色圈与菌落直径比值大的菌落中的菌株分解尿素能力强
D.1g土壤样品中尿素分解菌的数目约为1.2×109个
4.谷氨酸棒状杆菌可用于发酵工程生产谷氨酸,发酵过程中,通常需要分次加入氨水。培养基中的碳氮比会影响菌体的繁殖和谷氨酸的合成量。下列说法错误的是( )
A.性状优良的菌种可从自然界中筛选,也可通过诱变育种等获得
B.发酵需要大量菌种,菌种的扩大培养是发酵工程的中心环节
C.加入氨水可为菌种提供氮源,也能调节发酵液的pH
D.发酵过程中要严格控制温度、pH及培养基碳氮比等条件
5.用紫外线照射野生型大肠杆菌后,筛选精氨酸营养缺陷型菌株(缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶)的流程如图。其中过程①是稀释涂布平板,过程②是将培养基甲上的菌落平移到培养基乙上,继续培养一段时间。下列说法错误的是( )
A.过程①中,待涂布的菌液被培养基吸收后应将培养基倒置
B.甲、乙培养基成分的区别在于是否含有精氨酸
C.培养基甲中菌落b即为精氨酸营养缺陷型菌株
D.紫外线照射会提高精氨酸营养缺陷型菌株占突变型菌株的比例
6.利用发酵技术生产青霉素时,总有头孢霉素产生。研究发现青霉素和头孢霉素有一个共同的前体物质,该前体物质在不同酶的作用下分别合成青霉素和头孢霉素。下列说法正确的是( )
A.由于抗生素有抗菌作用,通入发酵罐的空气不需要经过灭菌
B.通过敲除控制前体合成的酶的基因,可以使青霉菌只产生一种产物
C.青霉菌可以同时产生大量青霉素和头孢霉素两种单细胞蛋白
D.发酵结束时可采用适当的提取、分离和纯化措施获取青霉素
7.人参皂苷具有重要的药用价值,可通过植物细胞培养生产。下列说法错误的是( )
A.外植体消毒需用酒精和次氯酸钠溶液
B.外植体脱分化形成愈伤组织需要光照和氧气
C.可通过液体培养获得大量愈伤组织细胞
D.人参皂苷属于植物细胞的次生代谢物
8.研究人员用花椰菜(BB,2n=18)根与黑芥(CC,2n=16)叶片分别制备原生质体,经PEG诱导融合形成杂种细胞,进一步培养获得再生植株,其中的植株N经鉴定有34条染色体。下列叙述正确的是( )
A.两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞
B.再生植株N的形成证明杂种细胞仍具有全能性
C.花椰菜和黑芥的原生质体能融合,证明两种植物间不存在生殖隔离
D.植株N的B组和C组染色体不能正常联会配对,无法产生可育配子
9.某团队通过多代细胞培养,将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除,获得XO胚胎干细胞,再经过一系列处理,使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是( )
A.营养供应充足时,传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制
B.获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异
C.XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化
D.若某濒危哺乳动物仅存雄性个体,可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育
10.水母雪莲是我国的一种名贵药材,主要活性成分为次生代谢产物黄酮。水母雪莲生长缓慢,长期的掠夺性采挖导致该药材资源严重匮乏。研究人员开展了悬浮培养水母雪莲细胞合成黄酮的工程技术研究,结果如表所示。下列叙述错误的是( )
转速(r/min)
55
65
75
85
相对生长速率
0.21
0.25
0.26
0.25
细胞干重(g/L)
7.5
9.7
11.4
9.5
黄酮产量(g/L)
0.2
0.27
0.32
0.25
A.黄酮产量与细胞干重呈正相关
B.黄酮是水母雪莲细胞生存和生长所必需的
C.氧气供给对于水母雪莲细胞生长、分裂和代谢是必需的
D.转速为75r/min时既利于细胞分裂,又利于黄酮的积累
11.某研究小组进行微型月季的快速繁殖研究,结果如表所示。
流程
最佳措施或最适培养基
①外植体腋芽消毒
75%乙醇浸泡30s+5%NaClO浸泡6min
②诱导出丛生苗
MS+3.0mg·L-16-BA+0.05mg·L-1NAA
③丛生苗的扩增
MS+2.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA
④丛生苗的生根
1/2MS+0.25mg·L-1IBA+0.25mg·L-1NAA
注:丛生苗为丛状生长的幼苗,IBA、NAA为生长素类物质,6-BA为细胞分裂素类物质
下列叙述正确的是( )
A.流程①的效果取决于消毒剂浓度
B.微型月季的快速繁殖属于有性生殖
C.与流程②相比,流程③培养基中细胞分裂素类与生长素类物质的比值更小
D.与流程③相比,提高流程④培养基的盐浓度有利于丛生苗的生根
12.下图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程,在人-鼠杂种细胞中人的染色体会以随机方式丢失,通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4种酶活性,只有Ⅱ具有芳烃羟化酶活性,只有Ⅲ具有胸苷激酶活性,Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述错误的是( )
A.加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合
B.细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为人-人、人-鼠、鼠-鼠融合细胞
C.芳烃羟化酶基因位于2号染色体上,乳酸脱氢酶基因位于11号染色体上
D.胸苷激酶基因位于17号染色体上,磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上
13.下列有关现代生物学技术叙述正确的是( )
A.胚胎分割时,应注意将囊胚或原肠胚进行均等分割
B.植物体细胞杂交时,可用灭活病毒诱导法促进原生质体融合
C.动物细胞培养时,需定期更换培养基,以防止杂菌污染
D.诱导多能干细胞可分化成特定的细胞,用于治疗人类的某些疾病
14.胚胎移植可充分发挥雌性优良个体繁殖潜力。我国牛、羊等动物胚胎移植已获成功,保障了肉奶供应,有利于端稳“中国人的饭碗”。研究者在胚胎移植前进行受体母牛黄体直径测定,胚胎移植后统计妊娠率,结果如表。下列叙述错误的是( )
黄体种类
黄体直径/cm
妊娠率/%
CL-1
<1.5
36.23
CL-2
1.5-2.5
53.30
CL-3
>2.5
43.18
注:黄体直径与孕酮浓度呈正相关。
A.胚胎移植需对受体母牛进行同期发情处理
B.无需考虑受体母牛对外来胚胎的免疫排斥反应
C.CL-2分泌的孕酮多于CL-3分泌的孕酮
D.应选择CL-2的母牛作为胚胎移植受体
15.为保护濒危哺乳动物甲,科研工作者将甲的近亲物种乙(种群数量多)进行了如图所示的研究,下列叙述正确的是( )
A.克隆动物的核基因组来源于甲、乙
B.体外受精需用获能的精子与MI期的卵母细胞受精
C.囊胚①的内细胞团可发育为胎盘、个体
D.滋养层可影响内细胞团的发育
16.PAT1基因编码的蛋白质在不同物种中高度保守。为鉴定桃树PAT1基因的功能,研究人员提取桃树RNA逆转录得到PAT1基因,转入拟南芥后获得两种插入1个PAT1基因的转基因植株甲、乙,分别培养筛选出纯合转基因株系1、2。将拟南芥的野生型和两种转基因株系用不同浓度的NaCl处理,检测种子萌发率,结果如图。下列叙述错误的是( )
A.PAT1蛋白的氨基酸序列差异性可反映不同物种间亲缘关系远近
B.PAT1基因表达产物可提高盐胁迫条件下拟南芥种子萌发率
C.利用甲自交培育PAT1基因纯合子,该种纯合子占子代转基因植株的1/4
D.株系1和2种子萌发率不同,可能是PAT1基因插入染色体的位置不同引起的
17.基因X编码的蛋白X能够与核基因Y的启动子区域结合,进而显著增强基因Y的表达。基因Y的表达产物可促进植物开花。下列叙述正确的是( )
A.蛋白X在细胞核内合成,可直接作用于基因Y的启动子
B.通过基因工程技术敲除基因X,会延迟植物的开花时间
C.在基因Y缺失突变体中,过量表达基因X仍能促进植物开花
D.蛋白X可能通过帮助DNA聚合酶识别基因Y的启动子而发挥作用
18.下列关于PCR的叙述正确的是( )
A.该技术的原理是高温提高了DNA聚合酶的活性
B.在PCR反应过程中,两条单链DNA与引物在复性阶段结合
C.扩增目的基因时,子链从引物的3’端向5’端延伸
D.若PCR进行了30轮循环,则理论上共消耗引物230-1个
19.研究表明,COX-2基因与肿瘤细胞的迁移有关,科研人员通过构建COX-2基因表达载体(如图),用于进一步研究COX-2基因表达产物对肿瘤细胞迁移的作用机制。图中1链为转录的模板链,BamH Ⅰ、Sac Ⅰ为限制酶识别序列,LacZ基因表达产物可使显色剂X-gal变蓝。下列说法正确的是( )
A.通过PCR扩增COX-2基因片段,需要加入引物A和引物D
B.为构建COX-2表达载体,需在与1链结合的引物的5’端添加BamH Ⅰ识别序列
C.在含氨苄青霉素的培养基中能生长的是含重组质粒的菌落
D.在含X-gal培养基中长出的蓝色菌落含重组质粒
20.基因工程中,使用单个限制酶酶切构建的表达载体易出现连接方向错误和重复插入目的基因片段等现象,可通过酶切及筛选标记鉴定出符合预期的重组载体。研究小组选用的载体P和目的基因CDS片段特征如图,将CDS片段插入载体P的Sac Ⅱ位点后对重组载体进行扩增、筛选和检测。下列叙述错误的是( )
注:LacZ基因表达产物为β-半乳糖苷酶,X-gal会被β-半乳糖苷酶分解,产生蓝色产物。
A.含重组载体的宿主细胞在含X-gal的培养基上,菌落颜色为白色
B.重组载体被Pst Ⅰ充分酶切后电泳可能会获得长度为9.4kbDNA片段
C.用EcoR Ⅰ与Pst Ⅰ充分酶切重组载体,可判断CDS片段的连接方向
D.用EcoR Ⅰ与Sac Ⅱ充分酶切重组载体,可能得到2个长度的DNA片段
二、非选择题(本大题有4小题,共50分)
21.(9分)某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降解,会对环境造成污染,只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基,甲的组分为无机盐、水和S,乙的组分为无机盐、水、S和Y。
回答下列问题:
(1)实验时,盛有水或培养基的摇瓶通常采用_________________的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_________________。甲、乙培养基均属于_________________培养基。
(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL,若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液,且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个,则至少应将摇瓶M中的菌液稀释_________________倍。
(3)在步骤⑤的筛选过程中,发现当培养基中的S超过某一浓度时,某菌株对S的降解量反而下降,其原因可能是_________________(答出1点即可)。
(4)若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数,请写出实验思路___________。
22.(12分)某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中,需要表达N蛋白胞外段,制备相应的单克隆抗体,增加其对N蛋白胞外段特异性结合的能力。
Ⅰ.N蛋白胞外段抗原制备,流程如图1
(1)构建重组慢病毒质粒时,选用氨苄青霉素抗性基因作为标记基因,目的是___________。用脂质体将重组慢病毒质粒与辅助质粒导入病毒包装细胞,质粒被包在脂质体___________(填“双分子层中”或“两层磷脂分子之间”)。
(2)质粒在包装细胞内组装出由___________组成的慢病毒,用慢病毒感染海拉细胞进而表达并分离、纯化N蛋白胞外段。
Ⅱ.N蛋白胞外段单克隆抗体制备,流程如图2
(3)用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后,取小鼠脾组织用___________酶处理,制成细胞悬液,置于含有混合气体的___________中培养,离心收集小鼠的B淋巴细胞,与骨髓瘤细胞进行融合。
(4)用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选,获得杂交瘤细胞,将其接种到96孔板,进行___________培养。用___________技术检测每孔中的抗体,筛选既能产生N蛋白胞外段抗体,又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株,经体外扩大培养,收集___________,提取单克隆抗体。
(5)利用N蛋白胞外段抗体与药物结合,形成___________,实现特异性治疗。
23.(16分)流感病毒的抗原有H和N两类,均可以分为很多亚型。某科研团队基于融合蛋白的思路,尝试制造H3、N2融合蛋白疫苗,以更好地预防H3N2病毒。
(1)获取病毒H3、N2抗原蛋白的mRNA,通过___________过程得到相应的DNA,并进一步构建H3、N2融合基因。在H3蛋白基因和N2蛋白基因融合的过程中,起搭桥作用的是___________(从引物1~8中选择)。图中含磷酸基团的一端为5’端。
(2)从引物角度分析,两种基因能够融合的关键是___________,变性后形成的杂交分子在延伸为双链等长的融合基因时,不需要添加引物的原因是___________。若融合基因中上游基因的mRNA终止密码子对应的碱基序列未被切除,则融合基因翻译得到的抗原蛋白为___________。
(3)已知Bsa Ⅰ的切割位点和识别位点不是同一序列,这会导致切割位点出现很大偏差,综合该信息和图示,将目的基因与运载体连接过程中,首先需要用___________(填限制酶种类)处理载体;用___________(填限制酶种类)处理目的基因所在的片段。
(4)利用大肠杆菌作受体细胞筛选获得目的菌株:首先在含卡那霉素的培养基上培养目标菌,将培养基上生长的菌落用影印法接种到含四环素的培养基上,最后选择___________的菌株。
24.(13分)驹形杆菌可合成细菌纤维素(BC)并将其分泌到胞外组装成膜。作为一种性能优异的生物材料,BC膜应用广泛。研究者设计了酪氨酸酶(可催化酪氨酸形成黑色素)的光控表达载体,将其转入驹形杆菌后构建出一株能合成BC膜并可实现光控染色的工程菌株,为新型纺织原料的绿色制造及印染工艺升级提供了新思路(图一)。
回答下列问题:
(1)研究者优化了培养基的__________(答两点)等营养条件,并控制环境条件,大规模培养工程菌株后可在气液界面处获得BC菌膜(菌体和BC膜的复合物)。
(2)研究者利用T7噬菌体来源的RNA聚合酶(T7RNAP)及蓝光光敏蛋白标签,构建了一种可被蓝光调控的基因表达载体(光控原理见图二a,载体的部分结构见图二b)。构建载体时,选用了通用型启动子PBAD(被工程菌RNA聚合酶识别)和特异型启动子PT7(仅被T7RNAP识别)。为实现蓝光控制染色,启动子①②及③依次为__________,理由是__________。
(3)光控表达载体携带大观霉素(抗生素)抗性基因。长时间培养时在培养液中加入大观霉素,其作用为_________________________________(答两点)。
(4)根据预设的图案用蓝光照射已长出的BC菌膜并继续培养一段时间,随后将其转至染色池处理,发现只有经蓝光照射的区域被染成黑色,其原因是___________。
(5)有企业希望生产其他颜色图案的BC膜。按照上述菌株的构建模式提出一个简单思路___________。
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