广西钦州市第四中学2026年春季学期高二年级第九周考试生物试卷

**基本信息** 以微生物培养与应用为核心，通过工业废水降解、食品发酵等真实情境，考查实验操作与科学思维，适配高二周测学情。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|16题/40分|培养基灭菌（12题）、稀释涂布平板法计数（7题）、发酵工程应用（5题）|立足基础操作，辨析灭菌方法与计数原理| |非选择题|5题/60分|菌株筛选（17题）、酶活性细菌分离（18题）、多环芳烃降解（21题）|以废水处理、食品发酵为情境，融合筛选、计数等实验流程，突出探究实践与科学思维|

广西钦州市第四中学2026年春季学期高二年级第九周考试生物试卷 注意事项: 1.答题前,考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上， 2.回答选择题时,选出每小题答案后,用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动,用橡皮擦干净后,再选涂其他答案标号。回答非选择题时,将答案写在答题卡上。 写在本试卷上无效。 3.考试结束后,将本试卷和答题卡一并交回 一、单选题（共16小题，其中第1-12小题，每小题2分，第13-16小题，每小题4分；共40分） 1．下列是某同学分离高产脲酶菌的实验设计，不合理的是（　　） A．选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株B．土壤取样时用到的纸袋、铁铲需要预先灭菌 C．可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌D．得到的菌落形状、大小和颜色等特征不一定相同 2．幽门螺旋杆菌（能分解对热不稳定的尿素）是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病菌。从带菌者胃黏膜样本中分离出该细菌，相关实验步骤和方法不合理的是（　　） A．幽门螺旋杆菌可通过合成脲酶来分解利用尿素B．尿素分解后培养基中pH升高，可利用刚果红染液进行鉴定 C．选择培养基应以尿素为唯一氮源，制备时应先灭菌后加入无菌尿素 D．若要判断选择培养基是否起到作用，可设置接种相同菌液的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照组 3．微生物相关实验中需要进行灭菌或消毒操作。实验操作者的双手、培养基、接种环、超净工作台、牛奶，分别采用的灭菌或消毒方法依次是（　　） ①化学药物消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线消毒⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法 A．④⑤②③⑥ B．⑥⑤②④⑥ C．①⑤②③⑥ D．①⑤②④⑥ 4．我国卫生部门规定了饮用水标准，1mL自来水检出的菌落总数不可以超过100个，不得检出总大肠菌群（包含大肠杆菌等）。下列检测方法不合理的是（　　） A．采集水样的试管在使用前要灭菌，采集水样后立即密封并尽快检测 B．将待测水样滴加到细菌计数板上，在显微镜下计数C．取一待测水样过滤，将滤膜贴在平板培养基上，培养后计数 D．固体培养基中添加伊红—亚甲蓝，接种合规水样后不应产生深紫色菌落 5．下列对发酵工程及其应用的叙述，正确的有几项（    ） ①发酵工程所用的菌种大多是单一菌种②发酵工程的产品可能是微生物的代谢物或菌体本身 ③单细胞蛋白就是从人工培养的微生物菌体中提取的蛋白质 ④与使用化学农药相比，使用微生物农药具有成本低、见效快、无污染的特点 ⑤可用诱变育种或基因工程等方法选育出性状优良的菌种并进行扩大培养 A．2项 B．3项 C．4项 D．5项 6．某同学在培养酵母菌的过程中，分别采用了血细胞计数板法和稀释涂布平板法统计培养液中细胞数量，得到下图中两种不同的结果，下列理由不成立的是（　　） A．稀释涂布平板法只计数活细胞，血细胞计数板法还计数了死细胞 B．采用稀释涂布平板法时，两个或多个细胞连在一起长成一个菌落 C．采用稀释涂布平板法时，培养过程中有杂菌污染，也计入了结果 D．采用稀释涂布平板法时，没等到菌落数目稳定下来就记录了结果 7．微生物计数时，若一个平板上菌落数为300，稀释倍数为106，则每克样品中的活菌数约为（　　） A．3×108 B．3×107 C．3×109 D．3×106 8．下列不属于发酵工程菌种选育方法的是（　　） A．自然选育 B．诱变育种 C．杂交育种 D．基因工程育种 9．腐乳制作中，卤汤中酒的含量一般控制在12%左右，其作用不包括（　　） A．抑制微生物生长B．使腐乳具有独特香味C．加快腐乳成熟速度D．防止腐乳腐败变质 10．稀释涂布平板法统计菌落数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目（　　） A．相等 B．偏多 C．偏少 D．无法确定 11．为分离出固氮细菌，某同学配制了下表中的四种培养基，其中“+”表示添加，“-”表示未添加。据表分析，应该选择的培养基是（    ） 培养基成分 甘露醇（C6H14O6） 蛋白胨 抗生素 NaCl等无机盐 琼脂 水 ① + — + — + + ② — + — + + + ③ + — — + + + ④ — + + — — + A．④ B．③ C．② D．① 12．培养基灭菌常用的方法是（　　） A．巴氏消毒法B．紫外线消毒法C．高压蒸汽灭菌法D．酒精消毒法 13．某实验小组在对某大肠杆菌培养液中的大肠杆菌进行计数时，样品的稀释情况如图所示，涂布平板时各组所用稀释液的体积均为0.05 mL。若在F组稀释液对应的培养基中测得的菌落数的平均值为34个，则1 mL原培养液中大肠杆菌的活菌数约为（　　） A．6.8×106个 B．6.8×108个 C．1.7×107个 D．1.7×108个 14．下列实验中，对实验材料、试剂、方法进行替换后，仍然可以达成实验目的的是（　　） A．探究pH对酶活性的影响：过氧化氢酶替换为淀粉酶 B．观察植物细胞质壁分离与复原：紫色洋葱外表皮替换为黑藻叶片 C．研究分泌蛋白的合成与运输途径：3H-亮氨酸替换为15N-亮氨酸 D．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数：稀释涂布平板法替换为平板划线法 15．某校生命科学社的同学利用学校实验平台对微生物进行纯培养，下列操作中正确的有几项（    ） ①在接种室内预先喷洒煤酚皂溶液，并用紫外灯照射进行消毒②为避免杂菌污染，超净工作台需全程开启紫外灯 ③培养基中的牛肉膏和蛋白胨可为微生物提供氮源④所有微生物培养时，培养基中都需加入碳源 ⑤利用接种环接种前需对其进行灼烧灭菌⑥消毒比灭菌更加温和，生物消毒法可以除去环境中全部微生物 ⑦在培养乳酸杆菌时，培养基中需添加纤维素⑧使用后的培养基可直接丢入垃圾桶 ⑨生长在伊红——亚甲蓝琼脂培养基的大肠杆菌菌落呈深紫色，有金属光泽 A．2项 B．3项 C．4项 D．5项 16．“筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段，下列有关技术筛选成功率较低的是（    ） A．以尿素为唯一氮源从土壤中筛选能够分解尿素的微生物B．用不含有机氮源的培养基筛选土壤中能够固氮的微生物 C．从云南腾冲热泉的极端环境中筛选耐热的微生物D．在培养基中加入较高浓度的氯化钠筛选耐盐的细菌突变体 第II卷（非选择题） 2、 综合题（5大题，共60分，请考生按要求作答问题 ） 17．某化工厂的生产废水中含有一种含氮有机物Y，直接排放会污染土壤，现需将废水中物质Y降解处理后方可排放。某研究小组欲从土壤中筛选出降解Y效率最高的细菌（目标菌），已知Y在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。根据所学知识回答下列问题： (1)培养基的配方一般都含有______等营养物质。若要从土壤中分离目标菌，所用培养基应以Y作为______。 (2)在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙、丙3种细菌都能生长并形成菌落（如图一所示）。如果要得到目标菌，应该选择______菌落进一步纯化，选择的依据是______。 (3)分离纯化上述菌种的方法有______、______。某生物兴趣小组进行了如图二所示的操作：其中较明显的一处错误是______，整个操作过程中要灼烧接种环______次。 (4)接种前需要对培养基进行灭菌，常用的灭菌方法是______，无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行，目的是______。 18．Ⅰ.研究人员欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的细菌，并对其进行研究。请回答下列问题： (1)在细菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以_______为唯一碳源的固体培养基上进行培养，除碳源外，该培养基还含有氮源、水、无机盐和_______。不同微生物生长所需的pH是不同的，在配制培养基时，pH的调节应在灭菌_______（填“前”或“后”）。 (2)在将筛选到的微生物进行分离纯化时，采用了两种不同的接种方法，培养一段时间后得到如图所示的菌落。 平板A所采用的接种方法是______，平板B所采用的接种工具是______。A、B两个平板所采用的接种方法适合用来计数的是______（填“A”或“B”）。 (3)根据下图所示，4号试管的土壤样品稀释了_____倍，根据图示的三个平板上的菌落结果，可以估算1克土壤中的细菌数为______个。 Ⅱ.现代工业生产中往往采用规范的流程进行发酵生产以提高生产效率，如下图是发酵工程生产产品的流程图。据图回答下列问题： (4)在啤酒生产中，使用①改造的啤酒酵母，可以加速发酵过程，缩短生产周期，①是_______；高产青霉素菌种是通过②培育的，②是_______；③是细胞工程。 (5)⑤表示______。 (6)若发酵所得产品是单细胞蛋白，则是往往采用_______的方法进行提取。 19．微生物技术及发酵工程的发展在环境污染治理及食品加工制造方面有着重要作用。根据相关要求回答下列问题。 Ⅰ、利用微生物降解污染物成为环境治理的重要方法之一、工业污水中含有的多环芳烃类化合物会造成农田土壤污染，围绕污染土壤修复的微生物筛选，回答下列问题。 (1)为了获得能降解多环芳烃化合物的菌株，配制的培养基中________是唯一碳源。 (2)在分离纯化过程中，除稀释涂布平板法之外，还可以采用________法。 (3)为进一步提高菌株降解多环芳烃的效率，可采用物理化学等诱变方法进行育种，也可采用_______技术定向改造菌株。 Ⅱ、胡玉美蚕豆酱是豆瓣经过发酵后，大分子物质经过微生物代谢转化成多肽、氨基酸等，从而具有独特的风味，此过程需要枯草芽孢杆菌的作用，传统蚕豆酱制作流程是蚕豆→去皮→浸泡→蒸熟、冷却→接种→发酵→蚕豆酱。请回答下列问题： (4)传统蚕豆酱制作过程中，蚕豆为微生物生长发育提供________（至少答出两点），蚕豆蒸熟后冷却的原因是________。 (5)取30g酱醪溶于70mL无菌水中，再稀释104倍，取0.1mL菌液涂布3个选择培养基（只允许枯草芽孢杆菌生长），统计菌落数分别为50、60、70个，每克酱醅中枯草芽孢杆菌数为________。计数结果比显微镜计数法少，原因在于： 一是________，因此通过统计菌落数得到的菌体数量比实际值小； 二是________，因此显微镜计数法统计的结果比实际值偏大。 20．阅读下列关于能源、环境和农业生产方面的材料，回答相关问题： 材料I：随着能源和环境问题日益严峻，利用纤维素酶降解秸秆生产燃料乙醇，对缓解全球能源危机有着重大意义。某兴趣小组通过实验分离出能分解纤维素的微生物。 (1)为了筛选出分解纤维素的微生物，实验小组尝试从收割后的小麦田里取样，配制以纤维素为唯一碳源的______（填“选择”或“鉴别”）培养基。配制好的培养基需_______灭菌。 (2)若要对培养的细菌计数，则需要用________法进行接种，当样品的稀释度足够高时，培养一段时间后，可根据________初步鉴定并挑取产纤维素酶菌株。 材料Ⅱ：尿素是一种重要的农业氮肥，但尿素并不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细菌并进行计数的过程如图所示。 (3)图中培养基应以__________为唯一氮源。该琼脂培养基倒平板时需等待培养基冷却后倒过来放置，原因是__________。 (4)某同学选取5个培养皿进行实验，其中1个不进行涂布或者用无菌水涂布平板，目的是_______；接种其余4个培养皿，一段时间后4个培养皿中分别长出了54、46、50、24个菌落，根据实验结果，该1g土壤样本中约有分解尿素的细菌____________个。培养基表面生长的是单菌落，运用这种方法统计的结果往往比实际值偏小的原因是______。 21．I．淀粉酶在工业生产上应用最早，迄今仍是用途最广、产量最大的酶制剂产品之一。为了提高淀粉酶的生产水平，首先要从土壤中筛选出产淀粉酶的活性菌株。研究人员对所取土样进行产淀粉酶的细菌的分离操作（A组）和计数操作（B组），过程如图I。图Ⅱ是一种接种方法示意图。请回答下列问题： (1)步骤③、④所用培养基的成分，最大的区别是_____种类不同。 (2)步骤④、⑤所用培养基的成分，最大的区别是固体培养基中添加了_____。步骤⑤、⑧接种时需设置未接种培养基做对照，目的是_____。 (3)图Ⅱ中甲、乙、丙为划线的三个区域，为正确完成整个接种过程，接种环要进行____次灭菌，其中灭菌目的相同的是第_____次。 Ⅱ．我国十分重视对环境污染的治理，随着生物技术的发展，利用微生物降解污染物成为环境治理的重要方法之一。工业污水中含有的多环芳烃类化合物会造成农田土壤污染，请围绕污染土壤修复的微生物筛选，回答下列问题。 (4)为了获得能降解多环芳烃化合物的菌株，配制的培养基中_____是唯一碳源：培养基配制好后须立即灭菌，目的是_____；在目标菌株分离纯化过程中必须使用_____（固体培养基/液体培养基）。 (5)在分离纯化过程中，土壤样品需经_____后再涂布平板，原因是防止浓度过高，不便于分离菌落。如果分离纯化菌株不是纯培养物，除稀释涂布平板法之外，还可以采用_____法进一步分离纯化。 参考答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 C B D B B C C C C C 题号 11 12 13 14 15 16 答案 B C B B C B 17．(1)水、碳源、氮源和无机盐 唯一氮源 (2)甲 甲菌落透明圈直径与菌落直径差值最大，说明其分解Y的效率最高 (3) 稀释涂布平板法 平板划线法 最后一次（第四次）划线与第一次划线区域重叠 五 (4)湿热灭菌法 避免周围环境中微生物的污染 18．(1)淀粉 琼脂（凝固剂） 前(2)稀释涂布平板法 接种环 A (3)105 8.5×108(4)基因工程 诱变育种(5)灭菌(6)过滤、沉淀 19．(1)多环芳烃类化合物(2)平板划线法(3)基因工程 (4) 碳源、氮源、无机盐 避免高温杀死接种的微生物 (5) 6×107 当两个菌体或多个菌体连在一起时形成的是一个菌落 显微镜下统计的菌体既有活菌又有死菌 20．(1) 选择 高压蒸汽(2)稀释涂布平板 菌落的特征 (3) 尿素 防止皿盖上的水珠滴落在培养基上，造成污染 (4) 检测培养基是否被污染 5×109 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 21．(1)碳源(2)琼脂 检测培养基是否被污染(3) 4/四 二、三 (4)多环芳烃化合物 防止杂菌污染 固体培养基(5)稀释 平板划线 学科网（北京）股份有限公司 $