广东省实验中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题

广东实验中学2025一2026学年（下）高二级中段模块考试生物学答案 1-5 BCCDD 6-10 CBBAD 11-15 CDBCC 16-20 CBCBC 21.(12分) (1)扩大培养(2分) 防止杂菌污染(2分) (2)C基因缺失（或敲除C基因）(2分) 不含(1分) 选择(1分) (3)与菌株乙相比，菌株丙的内源基因2替换为B基因，不受负反馈抑制，可以更快消耗 酸合成更多异亮氨酸，因此菌株丙的酸含量比菌株乙低，异亮氨酸含量比菌株乙高(2 分) (4)改造菌株，使其能利用比葡萄糖更经济的原料（如分解纤维素）；转入异亮氨酸外转运 蛋白，从发酵液中直接提取异亮氨酸等(2分) 22.(12分) (1)纤维素酶和果胶酶(2分) 杂种原生质体生理互补，细胞呼吸正常，能正常分裂： 而未融合或同种融合原生质体会在细胞呼吸不同阶段受到抑制从而无法正常分裂(2分，答 出杂种细胞这方面即可) (2)①1(1分) ②a生成再生壁的细胞比例(1分)b使用激素(1分) c抑制甘蔗杂种原生质体中GAUT基因表达(1分) d+(1分) ③答案1：++(1分)激素不是通过促进GAUT表达来促进细胞壁的形成(2分) 答案2：++/++(1分)除了促进GAUT表达，激素还有其他途径促进细胞壁的形成(2 分) 23.(13分) (1)骨髓瘤(1分) EGFR单抗可与EGF竞争结合EGFR,降低EGF对细胞增殖的促进作用(2分) (2)胞外区域(2分) (3)Met基因扩增，表达出的Met蛋白增加，Met途径的作用增强，使癌细胞产生耐药性 (2分) (4)bde(3分) 1(1分) (5)药物对耐药肿瘤的抑制效果如何；药物对人体是否有副作用等(2分) 24.(13分) (1)在富含卡拉胶的环境中，存在能够分解卡拉胶的微生物的可能性较大(2分) 稀 释(1分) (2)BamHI(2分) (3)复制原点(1分) (4)能吸收周围环境中DNA分子(2分) 卡拉胶和四环素(2分，1点1分) (5)44(1分) 该位点的氨基酸空间上离半胱氨酸更近，容易形成二硫键，而且保守度低，替换后对酶功能 的影响较小（2分) 题 号 标准答案 分值 补充答案及说明 扩大培养 2 意思对即可 (1) 防止杂菌污染 答出“杂菌给2分，只写“防止污染”1分 C基因缺失 2 敲除C基因/C基因不表达/抑制C基因表达等意思均可 (2)不含 选择 3 1.主语是丙均可： 与菌株乙相比，菌株丙的内源基因2替换为B基 因，不受负反馈抑制，可以更快消耗α酸合成 2写出内源基因2替换为B基因或者无负反馈这层意思，得 (3) 更多异亮氨酸，因此菌株丙的α酸含量比菌株 2 1分： 乙低，异亮氨酸含量比菌株乙高 3.答出消耗α酸更快/多或合成异亮氨酸更多，得1分。 4主语是乙，后面趋势都能和乙对应上也可给分。 改造菌株，使其能利用比葡萄糖更经济的原料 (4) 转入异亮氨酸外转运蛋白 (如分解纤维素) 纤维素酶和果胶酶 2 1点1分 杂种细胞能正常细胞呼吸(1分)，正常分裂/增殖，1分 (①)杂种原生质体生理互补，细胞呼吸正常，能正 常分裂；而未融合或同种融合原生质体会在细 2 答出杂种细胞这方面即可，未融合的可以不答。但如果只 胞呼吸不同阶段受到抑制从而无法正常分裂 答出未融合细胞不能呼吸，不能分裂，都写对了也只能1 分。 ①1 22 ②a生成再生壁的细胞比例 生成再生壁的细胞数量等关于量的表述均可 ②b使用激素 (2) ②c抑制甘蔗杂种原生质体中GAUT基因表达 1 只要体现出该基因表达量减少即可 ②d+ ③++++ +/4+ ③激素不是通过促进GAUT表达来促进细胞壁 除了促进GAUT表达，激素还有其他途径促进细胞壁的形 2 的形成（必须与上一个空对应上） 成（必须与上一个空对应上） 骨髓瘤 (I)EGFR单抗可与EGF竞争结合EGFR,降低EGF EGFR单抗结合EGFR(1分)，不促进/抑制细胞增殖(1 2 对细胞增殖的促进作用 分) (2)胞外区域 2 配体结合区域 Met蛋白增加(1分)，Met途径的作用增强（更多地与配 Met基因扩增，表达出的Met蛋白增加，Met 23(3) 2 途径的作用增强，使癌细胞产生耐药性 体表皮生长因子(EGF)结合促进细胞增殖，答出该具体 途径也对)(1分) bde 对1个给1分，错选倒扣分，扣到0为止。如bdP”给1分，“ (4) ace“0分 1 (5)药物对耐药肿瘤的抑制效果如何； 2 药物对人体是否有副作用等 在富含卡拉胶的环境中，存在能够分解卡拉胶 2 (1)的微生物的可能性较大 海藻和海泥富含卡拉胶 稀释 (2)BamHⅢ 2 抄错字母扣1分e (3)复制原点 24(4) 能吸收周围环境中DNA分子 2 感受态“1分 卡拉胶和四环素 2 一个一分，不倒扣 44 (5) 该位点的氨基酸空间上离半胱氨酸更近，容易 该位点的氨基酸空间上离半胱氨酸更近/容易形成二硫键 形成二硫键，而且保守度低，替换后对酶功能 (任答出一句给1分)；保守度低/替换后对酶功能的影响 的影响较小 较小（任答出一句给1分）。广东实验中学2025一2026学年（下)高二级中段模块考试 生物学 命题：关岚岚 审定：陈义虎 校对：傅岚 本试卷分选择题和非选择题两部分，共9页，满分100分，考试用时75分钟。 注意事项： 1.答卷前，生务必用黑色字迹的钢笔或签字笔将自己的姓名、考号填写在答题卷上。 2.选择题每小题选出答案后，用2铅笔把答题卷上对应题目的答案标号涂黑：如需改动， 用橡皮擦千净后，再选涂其它答案：不能答在试卷上。 3.非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卷各题目指定区域内的 相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新的答案；不准使用铅笔和涂改 液不按以上要求作答的答案无效。 4.考生必须保持答题卡的整洁，考试结束后，将答题卷收回。 第一部分选择题（共50分) 一、单选题（共50分，20小题。1-15每题2分，16-20每题4分） 1.如图为传统米醋的酿制流程，接种1使用的是酵母菌。下列叙述正确的是() 接种1 接种2 糯米浸渍 →蒸煮发酵1→发酵2→煮沸 分装保存 A.蒸煮与煮沸的目的都是灭菌，能完全杀死其中的微生物 B.接种1还需加入分解淀粉的菌种 C.发酵1会产生C02,需及时排气，发酵2不产生C02,可密封发酵 D.发酵2过程在发酵液的表面会出现菌膜，这是由酵母菌大量繁殖形成的 2.实验中常根据菌落外表特征鉴别微生物，进而对实验结果做出判断。下列实验不是根据菌落 外表特征做出判断的是() A.艾弗里证明肺炎链球菌的转化因子是DNA B.判断分离酵母菌的固体培养基是否被毛霉污染 C.利用浸有抗生素的滤纸片筛选大肠杆菌中耐药性强的菌株 D.判断在尿素为唯一氮源的培养基上生长的尿素降解菌是否有不同种类 3.基因工程中常用酵母菌来构建基因工程菌。下列相关叙述正确的是() A.酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌，但不能灭活真菌 B,酵母菌是真核细胞，必须放置在CO2培养箱中进行培养 C.可用稀释涂布平板法对酵母菌计数 D.该工程菌不能对合成的多肽链进行加工和修饰 高二生物 第1页共9页 4.将纤维素、半纤维素预处理和酶解后，利用某大肠杆菌菌株发酵产乳酸的过程如图。阻断该 菌株产乙酸（或乙醇）的代谢途径，构建了高产乳酸工程菌。相关叙述错误的是() →葡萄糖→丙酮酸→乳酸 纤维素、预处理，酶解。 半纤维素 可发酵糖 →乙酰磷酸+乙酸（或乙醇） ·五碳糖 →丙酮酸→乳酸 A.需敲除乙酸（或乙醇）代谢途径中相关酶的基因 B.可将纤维素酶基因等导入工程菌以简化生产环节 C.葡萄糖可为大肠杆菌提供碳源 D.发酵过程中需保证充足的氧气以代谢生产乳酸 5.辣椒素作为一种常见的酚类生物碱，广泛用于食品保健、医药工业等领域，目前获得辣椒素的 两条途径如下图所示。下列相关叙述正确的是( 外植体一愈伤组织→根、芽②脱毒苗→果实 细胞分离 提取辣椒素 单细胞高产细胞系→细胞培养物 A.外植体灭菌后，经过程①脱分化形成不定形的薄壁组织团块 B.脱毒苗和高产细胞系的获得均体现了植物细胞的全能性 C.过程②通常选择植物茎尖培养脱毒苗，是因为其分裂能力强 D.过程③采用的植物细胞培养技术几乎不受气候条件的限制 6.下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是() A.将适宜浓度的乙醇和次氯酸钠等比例混合后，对外植体进行消毒 B.培养瓶用专用封口膜封口，可防止外界杂菌侵入并阻止气体交换 C.避光条件下外植体脱分化形成分裂能力强的愈伤组织 D.对愈伤组织进行诱导分化时通常先诱导生根，再诱导生芽 7.研究人员用花椰菜(BB,2n=18)根与黑芥(CC,2n=16)叶片分别制备原生质体，经 PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有33条染色 体。下列叙述正确的是() A.两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞 B.再生植株N的形成证明杂种细胞仍具有全能性 C.花椰菜和黑芥的原生质体能融合，证明两种植物间不存在生殖隔离 D.植株N的B组和C组染色体不能正常联会配对，无法产生可育配子 8.生物工程在社会生产中的应用日益广泛。下列相关技术和方法正确的是() A.原生质体需在低渗溶液中长期保存，以防止过度失水而死亡 B.对供体母牛注射促性腺激素使其超数排卵用于胚胎制备 C.正常细胞体外培养时，都具有贴壁生长的特点 D.动物克隆过程中，核移植的受体细胞通常是去核的卵原细胞 高二生物 第2页共9页 9.我国自主研发的全球首款“异体通用型”药品，含人异体诱导多能干细胞(P$)再生的脊髓神 经祖细胞注射液，可改善脊髓损伤患者的运动功能。该药研发过程不涉及() A.胚胎干细胞的伦理争议 B.细胞的原代和传代培养 C.给药后免疫排斥的监测 D.调控基因的选择性表达 10.抗体-药物偶联物(ADC)常用于肿瘤靶向治疗，其释放的细胞毒素类药物作用于细胞周期 的关键节点，对乳腺癌、淋巴瘤等癌症的治疗效果显著，作用机制如图所示。有关说法错误 的是() ADC被细胞香噬 抗体 ② ⑤ 药物 099 ADC 00 释放 约物 结构甲 细胞凋亡 溶酶件 破裂 A.单克隆抗体的制备需动物细胞融合和动物细胞培养技术的支持 B.推测结构甲在肿瘤细胞中高表达，在正常组织中低表达或不表达 C.ADC中的药物部分可以是DNA损伤剂和抑制纺锤体形成的药剂 D.比较接头-药物结合的稳定性，在血浆中的稳定性低于在溶酶体中 11.利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列叙述错误的是() 牛甲耳部的体细胞 培养 →转基因体细胞 转基 核移植 牛乙的卵母细跑去越重的胚→ 囊胚植入 牛丙的子宫 →犊牛丁 A.卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅱ中期进行 B.胚胎移植时要对牛丙注射激素进行发情处理 C.要对牛乙和牛丙进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应 D.可用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程 12.2014年出生在澳大利亚的一对姐弟被确认为一种极其罕见的半同卵双胞胎。该对半同卵双胞 胎的受精及胚胎发育过程如图所示，下列叙述错误的是() 3.受精卵分裂成3种 5.内细胞团一分为二，各自带有 1.两个精子进入同一卵子 二倍染色体细胞 不同比例的MPI和MP2细胞 精子1 O父系PI MP 卵子 母系M MP2 精子2 ○父系P凹 2,受精卵内有3套染色体全父系P1P2死亡4.细胞分裂增殖 6半同卵双胞胎形成 高二生物 第3页共9页 A.半同卵双胞胎极其罕见的主要原因是过程1有透明带反应和卵细胞膜反应 B.过程2所示的P1、P2和M包括了两个雄原核和一个雌原核 C.过程5内细胞团一分为二发育成的双胞胎共用一个胎盘 D.图中精子1和精子2有可能来自同一个次级精母细胞 I3.某同学使用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术获取cDNA,结果未获得cDNA产 物，分析可能的原因并提出解决方法。下列叙述错误的是() A.逆转录酶失活，更换新的逆转录酶 B.酶的用量不足，增加耐高温的DNA聚合酶的用量 C.RNA模板降解，使用新的RNA模板 D.引物失效，换用新的引物 14.科研团队通过转基因牛乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白。下列叙述正确的是() A.只能从人的乳腺细胞中获取目的基因B.PCR扩增目的基因时边解旋边复制 C.将目的基因与牛乳腺特异性启动子相连D.生产的人乳铁蛋白无需进行安全性评估 15.水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓，但在治疗过程中发现其抗凝血活性低。研究 人员欲提高水蛭素抗凝血活性，正确的操作步骤是() ①确定影响活性的氨基酸序列 ②分析水蛭素的空间结构，找到影响其活性的结构域 ③推测需要替换的氨基酸序列 ④构建表达载体，使其在受体细胞中表达 ⑤PCR技术获得改造后的水蛭素基因 ⑥确定基因中的碱基序列 A.②①③⑤⑥④ B.②③⑥①⑤④ C.②①③⑥⑤④ D.①②③④⑤⑥ 16.养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生 H3,影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少H3产生的微生物，兴趣小组 按图进行实验获得目的菌株，以下说法正确的是() 菌种保 ， 畜禽 培养 利用氨氮 接种 甲：不产脲酶 牛肉膏蛋白陈 粪便 筛选 筛选 不能利用 培养、离心取 的菌株 化合物的 培养基 上清液检测 样本 ⊙ 多个菌落 接种 尿素的多 ① 个单菌落 尿素唯 乙：分泌脲酶 氮源培养基 抑制剂的菌株 A.①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B.②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C.③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D.粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH的减少 高二生物 第4页共9页 17.为了获得抗白叶枯病的水稻品种，研究人员构建了含有抗病基因D的重组Ti质粒（如图）， 通过农杆菌转化法将D基因导入水稻种子诱导成的愈伤组织细胞，最终获得抗病植株。下列 叙述正确的是( T-DNA U6启动子 D基因 潮霉素抗性基因 T-DNA 左边界 右边界「 卡那霉素抗性基因 A.水稻愈伤组织细胞中RNA聚合酶无法识别U6启动子 B.在含重组T质粒的农杆菌中U6启动子不能驱动卡那霉素抗性基因表达 C.农杆菌侵染愈伤组织后所用的筛选培养基中需加入卡那霉素 D.愈伤组织再分化获得的含有D基因的幼苗即为抗病植株 18.转基因抗虫棉有效控制了棉铃虫的危害。但棉铃虫也可能对Bt抗虫蛋白产生抗性。为使转 基因抗虫棉保持抗虫效果，科研人员采取策略1：提高B抗虫蛋白基因的表达量、将两种或 多种Bt抗虫蛋白基因同时转入棉花等措施，研发新一代的抗虫棉。策略2：一些棉区会在转 基因抗虫棉田周围种植一定面积的非抗虫棉花，为棉铃虫提供专门的庇护所。下列叙述错误 的是() A.提高Bt抗虫蛋白基因表达量和Bt抗虫蛋白活性，可降低抗虫棉种植区的棉铃虫种群密度 B,转入棉花植株的两种Bt抗虫蛋白基因的遗传不一定遵循基因的自由组合定律 C,提高Bt抗虫蛋白基因的表达量，可降低棉铃虫抗性基因的突变频率 D.转基因抗虫棉田周围种植非抗虫棉，有利于维持棉铃虫种群的遗传多样性 19.从红豆杉树皮中提取出的紫杉醇是治疗某些癌症的特效药。研究人员构建了转紫杉醇合成关 键酶(Bapt)基因的红豆杉细胞，通过悬浮培养获得了高纯度的紫杉醇，主要流程如下图。 下列叙述错误的是( 引物1 引物2 3Bapt速基因☐} 筛选发出绿色 引物3 引物4 筛选，⊙⑧ 转化 荧光的细胞 →紫杉醇 ®过 悬浮培养 Ap Ti质粒 农杆菌 红豆杉细胞 T-DNA EcoRI BamHI GFPSac I 注：Ap表示氨苄青霉素抗性基因；GP表示绿色荧光蛋白基因 A.利用PCR技术获取Bpt基因时，应选用引物2和引物3 B.构建基因表达载体时，宜选用EcoRI和SacI酶切 C.利用添加氨苄青霉素的培养基可初步筛选导入T质粒的农杆菌 D.工厂化生产紫杉醇需将改造后的红豆杉细胞培养至愈伤组织 高二生物 第5页共9页 20.我国科学家最新研究发现，沙门氏菌（一种致病细菌）可激活免疫细胞，发挥抗肿瘤功能。 肿瘤组织往往结构致密，环境偏酸性且含氧量较低。为保证沙门氏菌能在肿瘤区域稳定存活 并繁殖，同时又不危害机体正常细胞，研究人员设计了氧气敏感型启动子，改造沙门氏菌以 实现靶向效果。改造后的沙门氏菌(DB1)的部分DNA结构如图。下列说法正确的是() 0 、“?”作用 形成细胞壁 物质r ○○ 一启动子 物质a 从终止子 P2 基因是基因 h基因 注： P1为组成型启动子，可持续发挥作用： P2、P3为诱导型启动子，需要特殊因素诱导才能发挥作用： h基因表达产物可增强沙门氏菌的肿瘤穿透能力。 A.P1是f基因的转录起始位点 B.图中“？”应为促进作用 C.为验证DB1的靶向效果，可将图中启动子P2替换为P1,形成DB1的对照组 D.沙门氏菌不危害正常细胞，因此不需考虑该细菌在体内过度繁殖这一风险 第二部分 非选择题(50分) 二、非选择题题（共50分，4小题。） 21.(12分)异亮氨酸是一种必需氨基酸，可用作食品添加剂。研究者希望利用大肠杆菌实现异 亮氨酸的高效发酵生产。 (1)发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要 的产物的过程。为大量生产异亮氨酸，相应的发酵工程一般包括菌种选育、 一、培养基的 配制和灭菌、接种、产物的分离提纯等方面。获得纯净的大肠杆菌的关键是 (2)C酶是异亮氨酸合成途径的关键酶，若失去功能，细菌不能合成异亮氨酸。为了获得催化 效率更高的C酶，研究者对C基因进行随机诱变，将诱变后的基因分别转入 的大肠杆 菌，在（含不含）异亮氨酸的固体培养基上进行培养，选择最适的菌株命名为菌株甲。从 用途上看，该培养基属于 培养基。 高二生物 第6页共9页 (3)自然条件下，菌株甲通过图1途径产生异亮氨酸，但是异亮氨酸会反馈作用于内源基因1 和内源基因2，限制产量。为解除该限制，研究者对菌株甲进行改造，用外源的不受反馈调节影响 的A基因、B基因替代大肠杆菌对应的内源合成基因，获得菌株乙和菌株丙，如下表所示。 完成替换后，研究者检测对应菌株的c酸和异亮氨酸含量，结果如图2。解释菌株乙和菌株丙 中酸和异亮氨酸含量产生差异的原因 61 ☐α酸 口异亮氨酸 内源基因1内源基因2 菌种 相关基因 菌株甲 内源基因1 内源基因2 吟4 葡萄糖→→二α酸→一→异亮氨酸 菌株乙 基因A 内源基因2 3 图1 菌株丙 基因A 基因B (g/L) 2 1 04 菌株甲菌株乙 菌株丙 图2 (4)研究者希望用更经济的原料、更简单的分离提纯手段获得发酵产物。请在上述研究基础上， 提出一个对现有菌株继续进行优化改造的研究方向 22.(13分)甘蔗是蔗糖的主要来源，甘蔗R具有高产高糖的优良特性但耐寒性差：甘蔗G是耐 寒品种。科研人员利用植物体细胞杂交技术以期快速培育出耐寒性更强且性状更优良的甘蔗新品 种。 R-6G 1② 甘蔗R 1① 甘蔗R 原生质体 ④ 杂种原⑤ ⑥ 生质体 愈伤组织 再生植株 甘蔗G 甘蔗G ① 原生质体 注：IOA可抑制细胞呼吸第一阶段： T③ R一6G可抑制细胞呼吸第二、三阶段。 IOA 图1 (1)如图1，利用 去除细胞壁获得原生质体。 ▣激素组合1：2mg/L2,4-D+3mg/L6-BA ▣激素组合2：4mg/L2,4-D+1mg/L6-BA 分别加入IOA和R-6G处理后诱导原生质体融合。仅有 100t -5--5-5-5---56-0---50-55 杂种原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是 90 60 (2)科研人员发现制备原生质体及原生质体融合后，均 50 40 会不同程度发生氧化褐变、细胞壁再生困难的现象。为解 决这一问题，科研人员利用甘蔗杂种原生质体进行以下实 8 0 验。 第3天 第7天第10天第15天 培养天数 ①由图2可知，甘蔗杂种原生质体再生过程中最好使用 图2 激素组合一。 高二生物 第7页共9页 ②科研人员推测激素必须通过促进细胞内果胶合成关键酶基因GAUT表达的这个唯一途径， 来促进细胞壁再生，请将下表补充完整，为该推测提供证据。 检测指标及预期实验结果 组别 激素使用 实验处理 GAUT基因表达量 (用+的多少表示) 1 不使用激素 甘蔗杂种原生质体 低 ++ 2 使用激素 甘蔗杂种原生质体 高 ++++ 抑制甘蔗杂种原生质体 3 不使用激素 中GAUT基因表达 4 C ③上表中a指标的检测数据中，如果第4组的结果为 和预期结果不同，则说 明 0 23.(12分)表皮生长因子受体(EGFR)结构如图1，可与配体表皮生长因子(EGF)结合促进 细胞增殖，其过表达可驱动肿瘤发生。研究人员通过制备EGF单抗治疗癌症。 配体结合 0 @ 60 曲线1 胞外区域 8 曲线2 配体结合 癌细胞 0 ) EGFR Met 30 单次跨膜结构000 10 口曲线3 酪氨酸激酶域 0 00.010.1110100 抗体浓度/（μg/ml) 图3 图1 图2 (1)研究人员将EGFR完整蛋白注射到小鼠体内，分离出B淋巴细胞后诱导其与小鼠的 细胞融合，经筛选及克隆化培养，最终获得EGFR单抗。利用EGFR单抗治疗癌症的机理 是 (2)将EGF℉单抗与癌细胞混合后发现，其阻断癌细胞增殖的效率低下。研究人员进而将完整 EGFR改成用EGFR的 作为抗原并重新制备，获得的单抗抑制癌细胞增殖效果明显提升。 (3)利用新制备的EGF单抗治疗癌症，病人会出现耐药性。检测发现耐药病人癌细胞中的 Mt基因（编码另一种生长因子的受体）拷贝数增多。推测耐药性的产生可能是该基因扩增导致 的，理由是 (4)研究人员进一步构建了EGR-Mt双特异性抗体（如图2）。不同类型抗体的Fc段都可与 杀伤细胞（如NK细胞）表面的Fc受体结合，介导杀伤细胞直接杀伤靶细胞，称为抗体依赖-细 胞介导的细胞毒性作用(ADCC)。为检测EGFR-Mt双特异性抗体的作用效果，其中实验组应选 用的实验材料是 (填字母)。 a.EGFR单抗 b.EGFR-Met双特异性抗体 c.无关抗体 d.NK细胞 e.癌细胞 f.B细胞 结果表明双特异性抗体的ADCC活性相比EGFR单抗更高。那么实验组应对应图3的曲线 高二生物 第8页共9页 (5)将该双特异性抗体开发成药物用于EGFR靶点耐药患者的治疗，请提出一个需进一步研究 的问题： 24.(13分)卡拉胶是一类源于海洋红藻的大分子多糖（常温下不溶于水），可被某些细菌降解为 具有多种应用前景的卡拉胶寡糖。某研究小组拟筛选具有高活性卡拉胶酶(CG)的菌种用于生产 卡拉胶寡糖。回答下列问题： (1)选择海藻和海泥作为样本筛选卡拉胶降解菌的原因是。将培养后的菌液混匀并充 再接种至96孔板中，经培养和筛选获得了CG活性最高的菌种。 (2)为构建携带cg(CG的编码基因)的大肠杆菌表达载体（图1），对cg的PCR扩增产物 和质粒进行双酶切，形成黏性末端，随后用E.coliDNA连接酶连接。为保证连接准确性和效率， cg转录模板链的5'端最好含有 酶切位点。 mm 限制酶的识别序列和切割位点如下： 四环素 抗性基因 5-GGATCC-3 .5-GATATC-3 BamH I 3-CCTAGG-5' EcoRV 3'-CTATAG-5' 质粒 5-CCCGGG-3' 5-ACTAGT-3 启动子 终止子 Sma I 3-GGGCCC-5' SpeI 3-TGATCA-5 卡那霉素 抗性基因 EcoRV 5-TCTAGA-3 SpeI BamH I XbaI 3-AGATCT-5' SmaI Xbal 图1 (3)作为符合条件的基因表达载体，未在图中显示的组件是 (4)为将构建好的表达载体转入大肠杆菌，需要先用C2+处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一 种」 的生理状态，随后在含」 的培养基中培养一段时间后，根据菌落周围有无透 明圈筛选目的菌株。 (5)已知空间上邻近的两个半胱氨酸易形成二硫 缬氨酸)第76位 键，从而提升蛋白质的耐热性。为提高CG的耐热 赖氨酸 保守度：0.83 第44位 性，研究人员分析了五个氨基酸位点的空间距离和保 保守度：0.31 半胱 第119位 氨酸 守度（保守度值越大表明该位点对酶的功能越关键)， 精氨酸 第293位 保守度：0.31 如图2所示。根据分析结果，选择第 位的氨基 第45位 苏氨酸 保守度：0.92 酸替换成半胱氨酸最合适，原因是 注：虚线长度代表氨基酸间的空间距离 图2 高二生物 第9页共9页