精品解析：河北衡水中学2025-2026学年度第二学期高二年级二调考试生物试卷

2025—2026学年度第二学期高二年级二调考试 生物试卷 一、单选题：本题共20小题，每小题2分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 传统发酵技术在我国食品工业中有着深厚的历史积淀，并逐步发展为现代发酵工程，下列相关叙述错误的是（　　） A. 醋酸杆菌可在有氧条件下将糖或酒精转化为醋酸 B. 乳酸菌是异养厌氧型生物，可用于制作酸奶或泡菜 C. 制作腐乳时，毛霉可分泌蛋白酶催化豆腐中蛋白质和脂肪的水解 D. 传统发酵技术多用于家庭制作食品，发酵工程还可用于生产抗生素等药品 2. 酵母干重的50%左右都是蛋白质，含有9种人体必需的氨基酸。生产酵母蛋白的酵母菌，经挑选、培育，蛋白质含量可高达80%。而酿酒过程中筛选出的优良菌种具有高效的产酒精能力与高酒精耐受性。下列关于酵母菌的说法，正确的是（ ） A. 由于酵母菌蛋白质含量高，其菌体可用于单细胞蛋白的生产 B. 进行酿酒酵母扩大培养的过程中，需要先有氧后无氧的环境 C. 对酵母菌进行显微镜直接计数时，需选用细菌计数板 D. 由酿制葡萄酒转为酿制果醋的过程中，需要通入无菌空气并降低温度 3. 某兴趣小组试图从土壤中分离分解尿素的细菌，流程图如图所示： 关于上述过程的说法错误的是（　　） A. 该实验配制的培养基中不含蛋白胨 B. 上图中菌液稀释10倍时所加的无菌水的量都为9mL C. 若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置未接种的培养基作为对照 D. 三个培养皿中分别形成了54个、46个、50个菌落，则1g土壤样本中约有分解尿素的细菌5×107个 4. 下列关于微生物的培养技术的说法正确的是（ ） A. 细菌适宜在酸碱度接近中性或微碱性的潮湿土壤中生长，绝大多数分布在距地表3～8cm的土壤层 B. 土壤中存在多种自生固氮菌，它们对于增加土壤中氮素有重要意义。如果要分离土壤中的自生固氮菌，无需加碳源 C. 可在培养基中加入青霉素，从而抑制细菌生长，并将酵母菌和青霉菌等真菌分离开 D. 菌落的大小、颜色、有无荚膜、隆起程度等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定依据 5. 我国常用滤膜法测定饮用水中的大肠杆菌数目来检测水样是否符合饮用水标准，流程图如下，其中EMB培养基中的伊红美蓝可使大肠杆菌菌落呈紫黑色。某研究小组将10mL待测水样加入90mL无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上紫黑色菌落数平均为33。以下说法正确的是（ ） A. 从功能上看伊红美蓝培养基属于选择培养基 B. 过滤装置和水样等均需高压蒸汽灭菌后使用 C. 沾在滤杯杯壁上的部分微生物需用蒸馏水冲洗，并再次过滤 D. 经推测1L待测水样中大肠杆菌数目约为3300个 6. 啤酒生产的简要流程如下图所示，其中糖化主要是利用过程①中大麦种子发芽产生的淀粉酶催化淀粉水解。下列叙述错误的是（　　） A. 过程②煮沸可终止淀粉酶的进一步作用 B. 活化的酵母菌菌种经扩大培养后再接种，可缩短发酵时间 C. 发酵过程中要适时排气，发酵后期需缩短排气的时间间隔 D. 过程③发酵时可通过检测发酵液的酒精浓度来判断发酵进程 7. 潘灯玉露是最具代表性的软叶类多肉植物，因其叶片晶莹剔透等特点，深受广大植物爱好者青睐。但因潘灯玉露生长速度缓慢、分生能力有限，难以在短时间内大量取得无性繁殖材料。为进一步满足市场对潘灯玉露的大量需求，某实验团队利用植物组织培养技术对其进行繁殖，下表为外源激素对脱分化的影响的相关数据。下列叙述正确的是（　　） 剂量：mg/L NAA=0.10 6-BA=0.00 6-BA=0.05 6-BA=0.10 6-BA=0.50 6-BA=1.00 诱导脱分化率/% 6.7 26.7 53.3 66.7 40.0 A. 选取无病虫害的潘灯玉露叶片为外植体，对其和其他实验用具进行灭菌 B. 再分化需给予适当光照并按需调整培养基中植物激素等物质的用量 C. 配制0.10 mg/LNAA+0.10 mg/L6-BA的MS培养基诱导脱分化的效果最好 D. 该技术依据的原理是植物细胞的全能性，完成分化的试管苗可直接移栽入土 8. 细胞工程为农业生产提供了新途径。下列叙述正确的是（ ） A. 植物体细胞杂交获得的杂种植株一定可育，并能表现双亲优良性状 B. 体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核 C. 用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 D. 融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 9. 长春新碱（VCR）通过抑制微管蛋白聚合妨碍纺锤体的形成，从而阻断细胞分裂，具有非常高的毒性。将VCR与单克隆抗体通过特殊的接头连接形成抗体—药物偶联物（ADC），可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，ADC的作用机制如下图所示。下列分析正确的是（ ） A. ADC进入肿瘤细胞需要载体蛋白的协助并消耗ATP B. 溶酶体内的蛋白酶催化VCR和抗体之间肽键的断裂 C. 纺锤体形成异常可激活细胞凋亡相关基因的表达 D. VCR通过抑制微管蛋白的聚合将细胞周期阻滞在分裂间期 10. 将人、鼠细胞悬液混合并诱导细胞融合（只考虑细胞两两融合）后，在HAT培养基上，同时含有T、H基因（独立遗传）的细胞才能存活和增殖。增殖过程中，细胞内人染色体随机丢失，只残留一条或几条。对处于分裂中期细胞的镜检结果如表。下列相关叙述正确的是（ ） 细胞 融合细胞 人 鼠 细胞样编号 残留人染色体编号 ttHH TThh ① 17 ② 10、10、17 ③ 17、X A. 在HAT培养基上，融合细胞均能存活和增殖 B. 可以确定①的基因组成为TTTTHHhhhh C. 可以确定①②③的相关基因组成相同 D. 可以将T（t）基因定位于人第17染色体 11. 某研究小组尝试将植物甲、乙的原生质体融合以培育抗逆新品系，同时利用杂交瘤技术制备针对某病毒的单克隆抗体。下列叙述正确的是（ ） A. 两项技术都需用纤维素酶、果胶酶处理细胞 B. 两项技术都可用聚乙二醇或电融合促进细胞膜融合 C. 两项技术所用培养基中的主要碳源都是葡萄糖 D. 两项技术最终都能获得具有双亲遗传物质的新个体 12. 多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。图列举了几项技术成果。下列叙述正确的是（　　） A. 培养早期胚胎的试剂均须进行高压蒸汽灭菌 B. ①②技术中均可用Ca²⁺载体处理，但作用对象不同 C. ①③技术中需取内细胞团进行性别鉴定，方可获得相应的奶牛或山羊 D. ③可通过①②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 13. 北方白犀牛目前在世界范围内仅剩下两头雌性，研究人员设法保存了北方白犀牛的精子和卵细胞，并计划利用数量更多的南方白犀牛繁衍北方白犀牛。此过程不涉及的操作是（ ） A. 发情处理 B. 精子获能处理 C. 细胞核移植 D. 胚胎培养 14. 下图为经过体外受精和胚胎分割、移植培育优质奶牛的过程。下列叙述错误的是（ ） A. 体外受精过程中会发生雌雄原核核膜消失现象 B. 胚胎移植前需要对受体母牛进行同期发情处理 C. 胚胎分割可看作动物无性繁殖或克隆方法之一 D. 将①均等分割成8等份的成活率与图示的相同 15. 为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如图）。 为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因，同时避免内源HMA3基因的干扰，在进行PCR扩增时，应选择的引物组合是（ ） A. ①+③ B. ①+② C. ③+② D. ③+④ 16. 下列关于生物工程技术的叙述，错误的是（　　） A. 获取马铃薯脱毒苗常选取茎尖进行组织培养 B. 为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射性激素以促进超数排卵 C. 单克隆抗体制备过程中需用特定培养基筛选得到杂交瘤细胞 D. 生产转基因农作物时，需防止转基因花粉的传播，避免基因污染 17. 基因水平转移是指基因不通过父母到子代的垂直传递，而是在不同物种间直接传递的过程。下列操作中不属于基因水平转移的是（　　） A. 农杆菌侵染植物时，将Ti质粒上的T-DNA转移到植物细胞的基因组中 B. 利用基因工程技术，将人的凝血因子基因通过载体导入山羊受精卵 C. 土壤中的真菌可以把自身的纤维素分解酶基因传递给寄生于植物的线虫 D. 用核移植技术培育“三亲婴儿”，目的是将亲代的正常基因传递给后代 18. 干扰素β是一种蛋白质，常用于治疗多发性硬化症。研究人员发现，用甲硫氨酸替换干扰素β第18位的半胱氨酸可以降低其免疫原性。在这项替换研究中，目前可行的直接操作对象是（ ） A. 氨基酸 B. 核糖核苷酸 C. 蛋白质 D. 基因 19. 关于生殖性克隆和治疗性克隆的叙述，错误的是（ ） A. 治疗性克隆为了治疗疾病，不涉及核移植技术 B. 生殖性克隆和治疗性克隆都涉及伦理问题 C. 我国政府禁止任何生殖性克隆人实验 D. 生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体 20. 下列关于生物武器的叙述，有误的是（　　） A. 生物武器可以直接或者通过食物、生活必需品等途径散布 B. 生物武器一旦被使用，就可以对军队和平民造成大规模杀伤后果 C. 因为生物武器造价昂贵，杀伤性大，所以一直没有被应用到战争中 D. 生物武器种类包括致病微生物、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等 二、不定项选题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 21. 以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法错误的是（ ） A. ①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死 B. ②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌 C. ③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入 D. ④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低 22. 研究人员取某糖尿病患者（相关基因缺陷导致，具有遗传倾向）的成纤维细胞在体外将其重编程为iPS 细胞，再诱导iPS 细胞分化为胰岛B细胞后移植到该患者体内，实现了临床功能性治愈。下列叙述错误的是（ ） A. 培养iPS 细胞的培养液中含有蔗糖、氨基酸、无机盐等营养成分 B. 诱导iPS 细胞分化成胰岛 B细胞的过程体现了细胞的全能性 C. 上述移植过程相对于异体移植可以降低患者的免疫排斥反应 D. 经过上述方式治愈的患者，其后代不会再患该种糖尿病 23. 下图为PML蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述错误的有（　　） 注：＋表示该孔中存在对应蛋白的抗体，-表示没有对应抗体 A. 将质粒导入大肠杆菌前需用Ca2＋处理细胞 B. W细胞是先提取B淋巴细胞再用PML蛋白免疫而获得 C. 步骤2筛选得到的是既能无限增殖又能产生特定抗体的杂交瘤细胞 D. 应选择孔2中的细胞注射到小鼠的腹腔培养 24. 下列有关“DNA 的粗提取与鉴定”“DNA 片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，错误的是（　　） A. “DNA 的粗提取与鉴定”和“绿叶中色素的分离”实验的原理都利用了物质的溶解度不同 B. “DNA 的粗提取与鉴定”实验中，取洋葱研磨液的上清液，加入等体积 70％的冷酒精后析出 DNA C. 电泳鉴定 DNA 片段利用了 DNA 在电场中会向着与它所带电荷相同的电极移动的原理 D. 待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时停止电泳并取出凝胶置于紫外灯下观察和照相 25. 琼脂糖凝胶电泳常用于核酸样品的分析，样品1-4的电泳结果如图所示（“+”“-”分别代表电泳槽的阳极和阴极）。已知样品1和2中的DNA分子分别是甲和乙，甲只有限制酶R的一个酶切位点，样品3和4中有一个样品是甲的酶切产物。下列叙述正确的是（ ） A. 配制琼脂糖凝胶时需选用适当的缓冲液 B. 该实验条件下甲、乙两种DNA分子均带负电荷 C. 甲、乙两种DNA分子所含碱基对的数量可能不同 D. 据图推测样品3可能是甲被酶R完全酶切后的产物 三、非选择题：本题共4题，共45分。 26. 根据所学知识，完成下列小题： （1）载体必须具备的条件：①能在受体细胞中保存下来并能______；②具有1个或多个___________，以便与外源基因连接。③具有________。 （2）PCR的含义：PCR是______的缩写。它是一项根据_________的原理，在体外提供____________的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。 （3）PCR技术可以分为____、___和____三步。在PCR反应缓冲液中添加Mg2+，目的：________。 （4）转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持______和_____的过程。 27. 为提高降解效率，研究人员将甲醛分解基因导入筛选出的甲醛分解菌中，下表为相关限制酶的识别序列及酶切位点，下图为获得转基因甲醛分解菌的过程。 限制酶 识别序列及酶切位点 限制酶 识别序列及酶切位点 MboI 5'⋯⋯↓GATC⋯3' SacI 5'…GGGCT↓C⋯3' SnaBI 5'…TAC↓GTA⋯3 BamHI 5'…G↓GATCC⋯3' （1）据图分析，甲醛分解基因的模板链是________（填“甲链”或“乙链”）。 （2）已知甲醛分解基因中不含表中限制酶的识别序列。利用PCR技术扩增甲醛分解基因时，选择的引物应为________，为保证甲醛分解基因与载体正确连接，在所选引物上分别添加的限制酶识别序列的情况是________（要求写出在何种引物的5′端或3′端添加何种限制酶的识别序列），不选择另外两种限制酶的原因是________。 （3）将重组质粒导入甲醛分解菌后，将其在含新霉素的培养基培养，长出的呈________（填“黄色”或“白色”）的菌落为成功转化的转基因甲醛分解菌。 （4）利用________技术检测宿主菌是否表达出相应蛋白质。 28. （一）银杏的次生代谢产物，如银杏黄酮（具有抑制癌细胞增殖，扩张冠脉血管、增加冠脉血液流量和解除痉挛的作用）、银杏内酯（具有促进脑血微循环、抑菌抗炎的作用）等，一般从叶片中取得，但传统载植方法周期长、成本高、受环境影响大，无法很好满足市场需求。因而利用组织培养技术，从愈伤组织中提取，具有一定的研究意义与应用前景。请回答下列相关 问题： （1）研究表明，选择银杏叶片比选择胚作为外植体材料成功率更低，原因可能是诱导叶片脱分化形成______的难度较大。因此，往往选择细胞生长分裂旺盛的部位作为外植体，但外植体也不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛，但在____时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用__________多次冲洗也不易清除，导致细胞易失活甚至破裂。 （2）为获得银杏的次生代谢产物，______（“需要”或“不需要”）走完上述流程图的全过程。 （3）此外，研究表明，用通气较为不良的介质封口，如塑料膜或玻璃纸，可以提升黄酮和内酯的产量，可能原因是_______胁迫细胞诱导产生次生代谢物。 （4）学习了植物组培技术后，同学们尝试进行了以菊花枝条为外植体的组织培养，结果有同学在首次对菊花继代培养配制MS生根培养基时，忘记添加NAA（NAA：萘乙酸，为生长素类似物），结果与添加NAA的生根培养基中的菊花幼苗相比，无添加NAA培养基中的菊花幼苗也有生根，其原因可能是_______。 （二）抗CD14单克隆抗体的制备流程如图所示： （5）步骤①向小鼠注射CD14抗原，其目的是______。 （6）步骤③的目的是_______，在步骤④中，根据抗原—抗体特异性结合的原理，需加入CD14进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体，原因是_____。 （7）步骤⑤将筛选后的细胞注射到小鼠腹腔进行增殖培养。步骤⑥从_____中提取到大量的抗CD14抗体，成为单克隆抗体，除此以外，还可以运用____技术进行体外扩增培养，获得单克隆抗体。 29. I．研究人员欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的细菌，并对其进行研究。请回答下列问题： （1）在细菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以_________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，除碳源外，该培养基还含有氮源、水、无机盐和_________。不同微生物生长所需的pH是不同的，在配制培养基时，pH的调节应在灭菌_________（填“前”或“后”）。 （2）在将筛选到的微生物进行分离纯化时，采用了两种不同的接种方法，培养一段时间后得到如图所示的菌落。 平板A所采用的接种方法是_________。A、B两个平板所采用的接种方法适合用来计数的是_________（填“A”或“B”）。 （3）根据下图所示，4号试管的土壤样品稀释了_________倍，根据图示的三个平板上的菌落结果，可以估算1克土壤中的细菌数为_________个。 Ⅱ．现代工业生产中往往采用规范的流程进行发酵生产以提高生产效率，如图是发酵工程生产产品的流程图。据图回答下列问题： （4）在啤酒生产中，使用①改造的啤酒酵母，可以加速发酵过程，缩短生产周期，①是_________；高产青霉素菌种是通过②培育的，②是_________；③是细胞工程。 （5）⑤表示_________。 （6）若发酵所得产品是单细胞蛋白，则是往往采用_________的方法进行提取。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025—2026学年度第二学期高二年级二调考试 生物试卷 一、单选题：本题共20小题，每小题2分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 传统发酵技术在我国食品工业中有着深厚的历史积淀，并逐步发展为现代发酵工程，下列相关叙述错误的是（　　） A. 醋酸杆菌可在有氧条件下将糖或酒精转化为醋酸 B. 乳酸菌是异养厌氧型生物，可用于制作酸奶或泡菜 C. 制作腐乳时，毛霉可分泌蛋白酶催化豆腐中蛋白质和脂肪的水解 D. 传统发酵技术多用于家庭制作食品，发酵工程还可用于生产抗生素等药品 【答案】C 【解析】 【详解】A、醋酸杆菌是好氧菌，在有氧条件下能将葡萄糖或乙醇转化为醋酸，A正确； B、乳酸菌为异养厌氧型，其无氧呼吸产生乳酸，用于酸奶和泡菜制作，B正确； C、毛霉分泌的蛋白酶只能催化蛋白质水解，不能催化脂肪水解，C错误； D、传统发酵技术多用于家庭制作食品（如腐乳，泡菜），而发酵工程可工业化生产抗生素等药品，D正确。 故选C。 2. 酵母干重的50%左右都是蛋白质，含有9种人体必需的氨基酸。生产酵母蛋白的酵母菌，经挑选、培育，蛋白质含量可高达80%。而酿酒过程中筛选出的优良菌种具有高效的产酒精能力与高酒精耐受性。下列关于酵母菌的说法，正确的是（ ） A. 由于酵母菌蛋白质含量高，其菌体可用于单细胞蛋白的生产 B. 进行酿酒酵母扩大培养的过程中，需要先有氧后无氧的环境 C. 对酵母菌进行显微镜直接计数时，需选用细菌计数板 D. 由酿制葡萄酒转为酿制果醋的过程中，需要通入无菌空气并降低温度 【答案】A 【解析】 【详解】A、单细胞蛋白指微生物菌体本身，题干说明酵母菌蛋白质含量高且富含人体必需氨基酸，因此其菌体可用于单细胞蛋白的生产，A正确； B、酿酒酵母扩大培养的目的是快速增加酵母菌种群数量，酵母菌只有在有氧条件下才能大量繁殖，因此扩大培养需要全程有氧环境，B错误； C、细菌计数板适用于个体更小的细菌计数，酵母菌细胞体积远大于细菌，显微镜直接计数酵母菌需选用血球计数板，C错误； D、果醋发酵依靠醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，最适发酵温度为30~35℃，高于果酒发酵的18~30℃，因此由酿酒转果醋时需要通入无菌空气并升高温度，D错误。 3. 某兴趣小组试图从土壤中分离分解尿素的细菌，流程图如图所示： 关于上述过程的说法错误的是（　　） A. 该实验配制的培养基中不含蛋白胨 B. 上图中菌液稀释10倍时所加的无菌水的量都为9mL C. 若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置未接种的培养基作为对照 D. 三个培养皿中分别形成了54个、46个、50个菌落，则1g土壤样本中约有分解尿素的细菌5×107个 【答案】C 【解析】 【详解】A、本实验的目的是从土壤中分离分解尿素的微生物，而蛋白胨主要提供氮源和维生素等，所以蛋白胨不能作为配制本培养基的原料，A正确； B、题图中菌液稀释10倍时需要加入1 mL菌液和9 mL无菌水，B正确； C、接种的培养基作为对照是用来判断培养基是否被污染，若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置接种的完全培养基作为对照，C错误； D、根据图解可知，对菌液进行稀释时共稀释了106倍，分别接种了3个培养皿，一段时间后，三个培养皿中分别形成了54个、46个、50个菌落，则该1 g土壤样本中约有分解尿素的细菌(54＋46＋50)÷3×106＝5×107个，D正确。 故选C。 4. 下列关于微生物的培养技术的说法正确的是（ ） A. 细菌适宜在酸碱度接近中性或微碱性的潮湿土壤中生长，绝大多数分布在距地表3～8cm的土壤层 B. 土壤中存在多种自生固氮菌，它们对于增加土壤中氮素有重要意义。如果要分离土壤中的自生固氮菌，无需加碳源 C. 可在培养基中加入青霉素，从而抑制细菌生长，并将酵母菌和青霉菌等真菌分离开 D. 菌落的大小、颜色、有无荚膜、隆起程度等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定依据 【答案】A 【解析】 【详解】A、细菌生长的最适pH为中性或微碱性，多分布在潮湿、有机质丰富的土壤中，绝大多数位于距地表3~8cm的土层，A正确； B、自生固氮菌可自主固定空气中的氮气，因此分离培养基无需添加氮源，但自生固氮菌属于异养型微生物，必须提供有机碳源才能存活，B错误； C、青霉素可抑制细菌细胞壁的合成，从而筛选出真菌，但酵母菌和青霉菌都属于真菌，均对青霉素不敏感，无法通过加青霉素的培养基分离二者，C错误； D、菌落的大小、颜色、隆起程度等是肉眼可见的菌落特征，可作为鉴定依据，但有无荚膜是细菌的细胞结构，无法通过肉眼直接观察，不属于肉眼可见的鉴定依据，D错误。 5. 我国常用滤膜法测定饮用水中的大肠杆菌数目来检测水样是否符合饮用水标准，流程图如下，其中EMB培养基中的伊红美蓝可使大肠杆菌菌落呈紫黑色。某研究小组将10mL待测水样加入90mL无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上紫黑色菌落数平均为33。以下说法正确的是（ ） A. 从功能上看伊红美蓝培养基属于选择培养基 B. 过滤装置和水样等均需高压蒸汽灭菌后使用 C. 沾在滤杯杯壁上的部分微生物需用蒸馏水冲洗，并再次过滤 D. 经推测1L待测水样中大肠杆菌数目约为3300个 【答案】D 【解析】 【详解】A、含伊红美蓝的培养基从功能上看属于鉴定培养基，A错误； B、过滤装置和需高压蒸汽灭菌，水样不能灭菌，B错误； C、沾在滤杯杯壁上的部分微生物需用无菌水冲洗，避免杂菌混入，C错误； D、10mL菌液中大肠杆菌数目为33个，则1L中的数目为100×33=3300，D正确。 故选D。 6. 啤酒生产的简要流程如下图所示，其中糖化主要是利用过程①中大麦种子发芽产生的淀粉酶催化淀粉水解。下列叙述错误的是（　　） A. 过程②煮沸可终止淀粉酶的进一步作用 B. 活化的酵母菌菌种经扩大培养后再接种，可缩短发酵时间 C. 发酵过程中要适时排气，发酵后期需缩短排气的时间间隔 D. 过程③发酵时可通过检测发酵液的酒精浓度来判断发酵进程 【答案】C 【解析】 【详解】A、淀粉酶的本质是蛋白质，高温煮沸会使淀粉酶空间结构改变、变性失活，从而终止其催化作用，A正确； B、活化酵母菌经扩大培养后，可获得大量菌种，接种后能加快发酵进程，缩短发酵时间，B正确； C、酵母菌发酵产生酒精和二氧化碳，发酵后期营养物质逐渐减少，酵母菌代谢速率减慢，二氧化碳产生量减少，因此需要延长排气的时间间隔，而非缩短，C错误； D、发酵的产物是酒精，酒精产量随发酵进程不断变化，因此可通过检测发酵液的酒精浓度判断发酵进程，D正确。 故选C。 7. 潘灯玉露是最具代表性的软叶类多肉植物，因其叶片晶莹剔透等特点，深受广大植物爱好者青睐。但因潘灯玉露生长速度缓慢、分生能力有限，难以在短时间内大量取得无性繁殖材料。为进一步满足市场对潘灯玉露的大量需求，某实验团队利用植物组织培养技术对其进行繁殖，下表为外源激素对脱分化的影响的相关数据。下列叙述正确的是（　　） 剂量：mg/L NAA=0.10 6-BA=0.00 6-BA=0.05 6-BA=0.10 6-BA=0.50 6-BA=1.00 诱导脱分化率/% 6.7 26.7 53.3 66.7 40.0 A. 选取无病虫害的潘灯玉露叶片为外植体，对其和其他实验用具进行灭菌 B. 再分化需给予适当光照并按需调整培养基中植物激素等物质的用量 C. 配制0.10 mg/LNAA+0.10 mg/L6-BA的MS培养基诱导脱分化的效果最好 D. 该技术依据的原理是植物细胞的全能性，完成分化的试管苗可直接移栽入土 【答案】B 【解析】 【详解】A、外植体只能进行消毒处理，若对外植体灭菌会杀死其活细胞，导致组织培养失败，仅实验用具需要灭菌，A错误； B、再分化需光照以促进叶绿体形成，且需调整生长素/细胞分裂素比例以诱导器官形成，B正确； C、由表格数据可知，NAA浓度固定为0.10mg/L时，6-BA浓度为0.50mg/L时诱导脱分化率最高，因此0.10mg/L NAA+0.50mg/L 6-BA的MS培养基诱导脱分化效果最好，C错误； D．植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，但完成分化的试管苗需要先经过炼苗处理，适应外界环境后再移栽入土，直接移栽会导致成活率极低，D错误。 8. 细胞工程为农业生产提供了新途径。下列叙述正确的是（ ） A. 植物体细胞杂交获得的杂种植株一定可育，并能表现双亲优良性状 B. 体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核 C. 用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 D. 融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 【答案】D 【解析】 【详解】A、植物体细胞杂交获得的杂种植株存在染色体联会紊乱的可能性，并不一定可育，且性状表达受基因互作、环境等多种因素影响，不一定能表现双亲所有优良性状，A错误； B、体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的遗传物质，只有1个细胞核，B错误； C、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故用果胶酶和纤维素酶去除愈伤组织的细胞壁可获得原生质体，C错误； D、用纤维素酶和果胶酶分别处理不同的植物细胞，得到原生质体，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株，故融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织，D正确。 9. 长春新碱（VCR）通过抑制微管蛋白聚合妨碍纺锤体的形成，从而阻断细胞分裂，具有非常高的毒性。将VCR与单克隆抗体通过特殊的接头连接形成抗体—药物偶联物（ADC），可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，ADC的作用机制如下图所示。下列分析正确的是（ ） A. ADC进入肿瘤细胞需要载体蛋白的协助并消耗ATP B. 溶酶体内的蛋白酶催化VCR和抗体之间肽键的断裂 C. 纺锤体形成异常可激活细胞凋亡相关基因的表达 D. VCR通过抑制微管蛋白的聚合将细胞周期阻滞在分裂间期 【答案】C 【解析】 【分析】有丝分裂过程： （1）间期：进行DNA的复制和有关蛋白质的合成，即染色体的复制，DNA数目加倍，但染色体数目不变； （2）前期：核膜、核仁逐渐解体消失，出现纺锤体和染色体； （3）中期：染色体形态固定、数目清晰，是观察染色体形态和数目的最佳时期； （4）后期：着丝点分裂，姐妹染色单体分开成为染色体，染色体数目加倍； （5）末期：核膜、核仁重建、纺锤体和染色体消失。 【详解】A、ADC进入肿瘤细胞的方式是胞吞，该过程不需要载体蛋白的协助，但需要消耗ATP，A错误； B、长春新碱（VCR）的化学成分不是蛋白质，据此可推测VCR和抗体之间并未形成肽键，B错误； C、结合图示可知，纺锤体形成异常可激活细胞凋亡相关基因的表达，进而诱发肿瘤细胞的凋亡，从而起到治疗肿瘤的目的，C正确； D、VCR通过抑制微管蛋白的聚合进而抑制纺锤体的形成，将细胞周期阻滞在中期，D错误。 故选C。 10. 将人、鼠细胞悬液混合并诱导细胞融合（只考虑细胞两两融合）后，在HAT培养基上，同时含有T、H基因（独立遗传）的细胞才能存活和增殖。增殖过程中，细胞内人染色体随机丢失，只残留一条或几条。对处于分裂中期细胞的镜检结果如表。下列相关叙述正确的是（ ） 细胞 融合细胞 人 鼠 细胞样编号 残留人染色体编号 ttHH TThh ① 17 ② 10、10、17 ③ 17、X A. 在HAT培养基上，融合细胞均能存活和增殖 B. 可以确定①的基因组成为TTTTHHhhhh C. 可以确定①②③的相关基因组成相同 D. 可以将T（t）基因定位于人第17染色体 【答案】B 【解析】 【分析】由题意知，人体细胞的基因型是ttHH，鼠细胞的基因型是TThh，人鼠细胞融合形成的杂交细胞的基因型是TTttHHhh，由于只有同时含有T、H基因（独立遗传）的细胞才能存活和增殖，增殖过程中，细胞内人染色体随机丢失，但是至少含有一条具有H基因的染色体。 【详解】A、融合细胞有多种，由题意知，在HAT培养基上，同时含有T、H基因（独立遗传）的细胞才能存活和增殖，A错误； B、由表格信息可知，①细胞含有一条人体染色体，由细胞同时具有T、H基因才能存活，因此该染色体上含有H基因，由于有丝分裂中期一条染色体上含有2个染色单体，因此此时细胞中含有HH基因，鼠染色体上的基因型是TTTThhhh，所以融合细胞①的基因型是TTTTHHhhhh，B正确； C、由于"增殖过程中，细胞内人染色体随机丢失"，故②③基因型不能确定，C错误； D、据表格信息可知，残留人染色体编号均含有17号染色体，而①细胞含有一条人体染色体，由细胞同时具有T、H基因才能存活，因此该染色体上含有H基因，故可将H（h）基因位于17号染色体上，D错误。 故选B。 11. 某研究小组尝试将植物甲、乙的原生质体融合以培育抗逆新品系，同时利用杂交瘤技术制备针对某病毒的单克隆抗体。下列叙述正确的是（ ） A. 两项技术都需用纤维素酶、果胶酶处理细胞 B. 两项技术都可用聚乙二醇或电融合促进细胞膜融合 C. 两项技术所用培养基中的主要碳源都是葡萄糖 D. 两项技术最终都能获得具有双亲遗传物质的新个体 【答案】B 【解析】 【详解】A、植物有细胞壁，原生质体融合前需用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁；单克隆抗体制备涉及动物细胞融合，动物细胞无细胞壁，无需使用这两种酶，A错误； B、聚乙二醇（化学诱导法）、电融合（物理诱导法）是动植物细胞融合通用的诱导方法，B正确； C、植物原生质体融合后使用的植物组织培养基，主要碳源为蔗糖；单克隆抗体制备使用的动物细胞培养基，主要碳源为葡萄糖，C错误； D、植物原生质体融合最终可获得含双亲遗传物质的杂种植株；单克隆抗体制备最终获得的是能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D错误。 12. 多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。图列举了几项技术成果。下列叙述正确的是（　　） A. 培养早期胚胎的试剂均须进行高压蒸汽灭菌 B. ①②技术中均可用Ca²⁺载体处理，但作用对象不同 C. ①③技术中需取内细胞团进行性别鉴定，方可获得相应的奶牛或山羊 D. ③可通过①②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 【答案】B 【解析】 【详解】A、培养早期胚胎的试剂中，含生物活性物质的试剂不能进行高压蒸汽灭菌，通常采用过滤灭菌等方法，A错误； B、①试管动物技术：Ca²⁺载体处理的是精子，使其获能。②克隆动物技术：使用Ca²⁺载体激活重构胚，两者作用对象不同，B正确； C、性别鉴定应取囊胚的滋养层细胞（将来发育成胎膜和胎盘），内细胞团将来发育成胎儿本身，取内细胞团会损伤胚胎，C错误； D、②克隆技术可得到大量同种个体，所以③转基因动物可通过②克隆动物技术实现扩大化生 产，转基因技术可导入外源优良基因，所以①②可通过③转基因技术实现性状改良，但 ①试管动物技术主要用于培育有性生殖的后代，而非实现③的扩大化生产，D错误。 13. 北方白犀牛目前在世界范围内仅剩下两头雌性，研究人员设法保存了北方白犀牛的精子和卵细胞，并计划利用数量更多的南方白犀牛繁衍北方白犀牛。此过程不涉及的操作是（ ） A. 发情处理 B. 精子获能处理 C. 细胞核移植 D. 胚胎培养 【答案】C 【解析】 【详解】A、发情处理：胚胎移植时需对受体进行同期发情处理，使其生理状态与供体一致，确保胚胎顺利着床，A涉及； B、精子获能处理：体外受精前需对精子进行获能处理，使其具备受精能力，B涉及； C、细胞核移植：题干中利用的是北方白犀牛自身的精子和卵子进行体外受精，未涉及将体细胞核移植到去核卵母细胞中的克隆技术，C不涉及； D、胚胎培养：体外受精形成的受精卵需在体外培养至早期胚胎（如桑葚胚或囊胚阶段）后才能移植，D涉及。 故选C。 14. 下图为经过体外受精和胚胎分割、移植培育优质奶牛的过程。下列叙述错误的是（ ） A. 体外受精过程中会发生雌雄原核核膜消失现象 B. 胚胎移植前需要对受体母牛进行同期发情处理 C. 胚胎分割可看作动物无性繁殖或克隆方法之一 D. 将①均等分割成8等份的成活率与图示的相同 【答案】D 【解析】 【详解】A、体外受精过程中，精子和卵子受精时，会发生雌雄原核的融合，在此过程中核膜会消失，A正确； B、胚胎移植前需要对受体母牛进行同期发情处理，使受体母牛的生理状态与供体母牛相同，有利于胚胎的着床和发育，B正确； C、胚胎分割时由于这些个体来自同一个受精卵，遗传物质完全相同，可看作动物无性繁殖或克隆方法之一，C正确； D、胚胎分割时，分割的份数越多，胚胎的成活率越低，将①均等分割成8等份，其成活率比分割成2等份的低，D错误。 15. 为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如图）。 为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因，同时避免内源HMA3基因的干扰，在进行PCR扩增时，应选择的引物组合是（ ） A. ①+③ B. ①+② C. ③+② D. ③+④ 【答案】B 【解析】 【分析】根据图示中引物的位置可知，引物①扩增的片段含有启动子和HMA3基因，引物③扩增的片段不含启动子，引物②扩增的片段既含有启动子，又含有HMA3基因序列。 【详解】图示中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中，若要检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因和高效启动子，需要检测是否含有高效启动子序列和HMA3基因序列，应选择的引物组合是①+②，即B正确，ACD错误。 故选B。 16. 下列关于生物工程技术的叙述，错误的是（　　） A. 获取马铃薯脱毒苗常选取茎尖进行组织培养 B. 为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射性激素以促进超数排卵 C. 单克隆抗体制备过程中需用特定培养基筛选得到杂交瘤细胞 D. 生产转基因农作物时，需防止转基因花粉的传播，避免基因污染 【答案】B 【解析】 【详解】A、植物茎尖属于分生区，细胞分裂速度快，病毒极少甚至无病毒，因此选取茎尖进行组织培养可获得马铃薯脱毒苗，A正确； B、要促进供体绵羊超数排卵，需注射促性腺激素，若注射性激素，会通过负反馈调节抑制垂体分泌促性腺激素，反而不利于排卵，B错误； C、单克隆抗体制备过程中，细胞融合后会存在未融合的亲本细胞、同种细胞融合的细胞，只有杂交瘤细胞能在特定的选择培养基上存活，因此需用该培养基筛选得到杂交瘤细胞，C正确； D、转基因农作物的花粉中可能携带插入的目的基因，若传播到近缘野生植物中会造成基因污染，因此生产时需采取措施防止转基因花粉传播，D正确。 17. 基因水平转移是指基因不通过父母到子代的垂直传递，而是在不同物种间直接传递的过程。下列操作中不属于基因水平转移的是（　　） A. 农杆菌侵染植物时，将Ti质粒上的T-DNA转移到植物细胞的基因组中 B. 利用基因工程技术，将人的凝血因子基因通过载体导入山羊受精卵 C. 土壤中的真菌可以把自身的纤维素分解酶基因传递给寄生于植物的线虫 D. 用核移植技术培育“三亲婴儿”，目的是将亲代的正常基因传递给后代 【答案】D 【解析】 【详解】A、农杆菌的Ti质粒通过侵染将T-DNA（含外源基因）整合到植物基因组中，实现了细菌与植物间的跨物种基因传递，属于基因水平转移，A正确； B、利用载体将人凝血因子基因导入山羊受精卵，使人类基因在山羊中表达，实现了跨物种（人→动物）的基因转移，属于基因水平转移，B正确； C、真菌将自身基因直接传递给线虫（不同物种），属于自然界中微生物间的基因水平转移，C正确； D、核移植技术培育"三亲婴儿"是将父母细胞核与捐赠者去核卵细胞结合，本质是细胞核移植而非基因跨物种传递。后代基因仍来自父母双方的细胞核DNA，捐赠者仅提供线粒体DNA（非主要基因），未发生不同物种间的基因转移，D错误。 故选D。 18. 干扰素β是一种蛋白质，常用于治疗多发性硬化症。研究人员发现，用甲硫氨酸替换干扰素β第18位的半胱氨酸可以降低其免疫原性。在这项替换研究中，目前可行的直接操作对象是（ ） A. 氨基酸 B. 核糖核苷酸 C. 蛋白质 D. 基因 【答案】D 【解析】 【详解】蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要．蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。通过题干信息可知，可通过蛋白质工程技来完成，蛋白质工程直接改造的是相应的基因，ABC错误，D正确。 故选D。 19. 关于生殖性克隆和治疗性克隆的叙述，错误的是（ ） A. 治疗性克隆为了治疗疾病，不涉及核移植技术 B. 生殖性克隆和治疗性克隆都涉及伦理问题 C. 我国政府禁止任何生殖性克隆人实验 D. 生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体 【答案】A 【解析】 【分析】1、“治疗性克隆”将使人胚胎干细胞（简称ES细胞）造福于人类的一种非常重要的途径。治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗。 2、生殖性克隆就是以产生新个体为目的克隆，即用生殖技术制造完整的克隆人。目的是产生一个独立生存的个体。于此相对的是研究性克隆或医学性克隆，指的是产生研究所用的克隆细胞，不产生可独立生存的个体。 【详解】A、治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗。治疗性克隆为了治疗疾病，涉及核移植技术，A错误； B、生殖性克隆和治疗性克隆都涉及伦理问题，B正确； C、我国政府禁止任何生殖性克隆人实验，C正确； D、生殖性克隆就是以产生新个体为目的克隆，即用生殖技术制造完整的克隆人。目的是产生一个独立生存的个体，D正确。 故选A。 20. 下列关于生物武器的叙述，有误的是（　　） A. 生物武器可以直接或者通过食物、生活必需品等途径散布 B. 生物武器一旦被使用，就可以对军队和平民造成大规模杀伤后果 C. 因为生物武器造价昂贵，杀伤性大，所以一直没有被应用到战争中 D. 生物武器种类包括致病微生物、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等 【答案】C 【解析】 【分析】生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等，例如，天花病毒、波特淋菌、霍乱弧菌和炭疽杆菌都可以用来制造生物武器。生物武器的致病能力强、攻击范围广。它可以直接或者通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由呼吸道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，也能大量损害植物。 【详解】A、生物武器可以直接或者通过食物、生活必需品和带菌昆虫等途径散布，A正确； B、生物武器致病能力强，攻击范围广，一旦被使用，就可以对军队和平民造成大规模杀伤后果，B正确； C、生物武器有部分国家应用到战争中，如日本、美国，C错误； D、生物武器种类包括致病微生物、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等，D正确。 故选C。 二、不定项选题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 21. 以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法错误的是（ ） A. ①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死 B. ②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌 C. ③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入 D. ④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低 【答案】ABD 【解析】 【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 （1）泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。 （2）选用火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的泡菜坛。 （3）原料加工：将新鲜蔬菜修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状。 （4）配制盐水：按照比例配制盐水，并煮沸冷却。原因是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。 （5）泡菜的制作：将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡菜坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。在坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常补充水槽中的水。 【详解】A、①盐水煮沸是为了杀灭水中的杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响，A错误； B、②盐水需要浸没全部菜料，造成无氧环境，有利于乳酸菌无氧呼吸，B错误； C、③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水，是排气减压、隔绝空气、防止杂菌污染等，气体只能从泡菜坛排出而不能进入，C正确； D、④检测泡菜中亚硝酸盐的含量，腌制泡菜过程中亚硝酸盐的含量先增多后减少，D错误。 故选ABD。 22. 研究人员取某糖尿病患者（相关基因缺陷导致，具有遗传倾向）的成纤维细胞在体外将其重编程为iPS 细胞，再诱导iPS 细胞分化为胰岛B细胞后移植到该患者体内，实现了临床功能性治愈。下列叙述错误的是（ ） A. 培养iPS 细胞的培养液中含有蔗糖、氨基酸、无机盐等营养成分 B. 诱导iPS 细胞分化成胰岛 B细胞的过程体现了细胞的全能性 C. 上述移植过程相对于异体移植可以降低患者的免疫排斥反应 D. 经过上述方式治愈的患者，其后代不会再患该种糖尿病 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、动物细胞培养液需含葡萄糖（而非蔗糖）作为碳源，蔗糖常用于植物组织培养；培养液成分应包含氨基酸、无机盐、维生素等，但蔗糖不是动物细胞营养源，A错误； B、细胞全能性指已分化细胞发育成完整个体的潜能，iPS细胞分化为胰岛B细胞仅形成特定细胞类型，未形成个体，故未体现全能性（体现的是分化潜能），B错误； C、移植细胞源于患者自身成纤维细胞重编程，自体移植时主要组织相容性复合体（MHC）相同，免疫排斥反应显著低于异体移植，C正确； D、该糖尿病由基因缺陷导致且具遗传倾向，治愈仅改变体细胞，未改变生殖细胞遗传物质，后代仍可能携带致病基因而患病，D错误； 故选ABD。 23. 下图为PML蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述错误的有（　　） 注：＋表示该孔中存在对应蛋白的抗体，-表示没有对应抗体 A. 将质粒导入大肠杆菌前需用Ca2＋处理细胞 B. W细胞是先提取B淋巴细胞再用PML蛋白免疫而获得 C. 步骤2筛选得到的是既能无限增殖又能产生特定抗体的杂交瘤细胞 D. 应选择孔2中的细胞注射到小鼠的腹腔培养 【答案】BC 【解析】 【详解】A、将质粒导入大肠杆菌（原核细胞）时，常用Ca2+处理使其处于感受态，便于吸收周围环境中的DNA，A正确； B、W细胞是经过PML蛋白免疫后，从动物体内提取的已免疫的B淋巴细胞，B错误； C、步骤2是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，但此时还需要进一步筛选才能得到既能无限增殖又能产生特定抗体的细胞，C错误； D、孔2中只有PML蛋白对应的抗体（+），说明该孔的细胞能产生特异性抗PML蛋白的抗体，符合要求，再将其注射到小鼠的腹腔进行扩大培养，D正确。 24. 下列有关“DNA 的粗提取与鉴定”“DNA 片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，错误的是（　　） A. “DNA 的粗提取与鉴定”和“绿叶中色素的分离”实验的原理都利用了物质的溶解度不同 B. “DNA 的粗提取与鉴定”实验中，取洋葱研磨液的上清液，加入等体积 70％的冷酒精后析出 DNA C. 电泳鉴定 DNA 片段利用了 DNA 在电场中会向着与它所带电荷相同的电极移动的原理 D. 待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时停止电泳并取出凝胶置于紫外灯下观察和照相 【答案】BC 【解析】 【分析】1、DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性；（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色； 2、DNA粗提取和鉴定的过程：（1）实验材料的选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大；（2）破碎细胞，获取含DNA的滤液：动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可，如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜，例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液；（3）去除滤液中的杂质；（4）DNA的析出与鉴定：粗提取的DNA与二苯胺试剂，混合均匀后变蓝。 【详解】A、“DNA的粗提取与鉴定”利用DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度差异及冷酒精中溶解度低的原理；“绿叶中色素的分离”利用不同色素在层析液中溶解度不同导致扩散速率差异的原理。两者均基于溶解度差异，A正确； B、DNA粗提取实验中，需加入体积分数为95%的冷酒精以降低DNA溶解度使其析出，而70%的冷酒精浓度不足，无法有效沉淀DNA，B错误； C、电泳鉴定DNA时，DNA片段带负电，应向正极（与所带电荷相反的电极）移动，而非“相同电极”，C错误； D、电泳过程中，当指示剂（如溴酚蓝）迁移至凝胶边缘附近时停止，可避免DNA片段跑出凝胶，取出凝胶置于紫外灯下观察和照相，操作正确，D正确。 故选BC。 25. 琼脂糖凝胶电泳常用于核酸样品的分析，样品1-4的电泳结果如图所示（“+”“-”分别代表电泳槽的阳极和阴极）。已知样品1和2中的DNA分子分别是甲和乙，甲只有限制酶R的一个酶切位点，样品3和4中有一个样品是甲的酶切产物。下列叙述正确的是（ ） A. 配制琼脂糖凝胶时需选用适当的缓冲液 B. 该实验条件下甲、乙两种DNA分子均带负电荷 C. 甲、乙两种DNA分子所含碱基对的数量可能不同 D. 据图推测样品3可能是甲被酶R完全酶切后的产物 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、配制琼脂糖凝胶时选用适当缓冲溶液，可维持电泳过程中体系的pH稳定，保证核酸分子正常泳动，A正确； B、电泳时，样品向+极移动，说明在该实验条件下甲、乙两种DNA分子均带负电荷，符合核酸分子在电泳中的带电特性，B正确； C、电泳中，DNA分子的迁移速率与分子大小、电荷的多少等多种因素有关。甲、乙电泳条带位置虽然相同，但影响DNA分子的迁移速率的因素很多，所以碱基对的数量可能不同，C正确； D、甲只有限制酶R的一个酶切位点，若被酶R完全酶切，只会得到2种DNA片段（2个条带），这两个条带的碱基数量比甲要少，电泳跑的距离要比甲更远，所以据图推测样品4才是甲被酶R完全酶切后的产物，D错误。 故选ABC。 三、非选择题：本题共4题，共45分。 26. 根据所学知识，完成下列小题： （1）载体必须具备的条件：①能在受体细胞中保存下来并能______；②具有1个或多个___________，以便与外源基因连接。③具有________。 （2）PCR的含义：PCR是______的缩写。它是一项根据_________的原理，在体外提供____________的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。 （3）PCR技术可以分为____、___和____三步。在PCR反应缓冲液中添加Mg2+，目的：________。 （4）转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持______和_____的过程。 【答案】（1） ①. 自我复制 ②. 限制酶切割位点 ③. 标记基因 （2） ①. 聚合酶链式反应 ②. DNA半保留复制 ③. 参与DNA复制 （3） ①. 变性 ②. 复性 ③. 延伸 ④. 激活DNA聚合酶 （4） ①. 稳定 ②. 表达 【解析】 【小问1详解】 载体必须具备的条件：①能在受体细胞中保存下来并能自我复制；②具有1个或多个限制酶切割位点，以便与外源基因连接。③具有标记基因，以便进行筛选。 【小问2详解】 PCR的含义：PCR是聚合酶链式反应的缩写。它是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。 【小问3详解】 PCR技术可以分为变性、复性和延伸三步。在PCR反应缓冲液中添加Mg2+，其目的是激活DNA聚合酶。 【小问4详解】 转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 27. 为提高降解效率，研究人员将甲醛分解基因导入筛选出的甲醛分解菌中，下表为相关限制酶的识别序列及酶切位点，下图为获得转基因甲醛分解菌的过程。 限制酶 识别序列及酶切位点 限制酶 识别序列及酶切位点 MboI 5'⋯⋯↓GATC⋯3' SacI 5'…GGGCT↓C⋯3' SnaBI 5'…TAC↓GTA⋯3 BamHI 5'…G↓GATCC⋯3' （1）据图分析，甲醛分解基因的模板链是________（填“甲链”或“乙链”）。 （2）已知甲醛分解基因中不含表中限制酶的识别序列。利用PCR技术扩增甲醛分解基因时，选择的引物应为________，为保证甲醛分解基因与载体正确连接，在所选引物上分别添加的限制酶识别序列的情况是________（要求写出在何种引物的5′端或3′端添加何种限制酶的识别序列），不选择另外两种限制酶的原因是________。 （3）将重组质粒导入甲醛分解菌后，将其在含新霉素的培养基培养，长出的呈________（填“黄色”或“白色”）的菌落为成功转化的转基因甲醛分解菌。 （4）利用________技术检测宿主菌是否表达出相应蛋白质。 【答案】（1）甲链 （2） ①. 引物b、引物c ②. 在引物b的5′端添加Sac Ⅰ的识别序列（5′-GAGCTC-3′），在引物c的5′端添加SnaB Ⅰ的识别序列（5′-TACGTA-3′） ③. Mbo Ⅰ可同时切割Mbo Ⅰ和BamH Ⅰ的识别序列，而标记基因（neor）中含有BamH Ⅰ的识别序列，因此使用Mbo Ⅰ或BamH Ⅰ会破坏标记基因，不利于筛选； （3）白色 （4）抗原-抗体杂交 【解析】 【小问1详解】 游离的磷酸基团一端为5'端，羟基（-OH）端为3'端，而mRNA的合成方向为5'→3'，且转录的方向为从右向左，故甲醛分解基因的模板链是甲链。 【小问2详解】 引物的作用是使DNA聚合酶从引物的3'端添加游离的脱氧核糖核苷酸，引物结合在模板链的3'端，据图分析，应选择引物b和引物c可扩增甲醛分解基因。为保证甲醛分解基因与载体正确连接，应选择两种不同的限制酶进行切割，根据表格，Mbo Ⅰ可同时切割Mbo Ⅰ和BamH I的识别序列，而标记基因(neor)中含有BamH I的识别序列，因此使用Mbo Ⅰ或BamH I会破坏标记基因，不利于筛选，且目的基因应插入启动子和终止子之间，BamH I的识别序列不在启动子与终止子之间，会造成启动子丢失，故选择限制酶Sac I、SnaB I。考虑到目的基因的转录方向，需在引物b的5'端添加Sac I的识别序列（5′-GGGCTC-3′），在引物c的5'端添加SnaBI的识别序列（5′-TACGTA-3′） 【小问3详解】 在重组质粒中，甲醛分解基因插入mlacZ基因中，从而使其失活无法表达产物，进而不能使细胞呈黄色，因此转基因甲醛分解菌的菌落呈白色。 【小问4详解】 检测宿主菌是否表达出相应的蛋白质，应利用抗原-抗体杂交技术进行检测。 28. （一）银杏的次生代谢产物，如银杏黄酮（具有抑制癌细胞增殖，扩张冠脉血管、增加冠脉血液流量和解除痉挛的作用）、银杏内酯（具有促进脑血微循环、抑菌抗炎的作用）等，一般从叶片中取得，但传统载植方法周期长、成本高、受环境影响大，无法很好满足市场需求。因而利用组织培养技术，从愈伤组织中提取，具有一定的研究意义与应用前景。请回答下列相关 问题： （1）研究表明，选择银杏叶片比选择胚作为外植体材料成功率更低，原因可能是诱导叶片脱分化形成______的难度较大。因此，往往选择细胞生长分裂旺盛的部位作为外植体，但外植体也不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛，但在____时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用__________多次冲洗也不易清除，导致细胞易失活甚至破裂。 （2）为获得银杏的次生代谢产物，______（“需要”或“不需要”）走完上述流程图的全过程。 （3）此外，研究表明，用通气较为不良的介质封口，如塑料膜或玻璃纸，可以提升黄酮和内酯的产量，可能原因是_______胁迫细胞诱导产生次生代谢物。 （4）学习了植物组培技术后，同学们尝试进行了以菊花枝条为外植体的组织培养，结果有同学在首次对菊花继代培养配制MS生根培养基时，忘记添加NAA（NAA：萘乙酸，为生长素类似物），结果与添加NAA的生根培养基中的菊花幼苗相比，无添加NAA培养基中的菊花幼苗也有生根，其原因可能是_______。 （二）抗CD14单克隆抗体的制备流程如图所示： （5）步骤①向小鼠注射CD14抗原，其目的是______。 （6）步骤③的目的是_______，在步骤④中，根据抗原—抗体特异性结合的原理，需加入CD14进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体，原因是_____。 （7）步骤⑤将筛选后的细胞注射到小鼠腹腔进行增殖培养。步骤⑥从_____中提取到大量的抗CD14抗体，成为单克隆抗体，除此以外，还可以运用____技术进行体外扩增培养，获得单克隆抗体。 【答案】（1） ①. 愈伤组织 ②. 消毒 ③. 无菌水 （2）不需要 （3）低氧 （4）植物体内可以产生内源生长素 （5）促进小鼠产生能产生抗CD14抗体的B淋巴细胞 （6） ①. 获得杂交瘤细胞 ②. 形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类很多 （7） ①. 小鼠腹水 ②. 动物细胞培养 【解析】 【小问1详解】 选择银杏叶片比选择胚作为外植体材料成功率更低，原因可能是诱导叶片脱分化形成愈伤组织的难度较大。外植体也不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛，但在消毒时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用无菌水多次冲洗也不易清除，导致细胞易失活甚至破裂。 【小问2详解】 为获得银杏的次生代谢产物，不需要走完如上述流程图的全过程，只需要经过脱分化阶段，产生愈伤组织，然后进行植物细胞培养即可。 【小问3详解】 研究表明，用通气较为不良的介质封口，如塑料膜或玻璃纸，可以提升黄酮和内酯的产量，可能原因是低氧胁迫细胞诱导产生次生代谢物。 【小问4详解】 与添加NAA的生根培养基中的菊花幼苗相比，无添加NAA培养基中的菊花幼苗也有生根，其原因可能是植物体内可以产生内源生长素。 【小问5详解】 实验的目的是制备抗CD14的单克隆抗体，所以步骤①向小鼠注射CD14抗原的目的是促进小鼠产生能产生抗CD14抗体的B淋巴细胞。 【小问6详解】 步骤③的目的是进行第一次筛选，获得杂交瘤细胞，在步骤④中，根据抗原—抗体特异性结合的原理，需加入CD14进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体，其原因是形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类很多，产生的抗体的种类也较多。 【小问7详解】 步骤⑤将筛选后的细胞注射到小鼠腹腔进行增殖培养。步骤⑥从小鼠腹水中提取到大量的抗CD14抗体，成为单克隆抗体，除此以外，还可以运用动物细胞培养技术进行体外扩增培养，获得单克隆抗体。 29. I．研究人员欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的细菌，并对其进行研究。请回答下列问题： （1）在细菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以_________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，除碳源外，该培养基还含有氮源、水、无机盐和_________。不同微生物生长所需的pH是不同的，在配制培养基时，pH的调节应在灭菌_________（填“前”或“后”）。 （2）在将筛选到的微生物进行分离纯化时，采用了两种不同的接种方法，培养一段时间后得到如图所示的菌落。 平板A所采用的接种方法是_________。A、B两个平板所采用的接种方法适合用来计数的是_________（填“A”或“B”）。 （3）根据下图所示，4号试管的土壤样品稀释了_________倍，根据图示的三个平板上的菌落结果，可以估算1克土壤中的细菌数为_________个。 Ⅱ．现代工业生产中往往采用规范的流程进行发酵生产以提高生产效率，如图是发酵工程生产产品的流程图。据图回答下列问题： （4）在啤酒生产中，使用①改造的啤酒酵母，可以加速发酵过程，缩短生产周期，①是_________；高产青霉素菌种是通过②培育的，②是_________；③是细胞工程。 （5）⑤表示_________。 （6）若发酵所得产品是单细胞蛋白，则是往往采用_________的方法进行提取。 【答案】（1） ①. 淀粉 ②. 琼脂（凝固剂） ③. 前 （2） ①. 稀释涂布平板法 ②. A （3） ①. 105 ②. 8.5×108 （4） ①. 基因工程 ②. 诱变育种 （5）灭菌 （6）过滤、沉淀 【解析】 【小问1详解】 由题干信息分析可知，该实验的目的是欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的目标菌，故在目标菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以淀粉为唯一碳源的固体培养基上进行培养，故培养基中还需要加入琼脂，除此以外还需要有氮源、水、无机盐等成分。为防止杂菌污染，在配制培养基时，pH的调节应在灭菌前。 【小问2详解】 根据培养基中菌落的分布判断平板A所采用的接种方法是稀释涂布平板法，平板B所采用的接种方法是平板划线法，其中稀释涂布平板法是将菌液稀释到一定浓度，取一定量菌液涂布在平板上，适合用来计数。 【小问3详解】 图中进行了系列稀释操作，由土样到试管4共稀释了5次，故4号试管的土壤样品稀释了105倍；根据图示的三个平板上的菌落结果，可以估算1克土壤中的细菌数为（168+175+167）÷3×106÷0.2=8.5×108个。 【小问4详解】 基因工程即转基因技术，可以对啤酒酵母进行改造；诱变育种在人为的条件下，利用物理、化学等因素，诱发生物体产生突变，从中选择，培育成动植物和微生物的新品种，高产青霉素菌种可以通过诱变育种获得，因此①是基因工程；高产青霉素菌种是通过②培育的，②是诱变育种；③是细胞工程。 【小问5详解】 ⑤表示培养基进行灭菌，以用于发酵。 【小问6详解】 过滤、沉淀可以获得菌体，将菌体与培养液分离，若发酵所得产品是单细胞蛋白，则是往往采用过滤、沉淀的方法进行提取。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $