精品解析：黑龙江省五常市雅臣中学校2025—2026学年高二下学期第二次考试生物试题

五常市雅臣中学高二下学期第二次考试 生物试题 满分100分 时间75分钟 2026.4.29 一、单项选择题（每题2分，共50分） 1. 微生物发酵已经广泛应用于人类生活的各个领域。下列关于传统发酵技术的说法中，正确的是（　　） A. 果酒发酵过程温度控制在30℃，果醋发酵过程温度控制在20℃ B. 制作果醋需要醋酸菌，它是一种严格厌氧的微生物，可将葡萄中的糖分解为醋酸 C. 多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等 D. 制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸和二氧化碳 【答案】C 【解析】 【分析】参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一种丝状真菌，常见于土壤、水果、蔬菜、谷物上，具有发达的白色菌丝。毛酶等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。 【详解】A、果酒发酵过程温度控制在18-25℃，果醋发酵过程温度控制在30℃，A错误； B、制作果醋需要醋酸菌，它是一种好氧的微生物，可将葡萄中的糖（或乙醇）分解为醋酸，B错误； C、多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等，其中起主要作用的是毛霉，C正确； D、制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸，乳酸菌的无氧呼吸不会产生二氧化碳，D错误。 故选C。 2. 防止杂菌入侵，获得纯净培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是（ ） A. 接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可以用紫外线照射30min，以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适当喷洒石碳酸或煤酚皂液等消毒液，可以加强消毒效果 B. 牛奶使用巴氏消毒法处理，在100℃煮30min，可以杀死牛奶中的微生物，且牛奶的营养成分不被破坏 C. 在实验室中，不可吃东西、喝水，离开实验室一定要洗手，以防止被微生物感染 D. 使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境 【答案】B 【解析】 【分析】微生物实验室培养的关键是防止杂菌污染，无菌操作分为消毒合灭菌，其中消毒只是杀死物体表面的微生物，而杀菌是杀死所有微生物，常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌。 【详解】A、在防止杂菌污染，研究和应用微生物时应进行消毒和灭菌，实验室可以用紫外线或化学药物进行消毒，因此接种室、接种箱或超净工作台在使用前，用紫外线照射 30min 能杀死物体表面或空气中的微生物，喷洒石碳酸或煤酚皂液等消毒液可加强消毒效果，A正确； B、巴氏消毒法处理的温度不是很高，一般在70-75℃煮30min或80℃煮15min，能杀死牛奶中的微生物且不破坏牛奶的营养成分，而不是在100℃煮30min，B错误； C、在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，这是为了防止被微生物感染，C正确； D、使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境或感染操作者，D正确。 故选B。 3. 微生物培养过程中，十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作，错误的是（　　） ①煮沸消毒法可以杀死所有微生物，包括芽孢和孢子 ②接种操作要在酒精灯火焰附近进行 ③无菌繁殖脱毒苗时，应对植物的外植体进行消毒 ④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 ⑤接种环要进行灼烧灭菌 ⑥植物组织培养、动物细胞培养、无土栽培都需要在无菌无毒环境中进行 A. ①③④ B. ②④⑥ C. ①③⑤ D. ①④⑥ 【答案】D 【解析】 【详解】①煮沸消毒法属于消毒范畴，仅能杀死物体表面或内部的部分微生物，无法杀灭芽孢和孢子，只有灭菌才能杀死包括芽孢、孢子在内的所有微生物，①错误； ②酒精灯火焰附近为无菌区域，接种操作在此处进行可避免杂菌污染，②正确； ③无菌繁殖脱毒苗时，植物外植体只能进行消毒，若进行灭菌会导致外植体细胞失活，③正确； ④家庭制作葡萄酒的发酵菌种来自葡萄表面的野生酵母菌，若对葡萄进行灭菌会杀死发酵所需的菌种，无法完成酒精发酵，④错误； ⑤接种环为金属接种工具，使用前后都需要进行灼烧灭菌，防止杂菌污染，⑤正确； ⑥植物组织培养、动物细胞培养需要在无菌无毒环境中进行，但无土栽培是利用营养液为植株提供矿质营养，不需要无菌环境，⑥错误。 因此错误的操作为①④⑥。 故选D。 4. 在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列相关叙述错误的是（　　） A. 两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度 B. 用稀释涂布平板法进行微生物计数时，所得数据往往比实际值偏小 C. 获取纯培养物的过程中，应根据微生物的种类调整培养基的pH D. 对10mL土样样液稀释106倍后，取0.1mL稀释液涂布，测得的菌落数分别为218、266、305，则该10mL土样中目的菌数为2.63×1010个 【答案】D 【解析】 【分析】接种微生物常用的两种方法： （1）平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 （2）稀释涂布平板法则是菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 【详解】A、获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，因此两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度，A正确； B、因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此用稀释涂布平板法进行微生物的计数时，所得数据往往比实际数据偏小，B正确； C、因为不同的微生物所需的最适pH条件不同，因此，在获取纯培养物的过程中，应根据微生物的种类调整培养基的pH，C正确； D、用稀释涂布平板法统计微生物的数量时，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数，D错误。 故选D。 5. 下列关于发酵工程的叙述中，不正确的是（ ） A. 发酵工程中优良菌种可以从自然界中筛选 B. 对培养基灭菌是发酵工程的中心环节 C. 在发酵过程中，要严格控制温度、pH、溶解氧、通气量与转速等发酵条件 D. 如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，得到产品 【答案】B 【解析】 【分析】发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。发酵过程：菌种选育→菌种的扩大培养→培养基的配制→灭菌和接种→发酵条件的控制→分离和提纯。 【详解】A、用于发酵的菌种可以从自然界中筛选，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，A正确； B、发酵工程的中心环节是发酵，B错误； C、要严格控制温度、pH溶解氧、通气量与转速等条件等环境因素，因为环境条件不仅会影响微生物的繁殖，还会 影响发酵产物的形成，C正确； D、发酵产品不同，分离、提纯的方法不同，如果发酵产品是微生物细胞本身，可采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取，D正确。 故选B。 6. 央视3.15晚会曝光老坛酸菜包里的部分酸菜是从外面收购的“土坑酸菜”。泡菜古称菹，是指为了利于长时间存放而经过发酵的蔬菜。它是一种在低浓度食盐液中泡制的蔬菜乳酸发酵加工品。下列叙述正确的是（ ） A. 泡菜主要是靠盐的渗透压来抑制腐败微生物的生长和繁殖 B. 腌制时间过短和制作过程污染严重等会使土坑酸菜易腐烂变质 C. 泡菜之盐水加热煮沸后应立即加入陈泡菜液以防止杂菌污染 D. 制作泡菜时要选择新鲜的原料，且为创设无氧环境泡菜坛要装满 【答案】B 【解析】 【分析】参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，其新陈代谢类型是异养厌氧型。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 【详解】A、泡菜主要是靠乳酸菌的发酵生成大量乳酸而不是靠盐的渗透压来抑制腐败微生物的，A错误； B、与标准化腌制相比，腌制时间过短、制作过程污染严重、密封不严等是造成士坑酸菜易腐烂变质的原因，B正确； C、泡菜之盐水加热煮沸冷却后才加入陈泡菜液，否则会使陈泡菜液中的乳酸菌失活，C错误； D、制作泡菜时要选择新鲜的原料的目的是新鲜蔬菜的亚硝酸盐含量低，泡菜坛只能装八成满，因为在泡菜发酵初期，由蔬菜表面带入的大肠杆菌、酵母菌等较为活跃，它们可进行发酵，发酵产物中有较多的CO2，如果泡菜坛装得太满，发酵液可能会溢出坛外；另外，泡菜坛装得太满，会使盐水不太容易完全淹没菜料，从而导致坛内菜料变质腐烂。泡菜坛留有一定的空间，也更方便拿取泡菜，D错误。 故选B。 7. 下面是有关啤酒的工业化生产的流程。下列有关叙述错误的是（ ） 发芽焙烤碾磨糖化蒸煮发酵消毒终止 A. 焙烤可以杀死大麦种子的胚，并使淀粉酶变性失活 B. 发芽的过程中大麦会产生淀粉酶，便于将大麦中的淀粉分解为葡萄糖进行酒精发酵 C. 发酵的过程是酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的过程 D. 蒸煮可以杀死糖浆中的微生物，避免杂菌污染 【答案】A 【解析】 【分析】啤酒发酵过程充分地利用了酵母的特性，在发酵开始时，让酵母在溶氧麦汁中大量繁殖，并积累能量，保证了在无氧条件下产生乙醇所需要的菌体数量和能量需要，接入酵母的麦汁进入前发酵后，酵母经过数小时生长带缓期后，才能开始进入生长繁殖，当细胞浓度达到2×107个/ml。麦汁表面开始气泡，这个阶段被称为前发酵，后发酵又称贮酒，其目的是完成残糖的最后发酵，增加啤酒的稳定性，饱充CO2，充分沉淀蛋白质，澄清酒液。 【详解】A、焙烤可以杀死大麦种子的胚，但不使淀粉酶失活，A错误； B、发芽过程产生淀粉酶将淀粉分解成葡萄糖，作为无氧呼吸的底物用于产生酒精，B正确； C、酵母菌属于兼性厌氧型微生物，发酵的过程是酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的过程，C正确； D、蒸煮相当于煮沸消毒法，可以杀死糖浆中的微生物，避免杂菌污染，D正确。 故选A。 8. 植物细胞工程包括植物组织培养、植物体细胞杂交等技术，具有广泛的应用前景和实用价值。下列对这些操作或应用的描述错误的是（　　） A. 可用PEG诱导植物原生质体融合，再生出细胞壁是融合成功的标志 B. 获取植物原生质体时，体现了酶的专一性 C. 植物体细胞杂交技术去壁前，需对两种植物细胞进行灭菌处理，以防止杂菌污染 D. 植物培养基中常用的植物生长调节剂，一般可以分为生长素类、细胞分裂素类 【答案】C 【解析】 【详解】A、PEG（聚乙二醇）是诱导植物原生质体融合的常用化学试剂，原生质体无细胞壁，融合成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁，A正确； B、获取植物原生质体时，使用纤维素酶和果胶酶分解细胞壁，细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，体现了酶的专一性，B正确； C、灭菌会杀死植物细胞，去壁前仅需对两种植物细胞进行消毒处理，防止杂菌污染的同时保留细胞活性，C错误； D、植物培养基中常用的植物生长调节剂，一般分为生长素类和细胞分裂素类，二者的配比会调控愈伤组织的分化方向，D正确。 9. 将诱导多能干细胞（简称iPS细胞）移植给急性心肌梗死小鼠，检测发现小鼠心肌电生理指标逐渐恢复正常。下列说法不合理的是（　　） A. 该实验仅需要正常小鼠作为对照组 B. 与成体干细胞相比，iPS细胞的分化潜能更强 C. 因为诱导过程无需破坏胚胎，且选择病鼠自身细胞获得iPS细胞再移植可避免免疫排斥，所以应用前景优于胚胎干细胞 D. 培养iPS细胞的培养液中含有动物血清等 【答案】A 【解析】 【详解】A、本实验的目的是验证iPS细胞对急性心肌梗死小鼠的治疗作用，除正常小鼠外，还需要设置未移植iPS细胞的急性心肌梗死小鼠作为空白对照，才能证明iPS细胞的疗效，仅设置正常小鼠作为对照组不符合实验设计的对照原则，A符合题意； B、成体干细胞属于多能或专能干细胞，分化潜能较低，iPS细胞属于多能干细胞，分化潜能接近胚胎干细胞，显著强于成体干细胞，B不符合题意； C、胚胎干细胞的获取需要破坏早期胚胎，存在伦理争议，且异体移植易发生免疫排斥，而iPS细胞可由患者自身体细胞诱导获得，无需破坏胚胎，自体移植也可避免免疫排斥，因此应用前景优于胚胎干细胞，C不符合题意； D、iPS细胞属于动物细胞，动物细胞培养的培养液中需要添加动物血清等天然成分，以补充细胞生长所需的未知营养物质，D不符合题意。 10. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c表示现代工程技术，①、②、③表示其结果，下列说法正确的是（ ） A. 若a是核移植技术，①反映了动物细胞也具有全能性 B. 若c表示动物细胞融合技术，③为获得的单克隆抗体 C. ①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物 D. 若b是体外受精技术，则②可提高动物繁殖能力 【答案】D 【解析】 【分析】1、动物细胞核移植技术表明动物细胞核具有全能性。 2、体外受精包括精子的采集和获得、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物。 3、胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。 【详解】A、动物细胞通过核移植技术获得动物个体只能证明动物细胞的细胞核具有全能性，故若a是核移植技术，①反映了动物细胞核也具有全能性，A错误； B、单克隆抗体的制备，需要借助动物细胞培养技术来培养杂交瘤细胞等细胞，但不涉及胚胎移植，因此c不能表示单克隆抗体的制备，③不能为获得的单克隆抗体，B错误； C、①②③中都需要进行胚胎移植，作为受体的动物品种必须是同种的健康的雌性动物，不一定为珍稀动物，C错误； D、若 b 是体外受精技术，则借助体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植，②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，D正确。 故选D。 11. 中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核后的兔子卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列有关叙述中错误的是（　　） A. 卵母细胞去核的方法是显微注射法，还可以用紫外光短时间照射等方法 B. 兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全能性的物质 C. 重组胚胎需要用物理或化学方法激活，使之完成细胞分裂和发育进程 D. 在大熊猫早期胚胎的形成过程中，囊胚期开始出现内细胞团和滋养层细胞 【答案】A 【解析】 【详解】A、卵母细胞去核的常用方法是显微操作去核法，还可采用梯度离心、紫外光短时间照射、化学物质处理等方法，显微注射法是向细胞内注入目的物质（如细胞核、目的基因）的技术，不属于去核方法，A错误； B、核移植选择卵母细胞作为受体细胞的原因之一，是卵母细胞质中存在诱导动物细胞核表达全能性的物质，因此兔子卵母细胞质可以使大熊猫细胞核的全能性得以表达，B正确； C、核移植获得的重组胚胎需要通过电刺激（物理方法）、钙离子载体处理（化学方法）等方式激活，才能启动细胞分裂和后续发育进程，C正确； D、早期胚胎发育至囊胚期时细胞开始出现分化，分化为将来发育成胎儿各组织的内细胞团，和将来发育成胎膜、胎盘的滋养层细胞，D正确。 12. 下列关于生物工程中常见的几种酶的叙述，正确的是（ ） A. 去除植物细胞壁时所用的纤维素酶溶液的渗透压不宜过低 B. 用限制酶从质粒上切下一个目的基因需脱去4个水分子 C. 用胰蛋白酶处理植物愈伤组织可得到单个的愈伤组织细胞 D. PCR仪扩增目的基因时加入解旋酶有利于提高解旋的效果 【答案】A 【解析】 【分析】植物细胞工程中，可采用纤维素酶、果胶酶处理植物细胞获得原生质体；动物细胞工程中，胰蛋白酶可以消化组织细胞间的蛋白质，获得单个动物细胞；限制性核酸内切酶可用于提取目的基因和切割运载体，限制酶作用的部位是磷酸二酯键；PCR扩增过程中利用高温解旋，因此在PCR扩增过程中需要耐高温的DNA聚合酶催化DNA子链的合成。 【详解】A、植物细胞工程中，可采用纤维素酶、果胶酶处理植物细胞获得原生质体，为了防止原生质体过度吸水涨破，因此所用的纤维素酶溶液的渗透压不宜过低，A正确； B、限制性核酸内切酶可用于提取目的基因和切割运载体，切割磷酸二酯键，从质粒上切下一个目的基因需要切割4个磷酸二酯键，消耗4分子水，B错误； C、动物细胞工程中，胰蛋白酶可以消化组织细胞间的蛋白质，获得单个动物细胞，对于植物细胞一般采用一定浓度的盐酸处理使植物细胞相互分离，C错误； D、PCR仪扩增目的基因时利用高温使DNA解旋，D错误。 故选A。 13. 下列关于生物科学技术的有关叙述，错误的是（　　） A. 植物组织培养的脱分化过程应该用固体培养基，并对外植体进行消毒处理 B. 植物体细胞杂交中，可采用质壁分离实验检测制备原生质体的活性情况 C. 胚胎移植时，受体对移入子宫内的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应 D. 胚胎工程的基础是哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律 【答案】B 【解析】 【详解】A、植物组织培养的脱分化过程需使用添加琼脂的固体培养基，为避免杂菌污染影响外植体发育，需要对外植体进行消毒处理，操作符合技术要求，A正确； B、质壁分离发生的前提是植物细胞具有细胞壁，原生质体是已经去除细胞壁的植物细胞结构，不存在原生质层与细胞壁分离的可能，因此不能用质壁分离实验检测原生质体的活性，B错误； C、受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，是胚胎移植能够成功的重要生理学基础之一，C正确； D、胚胎工程的各项操作都是在哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律的理论基础上开展的，因此该规律是胚胎工程的理论基础，D正确。 14. 细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列叙述不正确的是（ ） A. 选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量的细胞 B. 选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率 C. 选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得较多突变体 D. 选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗 【答案】A 【解析】 【分析】1、动物细胞核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆个体。 2、选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞大，容易操作；卵（母）细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质。 3、植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、高度分化的细胞已经失去分裂能力，因此选择高度分化的动物体细胞进行培养不会获得大量细胞，A错误； B、卵母细胞的细胞质中含有促进全能性表达的物质，因此选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率，B正确； C、愈伤组织细胞处于分生状态，易受外界环境因素影响，因此选择植物的愈伤组织进行诱变处理，再进行人工选择，可获得优质的突变体，C正确； D、茎尖等分生区组织几乎不含病毒，因此选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，D正确。 故选A。 15. 下列关于基因工程的叙述，正确的是（　　） A. 培育转基因动物时选择的受体细胞只能是动物的受精卵 B. 构建重组质粒时必须选择相同的限制性核酸内切酶处理载体质粒与目的基因 C. 经检测发现抗除草剂基因成功导入某抗盐植物，该植物一定具有抗除草剂及抗盐性状 D. 用氯化钙处理大肠杆菌，可提高重组DNA分子的导入成功率 【答案】D 【解析】 【详解】A、培育转基因动物时优先选择全能性高的受精卵作为受体细胞，但并非只能选择受精卵，也可将目的基因导入体细胞后，通过核移植技术培育得到转基因动物，A错误； B、构建重组质粒时，只要限制性核酸内切酶切割载体和目的基因后产生的末端可互补配对即可，并非必须使用相同的限制酶，如同尾酶切割也能得到可互补的黏性末端，B错误； C、目的基因成功导入受体细胞不代表一定能顺利表达出相应性状，因此导入抗除草剂基因的植物不一定具备抗除草剂性状，C错误； D、用氯化钙处理大肠杆菌可使其成为感受态细胞，细胞壁通透性提升，能够提高重组DNA分子的导入成功率，D正确。 16. PCR技术是在体外合成特定DNA片段的一种方法，由高温变性、低温复性及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增。下列关于PCR技术的叙述，错误的是（ ） A. PCR技术中DNA的解旋方式与体内DNA复制不相同 B. 复性时引物之间通过碱基互补配对结合 C. 反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板 D. 经过5次循环后消耗引物62个 【答案】B 【解析】 【分析】PCR技术： 1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。 2、原理：DNA复制。 3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。 4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。 5、过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。 【详解】A、PCR技术中高温解旋，体内DNA复制过程中在解旋酶的作用下解旋，A正确； B、两种引物之间不能碱基互补配对，防止引物之间结合形成双链，降低引物与DNA模板链结合的效率，B错误； C、PCR技术需要模板DNA，且反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板，C正确； D、由于DNA是半保留复制，母链不需要引物，循环5次，理论上至少需要25×2-2=62个引物，D正确。 故选B。 17. 在基因表达载体的构建中，下列说法不正确的是（　　） ①一个基因表达载体的组成只包括目的基因、启动子、终止子 ②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA ③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止 ④所有基因表达载体的构建是完全相同的 ⑤必须在细胞内进行 A. ② ③⑤ B. ① ④ ⑤ C. ① ②⑤ D. ③ ④ 【答案】B 【解析】 【分析】基因表达载体的构建的目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。 【详解】①基因表达载体的构建是基因工程的核心内容，一个表达载体的组成，除了目的基因外，还有启动子、终止子和标记基因等，①错误；②启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始，②正确；③终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束，③正确；④由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此基因表达载体的构建是不完全相同的，④错误；基因表达载体的构建必须在细胞外进行，⑤错误。②③正确，①④⑤错误。故选B。 18. 将小菜蛾细胞的羧酸酯酶基因（CarE）导入水稻细胞，培育抗农药水稻新品种，过程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 必须将含CarE基因的质粒导入水稻的受精卵 B. 构建重组质粒时，应选用PstI和SmaI分别切割质粒和含CarE基因的DNA C. Tetr的作用是鉴别和筛选含CarE基因的细胞 D. 通过检测表达产物来判断CarE基因在水稻细胞中是否发挥功能 【答案】A 【解析】 【详解】A、不一定要导入水稻的受精卵，但是导入受精卵效果要好，A错误； B、据图分析：CarE基因为目的基因，Tetr基因为标记基因。该质粒上存在3个限制酶的酶切位点，即限制酶PstI、限制酶SmaI和限制酶AluⅠ，但是AluⅠ的识别位点位于目的基因内，切割后会破坏目的基因，因此构建重组质粒时，应选用PstI和SmaI分别切割质粒和含CarE基因的DNA，B正确； C、Tetr是标记基因，是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，C正确； D、通过检测表达产物来判断CarE基因在水稻细胞中是否发挥功能作用，D正确。 故选A。 19. 胰岛素用于治疗糖尿病，但胰岛素注射后易在皮下堆积，需较长时间才能进入血液，进入血液后又易被分解，因此治疗效果受到影响。如图是新的速效胰岛素的生产过程，有关叙述正确的是（ ） A. 新的胰岛素的产生是依据基因工程原理完成的 B. 新的胰岛素生产过程中不涉及中心法则 C. 新的胰岛素产生过程中最困难的一步是设计新的胰岛素分子的空间结构 D. 若用大肠杆菌生产新的胰岛素，常用Mg2+处理大肠杆菌 【答案】C 【解析】 【详解】A、新的胰岛素的产生是依据蛋白质工程原理完成的，A错误； B、新的胰岛素生产过程中涉及转录、翻译的过程，其涉及中心法则，B错误； C、新的胰岛素产生过程中最困难的一步是由设计新的胰岛素分子的空间结构，C正确； D、把目的基因导入大肠杆菌，常用Ca2＋处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，利于重组质粒的进入，D错误。 故选C。 20. 已知B基因存在于水稻基因组中，其仅在体细胞和精子中正常表达，在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，研究人员将B基因编码区与Luc基因（表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光）连接成融合基因，实验过程如下。下列说法正确的是（ ） A. 若想通过逆转录的方法获得B基因，则只能从水稻体细胞中提取全部RNA进行操作 B. B-Luc融合基因的形成需要DNA连接酶的催化 C. 转基因植株中含有卡那霉素抗性基因 D. 通过PCR技术检测发现水稻细胞的染色体DNA上插入了B-Luc，则说明已成功获得转基因植株 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程中需要限制酶和DNA连接酶，构建基因表达载体需要启动子、终止子、目的基因、标记基因。 【详解】A、通过逆转录获取B基因编码蛋白的cDNA，可以从水稻体细胞或精子中提取全部RNA进行操作，A错误； B、要将水稻B基因编码蛋白的序列和Luc基因连接形成融合基因，需要DNA连接酶催化不同DNA片段的连接，B正确； C、T-DNA才能进入到植物细胞中，卡那霉素抗性基因不在T-DNA上，故转基因植株中不含有卡那霉素抗性基因，C错误； D、通过PCR技术检测发现水稻细胞的染色体DNA.上插入了B-Luc，还要进一步检测其是否能够表达以及在个体水平进行鉴定，D错误。 故选B。 21. 下列关于基因工程的叙述，错误的是 ( ) A. 目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B. 限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C. 人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D. 载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 【答案】D 【解析】 【详解】A.目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因，可来自动、植物或微生物，受体细胞是指表达目的基因的细胞，可来自动、植物或微生物，A正确； B.限制性核酸内切酶和DNA连接酶在获取目的基因和构建基因表达载体必要的工具酶，B正确； C.大肠杆菌属于原核生物，没有内质网和高尔基体，不能对核糖体上合成的人胰岛素原进行加工修饰，所以胰岛素原没有生物活性，C正确； D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞，但不能促进目的基因的表达，D错误； 因此，本题答案选D。 考点：本题考查基因工程的知识。 点评：本题难度中等，属于考纲理解层次。解答本题的关键是理解载体上的抗性基因的目的是用于检测目的基因是否导入受体细胞，即用于筛选含重组DNA的细胞。 22. 科学家已经在牛、山羊等动物乳腺生物反应器中，获得了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要的医药产品，由此还发展了动物膀胱生物反应器等。下列说法错误的是（　　） A. 膀胱生物反应器优于乳腺生物反应器的方面包括不受性别、发育时期等限制 B. 构建乳腺生物反应器时，需将目的基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起 C. 将目的基因导入动物细胞常采用显微注射技术操作 D. 转基因动物中，目的基因只存在于乳腺或膀胱细胞中，而不存在于其他体细胞中 【答案】D 【解析】 【详解】A、乳腺生物反应器只能利用进入泌乳期的雌性动物生产医药产品，而膀胱生物反应器可从动物尿液中提取产物，不受动物性别、发育时期的限制，A正确； B、启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，能调控基因的转录，构建乳腺生物反应器时，将目的基因与乳腺特异表达基因的启动子等调控元件重组，才能保证目的基因只在乳腺细胞中特异性表达，B正确； C、将目的基因导入动物细胞的常用方法是显微注射技术，一般将重组载体注射到受精卵中，C正确； D、转基因动物由导入目的基因的受精卵分裂分化形成，所有体细胞都含有目的基因，只是目的基因仅在乳腺或膀胱细胞中选择性表达，并非不存在于其他体细胞中，D错误。 23. 生物技术是一把双刃剑，既可以造福人类也可以给人带来危害，在社会上引起了广泛的争论。下列有关说法正确的是（　　） A. 转基因食品是不安全的，应该禁止食用 B. 我国禁止生殖性克隆人，但是允许治疗性克隆 C. 设计试管婴儿可以制造完美婴儿，应该推广此项技术 D. 新冠病毒的传染性强，可用于制造生物武器 【答案】B 【解析】 【详解】A、合法上市的转基因食品均经过严格的安全性评估，目前没有科学证据证明其对人体有害，应理性看待转基因技术，不能盲目禁止食用，A错误； B、我国对克隆技术的管理原则为禁止生殖性克隆人，坚持“不赞成、不允许、不支持、不接受”任何生殖性克隆人实验，但允许开展治疗性克隆研究用于疾病治疗等医疗用途，B正确； C、设计试管婴儿若用于定制“完美婴儿”会严重违背伦理道德，存在巨大伦理风险，我国仅允许用于救治患病子女等特殊医疗场景的设计试管婴儿，且有严格审批流程，禁止推广用于非医疗用途，C错误； D、我国明确禁止研发、使用任何形式的生物武器，D错误。 24. 现代生物技术既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜在的危害，下列关于生物技术的安全性与伦理问题的叙述，错误的是（ ） A. 转入叶绿体中的基因不会随花粉传递给子代，可避免基因污染 B. 为了保护消费者知情权，我国对农业转基因生物实行了标识制度 C. 生殖性克隆人能丰富人类基因多样性，但需对相关实验进行有效监控和严格审查 D. 生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等，其致病能力强、攻击范围广 【答案】C 【解析】 【详解】A、叶绿体基因属于细胞质遗传，花粉中几乎不含细胞质，因此转入叶绿体的基因不会通过花粉传播，可避免基因污染，A正确； B、我国对农业转基因生物实行标识制度，是为了保障消费者的知情权和选择权，B正确； C、生殖性克隆人通过无性繁殖产生，其遗传物质与供体完全相同，不会增加人类基因多样性，且生殖性克隆人存在严重伦理争议，目前被国际社会普遍禁止，C错误； D、生物武器包括致病菌、病毒及生化毒剂等，具有传染性强、危害范围广等特点，D正确。 故选C。 25. 下列有关生物工程的叙述，错误的有（　　） ①基因工程的核心步骤是构建基因表达载体②蛋白质工程可通过直接改造蛋白质的结构从而改变其功能③利用核移植可以培养试管婴儿④PCR技术需要利用限制性内切核酸酶打开DNA双链⑤利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体⑥利用植物茎尖培养脱毒苗时，全程都需要光照 A. 一项 B. 两项 C. 三项 D. 四项 【答案】D 【解析】 【详解】①基因工程的核心步骤是构建基因表达载体，可保证目的基因在受体细胞中稳定存在、表达并遗传，①正确； ②蛋白质工程的操作对象是基因，需通过改造或合成基因间接改造蛋白质，不能直接改造蛋白质结构，②错误； ③试管婴儿培育采用体外受精、胚胎移植技术，属于有性生殖；核移植是克隆动物的技术，属于无性生殖，不能用于培养试管婴儿，③错误； ④PCR技术通过高温加热使DNA双链解旋，不需要限制酶，限制酶的作用是切割DNA的磷酸二酯键，④错误； ⑤单克隆抗体制备时，先通过细胞融合技术获得杂交瘤细胞，再通过动物细胞培养技术扩增获得大量抗体，⑤正确； ⑥植物茎尖培养脱毒苗时，脱分化阶段不需要光照，再分化阶段才需要光照，并非全程需要光照，⑥错误。 ABC不符合题意，D符合题意。 二、不定项选择题（每题3分，共15分） 26. 柴油是重要的燃料油之一，泄漏或不当排放会造成环境污染。研究者从被柴油污染的土壤中获取了3种柴油降解菌进行研究，结果见下表。下列叙述不正确的是（ ） 柴油浓度（%） 菌株降解率（%） 1 2 4 5 Y1 90．9 60．8 53．5 41．0 Y2 92．8 - - - Y3 70．1 42．5 - - 注：“-”表示菌株不能生长 A. 为获得降解菌，应用以柴油为唯一碳源的培养基 B. 所用培养基和土壤样液均需进行严格灭菌 C. 可采用稀释涂布平板法获得降解菌的单菌落 D. Y1对高浓度柴油的耐受性更强 【答案】B 【解析】 【分析】选择特定菌种时需用特殊的选择培养基，选择培养基的作用是保证目的菌种的正常生长，抑制其他杂菌的生长。 据表中数据可知，三种菌种对柴油的耐受性依次为Y1大于Y3大于Y2。 【详解】A、要获得能降解柴油的菌种，需以柴油为唯一的碳源制备的培养基才有筛选作用，A正确； B、所用培养基需进行严格灭菌，以防止杂菌污染，若土壤样液灭菌，则连所需菌种一起杀死，B错误； C、可采用稀释涂布平板法或平板划线法获得降解菌的单菌落，C正确； D、由表格可知，Y1在各个浓度下均能生长，说明其对柴油的耐受性高于其余两个菌种，D正确。 故选B。 27. 运用植物细胞工程技术，可以培育单倍体植株和进行细胞产物的工厂化生产，下列有关说法错误的是（ ） A. 利用植物细胞培养生产紫草宁时，需要把外植体培养成完整的紫草植株 B. 细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件，提高了单个细胞中次生代谢物的含量 C. 单倍体育种中，需经过植物组织培养和诱导染色体加倍，以得到能稳定遗传的优良品种 D. 利用花药通过植物组织培养获得的单倍体植株可作为研究遗传突变的理想材料 【答案】AB 【解析】 【分析】本题考查植物细胞工程技术的应用。 【详解】A、紫草宁是从细胞中提取的一种药物和色素，利用植物细胞培养生产紫草宁时，不需要把外植体培养成完整的紫草植株，A错误； B、细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件，提高次生代谢物的总体含量，不能提高单个细胞中次生代谢物的含量，B错误； C、单倍体育种中，需经过植物组织培养后，诱导染色体加倍，得到能稳定遗传的优良品种，C正确； D、利用花药通过植物组织培养获得的单倍体植株，大多数单倍体植株的细胞中只含有一套染色体，染色体加倍后得到的植株隐性性状容易显现，因此可作为研究遗传突变的理想材料，D正确。 故选AB符合题意。 【点睛】熟练理解并掌握植物细胞工程的原理和技术是关键。 28. 以下为现代生物技术与工程操作常涉及的流程，下列说法正确的是（　　） A. 若为植物体细胞杂交过程，可用离心技术使处理①和②后获得的原生质体融合 B. 若为试管牛生产流程，体外受精时，卵母细胞①和精子②要分别进行成熟培养和获能处理 C. 若为动物细胞核移植过程，将供体细胞①注入卵母细胞②，两细胞融合后形成重构胚 D. 若为动物细胞融合过程，可以用灭活的病毒诱导融合形成杂交细胞 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、若为植物体细胞杂交过程，可用电融合法、离心法等技术或PEG诱导等方法使处理①和②后获得的原生质体融合，A正确； B、采集到的卵母细胞和精子要分别在体外进行成熟培养，卵母细胞需要培养至减数第二次分裂的中期，采集的精子需要获能处理，然后才能用于体外受精，B正确； C、若为动物细胞核移植过程，将供体细胞①注入去核的卵母细胞②，两细胞融合后形成重构胚，C错误； D、若为动物细胞融合过程，可以用灭活的病毒、电融合法、离心法等技术或PEG诱导等方法诱导融合形成杂交细胞，D正确。 29. 人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的研究及药物的筛选。利用正常大鼠获得遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如下图所示。下列分析错误的是（　　） A. 把早期胚胎植入大鼠子宫的最佳时期是原肠胚阶段 B. 质粒是独立于细菌染色体外的能自主复制环状DNA分子 C. 如果在子代大鼠体内检测到高血压相关的基因，说明高血压相关基因已成功表达 D. 通过胚胎分割技术可以提高胚胎利用率 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、把早期胚胎植入大鼠子宫的最佳时期是桑椹胚或囊胚阶段，A错误； B、细菌属于原核生物，没有染色体，B错误； C、如果在子代大鼠体内检测到高血压相关的基因，说明高血压相关基因已成功导入大鼠体内，但不一定表达，C错误； D、胚胎分割技术可以将一个早期胚胎分割得到多个胚胎，获得多个个体，能够提高胚胎的利用率，D正确。 30. 某科研团队用A和B两种限制酶同时和分别处理同一DNA片段，发现限制酶对应切点一定能切开。下图1为某DNA片段及两种酶的酶切位点，图2为酶切产物电泳分离结果。下列叙述正确的是（ ） A. 图1中X代表的碱基对数为4500，Y是限制酶B的酶切位点 B. 在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关 C. 用A和B两种限制酶同时处理图中同一DNA片段得到8个游离的磷酸基团 D. 利用PCR技术从图1的DNA中扩增出等长的X片段，至少需要2次循环 【答案】BC 【解析】 【分析】PCR技术即聚合酶链式反应，是一种用于扩增特定DNA片段的分子生物学技术，能在短时间内将微量的DNA大幅增加。电泳是一种利用带电粒子在电场中会向相反电荷电极移动的特性，对不同物质进行分离、分析的技术。 其基本原理是：在电场作用下，带电粒子（如核酸、蛋白质等）会沿着电场方向发生迁移。 【详解】A、结合图1和图2中第一列限制酶A和B同时处理的电泳条带结果可知，图1中×代表的碱基对数为4500，根据图2中1电泳分离结果存在3500bp长度的条带可知，①是单独使用限制酶A处理DNA片段的酶切产物电泳分离结果，再根据①电泳分离结果存在500bp长度和6000bp长度的条带可知，Y是限制酶A的酶切位点，A错误； B、在电泳过程中，凝胶中DNA分子的迁移速率确实与凝胶的浓度、DNA分子大小和构象等有关，这是电泳的基本原理，B正确； C、由图2可知，用限制酶A和B同时切割DNA分子，会形成4种长度的片段，DNA单链的一端具有1个游离的磷酸基团，则DNA双链具有2个磷酸基团。因此用A和B两种限制酶同时处理图中同一DNA片段最终得到8个游离的磷酸基团，C正确； D、引物A或B结合的单链DNA记作长链，引|物A或B合成的子链记作中链，以中链为模板合成的子链记作短链，则第一次循环结束后生成2个DNA，其两条链均为长中；第二次循环结束后生成4个DNA，其中2个DNA的两条链为长中，2个DNA的两条链为短中；第三次循环结束后生成8个DNA，其中2个DNA的两条链为长中，4个DNA的两条链为短中，2个DNA的两条链为短短，这两条脱氧核苷酸链等长。因此设计引I物从图1DNA中扩增出等长的X片段，至少需要3次循环，D错误。 故选BC。 三、非选择题（共35分） 31. 自古以来，人们就利用发酵技术来生产各种产品。回答问题： （1）果酒和果醋的制作依次利用了______和______两种微生物，若从自然菌样中筛选较理想的菌种进行纯化培养，通常采用______法接种。 （2）在果酒的基础上制作果醋时，打开瓶盖，盖上一层纱布，同时______（提供的条件）。 （3）谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵工程生产谷氨酸，从而制取谷氨酸钠（味精）。如图为谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的途径，通过发酵工程可以大量生产谷氨酸。回答下列问题： 由上图可知，谷氨酸棒状杆菌体内若积累了较多的谷氨酸，则会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，所以发酵过程中随时检测培养液中________、______等以了解发酵进程，同时还要检测温度和pH，因为温度会影响酶活性，而PH会影响产物种类，在______条件下发酵罐内会积累谷氨酸。 （4）发酵工程中有很多应用，其中在农牧业上的应用有生产微生物肥料、微生物农药还有生产______。 【答案】（1） ①. 酵母菌 ②. 醋酸菌 ③. 平板划线（或稀释涂布平板） （2）适当升高温度 （3） ①. 微生物数量 ②. 产物浓度 ③. 中性或弱碱性 （4）生产微生物饲料 【解析】 【小问1详解】 果酒和果醋的制作依次利用了酵母菌和醋酸菌两种微生物，若从自然菌样中筛选较理想的菌种进行纯化培养，通常采用平板划线（或稀释涂布平板）法接种，这两种方法均可得到单菌落。 【小问2详解】 制作果醋利用的是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，且其最适生长温度为30～35℃，故在果酒的基础上制作果醋时，打开瓶盖，盖上一层纱布，以提供氧气，防止杂菌污染，同时还需要适当升高温度。 【小问3详解】 如图所示，谷氨酸棒状杆菌体内若积累了较多的谷氨酸，则会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，所以要随时检测微生物数量和产物浓度，同时还要检测温度和pH，因为温度会影响酶的活性，而pH会影响产物种类，在中性或弱碱性条件下发酵罐内会积累谷氨酸，在酸性环境下会形成谷氨酰胺和N-乙酰谷胺酰胺。 【小问4详解】 发酵工程中有很多应用，其中在农牧业上的应用有生产微生物肥料、微生物农药还有生产微生物饲料，如生产的单细胞蛋白可以用作饲料。 32. 非洲猪瘟是由ASFV（一种双链DNA病毒）感染猪引起的烈性传染病。某研究小组将ASFV外壳蛋白基因导入猪体细胞中，利用核移植技术培育转基因克隆猪，从而得到自动产生ASFV抗体的个体，其过程如图所示。回答下列问题： （1）获得D猪的技术是______，取B猪体细胞进行①过程相对于胚胎细胞难度大，原因在于______，步骤③采用的技术手段是______。 （2）B猪体细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须______以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成的伤害。还需要控制气体条件是_______的混合气体，二氧化碳的主要作用是______。培养到一定程度后，需要分瓶再继续培养，分瓶后的培养过程称为_______。 （3）由于目的基因不能直接导入受体细胞，因此需要构建______，该过程采用双酶切法处理含目的基因的DNA片段和质粒，其优点是______（答出一点即可）。 【答案】（1） ①. 细胞核移植/细胞核移植技术、胚胎移植、动物细胞培养、转基因技术 ②. 动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难 ③. 胚胎移植 （2） ①. 定期更换培养液 ②. 传代培养 ③. 95%的空气与5%二氧化碳 ④. 维持培养液的pH （3） ①. 基因表达载体 ②. 保证目的基因和载体定向连接（防止反向连接、防止自身环化） 【解析】 【小问1详解】 分析题可知，获得D猪的技术包括细胞核移植技术、胚胎移植、动物细胞培养、转基因技术；取B猪体细胞进行①过程相对于胚胎细胞难度大，原因在于动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难；步骤③表示将早期胚胎移植给C猪，其技术手段为胚胎移植。 【小问2详解】 细胞培养过程中会产生代谢废物（如乳酸、氨），同时营养物质会消耗，定期更换培养液可以清除废物、补充营养，维持细胞正常生长。气体条件是95% 空气 + 5% 二氧化碳的混合气体。5% 二氧化碳用于维持培养液的 pH 稳定。将原代培养的细胞分瓶继续培养，称为传代培养。 【小问3详解】 基因表达载体的构建能使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用，所以目的基因导入受体细胞时，常需要构建基因表达载体。使用双酶切法可以避免目的基因自身环化、避免载体自身环化、避免目的基因反向连接到载体上，保证目的基因和载体定向连接。 33. 紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀病｡百脉根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后鼓胀｡为培育抗鼓胀病的新型牧草，科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究｡研究主要流程如下图（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的功能）｡ （1）在制备两种植物原生质体时，先将两种细胞分别置于0.5~0.6mol/L的甘露醇溶液中，使细胞在较高渗透压环境下处于较稳定状态，从而有利于用______去除细胞壁，分别获得两种植物的原生质体｡ （2）步骤②为______，从步骤②到步骤③需要更换新的培养基，经过步骤②、③到形成再生植株，体现的主要原理是______｡ （3）利用图示技术进行育种的优点是______｡ （4）谷蛋白是野生清水紫花苜蓿中含量较高的一种蛋白质，科研人员为比较植株不同部位谷蛋白的含量，想通过制备相应的单克隆抗体进行检测，部分流程如下图： 经过a步骤，细胞两两融合的产物有3种｡在步骤b的基础上经过步骤c______和抗体检测筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，获得的杂交瘤细胞可采用体外培养的方式进行扩大培养，培养—段时间后可从______中提取单克隆抗体｡单克隆抗体的优点是______。 （5）百脉根花的提取液可用于生产护肤品，为研究百脉根花提取液对受损皮肤的修复效果，需要—批遗传性状基本一致的实验小鼠，研究人员从______（填“同一”或“不同”）小鼠个体中取出体细胞核进行体细胞核移植，形成重构胚，激活后完成细胞分裂和发育进程，最后移植到经过______处理的受体雌鼠中获得实验小鼠｡ 【答案】（1）纤维素酶和果胶酶 （2） ①. 脱分化 ②. 植物细胞的全能性 （3）打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培养植物新品种等 （4） ①. 克隆化培养 ②. 培养液 ③. 准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，可以大量制备 （5） ①. 同一 ②. 同期发情 【解析】 【小问1详解】 在制备两种植物原生质体时，先将两种细胞分别置于0.5~0.6mol/L的甘露醇溶液中，使细胞在较高渗透压环境下处于较稳定状态，而后用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，进而获得两种植物的原生质体，为实现植物体细胞杂交做准备。 【小问2详解】 愈伤组织是经脱分化形成的，对应图中的步骤②；由于脱分化形成愈伤组织和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的激素和营养条件等不同，因此由步骤②到步骤③再分化过程需要更换新的培养基。图中经过步骤②、③到形成再生植株，这一过程的原理是植物细胞的全能性。 【小问3详解】 利用此项技术进行育种的优点是：打破生殖隔离，克服了远缘杂交不亲和的障碍。 【小问4详解】 科研人员为比较植株不同部位谷蛋白的含量，想通过制备相应的单克隆抗体进行检测，因此需要用谷蛋白作为抗原刺激小鼠的特异性免疫反应获得相应的B淋巴细胞。步骤a为诱导细胞融合的操作，细胞两两融合的产物有同种融合的和不同细胞融合的3种细胞。步骤b（筛选杂交瘤细胞）的基础上经过步骤c克隆化培养和抗体检测筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是既能大量增殖，又能产生特定抗体。得到的杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行体外培养的方式进行扩大培养；而后从培养液中获取单克隆抗体，单克隆抗体的特点是纯度高、特异性强，因而其表现的优点为可准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并可以大量制备。 【小问5详解】 若要一批遗传性状基本一致的实验小鼠，研究人员需要选择同一个小鼠获取细胞核进行核移植，形成重构胚，激活后完成细胞分裂和发育进程，最后在适当的早期胚胎，如桑葚胚和囊胚时进行胚胎移植，移植到经过同期发情处理的受体雌鼠中完成胚胎孕育，这样实现了同样生理环境条件下胚胎的转移。 34. 人胰岛素基因表达的最初产物是一条肽链构成的前胰岛素原，经加工后形成两条肽链（A链和B链）的有生物活性的胰岛素。此后科学家又提出了利用基因工程改造大肠杆菌生产人胰岛素的两种方法：“AB”法是根据胰岛素A、B两条肽链的氨基酸序列人工合成两种DNA片段，利用工程菌分别合成两条肽链后将其混合自然形成胰岛素;“BCA”法是利用人体某细胞中的mRNA得到胰岛素基因，表达出胰岛素原后再用特定酶切掉C肽段。这两种方法使用同一种质粒作为载体。请据下图分析并回答下列问题： （1）由于一种氨基酸可能对应多种密码子，“AB”法中人工合成的两种DNA片段均有多种可能的序列。“BCA”法是利用人体______细胞中的mRNA，再由mRNA经_______得到的胰岛素基因，“AB和BCA”法获取的目的基因中不含人胰岛素基因启动子。 （2）如图是利用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。为使目的基因与载体正确连接，在设计PCR引物时可添加限制酶_______的识别序列，PCR引物应该添加在识别序列的_______（填“3’或5’）端。 （3）PCR扩增的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，下列叙述中正确的有______。 A. PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，该酶主要在复性过程起作用 B. 琼脂糖凝胶电泳主要用来分离DNA，进行电泳时DNA片段越大，迁移速率越大 C. 进行电泳时，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动 D. 琼脂糖溶液中加入的核酸染料利于DNA在紫外灯下被检测 （4）β-半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。经_______（处理方法）大肠杆菌后，与重组质粒混合培养一段时间，将大肠杆菌接种到添加了_______和X-gal的培养基上筛选出_______色的菌落即为工程菌种。 （5）科学家利用蛋白质工程技术，研制出了易吸收、起效快的赖脯胰岛素，获得赖脯胰岛素基因的途径是：从预期的蛋白质功能出发→_______→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。 【答案】（1） ①. 胰岛B ②. 逆转录 （2） ①. XhoⅠ和MunⅠ ②. 3’ （3）CD （4） ①. 钙离子处理 ②. 氨苄青霉素 ③. 白 （5）设计预期的蛋白质结构 【解析】 【小问1详解】 胰岛素基因存在于所有细胞中，但只能在胰岛B细胞中表达，结合题意“BCA法是利用人体某细胞中的mRNA得到胰岛素基因，表达出胰岛素原后再用特定酶切掉C肽段”可知，BCA法是从人体胰岛B细胞中获取mRNA，再由mRNA经逆转录过程得到的胰岛素基因。 【小问2详解】 由图可知，对于目的基因，SalI和NheI的作用位点在目的基因的中间，会破坏目的基因，则在引物设计时不能选用这两种限制酶，那么只能在XhoI和MunI和EcoRI中选择；同时质粒上EcoRI的其中一个作用位点是在标记基因上，所以只能选择XhoI和MunI两种限制酶，则需要在设计PCR引物时可添加限制酶XhoI和MunI的识别序列。由于DNA复制时，子链的延伸是从引物的3’端开始的，因此引物需要在模板的3'端开始进行碱基互补配对，即PCR引物应该添加在识别序列的“3’端。 【小问3详解】 A、PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，该酶主要在延伸过程起作用，A错误； B、琼脂糖凝胶电泳中，DNA片段越小，迁移速率越快；片段越大，迁移越慢，B错误； C、根据电荷同性相斥、异性相吸引可推测，进行电泳时，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动，C正确； D、琼脂糖凝胶电泳中常加入核酸染料，凝胶中的DNA分子通过染色才可以在波长为300 nm的紫外灯下被检测出来，D正确。 【小问4详解】 将目的基因导入微生物细胞常用的方法是钙离子处理法，使其处于感受态，这样可提高转化率，结合图示可知，将目的基因的插入的位置是在lacZ基因中，会破坏lacZ基因的结构，不能产生β-半乳糖苷酶，根据题干信息“β-半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质”，故目的基因的插入破坏了lacZ基因的结构，使其不能正常表达产生β-半乳糖苷酶，底物X-gal不会被分解，所以筛选导入重组质粒的大肠杆菌时，在添加了氨苄青霉素和X-gal的培养基上应选择白色的菌落。 【小问5详解】 蛋白质工程的途径：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 五常市雅臣中学高二下学期第二次考试 生物试题 满分100分 时间75分钟 2026.4.29 一、单项选择题（每题2分，共50分） 1. 微生物发酵已经广泛应用于人类生活的各个领域。下列关于传统发酵技术的说法中，正确的是（　　） A. 果酒发酵过程温度控制在30℃，果醋发酵过程温度控制在20℃ B. 制作果醋需要醋酸菌，它是一种严格厌氧的微生物，可将葡萄中的糖分解为醋酸 C. 多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等 D. 制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸和二氧化碳 2. 防止杂菌入侵，获得纯净培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是（ ） A. 接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可以用紫外线照射30min，以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适当喷洒石碳酸或煤酚皂液等消毒液，可以加强消毒效果 B. 牛奶使用巴氏消毒法处理，在100℃煮30min，可以杀死牛奶中的微生物，且牛奶的营养成分不被破坏 C. 在实验室中，不可吃东西、喝水，离开实验室一定要洗手，以防止被微生物感染 D. 使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境 3. 微生物培养过程中，十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作，错误的是（　　） ①煮沸消毒法可以杀死所有微生物，包括芽孢和孢子 ②接种操作要在酒精灯火焰附近进行 ③无菌繁殖脱毒苗时，应对植物的外植体进行消毒 ④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 ⑤接种环要进行灼烧灭菌 ⑥植物组织培养、动物细胞培养、无土栽培都需要在无菌无毒环境中进行 A. ①③④ B. ②④⑥ C. ①③⑤ D. ①④⑥ 4. 在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列相关叙述错误的是（　　） A. 两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度 B. 用稀释涂布平板法进行微生物计数时，所得数据往往比实际值偏小 C. 获取纯培养物的过程中，应根据微生物的种类调整培养基的pH D. 对10mL土样样液稀释106倍后，取0.1mL稀释液涂布，测得的菌落数分别为218、266、305，则该10mL土样中目的菌数为2.63×1010个 5. 下列关于发酵工程的叙述中，不正确的是（ ） A. 发酵工程中优良菌种可以从自然界中筛选 B. 对培养基灭菌是发酵工程的中心环节 C. 在发酵过程中，要严格控制温度、pH、溶解氧、通气量与转速等发酵条件 D. 如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，得到产品 6. 央视3.15晚会曝光老坛酸菜包里的部分酸菜是从外面收购的“土坑酸菜”。泡菜古称菹，是指为了利于长时间存放而经过发酵的蔬菜。它是一种在低浓度食盐液中泡制的蔬菜乳酸发酵加工品。下列叙述正确的是（ ） A. 泡菜主要是靠盐的渗透压来抑制腐败微生物的生长和繁殖 B. 腌制时间过短和制作过程污染严重等会使土坑酸菜易腐烂变质 C. 泡菜之盐水加热煮沸后应立即加入陈泡菜液以防止杂菌污染 D. 制作泡菜时要选择新鲜的原料，且为创设无氧环境泡菜坛要装满 7. 下面是有关啤酒的工业化生产的流程。下列有关叙述错误的是（ ） 发芽焙烤碾磨糖化蒸煮发酵消毒终止 A. 焙烤可以杀死大麦种子的胚，并使淀粉酶变性失活 B. 发芽的过程中大麦会产生淀粉酶，便于将大麦中的淀粉分解为葡萄糖进行酒精发酵 C. 发酵的过程是酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的过程 D. 蒸煮可以杀死糖浆中的微生物，避免杂菌污染 8. 植物细胞工程包括植物组织培养、植物体细胞杂交等技术，具有广泛的应用前景和实用价值。下列对这些操作或应用的描述错误的是（　　） A. 可用PEG诱导植物原生质体融合，再生出细胞壁是融合成功的标志 B. 获取植物原生质体时，体现了酶的专一性 C. 植物体细胞杂交技术去壁前，需对两种植物细胞进行灭菌处理，以防止杂菌污染 D. 植物培养基中常用的植物生长调节剂，一般可以分为生长素类、细胞分裂素类 9. 将诱导多能干细胞（简称iPS细胞）移植给急性心肌梗死小鼠，检测发现小鼠心肌电生理指标逐渐恢复正常。下列说法不合理的是（　　） A. 该实验仅需要正常小鼠作为对照组 B. 与成体干细胞相比，iPS细胞的分化潜能更强 C. 因为诱导过程无需破坏胚胎，且选择病鼠自身细胞获得iPS细胞再移植可避免免疫排斥，所以应用前景优于胚胎干细胞 D. 培养iPS细胞的培养液中含有动物血清等 10. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c表示现代工程技术，①、②、③表示其结果，下列说法正确的是（ ） A. 若a是核移植技术，①反映了动物细胞也具有全能性 B. 若c表示动物细胞融合技术，③为获得的单克隆抗体 C. ①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物 D. 若b是体外受精技术，则②可提高动物繁殖能力 11. 中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核后的兔子卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列有关叙述中错误的是（　　） A. 卵母细胞去核的方法是显微注射法，还可以用紫外光短时间照射等方法 B. 兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全能性的物质 C. 重组胚胎需要用物理或化学方法激活，使之完成细胞分裂和发育进程 D. 在大熊猫早期胚胎的形成过程中，囊胚期开始出现内细胞团和滋养层细胞 12. 下列关于生物工程中常见的几种酶的叙述，正确的是（ ） A. 去除植物细胞壁时所用的纤维素酶溶液的渗透压不宜过低 B. 用限制酶从质粒上切下一个目的基因需脱去4个水分子 C. 用胰蛋白酶处理植物愈伤组织可得到单个的愈伤组织细胞 D. PCR仪扩增目的基因时加入解旋酶有利于提高解旋的效果 13. 下列关于生物科学技术的有关叙述，错误的是（　　） A. 植物组织培养的脱分化过程应该用固体培养基，并对外植体进行消毒处理 B. 植物体细胞杂交中，可采用质壁分离实验检测制备原生质体的活性情况 C. 胚胎移植时，受体对移入子宫内的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应 D. 胚胎工程的基础是哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律 14. 细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列叙述不正确的是（ ） A. 选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量的细胞 B. 选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率 C. 选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得较多突变体 D. 选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗 15. 下列关于基因工程的叙述，正确的是（　　） A. 培育转基因动物时选择的受体细胞只能是动物的受精卵 B. 构建重组质粒时必须选择相同的限制性核酸内切酶处理载体质粒与目的基因 C. 经检测发现抗除草剂基因成功导入某抗盐植物，该植物一定具有抗除草剂及抗盐性状 D. 用氯化钙处理大肠杆菌，可提高重组DNA分子的导入成功率 16. PCR技术是在体外合成特定DNA片段的一种方法，由高温变性、低温复性及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增。下列关于PCR技术的叙述，错误的是（ ） A. PCR技术中DNA的解旋方式与体内DNA复制不相同 B. 复性时引物之间通过碱基互补配对结合 C. 反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板 D. 经过5次循环后消耗引物62个 17. 在基因表达载体的构建中，下列说法不正确的是（　　） ①一个基因表达载体的组成只包括目的基因、启动子、终止子 ②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA ③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止 ④所有基因表达载体的构建是完全相同的 ⑤必须在细胞内进行 A. ② ③⑤ B. ① ④ ⑤ C. ① ②⑤ D. ③ ④ 18. 将小菜蛾细胞的羧酸酯酶基因（CarE）导入水稻细胞，培育抗农药水稻新品种，过程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 必须将含CarE基因的质粒导入水稻的受精卵 B. 构建重组质粒时，应选用PstI和SmaI分别切割质粒和含CarE基因的DNA C. Tetr的作用是鉴别和筛选含CarE基因的细胞 D. 通过检测表达产物来判断CarE基因在水稻细胞中是否发挥功能 19. 胰岛素用于治疗糖尿病，但胰岛素注射后易在皮下堆积，需较长时间才能进入血液，进入血液后又易被分解，因此治疗效果受到影响。如图是新的速效胰岛素的生产过程，有关叙述正确的是（ ） A. 新的胰岛素的产生是依据基因工程原理完成的 B. 新的胰岛素生产过程中不涉及中心法则 C. 新的胰岛素产生过程中最困难的一步是设计新的胰岛素分子的空间结构 D. 若用大肠杆菌生产新的胰岛素，常用Mg2+处理大肠杆菌 20. 已知B基因存在于水稻基因组中，其仅在体细胞和精子中正常表达，在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，研究人员将B基因编码区与Luc基因（表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光）连接成融合基因，实验过程如下。下列说法正确的是（ ） A. 若想通过逆转录的方法获得B基因，则只能从水稻体细胞中提取全部RNA进行操作 B. B-Luc融合基因的形成需要DNA连接酶的催化 C. 转基因植株中含有卡那霉素抗性基因 D. 通过PCR技术检测发现水稻细胞的染色体DNA上插入了B-Luc，则说明已成功获得转基因植株 21. 下列关于基因工程的叙述，错误的是 ( ) A. 目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B. 限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C. 人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D. 载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 22. 科学家已经在牛、山羊等动物乳腺生物反应器中，获得了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要的医药产品，由此还发展了动物膀胱生物反应器等。下列说法错误的是（　　） A. 膀胱生物反应器优于乳腺生物反应器的方面包括不受性别、发育时期等限制 B. 构建乳腺生物反应器时，需将目的基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起 C. 将目的基因导入动物细胞常采用显微注射技术操作 D. 转基因动物中，目的基因只存在于乳腺或膀胱细胞中，而不存在于其他体细胞中 23. 生物技术是一把双刃剑，既可以造福人类也可以给人带来危害，在社会上引起了广泛的争论。下列有关说法正确的是（　　） A. 转基因食品是不安全的，应该禁止食用 B. 我国禁止生殖性克隆人，但是允许治疗性克隆 C. 设计试管婴儿可以制造完美婴儿，应该推广此项技术 D. 新冠病毒的传染性强，可用于制造生物武器 24. 现代生物技术既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜在的危害，下列关于生物技术的安全性与伦理问题的叙述，错误的是（ ） A. 转入叶绿体中的基因不会随花粉传递给子代，可避免基因污染 B. 为了保护消费者知情权，我国对农业转基因生物实行了标识制度 C. 生殖性克隆人能丰富人类基因多样性，但需对相关实验进行有效监控和严格审查 D. 生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等，其致病能力强、攻击范围广 25. 下列有关生物工程的叙述，错误的有（　　） ①基因工程的核心步骤是构建基因表达载体②蛋白质工程可通过直接改造蛋白质的结构从而改变其功能③利用核移植可以培养试管婴儿④PCR技术需要利用限制性内切核酸酶打开DNA双链⑤利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体⑥利用植物茎尖培养脱毒苗时，全程都需要光照 A. 一项 B. 两项 C. 三项 D. 四项 二、不定项选择题（每题3分，共15分） 26. 柴油是重要的燃料油之一，泄漏或不当排放会造成环境污染。研究者从被柴油污染的土壤中获取了3种柴油降解菌进行研究，结果见下表。下列叙述不正确的是（ ） 柴油浓度（%） 菌株降解率（%） 1 2 4 5 Y1 90．9 60．8 53．5 41．0 Y2 92．8 - - - Y3 70．1 42．5 - - 注：“-”表示菌株不能生长 A. 为获得降解菌，应用以柴油为唯一碳源的培养基 B. 所用培养基和土壤样液均需进行严格灭菌 C. 可采用稀释涂布平板法获得降解菌的单菌落 D. Y1对高浓度柴油的耐受性更强 27. 运用植物细胞工程技术，可以培育单倍体植株和进行细胞产物的工厂化生产，下列有关说法错误的是（ ） A. 利用植物细胞培养生产紫草宁时，需要把外植体培养成完整的紫草植株 B. 细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件，提高了单个细胞中次生代谢物的含量 C. 单倍体育种中，需经过植物组织培养和诱导染色体加倍，以得到能稳定遗传的优良品种 D. 利用花药通过植物组织培养获得的单倍体植株可作为研究遗传突变的理想材料 28. 以下为现代生物技术与工程操作常涉及的流程，下列说法正确的是（　　） A. 若为植物体细胞杂交过程，可用离心技术使处理①和②后获得的原生质体融合 B. 若为试管牛生产流程，体外受精时，卵母细胞①和精子②要分别进行成熟培养和获能处理 C. 若为动物细胞核移植过程，将供体细胞①注入卵母细胞②，两细胞融合后形成重构胚 D. 若为动物细胞融合过程，可以用灭活的病毒诱导融合形成杂交细胞 29. 人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的研究及药物的筛选。利用正常大鼠获得遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如下图所示。下列分析错误的是（　　） A. 把早期胚胎植入大鼠子宫的最佳时期是原肠胚阶段 B. 质粒是独立于细菌染色体外的能自主复制环状DNA分子 C. 如果在子代大鼠体内检测到高血压相关的基因，说明高血压相关基因已成功表达 D. 通过胚胎分割技术可以提高胚胎利用率 30. 某科研团队用A和B两种限制酶同时和分别处理同一DNA片段，发现限制酶对应切点一定能切开。下图1为某DNA片段及两种酶的酶切位点，图2为酶切产物电泳分离结果。下列叙述正确的是（ ） A. 图1中X代表的碱基对数为4500，Y是限制酶B的酶切位点 B. 在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关 C. 用A和B两种限制酶同时处理图中同一DNA片段得到8个游离的磷酸基团 D. 利用PCR技术从图1的DNA中扩增出等长的X片段，至少需要2次循环 三、非选择题（共35分） 31. 自古以来，人们就利用发酵技术来生产各种产品。回答问题： （1）果酒和果醋的制作依次利用了______和______两种微生物，若从自然菌样中筛选较理想的菌种进行纯化培养，通常采用______法接种。 （2）在果酒的基础上制作果醋时，打开瓶盖，盖上一层纱布，同时______（提供的条件）。 （3）谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵工程生产谷氨酸，从而制取谷氨酸钠（味精）。如图为谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的途径，通过发酵工程可以大量生产谷氨酸。回答下列问题： 由上图可知，谷氨酸棒状杆菌体内若积累了较多的谷氨酸，则会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，所以发酵过程中随时检测培养液中________、______等以了解发酵进程，同时还要检测温度和pH，因为温度会影响酶活性，而PH会影响产物种类，在______条件下发酵罐内会积累谷氨酸。 （4）发酵工程中有很多应用，其中在农牧业上的应用有生产微生物肥料、微生物农药还有生产______。 32. 非洲猪瘟是由ASFV（一种双链DNA病毒）感染猪引起的烈性传染病。某研究小组将ASFV外壳蛋白基因导入猪体细胞中，利用核移植技术培育转基因克隆猪，从而得到自动产生ASFV抗体的个体，其过程如图所示。回答下列问题： （1）获得D猪的技术是______，取B猪体细胞进行①过程相对于胚胎细胞难度大，原因在于______，步骤③采用的技术手段是______。 （2）B猪体细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须______以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成的伤害。还需要控制气体条件是_______的混合气体，二氧化碳的主要作用是______。培养到一定程度后，需要分瓶再继续培养，分瓶后的培养过程称为_______。 （3）由于目的基因不能直接导入受体细胞，因此需要构建______，该过程采用双酶切法处理含目的基因的DNA片段和质粒，其优点是______（答出一点即可）。 33. 紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀病｡百脉根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后鼓胀｡为培育抗鼓胀病的新型牧草，科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究｡研究主要流程如下图（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的功能）｡ （1）在制备两种植物原生质体时，先将两种细胞分别置于0.5~0.6mol/L的甘露醇溶液中，使细胞在较高渗透压环境下处于较稳定状态，从而有利于用______去除细胞壁，分别获得两种植物的原生质体｡ （2）步骤②为______，从步骤②到步骤③需要更换新的培养基，经过步骤②、③到形成再生植株，体现的主要原理是______｡ （3）利用图示技术进行育种的优点是______｡ （4）谷蛋白是野生清水紫花苜蓿中含量较高的一种蛋白质，科研人员为比较植株不同部位谷蛋白的含量，想通过制备相应的单克隆抗体进行检测，部分流程如下图： 经过a步骤，细胞两两融合的产物有3种｡在步骤b的基础上经过步骤c______和抗体检测筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，获得的杂交瘤细胞可采用体外培养的方式进行扩大培养，培养—段时间后可从______中提取单克隆抗体｡单克隆抗体的优点是______。 （5）百脉根花的提取液可用于生产护肤品，为研究百脉根花提取液对受损皮肤的修复效果，需要—批遗传性状基本一致的实验小鼠，研究人员从______（填“同一”或“不同”）小鼠个体中取出体细胞核进行体细胞核移植，形成重构胚，激活后完成细胞分裂和发育进程，最后移植到经过______处理的受体雌鼠中获得实验小鼠｡ 34. 人胰岛素基因表达的最初产物是一条肽链构成的前胰岛素原，经加工后形成两条肽链（A链和B链）的有生物活性的胰岛素。此后科学家又提出了利用基因工程改造大肠杆菌生产人胰岛素的两种方法：“AB”法是根据胰岛素A、B两条肽链的氨基酸序列人工合成两种DNA片段，利用工程菌分别合成两条肽链后将其混合自然形成胰岛素;“BCA”法是利用人体某细胞中的mRNA得到胰岛素基因，表达出胰岛素原后再用特定酶切掉C肽段。这两种方法使用同一种质粒作为载体。请据下图分析并回答下列问题： （1）由于一种氨基酸可能对应多种密码子，“AB”法中人工合成的两种DNA片段均有多种可能的序列。“BCA”法是利用人体______细胞中的mRNA，再由mRNA经_______得到的胰岛素基因，“AB和BCA”法获取的目的基因中不含人胰岛素基因启动子。 （2）如图是利用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。为使目的基因与载体正确连接，在设计PCR引物时可添加限制酶_______的识别序列，PCR引物应该添加在识别序列的_______（填“3’或5’）端。 （3）PCR扩增的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，下列叙述中正确的有______。 A. PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，该酶主要在复性过程起作用 B. 琼脂糖凝胶电泳主要用来分离DNA，进行电泳时DNA片段越大，迁移速率越大 C. 进行电泳时，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动 D. 琼脂糖溶液中加入的核酸染料利于DNA在紫外灯下被检测 （4）β-半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。经_______（处理方法）大肠杆菌后，与重组质粒混合培养一段时间，将大肠杆菌接种到添加了_______和X-gal的培养基上筛选出_______色的菌落即为工程菌种。 （5）科学家利用蛋白质工程技术，研制出了易吸收、起效快的赖脯胰岛素，获得赖脯胰岛素基因的途径是：从预期的蛋白质功能出发→_______→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $