操作步骤，试验前的准备至少提前30分钟从冰箱中取出试剂盒，使试剂平衡至室温。为保证不同。样品的发育时间一致，可先取不低于50微升的待检血清，加入96孔板中，设A1、B一孔为阴性血清对照，C一第一孔为阴性血清对照。将血清按照事先排好的顺序加入96捆板中。取出用抗体包被的微量反应板，在每个反应孔中加入50微升检测溶液。将96孔板中的带简血清五十微升转入微量反应板。在A1B1孔各加50微升阳性对照，C1D1孔各加50微升阴性对照，轻弹微量反应板，将反应板中的溶液混匀。在37度条件下孵育2小时，也可在2到8度条件下孵育过夜。在抚育过程中将微量反应板加盖封闭，以防反应孔中的液体蒸发。洗涤液配制，取450毫升蒸馏水、50毫升十倍洗涤液混匀，配成工作浓度。洗涤液。去掉反应孔中的液体，每个反应孔中加入300微升洗涤液进行洗涤，洗涤五次。在最后一次洗涤完后将反应板在吸水性强的物质上拍干。在洗涤时以及加入下一步试剂之前，要防止反应板出现干燥现象。在每个反应孔中加入100微升酶标记物。在18到26度抚育30分钟。去掉反应孔中的液体，每个反应孔中加入300微升洗涤液进行洗涤，洗涤。五次。在每个反应孔中加入100微升底物溶液。在18到26度条件下，黑暗抚育十分钟，从夹完第一个孔开始计时。在每个反应孔中加入100微升终止液终止反应。在加终止液时要按照加底物溶液的顺序进行滴加。