精品解析：河南洛阳市2025——2026学年第二学期期中考试高二生物学试卷

2025—2026学年第二学期期中考试 高二生物学试卷 注意事项： 1.答卷前，考生务必将自己的姓名，准考证号填写在答题卡上。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3.考试结束后，将答题卡交回。 一、选择题：本题共25个小题，每题2分，共50分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 在适宜条件下微生物通过代谢可将原料转化为人类所需要的产物，如腐乳、泡菜、果酒和果醋等。下列叙述错误的是（　　） A. 腐乳易于消化与毛霉分泌的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解为肽和氨基酸有关 B. 制作泡菜时将盐水煮沸后冷却再使用，可以避免高温杀死植物表面的微生物 C. 制作果酒过程中定时打开瓶盖的主要目的是释放酒精发酵过程中产生的CO2 D. 果酒发酵后酿制果醋，原发酵装置适当升温并提供充足氧气有利于达到目的 2. 日常生活中食品保存有干制、腌制、低温保存和高温处理等多种方法。下列叙述错误的是（　　） A. 干制降低食品的含水量，使微生物不易生长和繁殖，食品保存时间延长 B. 腌制通过添加食盐、糖等制造高渗环境，从而抑制微生物的生长和繁殖 C. 低温保存可降低微生物的代谢速率，且温度越低对食品保存越有利 D. 高温处理可杀死食品中绝大部分微生物，可有效地延缓食物腐坏变质 3. 获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。下列关于无菌技术的叙述正确的是（　　） A. 实验操作者接种前要用95%的酒精棉球擦手消毒 B. 紫外线消毒能杀死所有病原微生物及其芽孢和孢子 C. 培养基和培养皿等通常采用干热灭菌法进行灭菌 D. 接种环、试管口等可以通过灼烧灭菌法进行灭菌 4. 微生物纯培养的划线方法如图所示，顺序为1→2→3→4→5。下列叙述正确的是（　　） A. 除第一次外，每次划线均需从上次划线的末端开始 B. 该方法不仅可以纯化菌种，还可用于微生物计数 C. 进行该划线操作一共至少需要灼烧接种环5次 D. 培养一段时间后只有在5区才能得到所需菌落 5. 野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，赖氨酸营养缺陷型突变菌株由于发生基因突变只能在添加了赖氨酸的培养基上生长。以野生型大肠杆菌菌株为材料，诱变、纯化赖氨酸营养缺陷突变株的部分流程如图所示。下列分析正确的是（　　） A. 野生型大肠杆菌能够合成所需氨基酸，因此培养基中无需提供氮源 B. ①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸 C. 需将①中菌液充分稀释后，用接种环蘸取菌液在②上进行划线接种 D. 从④中挑取乙菌落进行纯化培养即可获得所需赖氨酸营养缺陷突变株 6. 下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述中，正确的是（　　） A. 以尿素为唯一氮源的选择培养基可筛选出尿素分解菌 B. 为防止杂菌污染，菌液涂布均匀后需立即将平板倒置 C. 实验中应每隔24h统计一次菌落数，选取菌落数较多时的记录作为结果 D. 设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基可判断选择培养基是否起到了选择作用 7. 下列关于发酵工程应用的叙述中，正确的是（　　） A. 发酵工程所用菌种均是对自然界分离的菌种进行定向改造后获得的 B. 单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，可作为食品添加剂 C. 将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，可发酵生产乙型肝炎疫苗 D. 发酵结束后，采用提取、分离和纯化措施来获得微生物细胞产品 8. 我国是世界上啤酒的生产和消费大国，啤酒工业化生产的主要流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 焙烤的主要目的是加热杀死大麦种子胚但不使淀粉酶失活 B. 蒸煮的主要目的是抑制糖化过程后残留酶的活性，同时杀死麦汁中微生物 C. 加入啤酒花可以提供酵母菌菌种，有利于主发酵进行并能产生大量酒精 D. 主发酵结束后发酵液还要在低温密闭环境下储存一段时间才能形成成熟啤酒 9. 植物组织培养技术是植物细胞工程中的基本技术。下列有关叙述正确的是（　　） A. 只要给予适宜的培养条件，就可以诱导植物组织形成完整植株 B. 诱导愈伤组织期间每日需要给予适当时间和强度的光照 C. 培养前只需用适宜浓度的次氯酸钠溶液对外植体进行消毒 D. 提高生长素和细胞分裂素用量的比值有利于诱导愈伤组织生根 10. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域，辣椒素的两条获得途径如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 过程①②分别表示脱分化和再分化，均不涉及基因的选择性表达 B. 愈伤组织、脱毒苗和高产细胞系的获得都体现了植物细胞的全能性 C. 获得辣椒素的两条途径分别利用了植物组织培养和植物细胞培养技术 D. 脱毒苗的获得是利用了芽尖等分生区组织具有抗病毒的特性 11. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉能产生抗癌药紫杉醇。研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉(2n=24)与柴胡(2n=12)进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 A. 根据育种目的分析，a处理为碘乙酰胺处理，b处理为X射线处理 B. 可用聚乙二醇、高Ca2+-高pH融合法等方法诱导原生质体融合 C. 异源融合的原生质体中染色体数量少于两亲本染色体数目之和 D. 对杂种植株进行筛选鉴定，获得能产生紫杉醇的柴胡 12. 植物细胞工程在农业、医疗工业等方面有着广泛的应用。下列叙述错误的是（　　） A. 花药离体培养利用了植物组织培养技术 B. 愈伤组织更易受到诱变因素的影响而产生突变 C. 细胞产物的工厂化生产的原理主要是细胞增殖 D. 次生代谢物是植物基本的生命活动所必需的产物 13. 下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（　　） A. 动物细胞培养所需气体中，CO2的作用是刺激细胞呼吸 B. 诱导多能干细胞通常是由胚胎干细胞诱导分化而来的 C. 体外培养动物细胞时，培养液需要定期更换，以便清除代谢物 D. 剪碎的动物组织可以用胃蛋白酶处理制成细胞悬液 14. 科研人员从兔子的肝脏组织中分离获取肝细胞进行培养，在传代培养后的不同时间点检测细胞相关指标。下列叙述正确的是（　　） A. 传代培养时应将肝细胞置于无氧环境中以防止细胞被氧化 B. 贴壁生长的细胞传代培养时直接用离心法收集细胞后再制成细胞悬液 C. 细胞培养时应在含95%O2和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行 D. 细胞增长进入平台期可能与培养液中营养物质不足有关 15. 抗体一药物偶联物（ADC）是指通过化学键将药物连接到能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体上，当单克隆抗体识别肿瘤细胞时，将药物也精准带入了肿瘤细胞。ADC 通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，接头能够将抗体与药物结合。下图为ADC识别肿瘤细胞并发挥作用的示意图，下列叙述错误的是（ ） A. ADC中的药物与肿瘤细胞表面抗原结合后，细胞膜凹陷形成囊泡 B. 细胞中结构X 可能是溶酶体，ADC 被其中的水解酶水解释放药物 C. ADC同时结合了单克隆抗体的肿瘤靶向性和药物的杀伤作用 D. 单克隆抗体既可作为药物运载体，也可作为药物治疗某些疾病 16. 小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞系获得过程如图所示，下列叙述错误的是（　　） A. 使精子获能的获能液中常见的有效成分有肝素、Ca2+载体等 B. 精子入卵后被激活的卵子完成M Ⅱ并排出第二极体，形成雌原核 C. 受精卵早期分裂时，细胞数量和胚胎的总体积均在不断增加 D. 图中的早期胚胎为囊胚，其内细胞团将来会发育成小鼠的各种组织 17. 为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，下列有关叙述错误的是（　　） A. 图示繁育牛的两种方法中，方法Ⅰ更有利于该种奶牛的进化 B. 图示中对乙牛卵细胞进行去核其实是去除纺锤体—染色体复合物 C. 在繁育良种奶牛的过程中要对乙牛和丁牛进行同期发情处理 D. 需要对丁牛子宫进行免疫检查，以防对胚胎产生免疫排斥反应 18. 分离精子技术是有效的性别控制方法，例如牛含X染色体精子的DNA含量比含Y染色体精子的DNA含量高4%左右，利用这一差异人们借助特殊仪器将它们分离开来，再通过胚胎工程技术就可培育出所需性别的试管牛，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 过程①中精子入卵后，卵细胞膜会发生反应阻止其他精子再进入卵内 B. 过程①中常常以观察到两个极体或者雌、雄原核作为受精的标志 C. 在过程②的原肠胚期进行胚胎分割，经移植可获得同卵多胎 D. 为确保得到所需性别的试管牛，可在移植前取滋养层细胞做DNA分析 19. 下列有关“DNA粗提取与鉴定”及“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述中，正确的是（　　） A. 利用蛋白质不溶于酒精但DNA溶于酒精的原理，可分离DNA与蛋白质 B. 用二苯胺试剂对粗提取的DNA进行鉴定时不需要设置对照组 C. 待指示剂前沿迁移到达凝胶加样孔边缘时需停止电泳以防DNA跑出凝胶 D. 电泳鉴定可以通过观察DNA片段在凝胶中的迁移距离来判断其分子大小 20. 下列有关基因工程的应用与蛋白质工程的叙述，错误的是（　　） A. 基因工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质 B. 蛋白质工程的实质是从蛋白质分子水平上通过改造氨基酸来实现的 C. 制备乳腺生物反应器时要用显微注射的方法将目的基因导入受精卵 D. 蛋白质工程难度较大主要是因为蛋白质的高级结构往往很复杂 21. 下列关于重组DNA技术的基本工具的叙述，正确的是（　　） A. 为防止自身环化，通常用同种限制酶处理含目的基因的DNA和载体 B. 目的基因导入受体细胞后，受体细胞就会发生基因突变 C. DNA连接酶可以恢复双链DNA片段上被限制酶切开的氢键 D. 基因工程中常使用的载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等 22. 棉花是我国重要的经济作物，其生长易受杂草和棉铃虫的侵害，从而造成减产。科学家成功构建了抗除草剂和抗虫双价植物表达载体pBI121-Bar/Bt(pBI121是Ti质粒，Bar是抗除草剂基因，Bt-4AB是抗虫基因)，构建过程如下图所示，并通过农杆菌转化法获得了具有两种抗性的转基因棉花。下列叙述错误的是（　　） A. Ti质粒pBI121中的35S序列是RNA聚合酶识别和结合的部位 B. 筛选重组质粒pBI121-Bar时需向培养基中额外添加卡那霉素 C. 可用棉铃虫和除草剂处理转基因棉花来确定其是否具有抗性 D. pBI121-Bar/Bt直接导入棉花细胞后可整合到其染色体DNA上 23. 植物生物反应器主要以整株植物、植物组织或植物悬浮细胞为加工场所，生产药物蛋白。叶绿体遗传转化体系是近年发展起来的一种新的植物生物反应器。叶绿体转化是以同源重组原理将外源目的基因整合到目标叶绿体基因组中的一种方式，是一种高表达、安全性极高的遗传转化方法。下列相关叙述错误的是（　　） A. 植物生物反应器涉及的现代生物学技术是基因工程和植物细胞工程 B. 基因表达载体中可能含有叶绿体特异启动子，使目的基因只能在叶绿体中表达 C. 植物叶绿体表达体系可防止转基因作物的目的基因通过花粉在自然界中扩散 D. 将外源目的基因整合到目标叶绿体DNA上，说明转化已经成功 24. 现用EcoRⅠ和SmaⅠ两种限制酶处理某样品DNA分子，酶切后的电泳图谱如图所示，其中1号泳道是标准参照物，2、3、4号分别是EcoRⅠ单独处理、SmaⅠ单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果。下列相关叙述错误的是（　　） A. 加样孔在甲端，参照1号泳道可估计样品DNA的大小 B. 该DNA分子在凝胶中的迁移方向是从电源正极到负极 C. 该DNA分子可能是含1000个碱基对的环状双链DNA D. 该DNA分子中可能各有一个EcoRI和SmaI的酶切位点 25. 现代生物技术的进步在给人类带来福祉的同时，也会引起一系列的安全与伦理问题，下列相关叙述正确的是（　　） A. 基因编辑技术允许用于疾病预防领域研究和设计完美婴儿 B. 我国已对转基因食品和转基因农产品实施了产品标识制度 C. 人体对利用转基因技术制造的新型致病菌不会产生免疫反应 D. 生物武器种类多样，包括病菌类、毒品类和生化毒剂类等 二、非选择题：本题包括5小题，共50分。 26. 泡菜是一种传统发酵食品，古称菹，这是一个会意字，“且”为象形的泡菜坛，在泡菜坛里盛上盐水，放入草本植物，这就是泡菜。果胶具有将植物细胞粘合在一起的作用，若果胶被分解，植物组织会变得松散，从而使泡菜口感变得不脆。回答下列问题： （1）装坛时往往加入“陈泡菜水”，主要是为了增加___________的量。泡菜制作过程中，用水密封泡菜坛的目的是___________。 （2）某同学做的泡菜“咸而不酸”，造成这个结果最可能的原因是___________。 （3）用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜时，用热水短时处理，可抑制某些微生物产生___________酶，从而使成品泡菜口感较脆。 （4）泡菜制作过程中，三种食盐浓度的泡菜中亚硝酸盐含量与发酵天数的关系，如图所示。 根据图中的相关数据，提出对泡菜腌制和食用的合理建议___________。 27. 微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药“敌敌畏”的微生物，并设计了如下实验流程。 回答下列问题： （1）已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、无机盐、水等，从物理性质上来看，培养基B中加入而驯化培养基A中没有加入的物质是___________。据题分析，驯化时逐步加入的物质X是___________。 （2）将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为___________。下图中操作步骤的正确排序是___________(用图中字母和箭头表示)。 a. b. c. d. （3）将培养基B中分离得到的单菌落接种于培养基C中，培养24小时后，通过测定培养基中___________，可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。 （4）为统计培养基C中的微生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了3个平板培养基D，菌落数经统计分别为250、247、253个，最终测得培养基C中菌落数为5×107个/mL，则涂布的菌液Y为___________mL。该统计数据往往比活菌的实际数目___________(填“多”或“少”)，理由是___________。 28. 手足口病是由肠道病毒引起的传染病，其中以肠道病毒71型(EV71)最为常见。科研人员用小鼠进行实验，以该病毒核衣壳蛋白为抗原来制备能够中和EV71感染的单克隆抗体，制备流程如图所示。 回答下列问题： （1）在制备抗EV71单克隆抗体的过程中，给小鼠注射的抗原是___________，之后用动物细胞融合时特有的___________法诱导小鼠脾中分离出的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞发生融合。接着用___________进行筛选，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞才能生长。 （2）将上述杂交瘤细胞进行克隆化培养和___________，培养时常用96孔培养板进行杂交瘤细胞的培养和筛选，最终筛选出的杂交瘤细胞的主要特点是___________。 （3）杂交瘤细胞与大多数普通动物体细胞在培养瓶中生长特点的区别为后者具有贴壁生长和___________的特点，因此后者进一步培养时，需要定期用___________等消化处理。 （4）最终获得的抗EV71单克隆抗体的主要特点是___________。 29. 我国已成功创建世界首例生物节律紊乱体细胞克隆猴模型，Bmal1是生物节律核心基因。 回答下列问题： （1）为获得生物节律紊乱的克隆猴，研究者需要使用CRISPR/Cas9技术敲除多个猴胚胎中的Bmal1.图1所示系统由sgRNA和Cas9蛋白构成，sgRNA起向导作用，可与靶序列结合，引导Cas9蛋白切断Bmal1基因的___________键。 （2）研究者将敲除Bmal1基因的受精卵置于含有___________等天然成分的培养基中培养，经过胚胎移植获得了一批Bmal1缺失的猕猴。研究者采集了一只睡眠紊乱最明显的Bmal1敲除猕猴的体细胞，拟通过图2所示___________技术获得更多遗传背景一致的生物节律紊乱猕猴。 （3）为获得更多卵母细胞，需对健康的母猴注射___________进行___________操作，并收集其卵母细胞，在体外培养到___________期备用。 （4）获得的重构胚可以用___________法(填具体方法，写出2种即可)激活，使其完成___________进程，最终首次成功构建遗传背景一致的生物节律紊乱猕猴模型。 30. 磷酸吡哆醛(PLP)是维生素B6的活性形式，是多种酶的重要辅酶。科研人员从大肠杆菌(E．colik12)中找到了合成PLP的关键酶A，通过基因工程构建了高产PLP的工程菌，流程如图1所示。质粒中LacZ基因使细菌能够利用物质X−gal，从而使菌落呈现蓝色，若无该基因，菌落则呈现白色。 回答下列问题： （1）为确保大肠杆菌(E．colik12)的酶A基因正确插入图2的载体中，过程①②中需选择的限制酶组合是___________。图2中的表达载体除了图中各种结构外，还应具有___________。 （2）利用PCR扩增酶A基因需要在含Mg2+的缓冲溶液中添加模板、4种脱氧核苷酸和___________。常采用___________来鉴定PCR的产物。 （3）过程③需要在培养基中加入___________(填“青霉素”“X-gal”或“青霉素和X-gal”)筛选出呈___________(填颜色)的菌落即可能为所需工程菌。 （4）用___________方法检测酶A基因在工程菌中是否表达出目的蛋白。 （5）为探究④过程得到的是否为高产PLP工程菌，可以将等量原始(工程菌E．coliBL21)菌株与重组菌株(工程菌)分别置于相同且适宜的条件下培养，一段时间后分别检测___________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025—2026学年第二学期期中考试 高二生物学试卷 注意事项： 1.答卷前，考生务必将自己的姓名，准考证号填写在答题卡上。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3.考试结束后，将答题卡交回。 一、选择题：本题共25个小题，每题2分，共50分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 在适宜条件下微生物通过代谢可将原料转化为人类所需要的产物，如腐乳、泡菜、果酒和果醋等。下列叙述错误的是（　　） A. 腐乳易于消化与毛霉分泌的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解为肽和氨基酸有关 B. 制作泡菜时将盐水煮沸后冷却再使用，可以避免高温杀死植物表面的微生物 C. 制作果酒过程中定时打开瓶盖的主要目的是释放酒精发酵过程中产生的CO2 D. 果酒发酵后酿制果醋，原发酵装置适当升温并提供充足氧气有利于达到目的 【答案】C 【解析】 【详解】A、腐乳制作中，毛霉分泌的蛋白酶可将豆腐中的大分子蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，更易于人体消化吸收，A正确； B、制作泡菜时盐水煮沸的目的是杀灭盐水中的杂菌、去除溶解氧，为乳酸菌发酵提供无菌无氧环境；冷却的目的是避免高温杀死发酵所需的目的菌（乳酸菌），B正确； C、果酒发酵时酵母菌无氧呼吸会产生CO₂，使瓶内压强升高，定时拧松瓶盖的核心目的是释放CO₂，避免发酵瓶胀裂，而不是打开瓶盖，C错误； D、果酒发酵的酵母菌最适温度为18~25℃，为异养兼性厌氧菌；果醋发酵的醋酸菌最适温度为30~35℃，为异养需氧菌，因此果酒转果醋发酵时需要适当升温并通入充足氧气，D正确。 2. 日常生活中食品保存有干制、腌制、低温保存和高温处理等多种方法。下列叙述错误的是（　　） A. 干制降低食品的含水量，使微生物不易生长和繁殖，食品保存时间延长 B. 腌制通过添加食盐、糖等制造高渗环境，从而抑制微生物的生长和繁殖 C. 低温保存可降低微生物的代谢速率，且温度越低对食品保存越有利 D. 高温处理可杀死食品中绝大部分微生物，可有效地延缓食物腐坏变质 【答案】C 【解析】 【详解】A、干制会降低食品中自由水的含量，自由水是微生物代谢活动必需的物质，含水量下降会抑制微生物的生长和繁殖，延长食品保存时间，A正确； B、腌制时添加食盐、糖等物质会形成高渗环境，微生物细胞会因渗透作用大量失水，生命活动受抑制甚至死亡，从而抑制微生物的生长繁殖，B正确； C、低温可通过降低酶活性降低微生物的代谢速率，但并非温度越低对食品保存越有利，例如新鲜果蔬在过低温度下会发生冻害，细胞结构被破坏导致食品品质下降，C错误； D、高温可使微生物的蛋白质等生物活性物质变性失活，杀死食品中绝大多数微生物，减少微生物对食品的分解，有效延缓食物腐坏变质，D正确。 3. 获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。下列关于无菌技术的叙述正确的是（　　） A. 实验操作者接种前要用95%的酒精棉球擦手消毒 B. 紫外线消毒能杀死所有病原微生物及其芽孢和孢子 C. 培养基和培养皿等通常采用干热灭菌法进行灭菌 D. 接种环、试管口等可以通过灼烧灭菌法进行灭菌 【答案】D 【解析】 【详解】A、实验操作者接种前需用70%~75%的酒精棉球擦手消毒，A错误； B、紫外线属于消毒方法，仅能杀死物体表面的部分病原微生物，无法杀灭芽孢和孢子，只有灭菌处理才能杀灭包括芽孢、孢子在内的所有微生物，B错误； C、培养基通常采用高压蒸汽灭菌法灭菌，干热灭菌法适用于耐高温、需保持干燥的物品（如培养皿、金属用具等），培养基含水不适合用干热灭菌，C错误； D、灼烧灭菌通过酒精灯火焰的高温直接杀灭微生物，接种环、试管口、接种针等耐高温的物品可采用该方法灭菌，D正确。 4. 微生物纯培养的划线方法如图所示，顺序为1→2→3→4→5。下列叙述正确的是（　　） A. 除第一次外，每次划线均需从上次划线的末端开始 B. 该方法不仅可以纯化菌种，还可用于微生物计数 C. 进行该划线操作一共至少需要灼烧接种环5次 D. 培养一段时间后只有在5区才能得到所需菌落 【答案】A 【解析】 【详解】A、平板划线法的核心操作要求：除第一次划线外，每次划线都需从上一次划线的末端开始，这样能逐步稀释菌液，最终获得单菌落。A正确； B、平板划线法的作用是纯化菌种，但不能用于微生物计数（计数需要用稀释涂布平板法），B错误； C、划线操作中，接种环的灼烧次数： 划线前：灼烧1次（灭菌）；每次划线后：共5次划线，需要灼烧5次（杀死残留菌液、保证下一次划线的菌量来自上一次末端）总计：至少需要灼烧6次，C错误； D、划线的5个区域中，5区（最后一区）最容易得到单菌落，但不是只有5区能得到，3、4区也可能出现单菌落，只是5区的菌量最低，单菌落概率最高。D错误。 5. 野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，赖氨酸营养缺陷型突变菌株由于发生基因突变只能在添加了赖氨酸的培养基上生长。以野生型大肠杆菌菌株为材料，诱变、纯化赖氨酸营养缺陷突变株的部分流程如图所示。下列分析正确的是（　　） A. 野生型大肠杆菌能够合成所需氨基酸，因此培养基中无需提供氮源 B. ①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸 C. 需将①中菌液充分稀释后，用接种环蘸取菌液在②上进行划线接种 D. 从④中挑取乙菌落进行纯化培养即可获得所需赖氨酸营养缺陷突变株 【答案】B 【解析】 【详解】A、野生型大肠杆菌菌株虽然能合成所需的全部氨基酸，但培养基中仍需提供氮源，A错误； B、图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用影印法将菌种接种到两种培养基中，分别是基本培养基、完全培养基，图中①②④为完全培养基需添加赖氨酸，③为基本培养基不能添加赖氨酸，B正确； C、①中的菌液适当稀释后，需用涂布器将菌液均匀的涂布在②表面，C错误； D、从图中可看出，甲在基本培养基中无法生长，在完全培养基中可生长，说明甲是氨基酸缺陷型菌落，故经甲过程影印及培养后，可从④培养基中挑取甲菌落进行纯化培养，D错误。 6. 下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述中，正确的是（　　） A. 以尿素为唯一氮源的选择培养基可筛选出尿素分解菌 B. 为防止杂菌污染，菌液涂布均匀后需立即将平板倒置 C. 实验中应每隔24h统计一次菌落数，选取菌落数较多时的记录作为结果 D. 设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基可判断选择培养基是否起到了选择作用 【答案】A 【解析】 【详解】A、以尿素为唯一氮源的选择培养基中，只有能合成脲酶分解尿素的细菌可获取氮源生长繁殖，其他微生物因缺乏可利用的氮源无法存活，因此该培养基可筛选出尿素分解菌，A正确； B、菌液涂布均匀后，需要等待菌液完全被培养基吸收后再倒置平板，若立即倒置会导致菌液流动，造成菌落分布不均、混杂，B错误； C、统计菌落数时应选取菌落数目稳定时的记录作为结果，避免因培养时间不足遗漏菌落，选取菌落数较多时的记录会导致计数结果偏大，C错误； D、设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基的目的是检测培养基是否被杂菌污染，判断选择培养基是否起到选择作用，需设置接种了相同稀释度等量菌液的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，D错误。 7. 下列关于发酵工程应用的叙述中，正确的是（　　） A. 发酵工程所用菌种均是对自然界分离的菌种进行定向改造后获得的 B. 单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，可作为食品添加剂 C. 将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，可发酵生产乙型肝炎疫苗 D. 发酵结束后，采用提取、分离和纯化措施来获得微生物细胞产品 【答案】C 【解析】 【详解】A、发酵工程的菌种可来自自然界直接分离的野生菌种、诱变育种得到的突变菌种，或定向改造的基因工程菌种，并非所有菌种都需定向改造，A错误； B、单细胞蛋白指的是微生物菌体本身，而非从微生物细胞中提取的蛋白质，可直接作为食品或饲料添加剂，B错误； C、将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌构建基因工程菌，可通过发酵让酵母菌大量表达乙肝抗原，进而制备乙型肝炎疫苗，C正确； D、若发酵产品为微生物细胞本身，仅需通过过滤、沉淀等方法分离收集菌体即可；提取、分离和纯化是获取微生物代谢产物的措施，D错误。 8. 我国是世界上啤酒的生产和消费大国，啤酒工业化生产的主要流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 焙烤的主要目的是加热杀死大麦种子胚但不使淀粉酶失活 B. 蒸煮的主要目的是抑制糖化过程后残留酶的活性，同时杀死麦汁中微生物 C. 加入啤酒花可以提供酵母菌菌种，有利于主发酵进行并能产生大量酒精 D. 主发酵结束后发酵液还要在低温密闭环境下储存一段时间才能形成成熟啤酒 【答案】C 【解析】 【详解】A、焙烤的主要目的是杀死大麦种子的胚，防止其继续生长消耗养分，同时保留淀粉酶的活性，便于后续糖化过程分解淀粉，A正确； B、蒸煮的作用：一是高温使糖化后残留的酶失活，终止糖化反应；二是杀死麦汁中的微生物，避免杂菌污染，B正确； C、 啤酒花的作用是赋予啤酒独特的风味、苦味，同时具有防腐作用，不能提供酵母菌菌种，C错误； D、主发酵结束后，发酵液需要在低温、密闭环境下后发酵（储存），让啤酒风味更成熟、澄清度更高，最终形成成熟啤酒，D正确。 9. 植物组织培养技术是植物细胞工程中的基本技术。下列有关叙述正确的是（　　） A. 只要给予适宜的培养条件，就可以诱导植物组织形成完整植株 B. 诱导愈伤组织期间每日需要给予适当时间和强度的光照 C. 培养前只需用适宜浓度的次氯酸钠溶液对外植体进行消毒 D. 提高生长素和细胞分裂素用量的比值有利于诱导愈伤组织生根 【答案】D 【解析】 【详解】A、植物组织形成完整植株首先需要外植体是具有全套遗传物质的活细胞，且培养过程需要严格无菌环境，外加适宜的营养、激素等条件，并非仅给予适宜培养条件就能实现，A错误； B、诱导愈伤组织的阶段为脱分化阶段，该阶段需要避光处理，光照会抑制愈伤组织形成，不需要给予光照，B错误； C、外植体消毒需要先后用70%的酒精、次氯酸钠溶液分别处理，且每次消毒后都需用无菌水冲洗，并非只需次氯酸钠消毒，C错误； D、生长素和细胞分裂素的用量比值会影响分化方向，适当使二者比值升高有利于诱导愈伤组织生根，比值降低有利于诱导生芽，D正确。 10. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域，辣椒素的两条获得途径如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 过程①②分别表示脱分化和再分化，均不涉及基因的选择性表达 B. 愈伤组织、脱毒苗和高产细胞系的获得都体现了植物细胞的全能性 C. 获得辣椒素的两条途径分别利用了植物组织培养和植物细胞培养技术 D. 脱毒苗的获得是利用了芽尖等分生区组织具有抗病毒的特性 【答案】C 【解析】 【详解】A、过程①是脱分化，过程②是再分化，这两个过程都涉及基因的选择性表达，细胞的形态、结构和功能发生改变，A错误； B、愈伤组织的获得：只是形成了薄壁细胞团，没有发育成完整个体，不能体现细胞全能性；脱毒苗的获得：由外植体发育成完整植株，体现了细胞全能性；高产细胞系的获得：只是获得了细胞群，没有发育成完整个体，不能体现细胞全能性。 B错误； C、第一条途径：外植体→愈伤组织→脱毒苗→果实，提取辣椒素，利用了植物组织培养技术； 第二条途径：单细胞→高产细胞系→细胞培养物，提取辣椒素，利用了植物细胞培养技术。 C正确； D、脱毒苗的获得是利用了芽尖等分生区组织病毒极少（甚至无病毒）的特性，而不是“抗病毒”，D错误。   11. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉能产生抗癌药紫杉醇。研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉(2n=24)与柴胡(2n=12)进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 A. 根据育种目的分析，a处理为碘乙酰胺处理，b处理为X射线处理 B. 可用聚乙二醇、高Ca2+-高pH融合法等方法诱导原生质体融合 C. 异源融合的原生质体中染色体数量少于两亲本染色体数目之和 D. 对杂种植株进行筛选鉴定，获得能产生紫杉醇的柴胡 【答案】A 【解析】 【详解】A、根据题干，X射线处理破坏体细胞染色体，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理使细胞质中某些酶失活，抑制细胞分裂。 实验目的是培育能产生紫杉醇的柴胡，需要保留柴胡的全部遗传物质，只破坏红豆杉的遗传物质。因此红豆杉的原生质体需要用X射线处理（破坏染色体，抑制分裂），即a处理为X射线；柴胡的原生质体需要用碘乙酰胺处理（抑制分裂，保留全部遗传物质），即b处理为碘乙酰胺。 A错误; B、诱导原生质体融合的常用方法包括：物理法（电融合、离心等）、化学法（聚乙二醇(PEG)、高Ca²⁺-高pH融合法等），B正确; C、题干说明“X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等”，因此异源融合的原生质体中，红豆杉的染色体被部分破坏消除，最终染色体数量少于两亲本（红豆杉+柴胡）染色体数目之和，C正确; D、融合后得到的杂种细胞不一定都能表达紫杉醇的性状，因此需要对杂种植株进行筛选鉴定，才能获得能产生紫杉醇的柴胡，D正确。  12. 植物细胞工程在农业、医疗工业等方面有着广泛的应用。下列叙述错误的是（　　） A. 花药离体培养利用了植物组织培养技术 B. 愈伤组织更易受到诱变因素的影响而产生突变 C. 细胞产物的工厂化生产的原理主要是细胞增殖 D. 次生代谢物是植物基本的生命活动所必需的产物 【答案】D 【解析】 【详解】A、花药离体培养是将离体花药经脱分化、再分化培育为单倍体植株的技术，属于植物组织培养技术的应用，A正确； B、愈伤组织是分裂能力旺盛的薄壁细胞，分裂间期DNA复制时易受诱变因素影响发生基因突变，因此更易产生突变，B正确； C、细胞产物的工厂化生产通过培养愈伤组织等细胞使其大量增殖，进而积累目标产物，原理主要是细胞增殖，C正确； D、次生代谢物不是植物基本生命活动必需的产物，是植物生长到特定阶段产生的、具有抗逆、种间竞争等功能的物质，初生代谢物才是植物基本生命活动必需的产物，D错误。 13. 下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（　　） A. 动物细胞培养所需气体中，CO2的作用是刺激细胞呼吸 B. 诱导多能干细胞通常是由胚胎干细胞诱导分化而来的 C. 体外培养动物细胞时，培养液需要定期更换，以便清除代谢物 D. 剪碎的动物组织可以用胃蛋白酶处理制成细胞悬液 【答案】C 【解析】 【详解】A、动物细胞培养所需的CO2的作用是维持培养液的pH，并非刺激细胞呼吸，A错误； B、诱导多能干细胞通常是将已分化的体细胞（如成纤维细胞）通过重编程诱导得到的，并非由胚胎干细胞诱导分化而来，B错误； C、体外培养动物细胞时，细胞代谢会产生有害代谢产物，定期更换培养液可清除代谢物、补充营养，避免代谢物积累毒害细胞，C正确； D、动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶的最适pH为酸性，在该培养pH条件下会失活，剪碎的动物组织应选用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理制成细胞悬液，D错误。 14. 科研人员从兔子的肝脏组织中分离获取肝细胞进行培养，在传代培养后的不同时间点检测细胞相关指标。下列叙述正确的是（　　） A. 传代培养时应将肝细胞置于无氧环境中以防止细胞被氧化 B. 贴壁生长的细胞传代培养时直接用离心法收集细胞后再制成细胞悬液 C. 细胞培养时应在含95%O2和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行 D. 细胞增长进入平台期可能与培养液中营养物质不足有关 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物肝细胞属于需氧型细胞，需要有氧环境维持正常呼吸代谢，无氧环境下细胞会进行无氧呼吸产生大量乳酸，毒害细胞，A错误； B、贴壁生长的细胞传代培养时，首先需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理，使细胞从培养瓶壁上脱落，之后才能离心收集细胞制备细胞悬液，不能直接离心收集，B错误； C、动物细胞培养的气体环境为95%空气（为细胞代谢提供所需氧气）和5%CO₂（作用是维持培养液的pH），并非95%O₂，过高的氧气浓度会造成细胞氧化损伤，C错误； D、细胞增长进入平台期时细胞增殖停滞，可能的诱因包括培养液营养物质消耗殆尽、代谢废物积累、细胞密度过大出现接触抑制等，因此其可能与营养物质不足有关，D正确。 15. 抗体一药物偶联物（ADC）是指通过化学键将药物连接到能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体上，当单克隆抗体识别肿瘤细胞时，将药物也精准带入了肿瘤细胞。ADC 通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，接头能够将抗体与药物结合。下图为ADC识别肿瘤细胞并发挥作用的示意图，下列叙述错误的是（ ） A. ADC中的药物与肿瘤细胞表面抗原结合后，细胞膜凹陷形成囊泡 B. 细胞中结构X 可能是溶酶体，ADC 被其中的水解酶水解释放药物 C. ADC同时结合了单克隆抗体的肿瘤靶向性和药物的杀伤作用 D. 单克隆抗体既可作为药物运载体，也可作为药物治疗某些疾病 【答案】A 【解析】 【分析】据图分析，抗体上带有细胞毒素，抗体与靶细胞膜上的特异性受体结合通过胞吞的方式把细胞毒素一并带进靶细胞，引起靶细胞溶酶体膜的破裂，最后导致细胞凋亡。 【详解】A、ADC中的抗体与肿瘤细胞表面的抗原结合后，细胞膜凹陷形成囊泡，通过胞吐作用进入肿瘤细胞， A 错误； B、溶酶体中含有大量的水解酶，由图可知，ADC经胞吞进入癌细胞后与溶酶体融合，水解酶水解药物与接头之间的结构，最终将药物释放到细胞中，B正确； C、单克隆抗体的特异性强、能特异性识别抗原，ADC 是把抗肿瘤细胞的单克隆抗体跟药物相结合，借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到肿瘤细胞，实现精准杀伤肿瘤细胞的基础是抗体与抗原特异性结合， C正确； D、 单克隆抗体既可以作为药物的运载体，也可以根据抗体和抗原发生特异性结合的原理，作为药物用于治疗疾病，D正确。 故选A。 16. 小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞系获得过程如图所示，下列叙述错误的是（　　） A. 使精子获能的获能液中常见的有效成分有肝素、Ca2+载体等 B. 精子入卵后被激活的卵子完成M Ⅱ并排出第二极体，形成雌原核 C. 受精卵早期分裂时，细胞数量和胚胎的总体积均在不断增加 D. 图中的早期胚胎为囊胚，其内细胞团将来会发育成小鼠的各种组织 【答案】C 【解析】 【详解】A、在体外受精技术中，常用肝素、Ca²⁺载体等成分的获能液处理精子，使精子获得受精能力，A正确； B、精子入卵后，会激活处于MⅡ期停滞的卵母细胞，使其完成减数第二次分裂（MⅡ），排出第二极体，进而形成雌原核，B正确； C、受精卵早期分裂（卵裂期）的特点是：细胞数量不断增加，但胚胎的总体积并不增加，甚至略有缩小（因为细胞分裂消耗了营养物质，细胞体积变小）。因此“胚胎总体积不断增加”的描述是错误的，C错误； D、图中的早期胚胎为囊胚，囊胚的内细胞团细胞具有全能性，将来会发育成小鼠的各种组织，滋养层细胞则发育为胎膜和胎盘，D正确。 17. 为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，下列有关叙述错误的是（　　） A. 图示繁育牛的两种方法中，方法Ⅰ更有利于该种奶牛的进化 B. 图示中对乙牛卵细胞进行去核其实是去除纺锤体—染色体复合物 C. 在繁育良种奶牛的过程中要对乙牛和丁牛进行同期发情处理 D. 需要对丁牛子宫进行免疫检查，以防对胚胎产生免疫排斥反应 【答案】D 【解析】 【详解】A、方法Ⅰ是试管牛技术，属于有性生殖，会发生基因重组，产生更多变异，更有利于该种奶牛的进化；方法Ⅱ是克隆牛技术，属于无性生殖，遗传物质基本不变，不利于进化，A正确； B、对卵母细胞去核时，通常是去除减数第二次分裂中期的纺锤体-染色体复合物，这样可以彻底去除核遗传物质，保证重构胚的核遗传物质完全来自供体细胞，B正确； C、在胚胎移植前，需要对供体牛（乙牛）和受体牛（丁牛）进行同期发情处理，使二者的生理状态一致，为胚胎移入受体子宫提供相同的生理环境，提高移植成功率，C正确； D、受体子宫对移入的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，这是胚胎移植的生理学基础之一，因此不需要对丁牛子宫进行免疫检查，D错误。 18. 分离精子技术是有效的性别控制方法，例如牛含X染色体精子的DNA含量比含Y染色体精子的DNA含量高4%左右，利用这一差异人们借助特殊仪器将它们分离开来，再通过胚胎工程技术就可培育出所需性别的试管牛，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 过程①中精子入卵后，卵细胞膜会发生反应阻止其他精子再进入卵内 B. 过程①中常常以观察到两个极体或者雌、雄原核作为受精的标志 C. 在过程②的原肠胚期进行胚胎分割，经移植可获得同卵多胎 D. 为确保得到所需性别的试管牛，可在移植前取滋养层细胞做DNA分析 【答案】C 【解析】 【详解】A、过程①是体外受精，精子入卵后，卵细胞膜会发生卵细胞膜反应，这是防止多精入卵的第二道屏障，可阻止其他精子再进入卵内。A正确； B、受精的标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体（第一极体和第二极体）；受精完成的标志是雌雄原核的融合，B正确； C、胚胎分割应选择桑椹胚或囊胚阶段的胚胎，原肠胚阶段不能进行胚胎分割（原肠胚细胞已高度分化，分割后难以发育成完整个体）。C错误； D、为确保得到所需性别的试管牛，可在移植前取囊胚的滋养层细胞做DNA分析（性别鉴定），不会影响内细胞团的发育，D正确。  19. 下列有关“DNA粗提取与鉴定”及“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述中，正确的是（　　） A. 利用蛋白质不溶于酒精但DNA溶于酒精的原理，可分离DNA与蛋白质 B. 用二苯胺试剂对粗提取的DNA进行鉴定时不需要设置对照组 C. 待指示剂前沿迁移到达凝胶加样孔边缘时需停止电泳以防DNA跑出凝胶 D. 电泳鉴定可以通过观察DNA片段在凝胶中的迁移距离来判断其分子大小 【答案】D 【解析】 【详解】A、DNA不溶于酒精，蛋白质等杂质可溶于酒精，实验中利用冷却酒精析出DNA从而分离DNA与蛋白质，A错误； B、二苯胺鉴定DNA时需设置不加DNA的对照组，通过颜色对比排除其他试剂对实验结果的干扰，增强实验结论的可靠性，B错误； C、DNA带负电，电泳时从加样孔向阳极方向迁移，需待指示剂前沿迁移到凝胶远离加样孔的一端边缘时停止电泳，才能避免DNA跑出凝胶，C错误； D、相同电泳条件下，DNA分子的迁移速率与分子大小负相关，分子越大迁移距离越短，因此可通过观察迁移距离判断DNA片段的分子大小，D正确。 20. 下列有关基因工程的应用与蛋白质工程的叙述，错误的是（　　） A. 基因工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质 B. 蛋白质工程的实质是从蛋白质分子水平上通过改造氨基酸来实现的 C. 制备乳腺生物反应器时要用显微注射的方法将目的基因导入受精卵 D. 蛋白质工程难度较大主要是因为蛋白质的高级结构往往很复杂 【答案】B 【解析】 【详解】A、基因工程通过转移自然界已存在的目的基因进行表达，因此原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质，A正确； B、蛋白质工程的操作对象是基因，实质是在基因分子水平上通过改造或合成基因实现对蛋白质的改造，并非直接在蛋白质分子水平改造氨基酸，B错误； C、制备乳腺生物反应器的受体细胞为动物受精卵，将目的基因导入动物细胞最常用的方法是显微注射法，C正确； D、蛋白质的高级结构通常较为复杂，人类对多数蛋白质的空间结构了解不足，因此蛋白质工程实施难度较大，D正确。 21. 下列关于重组DNA技术的基本工具的叙述，正确的是（　　） A. 为防止自身环化，通常用同种限制酶处理含目的基因的DNA和载体 B. 目的基因导入受体细胞后，受体细胞就会发生基因突变 C. DNA连接酶可以恢复双链DNA片段上被限制酶切开的氢键 D. 基因工程中常使用的载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等 【答案】D 【解析】 【详解】A、若用同种限制酶处理含目的基因的DNA和载体，二者会产生相同的黏性末端，反而更容易出现载体自身环化、目的基因反向连接的问题，为防止该情况通常用两种不同的限制酶处理，A错误； B、目的基因导入受体细胞的过程属于基因重组，并未发生基因中碱基对的增添、缺失或替换，不属于基因突变，B错误； C、DNA连接酶恢复的是双链DNA片段上被限制酶切开的磷酸二酯键，氢键不需要酶催化，可通过碱基互补配对自行形成，C错误； D、基因工程中常使用的载体包括质粒、噬菌体和动植物病毒等，具备能自我复制、有多个限制酶切位点、有标记基因等特点，D正确； 22. 棉花是我国重要的经济作物，其生长易受杂草和棉铃虫的侵害，从而造成减产。科学家成功构建了抗除草剂和抗虫双价植物表达载体pBI121-Bar/Bt(pBI121是Ti质粒，Bar是抗除草剂基因，Bt-4AB是抗虫基因)，构建过程如下图所示，并通过农杆菌转化法获得了具有两种抗性的转基因棉花。下列叙述错误的是（　　） A. Ti质粒pBI121中的35S序列是RNA聚合酶识别和结合的部位 B. 筛选重组质粒pBI121-Bar时需向培养基中额外添加卡那霉素 C. 可用棉铃虫和除草剂处理转基因棉花来确定其是否具有抗性 D. pBI121-Bar/Bt直接导入棉花细胞后可整合到其染色体DNA上 【答案】D 【解析】 【详解】A、35S序列是启动子，启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，A正确； B、质粒pBI121上含有卡那霉素抗性基因，构建重组质粒pBI121-Bar后，卡那霉素抗性基因未被破坏，因此筛选重组质粒时，可向培养基中添加卡那霉素，只有含重组质粒的受体细胞能在该培养基上生长，B正确； C、该转基因棉花转入了抗除草剂基因（Bar）和抗虫基因（Bt），因此可用除草剂处理检测抗除草剂性状，用棉铃虫接种检测抗虫性状，来确定其是否具有抗性，C正确； D、农杆菌转化法的原理是：Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上。但不能直接将pBI121-Bar/Bt导入棉花细胞，需要先将重组质粒导入农杆菌，再用农杆菌感染棉花细胞，才能让T-DNA整合到棉花染色体DNA上。直接导入质粒无法完成整合，D错误。 23. 植物生物反应器主要以整株植物、植物组织或植物悬浮细胞为加工场所，生产药物蛋白。叶绿体遗传转化体系是近年发展起来的一种新的植物生物反应器。叶绿体转化是以同源重组原理将外源目的基因整合到目标叶绿体基因组中的一种方式，是一种高表达、安全性极高的遗传转化方法。下列相关叙述错误的是（　　） A. 植物生物反应器涉及的现代生物学技术是基因工程和植物细胞工程 B. 基因表达载体中可能含有叶绿体特异启动子，使目的基因只能在叶绿体中表达 C. 植物叶绿体表达体系可防止转基因作物的目的基因通过花粉在自然界中扩散 D. 将外源目的基因整合到目标叶绿体DNA上，说明转化已经成功 【答案】D 【解析】 【详解】A、植物生物反应器需要通过基因工程将外源目的基因导入受体细胞，再通过植物细胞工程中的植物组织培养技术获得整株植物、植物组织或悬浮细胞作为加工场所，涉及基因工程和植物细胞工程技术，A正确； B、启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，具有特异性，叶绿体特异启动子可驱动目的基因仅在叶绿体中表达，B正确； C、叶绿体基因属于细胞质基因，花粉作为雄配子几乎不含细胞质，因此将目的基因整合到叶绿体基因组中，可防止转基因作物的目的基因通过花粉在自然界中扩散，C正确； D、转化成功的标志是目的基因成功表达出所需的产物（本题为药物蛋白），仅将外源目的基因整合到叶绿体DNA上，无法保证目的基因正常表达，不能说明转化成功，D错误。 24. 现用EcoRⅠ和SmaⅠ两种限制酶处理某样品DNA分子，酶切后的电泳图谱如图所示，其中1号泳道是标准参照物，2、3、4号分别是EcoRⅠ单独处理、SmaⅠ单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果。下列相关叙述错误的是（　　） A. 加样孔在甲端，参照1号泳道可估计样品DNA的大小 B. 该DNA分子在凝胶中的迁移方向是从电源正极到负极 C. 该DNA分子可能是含1000个碱基对的环状双链DNA D. 该DNA分子中可能各有一个EcoRI和SmaI的酶切位点 【答案】B 【解析】 【详解】A、琼脂糖凝胶电泳中，DNA带负电，向正极移动，分子量越大迁移越慢（离加样孔越近）。图中1号泳道Marker的最大条带(2000bp)靠近甲端，说明甲端为加样孔，1号泳道是标准参照物，不同大小的DNA片段迁移距离不同，因此可以参照1号泳道估算样品DNA的大小。A正确； B、DNA分子带负电，在凝胶中的迁移方向是从电源负极（甲端）到正极（乙端），而非正极到负极。B错误； C、2号（EcoRⅠ单独处理）：出现1条1000bp的条带；3号（SmaⅠ单独处理）：出现1条1000bp的条带；4号（两种酶共同处理）：出现2条条带（约800bp和200bp，总和1000bp）。 若该DNA是环状双链DNA，且各有1个EcoRⅠ和SmaⅠ酶切位点； 单酶切环状DNA会得到1条线性DNA（1000bp），符合2、3号结果；双酶切会将环状DNA切成2个片段（800+200=1000bp），符合4号结果。 因此该DNA分子可能是含1000个碱基对的环状双链DNA。C正确； D、结合选项C的分析：环状DNA若各有1个EcoRⅠ和SmaⅠ酶切位点，单酶切得到1000bp条带，双酶切得到800bp+200bp条带，与电泳结果完全吻合。D正确。 25. 现代生物技术的进步在给人类带来福祉的同时，也会引起一系列的安全与伦理问题，下列相关叙述正确的是（　　） A. 基因编辑技术允许用于疾病预防领域研究和设计完美婴儿 B. 我国已对转基因食品和转基因农产品实施了产品标识制度 C. 人体对利用转基因技术制造的新型致病菌不会产生免疫反应 D. 生物武器种类多样，包括病菌类、毒品类和生化毒剂类等 【答案】B 【解析】 【详解】A、基因编辑技术可用于疾病预防领域研究，但设计“完美婴儿”属于生殖性基因编辑，严重违反伦理道德，是我国明令禁止的行为，A错误； B、我国为保障消费者的知情权和自主选择权，已对转基因食品和转基因农产品实施产品标识制度，B正确； C、利用转基因技术制造的新型致病菌属于抗原，进入正常人体后会刺激免疫系统产生特异性免疫反应，C错误； D、生物武器包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等，毒品不属于生物武器的范畴，D错误。 二、非选择题：本题包括5小题，共50分。 26. 泡菜是一种传统发酵食品，古称菹，这是一个会意字，“且”为象形的泡菜坛，在泡菜坛里盛上盐水，放入草本植物，这就是泡菜。果胶具有将植物细胞粘合在一起的作用，若果胶被分解，植物组织会变得松散，从而使泡菜口感变得不脆。回答下列问题： （1）装坛时往往加入“陈泡菜水”，主要是为了增加___________的量。泡菜制作过程中，用水密封泡菜坛的目的是___________。 （2）某同学做的泡菜“咸而不酸”，造成这个结果最可能的原因是___________。 （3）用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜时，用热水短时处理，可抑制某些微生物产生___________酶，从而使成品泡菜口感较脆。 （4）泡菜制作过程中，三种食盐浓度的泡菜中亚硝酸盐含量与发酵天数的关系，如图所示。 根据图中的相关数据，提出对泡菜腌制和食用的合理建议___________。 【答案】（1） ①. 乳酸菌 ②. 制造无氧环境 （2）食盐浓度过高或者发酵温度过低导致泡菜未能正常发酵(合理即可) （3）果胶 （4）使用适宜浓度(7%左右)的食盐腌制泡菜；泡菜腌制到一定时间(11天左右)后才能食用(合理即可) 【解析】 【小问1详解】 “陈泡菜水“中含有较多的乳酸菌，泡菜制作时加入“陈泡菜水“主要是为了增加乳酸菌的数量。泡菜制作利用的原理是乳酸菌的发酵（无氧呼吸），用水密封泡菜坛的目的是制造无氧环境，有利于乳酸菌发酵。 【小问2详解】 制作出的泡菜“咸而不酸”，可能是食盐浓度过高，抑制了乳酸菌的发酵，或者发酵温度过低导致泡菜未能正常发酵。 【小问3详解】 用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜，用热水短时处理，可抑制某些微生物产生果胶酶，从而使成品泡菜口感较脆。 【小问4详解】 从图中看出，使用7%食盐浓度腌制泡菜，亚硝酸盐含量一直较低，同时在腌制11天后，亚硝酸盐含量较低，所以食用建议是：使用适宜浓度(7%左右)的食盐腌制泡菜；泡菜腌制到一定时间(11天左右)后才能食用。 27. 微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药“敌敌畏”的微生物，并设计了如下实验流程。 回答下列问题： （1）已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、无机盐、水等，从物理性质上来看，培养基B中加入而驯化培养基A中没有加入的物质是___________。据题分析，驯化时逐步加入的物质X是___________。 （2）将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为___________。下图中操作步骤的正确排序是___________(用图中字母和箭头表示)。 a. b. c. d. （3）将培养基B中分离得到的单菌落接种于培养基C中，培养24小时后，通过测定培养基中___________，可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。 （4）为统计培养基C中的微生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了3个平板培养基D，菌落数经统计分别为250、247、253个，最终测得培养基C中菌落数为5×107个/mL，则涂布的菌液Y为___________mL。该统计数据往往比活菌的实际数目___________(填“多”或“少”)，理由是___________。 【答案】（1） ①. 琼脂##凝固剂 ②. 敌敌畏 （2） ①. 平板划线法 ②. b→a→c→d （3）敌敌畏的剩余量 （4） ①. 0.05 ②. 少 ③. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 【解析】 【小问1详解】 由图可知，从物理性质上来看，该驯化培养基A中并未加入凝固剂如琼脂等。据图分析，驯化时逐步加入的物质X是敌敌畏，这样操作的目的是筛选出高效分解敌敌畏的微生物。 【小问2详解】 图中使用了接种环，并且在固体培养基表面进行划线操作，这是典型的平板划线法的特征。平板划线法需要在酒精灯火焰旁的无菌操作，将接种环在火焰外焰灼烧至红热，冷却后蘸取少量菌液。左手持皿底，右手持接种环，在平板表面以30°~45°角进行划线，力度适中避免划破培养基。因此，操作步骤的正确排序是b→a→c→d。 【小问3详解】 单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的培养基C，单位时间内剩余的敌敌畏越少，说明筛选出的微生物分解敌敌畏的能力越强，故通过测定培养瓶中敌敌畏的剩余量，可筛选出分解敌敌畏能力较强的微生物。 【小问4详解】 微生物计数时应选择菌落数目在30-300之间的进行计数，统计菌落数分别为250、247、253，则菌落的平均数（250+247+253）/3=250个，图中稀释倍数是104，由公式250/Y×104=5×107个/mL，可知涂布菌液Y=0.05mL。用该方法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以计数的微生物数目比实际活菌数少。 28. 手足口病是由肠道病毒引起的传染病，其中以肠道病毒71型(EV71)最为常见。科研人员用小鼠进行实验，以该病毒核衣壳蛋白为抗原来制备能够中和EV71感染的单克隆抗体，制备流程如图所示。 回答下列问题： （1）在制备抗EV71单克隆抗体的过程中，给小鼠注射的抗原是___________，之后用动物细胞融合时特有的___________法诱导小鼠脾中分离出的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞发生融合。接着用___________进行筛选，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞才能生长。 （2）将上述杂交瘤细胞进行克隆化培养和___________，培养时常用96孔培养板进行杂交瘤细胞的培养和筛选，最终筛选出的杂交瘤细胞的主要特点是___________。 （3）杂交瘤细胞与大多数普通动物体细胞在培养瓶中生长特点的区别为后者具有贴壁生长和___________的特点，因此后者进一步培养时，需要定期用___________等消化处理。 （4）最终获得的抗EV71单克隆抗体的主要特点是___________。 【答案】（1） ①. EV71核衣壳蛋白 ②. 灭活病毒诱导 ③. (特定的)选择培养基 （2） ①. 抗体检测 ②. 既能迅速大量增殖，又能产生特定抗体 （3） ①. 接触抑制 ②. 胰蛋白酶(胶原蛋白酶) （4）能够识别抗原的细微差别并与特定抗原特异性结合，可大量制备 【解析】 【小问1详解】 制备抗EV71单克隆抗体，故给小鼠注射的抗原是EV71核衣壳蛋白，用动物细胞融合时特有的灭活病毒诱导法诱导小鼠脾中分离出的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞发生融合。第一次筛选在特定的选择培养基，在该培养基中只有杂交瘤细胞才能生长。 【小问2详解】 第二次筛选是对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，培养时常用96孔培养板进行杂交瘤细胞的培养和筛选，最终筛选出的杂交瘤细胞的主要特点是既能迅速大量增殖，又能产生特定抗体。 【小问3详解】 杂交瘤细胞无限增殖，与大多数普通动物体细胞在培养瓶中生长特点的区别为后者具有贴壁生长和接触抑制（即细胞相互接触后停止分裂）的特点，需要胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理，用于使贴壁生长的细胞脱落，进行传代培养。 【小问4详解】 抗EV71单克隆抗体的主要特点是能够识别抗原的细微差别并与特定抗原特异性结合，可大量制备。 29. 我国已成功创建世界首例生物节律紊乱体细胞克隆猴模型，Bmal1是生物节律核心基因。 回答下列问题： （1）为获得生物节律紊乱的克隆猴，研究者需要使用CRISPR/Cas9技术敲除多个猴胚胎中的Bmal1.图1所示系统由sgRNA和Cas9蛋白构成，sgRNA起向导作用，可与靶序列结合，引导Cas9蛋白切断Bmal1基因的___________键。 （2）研究者将敲除Bmal1基因的受精卵置于含有___________等天然成分的培养基中培养，经过胚胎移植获得了一批Bmal1缺失的猕猴。研究者采集了一只睡眠紊乱最明显的Bmal1敲除猕猴的体细胞，拟通过图2所示___________技术获得更多遗传背景一致的生物节律紊乱猕猴。 （3）为获得更多卵母细胞，需对健康的母猴注射___________进行___________操作，并收集其卵母细胞，在体外培养到___________期备用。 （4）获得的重构胚可以用___________法(填具体方法，写出2种即可)激活，使其完成___________进程，最终首次成功构建遗传背景一致的生物节律紊乱猕猴模型。 【答案】（1）磷酸二酯 （2） ①. 血清 ②. (动物)体细胞核移植 （3） ①. 促性腺激素 ②. 超数排卵 ③. MⅡ （4） ①. 电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂 ②. 细胞分裂和发育 【解析】 【小问1详解】 sgRNA通过碱基互补配对原则与靶序列（DNA链）结合，Cas9 蛋白相当于限制酶，可以切断BMAL1基因的磷酸二酯键。 【小问2详解】 培养受精卵相当于动物细胞培养，需要将其置于含有血清等天然成分的培养基中培养。可以通过动物体细胞核移植技术获得更多的遗传背景一致的生物节律紊乱猕猴。 【小问3详解】 为获得更多的卵母细胞，需要对母猴注射促性腺激素进行超数排卵，在体外培养至MⅡ期备用。 【小问4详解】 重构胚经过物理或化学方法（电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂）激活，使其完成细胞分裂和发育进程。 30. 磷酸吡哆醛(PLP)是维生素B6的活性形式，是多种酶的重要辅酶。科研人员从大肠杆菌(E．colik12)中找到了合成PLP的关键酶A，通过基因工程构建了高产PLP的工程菌，流程如图1所示。质粒中LacZ基因使细菌能够利用物质X−gal，从而使菌落呈现蓝色，若无该基因，菌落则呈现白色。 回答下列问题： （1）为确保大肠杆菌(E．colik12)的酶A基因正确插入图2的载体中，过程①②中需选择的限制酶组合是___________。图2中的表达载体除了图中各种结构外，还应具有___________。 （2）利用PCR扩增酶A基因需要在含Mg2+的缓冲溶液中添加模板、4种脱氧核苷酸和___________。常采用___________来鉴定PCR的产物。 （3）过程③需要在培养基中加入___________(填“青霉素”“X-gal”或“青霉素和X-gal”)筛选出呈___________(填颜色)的菌落即可能为所需工程菌。 （4）用___________方法检测酶A基因在工程菌中是否表达出目的蛋白。 （5）为探究④过程得到的是否为高产PLP工程菌，可以将等量原始(工程菌E．coliBL21)菌株与重组菌株(工程菌)分别置于相同且适宜的条件下培养，一段时间后分别检测___________。 【答案】（1） ①. BamHⅠ和EcoRⅠ ②. 启动子、终止子、复制原点(答出任意两个即可) （2） ①. 2种引物和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶) ②. 琼脂糖凝胶电泳 （3） ①. 青霉素和X-gal ②. 白色 （4）抗原—抗体杂交技术 （5）培养液中PLP的含量 【解析】 【小问1详解】 为保证目的基因和质粒正向连接，应该采用双酶切，分析目的基因，EcoRⅤ会破坏目的基因，所以应该采用BamHⅠ和EcoRⅠ对目的基因和质粒进行切割；图中基因表达载体包括标记基因和限制性酶切位点，所以还需要启动子、终止子、复制原点。 【小问2详解】 PCR扩增酶A基因需要加入模板、4种脱氧核苷酸、2种引物和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)。鉴定PCR产物用琼脂糖凝胶电泳。 【小问3详解】 从图中看出，重组质粒上LacZ基因被破坏，同时含有青霉素抗性基因，所以应该在培养基中加入青霉素和X-gal，由于LacZ基因被破坏，不能利用X−gal，菌落呈白色，所以选择白色菌落可能为所需工程菌。 【小问4详解】 检测酶A基因在工程菌中是否表达出目的蛋白可以用抗原—抗体杂交技术。 【小问5详解】 为探究④过程得到的是否为高产PLP工程菌，可以将等量原始(工程菌E．coliBL21)菌株与重组菌株(工程菌)分别置于相同且适宜的条件下培养，一段时间后分别检测培养液中PLP的含量。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $