精品解析：安徽合肥市第八中学2025-2026学年第二学期高二年级期中检测生物学试题

合肥八中2025-2026学年第二学期高二年级期中检测 生物学试题 注意事项： 1. 你拿到的试卷满分为100分，考试时间为75分钟。 2. 试卷包括“试题卷”和“答题卷”两部分，请务必在“答题卷”上答题，在“试题卷”上答题无效。 一、选择题；（本题共15小题，共45分，在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的） 1. 广东有丰富的水果资源用于制作果酒果醋，以下有关利用岭南佳果荔枝制作果酒果醋的叙述正确的是（　　） A. 酵母菌无氧呼吸产生的二氧化碳会导致后期发酵液pH下降 B. 制作果醋时，醋酸菌在无氧条件下可将酒精转化为醋酸 C. 制作果酒时，果酒变酸是因为密封不严导致乳酸菌大量繁殖 D. 主发酵阶段完成糖的分解，后发酵阶段完成酵母菌繁殖 【答案】A 【解析】 【详解】A、酵母菌无氧呼吸的产物包括酒精和二氧化碳，其中二氧化碳溶于发酵液会形成碳酸，会导致发酵液pH下降，A正确； B、醋酸菌是严格的好氧细菌，只有在氧气充足的条件下才能将酒精转化为醋酸，无氧条件下醋酸菌代谢受抑制甚至死亡，无法产生醋酸，B错误； C、果酒变酸主要是密封不严后氧气进入，好氧的醋酸菌大量繁殖，将酒精转化为醋酸；乳酸菌为厌氧微生物，有氧条件下繁殖受抑制，C错误； D、酵母菌的大量繁殖在发酵前期的有氧阶段完成；主发酵阶段酵母菌主要进行无氧呼吸分解糖类产生酒精，后发酵阶段主要是生成风味物质，酵母菌基本不再繁殖，D错误。 2. 味精因其溶于水后具有强烈的鲜味而备受中餐的喜爱，其主要成分是谷氨酸钠，图为味精生产的主要流程图。下列有关说法正确的是（　　） A. 糖化阶段可以加入适量焙烤过的发芽大麦以缩短糖化时间 B. 菌种扩大培养的过程应该采用固体培养基以尽快获得更多菌落 C. 发酵罐内发酵过程中严格控制发酵液保持酸性条件 D. 发酵结束后，可以采用过滤、沉淀的方法获取产物 【答案】A 【解析】 【详解】A、焙烤发芽过的大麦可以杀死种子胚，但不使淀粉酶失活，促进淀粉分解形成糖浆，以缩短糖化时间，A正确； B、菌种扩大培养的过程应该采用液体培养基，以尽快获得更多菌体，B错误； C、谷氨酸的发酵生产，在中性和弱碱性条件下会积累形成谷氨酸，在酸性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，所以发酵罐内发酵过程中严格控制发酵液保持中性和弱碱性条件，C错误； D、发酵结束后，获得的产品是代谢物，应采取适当的提取、分离和纯化的措施来获得产品，D错误。 故选A。 3. 在牙周致病菌研究中，采用1%浓度的羧甲基壳聚糖（碳源）作为培养基添加物，经过18天培养后，牙龈卟啉单胞菌的菌落周围会出现清晰的透明圈，如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 牙龈提取物要放入含有无菌水的锥形瓶中进行适当稀释 B. 图示利用平板划线法接种的过程中接种环需灼烧6次 C. 培养基上出现透明圈不能说明该培养基以羧甲基壳聚糖为唯一碳源 D. 当羧甲基壳聚糖浓度提升至5%时，一定形成菌落及透明圈 【答案】D 【解析】 【详解】A、牙龈提取物是细菌样品，稀释时应使用无菌水，以避免杂菌污染，A正确； B、用平板划线法分离菌种，划线5个区域，每次接种之前需要灼烧接种环灭菌，最后划线完成后也需要灼烧灭菌，共灼烧灭菌6次，B正确； C、培养基上出现透明圈，只能说明该菌能利用羧甲基壳聚糖作为碳源，但不能证明这是唯一碳源，C正确； D、当羧甲基壳聚糖浓度提升至5%时，高浓度的碳源可能抑制细菌生长，或超出该菌分解酶的耐受范围，因此不一定能形成菌落及透明圈，D错误。 4. 植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B. 过程②中常采用PEG诱导融合，过程③再生出细胞壁 C. 过程⑤的培养基中需要添加生长素和细胞分裂素，过程④则不需要 D. 可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株 【答案】C 【解析】 【详解】A、酶解是为了去除植物细胞的细胞壁，过程①中酶处理的时间不同，说明两种亲本的细胞壁结构有差异，A正确； B、过程②表示原生质体的融合，常采用PEG诱导融合，过程③再生出新的细胞壁，标志着杂种细胞的形成，B正确； C、过程④脱分化和⑤再分化的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素，但在两个过程中比例不同，C错误； D、植物丙是植物甲和植物乙体细胞杂交形成的个体，应具备两者的遗传物质，因此可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株，D正确。 故选C。 5. 槲皮素是一种天然存在的黄酮醇类化合物，广泛存在于多种植物的茎皮、花、叶、芽、种子、果实中，也是自然界中最强的抗氧化剂之一，科研人员为了快速检测出槲皮素，制备出了抗槲皮素的单克隆抗体，制备流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 给小鼠直接注射槲皮素可以引起小鼠体内的细胞免疫，使细胞毒性T细胞大量增殖并产生抗体 B. ②过程采用的诱导融合方法中有的不适合植物原生质体的融合 C. ③过程得到的细胞丙在体外培养时，需要提供95%空气和5%CO2的气体环境 D. ④过程需进行克隆化培养和抗体检测，可体外扩大培养细胞丁 【答案】A 【解析】 【详解】A、抗体只能由浆细胞产生，细胞毒性T细胞不能产生抗体，A错误； B、②过程采用的诱导融合的方法中 ，灭活病毒诱导法不适合植物原生质体的融合，B正确； C、动物细胞体外培养时，气体环境要求为95%空气和5%CO2的气体环境，C正确； D、④过程需进行克隆化培养和抗体检测，可体外扩大培养细胞丁，也可以体内培养细胞丁，D正确。 6. 抗体—药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. ADC中的抗体主要是发挥治疗效应，直接杀伤靶细胞 B. 制备ADC中的抗体应用了动物细胞融合和动物细胞培养等技术 C. ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞体现了细胞膜的选择透过性， D. ADC中的细胞毒素也能识别并杀伤正常细胞，因此ADC具有副作用 【答案】B 【解析】 【详解】A、ADC的治疗效应是由细胞毒素（药物）直接杀伤靶细胞实现的，抗体的作用是特异性识别肿瘤抗原、靶向定位，本身不直接杀伤细胞，A错误； B、ADC中的抗体是单克隆抗体，制备单克隆抗体用到的动物细胞工程技术有动物细胞融合和动物细胞培养，B正确； C、ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞体现了细胞膜的流动性，C错误； D、ADC中的细胞毒素本身不具备识别细胞的能力，识别肿瘤细胞的是抗体；正常细胞没有对应的肿瘤抗原，因此ADC不会结合正常细胞，只有当抗体的特异性不足时才可能误伤正常细胞，并非细胞毒素能识别正常细胞，D错误。 7. 为解决器官移植供体短缺问题，研究人员尝试培育含有人源化肾脏组织的人—猪嵌合胚胎。研究中构建了肾脏发育缺陷的猪胚胎，将过量表达 MYCN 和BCL2 基因的人诱导多能干细胞（iPSCs）注入桑葚胚或囊胚后进行移植。实验流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） 注：SIXI和SALLI基因缺失导致肾脏发育异常；MYCN基因具有促进细胞增殖等功能；BCL2基因能够抑制细胞凋亡。 A. 使用电刺激、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 B. 为获得去核卵母细胞，应该通过显微操作去除卵母细胞的细胞核 C. 与囊胚相比，桑葚胚的分化程度更高，全能性更大 D. 嵌合胚胎肾脏组织的形成完全依赖于注入的iPSCs，与猪胚胎自身细胞无关 【答案】A 【解析】 【详解】A、在体细胞核移植（重构胚）过程中，需要用电刺激、乙醇、钙离子载体、蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，模拟受精后的激活状态，A正确； B、获得核移植用的去核卵母细胞时，去除的不是卵母细胞的细胞核，而是卵母细胞的纺锤体 - 染色体复合物，B错误； C、胚胎发育阶段中： 桑葚胚：细胞尚未分化，全能性最高； 囊胚：已经分化为内细胞团和滋养层细胞，分化程度高于桑葚胚，全能性低于桑葚胚，C错误； D、嵌合胚胎的发育依赖猪胚胎提供的微环境，例如营养供应、发育信号调控等，人源化肾脏组织的形成虽然以注入的iPSCs为核心，但与猪胚胎自身细胞也存在密切关联，D错误。 8. 利用AI算法快速模拟、预测和优化的蛋白质结构与已知的蛋白质完全不同，但它们与天然蛋白质同样具有活性，并且最终设计出的蛋白质，是通常需要数百年才能进化出来的高活性蛋白质。下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是（　　） A. 进行蛋白质工程研究的原因是基因工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质 B. 蛋白质工程是基因水平上对蛋白质进行改造或制造 C. 利用AI算法优化合成的蛋白质合成不再遵循中心法则 D. “AI蛋白质设计和结构预测”解决了蛋白质工程中，序列-结构-功能关系难以准确预测的问题 【答案】C 【解析】 【详解】A、基因工程的原理是基因重组，只能将自然界已有的目的基因导入受体细胞表达，原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质，无法生产符合人类特殊需求的非天然蛋白质，因此需要进行蛋白质工程研究，A正确； B、蛋白质工程又被称为第二代基因工程，是通过改造或合成基因，实现对蛋白质的改造或制造，操作水平为基因水平，B正确； C、人工优化设计的蛋白质仍然是通过转录、翻译过程合成的，其合成过程遵循中心法则，C错误； D、蛋白质的高级结构复杂，序列-结构-功能的对应关系难以准确预测是蛋白质工程的难点之一，AI算法可快速模拟、预测蛋白质结构，解决了该问题，D正确。 9. 用重组DNA技术可以赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶，其中4种限制性核酸内切酶的切割位点如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，能识别特定核苷酸序列 B. 用限制酶EcoRⅠ和PstⅠ切割后产生的均为黏性末端 C. DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是氢键 D. 该技术中所用的质粒载体常有特殊的标记基因便于重组DNA分子的筛选 【答案】C 【解析】 【详解】A、限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，能识别特定核苷酸序列，A正确； B、限制酶EcoRⅠ和PstⅠ切割形成的是黏性末端，限制酶SmaⅠ和EcoRⅤ切割形成的是平末端，B正确； C、DNA连接酶催化磷酸二酯键的形成，使得目的基因和质粒相连，C错误； D、该技术中所用的质粒载体常有特殊的标记基因便于重组DNA分子的筛选，即可用于筛选含有重组DNA的受体细胞，D正确。 10. 基因工程中，使用单个限制酶酶切构建的表达载体易出现连接方向错误和重复插入目的基因片段等现象，可通过酶切及筛选标记鉴定出符合预期的重组载体。研究小组选用的载体P和目的基因CDS片段特征如图，将CDS片段插入载体P的SacⅡ位点后对重组载体进行扩增、筛选和检测。下列叙述错误的是（　　） 注：LacZ基因表达产物为β-半乳糖苷酶，X-gal会被β-半乳糖苷酶分解，产生蓝色产物。 A. 含重组载体的宿主细胞在含X-gal的培养基上，菌落颜色为白色 B. 重组载体被PstⅠ充分酶切后电泳可能会获得长度为9.4kbDNA片段 C. 用EcoRⅠ与PstⅠ充分酶切重组载体，可判断CDS片段的连接方向 D. 用EcoRⅠ与SacⅡ充分酶切重组载体，可得到2个长度的DNA片段 【答案】D 【解析】 【详解】A、目的基因插入LacZ基因的SacⅡ位点后，LacZ被插入而导致LacZ失活，进而无法表达出有活性的β−半乳糖苷酶，不能分解X−gal产生蓝色物质，因此含重组载体的菌落为白色，A正确； B、单个限制酶酶切可能出现重复插入目的基因的情况，若插入2个CDS，重组载体总长度为4.2+2.6×2=9.4kb；载体仅含1个PstⅠ位点，CDS无 𝑃𝑠𝑡 Ⅰ位点，因此酶切后得到1条长度为9.4kb的线性片段，存在这种可能性，B正确； C、PstⅠ位于载体上紧邻 SacⅡ，若CDS插入方向不同，EcoRⅠ距离PstⅠ的长度分别为 0.5 kb和 2.1 kb，双酶切后得到的片段长度不同，因此可以判断连接方向，C正确； D、插入1个CDS的重组载体，共含有2个SacⅡ位点（CDS两端）和1个EcoRⅠ位点（CDS内部），共3个酶切位点，环状DNA经3个切点酶切后，会得到3个不同长度的DNA片段（0.5 kb、2.1 kb、4.2 kb），插入多个CDS会得到更多长度的片段，不可能只得到2个长度的片段，D错误。 11. DMD基因结构改变会造成表达的D蛋白异常从而导致假肥大肌营养不良（DMD）。一对表型正常的夫妇，生育了一个正常的女儿和一个患DMD的儿子。为研究DMD基因结构改变的原因，研究人员通过PCR技术对该家庭成员进行了相应的基因检测，所用的引物和扩增产物的电泳结果如图。假设DMD在男性中发病率为p，下列分析错误的是（　　） A. 推测DMD基因和HS6S12基因位于X染色体上 B. DMD形成过程中可能发生了染色体的结构变异 C. 女儿是否携带DMD致病基因可用引物组合④PCR检出 D. 女儿婚后生育一个患有DMD疾病子代的概率是（p+1）/4 【答案】D 【解析】 【详解】A、表型正常的夫妇生育了患DMD的儿子，说明该病为隐性遗传，电泳结果显示，父亲条带与患儿不同，而母亲的条带中有两条与患儿相同，这符合 X 染色体遗传特点，因此 DMD 基因和 HS6S12 基因位于 X 染色体上，A正确； B、正常 DMD 基因仅能被引物组合②、③扩增出条带，而患儿的异常基因还能被引物组合①、④扩增出条带，这说明 DMD 基因区域与 HS6S12 基因区域发生了染色体结构变异，使原本不相邻的序列连接在一起，导致新的引物组合能扩增出产物，B正确； C、引物组合④仅能扩增出异常 X 染色体，女儿的两条 X 染色体，一条来自父亲（父亲正常），一条来自母亲（可能正常 / 异常），若女儿携带致病基因，则用引物④可扩增出条带，若不携带则无，因此可检测女儿是否携带致病基因，C正确； D、母亲为携带者（XAXa），父亲为 XAY，女儿基因型为1/2 XAXA或1/2 XAXa，已知 DMD 在男性中发病率为 p，即人群中 Xa的基因频率为 p，XA为 1-p，若女儿为 XAXA（概率 1/2），与任何男性婚配，子代均不患病，概率为 0，若女儿为 XAXa（概率 1/2），与正常男性（XAY，概率 1-p）婚配，子代患病概率为 1/4（仅儿子 XaY 患病），与患病男性（XaY，概率 p）婚配，子代患病概率为 1/2（女儿 XaXa、儿子 XaY），女儿婚后生育一个患有DMD疾病子代的概率是1/​2×[(1−p)×1​/4+p×1/2​]=（1+p）​/8，D错误。 故选D。 12. 下图是从被农杆菌侵染的棉花植株中分离得到的DNA片段。为确定T-DNA插入的具体位置，研究者将其连接成环，并以此环为模板进行PCR，扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列。有关说法正确的是（　　） A. 农杆菌在自然条件下主要侵染单子叶植物和裸子植物 B. 图中T-DNA两侧应该用不同限制酶切割 C. 应选择图中的引物②③组合以扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列 D. 将扩增出的未知序列与棉花基因组序列比对可确定T-DNA的插入位置 【答案】D 【解析】 【详解】A、农杆菌在自然条件下主要侵染双子叶植物和裸子植物，A错误； B、图中T-DNA两侧应该用相同限制酶切割，以便酶切后连接成环状，B错误； C、耐高温的DNA聚合酶可在引物的3'端延伸子链，利用图中的引物①④组合可扩增出两侧的未知序列，C错误； D、不同的DNA分子或DNA区段具有特异性，将扩增出的未知序列与棉花基因组序列比对可确定T-DNA的插入位置，D正确。 故选D。 13. 中国科学院覃重军团队在国际上首次构建出具有一条染色体的活酵母细胞。他们利用基因编辑工具CRISPR-Cas9切割端粒附近的基因组序列，进而利用修复DNA 切口的酶让两条染色体融合在一起。同时，还移除了两条染色体中的一条染色体上的着丝粒。下列说法错误的是（ ） A. 人造酵母菌属于真核细胞，遗传信息的表达遵循中心法则 B. 仅保留一个着丝粒有助于保证细胞分裂时染色体的稳定性 C. 染色体的切割和拼接过程发生了染色体的结构和数目变异 D. CRISPR-Cas9可以准确的识别目标序列并进行切割和修复 【答案】D 【解析】 【分析】分析题干信息：他们利用基因编辑工具CRISPR-Cas9切割端粒附近的基因组序列，进而利用修复DNA 切口的酶让两条染色体融合在一起，说明该过程发生了染色体的结构变异和数目变异。 【详解】A、人造酵母菌也含有染色体，属于真核细胞，其DNA可以进行转录翻译，遗传信息的表达遵循中心法则，A正确； B、仅保留一个着丝粒可以避免染色体在细胞分裂时发生断裂，保证细胞分裂时染色体的稳定性，B正确； C、染色体的切割和拼接过程，发生了2条染色体的拼接导致数量上减少了，这属于染色体结构变异和数目变异，C正确； D、根据题干信息，CRISPR-Cas9只能识别目标序列并进行切割，进行修复的是其他的酶，D错误； 故选D。 14. 由vbp2基因编码的VBP蛋白参与T-DNA转运。为表征vbp2c启动子的转录活性，科研人员将vbp2启动子控制的vbp2基因替换为红色荧光蛋白基因（rfp基因），并转入根癌农杆菌中。为探究根癌农杆菌其他成分是否干扰荧光检测，将野生型菌与重组菌（含红色荧光蛋白RFP）的粗提液按不同比例混合，测定荧光强度，结果如图所示。下列说法错误的是（　　） A. 用rfp基因替换vbp2基因时，需保证其插入方向与启动子正确匹配 B. 每组实验混合前应保证两种粗提液的来源不变 C. 实验结果说明粗提液中的其他成分对RFP荧光强度测定有显著干扰 D. 实验结果表明重组菌RFP荧光强度能够表征vbp2启动子的转录活性 【答案】C 【解析】 【详解】A、rfp基因替换vbp2基因时，为保证rfp基因的正确表达，需要正确插入启动子下游，A正确； B、实验需控制变量，粗提液来源应一致，B正确； C、随着重组菌粗提液比例增加，荧光强度线性增加，且过原点，说明野生型菌粗提液成分对RFP荧光强度测定无显著干扰，C错误； D、重组菌RFP可以产生红色荧光，且和vbp2启动子结合，所以荧光强度可反映vbp2启动子活性，D正确。 故选C。 15. 八氢番茄红素合成酶（Psy基因控制合成）、八氢番茄红素脱氢酶（Crtl基因控制合成）参与β-胡萝卜素的合成，β-胡萝卜素可使农作物种子呈现金黄色。将相关酶系统转入水稻胚乳中可以获得“黄金大米”，相关基因表达载体如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） 注：LB与RB分别为T-DNA左、右边缘序列；Glu为水稻胚乳谷蛋白启动子；nos为终止子。 A. 构建图示基因表达载体所需工具酶有限制酶和DNA连接酶等 B. Glu可以确保Psy基因和Crtl基因只在水稻胚乳细胞中表达 C. 图示基因表达载体是通过农杆菌转化法导入水稻细胞的 D. 检测发现水稻胚乳含有题述两种酶表明“黄金大米”培育成功 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，一个基因表达载体需要含有目的基因、启动子、终止子及标记基因等，其中标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来；在构建时，需要用相同的限制酶分别切割目的基因和载体，以获得相同末端，然后用DNA连接酶将二者连接，为保证基因表达载体能有效发挥作用，在限制酶切割时不能破坏目的基因、标记基因等必需结构。 【详解】A、构建基因表达载体时，需用限制酶切割目的基因和载体，形成相同黏性末端，再用 DNA 连接酶连接，所以需要限制酶和 DNA 连接酶等工具酶，A正确； B、Glu是水稻胚乳蛋白启动子，启动子是RNA聚合酶结合位点，能启动转录，且具有组织特异性，可确保Psy基因和CrtI基因只在水稻胚乳细胞中表达，B正确； C、图示基因表达载体含T-DNA，常用农杆菌转化法将其导入水稻细胞，利用农杆菌Ti质粒的T-DNA可转移并整合到植物细胞染色体DNA上的特点，C正确； D、“黄金大米” 培育成功的标志不仅是水稻胚乳含有两种酶，还需这些酶能正常发挥作用，使水稻种子呈现金黄色（即成功合成β-胡萝卜素 ），仅检测到酶存在不能说明培育成功，D错误。 故选D。 二、非选择题（共5题，总分55分）： 16. 利用农作物秸秆通过纤维素分解菌发酵来获取生产酒精的原料，是获取清洁再生能源的有效途径。研究者从牛的瘤胃中筛选出纤维素分解菌，其筛选过程如下图所示。刚果红能与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。 （1）培养基的配方中一般都含有水、碳源、氮源和_______，培养基通常采用________法进行灭菌。 （2）图中所示培养基是以_______为唯一碳源的培养基，这种培养基称为_______。Ⅰ号培养基中加入刚果红的目的是_______。Ⅰ号培养基所采用的接种方法是______。 （3）研究人员在Ⅱ号培养基上采用平板划线法进行接种，其主要目的是______。 【答案】（1） ①. 无机盐 ②. 高压蒸汽灭菌法 （2） ①. 纤维素 ②. 选择培养基 ③. 通过透明圈筛选出纤维素分解菌（鉴别纤维素分解菌） ④. 稀释涂布平板法 （3）将聚集的菌体逐步稀释分散，以获得纤维素分解菌的单菌落 【解析】 【小问1详解】 微生物培养基的基本成分包括：水、碳源、氮源、无机盐。培养基的常规灭菌方法是高压蒸汽灭菌法（121℃、100kPa、15-30min，可杀灭包括芽孢在内的所有微生物）。 【小问2详解】 本实验的目的是筛选纤维素分解菌，因此培养基以纤维素作为唯一碳源，只有能分解纤维素的细菌才能在此培养基上生长繁殖。这种允许特定微生物生长、同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基，称为选择培养基。刚果红染色法的原理：刚果红能与纤维素形成红色复合物，纤维素被分解后复合物消失，会出现透明圈。因此加入刚果红的目的是通过透明圈筛选出纤维素分解菌（鉴别纤维素分解菌）。从图中 “梯度稀释后涂布平板” 的流程来看，Ⅰ 号培养基采用的接种方法是稀释涂布平板法（梯度稀释后涂布，便于后续计数和单菌落分离）。 【小问3详解】 平板划线法通过连续划线，逐步稀释菌液，使聚集的微生物逐步分散成单个细胞，最终在培养基上形成由单个细胞繁殖而来的纯菌落。因此其主要目的是分离纯化（获得）纤维素分解菌的单菌落。 17. 兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过植物培养技术获得脱毒苗，操作流程如图所示。据图回答下列问题。 （1）通过该技术培育脱毒苗时，选取兰州百合的茎尖作为外植体的理由是_______。外植体接种前需要进行_____（填“消毒”或“灭菌”）处理。 （2）诱导已经分化的细胞失去特有的结构和功能，转变成为未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块的过程是______（填序号）。该过程一般_______（填“需要”或“不需要”）光照。 （3）在植物的组织培养过程中，易产生突变体，原因是_______。 【答案】（1） ①. 茎尖病毒极少，甚至无病毒  ②. 消毒 （2） ①. ② ②. 不需要 （3）培养细胞一直处于不断增殖的状态，容易受到培养条件和外界压力的影响而发生基因突变 【解析】 【小问1详解】 通过该技术培育脱毒苗时，之所以选取兰州百合的茎尖作为外植体，是由于茎尖病毒极少，甚至无病毒。外植体接种前，需要用酒精、次氯酸钠等进行消毒处理。 【小问2详解】 诱导已经分化的细胞失去特有的结构和功能，转变成为未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块的过程是②脱分化。脱分化过程不需要光照。 【小问3详解】 在植物的组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断地增殖状态，因此容易受到培养条件和外界压力的影响而产生突变，所以易产生突变体。 18. 《伤寒论》中记载的芍药甘草汤是由芍药和甘草两味药物制成，具有调和肝脾，缓急止痛的作用，芍药和甘草的主要活性成分分别为芍药苷和甘草酸。科研团队通过制备抗芍药苷的单克隆抗体，将其纯化后结合在固相载体上，让芍药甘草汤流过，去除汤中芍药苷，用于探究芍药苷与芍药甘草汤对小鼠镇痛作用的相关性。回答下列问题。 （1）制备单克隆抗体时，将芍药苷与蛋白质结合作为抗原，定期间隔对小鼠进行免疫，目的是_______。 （2）对上述经选择培养的细胞Y 进行_______和抗体检测。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。 （3）研究人员将生理状态相同的小鼠随机分为对照组、造模组进行如下处理，造模组前期已完成冰醋酸致痛处理（冰醋酸能引起深部的、大面积且较持久的疼痛刺激，此时小鼠会出现扭体反应）。请完善实验方案。 组别 前期处理 后期处理 对照组 腹腔注射生理盐水 Ⅰ 造模组 腹腔注射冰醋酸 模型组：口服生理盐水 阳性药组：口服芍药甘草汤 实验组：Ⅱ a．口服生理盐水 b．口服芍药甘草汤 c．口服去除芍药苷的芍药甘草汤 ①表中Ⅰ、Ⅱ分别进行的处理是______、_______（用上述字母表示）。 ②结果与分析：若前期处理后，造模组小鼠扭体次数显著_______对照组（填“高于”或“低于”），表明致痛处理成功。后期处理结束后测定各组小鼠扭体次数，若结果为实验组小鼠扭体次数高于阳性药组低于模型组，则表明芍药苷是芍药甘草汤中发挥镇痛作用的重要成分之一。 【答案】（1）获得大量分泌抗芍药苷抗体的B淋巴细胞(获得能产生特异性抗体的B淋巴细胞)   （2）克隆化培养 （3） ①. a ②. c ③. 高于  【解析】 【小问1详解】 将芍药苷与蛋白质结合作为抗原注入小鼠，目的是使小鼠产生大量分泌芍药苷抗体的B淋巴细胞（获得能产生特异性抗体的B淋巴细胞）。 【小问2详解】 对经选择培养的细胞Y进行克隆化培养和抗体检测，因为选择培养得到的杂交瘤细胞可能有多种，通过克隆化培养可以得到单一的杂交瘤细胞株。 【小问3详解】 ①正常对照组：前期处理为腹腔注射生理盐水（空白对照），后期处理 I为a口服生理盐水 (空白对照) ；造模组：模型组为口服生理盐水（产生模型小鼠），阳性药组为口服芍药甘草汤（药物具有显著的镇痛作用），实验组为c口服去除芍药苷的芍药甘草汤（检验去除芍药苷的芍药甘草汤是否具有镇痛作用）。 ②因为造模组注射了冰醋酸，结合题意可知，冰醋酸能引起小鼠的扭体反应，因此前期处理后，造模组小鼠扭体次数显著高于正常对照组，表明致痛处理成功。如果芍药苷是芍药甘草汤中发挥镇痛作用的重要成分之一，则阳性药组小鼠的扭体次数最低，实验组小鼠虽然口服的是去除了芍药苷的芍药甘草汤，但芍药甘草汤中除了芍药苷还有其他成分能够起到镇痛作用，则实验组小鼠扭体次数低于模型组，因此若结果为实验组小鼠扭体次数高于阳性药组低于模型组，则表明芍药苷是芍药甘草汤中发挥镇痛作用的重要成分之一。 19. 随着抗生素需求的增加，利用基因工程从微生物中获得抗生素已成为生产抗生素的一种重要途径。某实验室欲利用大肠杆菌获得抗体，图1表示该抗体基因及部分碱基序列，图2表示质粒及限制酶的切割位点，图3表示不同限制酶的识别序列，其中AmpR、KanR分别为氨苄青霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因。回答下列问题： （1）限制酶作用于DNA分子的_________键，其切割DNA后可产生_______和平末端。其中后者最好用________酶进行连接。 （2）通常在PCR反应体系中加入的缓冲液中含有Mg2+，Mg2+的作用是________。将图1中抗体基因与图2中质粒结合过程中使用的限制酶是________。将目的基因导入受体细胞后，可在培养基中加入________（填“氨苄青霉素”或“卡那霉素”）对目的细胞进行筛选。 （3）与从实验室常用小鼠中获得的抗体不同，从大肠杆菌中获得的抗体在结构上较为简单，原因最可能是_______。 【答案】（1） ①. 磷酸二酯  ②. 黏性末端  ③. T4DNA连接酶   （2） ①. 激活DNA聚合酶 ②. BlgⅡ、Not Ⅰ  ③. 卡那霉素 （3）大肠杆菌中不含内质网、高尔基体，从大肠杆菌中获得的抗体没有经过两者的加工      【解析】 【小问1详解】 限制酶作用于DNA分子的磷酸二酯键，切割DNA后可产生黏性末端和平末端，平末端只能用T4DNA连接酶进行连接。 【小问2详解】 真核细胞和细菌的DNA聚合酶都需要Mg2+激活。因此，PCR反应缓冲溶液中一般要添加Mg2+。将图1中抗体基因与图2中质粒结合的过程称为基因表达载体的构建，由图可知，抗体基因两侧具有已知黏性末端，因此使用限制酶Blg Ⅱ、Not Ⅰ切割质粒，使其具有与抗体基因相同的黏性末端。基因表达载体构建时，会破坏AmpR基因，因此只有kanR可做标记基因，则需在培养基中加入卡那霉素对目的细胞进行筛选。 【小问3详解】 大肠杆菌是原核生物，没有内质网、高尔基体等，大肠杆菌中获得的抗体没有经过两者的加工，因此从大肠杆菌中获得的抗体在结构上较为简单。 20. S蛋白能够特异性识别癌细胞表面抗原，L蛋白是一种可被低氧环境激活的菌体裂解酶，科研人员将S蛋白基因和L蛋白基因连接为S-L融合基因，利用腺病毒AAV构建基因表达载体，再利用AAV和大肠杆菌DNA片段中同源区段可发生交换的原理，将S-L融合基因导入大肠杆菌基因组中，构建出能够精准递送抗癌药物的工程菌。 图1：S-L融合基因的构建过程 图2：同源重组替换基因的过程 （1）已知S蛋白基因转录时以b链为模板，L基因转录时以a链为模板。在构建S-L融合基因时，最好使用限制酶_______分别切割S蛋白基因和L蛋白基因，再用_______酶连接。将S-L融合基因连接至AAV载体时，不用Pst Ⅰ单酶切的原因______。 （2）AAV作为载体应具备的条件有_______（答出两点）。 （3）将基因表达载体导入大肠杆菌后，获得甲、乙两种大肠杆菌，分别提取其DNA，加入引物1、2、3扩增并电泳，结果如图3所示。其中成功导入S-L融合基因的大肠杆菌为_______（填“甲”或“乙”）；条带③为用引物_______扩增的产物。 （4）已知癌细胞周围为低氧环境。把抗癌药物注入含S-L融合基因的工程菌中，该工程菌可实现抗癌药物的精准递送，分析其机理是________。 【答案】（1） ①. Xba Ⅰ、Spe Ⅰ ②. DNA连接 ③. 可保证目的基因的正向连接，避免质粒和目的基因发生自连 （2）有多个限制酶酶切位点、有标记基因、对宿主细胞无害 （3） ①. 乙 ②. 引物1和引物2 （4）工程菌中表达的S蛋白可特异性结合癌细胞抗原，将工程菌引导至癌细胞，癌细胞周围的低氧环境激活L蛋白导致工程菌破裂，抗癌药物释放      【解析】 【小问1详解】 构建S-L融合基因需保证两个基因转录方向一致，而S基因以b链为模板、L基因以a链为模板，因此需要用PstⅠ和XbaⅠ、 SpeⅠ和BglⅡ分别切割S、L基因，因为XbaⅠ和 SpeⅠ为同尾酶，因而可用DNA连接酶实现定向连接，获得S-L融合基因。将S-L融合基因连接至AAV载体时，需要用PstⅠ和BglⅡ切割质粒，而后用DNA连接酶将S-L融合基因和质粒实现连接，该过程不用Pst Ⅰ单酶切的原因是为了保证融合基因的正向连接，同时也可避免自身环化或载体自连。 【小问2详解】 基因工程载体需满足目的基因的装载、传递、稳定遗传和筛选等核心需求，必备条件为：有多个限制酶酶切位点，便于根据目的基因选择合适酶切位点，保证目的基因和质粒的连接； 具有标记基因（如抗性基因），有利于成功导入重组质粒的受体细胞的筛选。 【小问3详解】 甲种大肠杆菌提取DNA加入引物进行PCR只有一条条带，说明应该是未导入S-L融合基因（此时引物1和引物3可以发挥作用）；乙种大肠杆菌提取DNA加入引物进行PCR有两条条带，说明应导入了S-L融合基因（此时引物1和2，引物1和3均可以发挥作用扩增区间DNA片段）。PCR扩增产物的长度由引物结合的模板位置决定，引物1和引物3扩增的DNA片段长度最长；电泳中DNA片段越长，迁移速率越慢；最短的扩增产物对应条带③，条带③为引物1和引物2扩增的短片段，迁移速率更快。 【小问4详解】 已知癌细胞周围为低氧环境。把抗癌药物注入含S-L融合基因的工程菌中，该工程菌可实现抗癌药物的精准递送，其机理为：工程菌中S-L融合基因表达出S蛋白，S蛋白能特异性识别并结合癌细胞表面的抗原，使携带抗癌药物的工程菌被精准引导至癌细胞周围，避免药物作用于正常细胞； 癌细胞周围为低氧环境，可激活工程菌表达的L蛋白，L蛋白发挥裂解作用使工程菌的菌体破裂，内部装载的抗癌药物随即释放，精准作用于癌细胞，实现药物的靶向递送。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 合肥八中2025-2026学年第二学期高二年级期中检测 生物学试题 注意事项： 1. 你拿到的试卷满分为100分，考试时间为75分钟。 2. 试卷包括“试题卷”和“答题卷”两部分，请务必在“答题卷”上答题，在“试题卷”上答题无效。 一、选择题；（本题共15小题，共45分，在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的） 1. 广东有丰富的水果资源用于制作果酒果醋，以下有关利用岭南佳果荔枝制作果酒果醋的叙述正确的是（　　） A. 酵母菌无氧呼吸产生的二氧化碳会导致后期发酵液pH下降 B. 制作果醋时，醋酸菌在无氧条件下可将酒精转化为醋酸 C. 制作果酒时，果酒变酸是因为密封不严导致乳酸菌大量繁殖 D. 主发酵阶段完成糖的分解，后发酵阶段完成酵母菌繁殖 2. 味精因其溶于水后具有强烈的鲜味而备受中餐的喜爱，其主要成分是谷氨酸钠，图为味精生产的主要流程图。下列有关说法正确的是（　　） A. 糖化阶段可以加入适量焙烤过的发芽大麦以缩短糖化时间 B. 菌种扩大培养的过程应该采用固体培养基以尽快获得更多菌落 C. 发酵罐内发酵过程中严格控制发酵液保持酸性条件 D. 发酵结束后，可以采用过滤、沉淀的方法获取产物 3. 在牙周致病菌研究中，采用1%浓度的羧甲基壳聚糖（碳源）作为培养基添加物，经过18天培养后，牙龈卟啉单胞菌的菌落周围会出现清晰的透明圈，如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 牙龈提取物要放入含有无菌水的锥形瓶中进行适当稀释 B. 图示利用平板划线法接种的过程中接种环需灼烧6次 C. 培养基上出现透明圈不能说明该培养基以羧甲基壳聚糖为唯一碳源 D. 当羧甲基壳聚糖浓度提升至5%时，一定形成菌落及透明圈 4. 植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B. 过程②中常采用PEG诱导融合，过程③再生出细胞壁 C. 过程⑤的培养基中需要添加生长素和细胞分裂素，过程④则不需要 D. 可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株 5. 槲皮素是一种天然存在的黄酮醇类化合物，广泛存在于多种植物的茎皮、花、叶、芽、种子、果实中，也是自然界中最强的抗氧化剂之一，科研人员为了快速检测出槲皮素，制备出了抗槲皮素的单克隆抗体，制备流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 给小鼠直接注射槲皮素可以引起小鼠体内的细胞免疫，使细胞毒性T细胞大量增殖并产生抗体 B. ②过程采用的诱导融合方法中有的不适合植物原生质体的融合 C. ③过程得到的细胞丙在体外培养时，需要提供95%空气和5%CO2的气体环境 D. ④过程需进行克隆化培养和抗体检测，可体外扩大培养细胞丁 6. 抗体—药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. ADC中的抗体主要是发挥治疗效应，直接杀伤靶细胞 B. 制备ADC中的抗体应用了动物细胞融合和动物细胞培养等技术 C. ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞体现了细胞膜的选择透过性， D. ADC中的细胞毒素也能识别并杀伤正常细胞，因此ADC具有副作用 7. 为解决器官移植供体短缺问题，研究人员尝试培育含有人源化肾脏组织的人—猪嵌合胚胎。研究中构建了肾脏发育缺陷的猪胚胎，将过量表达 MYCN 和BCL2 基因的人诱导多能干细胞（iPSCs）注入桑葚胚或囊胚后进行移植。实验流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） 注：SIXI和SALLI基因缺失导致肾脏发育异常；MYCN基因具有促进细胞增殖等功能；BCL2基因能够抑制细胞凋亡。 A. 使用电刺激、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 B. 为获得去核卵母细胞，应该通过显微操作去除卵母细胞的细胞核 C. 与囊胚相比，桑葚胚的分化程度更高，全能性更大 D. 嵌合胚胎肾脏组织的形成完全依赖于注入的iPSCs，与猪胚胎自身细胞无关 8. 利用AI算法快速模拟、预测和优化的蛋白质结构与已知的蛋白质完全不同，但它们与天然蛋白质同样具有活性，并且最终设计出的蛋白质，是通常需要数百年才能进化出来的高活性蛋白质。下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是（　　） A. 进行蛋白质工程研究的原因是基因工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质 B. 蛋白质工程是基因水平上对蛋白质进行改造或制造 C. 利用AI算法优化合成的蛋白质合成不再遵循中心法则 D. “AI蛋白质设计和结构预测”解决了蛋白质工程中，序列-结构-功能关系难以准确预测的问题 9. 用重组DNA技术可以赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶，其中4种限制性核酸内切酶的切割位点如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，能识别特定核苷酸序列 B. 用限制酶EcoRⅠ和PstⅠ切割后产生的均为黏性末端 C. DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是氢键 D. 该技术中所用的质粒载体常有特殊的标记基因便于重组DNA分子的筛选 10. 基因工程中，使用单个限制酶酶切构建的表达载体易出现连接方向错误和重复插入目的基因片段等现象，可通过酶切及筛选标记鉴定出符合预期的重组载体。研究小组选用的载体P和目的基因CDS片段特征如图，将CDS片段插入载体P的SacⅡ位点后对重组载体进行扩增、筛选和检测。下列叙述错误的是（　　） 注：LacZ基因表达产物为β-半乳糖苷酶，X-gal会被β-半乳糖苷酶分解，产生蓝色产物。 A. 含重组载体的宿主细胞在含X-gal的培养基上，菌落颜色为白色 B. 重组载体被PstⅠ充分酶切后电泳可能会获得长度为9.4kbDNA片段 C. 用EcoRⅠ与PstⅠ充分酶切重组载体，可判断CDS片段的连接方向 D. 用EcoRⅠ与SacⅡ充分酶切重组载体，可得到2个长度的DNA片段 11. DMD基因结构改变会造成表达的D蛋白异常从而导致假肥大肌营养不良（DMD）。一对表型正常的夫妇，生育了一个正常的女儿和一个患DMD的儿子。为研究DMD基因结构改变的原因，研究人员通过PCR技术对该家庭成员进行了相应的基因检测，所用的引物和扩增产物的电泳结果如图。假设DMD在男性中发病率为p，下列分析错误的是（　　） A. 推测DMD基因和HS6S12基因位于X染色体上 B. DMD形成过程中可能发生了染色体的结构变异 C. 女儿是否携带DMD致病基因可用引物组合④PCR检出 D. 女儿婚后生育一个患有DMD疾病子代的概率是（p+1）/4 12. 下图是从被农杆菌侵染的棉花植株中分离得到的DNA片段。为确定T-DNA插入的具体位置，研究者将其连接成环，并以此环为模板进行PCR，扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列。有关说法正确的是（　　） A. 农杆菌在自然条件下主要侵染单子叶植物和裸子植物 B. 图中T-DNA两侧应该用不同限制酶切割 C. 应选择图中的引物②③组合以扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列 D. 将扩增出的未知序列与棉花基因组序列比对可确定T-DNA的插入位置 13. 中国科学院覃重军团队在国际上首次构建出具有一条染色体的活酵母细胞。他们利用基因编辑工具CRISPR-Cas9切割端粒附近的基因组序列，进而利用修复DNA 切口的酶让两条染色体融合在一起。同时，还移除了两条染色体中的一条染色体上的着丝粒。下列说法错误的是（ ） A. 人造酵母菌属于真核细胞，遗传信息的表达遵循中心法则 B. 仅保留一个着丝粒有助于保证细胞分裂时染色体的稳定性 C. 染色体的切割和拼接过程发生了染色体的结构和数目变异 D. CRISPR-Cas9可以准确的识别目标序列并进行切割和修复 14. 由vbp2基因编码的VBP蛋白参与T-DNA转运。为表征vbp2c启动子的转录活性，科研人员将vbp2启动子控制的vbp2基因替换为红色荧光蛋白基因（rfp基因），并转入根癌农杆菌中。为探究根癌农杆菌其他成分是否干扰荧光检测，将野生型菌与重组菌（含红色荧光蛋白RFP）的粗提液按不同比例混合，测定荧光强度，结果如图所示。下列说法错误的是（　　） A. 用rfp基因替换vbp2基因时，需保证其插入方向与启动子正确匹配 B. 每组实验混合前应保证两种粗提液的来源不变 C. 实验结果说明粗提液中的其他成分对RFP荧光强度测定有显著干扰 D. 实验结果表明重组菌RFP荧光强度能够表征vbp2启动子的转录活性 15. 八氢番茄红素合成酶（Psy基因控制合成）、八氢番茄红素脱氢酶（Crtl基因控制合成）参与β-胡萝卜素的合成，β-胡萝卜素可使农作物种子呈现金黄色。将相关酶系统转入水稻胚乳中可以获得“黄金大米”，相关基因表达载体如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） 注：LB与RB分别为T-DNA左、右边缘序列；Glu为水稻胚乳谷蛋白启动子；nos为终止子。 A. 构建图示基因表达载体所需工具酶有限制酶和DNA连接酶等 B. Glu可以确保Psy基因和Crtl基因只在水稻胚乳细胞中表达 C. 图示基因表达载体是通过农杆菌转化法导入水稻细胞的 D. 检测发现水稻胚乳含有题述两种酶表明“黄金大米”培育成功 二、非选择题（共5题，总分55分）： 16. 利用农作物秸秆通过纤维素分解菌发酵来获取生产酒精的原料，是获取清洁再生能源的有效途径。研究者从牛的瘤胃中筛选出纤维素分解菌，其筛选过程如下图所示。刚果红能与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。 （1）培养基的配方中一般都含有水、碳源、氮源和_______，培养基通常采用________法进行灭菌。 （2）图中所示培养基是以_______为唯一碳源的培养基，这种培养基称为_______。Ⅰ号培养基中加入刚果红的目的是_______。Ⅰ号培养基所采用的接种方法是______。 （3）研究人员在Ⅱ号培养基上采用平板划线法进行接种，其主要目的是______。 17. 兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过植物培养技术获得脱毒苗，操作流程如图所示。据图回答下列问题。 （1）通过该技术培育脱毒苗时，选取兰州百合的茎尖作为外植体的理由是_______。外植体接种前需要进行_____（填“消毒”或“灭菌”）处理。 （2）诱导已经分化的细胞失去特有的结构和功能，转变成为未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块的过程是______（填序号）。该过程一般_______（填“需要”或“不需要”）光照。 （3）在植物的组织培养过程中，易产生突变体，原因是_______。 18. 《伤寒论》中记载的芍药甘草汤是由芍药和甘草两味药物制成，具有调和肝脾，缓急止痛的作用，芍药和甘草的主要活性成分分别为芍药苷和甘草酸。科研团队通过制备抗芍药苷的单克隆抗体，将其纯化后结合在固相载体上，让芍药甘草汤流过，去除汤中芍药苷，用于探究芍药苷与芍药甘草汤对小鼠镇痛作用的相关性。回答下列问题。 （1）制备单克隆抗体时，将芍药苷与蛋白质结合作为抗原，定期间隔对小鼠进行免疫，目的是_______。 （2）对上述经选择培养的细胞Y 进行_______和抗体检测。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。 （3）研究人员将生理状态相同的小鼠随机分为对照组、造模组进行如下处理，造模组前期已完成冰醋酸致痛处理（冰醋酸能引起深部的、大面积且较持久的疼痛刺激，此时小鼠会出现扭体反应）。请完善实验方案。 组别 前期处理 后期处理 对照组 腹腔注射生理盐水 Ⅰ 造模组 腹腔注射冰醋酸 模型组：口服生理盐水 阳性药组：口服芍药甘草汤 实验组：Ⅱ a．口服生理盐水 b．口服芍药甘草汤 c．口服去除芍药苷的芍药甘草汤 ①表中Ⅰ、Ⅱ分别进行的处理是______、_______（用上述字母表示）。 ②结果与分析：若前期处理后，造模组小鼠扭体次数显著_______对照组（填“高于”或“低于”），表明致痛处理成功。后期处理结束后测定各组小鼠扭体次数，若结果为实验组小鼠扭体次数高于阳性药组低于模型组，则表明芍药苷是芍药甘草汤中发挥镇痛作用的重要成分之一。 19. 随着抗生素需求的增加，利用基因工程从微生物中获得抗生素已成为生产抗生素的一种重要途径。某实验室欲利用大肠杆菌获得抗体，图1表示该抗体基因及部分碱基序列，图2表示质粒及限制酶的切割位点，图3表示不同限制酶的识别序列，其中AmpR、KanR分别为氨苄青霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因。回答下列问题： （1）限制酶作用于DNA分子的_________键，其切割DNA后可产生_______和平末端。其中后者最好用________酶进行连接。 （2）通常在PCR反应体系中加入的缓冲液中含有Mg2+，Mg2+的作用是________。将图1中抗体基因与图2中质粒结合过程中使用的限制酶是________。将目的基因导入受体细胞后，可在培养基中加入________（填“氨苄青霉素”或“卡那霉素”）对目的细胞进行筛选。 （3）与从实验室常用小鼠中获得的抗体不同，从大肠杆菌中获得的抗体在结构上较为简单，原因最可能是_______。 20. S蛋白能够特异性识别癌细胞表面抗原，L蛋白是一种可被低氧环境激活的菌体裂解酶，科研人员将S蛋白基因和L蛋白基因连接为S-L融合基因，利用腺病毒AAV构建基因表达载体，再利用AAV和大肠杆菌DNA片段中同源区段可发生交换的原理，将S-L融合基因导入大肠杆菌基因组中，构建出能够精准递送抗癌药物的工程菌。 图1：S-L融合基因的构建过程 图2：同源重组替换基因的过程 （1）已知S蛋白基因转录时以b链为模板，L基因转录时以a链为模板。在构建S-L融合基因时，最好使用限制酶_______分别切割S蛋白基因和L蛋白基因，再用_______酶连接。将S-L融合基因连接至AAV载体时，不用Pst Ⅰ单酶切的原因______。 （2）AAV作为载体应具备的条件有_______（答出两点）。 （3）将基因表达载体导入大肠杆菌后，获得甲、乙两种大肠杆菌，分别提取其DNA，加入引物1、2、3扩增并电泳，结果如图3所示。其中成功导入S-L融合基因的大肠杆菌为_______（填“甲”或“乙”）；条带③为用引物_______扩增的产物。 （4）已知癌细胞周围为低氧环境。把抗癌药物注入含S-L融合基因的工程菌中，该工程菌可实现抗癌药物的精准递送，分析其机理是________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $