内容正文:
实训目的,掌握血凝试验的操作技术,会正确利用血凝试验检测新城疫病毒的血凝价。仪器材料,九十六孔血凝板、微量移液器及吸头、生理盐水、新橙翼病毒1%肌红细胞悬液振荡器等。操作过程,一滴加生理盐水调整微量移液器刻度为25微升。安装吸头,取生理盐水。用微量移液器加样,每孔25微升贡加12孔。2、稀释病毒液,更换吸头,取新成疫病毒液。微量一夜气息25微升。加入第一孔,用微量移液器在第一孔吹打3到5次后,取25微升加入第二孔,在第二孔吹打3到5次后,取25微升加入第三孔,依次被比稀释到十一孔。最后从11孔中吸取25微升,去掉12孔,不加病毒液为对照孔。3、再加生理盐水,更换机头。去生理盐水。用微量移液器加样,每孔25微升贡加12孔。4、叠加1%鸡红细胞悬液,更换吸头,取1%鸡红细胞悬液反转混匀后用微量移液器加样,每孔25微升贡加12孔。5、震荡,将96孔铉拧板放于振荡器上震荡60秒。6、反应在20到25度室温静置40分钟观察结果。如果室温太高,可于冰箱四度静置60分钟观察结果。7、结果分析,先观察对照孔十二孔,再对照孔出现正确结果的情况下,将血凝板倾斜,观察红细胞是否完全凝集,以完全凝集的病毒最大稀释度为该抗原的血凝降记录为n log 2,第一排病毒的血凝价为9 log 2。注意事项,一、操作要仔细,加样量要准确。2、一定调整微量移液器刻度为25微升。三红细胞用前一定要混匀。四对比稀释时不能出现气泡。五要保证反应的温度和时间。
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