内容正文:
答案
1.B 2.B 3.C 4.B 5.D 6.C 7.C 8.A 9.D 10.D 11.B 12.B 13.C 14.AC 15.ACD 16.ABC 17.ACD 18.BD
19.(除特殊标注外,每空1分,共11分)
【答案】(1)烟草根际土壤中解钾菌的数量更多,容易筛选得到目的菌
(2)4.5 mL 琼脂
(3)104 该稀释度下平板上的菌落数在30~300之间,计数结果准确1.8×107(2分)
大 当两个或多个细胞连在一起时,平板上只形成一个菌落
(4)透明圈直径与菌落直径比值大(2分)
20.(除特殊标注外,每空1分,共12分)
【答案】(1)外植体 已分化
(2)促进 脱分化
(3)全能性 保持亲本优良性状、生产周期短、便于运输和贮藏、不受季节气候限制、可大量快速繁殖(写出两点即可,每点1分,共2分)
(4)生长素和细胞分裂素 生长素用量与细胞分裂素用量的比值高(生长素>细胞分裂素,2分)
(5)提供氧气,保证胚状体进行有氧呼吸;防止水分过度蒸发,有利于种子存活;一定封闭性可减少营养物质流失、防止微生物污染(写出两点即可,每点1分,共2分)
21.(除特殊标注外,每空1分,共12分)
【答案】(1)促性腺激素 获能
(2)显微操作 细胞B 梯度离心、紫外线短时间照射、化学物质处理(写出1种即可得分,2分)
纺锤体—染色体复合物
(3)动物细胞培养、早期胚胎培养、胚胎移植技术(写出其中2个,2分)
牛1 生产牛1的过程属于有性生殖,集合了双亲的遗传物质(2分)
22.(除特殊标注外,每空1分,共12分)
【答案】(1)PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法(写出其中两个,每个1分,共2分) 未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞
(2)克隆化培养和抗体检测 既能无限增殖又能产生特异性抗体准确识别抗原细微差异,与特定抗原发生特异性识别,并可大量制备(特异性强、灵敏度高、可大量制备,2分)
(3)2 细胞密度过大、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏(2分)
(4)动物细胞培养、动物细胞融合
(5)双特异性单克隆抗体能携带长春碱与癌细胞特异性结合,不会对健康细胞造成伤害
23.(除特殊标注外,每空1分,共12分)
【答案】(1)引物2和引物3存在部分互补配对序列(2分)
(2)RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动基因转录出mRNA 可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞的染色体DNA上(2分)
(3)引物1和引物4(引物4和引物1) XmaⅠ和KpnⅠ(KpnⅠ和XmaⅠ,2分)
(4)农杆菌转化 卡那霉素 潮霉素 呈现甜菜红素红色(或变红)
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生物
本试卷共8页,满分100分,考试用时75分钟。
注意事项:
1.答卷前,考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。
2.回答选择题时,选出每小题答案后,用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动,用橡皮擦干净后,再选涂其它答案标号。回答非选择题时,将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3.考试结束后,将本试卷和答题卡一并交回。
一、单项选择题:本题共13小题,每小题2分,共26分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的。
1.关于传统发酵,下列说法正确的是( )
A.发酵就是生物产生酒精或乳酸等代谢产物的过程
B.传统发酵的菌种可来自原料或前一次发酵物中的微生物
C.微生物有氧呼吸的产物不可以作为发酵产物
D.传统发酵技术制作的食品不含杂菌,品质优良
2.东北流行的低度甜型山葡萄酒的生产过程如下图所示,下列有关说法错误的是( )
原料挑选、清洗、除梗→调糖→接种酵母→主发酵→分离压榨→后发酵→澄清过滤→灌装
A.挑选的山葡萄先清洗后除梗是为了减少杂菌污染
B.“调糖”步骤中加入的葡萄糖越多越有利于发酵
C.发酵罐中应留一部分空间,防止发酵液溢出
D.低度甜型山葡萄酒的发酵时间不宜过长,否则影响口感
3.如图为对酵母菌进行纯培养的实验结果,下列说法错误的是( )
A.配制好的培养基应先灭菌,然后在酒精灯火焰附近倒平板
B.制备的培养基在接种前后都处于倒置状态,但目的不同
C.接种环需灼烧5次,第2次灼烧的目的是防止杂菌污染
D.若得到的单菌落颜色、性状不一致,可能出现了杂菌污染
4.野生甜瓜具有极强的抗旱能力,这与其线粒体内的Nad基因密切相关,而栽培黄瓜的抗旱能力极弱。下图表示制备抗旱黄瓜的过程,下列说法错误的是( )
A.过程①用纤维素酶和果胶酶处理可解除细胞壁对细胞间杂交的阻碍
B.用α射线处理的主要目的是诱发a原生质体发生基因突变或染色体变异
C.过程②可用离心法或高Ca2+—高pH融合法进行诱导
D.融合后的抗旱黄瓜获得了野生甜瓜的细胞质基因
5.青蒿素是一种在黄花蒿叶片表面的腺毛细胞(高度分化的细胞)中合成的小分子有机物,具有抗虫、抗逆等作用。青蒿素可通过下图中三条途径生产,下列有关说法正确的是( )
A.青蒿素属于次生代谢物,是黄花蒿基本生命活动所必需的物质
B.途径二需要在液体培养基中培养愈伤组织,从愈伤组织中提取青蒿素
C.途径三需要用Ca2+处理酵母菌,使其能吸收周围环境中的DNA
D.途径三与途径一相比,优点是生产周期短且不受地域和季节限制
6.某课题组取猪输卵管组织后对其上皮细胞进行培养,如图为上皮细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线,下列相关叙述错误的是( )
A.通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理输卵管组织使细胞分散
B.AB段细胞增殖减缓的原因可能是贴壁生长时发生接触抑制
C.OA段和BC段细胞在快速增殖,期间不需要定期更换培养液
D.B点之后为传代培养,D点后细胞中遗传物质可能会发生改变
7.抗体—药物偶联物(ADC)对肿瘤细胞的选择性杀伤机理如下图所示,下列有关说法错误的是( )
A.图中a是单克隆抗体,a能识别并结合肿瘤抗原
B.b是对癌细胞有杀伤作用的药物,本身无特异性
C.溶酶体将ADC裂解向细胞质基质释放出抗体和药物
D.药物的作用可能是激活凋亡基因,促进癌细胞凋亡
8.下列关于哺乳动物早期胚胎发育及其应用的叙述,正确的是( )
A.卵裂发生在透明带内,产生的细胞体积逐渐变小
B.桑葚胚的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织
C.孵化是透明带破裂、桑葚胚从透明带中伸展出来的过程
D.桑葚胚均等分割并移植获得多个后代的过程属于有性生殖
9.基因工程中通常会用到限制酶、DNA连接酶等。下列有关说法错误的是( )
A.限制酶最可能是从原核生物中分离纯化出来的
B.限制酶能识别DNA序列,而DNA连接酶不能
C.限制酶和DNA连接酶均作用于磷酸二酯键
D.天然质粒不能直接用作载体,必须添加抗性基因
10.关于“DNA粗提取与鉴定”实验,下列有关叙述错误的是( )
A.用洋葱做实验材料时,经过充分研磨后才进行过滤或离心
B.用鸡血和洋葱作为实验材料,提取DNA的方法可能不同
C.含DNA的上清液中加入预冷的酒精并离心后,DNA会出现在沉淀物中
D.将提取的DNA溶解后加入二苯胺试剂,沸水加热后蓝色越深说明DNA纯度越高
11.现在常利用PCR获取和扩增DNA片段上的基因,某DNA片段上部分基因如下图所示(n基因的CG含量高于M基因),下列有关说法错误的是( )
A.扩增M基因和n基因时,每次循环的步骤是完全相同的
B.由该DNA片段分别扩增n基因和M基因时,变性温度不同
C.预扩增n基因,微量离心管中加入的引物是引物2和引物3
D.第二次循环产物中才会出现两条链等长的M基因
12.科学家在乳腺生物反应器的基础上研究了膀胱生物反应器,可以从转基因动物尿液中获取干扰素等基因工程药物,下列有关说法错误的是( )
A.白细胞产生的干扰素可用于治疗病毒感染性疾病
B.用膀胱生物反应器和乳腺生物反应器生产干扰素使用的启动子相同
C.用膀胱生物反应器和乳腺生物反应器生产干扰素的受体细胞都是受精卵
D.与膀胱生物反应器相比,乳腺生物反应器受到受体性别和年龄限制
13.“筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段,下列有关说法正确的是( )
A.用含酚红的培养基筛选出能分解纤维素的菌株
B.用不含维生素的培养基中可以筛选出乳酸杆菌
C.通常需要利用选择培养基筛选出杂种细胞或杂交细胞
D.应利用抗体来筛选B细胞与骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞
二、多项选择题:本题共6小题,每小题3分,共18分。在每小题给出的四个选项中,有两个或两个以上选项符合题目要求,全部选对得3分,选对但不全的得1分,有选错的得0分。
14.嗜热脂肪杆菌芽孢耐热性极强,常作高压蒸汽灭菌的指示菌。使用时将其芽孢菌片放入待灭菌物品中,灭菌后接种至含酸碱指示剂的培养液,芽孢萌发后会降低pH,使指示剂由紫变黄,下列说法错误的是( )
A.高压蒸汽灭菌能杀死芽孢,而煮沸和灼烧不能杀死芽孢
B.培养该芽孢时,一般需要将培养基调至中性或弱碱性
C.待灭菌的物品在100℃、121 KPa条件下维持30 min可达到灭菌目的
D.未灭菌的对照组指示剂变黄而实验组呈紫色,说明达到灭菌效果
15.植物无糖组织培养技术是利用CO2代替蔗糖,在开放培养环境下,向培养基中加入广谱抑菌剂的培养技术。其流程如下图所示,下列说法正确的是( )
外植体处理→接种于无糖培养基→CO2+光照+恒温培养→生根→炼苗→移栽→成苗
A.传统植物组织培养时,培养基添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压
B.由于培养基中加入广谱抑菌剂,外植体不需要进行消毒处理
C.外植体中应含叶绿体,培养过程中需要适宜的温度和光照等条件
D.培养基用CO2作为碳源,在一定程度上减少了杂菌污染
16.某研究团队利用人类多能干细胞(hPSC,存在于内细胞团)诱导生成人类肾脏类器官(hPSC-肾脏类器官),将这些hPSC-肾脏类器官灌注到离体猪肾脏后移植回同一只猪体内,在移植24小时和48小时后,移植的猪肾脏继续正常运作,没有出现损伤或毒性的迹象。下列有关说法错误的是( )
A.利用hPSC诱导为肾脏类器官,体现了细胞的全能性
B.培养hPSC时,需提供适量CO2以维持细胞正常呼吸
C.hPSC具有组织特异性,能够分化形成肾脏类器官
D.该方法显著降低了机体对移植肾脏的免疫排斥反应
17.我国科学家运用动物细胞工程和基因编辑技术成功培育出具有“两个母亲”的孤雌小鼠和具有“两个父亲”的孤雄小鼠,实验流程如图1和图2所示;另一种培育孤雌小鼠的实验流程如图3所示,下列说法正确的是( )
A.图1中相当于植物组织培养中脱分化过程的是①
B.图1和图3中孤雌小鼠的性别为雌性,图2中孤雄小鼠的性别为是雄性
C.图1~图3中涉及的生物工程相关技术都有动物细胞培养和胚胎移植
D.图2中对乙进行胚胎分割处理,最后可得到多只孤雄小鼠
18.为鉴定转基因细菌中是否含有正确插入目的基因(700 bp)的重组质粒,某小组设计引物进行PCR扩增并进行电泳鉴定。图1中甲~丙为3种引物在正确重组质粒中的相应位置,图2为不同成员独立进行PCR扩增并进行电泳的结果,下列叙述正确的是( )
A.图2是凝胶在紫光灯下观察的结果,凝胶的加样孔在A端
B.样1是用引物甲和乙PCR后的电泳结果,表明目的基因反向插入质粒
C.用引物乙和丙PCR后电泳可得到样2,不能证明目的基因的插入方向
D.样3和样4的结果均不能证明目的基因已经正确插入质粒
三、非选择题:本题共5题,共59分。
19.(11分)解钾菌是一类可分解土壤中硅铝酸盐等矿物的微生物,广泛分布于各类土壤,使土壤矿物中的难溶性钾转化为可被植物吸收的可溶性钾。下图是研究人员从土壤中分离解钾菌并计数的过程,下表是某科研团队所用的部分培养基的配方。已知钾长石粉不溶于水、不溶于琼脂,均匀分散在固体培养基中,使平板呈不透明状态。请回答下列问题:
成分
用量
磷酸氢二钠
2.0 g
硫酸镁
0.2 g
氯化铁
0.05 g
蔗糖
5.0 g
碳酸钙
0.1 g
钾长石粉
1.0 g
蒸馏水
1 L
(1)科研人员从烟草根系周围环境土壤中筛选解钾菌的原因是__________________________________。
(2)已知每个试管中稀释倍数均为10倍,图中每个试管中应该加入_______________无菌水,甲培养基中加入_______________后可作为图中对解钾菌进行分离和计数所用的平板。
(3)应选用稀释倍数为________倍的平板上的菌落进行计数,原因是_____________________________,可计算出1 g土样中含有的解钾菌数量为__________个。实际值往往比计算结果偏__________,原因是_______________________________________________________________。
(4)若需获得大量难溶性钾转化率高的解钾菌,应选择平板上_______________的菌落进行扩大培养。
20.(12分)山东农业大学的一项研究揭示了原表皮细胞(在成体植物的叶、茎等器官发育过程中,原表皮细胞由顶端分生组织持续分裂产生,是器官表皮的初始细胞)在不同调控机制下的不同发育情况。调控机制及发育状况如下图所示,请回答下列问题:
注:LEC2为植物胚胎发育关键转录因子;SPCH为是调控气孔发育和细胞重编程的关键转录因子;TAA1和YUCs表达产生的酶协同催化内源生长素合成;ARFs为生长素响应因子。
(1)原表皮细胞在植物组织培养过程中通常被称为____________,其属于____________(填“已分化”或“未分化”)的细胞。
(2)由图可知,LEC2和SPCH结合后______能(填“促进”或“抑制”)生长素的合成,进而对拟分生组织母细胞进行重编程。该重编程相当于植物组织培养中的____________过程。
(3)体细胞胚是与合子胚(受精卵胚)形态结构相似的胚状结构,由原表皮细胞产生体细胞胚的现象说明原表皮细胞具有____________。人工种子和传统种子相比,具有的优点有______________________________
_______________________(至少答出两点)。
(4)由体细胞胚产生试管苗的培养基中需要加入的两种关键植物激素是____________,若需促进胚状体生根,这两种植物激素的用量关系是____________________________________。
(5)人工种皮应该具备一定封闭性和良好的透气性,原因是_________________________________________
________________________________________________________________________________(答出两点)。
21.(12分)荷斯坦高产奶牛原产于荷兰北部及德国北部,经长期选育成为全球广泛养殖的高产乳用牛品种。科学家利用进口的优质荷斯坦高产奶牛冻精、良种荷斯坦高产奶牛和健康黄牛(主要用于耕作、肉用等),通过胚胎工程技术研究生产荷斯坦高产奶牛的途径如下图所示,请回答下列问题:
(1)在获得牛1的过程中,首先需对供体1注射____________进行超数排卵处理,同时对解冻的精液离心后进行____________处理,再将两者在体外合适的环境下共同培养一段时间后,完成受精作用。
(2)通常采用____________法对图中的____________(填“细胞A”或“细胞B”)进行去核处理,也可以采用____________(至少答出一种方法)对其进行去核处理。去除的“核”实际上是____________。
(3)获得牛1与牛2的培育过程中均用到的工程技术有________________________(答出两个)。牛1和牛2中,遗传多样性更高的是______,理由是____________________________________。
22.(12分)双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体。下图是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术(免疫的B细胞和杂交瘤细胞杂交技术)生产能同时识别癌胚抗原和长春碱(一种抗癌药物)的双特异性单克隆抗体的部分过程。请回答下列问题:
(1)图中“融合”常用的方法有____________________________________(至少答出两个),图中①过程会淘汰甲中________________________(填细胞类型),得到乙。
(2)过程②是通过多次____________对乙进行筛选,丙的特点是____________________________________。与传统血清抗体相比,单克隆抗体最主要的优点是______________________________________________。
(3)图中方框内需要经过______次筛选,才能获取能产生双特异性单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为______________________________________________________(至少答出两点)等因素而分裂受阻,需进行传代培养。
(4)制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的生物技术有_________________________________________
________________________________________________________________________________(答出两点)。
(5)与直接使用长春碱相比,将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药,对人体的副作用更小,原因是___________________________________________________________________________________________。
23.(12分)某科研团队以优化后的甜菜红素基因(RUBY,其表达产物使细胞中积累红色的甜菜红素)作为报告基因与Bt基因形成融合基因Bt-RUBY后,构建了一种可视化筛选转基因表达载体,提高了抗虫棉遗传转化效率。图1为融合基因的构建过程,图2为某Ti质粒的结构和部分限制酶的识别序列,请回答下列问题:
限制酶
识别序列
Sac Ⅰ
5′-GAGCT↓C-3′
BamH Ⅰ
5′-G↓GATCC-3′
Kpn Ⅰ
5′-GGTAC↓C-3′
Xma Ⅰ
5′-G↓CCGGG-3′
Sal Ⅰ
5′-G↓AGCTC-3′
EcoR Ⅴ
5′-GAT↓ATC-3′
(1)从引物角度分析,利用RUBY与Bt构建融合基因Bt-RUBY的前提条件是_____________________。
(2)基因表达载体上启动子的作用是_______________________。T-DNA的作用是___________________。
(3)为了能使Bt-RUBY与Ti质粒正确连接应该分别在引物____________的5′端添加限制酶____________的识别序列。
(4)通常利用____________法将Bt-RUBY导入棉花细胞中,过程中需要多次进行筛选或鉴定:先用含____________的培养基筛选出阳性菌落,然后利用筛选出的细菌与棉花的愈伤组织混合,再利用____________(填“卡那霉素”、“潮霉素”或“卡那霉素和潮霉素”)进行辅助筛选,或选择____________的愈伤组织直接进行分化培养,后者显著提高了筛选效率。
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