河南省方城县第一高级中学2025—2026学年高二下学期期中考试生物试题

**基本信息** 2026年春期高二期中生物试题，以传统发酵技术、微生物培养、基因工程等为载体，融合科技前沿（如生菜原生质体分离）与文化传承，考查生命观念、科学思维及探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|16题/48分|传统发酵（第1题）、无菌操作（第2题）、原生质体（第7题）、基因工程（第12题）|结合生活实例（泡菜制作）与科技进展（iPS细胞），考查基础概念辨析| |非选择题|5题/52分|果酒果醋发酵（17题）、植物体细胞杂交（18题）、双抗制备（19题）、PCR技术（20题）|以实验流程（啤酒生产）和技术应用（反向PCR）为情境，突出综合分析与探究能力|

2026年春期高二期中考试 生物试题 一、单选题（每小题3分，共48分） 1．中国传统发酵技术是中华文化的重要组成部分，具有丰富的历史背景和独特的工艺特色。这些技术在食品制作中发挥着关键作用，不仅增强了食品的风味，还有助于食品的保存和营养成分的转化。下列说法正确的是（    ） A．传统发酵以单一菌种的固体发酵及半固体发酵为主，通常是家庭式或作坊式的 B．制作果酒的发酵过程中，每隔12h左右将瓶盖打开一次，排出酵母菌呼吸产生的 C．制作泡菜时，发酵液表面的白膜可能是乳酸菌大量繁殖引起的 D．果酒发酵完成后进行果醋的发酵时，应适当升高温度 2．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，请分析下列操作，正确的项数是（    ） ①平板划线操作过程中，每次灼烧接种环的目的都是杀死接种环上残留的菌种 ②加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌 ③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 ④干热灭菌可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 ⑤涂布平板时所用的涂布器需酒精浸泡后灼烧灭菌 ⑥家庭制作泡菜并无刻意的灭菌环节，发酵初期乳酸菌产生的乳酸可以抑制其他微生物的生长 ⑦确保无菌操作条件下，获得的不含代谢废物的微生物培养物即是纯培养物 A．一项 B．二项 C．三项 D．四项 3．细菌素是某些细菌在代谢过程中产生的一类具有抑菌活性的多肽或前体多肽。某同学想筛选获得能高产细菌素的细菌，流程如图所示。下列叙述错误的是（　　）    A．细菌素是细菌的初生代谢物，可抑制其他微生物生长 B．在进行分离培养时，第一次划线和最后一次划线不能连接 C．IV过程后培养基上不同细菌的菌落直径越小说明细菌素的抑菌效果越好 D．若利用发酵工程生产细菌素，则发酵结束后需通过分离、纯化等措施来获得产品 4．生产啤酒的主要工艺流程如下图所示，下列叙述正确的是（　　） A．过程①中若用赤霉素溶液处理大麦种子，种子无需发芽就能产生淀粉酶 B．过程②中焙烤的目的是使酶失活，碾磨的目的是使淀粉与淀粉酶充分接触 C．过程②煮沸时加入啤酒花可增加啤酒的苦度等风味，蒸煮后需要马上接种 D．过程③主发酵阶段要适时往外排气，后发酵阶段在低温、通气环境中进行 5．某实验小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验，操作流程如图所示，下列相关叙述正确的是（    ）    A．培养基应以尿素为唯一氮源，其上生长的都是能分解尿素的细菌 B．培养一段时间后，培养基中的营养成分会减少，pH会升高 C．使用后的培养基在丢弃前一定要进行消毒处理，以免污染环境 D．5号试管的结果表明土壤中的菌株数为 1.7x108个/mL 6．大丽花为菊科大丽花属，是多年生草本植物。大丽花为世界名花之一，除具观赏价值外，还具有药用价值。大丽花在栽培过程中易受病毒感染，造成品质退化。研究小组尝试通过植物组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．应选取大丽花植株无病毒的茎尖作为外植体，并用酒精溶液浸泡30min B．过程①为再分化，目的是使细胞失去原特有的结构和功能，该过程无需光照 C．过程②的实质是基因选择性表达，该过程只进行有丝分裂，不进行细胞分化 D．2号和3号培养基中细胞分裂素与生长素用量的比值分别为等于1和大于1 7．原生质体作为植物生理学研究的重要工具，可用于基因功能探索、信号转导研究等多个领域。生菜是一种常见的蔬菜，生长快，产量大，但因分离技术问题一直未能成为原生质体的供给原料。2024年12月，华南农业大学研究团队通过优化关键技术，成功建立了从生菜茎尖组织获得高产、高活力的原生质体的方法，大致技术流程如下图。下列叙述错误的是（　　）    A．茎尖组织的细胞幼嫩，细胞壁较薄，纤维素含量较低，利于去壁 B．用酶解法去除细胞壁时，主要用到的酶是纤维素酶和果胶酶 C．纯化原生质体可采用过滤、离心等方法处理原生质体混合液 D．纯化后的原生质体在活力鉴定前应置于无菌水中 8．1978年，科学家Melchers等利用植物体细胞杂交技术获得了第一个属间杂种植株“番茄—马铃薯”（自然界中，番茄和马铃薯均为二倍体，染色体条数也均为24条）。下列相关叙述错误的是（　　） A．该技术的原理包括细胞膜具有一定的流动性和细胞的全能性 B．可利用高Ca2+—高pH融合法诱导原生质体融合 C．“番茄—马铃薯”体细胞中含有2个染色体组 D．“番茄—马铃薯”体细胞中可含有96条染色体 9．科学家通过体外诱导成纤维细胞，获得了类似于胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞（简称iPS细胞）。因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可来源于病人自身的体细胞，因此iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。下列说法错误的是（    ） A．干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞，前者存在于早期胚胎中 B．已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞 C．来源于病人自身的体细胞的iPS细胞，能够避免免疫排斥问题 D．在进行iPS细胞培养时，必须保证环境是无菌的，所以要定期更换培养液 10．胚胎工程的迅猛发展实现了家畜繁殖模式的改变，如图所示为某科研小组培育幼猪的两种模式。下列说法正确的是（　　） A．哺乳动物的受精过程和早期胚胎的发育均在子宫中完成 B．被阻止释放的极体会成为胚胎的组成部分，发挥重要作用 C．分析图示可知，两种繁殖模式得到的幼猪所含核基因相同 D．图示流程涉及了体细胞核移植、胚胎移植、重组DNA等技术 11．关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法正确的是（　　） A．整个提取过程中可以不使用离心机 B．研磨液在4℃冰箱中放置几分钟后，应充分摇匀再倒入烧杯中 C．鉴定过程中DNA双螺旋结构不发生改变 D．仅设置一个对照组不能排除二苯胺加热后可能变蓝的干扰 12．研究人员将一种海鱼的抗冻蛋白基因afp整合到土壤农杆菌的Ti质粒上，然后用它侵染番茄细胞，获得了抗冻的番茄品种。下列相关叙述中，正确的是（    ） A．目的基因的筛选与获取是培育转基因生物的核心工作 B．构建含有afp基因的Ti质粒需要限制酶、DNA连接酶、核酸酶 C．构建的含有afp基因的Ti质粒应首先导入土壤农杆菌细胞中 D．检测出番茄细胞中含有afp基因，就代表抗冻番茄培育成功 13．基因污染是指在天然物种的DNA中嵌入了人工重组基因，这些外来基因可伴随被污染的生物的繁殖、传播而扩散。下列有关“基因污染”的叙述中，不正确的是（　　） A．“基因污染”有可能会从一种生物扩散到其他生物 B．转基因生物有可能成为“外来物种”，影响生态系统的稳定性 C．抗除草剂基因有可能通过花粉传播进入杂草，从而产生“超级杂草” D．为避免基因污染，应保证目的基因整合到受体细胞的染色体DNA上 14．某同学实验时选取了长度为14kb（kb表示千碱基对）的某DNA分子，并用限制酶A、限制酶B进行充分酶切，结果如表，下列叙述错误的是（　　） 实验用酶 限制酶A 限制酶B 限制酶A和限制酶B 得到的片段长度 14kb 6kb、8kb 3kb、5kb、6kb A．该DNA分子上不含限制酶A的酶切位点 B．酶A和酶B切割可能产生相同的黏性末端 C．DNA连接酶和限制酶都作用于磷酸二酯键 D．限制酶需要在适宜温度下才能更好地发挥作用 15．下列关于“用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质流动”实验的叙述，正确的是（　　） A．黑藻叶片需经染色后，方可观察到叶绿体 B．高倍镜下可观察到叶绿体具有双层膜结构 C．用叶绿体的运动作为细胞质流动的标志 D．随着光照强度的增强，叶绿体移动变慢 16．下图为对刚收获的种子所做的一系列处理，据图分析有关说法正确的是（　　） A．④和⑤分别是结合水、自由水，①和②均能够萌发形成幼苗 B．点燃后产生的CO2中的C可来自种子中的糖类、脂肪、蛋白质等有机物 C．图中的③为生物体的生命活动提供能量 D．刚收获的种子含④/⑤的比例小，代谢旺盛，不利于储存 二、非选择题（52分） 17．（9分）下面是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题： (1)图1方框中所用菌种的新陈代谢类型是_____。当缺少糖源时，其酿醋的原理为_____（用反应式表示）。 (2)图2装置中完成酒精发酵后，若想继续进行果醋发酵，需改变条件，可采取的操作是_____。 (3)排气口为什么要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接？_____。 (4)在用玻璃瓶发酵生产时加入的葡萄汁不应超过玻璃瓶体积的_____，原因是_____。 18．（8分）科研人员发现植物A（2n=14）具有耐干旱的特性，植物B（2n=16）具有含糖量高的特性，计划培育出耐干旱且含糖量高的植株，为此进行了如图1所示的实验。回答下列问题： (1)“处理1”的目的是________，获得原生质体；制备原生质体 前需将两亲本的外植体用________依次进行消毒；进行细胞融合时，需将原生质体置于________（填“低渗”“等渗”或“高渗”）溶液中。 (2)若细胞甲是由两种细胞两两融合而成的，则细胞甲的染色体数为______条。在甲→试管苗的过程中需要更换培养基，原因是________。 (3)实验时发现，若使用聚乙二醇（PEG）使细胞融合，则不同浓度的PEG条件下，异源细胞融合率不同，实验结果如图2所示（PEG浓度较高时对细胞有毒害作用）；根据现有实验结果，PEG的最佳浓度为________。实验所得的试管苗还需要进行个体水平的筛选，需要进行的操作是________。 19．（15分）与单抗（单克隆抗体）药物相比，双抗（双特异性抗体）药物能同时结合两种不同的抗原表位，发挥两种靶点的识别协同作用，突破了单一疗法易产生耐药性等局限。图1为制备某种双抗的过程，图2为该双抗的部分作用机制。回答下列问题：    (1)培养骨髓瘤细胞时，培养液中除了营养物质外还要添加一定量的________等天然成分。过程①使用特定的选择培养基进行筛选的目的是________。 (2)本试验的目的是获得双特异性抗体，所以过程③注射的抗原A是________，过程⑤需要进行的操作是________。与从动物血清中分离的抗体相比，如图所示的双特异性抗体的优点是_______（答出3点）。 (3)动物细胞会自发融合，但效率很低，灭活病毒在动物细胞融合中的应用较为广泛。灭活病毒诱导动物细胞融合的原理是_______。 (4)单克隆抗体还可应用于筛选特定性别的胚胎。H-Y抗原由Y染色体上的基因编码，存在于雄性个体细胞的表面。可在早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体以及含荧光标记的第二抗体（可与H-Y单克隆抗体结合），筛选处于_______期的________（填“发荧光”或“不发荧光”）的胚胎进行移植，以多获得母牛。胚胎移植的实质是_______。 20．（9分）聚合酶链式反应（PCR）是一种用于扩增特定DNA片段的分子生物学技术，它可看作生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能使微量的DNA大幅增加。回答下列问题： (1)利用PCR扩增DNA时，子链DNA的延伸方向是_______；若一个基因在PCR中经过n轮循环，则需要________种引物，理论上共需要消耗_______个引物。 (2)反向PCR是通过已知序列设计引物对未知序列进行扩增的技术，其过程如图1所示。据图1中的过程①②可知，碱基序列L左侧和R右侧的部分碱基序列应_______；其中已知序列如图2所示，请写出需要的引物序列：________（写出6个碱基即可）。 (3)利用电泳鉴定PCR产物时，在凝胶中DNA分子的迁移速率与_______（答出1点）等有关。电泳鉴定的结果如图3所示，请分析产生这个结果的可能原因：_______（答出2点）。 21．（11分）生物体的生命活动都有共同的物质基础，如图中a、b、e代表几类化合物，甲、乙、丙代表有机大分子物质，c、d为组成有机大分子物质的单体。回答下列问题：    (1)动物体内的a是由________和________两种小分子形成的，除了作为细胞内良好的储能物质外，还具有的作用是_____________________（答两点）。 (2)在人体细胞内，c有________种，乙经彻底水解会形成________种小分子物质，e是________________。 (3)组成甲和乙的基本单位在化学组成上的主要区别是________________。 (4)HIV和SARS病毒两者生命形态和结构具有较大差异，请从RNA结构的角度分析，这两种病毒形态结构不同的根本原因是_________________。 试卷第1页，共3页 试卷第1页，共3页 学科网（北京）股份有限公司 生物参考答案 1．D 【分析】传统发酵是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术。 【详解】A、传统发酵食品所用的是自然菌种，没有进行严格的灭菌，以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主，A错误； B、制作果酒的发酵过程中，每隔12h左右将瓶盖拧松一次，不能打开，排出酵母菌呼吸产生的 CO2，B错误； C、作泡菜时，发酵液表面的白膜可能由于产膜酵母的繁殖形成的，C错误； D、利用醋酸菌制作果醋比酵母菌制作果酒温度高，所以果酒发酵完成后进行果醋的发酵时，应适当升高温度，D正确。 故选D。 2．B 【分析】无菌技术的主要内容：（1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。（2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 【详解】①在操作的第一步之前灼烧接种环‌是为了确保接种环上没有残留的微生物，从而避免污染培养物‌；划线结束时灼烧接种环‌是为了杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境或感染操作者‌，①错误； ②加入培养基中的指示剂和染料需要灭菌，否则会染菌，影响微生物的培养，②错误； ③家庭制作葡萄酒将容器和葡萄进行消毒，不需要灭菌，③错误； ④煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢，而灭菌，例如干热灭菌能杀灭环境中一切微生物，包括孢子和芽孢，④错误； ⑤涂布平板时所用的涂布器需70%酒精浸泡后在酒精灯火焰上进行灼烧灭菌，⑤正确； ⑥家庭制作泡菜时需要将容器进行清洗消毒，但不需要刻意灭菌，⑥正确； ⑦纯培养物是指只含一种微生物的培养物，与是否含代谢废物无关，⑦错误。 综上，⑤⑥正确，B正确，ACD错误。 故选B。 3．A 【分析】在发酵工程中，发酵结束后通常需要通过一系列的分离和纯化步骤来获得最终的产品。这些步骤可能包括离心、过滤、色谱分离等，以去除培养基中的其他成分。 【详解】A、细菌素是细菌的次生代谢物，可抑制其他微生物生长，A错误； B、在利用平板划线法进行分离培养时，第一次划线和最后一次划线不能连接，B正确； C、IV过程为将细菌产生的细菌素添加到培养基中培养其他细菌，培养基上不同细菌的菌落直径越小说明细菌素的抑菌效果越好，C正确； D、通过离心、过滤、色谱分离等，以去除培养基中的其他成分，从而得到纯度较高的细菌素，在发酵工程中，发酵结束后通常需要通过一系列的分离和纯化步骤来获得最终的产品，D正确。 故选A。 4．A 【分析】发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的。其中发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。发酵的温度和发酵的时间随啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。 【详解】A、赤霉素具有促进种子萌发和诱导淀粉酶合成的作用。在过程①中，用赤霉素溶液处理大麦种子，种子无需发芽就能产生淀粉酶，A正确； B、过程②中焙烤的目的不是使酶失活，而是杀死种子内的微生物，同时使部分蛋白质变性等，利于后续糖化等过程；碾磨的目的是将大麦磨碎，使淀粉充分暴露，以便与淀粉酶充分接触，B错误； C、过程②煮沸时加入啤酒花可增加啤酒的苦度等风味，但蒸煮后不能马上接种，因为高温会杀死菌种，需冷却后再接种，C错误； D、过程③主发酵阶段酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，要适时往外排气；后发酵阶段需要在低温、密闭环境中进行，以促进啤酒的成熟和风味形成，而不是通气环境，D错误。 故选A。 5．B 【分析】分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。 【详解】A、某些固氮菌不需要培养基提供氮源，所以能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长，所以培养基应以尿素为唯一氮源，其上生长的不一定都是能分解尿素的细菌，A错误； B、由于分解尿素的细菌是异养生物，所以培养基的营养成分会减少，分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH会升高，B正确； C、使用后的培养基需灭菌处理，不是消毒，防止污染环境，C错误； D、5号试管稀释倍数为106，菌落数平均值为（168 + 175 + 167）÷3 = 170，土壤中菌株数为170÷0.1×106 = 1.7×109个 /mL，D错误。 故选B。 6．D 【分析】图示分析，①为外植体脱分化形成愈伤组织过程，②为愈伤组织经过再分化形成丛壮苗的过程，③为丛壮苗在生根培养基中形成试管苗过程。 【详解】A、茎尖病毒很少或几乎不含病毒，作为外植体培养脱毒苗，外植体需要在酒精中浸泡30s，A错误； B、过程①为外植体经过脱分化过程形成愈伤组织，目的是使细胞失去原特有的结构和功能，该过程不需要光照，B错误； C、过程②为再分化过程，实质是基因选择性表达，该过程既进行有丝分裂，也进行细胞分化，C错误； D、脱分化过程所用的培养基细胞分裂素与生长素用量的比值等于1，发芽培养基中细胞分裂素与生长素用量的比值大于1，D正确。 故选D。 7．D 【分析】植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，可以用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，从而得到原生质体。 【详解】A、茎尖组织细胞分化程度低，细胞壁较薄，纤维素含量较低，在获取原生质体时更利于去除细胞壁，A正确； B、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以用酶解法去壁时，主要用到的酶通常是纤维素酶和果胶酶，B正确； C、要保证获得纯净的原生质体，可采用过滤、离心等方法，C正确； D、原生质体没有细胞壁的保护，将其置于等渗溶液中可以维持原生质体的渗透压平衡，防止细胞破裂或皱缩，D错误。 故选D。 8．C 【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。 【详解】A．植物体细胞杂交首先要使原生质体融合形成杂种细胞，其次要把杂种细胞经过植物组织培养技术培育成杂种植株。细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性，植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，A正确； B．促进植物原生质体融合的方法有电融合法、高Ca2+-高pH融合法等，B正确； C．“番茄—马铃薯”体细胞中含有4个染色体组，为异源多倍体，C错误； D．自然界中，番茄和马铃薯均为二倍体，染色体条数也均为24条，因此，“番茄—马铃薯”体细胞中可含有（24+24）×2=96条染色体，此时的细胞处于有丝分裂后期，D正确。 故答案为C。 9．D 【详解】A、干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞，前者存在于早期胚胎中，而成体干细胞多来自于人体的组织且增殖能力有限，A正确； B、由题干“iPS细胞可来源于病人自身的体细胞”可知，已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞，B正确； C、iPS细胞来源于患者自身体细胞，分化后的细胞移植回体内时，与患者主要组织相容性抗原一致，可避免免疫排斥，C正确； D、iPS细胞培养需无菌环境，但定期更换培养液的主要目的是清除细胞代谢产物并补充营养物质，而非单纯维持无菌条件，D错误。 故选D。 10．B 【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。 【详解】A、在自然条件下，哺乳动物的受精过程在输卵管中完成，受精卵形成后在输卵管内进行有丝分裂，发育到一定阶段后进入子宫继续进行胚胎发育，A错误； B、由图可知，孤雌生殖技术通过阻止次级卵母细胞释放极体，激活孤雌生殖从而获得早期胚胎，B正确； C、孤雌生殖得到的幼猪的核基因来自良种母猪，细胞核移植得到的幼猪的核基因来自良种公猪，故两种幼猪的核基因不同，C错误； D、图示流程涉及了体细胞核移植、胚胎移植等技术，未涉及重组DNA技术，D错误。 故选B。 11．A 【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是： ①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同 浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可 以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出， 从而达到分离的目的; ②DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离; ③在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。 【详解】A、在DNA的粗提取与鉴定实验中，可将获得的研磨液用纱布过滤后，在4℃的冰箱中放置几分钟，再取上清液，也可以直接将研磨液用离心机进行离心后取上清液，A正确； B、研磨液在4℃冰箱中放置几分钟后，DNA在上清液中，应取上清液倒入烧杯中，B错误； C、鉴定过程中用沸水浴加热，DNA双螺旋结构会发生改变，C错误； D、加入二苯胺试剂后沸水浴处理的时间要在5分钟以上，且要等到冷却后再观察结果，这样才可以观察到较为明显的显色反应，仅设置一个对照组可以排除二苯胺加热后可能变蓝的干扰，D错误。 故选A。 12．C 【分析】检测转基因抗冻番茄是否培育成功的最简便方法是在个体水平上进行抗性鉴定，即观察其是否能在相对寒冷的环境中生长。 【详解】A、表达载体的构建是培育转基因生物的核心工作，A错误； B、构建含有afp基因的Ti质粒需要限制酶、DNA连接酶，不需要核酸酶，B错误； C、将目的基因导入植物细胞常用的方法为脓杆菌转化法，构建的含有afp基因的Ti质粒应首先导入土壤农杆菌细胞中，C正确； D、只有番茄具有抗冻性才能代表抗冻番茄培育成功，含有的afp基因若不表达，也不会形成抗冻番茄，D错误。 故选C。 13．D 【详解】A、“基因污染”指的是转基因生物的外来基因可能会通过花粉等扩散到其他物种的现象，A正确； B、转基因生物竞争能力强，可能成为“入侵的外来物种”，影响生态系统的稳定性，B正确； C、抗除草剂基因有可能通过花粉传播进入杂草，使杂草成为用除草剂除不掉的“超级杂草”，C正确； D、要避免基因污染，一般需将目的基因导入细胞的细胞质（线粒体、叶绿体），不会随着花粉进行基因污染，D错误。 故选D。 14．A 【分析】转录、复制都是从模板链的3'端开始，因此新合成链的方向均为5'→3'。质粒作为基因的载体，与目的基因形成重组质粒时，需要形成相同的黏性末端，才能重新组合。 【详解】A、该DNA分子的大小为14kb，用限制酶A、B充分酶切后，分别得到1、2个片段，用二者共同酶切后得到3个片段，说明该DNA分子是环状DNA，含有1个限制酶A的酶切位点，A错误； B、不同的限制酶可能切割出相同的黏性末端，B正确； C、限制酶能使DNA链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，DNA连接酶能恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，两者均作用于磷酸二酯键，C正确； D、温度能够影响酶的活性，所以在适宜温度下限制酶才能更好地发挥作用，D正确。 故选A。 15．C 【详解】A、黑藻叶片细胞中的叶绿体本身含有色素，无需染色即可直接观察其形态和分布，A错误； B、叶绿体的双层膜结构属于亚显微结构，需借助电子显微镜观察，高倍光学显微镜无法分辨，B错误； C、实验中通过观察叶绿体的运动方向和速度，可间接判断细胞质基质的流动情况，故叶绿体被用作指示细胞质流动的标志物，C正确； D、在一定范围内，光照增强会促进细胞代谢，加速细胞质流动（含叶绿体移动），而非变慢，D错误。 故选C。 16．B 【详解】A、据图示可知，①为种子晒干的过程，②为种子烘干的过程，③为种子燃烧后剩下的灰分，即无机盐，④为自由水，⑤为结合水。②为种子烘干的过程，细胞结构被破坏，故②不能够萌发形成幼苗，A错误； B、种子中的糖类、脂肪、蛋白质等有机物都含C元素，点燃时有机物氧化分解，产生的CO2中的C可来自这些有机物，B正确； C、③为无机盐，不能为生物体的生命活动提供能量，C错误； D、刚收获的种子中自由水（④）比例大，结合水（⑤）比例小，即④/⑤的比例大，代谢旺盛，不利于储存，D错误。 17．(1) 异养需氧型 C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量。 (2)打开充气口（连接充气泵，保持通气）；适当提高温度 (3)避免空气中其他微生物进入发酵装置/防止空气中的微生物污染 (4) 2/3 储存一定的氧气，有利于酵母菌有氧呼吸提供更多的能量从而快速繁殖，同时也可防止发酵液溢出 【分析】题图分析，图1是果酒和果醋制作的实验流程，酒精发酵后还可以进行果醋发酵。图2是果酒和果醋的发酵装置图，其中排料口的作用是出料、检测；充气口的作用是在果醋制作时通入氧气的；排气孔是排气，其弯弯曲曲的好处是防止杂菌和浮尘的污染。 【详解】（1）酒精发酵后还可以进行醋酸发酵，所以图1方框中的内容是果醋发酵，果醋发酵所用的菌种是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，当缺少糖源时醋酸菌代谢的反应式为：C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量。 （2）果酒发酵是在无氧环境中进行的，而果醋制作是在有氧环境中进行的，因此图2装置中的充气口在果酒发酵时关闭，在果醋发酵时连接充气泵，并连续不断地向内泵入空气，适当提高温度。 （3）为了避免空气中其他微生物进入发酵装置(防止空气中的微生物污染)，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接。 （4）用玻璃瓶进行酒精发酵生产时，发酵装置内加入葡萄汁后留约1/3的空间，目的是有利于酵母菌有氧呼吸从而快速繁殖，同时也可防止发酵过程中产生的二氧化碳造成发酵液溢出，所以加入的葡萄汁不应超过玻璃瓶体积的2/3。 18．(1) 去除A、B两细胞的细胞壁 体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液 等渗 (2) 30 不同发育阶段所需的生长素和细胞分裂素的浓度、比例不同 (3) 35% 在干旱的条件下种植试管苗，并检测含糖量，挑选出耐干旱且含糖量高的植株 【分析】植物体细胞杂交过程中需要先进行去壁处理，植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，可利用酶解法，即利用纤维素酶和果胶酶分解细胞壁得到植物原生质体。 【详解】（1）两种细胞通过处理1得到了原生质体，所以处理1的目的是去除A、B两细胞的细胞壁。制备原生质体前需将两亲本的外植体用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液依次进行消毒。原生质体放入高渗溶液会失水，原生质体没有细胞壁的支持和保护，为防止其吸水涨破，在细胞融合时需将原生质体置于等渗溶液中。 （2）细胞甲是由两种细胞两两融合而成的，则细胞甲包含两种细胞的染色体，所以染色体数为16+14=30。由于不同发育阶段所需的生长素和细胞分裂素的浓度、比例不同，所以“甲→乙”过程和“乙→试管苗”过程需要更换培养基。 （3）PEG浓度为35%和40%时异源融合率相同，且均高于其他浓度下的异源融合率，但较低浓度的PEG对细胞的毒害作用较小，故应选择浓度为35%的PEG。目的植株应该兼具耐干旱特性和含糖量高的优势，所以试管苗的培养过程应该在干旱环境下进行，其目的是淘汰不耐旱的植株，同时检测含糖量，以筛选出符合要求的杂交植株。 19．(1) 血清 筛选出杂交瘤细胞 (2) CD28 克隆化培养和双特异性抗体检测 可准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合；能同时识别癌细胞和T细胞，对癌症的疗效更好；可以大量制备；不易产生耐药性（答出3点且合理即可） (3)病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合 (4) 桑葚胚或囊胚 不发荧光 早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1）由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此动物细胞培养液中除营养物质外，还要添加一定量的血清等天然成分。过程①是制备单克隆抗体过程中的第一次筛选，需要使用特定的选择培养基，筛选出杂交瘤细胞。 （2）本试验的目的是获得双特异性抗体PSMA-CD28，结合题图可知③注射的抗原A应是CD28。过程⑤是对经选择培养得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和双特异性抗体检测，以获得足够数量的能分泌所需双特异性抗体的杂交瘤细胞。与从动物血清中分离的抗体相比，双特异性抗体的优点是可准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合；能同时识别癌细胞和T细胞，对癌症的疗效更好；可以大量制备；不易产生耐药性。 （3）灭活病毒诱导动物细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 （4）要多获得母牛，需筛选雌性胚胎；而H-Y抗原存在于雄性个体细胞的表面，故H-Y单克隆抗体会与雄性胚胎细胞表面的H-Y抗原结合，而含荧光标记的第二抗体可与H-Y单克隆抗体结合，故应筛选处于桑葚胚或囊胚期的不发荧光的胚胎进行移植。胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。 20．(1) 5'→3' 2 2n+1-2 (2) 相同 5'-GCCTCT-3'，5'-ATAGTT-3'（顺序可颠倒） (3) 凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象（答出1点即可） 引物设计不合理，它们与非目的序列有同源性或容易聚合形成二聚体；复性温度过低；TaqDNA聚合酶的质量不好（答出2点且合理即可） 【分析】PCR技术： 1、概念： PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。 2、原理： DNA复制。 3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。 4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶( Taq酶) 。5,过程：①高温变性： DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。 PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。 【详解】（1）PCR扩增时，应分别以DNA的两条链为模板合成新的子链DNA，DNA复制时子链的延伸方向为5'→3'。DNA有2条单链，所以需要2种引物，一个基因在PCR中经过n轮循环，一共得到2n个DNA，总共有2n+1条单链，除去2条模板链，每条新的单链都需要1个引物，故理论上共需要消耗（2n+1-2）个引物。 （2）根据图1可知，要将DNA片段L和R相连接，这两个片段被限制酶切割后需要有相同的黏性末端，所以L左侧和R右侧需要有相同的碱基序列。由于是反向PCR，所以引物的方向是已知基因序列由中间向两侧的5'→3'方向，模板为已知基因序列由中间向两侧的3'→5'方向片段，再根据碱基互补配对原则可写出引物，即5'-GCCTCT-3'，5'-ATAGTT-3'。 （3）利用电泳鉴定PCR产物时，在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关；根据电泳出的条带数量和长度可判断PCR的准确性，图3显示待测样品扩增结果不止一个条带，可能的原因有：引物设计不合理，它们与非目的序列有同源性或容易聚合形成二聚体；复性温度过低；TaqDNA聚合酶的质量不好等。 21．(1) 甘油 脂肪酸（两空可互换） 可作为很好的绝热体；保温作用；缓冲和减压作用，保护内脏器官 (2) 8 6 胆固醇 (3)五碳糖不同，甲为脱氧核糖、乙为核糖；碱基不完全相同，甲特有T、乙特有U (4)两种病毒RNA的碱基排列顺序不同 【分析】分析题图：a是脂肪、b是糖类、c是核苷酸，d是氨基酸，甲是DNA，乙是RNA，丙是蛋白质。 【详解】（1）a是良好的储能物质，a是脂肪，由甘油和脂肪酸形成的，除了图中的作用，脂肪可作为很好的绝热体；保温作用；缓冲和减压作用，保护内脏器官。 （2）染色体主要由DNA和蛋白质组成，核糖体主要由RNA和蛋白质组成，故甲为DNA，乙为RNA，丙为蛋白质，c为核苷酸，d为氨基酸，在人体细胞内，c（核苷酸）有腺嘌呤核糖核苷酸、鸟嘌呤核糖核苷酸、胞嘧啶核糖核苷酸、尿嘧啶核糖核苷酸、腺嘌呤脱氧核糖核苷酸、鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸、胞嘧啶脱氧核糖核苷酸、胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸，共8种，乙（RNA）经彻底水解会形成一种核糖、一种磷酸、四种碱基共6种小分子物质，e参与血液中脂质的运输，是胆固醇。 （3）甲为DNA，乙为RNA，构成甲（DNA）的五碳糖为脱氧核糖，碱基为A、T、G、C，构成乙（RNA）的五碳糖为核糖，碱基为A、U、G、C。因此，组成甲和乙的基本单位在化学组成上的主要区别是五碳糖不同，甲为脱氧核糖、乙为核糖；碱基不完全相同，甲特有T、乙特有U （4）HIV和SARS病毒同属RNA病毒，遗传物质都是RNA，但两者生命形态和结构具有较大差异，这两种病毒形态结构不同的根本原因是两种病毒RNA的碱基排列顺序不同。 答案第1页，共2页 答案第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $