精品解析：河北省保定市莲池区保定市第一中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题

高二生物学 考生注意： 1.本试卷分选择题和非选择题两部分。满分100分，考试时间75分钟。 2.答题前，考生务必用直径0.5毫米黑色墨水签字笔将密封线内项目填写清楚。 3.考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；非选择题请用直径0.5毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。 一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 下列关于传统发酵技术及发酵工程的叙述，正确的是（　　） A. 泡菜坛装八成满，以防止发酵液溢出和菜料变质腐烂 B. 谷氨酸发酵过程中，在酸性条件下会积累谷氨酸，在弱碱性和中性条件下会形成谷氨酰胺 C. 啤酒生产过程中通常加入啤酒花以提供发酵的菌种 D. 为防止杂菌污染，菌液涂布均匀后需立即将平板倒置 【答案】A 【解析】 【详解】A、泡菜坛装八成满，一方面可避免发酵过程中发酵液膨胀溢出，另一方面可保证盐水没过菜料，隔绝氧气，防止菜料接触空气发生腐烂变质，A正确； B、谷氨酸发酵过程中，中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸，酸性条件下易形成谷氨酰胺或N-乙酰谷氨酰胺，B错误； C、啤酒生产过程中加入啤酒花的作用是赋予啤酒特殊风味、增强防腐效果，C错误； D、菌液涂布均匀后，需先正放一段时间，待菌液完全被培养基吸收后再倒置培养，若立即倒置会导致未被吸收的菌液流动，影响菌落的分离纯化效果，D错误。 2. 聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图如下。下列说法正确的是（ ） ①取湖水→②接种在培养基上→③培养→④挑取单菌落，分别扩大培养→⑤检测菌的数目和PHA的产量→⑥获得目标菌株 A. 步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上 B. 扩大培养时，接种后需要将培养基放入恒温箱倒置培养，以防杂菌污染 C. ④所用到的培养基应加入琼脂，以便挑取单菌落获得纯化菌株 D. 挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量 【答案】D 【解析】 【分析】筛选分离目的微生物的一般步骤是：样品取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株，筛选分离生产PHA菌种需要用稀释涂布平板法或平板划线法接种分离。 【详解】A、步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基上，A错误； B、扩大培养应选用液体培养基，B错误； C、液体培养基中不应加入琼脂，C错误； D、挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量，D正确。 故选D。 3. 下列是某同学分离高产脲酶菌的实验设计，不合理的是（ ） A. 选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株 B. 在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源 C. 适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落 D. 可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌 【答案】D 【解析】 【分析】为了筛选可分解尿素的细菌，配制的培养基应选择尿素作为唯一氮源，含脲酶的微生物在该培养基上能生长，其它微生物在该培养基上因缺乏氮源而不能生长，可用于分离含脲酶的微生物。 【详解】A、农田或公园土壤中含有较多的含脲酶的微生物，A正确； B、为了筛选可分解尿素的细菌，配制的培养基应选择尿素作为唯一氮源，含脲酶的微生物在该培养基上能生长，B正确； C、当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，C正确； D、在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高，酚红指示剂将变红，因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，能对分离的菌种做进一步鉴定，D错误。 故选D。 4. 与传统发酵相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量均明显提高。下列说法正确的是（　　） A. 传统发酵无需进行消毒、灭菌，而发酵工程需要消毒、灭菌 B. 发酵条件变化会影响微生物生长繁殖，但不影响其代谢途径 C. 发酵罐配套传感器实时监测和控制，通过反馈控制使发酵过程处于最佳状态 D. 发酵工程可获得大量微生物菌体并从菌体中提取单细胞蛋白 【答案】C 【解析】 【详解】A、传统发酵虽然利用的是原料表面的天然菌种，不需要严格灭菌，但仍需进行消毒操作避免有害杂菌污染，发酵工程为了保证纯种发酵需要严格消毒、灭菌，A错误； B、发酵条件（如温度、pH、溶氧量等）不仅会影响微生物的生长繁殖，也会改变微生物的代谢途径，例如酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸大量繁殖，无氧条件下进行无氧呼吸产生酒精，B错误； C、发酵罐配备的传感器可以实时监测温度、pH、溶解氧等发酵参数，通过反馈控制及时调整发酵条件，可使发酵过程始终处于最佳状态，C正确； D、单细胞蛋白本身就是微生物菌体，无需从菌体中提取，可直接作为食品或饲料使用，D错误。 5. 青枯病是一种严重危害马铃薯的病害，茄子对青枯病具有一定抗病性。研究者通过植物体细胞杂交技术培育抗青枯病的马铃薯新品种，在获得的90个杂种植株中，有6个具有明显的青枯病抗性。下列相关叙述错误的是（　　） A. 通过灭活病毒诱导马铃薯原生质体与茄子原生质体融合，进一步筛选出杂种细胞 B. 杂种细胞中来自茄子的染色体随机丢失可能是部分杂种植株无明显抗病性的原因 C. 利用PCR 技术可以检测杂种植株中是否具有来自茄子的青枯病抗性基因 D. 茄子和马铃薯之间存在生殖隔离，不宜采用杂交育种的方法来培育抗病马铃薯 【答案】A 【解析】 【详解】A、诱导植物原生质体融合的方法仅包括物理法（离心、电激等）和化学法（聚乙二醇诱导等），灭活病毒是诱导动物细胞融合的特有方法，无法用于植物原生质体融合，A错误； B、杂种细胞在增殖分化过程中可能出现异源染色体随机丢失的现象，若携带青枯病抗性基因的茄子染色体丢失，就会导致对应杂种植株无明显抗病性，B正确； C、PCR技术可对特定DNA序列进行扩增，因此可以用该技术检测杂种植株中是否存在来自茄子的青枯病抗性基因，C正确； D、茄子和马铃薯属于不同物种，二者之间存在生殖隔离，自然状态下无法交配产生可育后代，因此不适宜用杂交育种的方法培育抗病马铃薯，D正确。 6. 利用植物组织培养技术获得红豆杉试管苗，有助于解决紫杉醇药源短缺问题。下列叙述正确的是（ ） A. 细胞分裂素和生长素的比例会影响愈伤组织的形成 B. 培养基先分装到锥形瓶，封口后用干热灭菌法灭菌 C. 芽原基细胞由于基因选择性表达，不能用作外植体 D. 紫杉醇不能通过细胞产物的工厂化生产来获取，植物组织培养优势明显 【答案】A 【解析】 【分析】植物组织培养技术：1、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。2、原理：植物细胞的全能性。3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。4、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、在植物组织培养中，生长素和细胞分裂素的比例直接影响细胞的分化方向。当二者比例适中时，促进愈伤组织的形成；比例过高时促进生根，比例过低时促进生芽，A正确； B、培养基含大量水分，需用高压蒸汽灭菌法灭菌（121℃，15-30分钟）；干热灭菌法适用于耐高温且干燥的物品（如玻璃器皿），不能用于培养基灭菌，B错误； C、外植体可以是植物的任何活细胞、组织或器官，只要具有全能性。芽原基细胞是分生组织的一部分，全能性高，可作为外植体。基因选择性表达是细胞分化的基础，不影响其作为外植体的能力，C错误； D、细胞产物的工厂化生产正是通过植物组织培养技术实现的，如大量培养红豆杉细胞，从培养液中提取紫杉醇。因此，紫杉醇可通过此方法获取，植物组织培养的优势（如快速增殖、大量生产细胞产物）在此体现，D错误。 故选A。 7. 细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域得到了广泛应用。下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（ ） A. 从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为传代细胞 B. 将特定基因或特定蛋白导入已分化的T细胞，可将其诱导形成iPS细胞 C. 将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合的细胞即为能分泌所需抗体的细胞 D. 采用胚胎分割技术克隆动物常选用桑葚胚或囊胚，因这两个时期的细胞未发生分化 【答案】B 【解析】 【分析】动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础。 【详解】A、胰蛋白酶处理后直接培养的细胞为原代细胞，A错误； B、将特定基因或特定蛋白（特定的转录因子如Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc）导入已分化的T细胞，可将其诱导形成iPS细胞，B正确； C、融合细胞有具有同种核的融合细胞和杂交瘤细胞，需筛选才能获得分泌特定抗体的杂交瘤细胞，C错误； D、囊胚细胞已开始分化，D错误。 故选B。 8. 将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞，其过程如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A. ①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同 B. 体外培养杂交瘤细胞时需要置于含95%O2的培养箱中 C. ②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞 D. 抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性 【答案】B 【解析】 【详解】A、①过程是B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用细胞膜具有一定的流动性的特点，和植物原生质体融合的原理基本相同，A正确； B、体外培养杂交瘤细胞时需置于含95%空气和5%CO2的培养箱中，B错误； C、②过程是筛选杂交瘤细胞并克隆化培养，需要筛选出能产生所需抗体的单个杂交瘤细胞，再进行克隆，C正确； D、抗体的靶向作用，即抗原抗体的特异性结合，使③过程具有高度特异性，D正确。 9. 研究显示，约70%的小鼠体细胞核移植胚胎未能成功发育至囊胚期，且仅有约2%的胚胎移植到代孕母鼠后可正常发育。下列叙述错误的是（ ） A. 体细胞核进入去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚 B. 移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态 C. 胚胎移植到代孕母鼠后成活率低，可能是早期胚胎未能及时从滋养层内孵化 D. 为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植 【答案】C 【解析】 【分析】动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难。因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体叫“受体”。通过任何一项技术（如转基因、核移植和体外受精等）获得的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代。 【详解】A、由于M Ⅱ期卵母细胞的细胞更大，便于进行技术操作，细胞质中含有激发细胞核全能性的物质，因此体细胞核移植到去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚，A正确； B、移植前胚胎发育率低，细胞核来自于已分化的体细胞，全能性容易受到影响，因此可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态，B正确； C、根据题干，早期胚胎大多都不能发育至囊胚期，必然不是孵化的原因，着床在孵化之后发生，孵化是胚胎从透明带中伸展出来（不是滋养层），C错误； D、胚胎细胞核全能性高于体细胞，因此为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植，D正确。 故选C。 10. 近年来，亚洲黑熊数量骤减，为此科研人员期望通过如图所示方法拯救亚洲黑熊。据此分析，以下说法正确的是（　　） A. 野生亚洲黑熊C的精子获能是指获得能量 B. 目前过程②普遍使用的去除细胞核的方法是梯度离心法 C. D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊A、野生亚洲黑熊B进行同期发情处理 D. 胚胎移植前将囊胚的内细胞团均等分割可提高胚胎利用率，后代E、F的性别可能不同 【答案】D 【解析】 【详解】A、精子获能是指精子获得受精能力，而不是获得能量，A错误； B、普遍使用的去除细胞核的方法是显微操作法，B错误； C、D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊A进行同期发情处理，目的是使体内的生理环境保持一致，提高胚胎的存活率，而野生亚洲黑熊B只需要提供体细胞，所以不需要同期发情处理，C错误； D、为提高胚胎利用率，胚胎移植前可将囊胚的内细胞团均等分割，E为有性繁殖的后代，性别未知，F为无性繁殖的后代，性别为雌性，所以后代E、F的性别可能不同，D正确。 11. 关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”(实验I)和“DNA的粗提取与鉴定”(实验Ⅱ)的实验操作，下列相关叙述正确的是（ ） A. 实验I中，PCR实验所需的移液器、枪头、蒸馏水等必须进行高压灭菌处理 B. 实验I中，将扩增得到的PCR产物进行凝胶电泳，加样前应先接通电源 C. 实验Ⅱ中，取洋葱研磨液的上清液，加入等体积冷酒精后析出粗提取的DNA D. 实验Ⅱ中，将白色丝状物直接加入到二苯胺试剂中并进行沸水浴，用于鉴定DNA 【答案】C 【解析】 【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 【详解】A、实验Ⅰ中，PCR实验所需的枪头、蒸馏水等必须进行高压灭菌处理，移液器不需要进行高压蒸汽灭菌处理，A错误； B、实验Ⅰ中，将扩增得到的PCR产物进行凝胶电泳，应先加样后接通电源，B错误； C、实验Ⅱ中，取洋葱研磨液的上清液，由于DNA不溶于酒精溶液，加入等体积冷酒精后析出粗提取的DNA，C正确； D、实验Ⅱ中，将丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液后加入二苯胺试剂，在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，用于鉴定DNA，D错误。 故选C。 12. 限制酶、DNA连接酶的发现为DNA分子的切割、连接及基因表达载体的构建创造了条件。下列关于重组DNA技术基本工具的叙述，正确的是（　　） A. 限制酶在原核细胞内的主要作用是切割修剪自身的DNA B. 噬菌体、动植物病毒均可作为载体将外源基因导入受体细胞 C. 用作载体的质粒分子上可以不含有限制酶切割位点 D. DNA连接酶可连接DNA分子两条链中碱基对之间的氢键 【答案】B 【解析】 【详解】A、限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，其在原核细胞中的主要作用是切割外源DNA使之失效，从而达到保护自身的目的，A错误； B、将外源基因导入受体细胞，常常需要将目的基因与运载体结合构建基因表达载体，常用的载体有质粒、噬菌体和动植物病毒，B正确； C、作为载体的质粒需要含有1个或多个限制酶切割位点，以便插入外源目的基因，因此用作载体的质粒必须有限制酶切割位点，C错误； D、DNA连接酶的作用是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，D错误。 13. 如图是将目的基因导入大肠杆菌内制备“工程菌”的示意图，其中引物1—4在含有目的基因的DNA上的结合位置如甲图所示，限制酶BamHI、EcoRI、HindDI在质粒上的识别位点如乙图所示。以下说法中错误的是（　　） A. PCR过程完成4轮循环，理论上至少需加入引物30个 B. 若已经合成了甲图所示4种引物，应选择引物2和3扩增目的基因 C. 过程①中应使用限制酶BamHI切割质粒 D. 对于转化失败的大肠杆菌及其培养基应进行灭菌处理，以防其污染环境 【答案】B 【解析】 【分析】 基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、PCR 技术大量扩增目的基因时，缓冲液中需要加入的引物个数计算公式为2n+1-2，因此PCR过程完成4轮循环，理论上至少需加入引物24+1-2=30个，A正确； B、由于DNA聚合酶只能从5′→3′延伸子链，因此扩增目的基因时应选择引物1和4，B错误； C、①是基因表达载体的构建过程；若使用EcoRⅠ切割质粒会将目的基因掐入启动子上游，目的基因不能正确表达；使用HamdⅢ切割质粒将破坏标记基因，不利于目的基因的鉴定和筛选，因此该过程中应使用限制酶 BamHⅠ切割质粒，C正确； D、为了防止污染环境，对于转化失败的大肠杆菌及其培养基应进行灭菌处理，D正确。 故选B。 【点睛】 二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 14. 在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列说法错误的是（　　） A. 平板划线法在每次划线前后灼烧接种环的目的都是防止杂菌污染 B. 稀释涂布平板法也可用于微生物的计数，有时也可以不稀释直接涂布 C. 两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度 D. 接种环在划线前后都需要灼烧，涂布器在接种前也需要灼烧，两种处理方法相同 【答案】AD 【解析】 【详解】A、接种环在每次划线前后都要放在酒精灯上进行灼烧灭菌，第一次灼烧的目的是防止杂菌污染，最后一次是避免接种环上的微生物造成环境污染，操作中间灼烧接种环的目的是保证划线时菌种来自上一次划线的末端，A错误； B、用稀释涂布平板法也可用于微生物的计数，且计数的是活菌数目，若微生物的数量少，有时也可以不稀释直接涂布，B正确； C、获得纯培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，故两种纯化方法都是要防止杂菌污染，C正确； D、接种环的灭菌方法是直接置于酒精灯外焰灼烧至红热，涂布器的灭菌方法是先浸泡在酒精中，取出后引燃酒精，待酒精燃尽冷却后使用，二者灭菌处理方法不同，D错误。 15. 酥梨醋富含果胶、维生素以及多种矿物质等营养成分，具有开胃护肝、排毒养颜、减肥除脂等多种功效，是近年来的流行饮品。下列相关叙述正确的是（　　） A. 当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将酥梨汁中的糖分解成乙酸 B. 当缺少氧气时，醋酸菌将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸 C. 在酥梨醋发酵液中，液面处的醋酸菌密度高于瓶底处的密度 D. 随发酵时间的延长，发酵液中pH 先降低，后维持稳定 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、醋酸菌是一种好氧细菌，当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将酥梨汁中的糖分解成醋酸，A正确； B、当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化成醋酸，B错误； C、醋酸菌属于好氧菌，在酥梨醋发酵液中，液面处的醋酸菌更易接触到充足氧气，因此其密度高于瓶底处的密度，C正确； D、酥梨醋发酵过程中产生醋酸，使pH下降，发酵完成后pH维持稳定，D正确。 16. 我国科学家发现用体外受精胚胎的滋养层替换体细胞核移植胚胎的滋养层，能显著提升恒河猴体细胞核移植成功率，主要技术流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 体细胞核移植和体外受精都属于克隆 B. 图中进行核移植的卵母细胞需要去除纺锤体—染色体复合物 C. 为避免排斥反应，需要向植入重组囊胚的代孕猴注射免疫抑制剂 D. 滋养层细胞沿透明带内壁扩展，将来形成胎膜和胎盘的一部分 【答案】BD 【解析】 【详解】A、体细胞核移植属于克隆，体外受精不属于克隆，A错误； B、体细胞核移植的卵母细胞，在MⅡ中期，需要去除纺锤体-染色体复合物，B正确； C、胚胎移植通常不会发生免疫排斥，故无需注射免疫抑制剂，C错误； D、沿透明带内壁扩展排列的滋养层细胞，将来发育为胎膜和胎盘，而内细胞团细胞将来发育成胎儿的各种组织，D正确。 17. 研究发现，人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品。科学家将该蛋白基因导入山羊体内使其能够在山羊乳腺细胞中表达，从而从山羊乳汁中提取人溶菌酶。图1表示被限制酶切割后的该蛋白基因，图2表示培育流程。下列叙述正确的是（　　） A. 切割该蛋白基因的限制酶有2种，识别的序列可分别为-GGATCC-和-AAGCTT- B. ③过程是基因工程的核心步骤 C. ②过程常采用显微注射的方法 D. 转基因山羊乳腺细胞中检测到了hLZ基因的序列，说明目的基因在受体细胞中表达 【答案】AC 【解析】 【详解】A、根据目的基因切割后产生的黏性末端不同，可确定切割该基因的限制酶有2种，一种酶识别的序列可为-GGATCC-，在G和G之间进行切割，另一种酶识别的序列可为-AAGCTT-，在A和A之间切割，A正确； B、基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，对应图2中的①过程，B错误； C、②过程是将重组质粒导入受体细胞，对于动物细胞，常采用显微注射法，C正确； D、在转基因山羊乳腺细胞中检测到hLZ基因的序列，只能说明目的基因成功导入，不能说明目的基因完成表达（表达需要检测到对应的蛋白质），D错误。 18. 利用PCR 扩增下面DNA 分子，下列叙述正确的是（ ） 5'-TAAACTTCAGGGT……TGATTTGTTGACC-3' 3'-ATTTGAAGTCCCA……ACTAAACAACTGG-5' A. 其中一种引物的部分碱基序列应为3'-ATTTGAAGTCCCA -5' B. 变性时，在高温的作用下双链DNA 解聚为单链DNA C. 复性时，温度过低会导致PCR 扩增出多种DNA 片段 D. 复制n轮后，同时含有两种引物的子代DNA 分子有2n-2个 【答案】BCD 【解析】 【分析】.PCR技术的条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）； PCR的操作过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。 【详解】A、引物是一段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸，引物与模板链的3'端碱基互补配对，不能是3'-ATTTGAAGTCCCA -5'，A错误； B、PCR的过程为高温变性、低温复性、中温延伸，可见变性需要的温度最高，变性使DNA解聚为单链，B正确； C、复性时，温度过低会越容易形成氢键，引物与模版的结合位点增加，导致PCR 扩增出多种DNA 片段，C正确； D、复制n轮后，DNA 分子有2n个，新合成的DNA链都有引物，不含引物的DNA链有两条母链，据DNA半保留复制特性，同时含有两种引物的子代DNA 分子有2n-2个，D正确； 故选BCD。 三、非选择题：本题共5 小题，共59分。 19. 土壤中95%的钾是不溶性钾，可供植物吸收利用的可溶性钾不超过全钾的2%。解钾菌是一种能将土壤中不溶性钾转化为可溶性钾的细菌。某研究小组从土壤中筛选出高效解钾菌制成生物菌肥。回答下列问题： （1）初筛解钾菌时，以去离子水反复冲洗的钾长石粉为唯一的钾源配制培养基，推测钾长石粉是______（填“可溶性钾”或“不溶性钾”），该培养基从功能上分类属于________培养基。 （2）为了解土壤中解钾菌的数量，称取10g土样按照图1进行操作，将接种后的平板置于适宜温度等条件下培养，菌落稳定后统计不同稀释度下的菌落数。过程a所用的接种方法为___________。据图计算，10g土样中含有的解钾菌数量为____个。此方法统计的解钾菌数量比实际的少，原因是____________。 （3）为进一步探索扩增某高效解钾菌的培养条件，小组成员探究相同条件下不同氮源对菌体细胞数目的影响，利用火焰分光光度仪测定菌体细胞的数目。测定结果如图2.实验中还需增加一组______做对照，来检测培养基是否彻底灭菌。图中的氮源作为探索条件不合理的是________，原因为__________。由实验结果可知，菌株生长最适氮源是________。 （4）将筛选出的高效解钾菌菌种扩大培养后与其他微生物一同添加到有机肥中制成微生物肥料，在农业生产中使用微生物肥料的作用是_________（答2点）。 【答案】（1） ①. 不溶性钾 ②. 选择 （2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 2.9×107 ③. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 （3） ①. 无接种的空白培养基 ②. 硝酸钾 ③. 本实验目的是筛选能分解不溶性钾的解钾菌，硝酸钾中的钾会干扰实验结果 ④. 蛋白胨 （4）增进土壤肥力；改良土壤结构，促进植株生长；有的微生物肥料还可以减少病害发生 【解析】 【小问1详解】 因为题干中提到初筛解钾菌时，以去离子水反复冲洗的钾长石粉为唯一的钾源，而土壤中 95%的钾是不溶性钾，所以推测钾长石粉是不溶性钾，该培养基从功能上分类属于选择培养基，因为这种培养基以不溶性钾为唯一钾源，只有能将不溶性钾转化为可溶性钾的解钾菌才能在这种培养基上生长，起到了选择特定微生物的作用。 【小问2详解】 过程a所用的接种方法为稀释涂布平板法，首先计算三个平板上的菌落在30-300之间的菌落比较准确，平均数=（288+290+292）÷3=290（个）， 由于土壤悬液稀释了103倍，所以1g土壤的解钾菌数量约为290÷0.1×103= 2.9×106（个），故10g土样中含有的解钾菌数量为2.9×106×10=2.9×107。此方法统计的解钾菌数量比实际的少，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 【小问3详解】 实验中还需增加一组无接种的空白培养基做对照，来检测培养基是否彻底灭菌。图中的氮源作为探索条件不合理的是硝酸钾，原因是在相同条件下本实验目的是筛选能分解不溶性钾的解钾菌，硝酸钾中的钾会干扰实验结果。由实验结果可知，菌株生长最适氮源是蛋白胨，蛋白胨的培养基的菌体细胞密度最大。 【小问4详解】 在农业生产中使用微生物肥料的作用是增进土壤肥力；改良土壤结构，促进植株生长；有的微生物肥料还可以减少病害发生等。 20. 流程图是生物学研究中模型构建的一种表现形式。回答下列问题： （1）半夏是我国常用的传统中药材，经过Ⅰ、Ⅱ阶段产生半夏试管苗C。 ①若要快速繁殖有优良性状的半夏，所给细胞中不能作为外植体的是________（填“表皮细胞”“叶肉细胞”或“成熟筛管细胞”），在Ⅰ、Ⅱ阶段中发生基因选择性表达的是________阶段， A、B细胞中的蛋白质种类________（填“完全不”“不完全”或“完全”）相同。 ②若要培育半夏新品种，常常用射线、化学物质等处理图中的________（填“A”“B”或“C”），原因是_______。 （2）iPS 细胞增殖分化后能形成多种组织细胞，可用于多种疾病的治疗。科学家将4 种基因导入小鼠成纤维细胞后，经过________（填“Ⅰ”或“Ⅱ”）阶段的变化产生 iPS细胞，该过程类似于植物组织培养的________过程。科研人员已成功将Ⅱ型糖尿病病人的体细胞经重编程后诱导成iPS细胞，并定向分化为胰岛组织回植患者体内，科学家普遍认为 iPS 细胞的应用前景优于胚胎干细胞，原因是_________（答1点）。 （3）上述流程________（填“可以”或“不可以”）表示动物细胞培养技术的流程，理由是___________。 【答案】（1） ①. 成熟筛管细胞 ②. Ⅰ、Ⅱ ③. 不完全 ④. B ⑤. 这种细胞一直处于不断增殖的状态，容易受到培养条件和诱变因素的影响产生突变 （2） ①. I ②. 脱分化 ③. iPS细胞来自病人的体细胞，不发生免疫排斥##无需破坏胚胎，不涉及伦理问题 （3） ①. 不可以 ②. 动物细胞培养只涉及细胞增殖，不涉及细胞分化 【解析】 【小问1详解】 ①由于成熟筛管细胞没有细胞核，而表皮细胞和叶肉细胞都有细胞核，所以在所给细胞中不能作为外植体的是成熟筛管细胞。根据图示分析可知，过程Ⅰ是脱分化，过程Ⅱ是再分化，在Ⅰ、Ⅱ阶段中都会发生基因选择性表达。A、B细胞的分化状态不同，所以两个细胞中的蛋白质种类不完全相同。 ②由于B细胞处于未分化的状态，这种细胞一直处于不断增殖的状态，容易受到培养条件和诱变因素的影响产生突变，所以若要培育半夏新品种，常常用射线、化学物质等处理图中的B细胞。 【小问2详解】 根据题干信息可知，iPS细胞增殖分化后能形成多种组织细胞，iPS细胞是未分化的细胞，所以将4种基因导入小鼠成纤维细胞后，经过Ⅰ阶段的变化产生iPS细胞，由分化后的小鼠成纤维细胞转变为未分化的iPS细胞，该过程类似于植物组织培养的脱分化过程。因为iPS细胞来自病人的体细胞，不发生免疫排斥，或无需破坏胚胎不涉及伦理问题，所以科学家普遍认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。 【小问3详解】 根据图示分析可知，过程Ⅰ是脱分化，过程Ⅱ是再分化，因为动物细胞培养只涉及细胞增殖，不涉及细胞分化，所以上述流程不可以表示动物细胞培养技术的流程。 21. 某女性患有输卵管阻塞，该夫妇借助“试管婴儿”技术，一次生殖过程中生出两个孩子，如图所示。请分析回答下列问题。 （1）过程X若想顺利进行，首先来自父方的精子要进行________。 （2）若借助人工手段获得这样两个胎儿，需要用到的技术手段是胚胎分割，在分割囊胚阶段的胚胎时操作过程中需要将______________。 （3）________（生物技术）是甲、乙产生的最后一道工序。一般来说，该技术操作比较合适的时期是_______________ 。 （4）2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。“三亲婴儿”的培育过程可选用如下技术路线。 ①由于女性自然周期产生的卵子太少，捐献者在取卵前通常需要注射______激素，促使一次有更多的卵泡发育。 ②“三亲婴儿”的染色体来自_____（填细胞名称），这种生殖方式属于____（填“有性”或“无性”）生殖。 ③“三亲婴儿”的培育技术__（填“能”或“不能”）避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代。 【答案】 ①. 获能处理 ②. 内细胞团均等分割 ③. 胚胎移植 ④. 桑葚胚期或囊胚期 ⑤. 外源促性腺 ⑥. 母亲卵细胞和精子 ⑦. 有性 ⑧. 能 【解析】 【分析】图示中的过程X表示受精作用，过程Y表示第一次卵裂。三亲婴儿的培育过程图显示：母亲卵母细胞的细胞核与捐献者去核卵母细胞重组而成的重组卵子，与父亲产生的精子结合形成受精卵， 该受精卵发育为三亲婴儿；可见，三亲婴儿的细胞核来自父亲与母亲，细胞质遗传物质来自捐献者。 【详解】（1）过程X表示受精作用，来自父方的精子要进行获能处理才具备受精能力。 （2）胚胎分割时要注意将内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 （3）转基因、核移植、或体外受精等技术获得的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代，因此胚胎移植是胚胎工程中最后一道程序。胚胎移植操作比较合适的时期是桑椹胚期或囊胚期。 （4）①在取卵前，给捐献者注射促性腺激素，可促使其一次有更多的卵泡发育，使其超数排卵。 ②三亲婴儿由重组卵子与父亲产生的精子结合而成的受精卵发育而来，而重组卵子是由母亲卵母细胞的细胞核与捐献者去核卵母细胞重组而成。可见，三亲婴儿的染色体来自于母亲的卵细胞和父亲的精子，这种生殖方式属于有性生殖。 ③三亲婴儿的线粒体来自捐献者卵母细胞，细胞核是由来自母亲卵母细胞的细胞核与来自父亲精子的细胞核融合而成后发育而来，因此三亲婴儿的培育技术，能避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代。 【点睛】本题主要考查三亲婴儿的培育过程，难点在于理清“三亲婴儿”遗传物质的来源，明确线粒体疾病的致病机理(线粒体DNA通过母本遗传给后代)。在此基础上，即可得出正确的结论。 22. 如图表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程，回答下列问题： （1）图中所示过程所用的生物技术有动物细胞培养和__________，将特定的抗原注入小鼠，需在一定时间内间隔注射3次以上，其目的是_________。 （2）将经免疫处理后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞的过程中，至少要进行两次筛选，一次是通过选择培养基（如HAT 培养基），该培养基对__________和_________生长具有抑制作用，从而筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过________检测，筛选出能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞。 （3）培养杂交瘤细胞的培养基中需加入动物血清，作用是________，提供气体条件CO2的作用是_________，杂交瘤细胞体外培养过程中，为避免细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，常采取的措施是_______。 （4）与采用传统的血清分离法得到的抗体相比，单克隆抗体的优点是______。 【答案】（1） ①. 动物细胞融合技术 ②. 加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的淋巴细胞 （2） ①. 未融合的亲本细胞 ②. 融合的具有同种核的细胞 ③. 抗体 （3） ①. 补充细胞生长所需的未知营养物质 ②. 维持培养液的pH ③. 定期更换培养液 （4）能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 【解析】 【小问1详解】 图中表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程，所用的生物技术有动物细胞融合技术和动物细胞培养技术，为加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的淋巴细胞，将特定的抗原注入小鼠时，需在一定时间内间隔注射3次以上。 【小问2详解】 在抗X的单克隆抗体制备过程中，至少需要进行两次筛选，第一次是通过选择培养基，该培养基对未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞生长具有抑制作用，从而筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过抗体检测，筛选出能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞。 【小问3详解】 培养杂交瘤细胞的培养基中需加入动物血清，可以补充细胞生长所需的未知营养物质，提供气体条件CO2的作用是维持培养液的pH，为避免细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，常采取定期更换培养液的措施。 【小问4详解】 与采用传统的血清分离法得到的抗体相比，单克隆抗体的优点是能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备。 23. 苯丙酮尿症是单基因遗传病，科学家将正常基因D导入该病患者的细胞，以治疗该病。图甲为A、B、C三种质粒，图乙为含有目的基因D的DNA片段，图丙为重组载体的示意图。AmpR为氨苄青霉素抗性基因，Tet2为四环素抗性基因，LacZ为蓝色显色基因，其表达产物可以将无色化合物X-gal转化成蓝色物质，使菌落呈蓝色，EcoRⅠ（0.6 kb）、PvuⅠ（0.8kb）为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。回答下列问题： （1）基因工程操作的核心步骤是_______。图甲中三种质粒适宜作为载体的是质粒______，与另外两种质粒相比，其作为载体的优点是_______。 （2）获取目的基因D时对应选择图乙中的_______对其所在的DNA 进行切割。如果仅知道基因D首尾的部分核苷酸序列，需要根据基因D已知核苷酸序列合成_______，以便利用PCR 技术扩增目的基因，该技术的原理为_________。 （3）将目的基因D和图甲中相应质粒连接后，得到图丙中三种方式。为选出正向连接的重组质粒，使用______对质粒完全酶切后，进行电泳分析。若是正向连接载体，电泳图谱中出现长度为________kb和_______kb两条带。 【答案】（1） ①. 基因表达载体的构建 ②. B ③. 有标记基因，复制原点不会被限制酶切割 （2） ①. Pvu Ⅰ ②. 引物 ③. DNA半保留复制 （3） ①. EcoR Ⅰ ②. 1.2 ③. 5.5 【解析】 【小问1详解】 基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中基因工程的核心是基因表达载体的构建。图中质粒A缺少标记基因，质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时，复制原点会被限制酶切割，会影响重组质粒的自主复制，因此，不能作为目的基因运载体，质粒B中含有AmpR基因和lacZ基因，用和目的基因相同的限制酶切割时，lacZ基因遭到破坏，但有标记基因（AmpR基因），复制原点不会被限制酶切割，故适宜作为载体的是质粒B。 【小问2详解】 分析乙图，目的基因D上有两个Pvu Ⅰ酶切位点和一个EcoR Ⅰ酶切位点，而EcoR Ⅰ酶切会破坏目的基因D的结构，因此应选用Pvu Ⅰ酶对其所在的DNA进行切割，利用PCR 技术扩增目的基因，需要根据基因D已知核苷酸序列合成引物，该技术的原理为DNA半保留复制。 【小问3详解】 在目的基因D上存在EcoR Ⅰ酶的切割位点，因此在基因工程的操作过程中，需要选出正向连接的重组质粒，应使用该酶切重组质粒，依题意和图甲、乙可知，由于目的基因D的长度为4.0 Kb，因此用质粒B构建的重组质粒的长度为4.0Kb+2.7Kb=6.7Kb，重组质粒被EcoR Ⅰ酶完全切割后，出现两个不同长度片段，若是正向连接（目的基因D上的EcoR Ⅰ酶切位点与质粒B上的EcoR Ⅰ酶切位点的距离最近），会得到0.2Kb+1.0Kb=1.2Kb和（2.7Kb+4.0 Kb）-1.2Kb=5.5Kb的两个片段。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二生物学 考生注意： 1.本试卷分选择题和非选择题两部分。满分100分，考试时间75分钟。 2.答题前，考生务必用直径0.5毫米黑色墨水签字笔将密封线内项目填写清楚。 3.考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；非选择题请用直径0.5毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。 一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 下列关于传统发酵技术及发酵工程的叙述，正确的是（　　） A. 泡菜坛装八成满，以防止发酵液溢出和菜料变质腐烂 B. 谷氨酸发酵过程中，在酸性条件下会积累谷氨酸，在弱碱性和中性条件下会形成谷氨酰胺 C. 啤酒生产过程中通常加入啤酒花以提供发酵的菌种 D. 为防止杂菌污染，菌液涂布均匀后需立即将平板倒置 2. 聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图如下。下列说法正确的是（ ） ①取湖水→②接种在培养基上→③培养→④挑取单菌落，分别扩大培养→⑤检测菌的数目和PHA的产量→⑥获得目标菌株 A. 步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上 B. 扩大培养时，接种后需要将培养基放入恒温箱倒置培养，以防杂菌污染 C. ④所用到的培养基应加入琼脂，以便挑取单菌落获得纯化菌株 D. 挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量 3. 下列是某同学分离高产脲酶菌的实验设计，不合理的是（ ） A. 选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株 B. 在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源 C. 适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落 D. 可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌 4. 与传统发酵相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量均明显提高。下列说法正确的是（　　） A. 传统发酵无需进行消毒、灭菌，而发酵工程需要消毒、灭菌 B. 发酵条件变化会影响微生物生长繁殖，但不影响其代谢途径 C. 发酵罐配套传感器实时监测和控制，通过反馈控制使发酵过程处于最佳状态 D. 发酵工程可获得大量微生物菌体并从菌体中提取单细胞蛋白 5. 青枯病是一种严重危害马铃薯的病害，茄子对青枯病具有一定抗病性。研究者通过植物体细胞杂交技术培育抗青枯病的马铃薯新品种，在获得的90个杂种植株中，有6个具有明显的青枯病抗性。下列相关叙述错误的是（　　） A. 通过灭活病毒诱导马铃薯原生质体与茄子原生质体融合，进一步筛选出杂种细胞 B. 杂种细胞中来自茄子的染色体随机丢失可能是部分杂种植株无明显抗病性的原因 C. 利用PCR 技术可以检测杂种植株中是否具有来自茄子的青枯病抗性基因 D. 茄子和马铃薯之间存在生殖隔离，不宜采用杂交育种的方法来培育抗病马铃薯 6. 利用植物组织培养技术获得红豆杉试管苗，有助于解决紫杉醇药源短缺问题。下列叙述正确的是（ ） A. 细胞分裂素和生长素的比例会影响愈伤组织的形成 B. 培养基先分装到锥形瓶，封口后用干热灭菌法灭菌 C. 芽原基细胞由于基因选择性表达，不能用作外植体 D. 紫杉醇不能通过细胞产物的工厂化生产来获取，植物组织培养优势明显 7. 细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域得到了广泛应用。下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（ ） A. 从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为传代细胞 B. 将特定基因或特定蛋白导入已分化的T细胞，可将其诱导形成iPS细胞 C. 将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合的细胞即为能分泌所需抗体的细胞 D. 采用胚胎分割技术克隆动物常选用桑葚胚或囊胚，因这两个时期的细胞未发生分化 8. 将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞，其过程如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A. ①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同 B. 体外培养杂交瘤细胞时需要置于含95%O2的培养箱中 C. ②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞 D. 抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性 9. 研究显示，约70%的小鼠体细胞核移植胚胎未能成功发育至囊胚期，且仅有约2%的胚胎移植到代孕母鼠后可正常发育。下列叙述错误的是（ ） A. 体细胞核进入去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚 B. 移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态 C. 胚胎移植到代孕母鼠后成活率低，可能是早期胚胎未能及时从滋养层内孵化 D. 为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植 10. 近年来，亚洲黑熊数量骤减，为此科研人员期望通过如图所示方法拯救亚洲黑熊。据此分析，以下说法正确的是（　　） A. 野生亚洲黑熊C的精子获能是指获得能量 B. 目前过程②普遍使用的去除细胞核的方法是梯度离心法 C. D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊A、野生亚洲黑熊B进行同期发情处理 D. 胚胎移植前将囊胚的内细胞团均等分割可提高胚胎利用率，后代E、F的性别可能不同 11. 关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”(实验I)和“DNA的粗提取与鉴定”(实验Ⅱ)的实验操作，下列相关叙述正确的是（ ） A. 实验I中，PCR实验所需的移液器、枪头、蒸馏水等必须进行高压灭菌处理 B. 实验I中，将扩增得到的PCR产物进行凝胶电泳，加样前应先接通电源 C. 实验Ⅱ中，取洋葱研磨液的上清液，加入等体积冷酒精后析出粗提取的DNA D. 实验Ⅱ中，将白色丝状物直接加入到二苯胺试剂中并进行沸水浴，用于鉴定DNA 12. 限制酶、DNA连接酶的发现为DNA分子的切割、连接及基因表达载体的构建创造了条件。下列关于重组DNA技术基本工具的叙述，正确的是（　　） A. 限制酶在原核细胞内的主要作用是切割修剪自身的DNA B. 噬菌体、动植物病毒均可作为载体将外源基因导入受体细胞 C. 用作载体的质粒分子上可以不含有限制酶切割位点 D. DNA连接酶可连接DNA分子两条链中碱基对之间的氢键 13. 如图是将目的基因导入大肠杆菌内制备“工程菌”的示意图，其中引物1—4在含有目的基因的DNA上的结合位置如甲图所示，限制酶BamHI、EcoRI、HindDI在质粒上的识别位点如乙图所示。以下说法中错误的是（　　） A. PCR过程完成4轮循环，理论上至少需加入引物30个 B. 若已经合成了甲图所示4种引物，应选择引物2和3扩增目的基因 C. 过程①中应使用限制酶BamHI切割质粒 D. 对于转化失败的大肠杆菌及其培养基应进行灭菌处理，以防其污染环境 二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 14. 在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列说法错误的是（　　） A. 平板划线法在每次划线前后灼烧接种环的目的都是防止杂菌污染 B. 稀释涂布平板法也可用于微生物的计数，有时也可以不稀释直接涂布 C. 两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度 D. 接种环在划线前后都需要灼烧，涂布器在接种前也需要灼烧，两种处理方法相同 15. 酥梨醋富含果胶、维生素以及多种矿物质等营养成分，具有开胃护肝、排毒养颜、减肥除脂等多种功效，是近年来的流行饮品。下列相关叙述正确的是（　　） A. 当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将酥梨汁中的糖分解成乙酸 B. 当缺少氧气时，醋酸菌将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸 C. 在酥梨醋发酵液中，液面处的醋酸菌密度高于瓶底处的密度 D. 随发酵时间的延长，发酵液中pH 先降低，后维持稳定 16. 我国科学家发现用体外受精胚胎的滋养层替换体细胞核移植胚胎的滋养层，能显著提升恒河猴体细胞核移植成功率，主要技术流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 体细胞核移植和体外受精都属于克隆 B. 图中进行核移植的卵母细胞需要去除纺锤体—染色体复合物 C. 为避免排斥反应，需要向植入重组囊胚的代孕猴注射免疫抑制剂 D. 滋养层细胞沿透明带内壁扩展，将来形成胎膜和胎盘的一部分 17. 研究发现，人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品。科学家将该蛋白基因导入山羊体内使其能够在山羊乳腺细胞中表达，从而从山羊乳汁中提取人溶菌酶。图1表示被限制酶切割后的该蛋白基因，图2表示培育流程。下列叙述正确的是（　　） A. 切割该蛋白基因的限制酶有2种，识别的序列可分别为-GGATCC-和-AAGCTT- B. ③过程是基因工程的核心步骤 C. ②过程常采用显微注射的方法 D. 转基因山羊乳腺细胞中检测到了hLZ基因的序列，说明目的基因在受体细胞中表达 18. 利用PCR 扩增下面DNA 分子，下列叙述正确的是（ ） 5'-TAAACTTCAGGGT……TGATTTGTTGACC-3' 3'-ATTTGAAGTCCCA……ACTAAACAACTGG-5' A. 其中一种引物的部分碱基序列应为3'-ATTTGAAGTCCCA -5' B. 变性时，在高温的作用下双链DNA 解聚为单链DNA C. 复性时，温度过低会导致PCR 扩增出多种DNA 片段 D. 复制n轮后，同时含有两种引物的子代DNA 分子有2n-2个 三、非选择题：本题共5 小题，共59分。 19. 土壤中95%的钾是不溶性钾，可供植物吸收利用的可溶性钾不超过全钾的2%。解钾菌是一种能将土壤中不溶性钾转化为可溶性钾的细菌。某研究小组从土壤中筛选出高效解钾菌制成生物菌肥。回答下列问题： （1）初筛解钾菌时，以去离子水反复冲洗的钾长石粉为唯一的钾源配制培养基，推测钾长石粉是______（填“可溶性钾”或“不溶性钾”），该培养基从功能上分类属于________培养基。 （2）为了解土壤中解钾菌的数量，称取10g土样按照图1进行操作，将接种后的平板置于适宜温度等条件下培养，菌落稳定后统计不同稀释度下的菌落数。过程a所用的接种方法为___________。据图计算，10g土样中含有的解钾菌数量为____个。此方法统计的解钾菌数量比实际的少，原因是____________。 （3）为进一步探索扩增某高效解钾菌的培养条件，小组成员探究相同条件下不同氮源对菌体细胞数目的影响，利用火焰分光光度仪测定菌体细胞的数目。测定结果如图2.实验中还需增加一组______做对照，来检测培养基是否彻底灭菌。图中的氮源作为探索条件不合理的是________，原因为__________。由实验结果可知，菌株生长最适氮源是________。 （4）将筛选出的高效解钾菌菌种扩大培养后与其他微生物一同添加到有机肥中制成微生物肥料，在农业生产中使用微生物肥料的作用是_________（答2点）。 20. 流程图是生物学研究中模型构建的一种表现形式。回答下列问题： （1）半夏是我国常用的传统中药材，经过Ⅰ、Ⅱ阶段产生半夏试管苗C。 ①若要快速繁殖有优良性状的半夏，所给细胞中不能作为外植体的是________（填“表皮细胞”“叶肉细胞”或“成熟筛管细胞”），在Ⅰ、Ⅱ阶段中发生基因选择性表达的是________阶段， A、B细胞中的蛋白质种类________（填“完全不”“不完全”或“完全”）相同。 ②若要培育半夏新品种，常常用射线、化学物质等处理图中的________（填“A”“B”或“C”），原因是_______。 （2）iPS 细胞增殖分化后能形成多种组织细胞，可用于多种疾病的治疗。科学家将4 种基因导入小鼠成纤维细胞后，经过________（填“Ⅰ”或“Ⅱ”）阶段的变化产生 iPS细胞，该过程类似于植物组织培养的________过程。科研人员已成功将Ⅱ型糖尿病病人的体细胞经重编程后诱导成iPS细胞，并定向分化为胰岛组织回植患者体内，科学家普遍认为 iPS 细胞的应用前景优于胚胎干细胞，原因是_________（答1点）。 （3）上述流程________（填“可以”或“不可以”）表示动物细胞培养技术的流程，理由是___________。 21. 某女性患有输卵管阻塞，该夫妇借助“试管婴儿”技术，一次生殖过程中生出两个孩子，如图所示。请分析回答下列问题。 （1）过程X若想顺利进行，首先来自父方的精子要进行________。 （2）若借助人工手段获得这样两个胎儿，需要用到的技术手段是胚胎分割，在分割囊胚阶段的胚胎时操作过程中需要将______________。 （3）________（生物技术）是甲、乙产生的最后一道工序。一般来说，该技术操作比较合适的时期是_______________ 。 （4）2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。“三亲婴儿”的培育过程可选用如下技术路线。 ①由于女性自然周期产生的卵子太少，捐献者在取卵前通常需要注射______激素，促使一次有更多的卵泡发育。 ②“三亲婴儿”的染色体来自_____（填细胞名称），这种生殖方式属于____（填“有性”或“无性”）生殖。 ③“三亲婴儿”的培育技术__（填“能”或“不能”）避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代。 22. 如图表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程，回答下列问题： （1）图中所示过程所用的生物技术有动物细胞培养和__________，将特定的抗原注入小鼠，需在一定时间内间隔注射3次以上，其目的是_________。 （2）将经免疫处理后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞的过程中，至少要进行两次筛选，一次是通过选择培养基（如HAT 培养基），该培养基对__________和_________生长具有抑制作用，从而筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过________检测，筛选出能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞。 （3）培养杂交瘤细胞的培养基中需加入动物血清，作用是________，提供气体条件CO2的作用是_________，杂交瘤细胞体外培养过程中，为避免细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，常采取的措施是_______。 （4）与采用传统的血清分离法得到的抗体相比，单克隆抗体的优点是______。 23. 苯丙酮尿症是单基因遗传病，科学家将正常基因D导入该病患者的细胞，以治疗该病。图甲为A、B、C三种质粒，图乙为含有目的基因D的DNA片段，图丙为重组载体的示意图。AmpR为氨苄青霉素抗性基因，Tet2为四环素抗性基因，LacZ为蓝色显色基因，其表达产物可以将无色化合物X-gal转化成蓝色物质，使菌落呈蓝色，EcoRⅠ（0.6 kb）、PvuⅠ（0.8kb）为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。回答下列问题： （1）基因工程操作的核心步骤是_______。图甲中三种质粒适宜作为载体的是质粒______，与另外两种质粒相比，其作为载体的优点是_______。 （2）获取目的基因D时对应选择图乙中的_______对其所在的DNA 进行切割。如果仅知道基因D首尾的部分核苷酸序列，需要根据基因D已知核苷酸序列合成_______，以便利用PCR 技术扩增目的基因，该技术的原理为_________。 （3）将目的基因D和图甲中相应质粒连接后，得到图丙中三种方式。为选出正向连接的重组质粒，使用______对质粒完全酶切后，进行电泳分析。若是正向连接载体，电泳图谱中出现长度为________kb和_______kb两条带。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $