安徽省滁州市南谯区安徽省滁州中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试卷

**基本信息** 涵盖传统发酵技术与现代生物科技，注重科学思维与探究实践的高二生物期中试卷，如杨梅酒醋制作分析、双特异性抗体制备等情境体现知识应用。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|15/45|传统发酵（第1题）、微生物培养（第2题）、基因工程（第12题）|基础概念辨析，如腐乳发酵原理、限制酶作用特点| |非选择题|5/55|发酵工程（16题）、细胞工程（17题）、基因工程（20题）|综合应用情境，如杨梅酒醋制作流程分析（探究实践）、限制酶选择与质粒构建（科学思维）|

滁州中学2024级高二下学期期中考试 生物答案 一、选择题（每题3分，共45分） 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 D D B D B D A B C B B B D B C 二、非选择题（共55分） 16.（11分，除说明外每空1分） (1)缺氧/呈酸性 重铬酸钾 少于 (2)细胞质基质 该温度下与果酒发酵相关的酶活性高，发酵速度快 (3)无菌氧气(或无菌空气)　（2分，缺“无菌”得1分） (4)有氧（2分） 营养物质的消耗 高浓度的酒精 17.（11分，除说明外每空1分） (1)脱分化 再分化 需要 消毒 (2)抑制 (3)生长素类调节剂的种类（而非含量） (4)（每个方框、括号各1分，共5分） 18.（11分，除说明外每空1分） (1)刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞 (2)克隆化培养 抗体（阳性）检测 (3)长春碱 B淋巴 与长春碱结合 与肿瘤细胞结合（两空答案顺序可颠倒） (4)蛋白质和脂质（2分，不全得1分） (5)双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在该位置杀死癌细胞（2分） 19.（11分，除说明外每空1分） (1)2n+1-2 3＇ 少 (2)激活DNA聚合酶 72 电泳 (3)F2和R1 （2分，不全不给分） F1和 R2（2分，不全不给分） （两空答案顺序可颠倒） (4)①④ 20.（11分，除说明外每空1分） (1)原核 黏性末端和平末端 Mfe Ⅰ和Hind III（2分，不全不给分） EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ（2分，不全不给分） (2)2 4 4 (3)5′ 学科网（北京）股份有限公司 $ 滁州中学2024级高二下学期期中考试 生物试卷 注意事项： 1. 答题前，务必在试题卷、答题卡规定的地方填写自己的姓名、座位号。 2. 答第Ⅰ卷时，每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。 一、选择题（本题共有15小题，每小题3分，共45分。给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求） 1.腐乳、酸菜等的制作属于传统发酵技术。下列叙述错误的是 A.传统发酵技术以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主 B.豆腐经酵母、毛霉等发酵后有机物种类增加，蛋白质含量减少 C.泡菜“咸而不酸”可能是因为盐水浓度过高，抑制乳酸菌发酵所致 D.某小组成功制得口味佳的泡菜，该过程中乳酸、乳酸菌、亚硝酸盐含量均先增后减 2.尿素容易保存，是目前使用量较大的一种化学氮肥，尿素分子并不能直接被农作物吸收，只有被尿素分解菌分解成氨之后才能被植物利用。下图是从土壤中分离、计数尿素分解菌的过程，①②过程稀释了10倍。有关分析正确的是 A.乙锥形瓶里盛有9mL无菌水 B.a、b、c培养基可以用牛肉膏蛋白胨培养基 C.③的接种方法可用平板划线法或稀释涂布平板法 D.若a、b、c培养基上的菌落数依次为57、58、56个，则10g土样中尿素分解菌数量约为5.7×109个 3.啤酒的工业化生产中，大麦经发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等工序后，最终过滤、调节、分装。下列说法错误的是 A.焙烤时利用高温杀死了大麦种子胚 B.酒精的产生主要在后发酵阶段进行 C.用赤霉素处理大麦，可使大麦种子无须发芽就能产生淀粉酶 D.包装后放置的啤酒变酸且产生表面菌膜，一般可从菌膜中分离得到醋酸菌 4.花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性，为获得具有抗病性状的花椰菜新品种，研究人员利用植物体细胞杂交技术进行培育，如图1所示。图2是利用蛋白质电泳技术分析了植株中某些特异性蛋白。下列有关说法正确的是 A.过程①需用胰蛋白酶处理花椰菜和紫罗兰细胞，获得原生质体 B.过程②获得的融合细胞染色体数目均为32条 C.花椰菜新品种是不可育的四倍体 D.植株4、5同时含两种植物的特有蛋白，是符合育种目标的杂种植株 5.紫杉醇是全球最重要的抗癌药物之一，某研究机构设计了如下两个路径来提取。有关叙述正确的是 A.紫杉醇属于次生代谢物，是植物基本的生命活动所必需的产物 B.通过途径一获得脱毒苗一般选用茎尖等顶端分生区作为外植体 C.路径二中使用胰蛋白酶能够有效地将细胞分散开，有利于悬浮培养 D.两个路径均通过植物组织培养获得紫杉醇，原理是植物细胞的全能性 6.培养基是供微生物、动植物细胞生长和维持所需的人工配制的营养基质。下列叙述正确的是 A.植物原生质体融合所用的培养基中必须加入PEG或Ca2+ B.动物细胞培养液中营养合理，培养过程中无需定期更换培养液 C.菊花植物组织培养的MS培养基是液体培养基，其中蔗糖可供能 D.以尿素为唯一氮源的培养基上生长的微生物不一定能分解尿素 7.动物细胞经原代培养后，往往要进行分瓶培养。下列叙述错误的是 A.分瓶培养收集细胞前均必须用酶将细胞分散开 B.分瓶培养时均可用离心法收集细胞 C.分瓶培养时均需将收集的细胞制成细胞悬液 D.分瓶培养的细胞均可能因细胞密度过大而分裂受阻 8.我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是 A.过程①中小分子化合物诱导成纤维细胞基因突变为iPS细胞 B.过程②“去核”的“核”其实是“纺锤体－染色体复合物” C.过程③中可使用具有感染能力的病毒来诱导细胞融合 D.组蛋白去甲基化和乙酰化均不利于重构胚后续的胚胎发育过程 9．“三亲婴儿”的培育过程的技术流程如图，下列相关叙述错误的是 A.该培育过程涉及动物细胞培养、细胞核移植等技术 B.该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 C.“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲的全部基因 D.体外受精前要对精子进行获能处理，将卵母细胞培养成熟 10.如图表示人体体内受精和胚胎发育的过程，①②③④表示相关生理过程。下列叙述错误的是 A.①过程中，次级卵母细胞完成减数分裂Ⅱ需要精子入卵的刺激 B.②过程中，受精卵在子宫中开始进行有丝分裂 C.图中的a可表示囊胚，b可表示原肠胚 D.透明带破裂后胚胎从中伸展出来的过程叫作孵化 11.通过多种方法获得的早期胚胎，均需经胚胎移植获得后代（注：下图试管动物通过体外受精获得）。下列相关叙述正确的是 A.胚胎移植前可取内细胞团的细胞进行性别鉴定 B.受体子宫对植入的胚胎一般不会发生免疫排斥 C.一般可选择原肠胚阶段的胚胎进行胚胎移植 D.图中获得的三种动物都能保持亲本的优良遗传特性 12.下图为不同限制酶识别的序列及切割位置（箭头所指），下列叙述错误的是 A.图示4种限制酶均不能够识别和切割单链RNA分子内的核苷酸序列 B.若DNA上的碱基随机排列，Not I限制酶切割位点出现频率较其他三种限制酶高 C.酶切时使用两种限制酶同时处理是为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化等情况 D.用酶Bgl II切出的目的基因与酶BamH I切割的质粒重组后，则连接处不能再被这两种酶切开 13.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的分析，正确的是 A.用蒸馏水使家兔的红细胞涨破，可获取富含DNA的滤液 B.研磨液在4℃下静置，主要目的是降低DNA分子的溶解度 C.用二苯胺试剂对粗提取的DNA进行鉴定时无需设置对照实验 D.研磨液中可加入DNA酶的抑制剂，以防细胞破碎后DNA酶降解DNA 14.某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata 3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata 3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。下列叙述正确的是 A.据甲图分析，进行PCR扩增时，引物1的模板为M链 B.2号条带的小鼠是Gata 3-GFP基因纯合子 C.Gata 3-GFP基因转录是以M链为模板 D.选用引物1和引物3进行PCR，能更好的区分杂合子和纯合子 15.为提高玉米中赖氨酸含量，科学家通过蛋白质工程将天冬氨酸激酶的第352位苏氨酸变成异亮氨酸，将二氢吡啶二羧酸合成酶的第104位天冬氨酸变成异亮氨酸。下列有关说法正确的是 A.直接改造上述两种蛋白质的空间结构 B.对指导上述两种酶合成的mRNA进行改造 C.对控制上述两种酶的基因碱基序列进行改造 D.利用诱变技术促使上述两种酶的基因突变 二、非选择题（本题共有5小题，共55分） 16.（11分）杨梅果实风味独特、酸甜适中，具有很高的营养和保健价值。图1是制作杨梅酒和杨梅醋的流程图。请回答下列问题： 图1 (1)传统发酵中，发酵液虽然未经过严格的灭菌处理，但杂菌却不能正常生长繁殖，这是由于果酒发酵时的______________（答1点）条件抑制了杂菌的生长。常用来检测酒精的化学试剂是____________。果醋发酵时，发酵液产生的气泡量明显___________（少于，多于）果酒发酵时。 (2)果酒制作过程中，酵母菌无氧呼吸产生酒精的场所是_____________，温度适宜时果酒发酵时间较短，原因是_______________________________。 (3)杨梅醋的发酵过程中，除必需的营养物质外，还需要往发酵液中持续地通入_______________________。 (4)如图2表示果酒发酵过程中，发酵液的糖度(葡萄糖的浓度)和酒精度(酒精浓度)随时间变化的曲线。发酵前24 h，糖度变化很小，酒精度上升很慢，其原因是此阶段酵母菌主要进行____________呼吸，大量增殖。96 h后酒精度和糖度的变化都趋于平缓，其原因是___________________、________________使酵母菌的代谢减弱而影响发酵。 图2 17.（11分）科研人员用拟南芥探索获得大量愈伤组织的途径。切取外植体时的损伤可促进内源生长素(LAA)合成并运输到受伤部位,诱导细胞分裂分化。因此，组织培养时常添加2,4-D、NAA等生长素类调节剂。含较高浓度2,4-D的培基(2,4-D-CIM)可促进愈伤组织增殖，但在实践中发现，2,4-D-CIM中的外植体脱分化形成愈伤组织延迟。为探究其原因，进行相关实验。 图1 图2 (1)外植体经_____________形成愈伤组织，经过_____________形成芽、根等器官，整个过程中__________（需要，不需要）更换培养基。为创造无菌无毒环境，需对外植体___________。 (2)检测不同培养基中叶片外植体细胞中IAA合成酶基因(YUC)的表达量，由图1结果可知:较高浓度2,4-D___________(填“促进”或“抑制”)IAA的合成。 (3)研究者推测，一定量IAA有利于愈伤组织的形成。为此，在2,4-D-CIM的基础上，再分别添加IAA、NAA,检测接种后外植体细胞IAA响应基因W1的表达情况，结果如图2所示，同时还测量了各组,结果显示其与W1基因相对表达量呈正相关,证明推测成立。增加两个NAA组是为了进一步确认影响愈伤组织形成的可能是的生长素类调节剂的________________。 (4)根据上述所有实验结果，在图3方框中填相关基因,括号中填“+”(表示促进)或“-”(表示抑制)，完善在愈伤组织形成和增殖过程中相关物质的关系模式图。 图3 18．（11分）双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题： (1)图1中①步骤注射癌胚抗原的目的是________________。 (2)对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行多次_______________和_______________，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 (3)如图1所示，杂交—杂交瘤细胞技术是单克隆杂交瘤细胞与经______________免疫的______________细胞进行了融合，目的是为了获得既能___________________________又能________________________的抗体。 (4)灭活病毒使细胞膜上的________________________________重新排布，进而使细胞发生融合。 (5)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是________________________________________________________。 19.（11分）PCR技术可用于基因工程中目的基因的获取、扩增和检测，请分析下列相关问题。 (1)理想状态下，一个DNA片段经过n轮PCR扩增所消耗的引物数量是___________个；耐高温的DNA聚合酶能与引物结合，并从引物的_______（3＇，5＇）端连接脱氧核苷酸；PCR过程中用到的引物在允许范围内片段越长，理论上扩增出来的非特异性片段（非目标片段）越__________（多，少）。 (2)PCR扩增缓冲液中Mg2+的作用是______________________，PCR的变性、复性、延伸三个阶段需调控到三个不同的温度，如94℃、55℃、72℃ ,其中     ℃时DNA聚合酶的活性较高。PCR的产物一般通过_________________来鉴定。 (3)科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测。构建重组质粒后，为了确定J基因连接到质粒中且插入方向正确（图1示插入方向正确），需进行 PCR 检测。若仅用一对引物，应选择图1中的引物对____________________或___________________。 图1 (4)如图2所示，在一段未知序列的突变体DNA片段中，插入了已知序列的T－DNA，要想对T－DNA两侧的未知序列进行测序，可用DNA连接酶将该DNA连接成环状后，再用引物_________（填序号）PCR扩增后测序。 图2 20.（11分）某真菌的W基因可编码一种高效降解纤维素的酶，已知乙图中W基因转录方向为从左往右。为使放线菌产生该酶，以图甲中质粒为载体，进行转基因。不同限制酶的识别序列及切割位点如下表所示。请回答下列问题： 限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ MfeⅠ KpmⅠ HindⅢ 识别序列及切割位点 5′-G↓GATCC-3′ 5′-G↓AATTC-3′ 5′-C↓AATTC-3′ 5′-GCTAC↓C-3′ 5′-A↓AGCTT-3′ (1)限制酶主要是从__________生物中分离纯化出来的。DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有_____________________________________两种形式。应使用限制酶____________________切割图甲中质粒，使用限制酶____________________切割图乙中含W基因的DNA片段，以获得能正确表达W基因的重组质粒。 (2)用上表中的限制酶将双链链状DNA分子中间的W基因切割下来，需要切割______处，断裂_______个磷酸二酯键，同时产生_______个黏性末端。请在图丙中标出EcoRⅠ切割后产生的一个末端的碱基组成。 图丙 (3)若PCR获取W基因时，该基因片段两端无任何限制酶的识别序列，则需在引物的______（3＇，5＇）端添加相关限制酶的识别序列。 高二下学期期中考试生物试卷第 1 页 共 7 页 学科网（北京）股份有限公司 $