内容正文:
细胞工程是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。
植物细胞工程
动物细胞工程
胚 胎 工 程
第1节 植物细胞工程
第2章 细胞工程
1.植物细胞工程的理论基础是什么?
2.什么是植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术?
3.怎样进行菊花的组织培养?
人教版选择性必修2
本节聚焦:
人教版选必修3
从古至今,我国人民都把兰花看作高洁、典雅的象征,很多人喜欢兰花。但是兰花种子通常发育不全,在自然条件下萌发率极低;传统分株繁殖的方法又存在繁殖周期长,繁殖率低等问题,如果靠自然繁殖,兰花的价格可想而知了。
从社会中来
讨论:
如何能让名贵的兰花大量、快速地繁殖,从而走入寻常百姓家呢?
利用植物组织培养技术可以大量、快速地培育兰花
探索新知1
一、植物组织培养技术的原理及条件(P34-35)
【任务1】请同学们自主阅读教材P34-35,回答下列问题:
1.什么是植物组织培养?
2.为什么植物细胞能培养成完整植物体(组培利用的原理)?
3.细胞具有全能性的根本原因是什么?细胞全能性的大小主要与什么相关?
4.在生物生长发育过程中,为什么不是所有的细胞都表现出全能性?
5.(依据概念)如何才能让已分化的细胞表现出全能性?
1.什么是植物组织培养?
2.为什么植物细胞能培养成完整植物体(组培利用的原理)?
3.细胞具有全能性的根本原因是什么?细胞全能性的大小主要与什么相关?
探索新知1
一、植物组织培养技术的原理及条件(P34-35)
植物细胞具有全能性
是指将离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。
细胞都含有控制该生物生长发育所需的全套遗传信息
一般与细胞分化程度呈负相关,分化程度越低,全能性越高
4.在生物生长发育过程中,为什么不是所有的细胞都表现出全能性?
5.(依据概念)如何才能让已分化的细胞表现出全能性?
探索新知1
一、植物组织培养技术的原理及条件(P34-35)
生物体内的细胞在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性的表达。
②一定的营养物质、植物激素
③适宜的培养条件(温度、pH、光照、无菌环境等)
①离体
探索新知2
二、植物组织培养技术过程(P35-37)
【任务2】以菊花的组织培养为例,请同学们阅读教材P35-37,回答下列问题:
6.(找茬小活动)找出并纠正下面植物组织培养过程
7.外植体为什么一般选取幼嫩细胞?
8.整个植物组织培养中,无菌操作有哪些?
9.什么是脱分化?愈伤组织的特点是什么?什么是再分化?
10.培养过程中,何时需要给予光照?为什么?
11.培养过程中,培养基是否需要更换?
探索新知2
二、植物组织培养技术过程(P35-37)
6.(找茬小活动)找出并纠正下面植物组织培养过程
7.外植体为什么一般选取幼嫩细胞?
因为幼嫩细胞的分化程度低,全能性易表达
外植体
愈伤组织
生芽、生根(胚状体)
试管苗
移栽
灭菌
脱分化
再分化
生长发育
接种
光 照
光 照
光 照
脱分化
8.整个植物组织培养中,无菌操作有哪些?
外植体
愈伤组织
生芽、生根(胚状体)
试管苗
移栽
消毒
再分化
生长发育
接种
不需光照
光 照
光 照
脱分化
生长发育
接种外植体,需要______________30S,然后无菌水清洗2-3次;再 用___________处理30min后,立即用无菌水清洗2-3次;
操作者、工作台需__________处理;
操作过程需要在__________________进行。
培养基、器械需要______处理;
灭菌
酒精消毒
酒精灯火焰旁
70%酒精消毒
5%次氯酸钠
探索新知2
二、植物组织培养技术过程(P35-37)
9.什么是脱分化?愈伤组织的特点是什么?什么是再分化?
脱分化:已经分化的细胞经过诱导,失去其特有的结构和功能,转变成未分化细胞的过程。
愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,高度液泡化的呈不定形状态的薄壁组织团块。
再分化:愈伤组织重新分化成芽、根等器官的过程。
愈伤组织
外植体
愈伤组织
生芽、生根(胚状体)
试管苗
移栽
消毒
再分化
生长发育
接种
不需光照
光 照
光 照
脱分化
生长发育
探索新知2
二、植物组织培养技术过程(P35-37)
外植体
愈伤组织
生芽、生根(胚状体)
试管苗
移栽
消毒
再分化
生长发育
接种
不需光照
光 照
光 照
脱分化
生长发育
愈伤组织诱导生芽、生根需要给予光照;
叶绿素合成需要光照,试管苗能够进行光合作用
10.培养过程中,何时需要给予光照?为什么?
11.培养过程中,培养基是否需要更换?
需要
探索新知2
二、植物组织培养技术过程(P35-37)
①号培养基成分:无机盐、水、琼脂、氮源
②号培养基成分:无机盐、水、琼脂、氮源、蔗糖
探究●实践
探究植物组织培养常用培养基的关键条件
小龙选①,认为植物细胞能光合作用合成有机物,不需额外添加有机物
小业选②,认为需要有机物
(提供碳源,维持渗透压)
P116
外植体用②号培养基培养,发现其无法脱分化,从而逐渐衰老,请分析原因?
探究●实践
探究植物组织培养常用培养基的关键条件
缺少植物激素(生长素、细胞分裂素)
P116,
诱导菊花愈伤组织的培养基:在MS培养基中加入BA(苄基腺嘌呤)和NAA(茶乙酸)质量浓度均为0.5mg/L
诱导菊花生芽的培养基:在MS培养基中加入BA和NAA质量浓度分别为2~3mg/L和0.02~0.3mg/L
诱导菊花生根的培养基:将上述MS培养基中NH4NO3等用量减半、并添加NAA或IAA(吲哚乙酸),质量浓度均为0.1mL
生根分芽均愈伤
细胞分裂素
生长素
芽分化
愈伤组织
根分化
1.接种3~4d后,检查外植体的生长情况,若发现有外植体被污染,试分析它们被污染的可能原因。
①培养基、接种工具灭菌不彻底;
②外植体消毒不彻底;
③操作过程不符合无菌操作要求等。
2.组织培养技术属于什么繁殖方法?优点是什么?
无性繁殖
快速繁殖优良性状
【任务3】组织培养实验结果分析与评价:
探索新知2
二、植物组织培养技术过程(P35-37)
探究·实践
探究·实践
探究·实践
探究·实践
练习与应用
金版P30
B
探究·实践
探究·实践
探究·实践
探究·实践
练习与应用
评价P13
3.下图表示培养“落地生根”新植株的两种方法,遗传信息相同的是( )
A.仅①② B.仅②③
C.仅①③ D.①②③
D
第10题涉及后面知识可不做
小 结
植物组织培养技术
离体
无菌
一定的营养、激素
适宜的外界条件(温度、pH、光照等)
脱分化
再分化
外植体
愈伤组织
根、芽或胚状体
新植株
光照
植物激素:主要是生长素和细胞分裂素
培养基
生长发育
创设情境
科学家希望培育出,地上结番茄和地下长马铃薯的“超级作物”。
能利用传统有性杂交方法能实现吗?为什么?
不能。因为两种生物之间存在着天然的生殖隔离
番茄-马铃薯(想象图)
探索新知3
三、植物体细胞杂交技术(P36-38)
A细胞
B细胞
愈伤组织
杂种植株
①
①
③
1.①是什么过程,利用什么方法?
2.②过程常用方法有哪些? 融合成功的标志是什么?若只考虑两两融合,融合细胞有几种,符合要求的是哪种?
3.③④过程分别是什么?
A原生质体
B原生质体
去除细胞壁;酶解法(纤维素酶、果胶酶)
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
②
④
【任务4】阅读教材P36—37与图2-4结合,思考并回答下列问题
移栽后的植株
物理法:
化学法:
电融合法、离心法等
聚乙二醇(PEG)融合法
高Ca2+—高pH融合法等
②
AB细胞融合
3
脱分化
再分化
易混概念
原生质体与原生质层
细胞壁
细胞膜
细胞质
液泡
细胞核
指的是脱去细胞壁的细胞。
动物细胞也可看作是原生质体。
原生质体
成熟植物细胞的细胞膜、液泡膜和介于这两层膜之间的细胞质。
原生质层
探索新知3
三、植物体细胞杂交技术(P36-38)
A细胞
B细胞
愈伤组织
杂种植株
①
①
③
A原生质体
B原生质体
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
②
④
【任务4】阅读教材P36—37与图2-4结合,思考并回答下列问题
移栽后的植株
脱分化
再分化
4.植物体细胞杂交技术涉及的技术手段有哪些?对应的原理是什么?
植物细胞融合技术
植物组织培养技术
(细胞膜的流动性)
(植物细胞的全能性)
探索新知3
三、植物体细胞杂交技术(P36-38)
A细胞
B细胞
愈伤组织
杂种植株
①
①
③
A原生质体
B原生质体
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
②
④
【任务4】阅读教材P36—37与图2-4结合,思考并回答下列问题
移栽后的植株
脱分化
再分化
5.植物体细胞杂交完成的标志是什么?
6.通过上述分析,概括植物体细胞杂交的概念?
培育成新植物体
将不同来源的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新植物体的方法。
探索新知3
三、植物体细胞杂交技术(P36-38)
A细胞
B细胞
愈伤组织
杂种植株
①
①
③
A原生质体
B原生质体
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
②
④
【任务4】阅读教材P36—37与图2-4结合,思考并回答下列问题
移栽后的植株
脱分化
再分化
7.番茄(2n=24),马铃薯(4n=48),用植物体细胞杂交得到的植株的染色体数目有多少? 此变异类型是什么?
8.假设能将两种植物进行有性杂交,则后代植株的染色体数是多少?
染色体变异
72条
36条
探索新知3
三、植物体细胞杂交技术(P36-38)
A细胞
B细胞
愈伤组织
杂种植株
①
①
③
A原生质体
B原生质体
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
②
④
【任务4】阅读教材P36—37与图2-4结合,思考并回答下列问题
移栽后的植株
脱分化
再分化
9.植物体细胞杂交技术和传统有性杂交技术相比的优点是什么?
10.P38最终“超级作物”没有如科学家所想象的生长,这是为什么?
打破生殖隔离,实现远缘杂交育种
杂种植株虽然有两个遗传物质,但这些遗传物质的表达相互干扰,不能有序表达
探索新知3
三、植物体细胞杂交技术(P36-38)
+
=
白菜
甘蓝
融合成功的实例
叶片长,呈长筒
叶片短圆,包裹成圆球形
叶片像甘蓝(短、圆、厚),但整体株型像白菜。如生长期短、耐热性强、易于贮藏
探究·实践
探究·实践
探究·实践
探究·实践
练习与应用
课本P38
1.下图是利用甲、乙两种植物的各自优势,通过植物细胞工程技术培育高产、耐盐的杂种植株的实验流程图。下列相关叙述错误的是 ( )
A
一、概念检测
A.进行a处理时能用胰蛋白酶
B.b是诱导融合后得到的杂种细胞
C.c是培养后得到的具有耐盐性状的幼芽
D.进行d选择时要将植株种在高盐环境中
2.科学家在制备原生质体时,有时使用蜗牛消化道提取液来降解植物细胞的细胞壁。据此分析,蜗牛消化道提取液中可能含有什么成分?
纤维素酶和果胶酶
¦ 科技探索之路 ¦
1902年,哈伯兰特(G.Haberlandt,1854一1945)提出了细胞全能性的理论,但相关的实验尝试没有成功。
1958年,斯图尔德(EC.Steward,1904一1993)等发现胡萝卜的体细胞可以分化为胚,为细胞全能性理论提供了强有力的支持。
1960年,科金(E.C.Cocking,1931)用真菌的纤维素酶分解番茄根的细胞壁,成功获得了原生质体。
1964年,古哈(S.Guha,1938-2007)等在培养毛曼陀罗的花药时,首次得到了由花药中的花粉粒发育而来的胚。
1971年,卡尔森(PS.Carlson,1944一2017)诱导烟草种间原生质体融合,获得了第一株体细胞种间杂种植株。
1974年,土壤农杆菌的Ti质粒被发现。之后,该质粒应用于植物分子生物学领域,促进了植物细胞工程与分子生物学技术紧密结合。
植物细胞工程
探究·实践
探究·实践
探究·实践
探究·实践
知识网络
复习巩固
植物细胞工程的基本技术
1.植物组织培养的过程:________________________________
原理:________________________________
2.植物体细胞杂交技术原理:__________________________________
诱导体细胞融合的方法:_________________________,完成的标志:________________________
植物体细胞杂交完成的标志:_______________________________
探索新知4
四、植物细胞工程的应用(P39-41)
资料1:甜叶菊是一种菊科植物,植株中所含甜菊糖的甜度是蔗糖的300倍左右,而它的热量却很低,所以它逐渐成为一些用糖行业欢迎的新糖源。甜叶菊的种子小,发芽率低,种子繁殖遗传性状不稳定;而扦插植株的根系弱,且需要原始材料多,这些
都会限制甜叶菊的生产。假
如你是某甜叶菊生产公司的
技术顾问,人,你如何解
决公司的甜叶菊繁育效率?
甜叶菊
1.快速繁殖
①快速繁殖(组培)依据的原理是什么?
②快速繁殖技术有什么优点?
③还有哪些应用实例?
植物细胞的全能性
①可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖;
②可以保持优良品种的遗传特性。
探索新知4
四、植物细胞工程的应用(P39-41)
资料2:马铃薯、草莓和香蕉等通常是用无性繁殖方式进行繁殖的。多代后,作物产量降低,品质变差。
2.作物脱毒
①为什么通过无性繁殖多代之后产量会下降?
②为什么要选取植物茎尖培养脱毒苗?
无性繁殖感染的病毒很容易传给后代,并且逐代积累,影响后代的产量和品质。
植物顶端分生区附近(如茎尖)的病毒极少,甚至无病毒。
探究·实践
探究·实践
探究·实践
探究·实践
学以致用
金版P37
B
探索新知4
四、植物细胞工程的应用(P39-41)
资料3:现有紫色非甜玉米(基因型AASuSu)和白色甜玉米(基因型aasusu)杂交得到F1(AaSusu)。
①若选用常规杂交育种,应该如何筛选出纯合的紫色甜玉米(基因型AAsusu),请你写出遗传图解?
②此方法筛选需要多少年?
③你有办法缩短育种年限吗?
P:
F1
紫色非甜玉米
AaSusu
紫色非甜玉米
AASuSu
×
白色甜玉米
aasusu
↓
↓
×
直至不发生性状分离
F2
A_Su_
A_susu
aaSu_
aasusu
A_susu
F3
×
筛选
×
筛选
一般需要经过5-6年的连续筛选
单倍体育种
探索新知4
四、植物细胞工程的应用(P39-41)
3.单倍体育种
【任务1】请阅读P40,了解单倍体育种过程。
花药
花粉
单倍体植株
离体培养
纯合二倍体
人工诱导染色体加倍
优良品种
选择
花药培养
诱导染色体加倍
二倍体植株
单倍体植株
二倍体植株
秋水仙素处理
植物组织培养
(纯合子)
F1(AaSusu)
P
F1
紫色非甜玉米
AaSusu
紫色非甜玉米
AASuSu
×
白色甜玉米
aasusu
↓
↓
×
至直纯合子
F2
A_Su_
A_susu
aaSu_
aasusu
A_susu
F3
×
筛选
×
筛选
杂交育种
配子:
ASu
Asu
aSu
asu
ASu
Asu
aSu
asu
秋水 仙素
AAsusu
aaSuSu
aasusu
AASuSu
P
紫色非甜玉米 AASuSu
×
白色甜玉米
aasusu
F1
紫色非甜玉米
AaSusu
第1年
单倍体幼苗:
纯合体:
第2年
↓
↓
单倍体育种
花药离体培养
探究·实践
探究·实践
探究·实践
探究·实践
学以致用
金版P38
B
探索新知4
四、植物细胞工程的应用(P39-41)
资料4:抗花叶病毒的甘蔗是利用植物的组织培养过程中,对愈伤组织进行射线处理而培育出的新品种。该突变体的示意图:
外植体
脱分化
愈伤组织
再分化
突变体
筛选培育
新品种
诱变处理
4.突变体的利用
①利用的原理?
②诱变处理产生的变异一定符合需要吗?为什么?
基因突变和植物细胞的全能性
不一定。因为突变是不定向的,所以需要处理大量实验材料。
探索新知4
四、植物细胞工程的应用(P39-41)
资料5:人参的主要有效成分是人参皂苷,它是一种
固醇类化合物,具有较高的抗肿瘤活性,与其他化疗
药物联合应用有协同作用。但野生人参资源较少,
且生长缓慢。我国科学家在1963年就成功地培育了
人参的组织,近年来又实现了利用细胞培养技术来
大量生产人参皂苷。
讨论:①人参皂苷属于人参组织细胞的哪一类代谢物?
②细胞产物的工厂化生产利用的植物细胞培养,什么是植物细胞培养?其与植物组织培养的区别是?
③用该方法生产细胞产物的优点?
时间短、产量多;不占用耕地,几乎不受季节、天气等的限制
次生代谢物
探索新知4
四、植物细胞工程的应用(P39-41)
项目 植物组织培养 植物细胞培养
过程
目的
原理
培养基
获得植物体
获得细胞产物
植物细胞的全能性
细胞增殖
固体培养基
液体培养基
探索新知4
四、植物细胞工程的应用(P39-41)
从紫草细胞中提取的紫草宁
具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性
红豆杉中提取的紫杉醇
具有高抗癌活性,已用于乳腺癌等癌症的治疗
其它成果的实例:
探究·实践
探究·实践
探究·实践
探究·实践
知识网络
外植体
愈伤组织
脱分化
芽、根
再分化
植物体
快速、大量繁殖
保持优良性状
快速繁殖
选分生区(茎尖)病毒极少,甚至无病毒
作物脱毒
纯合
二倍体
选择花粉
离体培养
单倍体
加倍
单倍体育种
原理:染色体变异;
优点:明显缩短育种年限
物理、化学因素诱导产生突变并进行筛选
突变体利用
细胞产物的工厂化生产:采用液体培养基,培养到愈伤组织,得到其代谢产物。
次生代谢物:不是生物生长所必需,一般在特定的组织或器官中,并在一定的环境和时间条件下才进行。
植物繁殖的新途径
作物新品种的培育
探究·实践
探究·实践
探究·实践
探究·实践
练习与应用
课本P42
1.运用植物细胞工程技术可以培育单倍体 植株和进行细胞产物的工厂化生产。判断下列相关表述是否正确。
(1)用花药培养得到单倍体植株需要用到植物组织培养技术。( )
(2)细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件,提高了单个细胞中次生代谢物的含量。( )
2.生产中培育香蕉脱毒苗常用的方法是( )
A.人工诱导基因突变 B.选择优良品种进行杂交
C.进行远缘植物体细胞杂交 D.取茎尖分生组织进行组织培养
一、概念检测
√
×
D
Lavf57.25.100
【例2】植物组织培养是在体外将植物组织细胞培养成一个完整植株的过程,如下图所示。下列相关叙述错误的是 ( )
A.甲和丙分别是脱分化和再分化
B.乙是愈伤组织,是通过离体的植物组织、器官或细胞经过细胞增殖与分化形成的
C.离体的植物细胞能培养成完整植株,是因为植物细胞具有全能性
D.丙过程的实质是基因的选择性表达
Lavf58.46.101
Lavf58.20.100
Bilibili VXCode Swarm Transcoder v0.2.53(gap_fixed:False)
Multimedia Cloud Transcode (cloud.baidu.com)
Content Adaptive Encoding 3.1
FormatFactory : www.pcfreetime.com
【例2】下图为培育甘蔗脱毒苗的两条途径。研究发现,经b过程获得的幼苗脱毒效果更好。下列叙述正确的是( )
A.带叶原基的芽与植物体其他组织中的病毒含量相同
B.可推测b过程的温度处理有利于组织中的病毒失去活性
C.过程c、d均属于再分化,所以培养基A和B各成分含量相同
D.图中获得的脱毒苗与原甘蔗苗相比细胞核遗传物质发生了改变
单倍体育种的过程
单倍体育种是植物育种的手段之一,即利用植物组织培养技术获得单倍体植株,再通过某种手段使染色体加倍,从而使植物恢复正常染色体数。单倍体是体细胞染色体数为本物种配子染色体数的生物个体。单倍体育种的过程如下图所示,请据图分析回答问题。
亲本F1花药单倍体植株
选择所需类型纯合子
(1)图中①②分别表示什么过程?①的目的是什么?
(2)③过程是指 ,常用的试剂是 。
(3)单倍体育种所依据的原理和涉及的生物学技术主要有哪些?
Lavf58.33.100
$