精品解析：山东日照一中2025-2026学年高二下学期第一次月考生物试题

2025-2026学年高二下学期第一次单元质量检测 生物学试题 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。 1. 约9000年前，我们的祖先就会利用微生物将谷物、水果等发酵成含酒精的饮料。如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化，下列说法正确的是（ ） A. 酿酒和制醋所用微生物都是能在有氧条件下存活的真核生物 B. 过程①和③分别发生在酵母菌细胞的线粒体基质和线粒体内膜上 C. 产生乙醇后进行过程④会产生一层菌膜是由醋酸菌大量繁殖所致 D. ④过程是生产果醋的唯一途径 2. 研究发现，优质酿酒酵母的选择，对啤酒的酿造品质至关重要。科研人员将新鲜的葡萄或土样，加入含富集培养基的锥形瓶中，放置在摇床上培养1d，进行不同浓度梯度稀释后，将样液涂布于YEPD平板培养基，获得多个单菌落。下列说法错误的是（ ） A. YEPD培养基应添加碳源、氮源等，并将pH调至碱性 B. YEPD培养基需通过湿热灭菌法进行严格灭菌 C. 富集培养基为液体培养基，摇床温度应在28℃下进行 D. 对获得的多个单菌落需进一步筛选，并对特定菌落进行纯化培养 3. 某种除草剂是一种含氮有机物，在水中溶解度低，在土壤中不易降解，长期使用会污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，按如图所示过程筛选能降解该除草剂的细菌，含一定量该除草剂的培养基不透明。下列说法错误的是（ ） A. 步骤Ⅱ和步骤Ⅲ均可获得降解该除草剂的细菌 B. 步骤Ⅱ需对接种环灼烧6次，划线时需从上一次的末端开始 C. Ⅲ中不能通过透明圈的大小直接反应细菌降解除草剂的能力 D. 步骤Ⅲ需先将涂布器灼烧灭菌再插入锥形瓶中蘸取适量菌液 4. 下列有关菊花组织培养的说法，错误的是（ ） A. 植物组织培养的理论基础是植物细胞具有全能性 B. 诱导形成愈伤组织过程中不需要光照，但再分化过程需要光照 C. 对外植体进行消毒时先用酒精后用次氯酸钠溶液依次处理 D. 培养基中生长素、细胞分裂素的浓度是影响该过程中植物细胞发育方向的关键因素 5. 自从人类创立农业开始，就未停止过对农作物的改良。某科研小组以某种二倍体农作物①、②（分别具有不同的优良性状）为亲本进行杂交，然后通过不同途径获得了新品种④、⑧、⑨、⑩，下列有关分析错误的是（　　） A. 与③→⑧相比，③→⑩过程的育种进程更快 B. ③→④过程能提高植物突变频率且能使植物出现新的基因 C. 用秋水仙素处理③或⑦植株刚萌发的种子，都是为了诱导染色体数目加倍 D. 图中⑥⑨⑩分别为四倍体、三倍体、二倍体 6. 苏云金杆菌是杀灭玉米螟的重要生物，灭蚊球孢菌具有杀灭蚊子的效能。科研人员将这两种菌的原生质体融合获得既能杀蚊又能杀螟的新菌株，过程如图。微生物原生质体的获得过程和植物体细胞杂交过程类似。下列说法错误的是（ ） A. 图中过程与植物体细胞杂交过程所依据的原理不完全相同 B. ①过程还可用电融合、离心等方法促进原生质体融合 C. 离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶 D. 获得的融合株染色体数目是两个亲本染色体数之和 7. Vero细胞是非洲绿猴肾细胞，易于培养，生物安全性高，对多种病毒的感染敏感，是很多病毒培养的理想基质。培养 Vero细胞能广泛地用于人和动物疫苗的生产，下列有关叙述错误的是（　　） A. 贴壁生长的细胞需用胰蛋白酶处理后再进行离心收集 B. 培养正常的 Vero细胞时，在培养瓶上可形成多层细胞 C. 定期更换培养基能及时去除代谢废物并提供营养物质 D. 培养动物细胞的气体环境中CO2的作用是维持培养液的pH 8. 水牛养殖是中国重要的农业产业之一。与传统繁殖方法相比，家畜胚胎工程技术可以挖掘动物的繁殖潜力，提升家畜种质资源质量。以下选项错误的是（ ） A. 取滋养层细胞进行DNA分析、选育优良品种，可以提升水牛种质资源 B. 注射促性腺激素促超数排卵和体外受精可以增加水牛胚胎数量 C. 胚胎移植使优良母畜免去了冗长的妊娠期，同时需要用免疫抑制剂处理代孕母畜 D. 同一胚胎分割产生的后代具有相同的遗传物质，是动物无性繁殖或克隆的方法之一 9. 下列有关细胞工程的叙述，正确的有（ ） ①植物体细胞杂交技术，能克服远缘杂交不亲和的障碍 ②动物细胞培养时不能用机械的方法将组织分散成单个细胞 ③利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体 ④受精完成的标志是雌雄原核融合 ⑤桑葚胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化” A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项 10. 科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，利用其乳腺生产人生长激素，为加速转基因奶牛的繁育，对此转基因奶牛进行克隆，过程如图所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. 细胞培养前，可采用酶解法将动物组织分散成单个细胞 B. 重组胚胎移植到代孕母牛体内之前不需要进行性别鉴定 C. 可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合 D. 将重组胚胎移到雌性奶牛体内，需要注射免疫抑制剂降低免疫排斥 11. 花椰菜容易遭受病菌侵害，形成病斑。紫罗兰具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种。利用流式细胞仪测定植物细胞的DNA含量，筛选出融合原生质体。下图是科研人员测定三种不同细胞的DNA含量，其中一种是融合细胞。以下叙述正确的是（　　） A. 通常在低渗溶液中利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体 B. C细胞是融合的细胞，包括同种细胞融合形成的和异种细胞融合形成的 C. 可直接诱导筛选出的杂种细胞再分化形成杂种植株 D. 利用植物体细胞杂交技术繁殖后代属于无性繁殖 12. 限制酶是基因工程中必需的工具之一，下图表示五种限制酶的识别序列及切割位点。下列关于限制酶的叙述，错误的是（　　） 限制酶 EcoRI BamHI Sau3AI Mfe I EcoRV 识别序列及切割位点 A. EcoR I和EcoR V切割DNA片段产生的末端分别为黏性末端和平末端 B. EcoR I和Mfe I切割产生的DNA片段能被E． coli DNA连接酶相连在一起 C. BamH I和Sau3A I切割产生的DNA片段，连接后一定能被BamH I切割 D. 以上五种限制酶均能识别双链DNA的特定序列，并切开特定部位的磷酸二酯键 13. 幽门螺杆菌（Hp）感染会引发胃炎、消化性溃疡等多种疾病。研究人员将Hp的Ipp20基因作为目的基因，用限制酶Xho I和Xba I切割，通过基因工程制备相应的疫苗，质粒及操作步骤如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A. Ipp20基因整合到大肠杆菌的DNA中属于基因重组 B. 基因表达载体导入之前，可用Ca2+处理大肠杆菌 C. 培养基A中添加了氯霉素，培养基B中添加了潮霉素 D. 能用来生产Hp疫苗的大肠杆菌在菌落3和5中 14. 自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）构建基因表达载体（如下图，Pme1、BamH1、Spe1、SacI为不同限制酶），通过农杆菌转化法导入白玫瑰中，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。下列说法错误的是（ ） A. 上述获得蓝色玫瑰的方案中无需转入能调控液泡pH的基因 B. 将sfp基因插入Ti质粒时使用的限制酶是BamHI C. 农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上 D. sfp和idgS基因表达时可能是以T-DNA的同一条链为模板进行转录 15. 利用某限制酶Ⅰ、酶Ⅱ对提取的莱茵衣藻某DNA进行单酶切和双酶切后的电泳结果，据此推测，下列叙述不正确的是（　　） A. 电泳时，核酸的移动方向是从负极到正极的 B. 莱茵衣藻某DNA最可能为环状DNA分子 C. 限制酶Ⅰ、酶Ⅱ的切点最长相距约600bp D. 两种限制酶在载体上识别的序列可能相同 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。 16. 桑葚玫瑰酒既融合了桑葚和玫瑰的果香、花香，又使其营养价值和功能活性增加，极大地满足人们的需求。图1为制作桑葚玫瑰酒的装置图；图2为不同桑葚汁与玫瑰质量比对花色苷含量、酒精度和感官评分（感官评分越高，品质越好）的影响。下列相关叙述正确的是（ ） A. 桑葚玫瑰酒发酵所用菌种的代谢类型与醋酸菌相同 B. 图1中排气口连接长而弯曲的胶管可避免其他微生物进入装置 C. 由图2可知，桑葚汁与玫瑰质量比对酒精度影响不大 D. 花色苷含量随桑葚汁与玫瑰质量比的增大而降低，质量比为4：1时酒的感官评分最高 17. 以纯化鉴定后的重组大肠杆菌RecQ解旋酶免疫小鼠（2n=40），融合免疫小鼠的脾细胞及骨髓瘤细胞（2n=62-68），筛选杂交瘤细胞，制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体（mAb），相关检测结果如图A、B所示。有关说法错误的是（　　） A. 重组大肠杆菌RecQ解旋酶可刺激相应B淋巴细胞增殖分化 B. 单克隆抗体的制备过程中需要进行2次筛选和2次抗原检测 C. 杂交瘤细胞在融合的过程中可能会发生染色体数目的丢失 D. 该mAb能特异性与RecQ解旋酶结合，在稀释度为1/1600时对RecQ解旋酶与DNA的结合抑制最大 18. 下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法错误的是（ ） A. ①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能 B. ②代表体外胚胎培养，该过程中细胞既进行有丝分裂也存在细胞分化 C. ③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育 D. ⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关 19. 为使玉米获得抗除草剂性状，科研人员进行了相关操作（如图所示）。含有内含子的报告基因不能在原核生物中正确表达，其正确表达产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列说法错误的是（ ） A. T-DNA可将基因G转移并整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上 B. 利用物质K和氨苄青霉素进行筛选1，可获得农杆菌的蓝色菌落 C. 利用物质K和除草剂进行筛选2，更易于获得抗除草剂的转基因植株 D. 培养基中细胞分裂素和生长素的浓度、比例都会影响植物细胞的发育方向 20. 某二倍体植物松散株型与紧凑株型是一对相对性状，控制该相对性状的基因为A/a。为研究控制该性状的基因，研究人员将一个紧凑株型的植株与纯合松散株型植株杂交，均为松散株型，中松散株型：紧凑株型=3∶1。研究得知，a基因由A基因内部插入一段序列而来（图1），研究人员设计了3条引物（P1～P3），位置如图1（→表示引物5′→3′方向）。以3个单株（甲、乙、丙）的DNA为模板，使用不同引物组合进行PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳结果分别为图2-A和2-B（图2-B中乙、丙电泳条带未标出）。不考虑PCR结果异常，下列说法正确的是（ ） A. 若a基因表达的肽链比A基因表达的肽链短，原因是插入导致转录提前终止 B. 图2-A中的条带代表a，丙单株无扩增条带的原因是其基因型为AA C. 图2-B使用的引物组合是P1、P2，乙、丙植株对应的条带均有两条 D. 使用图2-A中的引物组合扩增全部样本，有扩增条带松散株型：无扩增条带松散株型=2∶1 三、非选择题：本题共4小题，45分。 21. 我国是世界上啤酒的生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其工业化生产流程如下图所示。 发酵条件随啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。 （1）发酵工程一般包括菌种的选育、__________、培养基的配制、灭菌、_______、发酵罐内发酵、分离提纯产物等方面。 （2）在酿酒过程中常加入__________（填某种植物激素）以缩短大麦发芽的时间，从而减少有机物的消耗。焙烤阶段应注意控制温度，不能使__________失活。 （3）发酵过程可分为_____________、后发酵两个阶段，其中酵母菌繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在前一阶段完成。后一阶段要在低温_________的环境下储存一段时间才能形成澄清、成熟的啤酒。 （4）从发酵罐中取样装入甲瓶，初步估测甲瓶中酵母菌数量为3×106个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL用________稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过300个，则至少应将甲瓶的菌液稀释________________倍。 22. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合、所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题： 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 （1）过程②中将愈伤组织加入______酶去壁，对红豆杉和柴胡原生质体进行的A、B处理分别为______、______。 （2）③过程结束后，只有异源融合原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是______。 （3）过程④中，植物激素中的生长素和细胞分裂素是启动______、脱分化、再分化的关键激素。 （4）科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和 DNA 分子标记鉴定，结果如表所示。 后代植株类型 染色体数目、形态 DNA 分子标记鉴定 甲 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲 DNA片段 乙 12，形态与柴胡染色体相似 无红豆杉DNA片段 丙 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段和新的DNA 片段 由表可知，后代植株中______类型一定不是所需植株。科研人员推测：杂种植株细胞中某一方亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在，而是以DNA片段的方式整合进另一方亲本______（填“红豆杉”或“柴胡”）的染色体DNA 上，从而实现不对称杂交后的稳定遗传。 23. 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交一杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题： （1）制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的技术有_____和_____，对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行_____和_____，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 （2）图2方框内至少需要经过_____次筛选，才能获取单克隆杂交-杂交瘤细胞。单克隆杂交-杂交瘤细胞在体外培养时，需要满足的条件是充足的营养，_____的环境，适宜的温度、pH和渗透压以及适宜的气体环境等，气体环境应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_____。 （3）临床试验发现，从小鼠腹水中提取抗体具有外源性，直接注入人体治疗效果大大降低。因此鼠源性的双特异性单克隆抗体在注射到人体前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低_____。 （4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是_____。 24. 为了将某纳米抗体和增强型绿色荧光蛋白基因融合表达，运用重组酶技术构建质粒，如图1所示。请回答下列问题: （1）分别进行PCR扩增F1片段与F2片段时，配制的两个反应体系中不同的有______________。 （2）有关基因序列如图2，引物F2-F、F1-R序列可能为________。 A. 5′ATGGTG……CAACCA3′ B. 5′TGGTTG……CACCAT3′ C. 5′GACGAG……CTGCAG3′ D. 5′CTGCAG……CTCGTC3′ （3）将PCR产物片段与线性质粒载体混合后，在重组酶作用下可形成环化质粒，直接用于转化细菌。这一过程与传统重组质粒构建过程相比，无需使用的酶主要有________________________。 （4）转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选，下列叙述错误的有________。 A. 稀释涂布平板需控制每个平板30～300个菌落 B. 抗性平板上未长出菌落的原因一般是培养基温度太高 C. 抗性平板上常常会出现大量杂菌形成的菌落 D. 抗性平板上长出的单菌落无需进一步划线纯化 （5）为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计，用不同菌落的质粒为模板，用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩增，质粒P1-P4的扩增产物电泳结果如图3。根据图中结果判断，可以舍弃的质粒有________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年高二下学期第一次单元质量检测 生物学试题 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。 1. 约9000年前，我们的祖先就会利用微生物将谷物、水果等发酵成含酒精的饮料。如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化，下列说法正确的是（ ） A. 酿酒和制醋所用微生物都是能在有氧条件下存活的真核生物 B. 过程①和③分别发生在酵母菌细胞的线粒体基质和线粒体内膜上 C. 产生乙醇后进行过程④会产生一层菌膜是由醋酸菌大量繁殖所致 D. ④过程是生产果醋的唯一途径 【答案】C 【解析】 【分析】1、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵。2、醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；最佳温度是在30℃～35℃。 【详解】A、酿酒所需菌种是酵母菌，是真核生物，而醋酸菌好氧型细菌，属于原核生物，A错误； B、过程①是呼吸作用第一阶段，场所是细胞质基质，③包括有氧呼吸第二阶段和第三阶段，场所是线粒体基质和线粒体内膜，B错误； C、醋酸菌是好氧菌，产生乙醇后进行过程④醋酸发酵会产生一层菌膜，是由醋酸菌大量繁殖所致，C正确； D、醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）转化为乙醛，再将乙醛转化为成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸，故④过程不是生产果醋的唯一途径，D错误。 故选C。 2. 研究发现，优质酿酒酵母的选择，对啤酒的酿造品质至关重要。科研人员将新鲜的葡萄或土样，加入含富集培养基的锥形瓶中，放置在摇床上培养1d，进行不同浓度梯度稀释后，将样液涂布于YEPD平板培养基，获得多个单菌落。下列说法错误的是（ ） A. YEPD培养基应添加碳源、氮源等，并将pH调至碱性 B. YEPD培养基需通过湿热灭菌法进行严格灭菌 C. 富集培养基为液体培养基，摇床温度应在28℃下进行 D. 对获得的多个单菌落需进一步筛选，并对特定菌落进行纯化培养 【答案】A 【解析】 【分析】制作培养基的基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板，故制备实验所需的培养基时，在各成分都溶化后、分装前，要进行的是调pH和灭菌。 【详解】A、配制培养基时需要加入碳源、氮源，但酵母菌适宜在弱酸性环境中生长，需要将将pH调至弱酸性，A错误； B、培养基常用的灭菌方法为湿热灭菌（高压蒸汽灭菌法），B正确； C、富集培养基放在锥形瓶中，说明其为液体培养基；酵母菌的适宜生长温度为28℃，应将摇床温度应在28℃下进行，C正确； D、获得单菌落后需进一步筛选和纯化，从而分离出纯培养物，D正确。 故选A。 3. 某种除草剂是一种含氮有机物，在水中溶解度低，在土壤中不易降解，长期使用会污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，按如图所示过程筛选能降解该除草剂的细菌，含一定量该除草剂的培养基不透明。下列说法错误的是（ ） A. 步骤Ⅱ和步骤Ⅲ均可获得降解该除草剂的细菌 B. 步骤Ⅱ需对接种环灼烧6次，划线时需从上一次的末端开始 C. Ⅲ中不能通过透明圈的大小直接反应细菌降解除草剂的能力 D. 步骤Ⅲ需先将涂布器灼烧灭菌再插入锥形瓶中蘸取适量菌液 【答案】D 【解析】 【分析】微生物常用的接种方法‌： 1、平板划线法‌：这是最常用的接种方法之一。通过在固体培养基表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，使微生物在琼脂平板表面分散开来，形成单个菌落，从而达到分离纯种的目的‌； 2、稀释涂布平板法‌：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落‌，可以对微生物进行数量统计。 【详解】A、步骤Ⅱ是平板划线法，步骤Ⅲ是稀释涂布平板法，二者都能将微生物分离，均可获得降解该除草剂的细菌，A正确； B、步骤 Ⅱ 平板划线法，每次划线后接种环灼烧是为了杀死残留细菌，划线时需从上一次的末端开始，这样能逐步稀释细菌，获得单菌落，图中Ⅱ划线5个区域，接种环需要灼烧灭菌6次，即需要在接种前后以及每次划线前都需要灼烧接种环，B 正确； C、Ⅲ中有透明圈的菌落是以该除草剂作为氮源的，透明圈/菌落面积比值越大说明其降解效果越好，因此不能通过透明圈的大小直接反应细菌降解除草剂的能力，C正确； D、步骤Ⅲ为稀释涂布平板法，需先将适量菌液滴在培养基上，涂布器灼烧灭菌冷却后，再进行涂布，D错误。 故选D。 4. 下列有关菊花组织培养的说法，错误的是（ ） A. 植物组织培养的理论基础是植物细胞具有全能性 B. 诱导形成愈伤组织过程中不需要光照，但再分化过程需要光照 C. 对外植体进行消毒时先用酒精后用次氯酸钠溶液依次处理 D. 培养基中生长素、细胞分裂素的浓度是影响该过程中植物细胞发育方向的关键因素 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育形成植株。 【详解】A、已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能，植物细胞的全能性是植物组织培养技术的理论基础之一，A正确； B、外植体脱分化形成愈伤组织的过程一般不需要光照，但愈伤组织再分化形成胚状体的过程需要光照，B正确； C、植物组织培养时外植体用流水充分清洗后用体积分数为70%的酒精消毒30s，用无菌水清洗2-3次，再用次氯酸钠溶液处理30分钟，立即用无菌水清洗2-3次，C正确； D、生长素和细胞分裂素的浓度和比例等会影响植物细胞的发育方向，是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，D错误。 故选D。 5. 自从人类创立农业开始，就未停止过对农作物的改良。某科研小组以某种二倍体农作物①、②（分别具有不同的优良性状）为亲本进行杂交，然后通过不同途径获得了新品种④、⑧、⑨、⑩，下列有关分析错误的是（　　） A. 与③→⑧相比，③→⑩过程的育种进程更快 B. ③→④过程能提高植物突变频率且能使植物出现新的基因 C. 用秋水仙素处理③或⑦植株刚萌发的种子，都是为了诱导染色体数目加倍 D. 图中⑥⑨⑩分别为四倍体、三倍体、二倍体 【答案】C 【解析】 【详解】A、与③→⑧相比，③→⑩过程属于单倍体育种，其最明显的优点就是明显缩短育种年限，A正确； B、③到④过程发生多次射线处理种子，属于诱变育种，原理是基因突变，能提高植物突变频率且能使植物出现新的基因，B正确； C、⑦植株是单倍体植株，高度不育，不会产生种子，C错误； D、图中⑥是多倍体育种的植株，⑨是四倍体和二倍体杂交的植株，⑩是单倍体育种的结果，分别为四倍体、三倍体、二倍体（秋水仙素加倍），D正确。 6. 苏云金杆菌是杀灭玉米螟的重要生物，灭蚊球孢菌具有杀灭蚊子的效能。科研人员将这两种菌的原生质体融合获得既能杀蚊又能杀螟的新菌株，过程如图。微生物原生质体的获得过程和植物体细胞杂交过程类似。下列说法错误的是（ ） A. 图中过程与植物体细胞杂交过程所依据的原理不完全相同 B. ①过程还可用电融合、离心等方法促进原生质体融合 C. 离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶 D. 获得的融合株染色体数目是两个亲本染色体数之和 【答案】D 【解析】 【分析】图中①为诱导苏云金杆菌和灭蚊球孢菌的原生质体融合的过程，②为筛选杂种融合体。 【详解】A、去除细菌细胞壁和植物细胞的细胞壁都可以用酶解法，但所用酶的种类不同；图中为细菌细胞的杂交过程，与植物体细胞杂交过程相比，诱导融合的方法不完全相同；图中过程与植物体细胞杂交所依据的原理均有细胞膜具有一定的流动性，但植物体细胞杂交还利用了植物细胞具有全能性的原理，将杂种细胞培育为杂种植物，A正确； B、①过程是诱导原生质体的融合，除用PEG外，还可用电融合、离心等方法促进原生质体融合，B正确； C、溶菌酶可以溶解细菌的细胞壁，离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解细菌的细胞壁以获得原生质体，C正确； D、筛选到的融合株是有两个亲本融合而成的，两亲本细胞均是原核细胞，不具有染色体，D错误。 故选D。 7. Vero细胞是非洲绿猴肾细胞，易于培养，生物安全性高，对多种病毒的感染敏感，是很多病毒培养的理想基质。培养 Vero细胞能广泛地用于人和动物疫苗的生产，下列有关叙述错误的是（　　） A. 贴壁生长的细胞需用胰蛋白酶处理后再进行离心收集 B. 培养正常的 Vero细胞时，在培养瓶上可形成多层细胞 C. 定期更换培养基能及时去除代谢废物并提供营养物质 D. 培养动物细胞的气体环境中CO2的作用是维持培养液的pH 【答案】B 【解析】 【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、贴壁生长的细胞需用胰蛋白酶处理成为单个细胞后，再进行离心收集，A正确； B、培养正常的 Vero细胞时会出现接触抑制现象，不会形成多层细胞，B错误； C、代谢产物积累会导致细胞生长受阻，定期更换培养基能及时去除代谢废物并提供营养物质，C正确； D、培养动物细胞的气体环境中CO2的作用是维持培养液的pH，故动物细胞培养时的气体条件是95%的空气＋5%的CO2，D正确。 故选B。 8. 水牛养殖是中国重要的农业产业之一。与传统繁殖方法相比，家畜胚胎工程技术可以挖掘动物的繁殖潜力，提升家畜种质资源质量。以下选项错误的是（ ） A. 取滋养层细胞进行DNA分析、选育优良品种，可以提升水牛种质资源 B. 注射促性腺激素促超数排卵和体外受精可以增加水牛胚胎数量 C. 胚胎移植使优良母畜免去了冗长的妊娠期，同时需要用免疫抑制剂处理代孕母畜 D. 同一胚胎分割产生的后代具有相同的遗传物质，是动物无性繁殖或克隆的方法之一 【答案】C 【解析】 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、从囊胚中取滋养层细胞做DNA分析、选育优良品种，可以提升水牛种质资源，A正确； B、用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理，以获得大量卵母细胞，再通过体外受精可以增加水牛胚胎数量，B正确； C、受体母畜的生殖道对于植入的具有抗原性质的胚胎，一般来说，在同一物种之内并不产生排斥现象，因此不需要使用免疫抑制剂处理代孕母畜，C错误； D、同一胚胎分割产生的后代具有相同的遗传物质，是动物无性繁殖或克隆的方法之一，D正确。 故选C。 9. 下列有关细胞工程的叙述，正确的有（ ） ①植物体细胞杂交技术，能克服远缘杂交不亲和的障碍 ②动物细胞培养时不能用机械的方法将组织分散成单个细胞 ③利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体 ④受精完成的标志是雌雄原核融合 ⑤桑葚胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化” A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项 【答案】B 【解析】 【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。 【详解】①植物体细胞杂交技术，能克服远缘杂交不亲和的障碍，①正确； ②在进行细胞培养时，将动物组织分散成单个细胞，可采用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间，②错误； ③制备单克隆抗体的过程利用了动物细胞培养技术和细胞融合技术，③正确； ④雌雄原核融合是受精完成的标志，④正确； ⑤囊胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化”⑤错误； 综上，①③④正确，共3项正确，B正确，ACD错误。 故选B。 10. 科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，利用其乳腺生产人生长激素，为加速转基因奶牛的繁育，对此转基因奶牛进行克隆，过程如图所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. 细胞培养前，可采用酶解法将动物组织分散成单个细胞 B. 重组胚胎移植到代孕母牛体内之前不需要进行性别鉴定 C. 可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合 D. 将重组胚胎移到雌性奶牛体内，需要注射免疫抑制剂降低免疫排斥 【答案】D 【解析】 【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。 【详解】A、在进行细胞培养时，取材的动物组织可以用机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理一段时间，将组织分散成单个细胞，A正确； B、对转基因奶牛进行克隆，供核奶牛细胞来自雌性奶牛，所以重组胚胎是雌性，不需要进行性别鉴定，B正确； C、可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合，供体核进入卵母细胞形成重构胚，C正确； D、在胚胎移植过程中，供体牛的早期胚胎被植入代孕牛体内，代孕牛通常不会对移植的胚胎产生免疫排斥反应，因此一般不需要对代孕牛注射免疫抑制剂，D错误。 故选D。 11. 花椰菜容易遭受病菌侵害，形成病斑。紫罗兰具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种。利用流式细胞仪测定植物细胞的DNA含量，筛选出融合原生质体。下图是科研人员测定三种不同细胞的DNA含量，其中一种是融合细胞。以下叙述正确的是（　　） A. 通常在低渗溶液中利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体 B. C细胞是融合的细胞，包括同种细胞融合形成的和异种细胞融合形成的 C. 可直接诱导筛选出的杂种细胞再分化形成杂种植株 D. 利用植物体细胞杂交技术繁殖后代属于无性繁殖 【答案】D 【解析】 【详解】A、为避免去壁的原生质体吸水胀破，不能在低渗溶液中用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞，A错误； B、C细胞的DNA含量大约是200，A细胞是50，B细胞是150，C细胞DNA含量是A细胞与B细胞DNA含量之和，C最可能是A细胞与B细胞融合后的杂种细胞，B错误； C、筛选出的杂种细胞需脱分化形成愈伤组织后才能经诱导再分化形成杂种植株，C错误； D、通过植物体细胞杂交技术繁殖后代，没有生殖细胞参与生殖，属于无性繁殖，D正确。 12. 限制酶是基因工程中必需的工具之一，下图表示五种限制酶的识别序列及切割位点。下列关于限制酶的叙述，错误的是（　　） 限制酶 EcoRI BamHI Sau3AI Mfe I EcoRV 识别序列及切割位点 A. EcoR I和EcoR V切割DNA片段产生的末端分别为黏性末端和平末端 B. EcoR I和Mfe I切割产生的DNA片段能被E． coli DNA连接酶相连在一起 C. BamH I和Sau3A I切割产生的DNA片段，连接后一定能被BamH I切割 D. 以上五种限制酶均能识别双链DNA的特定序列，并切开特定部位的磷酸二酯键 【答案】C 【解析】 【详解】A、根据酶切位点，EcoRI和EcoRV切割DNA片段产生的末端分别为黏性末端和平末端，A正确； B、根据表格中EcoRI和MfeI的识别序列和切割位点可知，EcoRI和MfeI切割产生的DNA片段能被EcoliDNA连接酶相连在一起，B正确； C、BamHⅠ切割G↓GATCC，Sau3AⅠ切割↓GATC，故二者切割后产生的黏性末端是相同的，因此二者切割后产生的黏性末端能够相连，连接后仍然存在GATC的序列，能被Sau3AⅠ切割，但是BamHⅠ不一定能切割，C错误； D、限制酶具有专一性，以上五种限制酶均能识别双链DNA的特定序列，并切开特定部位的磷酸二酯键，D正确。 13. 幽门螺杆菌（Hp）感染会引发胃炎、消化性溃疡等多种疾病。研究人员将Hp的Ipp20基因作为目的基因，用限制酶Xho I和Xba I切割，通过基因工程制备相应的疫苗，质粒及操作步骤如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A. Ipp20基因整合到大肠杆菌的DNA中属于基因重组 B. 基因表达载体导入之前，可用Ca2+处理大肠杆菌 C. 培养基A中添加了氯霉素，培养基B中添加了潮霉素 D. 能用来生产Hp疫苗的大肠杆菌在菌落3和5中 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： 1.目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 2.基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 3.将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 【详解】A、基因重组是指控制不同性状的基因发生重新组合，主要发生在有性生殖过程中，但通过基因工程将不同来源的 DNA 拼接，可以赋予生物新的遗传特性，也属于基因重组的范畴，故利用基因工程将Ipp20基因整合到大肠杆菌的DNA中属于基因重组，A正确； B、原核细胞作为受体细胞时，可用Ca2+处理受体细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，更容易将基因表达载体导入其中，B正确； CD、该过程使用了限制酶 Xho I和Xba I切割质粒和Ipp20基因，结合图示可知，在构建目的基因表达载体的过程中氯霉素抗性基因被切割掉，保留了潮霉素抗性基因，不管是正常质粒还是重组质粒都含有潮霉素抗性基因，但只有正常质粒才同时含有氯霉素抗性基因，因此，可以先用含有潮霉素的培养基A筛选出导入正常质粒、重组质粒的大肠杆菌，再采用同位影印接种到含有氯霉素的培养基B和含有潮霉素的培养基A中，此时含有重组质粒的大肠杆菌不能在含有氯霉素的培养基 B上生长，从而与培养基A（对照）相比会消失一些菌落，对照两个平板上减少的菌落就是符合要求的大肠杆菌菌落，结合图示可知，符合要求的大肠杆菌菌落是3和5，C错误，D正确。 故选C。 14. 自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）构建基因表达载体（如下图，Pme1、BamH1、Spe1、SacI为不同限制酶），通过农杆菌转化法导入白玫瑰中，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。下列说法错误的是（ ） A. 上述获得蓝色玫瑰的方案中无需转入能调控液泡pH的基因 B. 将sfp基因插入Ti质粒时使用的限制酶是BamHI C. 农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上 D. sfp和idgS基因表达时可能是以T-DNA的同一条链为模板进行转录 【答案】D 【解析】 【分析】由图可知，将sfp基因插入Ti质粒时若使用的限制酶是PmeI和BamHI，则会将终止子一同切除，故只能用BamHI；将idgS基因插入Ti质粒时可用SpeI和SacI以避免产生的黏性末端环化，增加构建成功的概率。 【详解】A、靛蓝能够稳定显色，不受pH的影响，故本题方案中无需转入能调控液泡pH的基因，A正确； B、将sfp基因插入Ti质粒时若使用的限制酶是PmeI和BamHI，则会将终止子一同切除，故只能用BamHI，B正确； C、将目的基因导入植物细胞可采用农杆菌转化法，故农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上，C正确； D、sfp和idgS基因具有各自的启动子，表达是相互独立进行的，转录是以DNA的一条链为模板进行的，由启动子方向可知：两基因转录的模板不同，D错误。 故选D。 15. 利用某限制酶Ⅰ、酶Ⅱ对提取的莱茵衣藻某DNA进行单酶切和双酶切后的电泳结果，据此推测，下列叙述不正确的是（　　） A. 电泳时，核酸的移动方向是从负极到正极的 B. 莱茵衣藻某DNA最可能为环状DNA分子 C. 限制酶Ⅰ、酶Ⅱ的切点最长相距约600bp D. 两种限制酶在载体上识别的序列可能相同 【答案】D 【解析】 【分析】限制酶是识别特定的核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。 【详解】A、据图可知，上端是点样位点，是负极，所以电泳时，核酸的移动方向是从负极到正极，A正确； B、由题意可知，只用一种限制酶进行酶切时产生一种长度的DNA片段，莱茵衣藻某DNA最可能为环状DNA分子，B正确； C、两种酶切时会产生600bp和200bp长度的DNA片段，由此可知，限制酶Ⅰ、酶Ⅱ的切点最长相距约600bp，最短相距约200bp，C正确； D、 如果两种限制酶在载体上识别序列相同，两种酶切时与一种酶切产生结果应该相同，据图可知并不相同，D错误。 故选D。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。 16. 桑葚玫瑰酒既融合了桑葚和玫瑰的果香、花香，又使其营养价值和功能活性增加，极大地满足人们的需求。图1为制作桑葚玫瑰酒的装置图；图2为不同桑葚汁与玫瑰质量比对花色苷含量、酒精度和感官评分（感官评分越高，品质越好）的影响。下列相关叙述正确的是（ ） A. 桑葚玫瑰酒发酵所用菌种的代谢类型与醋酸菌相同 B. 图1中排气口连接长而弯曲的胶管可避免其他微生物进入装置 C. 由图2可知，桑葚汁与玫瑰质量比对酒精度影响不大 D. 花色苷含量随桑葚汁与玫瑰质量比的增大而降低，质量比为4：1时酒的感官评分最高 【答案】BCD 【解析】 【分析】果酒制作所需微生物是酵母菌，代谢类型为异养兼性厌氧型；果醋制作所需微生物是醋酸菌，代谢类型为异养需氧型。 【详解】A、桑葚玫瑰酒发酵利用的菌种是酵母菌，其代谢类型是异养兼性厌氧型，醋酸菌是异养好氧型细菌，A错误； B、图1中排气口连接长而弯曲的胶管可避免空气中其他微生物进入装置，避免污染，B正确； C、由图2可知，桑葚汁与玫瑰质量比对酒精度影响不大，C正确； D、由图2可知，花色苷含量随着桑葚汁与玫瑰质量比的增大而降低，桑葚汁和玫瑰最佳质量比为4：1，此时酒的感官评分最高，D正确。 故选BCD。 17. 以纯化鉴定后的重组大肠杆菌RecQ解旋酶免疫小鼠（2n=40），融合免疫小鼠的脾细胞及骨髓瘤细胞（2n=62-68），筛选杂交瘤细胞，制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体（mAb），相关检测结果如图A、B所示。有关说法错误的是（　　） A. 重组大肠杆菌RecQ解旋酶可刺激相应B淋巴细胞增殖分化 B. 单克隆抗体的制备过程中需要进行2次筛选和2次抗原检测 C. 杂交瘤细胞在融合的过程中可能会发生染色体数目的丢失 D. 该mAb能特异性与RecQ解旋酶结合，在稀释度为1/1600时对RecQ解旋酶与DNA的结合抑制最大 【答案】BD 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备：制备产生抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，克隆化培养和抗体检测，将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；提取单克隆抗体。 【详解】A、重组大肠杆菌RecQ解旋酶相当于抗原，能刺激机体产生相应的体液免疫，因此，重组大肠杆菌RecQ解旋酶可刺激B细胞增殖分化为浆细胞和记忆B细胞，A正确； B、单克隆抗体的制备过程中需要进行2次筛选和1次抗原检测，第一次是用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次是通过克隆化培养和抗体检测，进一步筛选出能产生人们所需要抗体的杂交瘤细胞，B错误； C、融合后的染色体数为两者之和，在102到108之间，图中染色体数为80到108之间，因此，融合过程中染色体数存在丢失现象，C正确； D、由图B可知，1/800时，RecQ解旋酶与DNA结合活性最低，抑制效果最好，D错误。 故选BD。 18. 下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法错误的是（ ） A. ①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能 B. ②代表体外胚胎培养，该过程中细胞既进行有丝分裂也存在细胞分化 C. ③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育 D. ⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关 【答案】AC 【解析】 【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，分析题图，①是体外受精过程，②是早期胚胎培养，③是胚胎分割，④是分割后胚胎的恢复，⑤是胚胎移植。 【详解】A、①代表体外受精，体外受精前和体内受精前精子均需要获能，A错误； B、②代表体外早期胚胎培养，该过程中细胞进行有丝分裂，当胚胎发育至囊胚阶段，会开始进行细胞分化，B正确； C、③代表胚胎分割，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分裂，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，而桑椹胚阶段的胚胎还未形成内细胞团，C错误； D、⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关，要对供、受体母牛进行同期发情处理，使供体和受体的生理状态相同，D正确。 故选AC。 19. 为使玉米获得抗除草剂性状，科研人员进行了相关操作（如图所示）。含有内含子的报告基因不能在原核生物中正确表达，其正确表达产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列说法错误的是（ ） A. T-DNA可将基因G转移并整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上 B. 利用物质K和氨苄青霉素进行筛选1，可获得农杆菌的蓝色菌落 C. 利用物质K和除草剂进行筛选2，更易于获得抗除草剂的转基因植株 D. 培养基中细胞分裂素和生长素的浓度、比例都会影响植物细胞的发育方向 【答案】B 【解析】 【分析】1、农杆菌转化法的具体过程：（1）利用土壤的Ti质粒构建基因表达载体，即将目的基因整合到土壤农杆菌的Ti质粒上。（2）将整合了目的基因的Ti质粒导入土壤农杆菌细胞内。（3）利用土壤农杆菌感染植物细胞，该过程实际上是将含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒导入植物细胞内。（4）含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒进入植物细胞后，可以把自己的一段基因整合到细胞核中的染色体上，这段基因中包含了目的基因。 2、原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。 3、农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。 4、转化：目的基因插入Ti质粒的T-DNA上 农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。 【详解】A、农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因（基因G）插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因（基因G）整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上，A正确； B、农杆菌属于原核生物，含有内含子的报告基因不能在原核生物中正确表达，故不会出现农杆菌的蓝色菌落，B错误； C、根据题意可知，报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色，而愈伤组织表面残留的农杆菌会导致未转化的愈伤组织能在含除草剂的培养基中生长，因此利用物质K和除草剂进行筛选2，更易于获得抗除草剂的转基因植株，C正确； D、提高培养基中细胞分裂素和生长素的比值，有利于诱导生芽，降低培养基中细胞分裂素和生长素的比值，有利于生芽，所以培养基中细胞分裂素和生长素的浓度、比例都会影响植物细胞的发育方向，D正确。 故选B。 20. 某二倍体植物松散株型与紧凑株型是一对相对性状，控制该相对性状的基因为A/a。为研究控制该性状的基因，研究人员将一个紧凑株型的植株与纯合松散株型植株杂交，均为松散株型，中松散株型：紧凑株型=3∶1。研究得知，a基因由A基因内部插入一段序列而来（图1），研究人员设计了3条引物（P1～P3），位置如图1（→表示引物5′→3′方向）。以3个单株（甲、乙、丙）的DNA为模板，使用不同引物组合进行PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳结果分别为图2-A和2-B（图2-B中乙、丙电泳条带未标出）。不考虑PCR结果异常，下列说法正确的是（ ） A. 若a基因表达的肽链比A基因表达的肽链短，原因是插入导致转录提前终止 B. 图2-A中的条带代表a，丙单株无扩增条带的原因是其基因型为AA C. 图2-B使用的引物组合是P1、P2，乙、丙植株对应的条带均有两条 D. 使用图2-A中的引物组合扩增全部样本，有扩增条带松散株型：无扩增条带松散株型=2∶1 【答案】BD 【解析】 【详解】A、在A基因编码蛋白质的区域中插入一段序列得到a基因（图1），a基因表达的肽链比A基因表达的肽链短，应是终止密码子提前出现，a基因转录产生的mRNA提前终止翻译，A错误； B、根据图示可知，A和a基因上均含有P1和P2引物互补的序列，而P3引物识别的序列只有a基因中才存在，即图2-A中使用的引物组合是P2和P3，丙的基因型为AA，B正确； C、图2-B是利用引物P1和P2扩增的产物电泳的结果，由于a基因扩增出来的产物长度大于A基因扩增的产物，因此AA（松散株型）、aa（紧凑株型）基因的个体扩增的产物电泳时均只有一个条带，Aa（松散株型）的个体扩增的产物电泳时会出现两个电泳条带。所以乙和丙都只有一条带，C错误； D、使用图2-A中的引物组合（P3和P2）扩增全部样本，由于只有含a基因的个体才能扩增出相应产物，且A为松散株型，而子二代中Aa∶AA=2∶1，所以使用图2-A中的引物组合扩增全部样本，有扩增条带松散株型（Aa）：无扩增条带松散株型（AA）=2∶1，D正确。 故选BD。 三、非选择题：本题共4小题，45分。 21. 我国是世界上啤酒的生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其工业化生产流程如下图所示。 发酵条件随啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。 （1）发酵工程一般包括菌种的选育、__________、培养基的配制、灭菌、_______、发酵罐内发酵、分离提纯产物等方面。 （2）在酿酒过程中常加入__________（填某种植物激素）以缩短大麦发芽的时间，从而减少有机物的消耗。焙烤阶段应注意控制温度，不能使__________失活。 （3）发酵过程可分为_____________、后发酵两个阶段，其中酵母菌繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在前一阶段完成。后一阶段要在低温_________的环境下储存一段时间才能形成澄清、成熟的啤酒。 （4）从发酵罐中取样装入甲瓶，初步估测甲瓶中酵母菌数量为3×106个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL用________稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过300个，则至少应将甲瓶的菌液稀释________________倍。 【答案】（1） ①. 扩大培养 ②. 接种 （2） ①. 赤霉素 ②. 淀粉酶 （3） ①. 主发酵 ②. 密闭 （4） ①. 无菌水 ②. 1000 【解析】 【分析】啤酒发酵过程是啤酒酵母在一定的条件下，利用麦汁中的可发酵性物质而进行的正常生命活动，其代谢的产物就是所要的产品—啤酒。 【小问1详解】 发酵工程一般包括菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵罐内发酵、分离提纯产物等方面。 【小问2详解】 发芽大麦合成大量淀粉酶，催化淀粉分解为小分子单糖。酵母菌不能直接利用淀粉做碳源，因此淀粉糖化后啤酒酵母才能利用分解形成的葡萄糖充分发酵。赤霉素作为一种重要的植物激素，对种子萌发具有促进作用，在酿酒过程中常加入适宜浓度的赤霉素缩短大麦发芽的时间，从而减少有机物的消耗，因此，在焙烤阶段应注意控制温度，不能使淀粉酶失活。 【小问3详解】 发酵过程可分为主发酵、后发酵两个阶段，其中酵母菌繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在前一阶段完成。后一阶段要在低温密闭的环境下储存一段时间才能形成澄清、成熟的啤酒。 【小问4详解】 从发酵罐中取样装入甲瓶，初步估测甲瓶中酵母菌量数为3×106个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL用无菌水稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过300个，根据300÷0.1×稀释倍数=3×106个/mL，则至少应将甲瓶的菌液稀释倍数为3×106×0.1÷300=1000倍。 22. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合、所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题： 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 （1）过程②中将愈伤组织加入______酶去壁，对红豆杉和柴胡原生质体进行的A、B处理分别为______、______。 （2）③过程结束后，只有异源融合原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是______。 （3）过程④中，植物激素中的生长素和细胞分裂素是启动______、脱分化、再分化的关键激素。 （4）科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和 DNA 分子标记鉴定，结果如表所示。 后代植株类型 染色体数目、形态 DNA 分子标记鉴定 甲 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲 DNA片段 乙 12，形态与柴胡染色体相似 无红豆杉DNA片段 丙 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段和新的DNA 片段 由表可知，后代植株中______类型一定不是所需植株。科研人员推测：杂种植株细胞中某一方亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在，而是以DNA片段的方式整合进另一方亲本______（填“红豆杉”或“柴胡”）的染色体DNA 上，从而实现不对称杂交后的稳定遗传。 【答案】（1） ①. 纤维素酶、翟胶 ②. X射线 ③. 碘乙酰胺 （2）异源混合原生质体在细胞核和细胞质的功能上实现了互补，使细胞分裂恢复正常 （3）细胞分裂 （4） ①. 乙 ②. 柴胡 【解析】 【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 【小问1详解】 原生质体为去除了植物细胞壁后的结构，要获得原生质体，需要用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞；要培育能产生紫杉醇的柴胡，红豆杉是供体需要X射线照射，柴胡是受体需要碘乙酰胺处理。 【小问2详解】 X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂，碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂，单独的红豆杉和柴胡细胞都不能分裂，杂种细胞由于融合后在细胞核和细胞质的功能上实现了互补，使细胞恢复正常分裂，因此只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团。 【小问3详解】 植物激素中的生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化、再分化的关键激素。 【小问4详解】 根据表格信息可知，植株后代乙无红豆杉DNA片段，说明其不是杂种植株。甲、丙类型植株与柴胡细胞中的染色体数目相同、形态相似，且含有双亲的 DNA片段，说明甲、丙植株属于杂种植株，它们的染色体主要由柴胡亲本来源的染色体组成，红豆杉亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以遗传物质重组的方式整合进柴胡的基因组。 23. 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交一杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题： （1）制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的技术有_____和_____，对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行_____和_____，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 （2）图2方框内至少需要经过_____次筛选，才能获取单克隆杂交-杂交瘤细胞。单克隆杂交-杂交瘤细胞在体外培养时，需要满足的条件是充足的营养，_____的环境，适宜的温度、pH和渗透压以及适宜的气体环境等，气体环境应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_____。 （3）临床试验发现，从小鼠腹水中提取抗体具有外源性，直接注入人体治疗效果大大降低。因此鼠源性的双特异性单克隆抗体在注射到人体前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低_____。 （4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是_____。 【答案】（1） ①. 动物细胞培养 ②. 动物细胞融合 ③. 克隆化培养 ④. （专一）抗体检测 （2） ①. 2##两##二 ②. 无菌无毒 ③. 维持培养液的pH （3）免疫排斥反应 （4）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞      【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【小问1详解】 制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的技术有动物细胞培养（细胞工程的基础）和动物细胞融合（将B细胞与骨髓瘤细胞融合）；为选出能产生专一抗体的杂交瘤细胞，要将选择培养基上筛选出的细胞稀释液滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中有一个细胞，然后筛选出专一抗体检测呈阳性的细胞，进行克隆化培养，即对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和（专一）抗体检测，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 【小问2详解】 图2方框内需要经过2次筛选：先筛选得到对长春碱免疫的B淋巴细胞，后筛选出杂交—杂交瘤细胞；单克隆杂交一杂交瘤细胞在体外培养时，需要满足的条件是充足的营养，无菌、无毒的环境，适宜的温度、pH和渗透压，适宜的气体环境等；气体环境应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH。 【小问3详解】 由于从小鼠腹水中提取抗体具有外源性，直接注入人体后会被人体免疫系统识别和清除，因此鼠源性的双特异性单克隆抗体在注射到人体前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低免疫排斥反应。 【小问4详解】 双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，避免了对正常细胞的损伤，因而对人体的副作用更小。 24. 为了将某纳米抗体和增强型绿色荧光蛋白基因融合表达，运用重组酶技术构建质粒，如图1所示。请回答下列问题: （1）分别进行PCR扩增F1片段与F2片段时，配制的两个反应体系中不同的有______________。 （2）有关基因序列如图2，引物F2-F、F1-R序列可能为________。 A. 5′ATGGTG……CAACCA3′ B. 5′TGGTTG……CACCAT3′ C. 5′GACGAG……CTGCAG3′ D. 5′CTGCAG……CTCGTC3′ （3）将PCR产物片段与线性质粒载体混合后，在重组酶作用下可形成环化质粒，直接用于转化细菌。这一过程与传统重组质粒构建过程相比，无需使用的酶主要有________________________。 （4）转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选，下列叙述错误的有________。 A. 稀释涂布平板需控制每个平板30～300个菌落 B. 抗性平板上未长出菌落的原因一般是培养基温度太高 C. 抗性平板上常常会出现大量杂菌形成的菌落 D. 抗性平板上长出的单菌落无需进一步划线纯化 （5）为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计，用不同菌落的质粒为模板，用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩增，质粒P1-P4的扩增产物电泳结果如图3。根据图中结果判断，可以舍弃的质粒有________。 【答案】（1）模板（片段F1、片段F2）、引物 （2）CD （3）限制酶和DNA连接酶 （4）ABC （5）P3、P4 【解析】 【分析】据题图1可知，引物F2-F用于扩增F2片段，引物F1-R用于扩增F1片段，因此引物F2-F含有EGFP基因右侧部分碱基序列，引物F1-R含有AnB1基因左侧部分序列。 【小问1详解】 PCR反应体系需要引物、酶、脱氧核苷酸、模板和缓冲液（一般缓冲液中要添加Mg2+）等。分别进行PCR扩增F1片段与F2片段时，配制的两个反应体系中不同的有模板（片段F1、片段F2）、引物。 【小问2详解】 AB、根据思路分析，并结合图2中两基因序列可知，碱基序列5′ATGGTG……CAACCA3′、5′TGCTTG……CACCAT3′在EGFP基因序列左侧、AnB1基因序列右侧部分，不能达到扩增的目的，AB错误； CD、而碱基序列5′GACGAC……CTGCAG3′、5′CTGCAG……CTCGTC3′在AnBI基因左侧部分、在EGFP基因右侧部分，能达到扩增的目的，CD正确。 故选CD。 【小问3详解】 传统重组质粒构建需要使用限制性内切核酸酶（限制酶）切割质粒使其具有与目的基因相同的黏性末端，之后再用DNA连接酶将目的基因和质粒连接成重组质粒。将PCR产物片段与线性质粒载体混合后，由于PCR产物片段和线性质粒载体具有同源序列，可通过重组酶形成环化质粒，不需要使用限制性内切核酸酶（限制酶）和DNA连接酶。 【小问4详解】 A、转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选，用稀释涂布平板法筛选时，菌落数可以低于30，A错误； B、培养基冷却后才能接种，抗性平板上未长出菌落，一般不是培养基温度太高所致，B错误； C、转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选，一般含有重组质粒的大肠杆菌才能发展为菌落，故不会出现大量杂菌形成的菌落，C错误； D、稀释涂布平板和平板划线法均为分离纯化细菌的方法，用稀释涂布平板法在抗性平板上长出的单菌落无需进一步划线纯化，D正确。 故选ABC。 【小问5详解】 EGFP长度为720bp，AnBI长度为390bp，二者的总大小为720bp+390bp=1110bp，用引物FI-F和F2-R进行了PCR扩增,其大小应接近两基因之和，根据图中结果判断，可以舍弃的质粒有P3、P4。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $