江苏扬州市广陵区江苏省扬州中学2025-2026学年第二学期期中试题高二生物（选修）

**基本信息** 聚焦发酵工程、基因工程等核心模块，以维生素C生产、基因编辑猪等真实情境设计综合探究题，强化科学思维与探究实践。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|19题/43分|传统发酵技术、微生物培养、细胞工程、基因工程|单选第1题对比传统发酵与发酵工程，渗透结构与功能观；多选15题结合接种方法考查实验分析，体现科学思维| |非选择题|5题/57分|发酵工艺优化、单克隆抗体制备、体细胞杂交、核移植、基因工程操作|20题以两步发酵法为情境，考查菌种筛选与发酵条件控制，强化探究实践；23题结合基因编辑猪核移植流程，融入科技前沿，培养态度责任|

江苏省扬州中学2025-2026学年第二学期期中试题 高二生物（选修） 2026.4 试卷满分：100分，考试时间：75分钟 注意事项: 1. 作答第I卷前，请考生务必将自己的姓名、考试证号等写在答题卡上并贴上条形码。 2. 将选择题答案填写在答题卡的指定位置上（使用机读卡的用2B铅笔在机读卡上填涂），非选择题一律在答题卡上作答，在试卷上答题无效。 3. 考试结束后，请将机读卡和答题卡交监考人员。 第I卷（选择题共43分） 一、单项选择题：本大题共14小题，每小题2分，共28分。在每题给出的四个选项中只有一项是最符合题意的。（请将所有选择题答案填到答题卡的指定位置中） 1．制醋、制酒是我国传统发酵技术。以下关于传统发酵技术与发酵工程的叙述正确的是（     ） A．在葡萄酒酿制的整个过程中需要严格保证无氧环境 B．乙醇既是果酒发酵的产物，也是果醋发酵的底物，又可以抑制杂菌繁殖 C．通过酵母菌发酵获得大量菌体，从菌体细胞中提取单细胞蛋白作为动物饲料 D．啤酒生产的后发酵阶段是在密闭和酵母菌生长的最适温度下获得澄清、成熟的啤酒 2．选择培养基是指对培养基进行处理，使其能允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长，从而将目的菌株从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。下列不属于选择培养基的是（     ） A．以纤维素为唯一碳源，用于筛选纤维素分解菌的培养基 B．加入青霉素以分离酵母菌等真菌的培养基 C．加入刚果红和纤维素的呈现红色的培养基 D．不加氮源以分离固氮微生物的培养基 3．地膜的主要成分是聚乙烯，化学式是（C2H4）n。残留在土壤中的地膜难以被降解，为筛选出高效降解地膜的细菌，研究人员进行了如图所示操作。下列叙述错误的是（     ） A．富集培养过程中摇床振荡便于微生物获取营养和氧气 B．富集培养后，利用平板划线法将微生物接种于X培养基 C．应挑选降解地膜最高效的细菌⑤接种到Y培养基 D．若要研究目的菌的生长规律，可用细菌计数板计数方法进行计数 4．关于现代生物技术的应用叙述，正确的是（     ） A．克隆牛和试管牛均是无性繁殖 B．需用促性腺激素释放激素处理使其超数排卵 C．动物细胞培养的原理是细胞的全能性 D．植物组织培养技术可用于转基因植物的培育 5．辣椒素是存在于辣椒细胞中的一种活性成分，具有抗癌、提高免疫力等功能。研究人员利用植物细胞培养技术实现了天然辣椒素的工厂化生产，其主要流程为：外植体→消毒→愈伤组织→悬浮培养→分离提纯。下列相关说法正确的是（     ） A．外植体应先后用酒精和次氯酸钠溶液进行消毒 B．愈伤组织是薄壁组织团块，没有液泡，分化能力弱 C．辣椒素属于辣椒的初生代谢产物 D．选取幼嫩的茎尖作外植体，通过植物组织培养可获得抗毒苗 6．兴趣小组的同学用稀释涂布平板法分离、纯化金黄色葡萄球菌。下列实验结果及其可能的原因对应有误的是（     ） 选项 实验结果 可能的原因 A 菌落连接成片 稀释倍数不够 B 长出霉菌菌落 培养基灭菌不彻底 C 未长出菌落 涂布器未灼烧 D 菌落形成缓慢 培养温度过低 A．A B．B C．C D．D 7．关于桑葚胚和囊胚的比较，下列叙述正确的是（   ） A．细胞分化开始于桑葚胚，这一阶段前的每一个细胞是全能细胞 B．桑葚胚的内细胞团将来可发育成胎儿的各种组织 C．囊胚期细胞分化是由遗传物质突变引起的 D．囊胚的进一步扩大会导致透明带的破裂 8．干细胞是一类具有分裂、分化能力的细胞，在一定条件下可以分化成其他类型的细胞。科学家通过体外诱导小鼠的成纤维细胞，获得了诱导多能干细胞（iPS细胞）。下列说法正确的是（     ） A．胚胎干细胞都是从早期胚胎中分离出来的 B．不同类型的干细胞，它们的分化潜能没有差别 C．由 iPS细胞产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用 D．胚胎干细胞的应用前景优于iPS细胞 9．下图是科研人员利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合体小鼠的流程，相关叙述正确的是（     ） A．代孕母鼠对早期胚胎不发生免疫排斥反应 B．过程②中可利用灭活的病毒诱导卵裂球细胞发生融合 C．代孕母鼠生产的嵌合鼠毛色黑白相间，是四倍体小鼠 D．嵌合体幼鼠的一个细胞中同时有白鼠和黑鼠的基因 10．如图为质粒pUC18，为生产出满足需求的质粒载体，利用定点诱变技术，通过设计具有诱变位点的引物P1和引物P2进行PCR，来实现目标载体的单碱基突变，目的是使质粒pUC18不能被限制酶Eam1105Ⅰ识别，但依然具有氨苄青霉素抗性。下列相关叙述，错误的是（     ） A．诱变位点位于限制酶Eam1105Ⅰ识别序列中 B．PCR的一轮循环一般可分为变性、复性、延伸三步，其中复性的温度高于延伸的温度 C．诱变成功的质粒依然具有氨苄青霉素抗性，利用了密码子具有简并性的原理 D．诱变成功的质粒pUC18经过EcoRⅠ、Eam1105Ⅰ双酶切后进行电泳，只能产生1条条带 11．某科研团队通过转基因获得了一种大肠杆菌（工程菌），可作为监测残留在生物组织或环境中的四环素水平的“报警器”，其监测原理如下图所示，天然大肠杆菌不含有图中所示基因。（GFP基因是绿色荧光蛋白基因）。下列有关说法正确的是（     ） A．启动子1、2是DNA聚合酶识别和结合的位点，启动基因的转录过程 B．该转基因工程菌中的GFP基因表达产物不需要内质网等细胞器的加工 C．培育“报警器”需要构建的基因表达载体只有GFP基因表达载体 D．当环境中存在四环素时，生物报警器的绿色荧光会熄灭 12．不对称PCR是一种通过控制引物浓度比例选择性扩增单链DNA的技术，其核心原理是使用限制性引物与非限制性引物按1:50的比例进行PCR扩增，初期生成双链DNA，当限制性引物耗尽后转为单链扩增，该方法可用于制备DNA探针，部分过程如图所示，下列叙述错误的是（    ） A．为标记DNA探针，可掺入含32P的dNTP B．第一阶段的扩增以DNA的两条链为模板 C．非限制性引物的作用是为单链扩增提供所需模板 D．制备的单链DNA探针与目标DNA的α链相同 13．下列关于基因工程的应用的叙述，正确的是（ ） A．将药用蛋白基因注射入牛的乳腺细胞，从牛乳汁中获得所需的药品 B．基因工程改造后的个体与未经改造的同种个体之间已产生生殖隔离 C．利用基因工程生产的甜味剂对人体无害，在食品中可以大量添加 D．基因工程可以改良动植物品种、提高作物和畜产品的产量 14．以下关于生物学知识在生产生活中的应用，不合理的是（     ） A．有些新闻报道转基因产品存在安全隐患，应该禁止转基因技术的应用 B．利用转基因技术制造的新型致病菌，可能让感染者发病后无药可医 C．生殖性克隆人存在伦理问题，我国政府不允许任何生殖性克隆人实验 D．为提高经济作物的产量，可以适时适量使用植物生长调节剂 二、多项选择题：本大题共5个小题，每小题3分，共15分。每题有不止一个选项符合题意。每题选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。 15．从自然界中筛选具有优良性状的菌种的一般步骤为：采集样品→富集培养（使菌体数量增多）→纯种分离→性能测定，如图a、b是采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图。下列相关叙述正确的是（     ） A．在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性 B．为获得纯种的目的菌种，需对采集的样品进行灭菌 C．获得图a所示结果的接种过程中，接种环需灼烧灭菌3次 D．利用图b计算出样品中菌体浓度为5.8×108个/ml，若涂布平板的菌液体积为0.1ml，则接种稀释液的稀释倍数为106倍 16．T4溶菌酶在温度较高时容易失去活性，科学家对影响T4溶菌酶耐热性的相关基因进行改造，使该酶的第3位异亮氨酸变为半胱氨酸，且与第97位的半胱氨酸之间形成二硫键，提高了该酶的耐热性。下列有关叙述错误的是（     ） A．引起T4溶菌酶分子结构改变的根本原因是基因的碱基序列发生了变化 B．该技术是细胞水平的操作，可改变细胞合成的蛋白质 C．T4溶菌酶在温度较高时失去活性是因为空间结构改变 D．T4溶菌酶的改造属于基因工程，耐热性提高可能与其分子内部二硫键的数量有关 17．下图表示利用基因工程制备某种病毒单克隆抗体的操作流程，下列叙述正确的是（     ） A．过程①所用的mRNA可从病毒感染者的浆细胞中提取 B．过程①②④⑥遵循碱基互补配对原则 C．过程③⑤⑦需要依赖于生物膜的结构特点而完成 D．图中的鼠瘤细胞在体外培养时既能无限增殖又能产生病毒抗体 18．运用植物细胞工程技术，可以培育单倍体植株和进行细胞产物的工厂化生产，下列有关说法正确的是（     ） A．单倍体育种中，需经过植物组织培养和诱导染色体加倍，以得到能稳定遗传的优良品种 B．利用花药通过植物组织培养获得的单倍体植株可作为研究遗传突变的理想材料 C．利用植物细胞培养生产紫草宁时，需要把外植体培养成完整的紫草植株 D．细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件，提高了单个细胞中次生代谢物的含量 19．下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的分析，正确的是（     ） A．可选择鸡的成熟的红细胞作为提取细胞中DNA的材料 B．研磨液在4℃下静置，主要目的是降低DNA分子的溶解度 C．在上清液中加入预冷酒精后轻缓搅拌，可避免DNA分子的断裂 D．粗提取得到的白色丝状物中仍含有蛋白质等杂质 Ⅱ卷（非选择题，共57分） 三、非选择题（本大题共5小题，共57分） 20．（10分）工业发酵生产维生素C常采用“两步发酵法”的工艺路径（如图所示）。路径1为“三菌两步法”，是一种利用三种微生物分两步进行发酵生产的生物技术，目前在维生素C生产中应用最广泛；路径2为未来技术优化方向。回答下列问题： （1）路径1中，为纯化和保存菌种，取适量第一步发酵液稀释后用_____法接种在含有碳酸钙粉的培养基上，以_____（填下列选项代号）为最佳指标，分离保存菌种。 A．菌落直径大小            B．溶钙圈大小            C．溶钙圈直径与菌落直径比值 （2）路径1中，第一步发酵结束后，在发酵液转移至第二步发酵前，需先进行_________处理，以防止因种间关系而干扰后续菌种生长。生酮基古龙酸菌和巨大芽孢杆菌发酵过程中发酵液pH的变化是__________，第二步发酵过程中两种菌的菌种数比例会影响产酸率，种液接入发酵罐前需对种液中的两种菌计数，计数所用的培养基除含有与发酵液相同的成分外，还需添加_____，在培养基上，可根据菌落的______________等特征（至少写两个）对两种菌分别计数。 （3）两种路径中，均有氧化葡萄糖酸杆菌参与，由图可知该种菌株存在_______（填“专一性”或“广谱性”）代谢能力。 （4）在发酵过程中要不断搅拌的目的是_____________。 （5）与从植物中提取维生素C相比，图示两种路径生产维生素C的优势有_________（答两点）。 21．（12分）尼帕病毒（NV）是一种新型人畜共患病毒，科学家利用该病毒的结构蛋白（蛋白A）为抗原制备单克隆抗体的流程如图所示。回答下列问题： （1）制备单克隆抗体涉及多种技术手段，其中_____是动物细胞工程的基础，实验时一般需要多次注射蛋白A免疫小鼠，目的是_____________________________。 （2）与骨髓瘤细胞融合前，B淋巴细胞_____（填“需要”或者“不需要”）通过原代培养扩大细胞数量。诱导细胞融合时，灭活病毒表面的糖蛋白和酶能与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上_____________重新排布，使细胞融合。 （3）杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基，在该培养基上_____________________细胞会死亡。经筛选②得到的细胞最简便的培养方法是_____（填“体内培养”或“体外培养”），原因是___________________________________。 （4）提取的单克隆抗体，需鉴定其特异性，操作方法是_________________________________。 （5）为鉴定单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将抗原（A蛋白）逐步截短，分别与纯化的单克隆抗体反应，实验结果如图所示（“+”表示有反应，“-”表示无反应，“aa”表示氨基酸）。 ( A蛋白 ) 结果证明该单克隆抗体识别抗原（A蛋白）的区域大概为________（填“40～50”、“40～55”或“40～60”）位氨基酸。 22．（11分）利用山金柑愈伤组织细胞（2n）和早花柠檬叶肉细胞（2n）进行体细胞杂交可获得高品质、抗逆性强的杂种植株，流程如图。回答下列问题： （1）实验中常用_________酶去除细胞壁得到山金柑与早花柠檬原生质体，需要向原生质体培养液中加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是_____________。 （2）过程②利用化学试剂_______诱导融合，可通过观察__________进行杂种细胞的初步筛选，愈伤组织形成和生长、分化过程中，培养基中的碳源是_____（填“无机碳源”或“有机碳源”），在③、④过程中发生基因选择性表达的是_____。 （3）为探究6-BA和IAA对愈伤组织再生丛芽的影响，某研究小组在MS培养基中加入6-BA和IAA，配制成四种培养基，培养后统计愈伤组织再生丛芽的比例（m），以及愈伤组织上的再生丛芽的平均数（n），结果如表所示。 培养基编号 浓度/（mg·L-1） m/% n/个 6-BA IAA 1 0.5 0 76.7 3.1 2 0.1 77.4 6.1 3 0.2 66.7 5.3 4 0.5 60.0 5.0 该实验中，自变量是________，6-BA属于__________类生长调节剂。分析实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是_____号培养基，当6-BA / IAA的值_____（填“低”或“高”）时，诱导生芽成功率较高。 （4）与其他育种方式相比，植物体细胞杂交的突出优点是_______________________。 23．（12分）异种器官移植是解决人类器官短缺的重要途径。近年来，我国科研团队在此领域取得了突破性进展。云南农业大学某研究团队与多家机构合作，于2025年成功培育出无特定病原体的10基因编辑猪，并利用体细胞核移植技术克隆10基因编辑猪，用于异种器官移植研究，主要技术操作流程如图所示。回答下列问题。 （1）图中过程①培养时，应使用_____培养基（按物理性质划分），除了细胞需要的营养物质外，通常还需要添加____________等天然成分，同时需要提供的气体环境是____________。过程②可通过显微操作对卵母细胞进行“去核”， “去核”实际上去除的是“纺锤体—染色体复合物”，理由是_____________________________________。 （2）在转基因重构胚胎移植前开展遗传病筛查时，应选取胚胎的_______细胞进行DNA分析，进行胚胎移植时需对代孕母猪进行同期发情处理，目的是_____________________________。 （3）猪受精卵可通过体外受精的方式获得，此时，卵子需要培养到____________期才具备与精子受精的能力；而精子需要获能后才能受精。精子发生过程中，________发育形成精子头部的顶体，其中的顶体酶能协助精子穿过卵细胞外的放射冠和__________。 （4）重构胚成活率低是限制核移植成功的主要因素之一，研究人员探究了不同浓度的TSA（组蛋白去乙酰化酶抑制剂）对猪重构胚发育成囊胚的影响，结果如下表所示： TSA浓度（nM） 0 20 40 60 囊胚的形成率（%） 13% 22.8% 35.7% 21% 由上表可知，选用浓度为_____nM的TSA处理更有利于提高囊胚的形成率，由此推测：一定范围内组蛋白乙酰化程度的升高会_____（填“促进”或“抑制”）重构胚的发育。 （5）为提高基因编辑猪细胞核移植的成功率，可以用胚胎细胞核移植替代体细胞核移植，原因是_______________________。 24．（12分）某真菌的W基因编码一种高效降解纤维素的酶，利用转基因技术可改造出生产该酶的大肠杆菌工程菌，相关限制酶的识别序列如下表。请回答下列问题： 限制酶 XbaI EcoRI SpeI XhoI HindIII 识别序列（5′→3′） T↓CTAGA G↓AATTC A↓CTAGT C↓TCGAG A↓AGCTT （1）利用PCR技术扩增W基因，需要引物、_____、4种脱氧核苷酸、含Mg2+的缓冲液和耐高温的Taq酶，耐高温的Taq酶的适宜温度通常在_____℃左右。在制备PCR反应体系时，每次用微量移液器吸取不同试剂前，需调整刻度和量程，并更换经_________灭菌处理过的枪头。 （2）图1标识了载体pBL和W基因中限制酶的切割位点（1kb=1000bp，假设构建重组质粒前后，质粒pBL对应部分大小基本不变）。已知a链为W基因转录模板链，结合上表分析，为保证W基因与质粒pBL正确连接，PCR扩增W基因时需在引物1和引物2的5′端分别添加的碱基序列5′-_____-3′、5′-_____-3′。切割载体时应选用的限制酶是___________。 （3）图1载体pBL中的色氨酸合成酶基因的作用是______________，将重组质粒导入色氨酸合成缺陷的大肠杆菌菌株，利用___________的培养基筛选菌株并提取质粒，用引物1和引物2进行PCR扩增，相关产物电泳图见图2。已知1号泳道和2号泳道分别是重组质粒和空载质粒的电泳图（均用EcoRI酶切成线性），在3号、4号的PCR扩增产物中，符合预期的W基因的DNA片段是_____号，若要进一步验证可对其进行______________。空白对照组5中使用无菌水代替实验组的模板DNA，目的是____________________________。 参考答案 1—5 BCBDA 6—10 CDCAB 11—14 BCDA 15. AD 16.BD 17.ABD 18.AB 19.ACD 20．（10分）（1）涂布法 C （2）灭菌（除菌） 逐渐下降，最后趋于稳定 琼脂 大小、颜色、形状或隆起程度 （3）广谱性 （4）使菌种与培养液充分接触，提高原料的利用率（或增加溶氧量，使菌种与培养液充分接触，提高原料的利用率） （5）生产周期短、产量高、成本低、产品纯度高、质量稳定，且不受季节和地域限制，适合大规模工业化生产（合理即可得分）（2分） 21．（12分）（1）动物细胞培养技术 增强小鼠机体的免疫反应，从而从该小鼠的脾中获得更多能产生特定抗体（抗蛋白A的抗体）的B淋巴细胞 （2）不需要 蛋白质分子和脂质分子（2分） （3）未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞（2分） 体内培养 体内培养条件容易控制、不需要更换培养基、不需要考虑温度、pH是否合适等 （4）将提取的单克隆抗体与尼帕病毒（NV）、其他病毒分别进行混合，检测单克隆抗体与不同抗原的结合情况（2分） （5）40~55 22．（11分）（1）纤维素酶和果胶 保持原生质体的完整性 （2） 聚乙二醇 (PEG) 是否再生新细胞壁 有机碳源 ③④ （3）IAA 浓度 细胞分裂素 1 高 （4）克服远缘杂交不亲和的障碍，打破生殖隔离，实现远缘杂交 23．（12分）（1）液体 动物血清 95%空气+5%二氧化碳 MⅡ期卵母细胞中原有的核仁已解体，核膜已消失，新的核膜和核仁未出现，新的细胞核还没有形成 （2）滋养层 为胚胎移入受体提供相同的生理环境，确保胚胎移植后能正常发育 （3）减数第二次分裂中 高尔基体 透明带 （4）40 促进 （5）胚胎细胞分化程度低，全能性更容易恢复 24．（12分）（1）模板DNA 72 湿热（或高压蒸汽） （2）CTCGAG TCTAGA SpeI和XhoI（2分） （3）作为标记基因 不含色氨酸 3 DNA测序 检验PCR反应中是否有外源DNA的污染 ( 第 4 页 共 9 页 ) 学科网（北京）股份有限公司 $