山东日照一中2025-2026学年高二下学期第一次月考生物试题

2025-2026学年高二下学期第一次单元质量检测 生物学 参考答案 一、选择题 1-15 CADDC DBCBD DCCCD 二、选择题 16.BCD 17.BD 18.AC19.B20.BD 三、非选择题 21.（16分，每空2分) (1)扩大培养 接种 (2)赤霉素 淀粉酶 (3)主发酵 密闭 (4)无菌水 1000 22.（15分，除标注外，每空2分) (1)纤维素酶、果胶X射线、碘乙酰胺（顺序不能颠倒）(4分) (2)异源混合原生质体在细胞核和细胞质的功能上实现了互补，使细胞分裂恢复正常(3 分) (3)细胞分裂 (4)乙 柴胡 23.（12分，除标注外，每空2分) (1)动物细胞培养和动物细胞融合 克隆化培养和（专一）抗体检测 (2)2/两/二(1分) 无菌无毒 维持培养液的pH (3)免疫排斥反应(1分) (4)双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞 24.(12分，除标注外，每空2分) (1)模板（片段F1、片段F2)、引物(3分） (2)CD(3分) (3)限制酶和DNA连接酶 (4)ABC (5)P、P4 12025-2026学年高二下学期第一次单元质量检测生物答题卡 学校 班级 23. (12分，除标注外，每空2分) 姓名 考生号 座号】 贴条形码区 (1) 注意事项：1、答题前，将区县、学校、班级、姓名、考生后 十位用0,5燕米黑色签字笔填写，用2B铅笔填涂相应位置， 由监考员负责粘贴 2、答选择题时，必颈使用2B铅笔填涂答题卡上相应题目的容 案标号，修改时，要用橡皮擦干净。 3、答非远择题时，必须使用05毫米渊色签字笔书写，做图 (2) (1分) 时，可用2B船笔，要求字体工整、笔迹清晰。务必在题号所 考生禁填 指示的答题区城内作答，造做题必须用2B铅笔将所逃题号涂 缺考标记口 照。 缺考考生由监考员贴条形码。 (3 (1分) 4、保证答卡清洁、完整严禁折叠，严在答卡号、鸥 并用2B铅笔填涂上面的缺考 号完整的填写在相应位置，务必认真核对考生号将其上做任 何标记，严禁使用涂改薇、胶带纸、修正世. 标记. 5、若来按上述要求填写，答题。影响评分质量，后果自负 【选释题】（须用2B铅笔填涂） 填涂样例 正确填涂 1CA灯CB1[63ID3 6[A][4][G1E03 11CA3[B1[03t0J 16A]L8]rc][D] 2 CAZC8]CC3ED2 7【A3[B1[c]E0J 12 EA3CB]CC3 C03 17CA1[8]CC]C0] 3 CAJC8JE0J ED3 8【A][]rG1[03 13【42tB]tG][D] 18 CAJCB3CCIC0] 24 (12分，除标注外，每空2分) 4 CA3 CB]ECJ ED3 9CA]E81[c]L0] 14[A3EB1[6]E0] 19CA门L8]Lc]cDJ 5 CAJEHJEC3 ED3 10 LAJEBJEC1E03 15 CA3 CBJEOJ EDJ 20 EA3 E83EC3E01 (1) (3分)(2) (3分) 【非选择题】（须用0.5基米黑色签字笔书写） 21.(16分，每空2分) (3) (4) (5) (1) (3) 22.(15分，除标注外，每空2分) (1) (4分) (2 (3分) ⊙ (4 请在各题目的答题区域内作答，超出边框的答案无效 请在各题目的答题区域内作答，超出边框的答案无效 高二生物学答题卡第1面/供1面2025-2026学年高二下学期第一次单元质量检测 生物学试题 2026.04 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。 1.约9000年前，我们的祖先就会利用微生物将谷物、水果等发酵成含酒精的饮料。如图 表示果酒和果醋制作过程中的物质变化，下列说法正确的是( A.酿酒和制醋所用微生物都是能在有氧条件下存活的真核生物 B.过程①和③分别发生在酵母菌细胞 H20+C02 醋酸+H2O 的线粒体基质和线粒体内膜上 C.产生乙醇后进行过程④会产生一层 ③ ④ 菌膜是由醋酸菌大量繁殖所致 葡萄糖 ① ② 丙酮酸 乙醇 C02 D.④过程是生产果醋的唯一途径 2.研究发现，优质酿酒酵母的选择，对啤酒的酿造品质至关重要。科研人员将新鲜的 葡萄或土样，加入含富集培养基的锥形瓶中，放置在摇床上培养1d,进行不同浓度梯度 稀释后，将样液涂布于YEPD平板培养基，获得多个单菌落。下列说法错误的是() A.YEPD培养基应添加碳源、氮源等，并将pH调至碱性 B.YEPD培养基需通过湿热灭菌法进行严格灭菌 C.富集培养基为液体培养基，摇床温度应在28℃下进行 D.对获得的多个单菌落需进一步筛选，并对特定菌落进行纯化培养 3.某种除草剂是一种含氨有机物，在水中溶解度低，在土壤中不易降解，长期使用会 污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，按如图所示过程筛选能降解该除草剂的细 菌，含一定量该除草剂的培养基不透明。下列说法错误的是( ) 蘸取 无透明圈菌落 上清液 →培养 长期使用 用 。十有透明圈 该除草剂的土壤 菌落 A.步骤Ⅱ和步骤Ⅲ均可获得降解该除草剂的细菌 B.步骤Ⅱ需对接种环灼烧6次，划线时需从上一次的末端开始 C.Ⅲ中不能通过透明圈的大小直接反应细菌降解除草剂的能力 D.步骤Ⅲ需先将涂布器灼烧灭菌再插入锥形瓶中蘸取适量菌液 4.下列有关菊花组织培养的说法，错误的是( A.植物组织培养的理论基础是植物细胞具有全能性 B.诱导形成愈伤组织过程中不需要光照，但再分化过程需要光照 C.对外植体进行消毒时先用酒精后用次氯酸钠溶液依次处理 D.培养基中生长素、细胞分裂素的浓度是影响该过程中植物细胞发育方向的关键因素 1 5.自从人类创立农业开始，就未停止过对农作物的改良。某科研小组以某种二倍体农作 物①、②（分别具有不同的优良性状）为亲本进行杂交，然后通过不同途径获得了新品种 ④、⑧、⑨、⑩，下列有关分析错误的是( A.与③→⑧相比，③→⑩过程的育种进 种子 →④植株 程更快 多次射线处理 B.③→④过程能提高植物突变频率且能 自然生长，⑤植株 →⑧植株 使植物出现新的基因 ① C.用秋水仙素处理③或⑦植株刚萌发的 +③幼苗 ⑨植株 种子，都是为了诱导染色体数目加倍 秋水仙素，⑥植株 D.图中⑥⑨⑩分别为四倍体、三倍体、 花粉⑦幼苗秋水仙素⑩植株 二倍体 6.苏云金杆菌是杀灭玉米螟的重要生物，灭蚊球孢菌具有杀灭蚊子的效能。科研人员 将这两种菌的原生质体融合获得既能杀蚊又能杀螟的新菌株，过程如图。微生物原生质 体的获得过程和植物体细胞杂交过程类似。下列说法错误的是( 亲本A 灭蚊球孢菌 (杀蚊) 影印选择板 对数期 离心洗涤后 培养液 加相关酶 00 亲本 原生质体 融合体检出融株，进行 混合后加 ② 个体生物学测定 PEG ① S 甲实验乙实验 A.图中过程与植物体细胞杂交过程所依据的原理不完全相同 B.①过程还可用电融合、离心等方法促进原生质体融合 C.离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶 D.获得的融合株染色体数目是两个亲本染色体数之和 7.Vro细胞是非洲绿猴肾细胞，易于培养，生物安全性高，对多种病毒的感染敏感， 是很多病毒培养的理想基质。培养Vro细胞能广泛地用于人和动物疫苗的生产，下列 有关叙述错误的是() A.贴壁生长的细胞需用胰蛋白酶处理后再进行离心收集 B.培养正常的Vero细胞时，在培养瓶上可形成多层细胞 C,定期更换培养基能及时去除代谢废物并提供营养物质 D.培养动物细胞的气体环境中CO2的作用是维持培养液的pH 8.水牛养殖是中国重要的农业产业之一。与传统繁殖方法相比，家畜胚胎工程技术可以 挖掘动物的繁殖潜力，提升家畜种质资源质量。以下选项错误的是() A. 取滋养层细胞进行DNA分析、选育优良品种，可以提升水牛种质资源 B.注射促性腺激素超数排卵和体外受精可以增加水牛胚胎数量 C.胚胎移植使优良母畜免去了冗长的妊娠期，同时需要用免疫抑制剂处理代孕母畜 D.同一胚胎分割产生的后代具有相同的遗传物质，是动物无性繁殖或克隆的方法之一 2 9.下列有关细胞工程的叙述，正确的有( ) ①植物体细胞杂交技术，能克服远缘杂交不亲和的障碍 ②动物细胞培养时不能用机械的方法将组织分散成单个细胞 ③利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体 ④受精完成的标志是雌雄原核融合 ⑤桑葚胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化” A.2项 B.3项 C.4项 D.5项 10.科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，利用其乳腺生产人生长 激素，为加速转基因奶牛的繁育，对此转基因奶牛进行克隆，过程如图所示。下列有关叙 述错误的是( A.细胞培养前，可采用酶解法将动物组织分散成单个细胞 B.重组胚胎移植 0000 到代孕母牛体内之 细胞培养 前不需要进行性别 含有人生长 去核 激素基因的 重组细胞 重组胚胎 犊牛 鉴定 奶牛体细胞 采集卵母细胞 C.可采用电融合 法使供体细胞和去核卵母细胞融合 D.将重组胚胎移到雌性奶牛体内，需要注射免疫抑制剂降低免疫排斥 11.花椰菜容易遭受病菌侵害，形成病斑。紫罗兰具有一定的抗病性。科研人员利用植 物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种。利用流式细胞仪测定植物细胞的 DNA含量，筛选出融合原生质体。下图是科研人员测定三种不同细胞的DNA含量，其中 一种是融合细胞。以下叙述正确的是( A细胞 B细胞 C细胞 600月 2000 m500 200 新 1500 如 豁400 1000 150 100 500 100 50 0 50100150200250 050100150200250 0 301001502002350 DNA相对含量 DNA相对含量 DNA相对含量 A.通常在低渗溶液中利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体 B.C细胞是融合的细胞，包括同种细胞融合形成的和异种细胞融合形成的 C,可直接诱导筛选出的杂种细胞再分化形成杂种植株 D.利用植物体细胞杂交技术繁殖后代属于无性繁殖 3 12.限制酶是基因工程中必需的工具之一，下图表示五种限制酶的识别序列及切割位点。 下列关于限制酶的叙述，错误的是( A.EcoR I和EcoR V切割DNA 片段产生的末端分别为黏性末 限制酶 EcoR I BamHI Sau3A I MfeI EcoRV 端和平末端 识别序 B.EcoR I和MfeI切割产生 GAATTC GGATCC GATC CAATTG GATATC 列及切 的DNA片段能被E.coli DNA CTTAAG CCTAGG CTAG GTTAAC CTATAG 割位点 连接酶相连在一起 C.BamH I和Sau3AI切割产生的DNA片段，连接后一定能被BamH I切割 D.以上五种限制酶均能识别双链DNA的特定序列，并切开特定部位的磷酸二酯键 13.幽门螺杆菌(Hp)感染会引发胃炎、消化性溃疡等多种疾病。研究人员将Hp的 Ipp20基因作为目的基因，用限制酶XhoI和XbaI切割，通过基因工程制备相应的疫 苗，质粒及操作步骤如图所示。下列相关叙述错误的是( BamH I 启动子 培养基B 复制 潮霉素 原点 抗性基因 ←-hoI 2 IpP20基因 菌落 氯霉素 ←PstI 构建基因 大肠 6 获取 抗性基因 表达载体 杆菌 569 疫苗 终止子 培养基A 6 BamH I 质粒 Xba I 培养基A A.Ipp20基因整合到大肠杆菌的DNA中属于基因重组 B.基因表达载体导入之前，可用Ca处理大肠杆菌 C.培养基A中添加了氯霉素，培养基B中添加了潮霉素 D.能用来生产Hp疫苗的大肠杆菌在菌落3和5中 14.自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素 在碱性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因(1dgS)及其激活基因 (sfp)构建基因表达载体（如下图，Pmel、BamH1、Spel、SacI为不同限制酶），通过 农杆菌转化法导入白玫瑰中，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。错误的是() A.上述获得蓝色玫 Pme I BamHI Spe I Sac I 瑰的方案中无需转 T-DNA 入能调控液泡pH的 T质粒 T-DNA 基因 T质粒 B.将sfp基因插入 P☐ Ddg☒ T1质粒时使用的限 口终止子1⊙启动子1口终止子2→启动子2 制酶是BamHI C.sfp和idgS基因表达时可能是以T-DNA的同一条链为模板进行转录 D.农杆菌可将T1质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上 4 15.利用某限制酶I、酶Ⅱ对提取的莱茵衣藻某DNA进行单酶切和双酶切后的电泳结 果，据此推测，下列叙述不正确的是() Marker。酶I酶Ⅱ酶I+Ⅱ 1000 A.电泳时，核酸的移动方向是从负极到正极的 800 B.莱茵衣藻某DNA最可能为环状DNA分子 600 C.限制酶I、酶Ⅱ的切点最长相距约600bp 400 200 D.两种限制酶在载体上识别的序列可能相同 Marker:含有不同长度的标准DNA片段。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。 16.桑葚玫瑰酒既融合了桑葚和玫瑰的果香、花香，又使其营养价值和功能活性增加 极大地满足人们的需求。图1为制作桑葚玫瑰酒的装置图；图2为不同桑葚汁与玫瑰质 量比对花色苷含量、酒精度和感官评分（感官评分越高，品质越好）的影响。下列相关叙 述正确的是() 口酒精度 充气口的 20 。花色苷含量 1100 100 排气▣ △感官评分 1050花 酒18 1000 90 950 900 色苷 度16 80感 出料口产 850 800 含量 70 图1 601 14 750 700 A.桑葚玫瑰酒发酵所用菌种的 (mg 60分 12 650 600 E /50 代谢类型与醋酸菌相同 550 500 140 B.图1中排气口连接长而弯曲 450 400 30 的胶管可避免其他微生物进入 2:13:14:15:16:1 桑葚汁与玫瑰质量比 装置 图2 C.由图2可知，桑葚汁与玫瑰质量比对酒精度影响不大 D.花色苷含量随桑葚汁与玫瑰质量比的增大而降低，质量比为4：1时酒的感官评分最 高 17.以纯化鉴定后的重组大肠杆菌RecQ解旋酶免疫小鼠(2n=40),融合免疫小鼠的脾细 胞及骨髓瘤细胞(2n=62-68),筛选杂交瘤细胞，制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体 (mAb),相关检测结果如图A、B所示。有关说法错误的是() A.重组大肠杆菌R©cQ解旋酶可刺激相应B淋巴细胞增殖分化 5 B.单克隆抗体的 30 50 制备过程中需要进 40 行2次筛选和2次 抗原检测 20 10 C.杂交瘤细胞在 10 融合的过程中可能 会发生染色体数目 80-9394-104105-108 染色体数日（条） 单抗稀释度 的丢失 图A杂交瘤细胞染色体数目 图B不同浓度mAb对RecQ蛋白结合DNA活性的影响 D.该mAb能特异性与RecQ解旋酶结合，在稀释度为l/1600时对RecQ解旋酶与DNA的 结合抑制最大 18.下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法错误的是( A.①代表体外受精，与体内受精不 分割针 同的是体外受精前精子需要获能 ⑤ B.②代表体外胚胎培养，该过程 中细胞既进行有丝分裂也存在细 胞分化 C.③代表胚胎分割，需均等分割桑甚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育 D.⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关 19.为使玉米获得抗除草剂性状，科研人员进行了相关操作（如图所示）。含有内含子的 报告基因不能在原核生物中正确表达，其正确表达产物能催化无色物质K呈现蓝色。转 化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养 基中生长。下列说法错误的是() 报告基因（含有内含子） 幼胚 T-DNA- Ti质粒 诱导V 氨苄青霉 表达载体 转化、 转化， 筛选1 农杆菌 煎伤组织 素抗性基因 筛选2 抗除草剂的 除草剂抗性基因G 转基因植株 A.T-DNA可将基因G转移并整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上 B.利用物质K和氨苄青霉素进行筛选1，可获得农杆菌的蓝色菌落 C.利用物质K和除草剂进行筛选2，更易于获得抗除草剂的转基因植株 D.培养基中细胞分裂素和生长素的浓度、比例都会影响植物细胞的发育方向 6 20.某二倍体植物松散株型与紧凑株型是一对相对性状，控制该相对性状的基因为 A/。为研究控制该性状的基因，研究人员将一个紧凑株型的植株与纯合松散株型植株 杂交，F1均为松散株型，F2中松散株型：紧凑株型=3：1。研究得知，a基因由A基因内 部插入一段序列而来（图1），研究人员设计了3条引物(P1一P3),位置如图1（→表 示引物5′→3′方向)。以3个F2单株（甲、乙、丙）的DNA为模板，使用不同引物组 合进行PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳结果分别为图2-A和2-B(图2-B中乙、丙电泳条带 未标出)。不考虑PCR结果异常，下列说法正确的是( PI 甲乙丙 甲 丙 A基因 松散紧凑松散 松散紧凑松散 插入位点 2 点样孔：；t;【:: 点样孔；：：：：： P3 P1 a基因 插入位点 P2 图1 图2 B A.若a基因表达的肽链比A基因表达的肽链短，原因是插入导致转录提前终止 B.图2-A中的条带代表a,丙单株无扩增条带的原因是其基因型为AA C.图2-B使用的引物组合是P1、P2,乙、丙植株对应的条带均有两条 D.使用图2-A中的引物组合扩增F2全部样本，有扩增条带松散株型：无扩增条带松散 株型=2：1 三、非选择题：本题共4小题，45分。 21.我国是世界上啤酒的生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成 的，其工业化生产流程如下图所示。 大麦 碾磨 蒸煮 冷却 过滤 过滤 发芽 烘培 糖化 发酵 芽粉 加啤 消毒 酒花 分装 发酵条件随啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。 (1)发酵工程一般包括菌种的选育、 、 培养基的配制、灭菌、 发酵 罐内发酵、分离提纯产物等方面。 (2)在酿酒过程中常加入 (填某种植物激素)以缩短大麦发芽的时间，从而 减少有机物的消耗。焙烤阶段应注意控制温度，不能使 失活。 (3)发酵过程可分为 后发酵两个阶段，其中酵母菌繁殖、大部分糖的分 解和代谢物的生成都在前一阶段完成。后一阶段要在低温 的环境下储存一段 时间才能形成澄清、成熟的啤酒。 (4)从发酵罐中取样装入甲瓶，初步估测甲瓶中酵母菌数量为3×10°个/mL,若要在每个 平板上涂布0.1mL用 稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过 300个，则至少应将甲瓶的菌液稀释 倍。 22.不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细 胞融合、所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生产物紫 杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极 低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆 杉(2n=24)与柴胡(2n=12)进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。 A处理 红豆杉 愈伤组织 ② 原生质体 ③ 异源融合 再生 ④ 杂种 2 原生质体 细胞团 植株 柴胡 愈伤组织 原生质体 B处理 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞 不再持续分裂：碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 (1)过程②中将愈伤组织加入 酶去壁，对红豆杉和柴胡原生质体进行的A、B处理 分别为 (2)③过程结束后，只有异源融合原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是 (3)过程④中，植物激素中的生长素和细胞分裂素是启动、脱分化、再分化的关键 激素。 (4)科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，结果 如表所示。 后代植株类型 染色体数目、形态 DNA分子标记鉴定 甲 12,形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段 乙 12,形态与柴胡染色体相似 无红豆杉DNA片段 丙 12,形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段和新的DNA片段 由表可知，后代植株中 类型一定不是所需植株。科研人员推测：杂种植株细胞中 某一方亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在，而是以DNA片段的方式整合进 另一方亲本 (填红豆杉”或“柴胡”)的染色体DNA上，从而实现不对称杂交后 的稳定遗传。 23.双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表 位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花 卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交一杂交瘤细胞 技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的 双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。 请分析回答下列问题： 注射癌 B淋巴细胞 胚抗原 单克隆杂 力 交瘤细胞 肿瘤细胞 ① 药物 ② 爱+爱 提取双特异性 膜抗原 HAT培养基 多孔培养板因 单克隆抗体 ③ ④ 骨髓瘤细胞 注射长春碱 单克隆 ⑤ 杂交-杂交 图1 图2 瘤细胞 (1)制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的技术有 对 ③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行 才能筛选出足够 量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 (2)图2方框内至少需要经过 次筛选，才能获取单克隆杂交-杂交瘤细胞。单 克隆杂交-杂交瘤细胞在体外培养时，需要满足的条件是充足的营养， 的 环境，适宜的温度、pH和渗透压以及适宜的气体环境等，气体环境应在含5%C02的恒温 培养箱中进行，C02的作用是 (3)临床试验发现，从小鼠腹水中提取抗体具有外源性，直接注入人体治疗效果大大降 低。因此鼠源性的双特异性单克隆抗体在注射到人体前需要进行人源化改造，除抗原结 合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低 (4)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副 作用更小，原因是 24.为了将某纳米抗体和增强型绿色荧光蛋白基因融合表达，运用重组酶技术构建质 粒，如图1所示。请回答下列问题： (1)分别进行PCR扩增F1片段与F2片段时，配制的两个反应体系中不同的有 0 拟构建的 720bp 390bp 基因结构 EGFP AnB1 F2-EF2片段 F1-F F1片段 PCR引物及目 F2-R 的产物片段 F1-R 基因重组 口启动子 发AmD 线性质粒载体 克隆流程 PCR产物片段与 重组酶 线性载体混合 注：EGFP表示增强型绿色荧光蛋白基因： AnB/表示纳米抗体基因： 转化 AmpR表示氨苄青霉素抗性基因： +表示PCR引物： 相同填充方框表示同源序列。 图1 (2)有关基因序列如图2，引物F2-F、F1-R序列可能为 EGFP基因序列：5'ATGGTGAGCAAGGGC·GACGAGCTGTACAAG3' AnBI基因序列：5'CATGTCCAGCTGCAGCCAAAACCACAACCA3' 图2 A.5′ATGGTG…CAACCA3/ B.5′TGGTTG…CACCAT3' C.5′GACGAG…CTGCAG3' D.5'CTGCAG…CTCGTC3' (3)将PC℉产物片段与线性质粒载体混合后，在重组酶作用下可形成环化质粒，直接 用于转化细菌。这一过程与传统重组质粒构建过程相比，无需使用的酶主要有 0 (4)转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选， p M P1 P2 P3 P4 下列叙述错误的有 3000 A.稀释涂布平板需控制每个平板30~300个菌落 2000 B.抗性平板上未长出菌落的原因一般是培养基温度太高 1000= 500- C.抗性平板上常常会出现大量杂菌形成的菌落 250- D.抗性平板上长出的单菌落无需进一步划线纯化 (5)为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计，用不同 50- 菌落的质粒为模板，用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩 图3 增，质粒P1-P4的扩增产物电泳结果如图3。根据图中结 果判断，可以舍弃的质粒有 10