精品解析：辽宁锦州市某校2025-2026学年高二下学期第一次月考生物试卷

高二生物试题 说明： 1．本试卷满分100分，答题时间75分钟。 2．请将所有答案都填涂到答题卡上，考试结束后只交答题卡。 一、单选题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中只有一项符合题意。 1. 下图表示培养和纯化酵母菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（ ） A. 步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置 B. 步骤②为防止污染，接种环灼烧灭菌后应快速挑取菌落 C. 步骤③划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落 D. 步骤④在恒温培养箱培养后，可用于对酵母菌进行计数 【答案】C 【解析】 【分析】根据题意和图示分析可知：①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。 【详解】A、步骤①倒平板操作时，倒好后应待平板冷却凝固后再将平板倒过来放置，A错误； B、灼烧后的接种环需在火焰旁冷却后再沾取菌液进行平板划线，B错误； C、步骤③通过连续划线，使接种物逐渐稀释分布在培养基的表面，在数次划线后培养，可分离到一个细胞繁殖而来的单个菌落，C正确； D、平板划线法接种的培养基上，由于起始段菌体密集，所以无法对其计数，D错误。 故选C。 2. 甘蔗原醋是近些年来开发的新型食用果醋，汁液透亮、酸味浓郁，具有调节肠胃功能、预防高血压及高血脂症等功效，在我国传统中医书中均有记载，具有很高的药用和保健价值。下列有关叙述正确的是（　　） A. LB型醋酸菌在缺少糖源和O2时，可直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸 B. 果醋发酵时，无论是利用糖源还是酒精，都需要打开通气阀释放产物CO2 C. 发酵①和②过程中，酵母菌和醋酸菌的代谢产物都会使发酵液的pH值降低 D. ①和②发酵条件不同，①为厌氧发酵，②为需氧发酵，果酒制好后直接通入无菌空气即可制醋 【答案】C 【解析】 【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。在有氧的情况下酵母菌生长繁殖速度快，把糖分解成二氧化碳和水。在无氧的环境中酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、当氧气、糖源都充足时，LB型醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，LB型醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，LB型醋酸菌是好氧菌，不能在缺少O2时发酵，A错误； B、果醋发酵时若利用糖源需要打开通气阀释放产物CO2，若利用酒精则没有二氧化碳产生，B错误； C、发酵①和②过程中，前者微生物是酵母菌，该过程中有二氧化碳产生，后者微生物是醋酸菌，有醋酸产生，二者均会使培养液pH值降低，即酵母菌和醋酸菌的代谢产物都会使发酵液的pH值降低，C正确； D、①和②发酵条件不同，①为厌氧发酵，②为需氧发酵，果酒制好后除需要通入无菌空气，还需升高温度才能制醋，D错误。 故选C。 3. 研究小组利用稀释涂布平板法来探究某河流中大肠杆菌的数量，每一个浓度涂布四个平板，并且设置空白对照组。下列关于操作步骤的叙述正确的是（ ） A. 涂布前，将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，燃尽后还要冷却8~10s B. 涂布完成后，在培养皿的皿盖上做标记，以避免混淆，并将培养皿倒置培养 C. 计算平板上的菌落数时，四个培养皿上的菌落数无论多少，都要全部平均 D. 若空白对照组上有7个菌落，则在实验组数据基础上减去7，以获得最准确数据 【答案】A 【解析】 【分析】常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，目的是让聚集在一起的微生物分散成单个细胞，然后得到由这个细胞繁殖而来的肉眼可见的单个群落。稀释涂布法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落 【详解】A、使用涂布器在酒精灯下涂布时，要先将涂布器沾有少量酒精进行灼烧灭菌，燃尽后还要冷却8~10s再进行涂布，A正确； B、涂布完成后，在培养皿的皿底上做标记，B错误； C、计算平板上的菌落数时，应选择菌落数在30-300平板进行计数，C错误； D、若空白对照组上有7个菌落，说明培养基灭菌不彻底，需要重新进行实验，D错误。 故选A。 4. 我国科研人员构建了一株嗜盐单胞菌H，并以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液）或餐厨垃圾为原料，生产PHA等新型可降解材料，工艺流程如下图。下列分析合理的是（　　） A. 嗜盐单胞菌H的选育和扩大培养是该发酵工程的中心环节 B. 搅拌器能使菌株H与培养液充分接触，提高原料利用率 C. PHA是一种单细胞蛋白，发酵结束后用过滤、沉淀等方法获取 D. 嗜盐单胞菌H是厌氧菌，通过无氧呼吸过程获得PHA产品 【答案】B 【解析】 【分析】在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。 【详解】A、发酵工程的中心环节是发酵过程，而不是嗜盐单胞菌H的选育和扩大培养。选育和扩大培养是发酵工程的前期准备工作，A错误； B、搅拌器能使菌株H与培养液充分接触，有助于菌株更好地吸收培养液中的营养物质，从而提高原料利用率，B正确； C、PHA不是单细胞蛋白，单细胞蛋白是指通过发酵获得的微生物菌体。发酵结束后，获取PHA可能需要特定的提取和分离方法，而不是简单的过滤、沉淀，C错误； D、由图可知，该发酵过程是有氧条件，所以嗜盐单胞菌H应是好氧菌，通过有氧呼吸过程获得PHA产品，D错误。 故选B。 5. 农业生产中常用栽种蒜瓣（大蒜的鳞茎）的方式对大蒜进行繁殖，长此以往会导致大蒜体内积累多种病毒，造成产量、品质下降等问题。某科研小组设计了如图所示的生产流程。下列叙述正确的是（　　） A. 图示生产流程利用了植物细胞具有全能性的原理 B. 对茎尖进行消毒处理是为了减少茎尖组织中的病毒 C. ①②过程中使用不同培养基是为了及时清除代谢废物 D. 获得的试管苗几乎不含病毒，可直接移栽至大田 【答案】A 【解析】 【详解】A、植物组织培养技术的原理是植物细胞的全能性，脱毒苗的培育需要将细胞培养成完整植株，故利用了细胞的全能性，A正确； B、对茎尖进行消毒处理的目的是杀灭茎尖表面的微生物，防止微生物污染培养过程；而减少茎尖组织中的病毒需通过选择几乎不含病毒的茎尖分生组织，并非消毒处理的作用，B错误； C、①过程为脱分化，②过程为再分化。这两个过程使用不同培养基的主要原因是培养基中植物激素的比例不同：脱分化需诱导细胞脱分化，再分化需诱导细胞分化出芽和根。清除代谢废物并非使用不同培养基的目的，C错误； D、获得的试管苗虽几乎不含病毒，但由于其在无菌环境中培养，根系不发达、抗逆性差，直接移栽至大田易因水分、养分吸收不足或环境不适而死亡。需先在温室中进行炼苗，再移栽，D错误。 故选A。 6. 豆科牧草沙打旺具有耐旱、耐贫瘠、抗风沙的特点，紫花苜蓿固氮能力较强。科研人员欲利用体细胞杂交技术获得兼具两者优点的杂种植株，实验流程如图，下列有关说法错误的是（　　） A. 荧光染料的颜色可以作为初步筛选融合原生质体的依据 B. 过程Ⅲ再生细胞壁的形成标志着植物细胞融合流程完成 C. 过程IV、V需照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用 D. 该技术打破了沙打旺与紫花苜蓿之间的生殖隔离，实现了远缘杂交育种 【答案】C 【解析】 【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 【详解】A、题图显示，两种原生质体分别带有不同的荧光染料，因此可以将荧光染料的颜色作为初步筛选融合原生质体的依据 ，A正确； B、植物体细胞杂交流程完成的标志是形成杂种植株，过程Ⅲ再生细胞壁标志着植物细胞融合流程完成，B正确； C、 过程IV脱分化形成的愈伤组织是一团不定形的薄壁组织团块，该过程不需要照光培养，而V过程为脱分化过程，该过程中需照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用，C错误； D、该技术为植物体细胞杂交技术，其优势为打破了沙打旺与紫花苜蓿之间的生殖隔离，实现了远缘杂交育种，D正确。 故选C。 7. 植物细胞悬浮培养技术在生产中已得到应用。某兴趣小组利用该技术培养胡萝卜细胞并获取番茄红素（次生代谢物），实验流程见下图。下列描述合理的是（　　） 胡萝卜根外植体愈伤组织悬浮细胞番茄红素 A. 番茄红素一般在特定的组织或器官中产生 B. 实验流程中可用胶原蛋白酶处理愈伤组织，制备悬浮细胞 C. 细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件，提高了单个细胞中次生代谢物的含量 D. 胡萝卜根外植体进行适当的消毒处理后，立即使用蒸馏水清洗2～3次 【答案】A 【解析】 【详解】A、番茄红素属于植物次生代谢物，次生代谢物不是植物所有细胞都可合成，一般仅在特定的组织或器官中产生，A正确； B、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，分散愈伤组织获得悬浮细胞需用纤维素酶和果胶酶，胶原蛋白酶是用于分散动物组织细胞的试剂，B错误； C、细胞产物工厂化生产是通过优化培养条件促进细胞大量增殖，提升细胞总数量进而提高次生代谢物的总产量，并非提高单个细胞中次生代谢物的含量，C错误； D、植物组织培养全程需要无菌环境，外植体消毒后需用无菌水清洗2~3次，蒸馏水含杂菌，会引发污染，D错误。 8. 从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述错误的是（　　） A. 传代培养时，培养皿需密封防止污染 B. 选取②的细胞进行传代培养比①更合理 C. 不能直接用离心法收集细胞进行传代培养 D. 细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关 【答案】A 【解析】 【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 【详解】A、传代培养时培养器皿容许内部气体和培养箱中的气体进行交换，A错误； B、选取②的细胞进行传代培养比①更合理，②时细胞增长开始变得缓慢，B正确； C、对于贴壁生长的细胞进行传代培养时，先需要用胰蛋白酶等处理，使之分散为单个细胞，然后再用离心法收集，C正确； D、细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大、细胞间产生接触抑制有关，D正确。 故选A。 9. 下列关于干细胞的叙述，错误的是（ ） A. 干细胞具有分裂分化能力，包括胚胎干细胞和成体干细胞等 B. 成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织 C. 造血干细胞属于成体干细胞，能用来治疗白血病、帕金森病等疾病 D. 使用病人自身的iPS细胞移植回病人体内，可避免免疫排斥反应 【答案】C 【解析】 【详解】A、干细胞具有分裂和分化能力，根据来源和分化潜能可分为胚胎干细胞和成体干细胞等，A正确； B、成体干细胞具有组织特异性，如造血干细胞只能分化为血细胞，神经干细胞只能分化为神经细胞，B正确； C、造血干细胞属于成体干细胞，可用于治疗白血病（如骨髓移植），但帕金森病是神经系统疾病，需神经干细胞或胚胎干细胞治疗，造血干细胞无法分化为神经细胞，C错误； D、iPS细胞是自体细胞重编程得到的，移植回体内不会发生免疫排斥反应，D正确。 故选C。 10. 单克隆抗体制备流程如图所示，相关叙述错误的是（　　） A. 与植物细胞融合相比，诱导动物细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导法 B. 将筛选获得的杂交瘤细胞接种到96孔板时，每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞 C. 图中扩大培养后，只能从小鼠的腹水中获取大量单克隆抗体 D. 单克隆抗体能特异性识别、结合特定抗原，并可以大量制备 【答案】C 【解析】 【详解】A、诱导植物细胞融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇），诱导动物细胞融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒），所以与植物细胞融合相比，诱导动物细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导法，A正确； B、将筛选获得的杂交瘤细胞接种到96孔板时，每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞，这样可以保证得到的单克隆抗体来自同一个杂交瘤细胞，B正确； C、图中扩大培养后，单克隆抗体可以从小鼠的腹水中获取，也可以在体外培养液中提取，并非只能从小鼠的腹水中获取大量单克隆抗体，C错误； D、单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备，D正确。 11. 了解哺乳动物受精的规律对于胚胎工程十分重要。下列叙述错误的是（ ） A. 刚排出的精子需要经过获能处理才能获得受精能力 B. 卵子一般到 MⅡ期时才具备与精子受精的能力 C. 在自然条件下，哺乳动物的受精过程在子宫内完成 D. 精子入卵后，卵细胞膜立即发生生理反应，拒绝其他精子的进入 【答案】C 【解析】 【分析】受精是精子与卵子结合形成合子（即受精卵）的过程，包括受精前的准备阶段和受精阶段。在自然条件下，哺乳动物的受精在输卵管内完成。 【详解】A、精子需要获能才能与卵子结合，刚排出的精子需要经过获能处理才能获得受精能力，A正确； B、精子需要获能处理，而卵子只有发育到MII中期才具备与精子受精的能力，B正确； C、在自然情况下，受精是在雌性的输卵管内完成的，C错误； D、精子入卵后，卵细胞膜会发生卵细胞膜反应阻止其它精子的进入，这是防止多精入卵的反应之一，D正确。 故选C 12. 下列有关动物早期胚胎发育过程的叙述，错误的是（ ） A. 卵裂过程中细胞体积减小，有机物种类不断下降 B. 卵裂过程是在透明带内完成的，进行的是有丝分裂 C. 卵裂产生的子细胞逐渐形成致密的细胞团，形似桑葚，称为桑葚胚 D. 内、外胚层在原肠胚期形成，进而分化形成各种组织、器官等 【答案】A 【解析】 【分析】动物早期胚胎发育过程：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚。①卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；②桑椹胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）；③囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔（注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化）；④原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。 【详解】A、卵裂过程中细胞体积减小，但有机物分解会生成更多小分子物质（如葡萄糖、氨基酸等），导致有机物种类增加而非下降，A错误； B、卵裂过程在透明带内进行，通过有丝分裂增加细胞数量，B正确； C、桑葚胚由卵裂产生的子细胞紧密排列形成，外观呈致密细胞团，C正确； D、原肠胚期形成内、外胚层，后续中胚层出现，三者共同分化形成组织、器官，D正确。 故选A。 13. 基因工程的实施需要借助工具才能完成。下列说法错误的是（　　） A. 限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，能识别特定的核苷酸序列 B. 用作运载体的质粒上常含有抗生素合成基因，便于重组DNA分子的筛选 C. DNA连接酶可以催化磷酸二酯键的形成，进而连接黏性末端或平末端 D. 将动物基因转入大肠杆菌细胞内可以用改造后的噬菌体做运载体 【答案】B 【解析】 【详解】A、限制酶主要来源于原核生物，具有特异性识别特定核苷酸序列的功能，A正确； B、质粒作为运载体时，常携带的是抗生素抗性基因，而非抗生素合成基因。抗性基因用于重组DNA的筛选，B错误； C、T4DNA连接酶可催化DNA片段间形成磷酸二酯键，既能连接黏性末端也能连接平末端，C正确； D、噬菌体侵染大肠杆菌，改造后的噬菌体是常用基因工程运载体，可将外源基因（包括动物基因）导入大肠杆菌等宿主细胞，D正确。 故选B。 14. 从图1酶切结果分析，图2中的目的基因（长度为2.0kb）插入方向正确的重组质粒序号和作出该判断所用的限制酶是（　　） A. ①，EcoRI和HindⅢ B. ①，BamHI C. ②，EcoRI和HindⅢ D. ②，EcoRI 【答案】A 【解析】 【详解】分析图1可知，重组质粒被EcoRⅠ酶切后，得到5.8kb的片段，说明重组质粒中只有一个EcoRⅠ的酶切位点；重组质粒被BamHⅠ酶切后产生3.8kb和2.0kb两种片段，说明重组质粒中有2个BamHⅠ的酶切位点；重组质粒被EcoRⅠ和HindⅢ酶切后，产生4.5kb和1.3kb两种片段，说明重组质粒中有EcoRⅠ和HindⅢ的酶切位点，且二种酶切位点之间的片段为4.5kb和1.3kb。结合图2分析可知，重组质粒①符合上述分析的结果，所用的限制酶是EcoRⅠ和HindⅢ，重组质粒②中EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点之间的片段为2.3kb和3.5kb，不符合图1酶切的结果。综上所述，A正确，BCD错误。 故选A。 15. 某同学将质粒DNA进行限制酶酶切时，发现DNA完全没有被酶切，分析可能的原因并提出解决方法。下列叙述错误的是（　　） A. 限制酶失活，更换新的限制酶 B. 酶切条件不合适，调整反应条件如温度和酶的用量等 C. 质粒DNA突变导致酶识别位点缺失，更换正常质粒DNA D. 酶切位点被甲基化修饰，换用对DNA甲基化不敏感的限制酶 【答案】B 【解析】 【分析】酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物，大多数是蛋白质，少部分是RNA，酶具有特异性、高效性、易受环境因素影响等特点。限制酶特异性识别并切割DNA上的特定位点。 【详解】A、限制酶失活会使DNA完全不被酶切，此时应更换新的限制酶，A正确； B、酶切条件不合适通常会使切割效果下降，调整反应条件如温度和PH等，调整酶的用量没有作用，B错误； C、质粒DNA突变会导致限制酶识别位点缺失，进而造成限制酶无法进行切割，此时应更换为正常质粒，C正确； D、质粒DNA上酶切位点被甲基化修饰，会导致对DNA甲基化敏感的限制酶无法进行酶切，此时应换用对DNA甲基化不敏感的限制酶，D正确。 故选B。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，至少有一项符合题目要求，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16. 吸水链霉菌井冈变种是一种可与水稻根系共生的放线菌，其产生的井冈霉素是一种广谱抗生素，可以防治由立枯丝核菌引起的水稻纹枯病。如图为井冈霉素高产菌的选育过程，下列叙述正确的是（　　） A. 在患纹枯病的稻田中，应采集患病水稻根系附近的土壤样品 B. 步骤②使用全营养培养基富集菌液，以提高目标菌种的比例 C. 步骤③用稀释涂布平板法分离单菌落，根据菌落特征初筛 D. 步骤⑤先在培养基上均匀涂布立枯丝核菌，再接种吸水链霉菌井冈变种 【答案】CD 【解析】 【详解】A、要分离能产生井冈霉素，抑制立枯丝核菌的吸水链霉菌井冈变种，应在患纹枯病稻田中的健康水稻根系附近采集土壤，患病水稻患病说明其根际缺乏足够能抑制病的目标菌，A错误； B、富集培养的目的是提高目标菌种的比例，需要使用选择培养基，全营养培养基会使各种杂菌也旺盛生长，无法提高目标菌种的比例，B错误； C、稀释涂布平板法可以将菌液稀释后分散得到单菌落，不同菌种的菌落形态、大小、颜色等特征不同，因此可以根据菌落特征完成初筛，C正确； D、步骤⑤的目的是筛选高产井冈霉素的菌株，井冈霉素可抑制立枯丝核菌生长，抑菌圈越大说明菌株产井冈霉素能力越强；操作时需要先在培养基上均匀涂布立枯丝核菌，再接种吸水链霉菌井冈变种，后续通过抑菌圈大小筛选高产菌株，D正确。 17. 中国名茶普洱茶的主要活性成分——茶褐素，具有降脂减肥、抗氧化和提高免疫力等功能。研究人员在制作普洱熟茶的固体发酵过程中分离得到优势菌塔宾曲霉，塔宾曲霉能分泌胞外氧化酶催化茶多酚生成茶褐素。不同发酵温度下塔宾曲霉生成茶褐素的浓度如图。下列说法错误的是（ ） A. 普洱熟茶浸提液中的氨基酸和蛋白质可为塔宾曲霉生长提供氮源 B. 塔宾曲霉为好氧微生物，用普洱熟茶浸提液进行液体培养时应采用静置培养 C. 在发酵前两天茶褐素均无显著增加的原因可能是塔宾曲霉先进行生长繁殖，之后才分泌胞外氧化酶 D. 由图可知在最适温度为 37℃时且第 6 天结束发酵即可获得较高浓度的茶褐素 【答案】BD 【解析】 【分析】分析题图，47℃下曲线不增长，可能是温度过高，相关酶已经失活；37℃和42℃的增长几乎同步，最适温度介于两者之间。 【详解】A、霉菌可分泌蛋白酶分解蛋白质，普洱熟茶浸提液中的氨基酸和蛋白质可为塔宾曲霉生长提供氮源，A正确； B、塔宾曲霉为好氧微生物，用普洱熟茶浸提液进行液体培养时应采用摇床培养，可以为培养液增加溶氧量，有利于塔宾曲霉的繁殖，B错误； C、培养过程中前两天塔宾曲霉进行生长繁殖，之后才分泌氧化酶催化茶多酚生成茶褐素，C正确； D、发酵效率较高的是37℃和42℃， 生产茶褐素的最适温度在37℃~42℃范围内，D错误。 故选BD。 18. 在体细胞克隆猴培育过程中，为调节相关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人员将组蛋白去甲基化酶 Kdm4d 的 mRNA 注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）处理，具体流程如下图所示。相关叙述错误的是（ ） A. 常用显微操作法去除由核膜包被的卵母细胞的细胞核 B. 灭活的仙台病毒可使细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，利于融合 C. 组蛋白去甲基化和乙酰化的表观遗传修饰都有利于重构胚的分裂和发育 D. 为得到遗传背景相同的克隆猴，可将桑葚胚的内细胞团均等分割后再进行胚胎移植 【答案】AD 【解析】 【分析】1、动物细胞核移植：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 2、动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。 3、题图表示通过体细胞核移植方法克隆猴培育过程：该过程中采集减数第二次分裂中期的卵母细胞，采用显微操作法对其去核。 【详解】A、常用显微操作法去除卵母细胞的“核”，而此处的“核”是纺锤体一染色体复合物，不具有核膜，A错误； B、灭活的仙台病毒可使细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，B正确； C、研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA处理了它，即将组蛋白去甲基化和增加乙酰化，有利于重构胚的分裂和发育，使其完成细胞分裂和发育进程，C正确； D、由于来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此为得到遗传背景相同的克隆猴用于科研，可将早期胚胎囊胚的内细胞团均等分割后再进行胚胎移植，D错误。 故选AD。 19. 中华猕猴桃果实大、抗寒能力弱，狗枣猕猴桃果实小、耐低温。研究人员尝试培育抗寒能力强且果实大的猕猴桃新品种。方案1，中华猕猴桃和狗枣猕猴桃进行体细胞杂交；方案2，对中华猕猴桃或狗枣猕猴桃的体细胞进行诱变处理，再培育成植株。下列叙述正确的是（ ） A. 方案1和2中均需要先获得原生质体 B. 方案1可以采用离心法或PEG处理诱导两种猕猴桃的原生质体融合 C. 方案2宜选择两种猕猴桃的愈伤组织进行处理，且需筛选大量细胞 D. 方案1需使用的化学试剂有生长素、细胞分裂素和秋水仙素 【答案】BC 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。 【详解】A、方案1体细胞杂交，需要去除细胞壁，用纤维素酶和果胶酶处理得到原生质体；方案2是诱变处理不需要用纤维素酶和果胶酶处理，A错误； B、方案1可以采用离心法或PEG（聚乙二醇）处理诱导两种猕猴桃的原生质体融合，B正确； C、诱变育种通常处理的是能分裂的细胞，比如愈伤组织，因为DNA复制时更容易发生突变。诱变育种原理是突变，突变具有不定向性，故需要筛选大量细胞，C正确； D、方案1杂交细胞需要通过植物组织培养成为植株，植物组织培养需要生长素和细胞分裂素来调节脱分化和再分化。而秋水仙素是在多倍体育种中使用的，植物组织培养过程中不需要秋水仙素，D错误。 故选BC。 20. 羊乳价格比牛乳价格高。为防范市场上以牛乳冒充羊乳销售的行为，研究人员以羊乳asl-酪蛋白为抗原，制备出了单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（ ） A. 利用抗asl-酪蛋白的单克隆抗体可以检测羊乳中是否掺杂了牛乳 B. 聚乙二醇可诱导B细胞与骨髓瘤细胞融合 C. 将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔可大量生产单克隆抗体 D. 杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖需要提供95%空气+5%CO2的混合气体 【答案】BC 【解析】 【分析】在单克隆抗体的制备过程中，需要先给小鼠进行免疫，给小鼠注射特定的抗原，然后从小鼠的脾脏中取出B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞融合；第一次是选择出杂交瘤细胞，第二次是选择能产生所需抗体的杂交瘤细胞；杂交瘤细胞的特点是既能无限增殖又能产生专一抗体；单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、能大量制备；动物细胞培养时，首先应保持无菌、无毒的环境中；需要加入血清或血浆等天然成分；二氧化碳的作用是维持培养液的pH稳定。 【详解】A、羊乳中含有asl-酪蛋白，因此利用抗asl-酪蛋白的单克隆抗体不能检测羊乳中是否掺杂了牛乳，A错误； B、聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等都可诱导B细胞与骨髓瘤细胞融合，B正确； C、将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔或在体外培养均可大量生产单克隆抗体，C正确； D、杂交瘤细胞在体外培养增殖需要提供95％空气+5％CO2的混合气体，在小鼠腹腔内增殖无需提供，D错误。 故选BC。 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题： （1）实验室获得纯净的微生物培养物的关键是_______________。 （2）称取1.0g某土壤样品，转入99mL无菌水中，制备成菌悬液，经等比稀释后，从下图③号试管取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上，重复3次，若平板培养后的菌落平均数为120个，则该样本中每克土壤约含酵母菌______________个。该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为_________________________________。 （3）为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行___________育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以___________为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径_______________的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。 （4）在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据图分析，应选择菌株__________进行后续相关研究，理由是_________________________________。 【答案】（1）防止杂菌污染 （2） ①. 1.2×108 ②. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 （3） ①. 诱变 ②. 脂肪 ③. 较大 （4） ①. B ②. 菌株B增殖速度快，单细胞蛋白产量高；降解脂肪能力强，净化效果好 【解析】 【小问1详解】 防止杂菌污染是实验室获得纯净的微生物培养物的关键。 【小问2详解】 称取1.0g某土壤样品，转入99mL无菌水中，稀释了100倍，而经梯度稀释后，此时相当于稀释了100000倍，从图③号试管取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上，重复3次，若平板培养后的菌落平均数为120个，故该样本中每克土壤约含酵母菌（120÷0.1）×100000=1.2×108个/g。该方法测得的菌落数值往往比活菌的实际数值偏小，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，观察计数只能计为一个菌落。 【小问3详解】 为了进一步提高酵母菌产酶能力，筛选高效产脂肪酶酵母菌株，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行诱变育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以脂肪为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，产脂肪酶能力越强的酵母菌，分解利用脂肪的能力越强，菌落生长越好，一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选取直径较大的菌落即可。 【小问4详解】 由曲线图分析可知，相同时间内，菌株B的细胞密度高于菌株A，而菌株B的脂肪剩余量低于菌株A的脂肪剩余量，故进行相关研究可选择菌株B，原因是菌株B增殖速度快，单细胞蛋白产量高；降解脂肪能力强，净化效果好。 22. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其产生的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程进行培养，具体过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。请回答下列相关问题： （1）进行①过程前要对狼爪瓦松植株甲幼嫩的叶进行______处理，所用的试剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液。图中②过程称为______，通过②③培养获得植株乙所利用技术的细胞学原理是______。 （2）培养中的愈伤组织细胞一直处于______的状态，可用于④诱导产生突变体。 （3）⑤过程需要用______酶进行处理，形成植株丁的过程中，PEG的作用是______。 （4）黄酮类化合物是狼爪瓦松的次生代谢物，⑥为对该产物进行工厂化生产，某同学认为细胞产物的工厂化生产主要目的是提高单个细胞中黄酮类化合物的含量，你同意该同学的观点吗______，请说明相应的理由：______。 【答案】（1） ①. 酒精 ②. 脱分化 ③. 植物细胞的全能性 （2）增殖 （3） ①. 纤维素酶、果胶酶 ②. 促进原生质体融合 （4） ①. 不同意 ②. 植物细胞的次生代谢物含量很低，利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物主要是通过增加细胞数量从而增加黄酮类化合物的含量 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术： 1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。 2、过程：（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。（3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。 3、意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。题图分析：①表示外植体接种，②表示脱分化，③表示再分化，④表示再分化过程产生突变体，⑤表示去除细胞壁获得原生质体，⑥表示黄酮类化合物的提取。 【小问1详解】 用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液对外植体消毒。②表示脱分化，③表示再分化，植物组织培养所利用的原理是植物细胞的全能性。 【小问2详解】 愈伤组织在不诱导再分化的情况下，一般处于不断增殖的状态。 【小问3详解】 ⑤表示去除细胞壁获得原生质体，该过程需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。培育形成植株丁的过程中，PEG的作用是诱导原生质体融合，属于化学方法诱导原生质体融合。 【小问4详解】 不同意该同学的观点，黄酮类化合物属于植物的次生代谢物，植物细胞的次生代谢物含量很低，利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物主要是通过增加细胞数量从而增加黄酮类化合物的含量。 23. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC），过程如图1所示。 （1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自______。 （2）步骤①常用方法包括_______融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。其中灭活病毒诱导融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与_____发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 （3）步骤②的细胞必须经过步骤③______和______才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，符合要求的杂交瘤细胞的特点是____________。 （4）研究发现，抗体—药物偶联物（ADC）通过将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，其在患者体内的作用如图2所示。ADC依靠______（填“a”或“b”）最终作用于乳腺癌细胞的______，导致细胞凋亡。与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体—药物偶联物（ADC）对人体的副作用更小，原因是______。 【答案】（1）人的乳腺癌细胞    （2） ①. PEG##聚乙二醇 ②. 细胞膜上的糖蛋白 （3） ①. 克隆化培养 ②. 抗体检测 ③. 既能大量增殖，又能产生特定抗体  （4） ①. b ②. 细胞核 ③. 将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤 【解析】 【分析】由图1可知，①表示动物细胞的融合，②表示利用选择培养基筛选杂交瘤细胞，③表示克隆化培养和专一抗体检测。由图2可知，ADC不识别正常细胞，识别并结合乳腺癌细胞。 【小问1详解】 要生产乳腺癌的单克隆抗体，应该选择人的乳腺癌细胞作为抗原对小鼠进行免疫处理。 【小问2详解】 分析图1可知，①表示动物细胞的融合，常用化学药物PEG处理，诱导细胞融合；病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 【小问3详解】 ②表示利用选择培养基筛选杂交瘤细胞，杂交瘤细胞产生的抗体不一定是需要的，故需要进行③克隆化培养和抗体检测；符合要求的杂交瘤细胞的特点是杂交瘤细胞具有无限增殖，且能产生特定抗体；杂交瘤细胞可以在体外或小鼠腹腔内培养。 【小问4详解】 由图可知，ADC进入乳腺癌细胞，溶酶体可以将ADC水解，释放出的药物b进入细胞质基质，最终作用于细胞核，引起乳腺癌细胞的凋亡。因为将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤（靶点清楚，毒副作用小），故与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体—药物偶联物（ADC），对人体的副作用更小。 24. 如图是科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导胚胎干细胞（iPS细胞），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠的流程。回答下列有关问题： （1）图中黑鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的________过程类似。该过程结束后，细胞的全能性________（填“提高”或“降低”）。 （2）灰鼠体内受精过程中，精子入卵后被激活的卵子完成________，排出________后形成雌、雄原核。防止多精入卵的两道屏障是________反应和________反应。囊胚的滋养层细胞最终发育成________。 （3）将重组囊胚移入白鼠子宫内的技术为________，克隆鼠X的体色为________。科学家又利用图中的三只鼠（黑鼠作为体细胞供体）通过核移植技术得到克隆鼠Y，克隆鼠X和克隆鼠Y的性状不完全相同，若不考虑环境因素的影响，造成该现象的原因可能是核移植技术所用卵细胞中的_______________________________________________。 【答案】（1） ①. 脱分化 ②. 提高 （2） ①. 减数分裂Ⅱ ②. 第二极体 ③. 透明带 ④. 卵细胞膜 ⑤. 胎膜和胎盘 （3） ①. 胚胎移植 ②. 黑色 ③. 细胞质基因（或细胞质遗传物质）对性状有一定影响 【解析】 【小问1详解】 黑鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的脱分化过程类似，是组织细胞恢复分裂能力的过程。iPS细胞与小鼠内细胞团一样，具有全能性，该过程结束后，细胞的全能性提高。 【小问2详解】 受精过程中，精子入卵后被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后形成雌、雄原核。防止多精入卵的两道屏障是透明带反应、卵细胞膜反应。囊胚的滋养层细胞最终发育成胎膜和胎盘。 【小问3详解】 将重组囊胚移入白鼠子宫内的技术为胚胎移植，克隆属于无性繁殖，iPS细胞来自黑鼠，克隆鼠X的体色为黑色。若要利用图中的三只鼠（黑鼠作为体细胞供体）通过核移植技术得到克隆鼠Y，不考虑环境因素的影响，克隆鼠X和克隆鼠Y的性状不是完全相同，因为克隆鼠X的细胞质基因来源于黑鼠的卵细胞，克隆鼠Y的细胞质基因来源于灰鼠的卵细胞，卵细胞的细胞质基因对性状有一定影响。 25. 基因工程操作中经常用到多种工具，回答下列有关问题： （1）图甲是与DNA有关的五种酶分子的作用，除________（从酶1～5中选填）之外，其余的酶均作用于DNA的_________键。其中酶2与酶4起作用时的区别有______________（至少答出1点）。 （2）同尾酶在基因工程中有特殊用途，当准备连接的两个DNA分子中没有相同的限制酶识别序列时，可以用同尾酶切割后进行连接，据此推测同尾酶是指_____________________。 （3）某线性DNA分子含有5000个碱基对（bp），先用a酶切割，把得到的产物用b酶切割，得到的DNA片段大小如下表所示。a酶和b酶的识别序列和切割位点如下图所示。（本小题仅考虑完全酶切） a酶切割产物（bp） b酶再次切割产物（bp） 2100；1400；1000；500 1900；200；800；600；1000；300；200 在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别为_________个；用a酶切割与线性DNA分子具有相同碱基序列的质粒，能得到________种切割产物。 （4）如图表示的是构建表达载体时的某种质粒与目的基因。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。 分析可知，最好选择限制酶________切割质粒，限制酶_________切割目的基因所在的DNA． （5）标记基因在基因工程中的作用是_______________________________。 【答案】（1） ①. 酶3 ②. 磷酸二酯 ③. 酶2连接的是两个DNA片段，使DNA片段间形成磷酸二酯键而拼接起来。而酶4的作用是把脱氧核苷酸连接到脱氧核苷酸链的3'端 （2）识别序列不同，但切割后能产生相同黏性末端的限制酶 （3） ①. 3、3 ②. 3##三 （4） ①. Ⅰ ②. Ⅱ （5）便于重组DNA分子的筛选 【解析】 【小问1详解】 酶1能将DNA切成两个具有黏性末端的DNA片段，属于限制酶，破坏的是磷酸二酯键，酶2能将两个DNA片段连接在一起，属于DNA连接酶，连接的是磷酸二酯键，酶3是解旋酶，破坏的是碱基对之间的氢键，酶4是DNA聚合酶，可催化单个脱氧核苷酸连接在已有的DNA链上，形成的是磷酸二酯键，酶5是DNA水解酶，可使磷酸二酯键断裂，因此图甲中除酶3外，其余的酶均作用于DNA的磷酸二酯键，酶2是DNA连接酶，连接的是两个DNA片段，使DNA片段间形成磷酸二酯键而拼接起来。而酶4是DNA聚合酶，DNA聚合酶的作用是把脱氧核苷酸连接到脱氧核苷酸链的3'端。 【小问2详解】 根据题意“当准备连接的两个DNA分子中没有相同的限制酶识别序列时，可以用同尾酶切割后进行连接”，说明同尾酶识别序列不相同，但切割后能产生相同黏性末端的限制酶，因此可将两个没有相同的限制酶识别序列的DNA片段用同尾酶切割后并用DNA连接酶连接在一起。 【小问3详解】 分析表格：a酶可以把原有线性DNA切成4段，说明在该DNA分子上有3个切口，即a酶的识别序列有3个；b酶把大小是2100的DNA切成大小分别为1900和200两个片段，把大小是1400的DNA切成大小分别为800和600两个片段，把大小是500的DNA切成大小分别为300和200两个片段，且a酶和b酶的识别位点不同，说明b酶的识别序列有3个。质粒为环状DNA分子，故用a酶切割与线性DNA相同碱基序列的质粒（含有3个a酶的切点），可得到3种切割产物。 【小问4详解】 质粒上有两个标记基因：Gene I 内有酶Ⅱ的识别序列（GATC）； Gene Ⅱ内有酶I的识别序列（GGATCC）。如果用酶Ⅱ切割质粒，会同时切断Gene I，导致该标记基因失活，无法用于后续筛选；而用酶I切割质粒，只会切断Gene Ⅱ，保留Gene I 的完整性，可以保留一个标记基因用于筛选重组质粒。因此，质粒最好用限制酶 I切割。目的基因的左端有酶I的识别序列：GGATCC； 右端有酶Ⅱ的识别序列：GATC。 如果只用酶I切割，目的基因右端没有酶I的识别序列，无法被切割；而用酶Ⅱ切割，能同时识别两端的序列（左端GGATCC中包含GATC，右端是GATC），切割后产生的黏性末端与质粒上酶I切割的黏性末端互补，可以定向连接。因此，目的基因所在的DNA最好用限制酶Ⅱ切割。 【小问5详解】 标记基因（如抗生素抗性基因）的作用是：鉴别受体细胞中是否含有目的基因，便于重组DNA分子的筛选（或筛选含有重组质粒的受体细胞）。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二生物试题 说明： 1．本试卷满分100分，答题时间75分钟。 2．请将所有答案都填涂到答题卡上，考试结束后只交答题卡。 一、单选题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中只有一项符合题意。 1. 下图表示培养和纯化酵母菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（ ） A. 步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置 B. 步骤②为防止污染，接种环灼烧灭菌后应快速挑取菌落 C. 步骤③划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落 D. 步骤④在恒温培养箱培养后，可用于对酵母菌进行计数 2. 甘蔗原醋是近些年来开发的新型食用果醋，汁液透亮、酸味浓郁，具有调节肠胃功能、预防高血压及高血脂症等功效，在我国传统中医书中均有记载，具有很高的药用和保健价值。下列有关叙述正确的是（　　） A. LB型醋酸菌在缺少糖源和O2时，可直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸 B. 果醋发酵时，无论是利用糖源还是酒精，都需要打开通气阀释放产物CO2 C. 发酵①和②过程中，酵母菌和醋酸菌的代谢产物都会使发酵液的pH值降低 D. ①和②发酵条件不同，①为厌氧发酵，②为需氧发酵，果酒制好后直接通入无菌空气即可制醋 3. 研究小组利用稀释涂布平板法来探究某河流中大肠杆菌的数量，每一个浓度涂布四个平板，并且设置空白对照组。下列关于操作步骤的叙述正确的是（ ） A. 涂布前，将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，燃尽后还要冷却8~10s B. 涂布完成后，在培养皿的皿盖上做标记，以避免混淆，并将培养皿倒置培养 C. 计算平板上的菌落数时，四个培养皿上的菌落数无论多少，都要全部平均 D. 若空白对照组上有7个菌落，则在实验组数据基础上减去7，以获得最准确数据 4. 我国科研人员构建了一株嗜盐单胞菌H，并以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液）或餐厨垃圾为原料，生产PHA等新型可降解材料，工艺流程如下图。下列分析合理的是（　　） A. 嗜盐单胞菌H的选育和扩大培养是该发酵工程的中心环节 B. 搅拌器能使菌株H与培养液充分接触，提高原料利用率 C. PHA是一种单细胞蛋白，发酵结束后用过滤、沉淀等方法获取 D. 嗜盐单胞菌H是厌氧菌，通过无氧呼吸过程获得PHA产品 5. 农业生产中常用栽种蒜瓣（大蒜的鳞茎）的方式对大蒜进行繁殖，长此以往会导致大蒜体内积累多种病毒，造成产量、品质下降等问题。某科研小组设计了如图所示的生产流程。下列叙述正确的是（　　） A. 图示生产流程利用了植物细胞具有全能性的原理 B. 对茎尖进行消毒处理是为了减少茎尖组织中的病毒 C. ①②过程中使用不同培养基是为了及时清除代谢废物 D. 获得的试管苗几乎不含病毒，可直接移栽至大田 6. 豆科牧草沙打旺具有耐旱、耐贫瘠、抗风沙的特点，紫花苜蓿固氮能力较强。科研人员欲利用体细胞杂交技术获得兼具两者优点的杂种植株，实验流程如图，下列有关说法错误的是（　　） A. 荧光染料的颜色可以作为初步筛选融合原生质体的依据 B. 过程Ⅲ再生细胞壁的形成标志着植物细胞融合流程完成 C. 过程IV、V需照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用 D. 该技术打破了沙打旺与紫花苜蓿之间的生殖隔离，实现了远缘杂交育种 7. 植物细胞悬浮培养技术在生产中已得到应用。某兴趣小组利用该技术培养胡萝卜细胞并获取番茄红素（次生代谢物），实验流程见下图。下列描述合理的是（　　） 胡萝卜根外植体愈伤组织悬浮细胞番茄红素 A. 番茄红素一般在特定的组织或器官中产生 B. 实验流程中可用胶原蛋白酶处理愈伤组织，制备悬浮细胞 C. 细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件，提高了单个细胞中次生代谢物的含量 D. 胡萝卜根外植体进行适当的消毒处理后，立即使用蒸馏水清洗2～3次 8. 从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述错误的是（　　） A. 传代培养时，培养皿需密封防止污染 B. 选取②的细胞进行传代培养比①更合理 C. 不能直接用离心法收集细胞进行传代培养 D. 细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关 9. 下列关于干细胞的叙述，错误的是（ ） A. 干细胞具有分裂分化能力，包括胚胎干细胞和成体干细胞等 B. 成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织 C. 造血干细胞属于成体干细胞，能用来治疗白血病、帕金森病等疾病 D. 使用病人自身的iPS细胞移植回病人体内，可避免免疫排斥反应 10. 单克隆抗体制备流程如图所示，相关叙述错误的是（　　） A. 与植物细胞融合相比，诱导动物细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导法 B. 将筛选获得的杂交瘤细胞接种到96孔板时，每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞 C. 图中扩大培养后，只能从小鼠的腹水中获取大量单克隆抗体 D. 单克隆抗体能特异性识别、结合特定抗原，并可以大量制备 11. 了解哺乳动物受精的规律对于胚胎工程十分重要。下列叙述错误的是（ ） A. 刚排出的精子需要经过获能处理才能获得受精能力 B. 卵子一般到 MⅡ期时才具备与精子受精的能力 C. 在自然条件下，哺乳动物的受精过程在子宫内完成 D. 精子入卵后，卵细胞膜立即发生生理反应，拒绝其他精子的进入 12. 下列有关动物早期胚胎发育过程的叙述，错误的是（ ） A. 卵裂过程中细胞体积减小，有机物种类不断下降 B. 卵裂过程是在透明带内完成的，进行的是有丝分裂 C. 卵裂产生的子细胞逐渐形成致密的细胞团，形似桑葚，称为桑葚胚 D. 内、外胚层在原肠胚期形成，进而分化形成各种组织、器官等 13. 基因工程的实施需要借助工具才能完成。下列说法错误的是（　　） A. 限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，能识别特定的核苷酸序列 B. 用作运载体的质粒上常含有抗生素合成基因，便于重组DNA分子的筛选 C. DNA连接酶可以催化磷酸二酯键的形成，进而连接黏性末端或平末端 D. 将动物基因转入大肠杆菌细胞内可以用改造后的噬菌体做运载体 14. 从图1酶切结果分析，图2中的目的基因（长度为2.0kb）插入方向正确的重组质粒序号和作出该判断所用的限制酶是（　　） A. ①，EcoRI和HindⅢ B. ①，BamHI C. ②，EcoRI和HindⅢ D. ②，EcoRI 15. 某同学将质粒DNA进行限制酶酶切时，发现DNA完全没有被酶切，分析可能的原因并提出解决方法。下列叙述错误的是（　　） A. 限制酶失活，更换新的限制酶 B. 酶切条件不合适，调整反应条件如温度和酶的用量等 C. 质粒DNA突变导致酶识别位点缺失，更换正常质粒DNA D. 酶切位点被甲基化修饰，换用对DNA甲基化不敏感的限制酶 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，至少有一项符合题目要求，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16. 吸水链霉菌井冈变种是一种可与水稻根系共生的放线菌，其产生的井冈霉素是一种广谱抗生素，可以防治由立枯丝核菌引起的水稻纹枯病。如图为井冈霉素高产菌的选育过程，下列叙述正确的是（　　） A. 在患纹枯病的稻田中，应采集患病水稻根系附近的土壤样品 B. 步骤②使用全营养培养基富集菌液，以提高目标菌种的比例 C. 步骤③用稀释涂布平板法分离单菌落，根据菌落特征初筛 D. 步骤⑤先在培养基上均匀涂布立枯丝核菌，再接种吸水链霉菌井冈变种 17. 中国名茶普洱茶的主要活性成分——茶褐素，具有降脂减肥、抗氧化和提高免疫力等功能。研究人员在制作普洱熟茶的固体发酵过程中分离得到优势菌塔宾曲霉，塔宾曲霉能分泌胞外氧化酶催化茶多酚生成茶褐素。不同发酵温度下塔宾曲霉生成茶褐素的浓度如图。下列说法错误的是（ ） A. 普洱熟茶浸提液中的氨基酸和蛋白质可为塔宾曲霉生长提供氮源 B. 塔宾曲霉为好氧微生物，用普洱熟茶浸提液进行液体培养时应采用静置培养 C. 在发酵前两天茶褐素均无显著增加的原因可能是塔宾曲霉先进行生长繁殖，之后才分泌胞外氧化酶 D. 由图可知在最适温度为 37℃时且第 6 天结束发酵即可获得较高浓度的茶褐素 18. 在体细胞克隆猴培育过程中，为调节相关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人员将组蛋白去甲基化酶 Kdm4d 的 mRNA 注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）处理，具体流程如下图所示。相关叙述错误的是（ ） A. 常用显微操作法去除由核膜包被的卵母细胞的细胞核 B. 灭活的仙台病毒可使细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，利于融合 C. 组蛋白去甲基化和乙酰化的表观遗传修饰都有利于重构胚的分裂和发育 D. 为得到遗传背景相同的克隆猴，可将桑葚胚的内细胞团均等分割后再进行胚胎移植 19. 中华猕猴桃果实大、抗寒能力弱，狗枣猕猴桃果实小、耐低温。研究人员尝试培育抗寒能力强且果实大的猕猴桃新品种。方案1，中华猕猴桃和狗枣猕猴桃进行体细胞杂交；方案2，对中华猕猴桃或狗枣猕猴桃的体细胞进行诱变处理，再培育成植株。下列叙述正确的是（ ） A. 方案1和2中均需要先获得原生质体 B. 方案1可以采用离心法或PEG处理诱导两种猕猴桃的原生质体融合 C. 方案2宜选择两种猕猴桃的愈伤组织进行处理，且需筛选大量细胞 D. 方案1需使用的化学试剂有生长素、细胞分裂素和秋水仙素 20. 羊乳价格比牛乳价格高。为防范市场上以牛乳冒充羊乳销售的行为，研究人员以羊乳asl-酪蛋白为抗原，制备出了单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（ ） A. 利用抗asl-酪蛋白的单克隆抗体可以检测羊乳中是否掺杂了牛乳 B. 聚乙二醇可诱导B细胞与骨髓瘤细胞融合 C. 将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔可大量生产单克隆抗体 D. 杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖需要提供95%空气+5%CO2的混合气体 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题： （1）实验室获得纯净的微生物培养物的关键是_______________。 （2）称取1.0g某土壤样品，转入99mL无菌水中，制备成菌悬液，经等比稀释后，从下图③号试管取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上，重复3次，若平板培养后的菌落平均数为120个，则该样本中每克土壤约含酵母菌______________个。该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为_________________________________。 （3）为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行___________育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以___________为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径_______________的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。 （4）在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据图分析，应选择菌株__________进行后续相关研究，理由是_________________________________。 22. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其产生的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程进行培养，具体过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。请回答下列相关问题： （1）进行①过程前要对狼爪瓦松植株甲幼嫩的叶进行______处理，所用的试剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液。图中②过程称为______，通过②③培养获得植株乙所利用技术的细胞学原理是______。 （2）培养中的愈伤组织细胞一直处于______的状态，可用于④诱导产生突变体。 （3）⑤过程需要用______酶进行处理，形成植株丁的过程中，PEG的作用是______。 （4）黄酮类化合物是狼爪瓦松的次生代谢物，⑥为对该产物进行工厂化生产，某同学认为细胞产物的工厂化生产主要目的是提高单个细胞中黄酮类化合物的含量，你同意该同学的观点吗______，请说明相应的理由：______。 23. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC），过程如图1所示。 （1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自______。 （2）步骤①常用方法包括_______融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。其中灭活病毒诱导融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与_____发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 （3）步骤②的细胞必须经过步骤③______和______才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，符合要求的杂交瘤细胞的特点是____________。 （4）研究发现，抗体—药物偶联物（ADC）通过将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，其在患者体内的作用如图2所示。ADC依靠______（填“a”或“b”）最终作用于乳腺癌细胞的______，导致细胞凋亡。与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体—药物偶联物（ADC）对人体的副作用更小，原因是______。 24. 如图是科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导胚胎干细胞（iPS细胞），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠的流程。回答下列有关问题： （1）图中黑鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的________过程类似。该过程结束后，细胞的全能性________（填“提高”或“降低”）。 （2）灰鼠体内受精过程中，精子入卵后被激活的卵子完成________，排出________后形成雌、雄原核。防止多精入卵的两道屏障是________反应和________反应。囊胚的滋养层细胞最终发育成________。 （3）将重组囊胚移入白鼠子宫内的技术为________，克隆鼠X的体色为________。科学家又利用图中的三只鼠（黑鼠作为体细胞供体）通过核移植技术得到克隆鼠Y，克隆鼠X和克隆鼠Y的性状不完全相同，若不考虑环境因素的影响，造成该现象的原因可能是核移植技术所用卵细胞中的_______________________________________________。 25. 基因工程操作中经常用到多种工具，回答下列有关问题： （1）图甲是与DNA有关的五种酶分子的作用，除________（从酶1～5中选填）之外，其余的酶均作用于DNA的_________键。其中酶2与酶4起作用时的区别有______________（至少答出1点）。 （2）同尾酶在基因工程中有特殊用途，当准备连接的两个DNA分子中没有相同的限制酶识别序列时，可以用同尾酶切割后进行连接，据此推测同尾酶是指_____________________。 （3）某线性DNA分子含有5000个碱基对（bp），先用a酶切割，把得到的产物用b酶切割，得到的DNA片段大小如下表所示。a酶和b酶的识别序列和切割位点如下图所示。（本小题仅考虑完全酶切） a酶切割产物（bp） b酶再次切割产物（bp） 2100；1400；1000；500 1900；200；800；600；1000；300；200 在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别为_________个；用a酶切割与线性DNA分子具有相同碱基序列的质粒，能得到________种切割产物。 （4）如图表示的是构建表达载体时的某种质粒与目的基因。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。 分析可知，最好选择限制酶________切割质粒，限制酶_________切割目的基因所在的DNA． （5）标记基因在基因工程中的作用是_______________________________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $