精品解析：北京市第八十中学2025--2026学年第二学期4月阶段测 高二 生物(选考)

北京市第八十中学2025--2026学年第二学期4月阶段测 高二生物(选考) （考试时间60分钟 满分100分） 提示：试卷答案请一律填涂或书写在答题卡上，在试卷上作答无效。在答题卡上，选择题用2B铅笔作答，其他试题用黑色签字笔作答。 第一部分 选择题（每题2分，共30分） 本部分共15小题，在每题列出的四个选项中，选出最符合题目要求的一项。 1. 大豆叶片细胞的细胞壁被酶解后，可获得原生质体。以下对原生质体的叙述错误的是（ ） A. 制备时需用纤维素酶和果胶酶 B. 膜具有选择透过性 C. 可再生出细胞壁 D. 失去细胞全能性 【答案】D 【解析】 【分析】植物体细胞杂交就是将不同种的植物体细胞，在一定的条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。该技术涉及的原理是细胞膜的流动性和细胞的全能性。 【详解】A、大豆叶片细胞是植物细胞，具有细胞壁，其细胞壁的成分是纤维素和果胶，所以制备原生质体，需用纤维素酶和果胶酶进行处理，A正确； B、生物膜的功能特点是具有选择透过性，所以膜具有选择透过性，B正确； C、原生质体可以再生出新的细胞壁，C正确； D、分离出的原生质体具有全能性，可用于植物体细胞杂交，为杂种植株的获得提供了理论基础，D错误。 故选D。 2. 紫花地丁是一种传统的中药材，全草可以入药。为了满足市场需要，现需用植物组织培养的方法进行大量繁殖。下列叙述正确的是（　　） A. 启动脱分化和再分化的关键因素是光照条件 B. 对外植体进行消毒时，消毒时间越长，成活率越高 C. 植物组织培养技术和果树嫁接均属于快速繁殖技术 D. 培养的脱毒苗需要先进行病毒检测后才可以进行扩大繁殖 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。其具体流程为：接种外植体→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→移栽成活。 【详解】A、启动脱分化和再分化的关键因素是植物激素，如生长素和细胞分裂素的浓度比例，A错误； B、外植体消毒时间过长会损伤细胞，降低成活率。实际操作中需使用酒精、次氯酸钠等适当消毒，而非时间越长越好，B错误； C、植物组织培养技术属于快速繁殖技术（如微型繁殖），而果树嫁接属于传统无性繁殖技术，虽能保持遗传性状，但效率较低，C错误； D、脱毒苗通过茎尖分生组织培养获得，理论上不含病毒，但为确保彻底脱毒，需先进行病毒检测，确认无毒后再扩大繁殖，避免潜在病毒扩散，D正确。 故选D。 3. 基因型为 AaBb的水稻的花药通过无菌操作，接种到试管后，在一定条件下形成试管苗。下列相关叙述错误的是（ ） A. 在离体条件下，花粉经过脱分化和细胞分裂形成不定形的愈伤组织 B. 愈伤组织必须从培养基中获得水、无机盐和小分子的有机物等营养 C. 一般先诱导愈伤组织生芽，再诱导愈伤组织生根，最后形成试管苗 D. 经无菌培养获得的试管苗的基因型是 AABB、AAbb、aaBB、aabb 【答案】D 【解析】 【分析】1、离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织；由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化；脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化；再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植株体； 2、由题图信息分析可知，a→b是脱分化的过程，c→d是再分化的过程。 【详解】A、在离体条件下，花粉经过脱分化转变成为具有分生能力的薄壁细胞，进而形成植物的愈伤组织，A正确； B、愈伤组织的代谢类型是异养需氧型，因此在愈伤组织的形成过程中，必须从培养基中获得水、无机盐和小分子的有机物等营养物质，B正确； C、一般将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽的培养基上，长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导形成试管苗，C正确； D、基因型为AaBb的水稻经过减数分裂可产生基因型为AB和ab或Ab和aB的配子，再经过花药离体培养可得到单倍体，因此可能出现的基因型有AB、Ab、aB、ab，D错误。 故选D。 4. 科学家将鼠的肾单位祖细胞（NPC）和输尿管祖细胞（UPC）共培养，构建出具有部分功能的类器官，过程如下图。下列相关叙述错误的是（　　） A. ①过程需在CO2培养箱中进行 B. ①过程通常需在培养基中加入血清 C. ①②过程有细胞分裂也有细胞分化 D. NPC和UPC的子代细胞随机分布 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物细胞培养需要放在CO2培养箱中进行，故①过程需在CO2培养箱中进行，A正确； B、研究者对动物细胞培养所需的营养物质尚未研究清楚，故培养动物细胞需要在培养基中加入血清，①过程通常需在培养基中加入血清，B正确； C、动物细胞培养的原理是细胞增殖（有丝分裂），分析题图可知，①②过程有细胞分裂也有细胞分化，C正确； D、题图可知，UPC的子代细胞会自发聚集于中心并分支最终形成集合管，而NPC的子代细胞围绕着集合管的外围分布最终形成了肾单位，可见NPC和UPC的子代细胞不是随机分布而是有规律分布，D错误。 故选D。 5. 在制备单克隆抗体的过程中HAT选择培养基可以筛选出融合成功的杂交瘤细胞，一种杂交瘤细胞只能产一种抗体。科学家通过动物细胞融合技术，将两株不同的杂交瘤细胞（A和B）融合形成双杂交瘤细胞AB．双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，可以产生双特异性抗体AB．据图分析，下列说法正确的是（ ） A. 双杂交瘤细胞同时识别α、β抗原后，才能产生双特异性抗体 B. 双杂交瘤细胞的筛选需要进行克隆化培养和抗体检测 C. 对双杂交瘤细胞进行传代培养时，需用胰蛋白酶使之分散 D. 体外培养双杂交瘤细胞需要定期更换培养液以创设无菌环境 【答案】B 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、杂交瘤细胞是由已免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，无需接触抗原就能产生抗体，A错误； B、单克隆抗体制备过程中，杂交瘤细胞需要进行两次筛选，第一次利用选择培养基筛选出能在特定培养基生长且能无限增殖的杂交瘤细胞，第二次筛选可用抗原-抗体杂交的方法筛选出产生特异性抗体的杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞是由两个杂交瘤细胞融合而成，需要进行克隆化培养和抗体检测，B正确； C、双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，若要传代培养，细胞培养液直接离心，去除上清液培养基，加入新鲜培养基即可，不用胰蛋白酶处理，C错误； D、体外培养双克隆抗体需要定期更换培养液以补充营养，减少代谢废物的产生，创造无毒环境，D错误。 故选B。 6. 研究者通过下图所示的操作过程，获得导入S基因的基因编辑小鼠。下列相关叙述正确的是（ ） A. 过程①用促性腺激素处理以获得更多卵母细胞 B. 过程②在雌鼠a的输卵管内完成受精 C. 过程③需将表达载体注射到子宫中 D. 过程④需抑制雌鼠b对植入胚胎的免疫排斥 【答案】A 【解析】 【分析】胚胎移植的生理学基础： ①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。 ②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。 ③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。 ④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。 【详解】A、过程①用促性腺激素对供体进行超数排卵处理，获得更多的卵母细胞，A正确； B、过程②是体外受精，体外受精是将获能的精子和培养成熟的卵子置于适当的培养液中共同培养一段时间，来促使它们完成受精，B错误； C、③是导入含S基因的表达载体，应该将含S基因的表达载体通过显微注射法注射至小鼠的受精卵中，C错误； D、受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，故过程④不需要抑制雌鼠b对植入胚胎的免疫排斥，D错误。 故选A。 7. 哺乳动物细胞中某些基因会根据来源发生DNA甲基化，使来自父本或母本的基因不表达，称为印记基因。我国科学家通过基因编辑技术使印记基因恢复表达，培育出存活至成年的双父本小鼠（如图），增进了对印记基因的了解。相关叙述错误的是（　　） A. 图中胚胎干细胞来自囊胚1的内细胞团细胞 B. 通过基因编辑使两个父本的印记基因都恢复表达功能 C. 双父本小鼠体细胞中的线粒体DNA来自去核卵母细胞 D. 双父本小鼠培育过程中利用了体细胞核移植和胚胎移植等技术 【答案】B 【解析】 【详解】A、囊胚的内细胞团细胞具有全能性，是胚胎干细胞的主要来源，图中胚胎干细胞必然来自囊胚1的内细胞团，A正确； B、印记基因的特点是“父本或母本来源的基因不表达”，双父本小鼠的两个基因均来自父本，原本均会因甲基化不表达；基因编辑解除精子1父本印记基因的甲基化抑制，使其恢复表达，而非“两个父本的印记基因都恢复”，B错误； C、线粒体DNA主要来自母本的细胞质，双父本小鼠的培育中使用了去核卵母细胞，其细胞质中的线粒体DNA会被保留，因此体细胞线粒体DNA来自去核卵母细胞，C正确； D、流程中“去除卵母细胞核”“注入基因编辑后的细胞和精子”属于体细胞核移植相关操作，后续胚胎需移植到代孕母体才能发育，因此利用了体细胞核移植和胚胎移植技术，D正确。 故选B。 8. 用PCR技术将DNA分子中的A1片段进行扩增，设计了引物Ⅰ、Ⅱ，其连接部位如图所示，x为某限制酶识别序列。扩增后得到的绝大部分DNA片段是右图中的 A. B. C. D. 【答案】D 【解析】 【详解】利用PCR技术将DNA分子中的A1片段进行扩增，当引物与母链通过碱基互补配对结合后，子链延伸的方向总是从5′端到3′端，据此依题意和图示分析可知，A、B、C均错误，D正确。 9. 某同学将质粒DNA进行限制酶酶切时，发现DNA完全没有被酶切，分析可能的原因并提出解决方法。下列叙述错误的是（ ） A. 质粒DNA突变导致酶识别位点缺失，更换正常质粒DNA B. 限制酶放置过久可能导致活性丧失，更换新的限制酶 C. 酶切位点被甲基化修饰，换用对DNA甲基化不敏感的限制酶 D. 酶切条件不合适，调整反应条件如温度、pH、酶的用量等 【答案】D 【解析】 【详解】质粒DNA未被限制酶切割的可能原因包括酶活性丧失、识别位点缺失或修饰、反应条件不适宜等。需逐一分析各选项的合理性。 【分析】A、质粒DNA突变导致酶识别位点缺失时，更换正常质粒DNA可恢复切割，A正确； B、限制酶活性丧失时，更换新酶可解决问题，B正确； C、甲基化修饰可能阻碍酶切，换用对甲基化不敏感的限制酶是有效方法，C正确； D、调整温度、pH是正确的，但酶的用量不足通常导致切割不完全而非完全无切割，D错误。 故选D。 10. 利用农杆菌转化法可以将目的基因导入受体细胞。农杆菌Ti质粒是一种天然存在的植物遗传转化系统。下列关于Ti质粒的叙述正确的是（　　） A. 当农杆菌感染植物时，菌体进入受体细胞后留在细胞质内 B. T-DNA进入受体细胞后不能利用植物体内的酶进行转录和翻译 C. 将目的基因与Ti质粒整合的过程称为转化 D. Ti质粒上的T-DNA区段可整合到受体细胞的染色体上 【答案】D 【解析】 【详解】A、农杆菌感染植物时，仅Ti质粒上的T-DNA片段会转移进入植物受体细胞，农杆菌菌体本身不进入受体细胞，A错误； B、T-DNA进入受体细胞后可整合到受体细胞染色体DNA上，能够利用植物体内的酶完成转录和翻译过程，B错误； C、转化是指目的基因进入受体细胞并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，将目的基因与Ti质粒整合属于构建基因表达载体的操作，不属于转化，C错误； D、Ti质粒上的T-DNA（可转移DNA）具有可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA上的特点，D正确。 11. 第三代疫苗——DNA 疫苗是指将编码保护性抗原蛋白的基因（如图甲）插入到适宜的质粒（如图乙）中得到的重组DNA分子，将其导入人体内，在人体细胞内表达的产物可直接诱导机体免疫应答，且可持续一段时间。限制性内切核酸酶的切点分别是BgIⅡ、EcoRI和 Sau3AⅠ。下列分析错误的是（　　） A. 构建DNA 疫苗时，可用BgIⅡ和 Sau3AI切割目的基因和质粒 B. 图乙中只用EcoRI切割后的质粒，含有2个游离的磷酸基团 C. 用EcoRI切割目的基因和质粒，再用DNA 连接酶连接，只产生1种连接产物 D. 抗原基因在体内表达时不需要解旋酶 【答案】C 【解析】 【分析】根据题意和图示分析可知：图甲中可以看出，在目的基因上存在三种酶切位点，只有EcoR I具有两个切点，而BglⅡ和Sau3A I具有只有一个切点。图乙中也具有这三种限制酶的切割位点。 【详解】A、如果用BglⅡ和Sau3A I切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用BglⅡ和Sau3A I切割质粒也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，A正确； B、质粒为环状DNA，其上只含有一个EcoRI的切点，因此用EcoRI切割后，该环状DNA分子变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团，B正确； C、从图甲看出，用EcoRI切割目的基因后两端各有一切口，与图乙中EcoRI切口对接时，可有两种可能，即可产生两种重组DNA，C错误； D、基因表达包括转录和翻译，转录时不需要解旋酶，在RNA聚合酶的作用下，DNA即可解旋，D正确。 故选C。 12. 最早的双脱氧测序法是PCR反应体系中，分别再加入一种少量的双脱氧腺苷三磷酸（ddATP、ddCTP、ddGTP或ddTTP），子链延伸时，双脱氧核苷三磷酸也遵循碱基互补配对原则，以加入ddATP的体系为例：若配对的为ddATP，延伸终止；若配对的为脱氧核苷三磷酸（dATP），继续延伸；PCR产物变性后电泳检测。通过该方法测序某疾病患者及对照个体的一段序列，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 上述PCR反应体系中只需加入一种引物 B. 5'—TAGTGTCCATC-3'为患者的一段序列 C. 电泳时产物的片段越大，迁移速率越慢 D. 患者该段序列中某位点的碱基G突变为A 【答案】B 【解析】 【分析】双脱氧测序法的原理：在DNA聚合酶、引物、四种单脱氧核苷酸（dNTP）存在的情况下，如果在四管反应系统中再分别加入四种双脱氧核苷三磷酸（ ddNTP），DNA链合成反应过程中ddNTP与dNTP处于一种竞争状态，即新合成DNA链既可能掺入正常dNTP，也可能掺入ddNTP并使新合成链终止延伸。这样在每个反应系统中形成的产物是一系列长度不等的多核苷酸片段，这些片段具有相同的起点，即引物的5'端，但有不同的ddNTP终端。 在结束反应后，用四个泳道进行电泳，分别分离各组反应体系中不同长度的DNA片段，检测DNA片段终止末端位置的碱基种类，从自显影图谱中直接读取到与模板相匹配的新的链序。 【详解】A、利用双脱氧测序法时，PCR反应体系中加入的模板是待测的单链DNA，故只需加入一种引物，A正确； B、双脱氧测序法的原理：在DNA聚合酶、引物、四种单脱氧核苷酸（dNTP）存在的情况下，如果在四管反应系统中再分别加入四种双脱氧核苷三磷酸（ ddNTP），DNA链合成反应过程中ddNTP与dNTP处于一种竞争状态，即新合成DNA链既可能掺入正常dNTP，也可能掺入ddNTP并使新合成链终止延伸。这样在每个反应系统中形成的产物是一系列长度不等的多核苷酸片段，这些片段具有相同的起点，即引物的5'端，但有不同的ddNTP终端。 在结束反应后，用四个泳道进行电泳，分别分离各组反应体系中不同长度的DNA片段，检测DNA片段终止末端位置的碱基种类，从自显影图谱中直接读取到与模板相匹配的新的链序。依据双脱氧测序法的原理，可以确定每个泳道中的条带（DNA片段）的3'终端的碱基，如+ddATP的泳道中出现的条带（DNA片段）的3'终端碱基就是A。另外由于每个片段的起始点相同，但终止点不同，因此可以通过比较片段的长度来确定DNA序列中每个位置上的碱基；图示电泳方向为从上→下，即对应的DNA片段为长→短，则对应的DNA测序结果为3'→5'，如对照个体的电泳结果最短的条带为+ddCTP泳道组的条带，则说明该DNA片段5'端第一个碱基为C；因此对照个体的测序结果为5'-CTACCCGTGAT-3'，患者的测序结果为5'-CTACCTGTGAT-3'，模板链与之互补，B错误； C、电泳时，DNA的片段越大，迁移速率越慢，C正确； D、对比患者和对照个体的测序结果可知，患者该段序列中某位点的碱基G突变为A，D正确。 故选B。 13. L-精氨酸在医药、食品等领域有广泛的应用。我国科研人员以大肠杆菌为材料，构建了能快速检测L-精氨酸产能的生物传感器。该生物传感器的构建原理及其基因表达载体如图所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. arg基因与GFP基因转录时共用同一条模板链 B. 一定范围内，L-精氨酸产量越高，可检测到的绿色荧光强度越高 C. 推测arg蛋白会抑制RNA聚合酶与启动子B的结合 D. 图中的基因表达载体还应该包括复制原点、标记基因等 【答案】A 【解析】 【详解】A、不同基因可分别以 DNA 分子的两条链作为模板，图中启动子A和启动子B方向相反，说明arg基因与GFP基因转录时的模板链不是同一条，A错误； B、GFP 基因为绿色荧光蛋白基因，L-精氨酸产量升高会促进 GFP 基因的表达（如 arg 基因产物激活 GFP 基因的转录），在一定范围内，L-精氨酸产量与 GFP 荧光强度呈正相关，所以GFP基因的表达产物的荧光强度可直接反映目标产物（L-精氨酸）的产量，B正确； C、据图可知，arg蛋白会抑制启动子B启动转录过程，即推测arg蛋白会抑制RNA聚合酶与启动子B的结合，C正确； D、基因表达载体的组件包括：启动子、终止子、目的基因、复制原点、标记基因，图示仅展示了启动子和部分基因，缺少复制原点、标记基因等关键组件，D正确。 故选A。 14. 神经科学家设计了一种合成蛋白质LIMK1（结合ATP并磷酸化其靶标的蛋白质），能改善老年认知退化人群的记忆功能。下列叙述不正确的是（　　） A. 设计蛋白质LIMK1时，先设计其基因的碱基序列再推测其功能 B. 通过基因定点突变技术可对LIMK1蛋白基因进行碱基的替换 C. 设计蛋白质LIMK1利用的技术是蛋白质工程，其可制造新的蛋白质 D. 蛋白质的高级结构十分复杂，故蛋白质工程是一项难度很大的工程 【答案】A 【解析】 【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一-种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。 【详解】A、蛋白质工程的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)，A错误； B、通过基因定点突变技术可对LIMK1蛋白基因进行碱基的替换，B正确； C、设计蛋白质LIMK1利用的技术是蛋白质工程，其可制造新的蛋白质，C正确； D、蛋白质的高级结构十分复杂，故蛋白质工程是一项难度很大的工程，D正确。 故选A。 15. 下图表示“DNA的粗提取和鉴定”的相关流程。下列叙述正确的是（　　） A. 步骤1和步骤2的目的是获取研磨液中的沉淀物 B. 步骤3中的DNA溶于酒精，而某些蛋白质不溶于酒精 C. 步骤4中DNA在2mol·L-1的NaCl溶液中溶解度较高 D. 利用二苯胺试剂鉴定DNA时，将试管置于50℃的温水中 【答案】C 【解析】 【分析】DNA的粗提取和鉴定的原理：DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理，可以初步分离DNA和蛋白质。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2 mol⋅L−1 的NaCl溶液中。在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。 【详解】A、步骤1和步骤2的目的是获取研磨液中的上清液，A错误； B、步骤3中的DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精，B错误； C、DNA在不同浓度的NaCl中溶解度不同，DNA在2 mol⋅L−1 的NaCl溶液中溶解度较高，C正确； D、利用二苯胺试剂鉴定DNA时，将试管置于沸水中，D错误。 故选C。 第二部分 非选择题（共70分） 16. 植物组织培养技术应用广泛，科研人员用拟南芥探索获得大量愈伤组织的途径。 （1）组培的理论基础是植物细胞具有_____，即细胞经过分裂分化后，仍具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的____。切取外植体时的损伤可促进内源生长素（IAA）合成并运输到受伤部位，诱导细胞分裂分化。因此，组培时常添加2，4-D、NAA等生长素类调节剂。 （2）含较高浓度2，4-D的培养基（2，4-D-CIM）可促进愈伤组织增殖，但在实践中发现，2，4-D-CIM中的外植体脱分化形成愈伤组织延迟。为探究其原因，进行相关实验。 ①检测不同培养基中叶片外植体细胞中IAA合成酶基因（YUC）的表达量，由图1结果可知：较高浓度2，4-D______IAA的合成。 ②研究者推测，一定量IAA有利于愈伤组织的形成。为此，在2，4-D-CIM的基础上，再分别添加IAA、NAA、检测接种后外植体细胞IAA响应基因W1的表达情况，结果如图2所示，同时还测量了各组______，结果显示其与W1表达量正相关，证明推测成立。添加NAA组是为了进一步确认______。 （3）根据上述所有实验结果，在答题卡方框中填相关基因，括号中填“+”（表示促进）或“-”（表示抑制），完善在愈伤组织形成和增殖过程中相关物质的关系模式图______。 【答案】（1） ①. 全能性 ②. 潜能 （2） ①. 抑制 ②. 愈伤组织形成量 ③. 影响愈伤组织形成的是生长素类激素的种类而非含量 （3） 【解析】 【分析】植物体各部分的组织细胞，有着不同的结构和功能，当被接种在人工培养基上，受到植物激素等物质和外界条件的作用，一般先脱分化，成为一团没有特定结构和功能的分生状态的细胞（愈伤组织），然后在一定条件下再分化长出根和芽，形成完整植株。植物组织培养的原理是植物细胞的全能性。 【小问1详解】 植物组培的一般过程是剪接植物器官或组织→经过脱分化（也叫去分化）形成愈伤组织→再经过再分化形成组织或器官→经过培养发育成一颗完整的植株，植物组织培养的理论基础是植物细胞具有全能性，全能性是指细胞经过分裂分化后，仍具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能； 【小问2详解】 ①观察图1，与对照组相比，在2，4-D-CIM组中IAA合成酶基因（YUC）的表达量明显降低，说明较高浓度2，4-D抑制IAA的合成； ②因为研究者推测一定量IAA有利于愈伤组织的形成，并且要证明IAA响应基因W1的表达情况与某一指标正相关来确认推测成立，所以同时还测量了各组愈伤组织的形成量；添加NAA组是为了进一步确认影响愈伤组织形成的是生长素类激素的种类而非含量； 【小问3详解】 根据实验结果可知，较高浓度2，4-D抑制IAA合成酶基因（YUC）的表达，从而抑制IAA合成，而IAA有利于愈伤组织形成，所以模式图为：。 17. 猫的Feld1蛋白主要存在于毛发和唾液中，是导致人类过敏的一种常见过敏原，因此开发Feld1蛋白的快速检测技术具有重要意义。 （1）科研人员通过多次注射_____对小鼠进行免疫，然后从免疫小鼠的脾脏收集______细胞和骨髓瘤细胞混合，并加入______试剂促进细胞融合，经选择的杂交瘤细胞进行_____培养和抗体阳性检测，最终在培养液中提取分离得到多种抗Feld1蛋白的单克隆抗体，分别命名为5H4和7D11。 （2）为了探究5H4和7D11结合抗原的具体表位，将Feld1蛋白分为F1、F2、F3三个小片段蛋白（图1A），并利用5H4和7D11进行蛋白质免疫印记实验（图1B），结果表明5H4和7D11分别识别Feld1蛋白的______片段。 （3）传统的双抗体夹心法可以快速检测样本中的抗原，原理如图2A。金标垫部位具有5H4蛋白-胶体金颗粒复合物，该复合物具有肉眼可见的红色斑点，并会随着标本流向移动。检测线（T线）和质控线（C线）分别包埋了固定在硝酸纤维素膜上的______（①5H4蛋白、②抗5H4蛋白的抗体、③7D11蛋白、④抗7D11蛋白的抗体）。请根据原理图分析不同结果下C线、T线的结果，并填入表格中______（“+”代表红色，“-”代表无色）。 （4）为了检测Feldl蛋白的含量，研究人员对双抗体夹心法做了进一步改造，如图3所示，三条检测线T1、T2、T3包埋相同的物质，请简述如何通过检测线的显色结果来判断待测血清中Feld1蛋白的相对含量______。 【答案】（1） ①. Feld1蛋白 ②. B细胞 ③. PEG ④. 克隆化 （2）F3、F1 （3） ①. ③、② ②. 阳性结果 阴性结果 C线 + + T线 + - （4）检测线出现红色条带数量越多，Feld1蛋白的含量越多 【解析】 【分析】血糖的升高会刺激下丘脑的感受器进而通过神经刺激胰岛B细胞分泌胰岛素，但同时血糖的升高也会直接刺激胰岛B细胞分泌胰岛素。 胰岛素分泌的增多：①会抑制胰高血糖素的分泌；②促进糖类的氧化的分解；③促进血糖转化为肝糖原、肌糖原；④促进糖类转化为脂肪、非必需氨基酸。血糖降低，刺激下丘脑和胰岛B细胞，而下丘脑也会通过神经刺激胰岛B细胞分泌胰高血糖素。胰高血糖素会促进储能物质向血糖的转化，进而提高血糖。 【小问1详解】 科研人员通过多次注射Feld1蛋白作为抗原，对实验小鼠进行免疫，产生相应的B淋巴细胞，然后从脾脏中收集B淋巴细胞，然后与骨髓瘤细胞混合，在PEG的作用下促进B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，经选择的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体阳性检测，最终在培养液中提取分离得到多种抗Feld1的单克隆抗体。 【小问2详解】 据图1B可知，5H4可与F3片段产生免疫反应，7D11可与F1片段产生免疫反应，故5H4和7D11分别识别Feld1蛋白的F3、F1片段。 【小问3详解】 据图2A结合题干信息可知，该检测工具的工作原理是:若样品中含有待测物质，经过金标垫时，可与其上的5H4蛋白-胶体金颗粒复合物(红色)结合，并移向检测线，检测线预埋的物质应能与该物质结合，使部分红色物质停留在检测线，此时检测线显示为红色，部分样品继续向质控线移动，而质控线预埋的物质不管样品中是否含有待测物质，均能与5H4蛋白-胶体金颗粒复合物(红色)结合，显示红色，以确保检测工具的有效性若质控线不显示红色，则说明检测工具本身质量有问题，那么检测线的结果不可信，因此检测线(T线)和质控线(C线)分别包埋了固定在硝酸纤维素膜上的③7D11蛋白和②抗5H4蛋白的抗体；根据该检测工具的工作原理，阴性和阳性结果对应的C线、T线是否显红色如表所示(“+”代表红色，“_’代表无色):。 【小问4详解】 为了检测Feld1蛋白的含量，研究人员将一条检测线改成三条检测线，若检测线出现红色条带数量越多，则说明Feldl蛋白的含量越多。 18. 甜玉米与普通玉米相比，甜玉米中可溶性糖向淀粉的转化较慢含可溶性糖量高，汁多质脆，富含多种维生素。为了使甜玉米更富有生产应用价值，科研人员通过转基因技术培育出了超量表达P蛋白转基因甜玉米。在超量表达P基因载体的构建中，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1所示，P蛋白在玉米株系的表达量如图2所示。回答下列问题： （1）①强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被________识别并结合，驱动基因的持续转录。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用________酶组合，将片段和Ti质粒切开后构建重组表达载体。 ②TDNA在该实验中的作用是________。 （2）将农杆菌液浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养，培养基中需加入________进行筛选，筛选出的愈伤组织________形成丛芽，最终获得多个玉米株系a1、a2、a3、a4。通过对a1、a2、a3、a4四株甜玉米株系的蛋白质表达量进行测定结果如图2，其中a4株系P蛋白表达量较低的原因可能是________。 （3）为了进一步提高甜玉米中淀粉的含量，科研人员提出通过降低淀粉酶合成有关基因的表达实现生产目标。研究人员发现吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂，将其注入植物细胞内会使基因表达受阻，科研人员将吗啉反义寡核苷酸导入玉米的受精卵中起到明显效果。针对它的具体作用，科研人员提出以下假说： 假说1：导致RNA前体上内含子1的对应序列不能被剪切。 假说2：导致RNA前体上内含子1和外显子2的对应序列同时被剪切。 为了验证上述假说，分别从受精卵发育后3天的实验组和对照组胚细胞中提取________，逆转录形成cDNA。若假说1成立，使用右图所示引物2和引物4进行PCR后电泳的结果为________（填字母）。 A．实验组有目的条带　    B．实验组无目的条带 C．对照组有目的条带　    D．对照组无目的条带 若要证明假说2成立，需要选择如图所示引物________进行PCR。 【答案】（1） ①. RNA聚合酶 ②. BamHⅠ和SacⅠ ③. 将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上 （2） ①. 潮霉素 ②. 再分化 ③. a4株系玉米中可能没有导入目的基因或目的基因未表达 （3） ①. 总RNA ②. AD ③. 3和4 【解析】 【小问1详解】 启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点，能驱动基因的转录，为使P基因在玉米植株中超量表达，则需要强启动子，由于启动子和P基因构成的目的基因两端只有BamH I和Sac I酶切位点，因此应优先选用BamH I和Sac I酶组合，将片段和Ti质粒切开后构建重组表达载体。 农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，因此T-DNA在该实验中的作用是将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上。 【小问2详解】 由图可知，标记基因是潮霉素抗性基因，因此将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织除菌后进行植物组织培养，培养基中需加入潮霉素进行筛选。愈伤组织经过再分化形成丛芽。 从图2看出a4株系P蛋白表达量较低，可能是a4株系玉米中没有导入目的基因或目的基因未表达。 【小问3详解】 针对吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂，提出假说1和假说2，为验证上述假说，可分别从受精后3天的实验组和对照组胚细胞中提取总RNA，逆转录形成cDNA。 若假说1成立，即实验组RNA前体上内含子1的对应序列不能被剪切下去，对照组RNA前体上内含子1的对应序列不能被剪切下去，使用上图所示引物2和引物4进行PCR后电泳的结果为实验组有目的条带，对照组无目的条带，即AD正确。 若要证明假说2成立，即RNA前体上内含子1和外显子2的对应序列同时被剪切下去，即选择图示引物3和4进行PCR可得到电泳条带。 19. 2020年10月7日，瑞典皇家科学院已决定将2020年诺贝尔化学奖授予德国马克斯·普朗克病原学研究所的Emmanuelle Charpentier博士以及美国加州大学伯克利分校的Jennifer A． Doudna博士，以表彰她们在基因组编辑领域的贡献。在人工设计的条件下，通过sgRNA与基因组靶序列的特异性结合，引导Cas9蛋白“切割”基因组DNA (如下图所示)。请回答下列问题。 （1）sgRNA与基因组靶序列可以特异性结合的原因是___________，Cas9核酸酶可以在sgRNA的引导下打开目标基因中的_______键，使得基因组DNA断裂。在_____酶的作用下，断裂的DNA可重新拼接。 （2）有研究者利用该技术，敲除了大鼠胰岛素受体底物1 (Irsl)基因，获得了糖尿病模型动物。流程如下： 根据已知Irs1基因的______， 设计两种sgRNA；构建含有两种sgRNA基因和______基因的表达载体；利用__________法，将上述基因的体外表达产物RNA，导入大鼠的_____(细胞)。 （3）提取转基因大鼠DNA，用PCR的方法检测Irs1编辑情况，结果如下图。其中WT为_____大鼠，由图可知2号大鼠比野生型大鼠的PCR产物短95bp，研究者据此确定其为阳性结果，即Irsl 被敲除失活，因为____________对应序列在Irsl基因上的位置相距95bp。 （4）2号大鼠P与野生型WT大鼠杂交，提取后代DNA，用相同引物进行PCR，结果如上图。_________________属于杂交后代， 说明基因编辑结果______稳定遗传。 【答案】（1） ①. 二者的碱基互补配对 ②. 磷酸二酯 ③. DNA连接 （2） ①. 碱基序列 ②. Irs1 ③. 显微注射 ④. 受精卵 （3） ①. 野生型 ②. sgRNA基因 （4） ①. 2、3、7、9 ②. 可以 【解析】 【分析】根据题意分析可知，CRISPR/Cas9系统基因编辑技术是利用该基因表达系统中的引导sgRNA识别并结合特定的DNA序列，从而引导Cas9蛋白结合到相应位置并剪切DNA，最终实现对靶基因序列的编辑。 【小问1详解】 由于人工设计条件下，使sgRNA与基因组靶序列二者的碱基互补配对，因此sgRNA与基因组靶序列可以特异性结合。Cas9核酸酶可以在sgRNA的引导下打开目标基因中的磷酸二酯键，使得基因组DNA断裂。在DNA连接酶的作用下，断裂的DNA可重新拼接。 【小问2详解】 利用“CRISPR/Cas9基因编辑技术”，敲除大鼠胰岛素受体底物1（Irsl）基因，获得糖尿病模型动物的流程如下：据已知Irs1基因的碱基序列，设计两种sgRNA；构建含有两种sgRNA基因和Irs1基因的表达载体；通过显微注射法，将上述基因的体外表达产物RNA，导入大鼠的受精卵细胞。 【小问3详解】 WT为野生型大鼠，据图分析可知，2号大鼠比野生型大鼠的PCR产物短95bp，据此确定其为阳性结果，即Irsl被敲除失活，因为sgRNA基因对应序列在Irsl基因上的位置相距95bp。 【小问4详解】 2号大鼠P与野生型WT大鼠杂交，根据图分析，同时含有2 号大鼠P与野生型WT大鼠的两种条带的为杂交后代，因此2、3、7、9属于杂交后代，由此说明基因编辑结果可以稳定遗传。 【点睛】本题主要考查基因工程的相关知识，意在考查考生识图能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 北京市第八十中学2025--2026学年第二学期4月阶段测 高二生物(选考) （考试时间60分钟 满分100分） 提示：试卷答案请一律填涂或书写在答题卡上，在试卷上作答无效。在答题卡上，选择题用2B铅笔作答，其他试题用黑色签字笔作答。 第一部分 选择题（每题2分，共30分） 本部分共15小题，在每题列出的四个选项中，选出最符合题目要求的一项。 1. 大豆叶片细胞的细胞壁被酶解后，可获得原生质体。以下对原生质体的叙述错误的是（ ） A. 制备时需用纤维素酶和果胶酶 B. 膜具有选择透过性 C. 可再生出细胞壁 D. 失去细胞全能性 2. 紫花地丁是一种传统的中药材，全草可以入药。为了满足市场需要，现需用植物组织培养的方法进行大量繁殖。下列叙述正确的是（　　） A. 启动脱分化和再分化的关键因素是光照条件 B. 对外植体进行消毒时，消毒时间越长，成活率越高 C. 植物组织培养技术和果树嫁接均属于快速繁殖技术 D. 培养的脱毒苗需要先进行病毒检测后才可以进行扩大繁殖 3. 基因型为 AaBb的水稻的花药通过无菌操作，接种到试管后，在一定条件下形成试管苗。下列相关叙述错误的是（ ） A. 在离体条件下，花粉经过脱分化和细胞分裂形成不定形的愈伤组织 B. 愈伤组织必须从培养基中获得水、无机盐和小分子的有机物等营养 C. 一般先诱导愈伤组织生芽，再诱导愈伤组织生根，最后形成试管苗 D. 经无菌培养获得的试管苗的基因型是 AABB、AAbb、aaBB、aabb 4. 科学家将鼠的肾单位祖细胞（NPC）和输尿管祖细胞（UPC）共培养，构建出具有部分功能的类器官，过程如下图。下列相关叙述错误的是（　　） A. ①过程需在CO2培养箱中进行 B. ①过程通常需在培养基中加入血清 C. ①②过程有细胞分裂也有细胞分化 D. NPC和UPC的子代细胞随机分布 5. 在制备单克隆抗体的过程中HAT选择培养基可以筛选出融合成功的杂交瘤细胞，一种杂交瘤细胞只能产一种抗体。科学家通过动物细胞融合技术，将两株不同的杂交瘤细胞（A和B）融合形成双杂交瘤细胞AB．双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，可以产生双特异性抗体AB．据图分析，下列说法正确的是（ ） A. 双杂交瘤细胞同时识别α、β抗原后，才能产生双特异性抗体 B. 双杂交瘤细胞的筛选需要进行克隆化培养和抗体检测 C. 对双杂交瘤细胞进行传代培养时，需用胰蛋白酶使之分散 D. 体外培养双杂交瘤细胞需要定期更换培养液以创设无菌环境 6. 研究者通过下图所示的操作过程，获得导入S基因的基因编辑小鼠。下列相关叙述正确的是（ ） A. 过程①用促性腺激素处理以获得更多卵母细胞 B. 过程②在雌鼠a的输卵管内完成受精 C. 过程③需将表达载体注射到子宫中 D. 过程④需抑制雌鼠b对植入胚胎的免疫排斥 7. 哺乳动物细胞中某些基因会根据来源发生DNA甲基化，使来自父本或母本的基因不表达，称为印记基因。我国科学家通过基因编辑技术使印记基因恢复表达，培育出存活至成年的双父本小鼠（如图），增进了对印记基因的了解。相关叙述错误的是（　　） A. 图中胚胎干细胞来自囊胚1的内细胞团细胞 B. 通过基因编辑使两个父本的印记基因都恢复表达功能 C. 双父本小鼠体细胞中的线粒体DNA来自去核卵母细胞 D. 双父本小鼠培育过程中利用了体细胞核移植和胚胎移植等技术 8. 用PCR技术将DNA分子中的A1片段进行扩增，设计了引物Ⅰ、Ⅱ，其连接部位如图所示，x为某限制酶识别序列。扩增后得到的绝大部分DNA片段是右图中的 A. B. C. D. 9. 某同学将质粒DNA进行限制酶酶切时，发现DNA完全没有被酶切，分析可能的原因并提出解决方法。下列叙述错误的是（ ） A. 质粒DNA突变导致酶识别位点缺失，更换正常质粒DNA B. 限制酶放置过久可能导致活性丧失，更换新的限制酶 C. 酶切位点被甲基化修饰，换用对DNA甲基化不敏感的限制酶 D. 酶切条件不合适，调整反应条件如温度、pH、酶的用量等 10. 利用农杆菌转化法可以将目的基因导入受体细胞。农杆菌Ti质粒是一种天然存在的植物遗传转化系统。下列关于Ti质粒的叙述正确的是（　　） A. 当农杆菌感染植物时，菌体进入受体细胞后留在细胞质内 B. T-DNA进入受体细胞后不能利用植物体内的酶进行转录和翻译 C. 将目的基因与Ti质粒整合的过程称为转化 D. Ti质粒上的T-DNA区段可整合到受体细胞的染色体上 11. 第三代疫苗——DNA 疫苗是指将编码保护性抗原蛋白的基因（如图甲）插入到适宜的质粒（如图乙）中得到的重组DNA分子，将其导入人体内，在人体细胞内表达的产物可直接诱导机体免疫应答，且可持续一段时间。限制性内切核酸酶的切点分别是BgIⅡ、EcoRI和 Sau3AⅠ。下列分析错误的是（　　） A. 构建DNA 疫苗时，可用BgIⅡ和 Sau3AI切割目的基因和质粒 B. 图乙中只用EcoRI切割后的质粒，含有2个游离的磷酸基团 C. 用EcoRI切割目的基因和质粒，再用DNA 连接酶连接，只产生1种连接产物 D. 抗原基因在体内表达时不需要解旋酶 12. 最早的双脱氧测序法是PCR反应体系中，分别再加入一种少量的双脱氧腺苷三磷酸（ddATP、ddCTP、ddGTP或ddTTP），子链延伸时，双脱氧核苷三磷酸也遵循碱基互补配对原则，以加入ddATP的体系为例：若配对的为ddATP，延伸终止；若配对的为脱氧核苷三磷酸（dATP），继续延伸；PCR产物变性后电泳检测。通过该方法测序某疾病患者及对照个体的一段序列，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 上述PCR反应体系中只需加入一种引物 B. 5'—TAGTGTCCATC-3'为患者的一段序列 C. 电泳时产物的片段越大，迁移速率越慢 D. 患者该段序列中某位点的碱基G突变为A 13. L-精氨酸在医药、食品等领域有广泛的应用。我国科研人员以大肠杆菌为材料，构建了能快速检测L-精氨酸产能的生物传感器。该生物传感器的构建原理及其基因表达载体如图所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. arg基因与GFP基因转录时共用同一条模板链 B. 一定范围内，L-精氨酸产量越高，可检测到的绿色荧光强度越高 C. 推测arg蛋白会抑制RNA聚合酶与启动子B的结合 D. 图中的基因表达载体还应该包括复制原点、标记基因等 14. 神经科学家设计了一种合成蛋白质LIMK1（结合ATP并磷酸化其靶标的蛋白质），能改善老年认知退化人群的记忆功能。下列叙述不正确的是（　　） A. 设计蛋白质LIMK1时，先设计其基因的碱基序列再推测其功能 B. 通过基因定点突变技术可对LIMK1蛋白基因进行碱基的替换 C. 设计蛋白质LIMK1利用的技术是蛋白质工程，其可制造新的蛋白质 D. 蛋白质的高级结构十分复杂，故蛋白质工程是一项难度很大的工程 15. 下图表示“DNA的粗提取和鉴定”的相关流程。下列叙述正确的是（　　） A. 步骤1和步骤2的目的是获取研磨液中的沉淀物 B. 步骤3中的DNA溶于酒精，而某些蛋白质不溶于酒精 C. 步骤4中DNA在2mol·L-1的NaCl溶液中溶解度较高 D. 利用二苯胺试剂鉴定DNA时，将试管置于50℃的温水中 第二部分 非选择题（共70分） 16. 植物组织培养技术应用广泛，科研人员用拟南芥探索获得大量愈伤组织的途径。 （1）组培的理论基础是植物细胞具有_____，即细胞经过分裂分化后，仍具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的____。切取外植体时的损伤可促进内源生长素（IAA）合成并运输到受伤部位，诱导细胞分裂分化。因此，组培时常添加2，4-D、NAA等生长素类调节剂。 （2）含较高浓度2，4-D的培养基（2，4-D-CIM）可促进愈伤组织增殖，但在实践中发现，2，4-D-CIM中的外植体脱分化形成愈伤组织延迟。为探究其原因，进行相关实验。 ①检测不同培养基中叶片外植体细胞中IAA合成酶基因（YUC）的表达量，由图1结果可知：较高浓度2，4-D______IAA的合成。 ②研究者推测，一定量IAA有利于愈伤组织的形成。为此，在2，4-D-CIM的基础上，再分别添加IAA、NAA、检测接种后外植体细胞IAA响应基因W1的表达情况，结果如图2所示，同时还测量了各组______，结果显示其与W1表达量正相关，证明推测成立。添加NAA组是为了进一步确认______。 （3）根据上述所有实验结果，在答题卡方框中填相关基因，括号中填“+”（表示促进）或“-”（表示抑制），完善在愈伤组织形成和增殖过程中相关物质的关系模式图______。 17. 猫的Feld1蛋白主要存在于毛发和唾液中，是导致人类过敏的一种常见过敏原，因此开发Feld1蛋白的快速检测技术具有重要意义。 （1）科研人员通过多次注射_____对小鼠进行免疫，然后从免疫小鼠的脾脏收集______细胞和骨髓瘤细胞混合，并加入______试剂促进细胞融合，经选择的杂交瘤细胞进行_____培养和抗体阳性检测，最终在培养液中提取分离得到多种抗Feld1蛋白的单克隆抗体，分别命名为5H4和7D11。 （2）为了探究5H4和7D11结合抗原的具体表位，将Feld1蛋白分为F1、F2、F3三个小片段蛋白（图1A），并利用5H4和7D11进行蛋白质免疫印记实验（图1B），结果表明5H4和7D11分别识别Feld1蛋白的______片段。 （3）传统的双抗体夹心法可以快速检测样本中的抗原，原理如图2A。金标垫部位具有5H4蛋白-胶体金颗粒复合物，该复合物具有肉眼可见的红色斑点，并会随着标本流向移动。检测线（T线）和质控线（C线）分别包埋了固定在硝酸纤维素膜上的______（①5H4蛋白、②抗5H4蛋白的抗体、③7D11蛋白、④抗7D11蛋白的抗体）。请根据原理图分析不同结果下C线、T线的结果，并填入表格中______（“+”代表红色，“-”代表无色）。 （4）为了检测Feldl蛋白的含量，研究人员对双抗体夹心法做了进一步改造，如图3所示，三条检测线T1、T2、T3包埋相同的物质，请简述如何通过检测线的显色结果来判断待测血清中Feld1蛋白的相对含量______。 18. 甜玉米与普通玉米相比，甜玉米中可溶性糖向淀粉的转化较慢含可溶性糖量高，汁多质脆，富含多种维生素。为了使甜玉米更富有生产应用价值，科研人员通过转基因技术培育出了超量表达P蛋白转基因甜玉米。在超量表达P基因载体的构建中，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1所示，P蛋白在玉米株系的表达量如图2所示。回答下列问题： （1）①强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被________识别并结合，驱动基因的持续转录。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用________酶组合，将片段和Ti质粒切开后构建重组表达载体。 ②TDNA在该实验中的作用是________。 （2）将农杆菌液浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养，培养基中需加入________进行筛选，筛选出的愈伤组织________形成丛芽，最终获得多个玉米株系a1、a2、a3、a4。通过对a1、a2、a3、a4四株甜玉米株系的蛋白质表达量进行测定结果如图2，其中a4株系P蛋白表达量较低的原因可能是________。 （3）为了进一步提高甜玉米中淀粉的含量，科研人员提出通过降低淀粉酶合成有关基因的表达实现生产目标。研究人员发现吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂，将其注入植物细胞内会使基因表达受阻，科研人员将吗啉反义寡核苷酸导入玉米的受精卵中起到明显效果。针对它的具体作用，科研人员提出以下假说： 假说1：导致RNA前体上内含子1的对应序列不能被剪切。 假说2：导致RNA前体上内含子1和外显子2的对应序列同时被剪切。 为了验证上述假说，分别从受精卵发育后3天的实验组和对照组胚细胞中提取________，逆转录形成cDNA。若假说1成立，使用右图所示引物2和引物4进行PCR后电泳的结果为________（填字母）。 A．实验组有目的条带　    B．实验组无目的条带 C．对照组有目的条带　    D．对照组无目的条带 若要证明假说2成立，需要选择如图所示引物________进行PCR。 19. 2020年10月7日，瑞典皇家科学院已决定将2020年诺贝尔化学奖授予德国马克斯·普朗克病原学研究所的Emmanuelle Charpentier博士以及美国加州大学伯克利分校的Jennifer A． Doudna博士，以表彰她们在基因组编辑领域的贡献。在人工设计的条件下，通过sgRNA与基因组靶序列的特异性结合，引导Cas9蛋白“切割”基因组DNA (如下图所示)。请回答下列问题。 （1）sgRNA与基因组靶序列可以特异性结合的原因是___________，Cas9核酸酶可以在sgRNA的引导下打开目标基因中的_______键，使得基因组DNA断裂。在_____酶的作用下，断裂的DNA可重新拼接。 （2）有研究者利用该技术，敲除了大鼠胰岛素受体底物1 (Irsl)基因，获得了糖尿病模型动物。流程如下： 根据已知Irs1基因的______， 设计两种sgRNA；构建含有两种sgRNA基因和______基因的表达载体；利用__________法，将上述基因的体外表达产物RNA，导入大鼠的_____(细胞)。 （3）提取转基因大鼠DNA，用PCR的方法检测Irs1编辑情况，结果如下图。其中WT为_____大鼠，由图可知2号大鼠比野生型大鼠的PCR产物短95bp，研究者据此确定其为阳性结果，即Irsl 被敲除失活，因为____________对应序列在Irsl基因上的位置相距95bp。 （4）2号大鼠P与野生型WT大鼠杂交，提取后代DNA，用相同引物进行PCR，结果如上图。_________________属于杂交后代， 说明基因编辑结果______稳定遗传。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $