精品解析：黑龙江海林市朝鲜族中学2025-2026学年高二下学期4月月考生物试卷

2025-2026学年度第二学期高二年级生物学科第一次考试 班级：__________ 姓名：_________ 一、单选题 1. 动物细胞工程的技术基础是（　　） A. 动物细胞培养 B. 细胞融合 C. 单克隆抗体 D. 核移植 【答案】A 【解析】 【分析】  动物细胞培养是指从动物体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和繁殖的技术。 【详解】动物细胞融合、单克隆抗体、核移植是动物细胞工程常用的技术手段，但不是动物细胞工程的技术基础。动物细胞培养是动物细胞工程的技术基础。 故选A。 2. 不同的微生物对营养物质的需求不同。下列叙述错误的是（ ） A. 制作固体培养基时可加入琼脂作为凝固剂 B. 配制细菌培养基时都应该加入糖类作为碳源 C. 有些碳源也可以为微生物的生长提供能源 D. 氮源物质能为微生物提供必要的氮元素 【答案】B 【解析】 【分析】选择培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 【详解】A、琼脂属于凝固剂，制作固体培养基时可加入琼脂作为凝固剂，A正确； B、不同的微生物对碳源的要求不同，如自养型微生物不需糖类作碳源，B错误； C、以糖类等有机碳作碳源时，碳源物质往往也是能源物质，C正确； D、氮源物质含有N，在微生物培养中的主要作用是为微生物提供氮元素，D正确。 故选B。 3. 一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（ ） ①无毒的环境；②无菌的环境；③只使用合成培养基；④温度与动物的体温相近；⑤因在CO2培养箱中培养，故不需要O2；⑥多数动物细胞培养在7.2～7.4的pH环境 A. ①②④⑤⑥ B. ①②③④ C. ①②④⑤ D. ①②④⑥ 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.2-7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。） 【详解】①动物细胞培养需要无毒环境，①正确； ②动物细胞培养需要无菌环境，②正确； ③用于动物细胞培养的合成培养基中还需加入血清、血浆等天然物质，③错误； ④动物细胞培养需要适宜的温度和pH，其中温度要与动物体温相近，④正确； ⑤动物细胞培养需要一定的气体环境，95%空气和5%的CO2，其中氧气可保障细胞呼吸，⑤错误； ⑥动物细胞培养需要适宜的温度和pH值，多数动物细胞培养在7.2～7.4的pH环境，⑥正确。 故选D。 4. 某研究者用抗原A分别免疫3只同种小鼠X、Y、Z，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后，测定各小鼠血清抗体的效价（效价越大，抗体浓度越高），结果如下图。已知该种小鼠体细胞染色体数为40条，而体外培养的小鼠骨髓瘤细胞染色体数为60条。若要利用该小鼠制备杂交瘤细胞，下列说法错误的是（ ） A. 成功融合的杂交瘤细胞中含有2个细胞核，染色体数目总共是50条 B. 血清抗体效价想达到16000以上，至少需要让小鼠经过4次免疫 C. X、Y、Z三只小鼠中最适合用于制备单克隆抗体的是Y D. 可以使用聚乙二醇诱导免疫后的小鼠B细胞和骨髓瘤细胞融合 【答案】A 【解析】 【分析】分析柱形图：用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价，由图可知，随着免疫次数的增加，血清抗体效价逐渐升高。在第五次中，血清抗体均达到16000以上，且Y的效价最大，最适合用于制备B淋巴细胞；B细胞与骨髓瘤细胞形成的杂交细胞有三种：B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞和杂交瘤细胞；融合形成的杂交瘤细胞，具有2个亲本的染色体，故染色体为100条。 【详解】A、成功融合后的杂交瘤细胞只含有1个核，染色体数目为100条，A错误； B、由图可知，血清效价16000以上，需要至少4次免疫，B正确； C、第五次中，血清抗体均达到16000以上，且Y的效价最大，最适合用于制备B淋巴细胞，C正确； D、电融合法，灭活病毒诱导法、PEG（聚乙二醇）融合法都是常用的诱导细胞融合的方法，D正确。 故选A。 5. 中国的许多传统美食制作过程都蕴含了生物技术。下列叙述不正确的是（　　） A. 泡菜制作过程中，密封处理有利于乳酸菌发酵 B. 馒头制作过程中，利用酵母菌进行呼吸作用产生CO2 C. 米酒制作过程中，将容器密封有利于酵母菌酒精发酵 D. 腐乳制作过程中，利用了毛霉等产生的蛋白酶 【答案】C 【解析】 【详解】A、乳酸菌为厌氧菌，密封环境抑制其他杂菌繁殖，促进乳酸菌无氧发酵，A正确； B、酵母菌为兼性厌氧菌，制作馒头时，初期有氧呼吸产生大量CO2使面团膨胀，后期无氧呼吸也产生CO2，B正确； C、米酒制作需先糖化（霉菌需氧分解淀粉为葡萄糖）后酒精发酵（酵母菌无氧产酒精）。若全程密封，霉菌无法进行糖化，导致酵母菌缺乏底物，C错误； D、毛霉分泌的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解为小分子物质，D正确。 故选C。 6. 下图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法的操作结果。下列叙述中正确的是（　　） A. 甲中涂布前要将涂布器灼烧接着涂菌液 B. 甲、乙操作中均可以用于微生物的计数 C. 乙中接种环需要灼烧5次 D. 乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端 【答案】D 【解析】 【分析】1、平板划线法和稀释涂布平板法都能纯化细菌，但平板划线法不能计数，稀释涂布平板法能使细菌分离成单个，便于计数。 2、关于平板划线法中灼烧接种环的次数，接种前灼烧一次，是为了避免接种环上可能存在的杂菌污染菌种，以后每次接种前灼烧接种环，是为了杀死上次划线结束时接种环上残留的菌种；划线结束时灼烧接种环，是为了及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 【详解】A、为防止杂菌污染，题图甲中的涂布平板操作 ，涂布前要将涂布器灼烧，冷却8~10 s后才能进行涂布，若灼烧后立即涂布，则会将菌体杀死，A错误； B、甲是稀释涂布平板法，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，通过统计菌落数，可以推测出菌液中微生物的数量，乙是平板划线法，接种环在划线前后都要灭菌（杀死残留在接种环上的菌种），平板划线法能用于菌种的分离纯化，无法计数，因此只有甲可以用于微生物的计数，B错误； C、乙是平板划线法中，在每次划线前都要灼烧接种环，在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环，乙总共划线5次，接种环需要灼烧6次，C错误； D、乙中连续划线的起点是上一次划线的末端，这样能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终得到由单个活菌繁殖而来的菌落，D正确。 故选D。 7. 胚胎工程中各种胚胎操作技术如图所示。下列分析正确的是（ ） A. 从良种公牛体内获得的精子可以直接与获能的卵细胞结合受精 B. 早期囊胚a、b、c的基因型相同，可用滋养层细胞进行性别鉴定 C. 胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从原肠胚细胞获得 D. 胚胎移植时因代孕牛几乎对胚胎无免疫排斥，因此无需使用免疫抑制剂 【答案】D 【解析】 【分析】试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。 【详解】A、受精前，精子经过获能处理才能获得受精能力，因而从良种公牛体内获得的精子不能直接与获能的卵细胞结合受精，A错误； B、早期囊胚a、b、c是由不同的受精卵经胚胎体外培养获得，因而基因型不一定相同，对未知性别的胚胎可以取滋养层，做DNA分析进行性别鉴定，B错误； C、胚胎干细胞是早期胚胎（原肠胚期之前）中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性，因而不能从原肠胚细胞获取，C错误； D、胚胎移植时，代孕牛为同种的、生理状况相同的母牛，几乎不会对胚胎产生免疫排斥反应，因此无需使用免疫抑制剂，D正确； 故选D。 8. 2018年1月25日， 两只克隆猴登上国际权威学术杂志《细胞》的封面， 克隆猴“中中”、“华华”的诞生， 是中国科学家伟大的杰作， 也解决了无法克隆灵长类动物的难题。此过程不涉及的操作是（ ） A. 动物细胞培养 B. 卵母细胞显微操作去核 C. 电刺激激活重构胚 D. 精子获能处理 【答案】D 【解析】 【分析】体细胞克隆技术涉及的主要技术有动物细胞核移植技术(将核移植到另一个去核卵细胞中)、早期体外胚胎培养技术（或动物细胞培养技术)、胚胎移植技术(将胚胎移植到代孕母子宫中)。 【详解】体细胞克隆技术是指把动物体细胞经过抑制培养，使细胞处于休眠状态。采用核移植的方法，利用细胞拆合或细胞重组技术，将卵母细胞显微操作去核后作为核受体，以体细胞或含少量细胞质的细胞核即核质体作为核供体，将后者移入前者中，构建重组胚，供体核在去核卵母细胞的胞质中重新编程，并启动卵裂，开始胚胎发育过程，妊娠产仔，克隆出动物的技术，又可称之为体细胞核移植技术，故此过程不涉及的操作是精子获能处理，D正确。 故选D。 9. 某一生物工程技术过程中出现细胞融合的操作，下列叙述正确的是（ ） A. 若为植物体细胞杂交技术，可用灭活病毒诱导两种植物细胞的原生质体融合 B. 若为单克隆抗体的制备技术，融合得到的杂交瘤细胞直接进行克隆化培养可得到大量所需的单克隆抗体 C. 若为体外受精技术，细胞融合过程可在显微镜下观察到雌、雄原核和两个第二极体 D. 若为动物体细胞核移植技术，融合得到的细胞培养到桑葚胚或囊胚可移植到受体动物子宫内以获得克隆动物 【答案】D 【解析】 【分析】首先用酶解法去壁，一般使用纤维素酶和果胶酶处理；然后诱导原生质体融合，采用的方法一般包括物理法（离心、振荡、电激）、化学法（用聚乙二醇处理）；培养融合的原生质体再生出新的细胞壁，形成杂种细胞。然后杂种细胞经过植物组织培养技术可以培养形成杂种植株。 【详解】A、若甲、乙为植物细胞，首先用酶解法去壁，一般使用纤维素酶和果胶酶处理得到有活力的原生质体，不能用灭活病毒诱导融合，A错误； B、若为单克隆抗体的制备技术，融合得到的细胞分别经过特定选择培养基筛选、克隆化培养和抗体检测，然后将杂交瘤细胞大量培养，可得到大量的单克隆抗体，B错误； C、若为体外受精技术，细胞融合时可在显微镜下观察到雌、雄原核和透明带和卵细胞膜之间的两个极体，其中一个是第一极体，另一个是第二极体，C错误； D、若为动物体细胞核移植技术，融合得到的细胞需培养到桑葚胚或囊胚，然后移植到受体动物子宫内获得克隆动物，D正确。 故选D。 10. 第三代试管婴儿技术（PGD/PGS）是对早期胚胎细胞进行基因诊断和染色体检测后再进行胚胎移植，流程如图所示。图中检测包括PGD、PGS（PGD是指胚胎植入前的基因诊断，PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测）。下列叙述正确的是（ ） A. 受精前需将采集的卵子培养至MⅡ期，精子在含Mg2+载体的获能液中获能 B. 进行胚胎移植前需要对夫妻双方进行免疫检查，以防止移植后出现免疫排斥反应 C. PGD和PGS技术可分别用于筛选红绿色盲和唐氏综合征 D. “理想胚胎”需培养至桑葚胚或原肠胚才能植入子宫 【答案】C 【解析】 【分析】胚胎移植的生理学基础：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的.这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。 【详解】A、体外受精时，需要将所采集到的卵母细胞在体外培养至MⅡ期，精子在含Ca2+载体的获能液中获能，才可以完成受精作用，A错误； B、受体子宫对外来胚胎几乎不发生免疫排斥反应，因此进行胚胎移植前不需要对夫妻双方进行免疫检查，B错误； C、PGD是指胚胎植入前的基因诊断，PGD可用于筛选红绿色盲，PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测，PGS可用于筛选唐氏综合征，C正确； D、“理想胚胎”需培养至桑葚胚或囊胚才能植入子宫，D错误。 故选C。 11. 2023年4月，中国科学家首次使用非人灵长类动物——食蟹猴的胚胎干细胞创造出了与天然胚胎十分类似的结构，这些人工“猴胚胎”能够成功植入雌猴的子宫，并引起与妊娠相似的反应，研究流程如下图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 食蟹猴的胚胎干细胞能分化形成成年猴体内任何一种类型的细胞 B. 囊胚细胞②③都由细胞①分裂分化形成，细胞③具有发育的全能性 C. 移植前动物细胞培养和早期胚胎培养都需要在的培养箱中进行 D. 胚胎移植后，经受体孕育的后代，其遗传特性与受体一致 【答案】D 【解析】 【分析】胚胎干细胞具有全能性，利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”，是利用了胚胎干细胞的全能性。 【详解】A、食蟹猴的胚胎干细胞具有全能性，能分化形成成年猴体内任何一种类型的细胞，A正确； B、囊胚细胞②③都由细胞①分裂分化形成，但表达的基因有部分不同，细胞③是内细胞团，具有发育的全能性，B正确； C、动物细胞培养和早期胚胎培养需要在95%空气和5%二氧化碳的环境中培养，C正确； D、胚胎移植后，经受体孕育的后代，其遗传特性与供体基本一致，不受受体遗传特性的影响，D错误。 故选D。 12. 胚胎发育的早期有一段时间是在透明带中进行的，这一时期称为卵裂期。其特点是（ ） A. 桑葚胚的细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞逐渐分化 B. 每个细胞体积不变，细胞的数量增加 C. 胚胎有机物总量增加，细胞DNA总量不断减少 D. 所有细胞的相对表面积减小，核物质（质量）与质物质比值增大 【答案】A 【解析】 【分析】卵裂期的特点是：细胞分裂的方式为有丝分裂，细胞的数量不断增加，但胚胎的总体积并不增加。卵裂期分为桑葚胚、囊胚、原肠胚三个阶段。 【详解】A、桑葚胚的细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞逐渐分化，A正确； B、每个细胞体积减小，胚胎的总体积不变，细胞的数量增加，B错误； C、胚胎有机物因为消耗总量减少，细胞DNA总量因为复制而增加，C错误； D、细胞体积减小，细胞的相对表面积增大，D错误。 故选A。 13. 将黑色小鼠囊胚内细胞团的部分细胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接受注射的囊胚培养后经胚胎移植发育为黑白相间的小鼠（Mc）。据此分析，下列叙述正确的是（ ） A. 进行胚胎移植的代孕小鼠也应是Mc小鼠 B. Mc小鼠的表皮组织中存在两种基因型的细胞 C. 获得Mc的生物技术包括细胞融合、胚胎移植等 D. 若将接受注射的囊胚一分为二，便可发育成两只Mc小鼠 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎发育的过程：①卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；②桑葚胚：32个细胞左右的胚胎；③囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔（注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂胚胎伸展出来，这一过程叫孵化）﹔④原肠胚：具有三个胚层和一个空腔。 【详解】A、进行胚胎移植的代孕小鼠为同种、生理状态相同的雌鼠，不一定是黑白相间的鼠（Mc），A错误； B、“黑色小鼠囊胚的内细胞团部分细胞注射到白色小鼠囊胚腔”，而后发育为黑白相间的小鼠，故Mc小鼠表皮中有两种基因型的细胞，B正确； C、黑色小鼠囊胚内细胞团的部分细胞并没有与白色小鼠囊胚腔内的细胞融合，因此获得Mc的生物技术不包括细胞融合，C错误； D、若将接受注射的囊胚一分为二，由于不能保证黑色小鼠囊胚内细胞团的部分细胞和白色小鼠囊胚腔内的内细胞团细胞均等分配，因此不能保证发育成两只Mc小鼠，D错误。 故选B。 14. 北方白犀牛曾经广泛分布于非洲中部等地，但由于猖獗的盗猎和自然栖息地的丧失，它们的数量不断减少。2018年3月，世界上最后一头雄性北方白犀牛死亡，该物种仅剩下两头雌性个体。在此之前，研究人员设法保存了北方白犀牛的精子。下列相关叙述正确的是（ ） A. 精子应在和北方白犀牛体温相同的环境下保存 B. 可以通过细胞核移植技术“克隆”出雌雄性北方白犀牛 C. 采用体外受精的方式繁殖北方白犀牛应采用胚胎移植技术 D. 为北方白犀牛等濒危动物提供最后生存机会的措施是就地保护 【答案】C 【解析】 【分析】体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。（1）卵母细胞的采集和培养：①主要方法是：用促性腺激素处理，使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子。 ②第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。（2）精子的采集和获能：①收集精子的方法：假阴道法、手握法和电刺激法。②对精子进行获能处理：包括培养法和化学诱导法。（3）受精：在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。 【详解】A、精子应置于低温环境下保存，A错误； B、因为剩下的两头北方白犀牛都是雌性个体，所以用细胞核移植技术只能克隆出雌性北方白犀牛，B错误； C、采用体外受精获得的受精卵，经过体外培养至早期胚胎后，要通过胚胎移植技术移植到受体体内发育，C正确； D、保护大熊猫的最好方法是就地保护，D错误。 故选C。 15. 在一项新的研究中，来自美国俄勒冈健康与科学大学的研究人员成功地将皮肤细胞转化为能够产生可存活胚胎的卵子，这一发现有望用于治疗不孕症。该技术依赖于将皮肤细胞的细胞核转移到已移除细胞核的捐赠卵子中，并诱导其与精子受精，形成一个可存活的胚胎。下列相关叙述错误的是（　　） A. 在受精之前应采用一定的方法将皮肤细胞的细胞核染色体减少一半 B. 该技术可以帮助那些自己没有卵子的病人制造卵子，用于治疗不孕症 C. 应在MI期对捐赠卵子去核，因为该时期第一极体和卵母细胞核较近 D. 受精完成后形成的可存活胚胎的细胞质中的DNA基本由捐赠卵子提供 【答案】C 【解析】 【详解】A、皮肤细胞是体细胞，含二倍体核DNA。移植到去核卵母细胞后，需通过类似减数分裂的过程使染色体数目减半，否则受精后会导致三倍体胚胎。因此需在核移植前人工处理使染色体减半，A正确； B、该技术通过核移植为无卵子患者提供遗传物质来源的卵子，从而治疗不孕症，B正确； C、卵母细胞去核通常在减数第二次分裂中期（MII期），此时染色体排列整齐且已完成减数第一次分裂，核DNA为单倍体。MI期（减数第一次分裂中期）尚未完成染色体分离，去核无法保证单倍体核，C错误； D、胚胎细胞质中的DNA（如线粒体DNA）几乎全部来自捐赠卵子的细胞质，D正确。 故选C。 16. 传统发酵技术在我国已有几千年的历史，可以用于腐乳、酸奶、酱油、醋、泡菜和豆豉等的制作。下列有关叙述错误的是（　　） A. 缺少糖源时，醋酸菌可直接利用乙醇转化为乙醛并最终生成乙酸 B. 传统发酵技术可以直接利用原材料中天然存在的微生物 C. 酸奶发酵所需的乳酸菌是厌氧型微生物，在空气和动植物体表面无法存活 D. 在一段时间内，果醋和果酒的制作过程中发酵液的pH均会逐渐降低 【答案】C 【解析】 【分析】传统发酵是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术。 【详解】A、缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇转化为乙醛，然后再将乙醇转化为乙酸，A正确； B、传统发酵技术可以直接利用原材料中天然存在的微生物，如葡萄酒的制作，利用葡萄表皮上自带的酵母菌，B正确； C、酸奶发酵所需的乳酸菌是厌氧型微生物，在空气和动植物体表面可以存活，只是有氧条件下代谢会受到抑制，C错误； D、果酒制作过程中，酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳，二氧化碳溶于水导致pH降低，果醋发酵，醋酸菌将乙醇氧化为醋酸，pH降低，D正确。 故选C。 17. 利用植物组织培养技术获得红豆杉试管苗，有助于解决紫杉醇药源短缺问题。下列叙述正确的是（ ） A. 细胞分裂素和生长素的比例会影响愈伤组织的形成 B. 培养基先分装到锥形瓶，封口后用干热灭菌法灭菌 C. 芽原基细胞由于基因选择性表达，不能用作外植体 D. 紫杉醇不能通过细胞产物的工厂化生产来获取，植物组织培养优势明显 【答案】A 【解析】 【分析】植物组织培养技术：1、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。2、原理：植物细胞的全能性。3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。4、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、在植物组织培养中，生长素和细胞分裂素的比例直接影响细胞的分化方向。当二者比例适中时，促进愈伤组织的形成；比例过高时促进生根，比例过低时促进生芽，A正确； B、培养基含大量水分，需用高压蒸汽灭菌法灭菌（121℃，15-30分钟）；干热灭菌法适用于耐高温且干燥的物品（如玻璃器皿），不能用于培养基灭菌，B错误； C、外植体可以是植物的任何活细胞、组织或器官，只要具有全能性。芽原基细胞是分生组织的一部分，全能性高，可作为外植体。基因选择性表达是细胞分化的基础，不影响其作为外植体的能力，C错误； D、细胞产物的工厂化生产正是通过植物组织培养技术实现的，如大量培养红豆杉细胞，从培养液中提取紫杉醇。因此，紫杉醇可通过此方法获取，植物组织培养的优势（如快速增殖、大量生产细胞产物）在此体现，D错误。 故选A。 18. 如图为制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是（　　） A. 步骤①给小鼠注射IL-6后，应从脾中分离筛选T淋巴细胞 B. 步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细胞悬液 C. 步骤③加入灭活病毒或PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性 D. 步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞 【答案】C 【解析】 【详解】A、步骤①给小鼠注射IL-6后，应从小鼠的脾中获取B淋巴细胞，A错误； B、步骤②需要在组织中加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶，使其成为单细胞，进而制成悬液，B错误； C、步骤③是诱导细胞融合过程，该过程可加入灭活病毒或PEG诱导，细胞融合的过程体现了细胞膜的流动性，C正确； D、步骤④是在选择培养基上筛选得到的杂交瘤细胞，该过程得到的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体，步骤⑤经过克隆化培养和抗体检测筛选出了分泌所需抗体的杂交瘤细胞，D错误。 故选C。 19. 梅花鹿和马鹿杂交后代生命力强、茸质好，但自然杂交很难完成，人工授精能解决此难题。胚胎工程技术的应用，可提高繁殖率，增加鹿场经济效益。下列相关叙述合理的是（ ） A. 采集的精液无需固定、稀释，即可用血细胞计数板检测精子密度 B. 人工授精时，采集的精液经获能处理后才能输入雌性生殖道 C. 超数排卵处理时，常用含促性腺激素的促排卵剂 D. 母体子宫对胚胎的免疫耐受性低下是胚胎移植的生理学基础 【答案】C 【解析】 【分析】体外受精主要操作步骤：（1）卵母细胞的采集和培养:方法一:对小型动物一般用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。方法二:对大型动物是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精（或从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞)。（2）精子的采集和获能:在体外受精前，要对精子进行获能处理。采集方法:假阴道法、手握法和电刺激法等。获能方法:培养法和化学法。（3）受精:获能的精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。。 【详解】A、采集的精子需要经过稀释和固定处理，否则活动精子会影响计数准确性，且血细胞计数板通常用于已固定的细胞，A错误； B、人工授精时，精子在雌性生殖道内自然获能，无需提前体外处理，B错误； C、超数排卵通过注射促性腺激素（如FSH和LH）促进卵泡发育和排卵，C正确； D、胚胎移植的生理学基础是母体子宫对胚胎的免疫耐受性高，不会发生免疫排斥，而非耐受低下，D错误。 故选C。 20. 科研人员通过对绵羊受精卵进行基因编辑和胚胎移植等操作，获得了羊毛长度显著长于对照组的优良品系。下列叙述错误的是（ ） A. 为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射促性腺激素进行超数排卵处理 B. 为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致，需进行同期发情处理 C. 受精卵发育至桑葚胚阶段，细胞数量和胚胎总体积均增加 D. 对照组绵羊的选择需考虑年龄、性别等无关变量的影响 【答案】C 【解析】 【分析】动物胚胎发育的基本过程：(1)受精场所是母体的输卵管。(2)卵裂期：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积并不增加，或略有减小。(3)桑葚胚：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑葚，是全能细胞。(4)囊胚：细胞开始出现分化(该时期细胞的全能性仍比较高)，聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为囊胚腔。(5)原肠胚：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。 【详解】A、促性腺激素可促进供体超数排卵，从而获得更多卵子，A正确； B、为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致，受体与供体需同期发情处理以保证胚胎移植后生理环境同步，B正确； C、桑葚胚阶段的细胞通过卵裂增殖，细胞数量增加，但胚胎总体积不变，或略有减小，C错误； D、本实验的自变量是是否对绵羊受精卵进行基因编辑等，其余为无关变量，对照组与实验组的无关变量（如年龄、性别）需保持一致，以排除干扰，D正确。 故选C。 二、多选题 21. 与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。下列有关叙述不正确的是（ ） A. 与传统发酵技术相同，发酵工程也是利用微生物进行发酵 B. 通过发酵工程获得大量的单细胞蛋白可以制成微生物饲料 C. 生产谷氨酸的发酵过程中，pH的变化不影响谷氨酸的产量 D. 利用放线菌通过发酵工程产生的井冈霉素防治水稻枯纹病属于化学防治 【答案】CD 【解析】 【分析】1、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。 2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。（1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；（2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。 3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。 【详解】A、发酵工程与传统发酵技术都需要利用微生物来进行发酵，A正确； B、单细胞蛋白是指利用发酵工程获得的大量的微生物菌体，可作为食品添加剂，例如用酵母菌生产的单细胞蛋白可作为食品添加剂，也可制成微生物饲料，例如在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，动物食用后能提高免疫力，B正确； C、中性和弱碱性条件下利于谷氨酸的积累，酸性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，生产谷氨酸的发酵过程中，pH的变化会影响谷氨酸的产量，C错误； D、利用放线菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病，这种治理不会对环境造成影响，属于生物防治，D错误。 故选CD。 22. 运用细胞工程技术获得单克隆抗体时，下列操作必要的是（ ） A. 对小动物注射抗原 B. 融合并筛选杂交瘤细胞 C. 培养杂交瘤细胞 D. 将胰蛋白酶注入小鼠腹腔 【答案】ABC 【解析】 【分析】细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。 单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取B淋巴细胞，将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。 【详解】A、为了获得能产生特异性抗体的B淋巴细胞，因此对小动物注射抗原，A不符合题意； B、为了集合B淋巴细胞能产生特异性抗体和骨髓瘤细胞无限增殖的优点，需要将两个细胞融合并筛选出杂交瘤细胞，B不符合题意； C、筛选出的杂交瘤细胞需要克隆化培养获取单克隆抗体，C不符合题意； D、获得单克隆抗体时，不需要将胰蛋白酶注入小鼠腹腔，胰蛋白酶在动物细胞培养时需要用到，其作用是将组织分散成单个细胞，D符合题意。 故选ABC。 23. 桑黄是生物治癌效率最高的药用真菌，人工栽培难度较大，利用发酵罐进行发酵培养具有广阔前景。科研人员研究发现，发酵罐中蔗糖为70g/L、氯化铵为10g/L、搅拌转速为150r/min、28℃下发酵120h,产生的菌丝量最大。下列说法正确的是（ ） A. 蔗糖、氯化铵分别为桑黄生长提供碳源和氮源 B. 控制温度、营养等都可提高桑黄的种间竞争力 C. 适当提高搅拌转速可增加培养液溶氧量提高菌丝产量 D. 发酵120h后，因发酵环境改变可导致菌丝量下降 【答案】AD 【解析】 【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。发酵过程一般来说都是在常温常床下进行，条件温和，反应安全，原料简单，污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。发酵工程在医药、食品、农业、冶金、环境保护等许多领域都得到广泛应用。 【详解】A、蔗糖为糖类为桑黄生长提供碳源，氯化铵含有N元素为桑黄生长提供氮源，A正确； B、发酵工程中只有单一物种桑黄，因此不存在种间竞争力的影响，B错误； C、发酵罐中蔗糖为70g/L、氯化铵为10g/L、搅拌转速为150r/min、28℃下发酵120h,产生的菌丝量最大，提高搅拌转速不会增加培养液溶氧量提高菌丝产量，C错误； D、发酵120h后，发酵环境内营养物质减少，代谢产物增加等改变可导致菌丝量下降，D正确。 故选AD。 24. 枸杞酒果香浓郁、保留了原果实中特有的营养成分，其生产流程大致如下。下列相关叙述正确的是（ ） A. 利用酵母菌进行枸杞酒发酵的过程中温度应控制在18～30℃ B. 在枸杞酒发酵期间，为保持无氧条件不能打开发酵装置的排气阀 C. 若枸杞汁中初始糖浓度过高，则所得果酒的酒精浓度可能偏低 D. 果汁发酵产生的酒精可使溴麝香草酚蓝溶液变成黄色 【答案】AC 【解析】 【分析】制作果酒的方法步骤：①将发酵瓶、榨汁机等器具用洗洁精清洗干净，并用体积分数为70%的酒精消毒，晾干备用。②取新鲜的葡萄，用清水冲洗1~2次，再去除枝梗和腐烂的籽粒，沥干。③用榨汁机榨取葡萄汁，将葡萄汁装入发酵瓶中，盖好瓶盖。④将温度控制在18~30℃进行发酵。 【详解】A、酵母菌生长的适宜温度是18～30℃，因此利用酵母菌进行枸杞酒发酵的过程中温度应控制在18~30℃，A正确； B、在枸杞酒发酵期间，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和CO2，在发酵过程需要保持无氧环境，但需要根据发酵进程适时拧松排气阀，B错误； C、初始糖浓度过高会导致酵母菌失水过多，酵母菌生长繁殖受到抑制，导致酒精浓度偏低，C正确； D、果汁发酵是否产生酒精，可用酸性重铬酸钾来检验，D错误。 故选AC。 25. 霉变的花生、玉米中含有黄曲霉素，黄曲霉素是由黄曲霉产生的，具有极强的毒性和致癌性，会导致肝癌等恶性肿瘤发生。研究人员利用黄曲霉素筛选出能高效降解黄曲霉素的菌株，部分实验过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 黄曲霉素是诱发肝癌的物理致癌因子 B. 将样品稀释液进行高压蒸汽灭菌，冷却后接种到1号培养基 C. 1号培养基与2号培养基的物理状态不同 D. 用2号培养基计数，计数结果一般比实际活菌数偏小 【答案】AB 【解析】 【分析】1、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 2、实验目的是利用黄曲霉素筛选出能高效降解黄曲霉素的菌株，所以应该以黄曲霉素作为唯一碳源。 【详解】A、致癌因子包括物理、化学和病毒致癌因子，黄曲霉素是诱发肝癌的化学致癌因子，A错误； B、样品稀释液中含有待分离的菌种，因此不能将样品稀释液进行高压蒸汽灭菌，应直接接种到1号培养基，B错误； C、1号培养基用于菌体快速增殖，是液体培养基，2号培养基用于菌种鉴定，是固体培养基，两者的物理状态不同，C正确； D、用2号培养基计数，计数结果一般比实际活菌数偏小，因为有的菌落可能由多个活菌长成，D正确。 故选AB。 三、非选择题 26. 醪糟是以糯米为主要原料，利用微生物发酵制作的民间传统食品。在醪糟发酵过程中起主要作用的是甜酒曲中的好氧霉菌、酵母菌和乳酸菌。醪糟的生产流程如下：糯米的选择→淘洗→浸泡→蒸饭→冷却→拌甜酒曲→发酵→煮沸→保存。回答下列问题： （1）霉菌产生的______能将糯米中的淀粉分解为葡萄糖等，使醪糟具有甜味；酵母菌使醪糟产生酒味；乳酸菌是____（填“真核”或“原核”）生物，其发酵产物是醪糟酸味的主要来源。 （2）拌入甜酒曲之前，需将蒸熟的糯米进行冷却，目的是______。发酵前期应保证氧气的供应，使______大量繁殖；后期应减少空气进入或隔绝空气，有利于______。 （3）发酵好的醪糟煮沸后，可转移到灭菌玻璃瓶中密封保存，密封之前应对瓶口进行______灭菌，防止瓶口被污染。 【答案】（1） ①. 淀粉酶 ②. 原核 （2） ①. 防止高温杀死甜酒曲中的微生物 ②. 霉菌和酵母菌 ③. 酒精发酵和乳酸发酵 （3）灼烧 【解析】 【分析】题意分析，醪糟发酵过程中起主要作用的是甜酒曲中的好氧霉菌、酵母菌和乳酸菌，其中好氧霉菌能产生淀粉酶，把淀粉分解为葡萄糖等，使醪糟具有甜味；酵母菌无氧呼吸产生酒精，具有酒香气味；乳酸菌无氧呼吸产生乳酸，具有酸味。在整个发酵过程中，通过控制条件，保证无菌操作。 【小问1详解】 霉菌产生的淀粉酶能将糯米中的淀粉分解为葡萄糖等，使醪糟具有甜味；酵母菌在无氧条件下能进行无氧呼吸，即消耗培养液中的葡萄糖，将其分解成二氧化碳和酒精，进而使醪糟产生酒味；乳酸菌为厌氧微生物，能发酵形成乳酸，是醪糟产生酸味的主要来源。 【小问2详解】 拌入甜酒曲之前，需将蒸熟的糯米冷却，这样可防止高温杀死甜酒曲中的微生物，发酵前期应保证氧气的供应，目的是为了让酵母菌和霉菌在有氧的条件下大量繁殖；发酵前期应保证氧气的供应，使霉菌和酵母菌大量繁殖；后期应减少空气进入或隔绝空气，有利于酒精发酵和乳酸发酵，使酒味和酸味经发酵产生。 【小问3详解】 发酵好的醪糟煮沸后，可转移到灭菌玻璃瓶中密封保存，密封之前需要对瓶口进行灼烧灭菌，以创造无菌环境，防止瓶口被污染。 27. 科学家利用基因工程和细胞核移植技术培育了绿色荧光蛋白转基因克隆猪。基本流程是：从荧光水母中获取目的基因，与有关载体重组，将其导入猪胎儿的成纤维细胞，经培养后再将成纤维细胞核植入去核的卵母细胞中，最后培养出转基因克隆猪。 （1）成纤维细胞贴壁生长分裂到表面相互接触时，就会停止分裂，这种现象叫做细胞的______。若将成纤维细胞进行传代培养，操作时首先用______处理成细胞悬液。 （2）作为核移植受体细胞的去核卵母细胞一般处在______期。目前核移植技术中普遍使用的去核方法是______。将供体细胞注入去核的卵母细胞，通过______法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重构胚。常通过______（物理方法）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。 （3）培养重组细胞时，将细胞所需的营养物质按其种类，数量严格配制而成的培养基称为______培养基，但通常在培养基中还需要加入适量的______等天然成分。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行，CO2的主要作用是______。为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量______。 【答案】（1） ①. 接触抑制 ②. 胰蛋白酶 （2） ①. MⅡ##减数第二次分裂中##减数分裂Ⅱ中期 ②. 显微操作去核法 ③. 电融合 ④. 电刺激 （3） ①. 合成 ②. 血清 ③. 维持培养液的pH ④. 抗生素 【解析】 【分析】 动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养需要的条件有：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO2；动物细胞培养技术主要应用在：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质等。 【小问1详解】 成纤维细胞贴壁生长分裂到表面相互接触时，就会停止分裂，这种现象叫做细胞的接触抑制，这时需要对细胞进行分瓶培养，让其继续增殖。若将成纤维细胞进行传代培养，操作时首先用胰蛋白酶使细胞相互分离开，处理成细胞悬液。 【小问2详解】 作为核移植受体细胞的去核卵母细胞一般处在减数第二次分裂中期，利用显微操作去核法，将细胞核和第一极体一并吸出。接着将供体细胞注入去核的卵母细胞，通过电融合法使两细胞融合。还可通过电刺激法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。 【小问3详解】 将细胞所需的营养物质如糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、维生素等，按其种类、数量严格配制而成的培养基称为合成培养基，但由于人们对细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，通常在培养基中还需要加入适量的血清等天然成分。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行，CO2的主要作用是维持培养液的pH。为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量抗生素抑制细菌生长繁殖。 28. 为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法。请根据图示信息回答下面的问题： （1）试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的生物工程技术有______等。 （2）用来促进B牛多排卵的激素是______激素。精子要具有受精能力，需对其进行______处理；卵母细胞要发育到______才能受精。为筛选出具有优良性状的母牛，胚胎移植前应取______鉴定胚胎的性别，并在胚胎发育到______期后进行胚胎移植。若要获得更多胚胎，可采用______技术，该技术属于______生殖。 （3）产生F牛的理论依据是______，其繁殖方式属于______。 【答案】（1）动物细胞培养和胚胎移植 （2） ①. 促性腺 ②. 获能 ③. MⅡ ④. 滋养层细胞 ⑤. 桑葚胚或囊胚 ⑥. 胚胎分割 ⑦. 无性 （3） ①. 动物细胞的细胞核具有全能性 ②. 无性繁殖 【解析】 【分析】胚胎移植时所移植的胚胎，可以是细胞核移植形成的克隆动物的胚胎，也可以是体外受精形成的胚胎，也可以是胚胎分割形成的胚胎。 【小问1详解】 试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的生物工程技术有动物细胞培养和胚胎移植等。 【小问2详解】 促进超数排卵是促性腺激素。精子要具有受精能力，需对其进行获能处理；卵母细胞要发育到减数分裂Ⅱ中期才能受精。为筛选出具有优良性状的母牛，胚胎移植前应取滋养层细胞鉴定胚胎的性别，并在胚胎发育到桑葚胚或囊胚期后进行胚胎移植。若要获得更多胚胎，可采用胚胎分割技术，该技术属于无性生殖。 【小问3详解】 F牛的产生是通过核移植，理论依据是动物细胞的细胞核具有全能性，其繁殖方式属于无性繁殖。 29. 尼帕病毒是一种新型人兽共患病毒，能引起广泛的血管炎，感染者有发热、严重头痛、脑膜炎等症状，给人及动物带来严重危害。科研人员以猕猴为实验材料来生产抗尼帕病毒的单克隆抗体，实验流程如图所示，已知B淋巴细胞的基因型为AA、骨髓瘤细胞的基因型为BB，回答以下问题： （1）图中应向猕猴注射________。 （2）骨髓瘤细胞的生长特点是________。两两融合后的融合细胞可能存在的基因型是________，筛选1需要使用特定的培养基，在该培养基上________的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。 （3）筛选2的两个步骤是________。该过程中通常会使用有限稀释法，即将细胞悬液进行连续倍数稀释，最终调整密度为5个/mL；将稀释好的细胞悬液接种于96孔板，每孔加0.1mL；在显微镜下挑选含1个细胞的孔，补加培养液后继续培养获得细胞克隆。与植物组织培养相比，该培养液中需要添加的特殊成分是________。检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗尼帕病毒抗体，原因是________________________。 【答案】（1）灭活的尼帕病毒 （2） ①. 适宜条件下可以无限增殖 ②. AABB、AAAA、BBBB ③. 未融合的细胞和同种融合的细胞 （3） ①. 克隆化培养和抗体检测 ②. 血清 ③. 形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类多，不一定都能分泌抗尼帕病毒抗体 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【小问1详解】 分析题意，本流程目的是以猕猴为实验材料来生产抗尼帕病毒的单克隆抗体，由于抗原与抗体的结合具有特异性，故图中应向猕猴注射（灭活的）尼帕病毒，诱导其产生特异性免疫。 【小问2详解】 骨髓瘤细胞的生长特点是在适宜条件下可以无限增殖；细胞的融合具有随机性，结合题干“已知B淋巴细胞的基因型为AA、骨髓瘤细胞的基因型为BB”可知，两两融合后的融合细胞可能存在的基因型是AABB、AAAA、BBBB；筛选1需要使用特定的培养基（通常是HAT培养基），在该培养基上未融合的细胞和同种融合的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。 【小问3详解】 筛选2为第二次筛选，是对经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测（专一抗体检验阳性），经多次筛选，获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞；有限稀释法是克隆化培养动物细胞的一种方法：将细胞悬液进行连续倍数稀释，最终调整密度为5个/mL，将稀释好的细胞悬液接种于96孔板，每孔加0.1mL，24h后在显微镜下挑选只含一个细胞的孔，补加培养液后继续培养获得细胞克隆；为保证细胞正常生长，体外培养时与植物组织培养相比，该培养液中需要添加的特殊成分是血清；每种B细胞只能分泌一种抗体，而由于形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类多，不一定都能分泌抗尼帕病毒抗体，故检测过程有些杂交瘤细胞不能分泌抗尼帕病毒抗体。 30. 二倍体豆科牧草沙打旺（2n=16）具有耐旱、耐贫瘠、抗风沙的特点，同源四倍体紫花苜蓿（4n=32）固氮能力较强.科研人员利用体细胞杂交技术获得兼具两者优点的杂种植株，实验流程如图所示，其中I~V表示相关过程，a~f表示相关细胞，组织或个体。回答下列问题： （1）已知红色荧光染料能使得植物细胞膜呈现红色，绿色荧光染料能使得细胞膜呈现绿色，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，当观察到________的现象时，可判断该原生质体是由沙打旺和紫花苜蓿的原生质体融合而成的。 （2）植物体细胞融合完成的标志是________.与过程Ⅲ密切相关的具有单层膜结构的细胞器为________。 （3）在植物体细胞杂交中，光照是重要的影响因素，一般情况下，从图中的过程________（填序号）开始需要进行光照培养，其作用是________。 （4）d细胞在有丝分裂后期含有________条染色体.杂种细胞培育成的植株为六倍体，此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________植株。 【答案】（1）发两种荧光（或既有红色荧光又有绿色荧光） （2） ①. 再生出新细胞壁  ②. 高尔基体 （3） ①. V ②. 诱导试管苗形成叶绿素，使试管苗能进行光合作用   （4） ①. 96   ②. 单倍体 【解析】 【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 【小问1详解】 两个原生质体融合所形成的细胞，可观察到发两种颜色的荧光，既有红色荧光又有绿色荧光。 【小问2详解】 过程Ⅲ表示再生出新细胞壁的过程，这是植物体细胞融合成功的标志，而植物细胞壁的形成与高尔基体有关，高尔基体为单层膜结构的细胞器。 【小问3详解】 一般情况下，过程V再分化需要光照，以诱导试管苗形成叶绿素，使试管苗能进行光合作用。 【小问4详解】 a细胞内有16（或32）条染色体，b细胞内有32（或16）条染色体，则d细胞含有16+32=48条染色体，有丝分裂后期，染色体数目加倍，含有2×48=96条染色体。由配子直接发育而来的个体是单倍体。 31. 微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药—敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。请据此回答以下问题： （1）已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、水等，驯化时逐步加入的物质X是__________。依照物理性质划分，驯化培养基属于__________培养基，其中蛋白胨可提供__________，氯化钠和磷酸二氢钾两种无机盐，在培养基中具有__________的作用（至少答两点） （2）用于筛选的样品应来自__________的土壤。将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为__________，该方法是否需要梯度稀释才能获得单菌落____________。 （3）将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的培养基C，培养24小时后，通过测定培养基中__________，可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。为统计培养基C中的微生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了4个平板培养基D，统计菌落数分别为250、247、312、253，测得培养基C中活菌数为1.25×107个/mL，则涂布的菌液Y为__________mL。 【答案】（1） ①. 敌敌畏 ②. 液体 ③. 碳源、氮源（和维生素 ④. 调节渗透压、充当（酸碱）缓冲物质 （2） ①. （常年）施用敌敌畏 ②. 平板划线法 ③. 否 （3） ①. 敌敌畏的剩余量 ②. 0.2 【解析】 【分析】1、稀释涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。 2、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。 【小问1详解】 微生物驯化是指在培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，得到对此种物质耐受或者能降解此种物质的微生物的过程，该实验目的是筛选抗敌敌畏的微生物，故驯化时，培养液逐步加入的物质X是敌敌畏，这样操作的目的是筛选出高效分解敌敌畏的微生物；由图可知，该驯化培养基中并未加入凝固剂如琼脂等，故依照物理性质划分，驯化培养基属于液体培养基；蛋白胨来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质；氯化钠和磷酸二氢钾除提供无机盐外，在培养基中还分别具有调节渗透压、充当酸碱缓冲物质的作用。 【小问2详解】 由提供信息可知，该实验的目的是从土壤中筛选能能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，故用于筛选的样品应来自常年施用敌敌畏的土壤，这样能够增加获得目的菌的概率；结合题图可知，将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为平板划线法；该方法中，划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着划线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落，故该方法不需要梯度稀释也能获得单菌落。 【小问3详解】 单位时间内剩余的敌敌畏越少，说明筛选出的微生物分解敌敌畏的能力越强，故通过测定培养瓶中敌敌畏的剩余量，可筛选出分解敌敌畏能力较强的微生物；微生物计数时应选择菌落数目在30-300之间的进行计数，统计菌落数分别为250、247、312、253，则菌落的平均数（250＋247＋253）/3=250个，图中稀释倍数是104，由公式可知250/Y×104=1.25×107个/mL可知，涂布菌液Y=0.2ml。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年度第二学期高二年级生物学科第一次考试 班级：__________ 姓名：_________ 一、单选题 1. 动物细胞工程的技术基础是（　　） A. 动物细胞培养 B. 细胞融合 C. 单克隆抗体 D. 核移植 2. 不同的微生物对营养物质的需求不同。下列叙述错误的是（ ） A. 制作固体培养基时可加入琼脂作为凝固剂 B. 配制细菌培养基时都应该加入糖类作为碳源 C. 有些碳源也可以为微生物的生长提供能源 D. 氮源物质能为微生物提供必要的氮元素 3. 一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（ ） ①无毒的环境；②无菌的环境；③只使用合成培养基；④温度与动物的体温相近；⑤因在CO2培养箱中培养，故不需要O2；⑥多数动物细胞培养在7.2～7.4的pH环境 A. ①②④⑤⑥ B. ①②③④ C. ①②④⑤ D. ①②④⑥ 4. 某研究者用抗原A分别免疫3只同种小鼠X、Y、Z，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后，测定各小鼠血清抗体的效价（效价越大，抗体浓度越高），结果如下图。已知该种小鼠体细胞染色体数为40条，而体外培养的小鼠骨髓瘤细胞染色体数为60条。若要利用该小鼠制备杂交瘤细胞，下列说法错误的是（ ） A. 成功融合的杂交瘤细胞中含有2个细胞核，染色体数目总共是50条 B. 血清抗体效价想达到16000以上，至少需要让小鼠经过4次免疫 C. X、Y、Z三只小鼠中最适合用于制备单克隆抗体的是Y D. 可以使用聚乙二醇诱导免疫后的小鼠B细胞和骨髓瘤细胞融合 5. 中国的许多传统美食制作过程都蕴含了生物技术。下列叙述不正确的是（　　） A. 泡菜制作过程中，密封处理有利于乳酸菌发酵 B. 馒头制作过程中，利用酵母菌进行呼吸作用产生CO2 C. 米酒制作过程中，将容器密封有利于酵母菌酒精发酵 D. 腐乳制作过程中，利用了毛霉等产生的蛋白酶 6. 下图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法的操作结果。下列叙述中正确的是（　　） A. 甲中涂布前要将涂布器灼烧接着涂菌液 B. 甲、乙操作中均可以用于微生物的计数 C. 乙中接种环需要灼烧5次 D. 乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端 7. 胚胎工程中各种胚胎操作技术如图所示。下列分析正确的是（ ） A. 从良种公牛体内获得的精子可以直接与获能的卵细胞结合受精 B. 早期囊胚a、b、c的基因型相同，可用滋养层细胞进行性别鉴定 C. 胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从原肠胚细胞获得 D. 胚胎移植时因代孕牛几乎对胚胎无免疫排斥，因此无需使用免疫抑制剂 8. 2018年1月25日， 两只克隆猴登上国际权威学术杂志《细胞》的封面， 克隆猴“中中”、“华华”的诞生， 是中国科学家伟大的杰作， 也解决了无法克隆灵长类动物的难题。此过程不涉及的操作是（ ） A. 动物细胞培养 B. 卵母细胞显微操作去核 C. 电刺激激活重构胚 D. 精子获能处理 9. 某一生物工程技术过程中出现细胞融合的操作，下列叙述正确的是（ ） A. 若为植物体细胞杂交技术，可用灭活病毒诱导两种植物细胞的原生质体融合 B. 若为单克隆抗体的制备技术，融合得到的杂交瘤细胞直接进行克隆化培养可得到大量所需的单克隆抗体 C. 若为体外受精技术，细胞融合过程可在显微镜下观察到雌、雄原核和两个第二极体 D. 若为动物体细胞核移植技术，融合得到的细胞培养到桑葚胚或囊胚可移植到受体动物子宫内以获得克隆动物 10. 第三代试管婴儿技术（PGD/PGS）是对早期胚胎细胞进行基因诊断和染色体检测后再进行胚胎移植，流程如图所示。图中检测包括PGD、PGS（PGD是指胚胎植入前的基因诊断，PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测）。下列叙述正确的是（ ） A. 受精前需将采集的卵子培养至MⅡ期，精子在含Mg2+载体的获能液中获能 B. 进行胚胎移植前需要对夫妻双方进行免疫检查，以防止移植后出现免疫排斥反应 C. PGD和PGS技术可分别用于筛选红绿色盲和唐氏综合征 D. “理想胚胎”需培养至桑葚胚或原肠胚才能植入子宫 11. 2023年4月，中国科学家首次使用非人灵长类动物——食蟹猴的胚胎干细胞创造出了与天然胚胎十分类似的结构，这些人工“猴胚胎”能够成功植入雌猴的子宫，并引起与妊娠相似的反应，研究流程如下图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 食蟹猴的胚胎干细胞能分化形成成年猴体内任何一种类型的细胞 B. 囊胚细胞②③都由细胞①分裂分化形成，细胞③具有发育的全能性 C. 移植前动物细胞培养和早期胚胎培养都需要在的培养箱中进行 D. 胚胎移植后，经受体孕育的后代，其遗传特性与受体一致 12. 胚胎发育的早期有一段时间是在透明带中进行的，这一时期称为卵裂期。其特点是（ ） A. 桑葚胚的细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞逐渐分化 B. 每个细胞体积不变，细胞的数量增加 C. 胚胎有机物总量增加，细胞DNA总量不断减少 D. 所有细胞的相对表面积减小，核物质（质量）与质物质比值增大 13. 将黑色小鼠囊胚内细胞团的部分细胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接受注射的囊胚培养后经胚胎移植发育为黑白相间的小鼠（Mc）。据此分析，下列叙述正确的是（ ） A. 进行胚胎移植的代孕小鼠也应是Mc小鼠 B. Mc小鼠的表皮组织中存在两种基因型的细胞 C. 获得Mc的生物技术包括细胞融合、胚胎移植等 D. 若将接受注射的囊胚一分为二，便可发育成两只Mc小鼠 14. 北方白犀牛曾经广泛分布于非洲中部等地，但由于猖獗的盗猎和自然栖息地的丧失，它们的数量不断减少。2018年3月，世界上最后一头雄性北方白犀牛死亡，该物种仅剩下两头雌性个体。在此之前，研究人员设法保存了北方白犀牛的精子。下列相关叙述正确的是（ ） A. 精子应在和北方白犀牛体温相同的环境下保存 B. 可以通过细胞核移植技术“克隆”出雌雄性北方白犀牛 C. 采用体外受精的方式繁殖北方白犀牛应采用胚胎移植技术 D. 为北方白犀牛等濒危动物提供最后生存机会的措施是就地保护 15. 在一项新的研究中，来自美国俄勒冈健康与科学大学的研究人员成功地将皮肤细胞转化为能够产生可存活胚胎的卵子，这一发现有望用于治疗不孕症。该技术依赖于将皮肤细胞的细胞核转移到已移除细胞核的捐赠卵子中，并诱导其与精子受精，形成一个可存活的胚胎。下列相关叙述错误的是（　　） A. 在受精之前应采用一定的方法将皮肤细胞的细胞核染色体减少一半 B. 该技术可以帮助那些自己没有卵子的病人制造卵子，用于治疗不孕症 C. 应在MI期对捐赠卵子去核，因为该时期第一极体和卵母细胞核较近 D. 受精完成后形成的可存活胚胎的细胞质中的DNA基本由捐赠卵子提供 16. 传统发酵技术在我国已有几千年的历史，可以用于腐乳、酸奶、酱油、醋、泡菜和豆豉等的制作。下列有关叙述错误的是（　　） A. 缺少糖源时，醋酸菌可直接利用乙醇转化为乙醛并最终生成乙酸 B. 传统发酵技术可以直接利用原材料中天然存在的微生物 C. 酸奶发酵所需的乳酸菌是厌氧型微生物，在空气和动植物体表面无法存活 D. 在一段时间内，果醋和果酒的制作过程中发酵液的pH均会逐渐降低 17. 利用植物组织培养技术获得红豆杉试管苗，有助于解决紫杉醇药源短缺问题。下列叙述正确的是（ ） A. 细胞分裂素和生长素的比例会影响愈伤组织的形成 B. 培养基先分装到锥形瓶，封口后用干热灭菌法灭菌 C. 芽原基细胞由于基因选择性表达，不能用作外植体 D. 紫杉醇不能通过细胞产物的工厂化生产来获取，植物组织培养优势明显 18. 如图为制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是（　　） A. 步骤①给小鼠注射IL-6后，应从脾中分离筛选T淋巴细胞 B. 步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细胞悬液 C. 步骤③加入灭活病毒或PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性 D. 步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞 19. 梅花鹿和马鹿杂交后代生命力强、茸质好，但自然杂交很难完成，人工授精能解决此难题。胚胎工程技术的应用，可提高繁殖率，增加鹿场经济效益。下列相关叙述合理的是（ ） A. 采集的精液无需固定、稀释，即可用血细胞计数板检测精子密度 B. 人工授精时，采集的精液经获能处理后才能输入雌性生殖道 C. 超数排卵处理时，常用含促性腺激素的促排卵剂 D. 母体子宫对胚胎的免疫耐受性低下是胚胎移植的生理学基础 20. 科研人员通过对绵羊受精卵进行基因编辑和胚胎移植等操作，获得了羊毛长度显著长于对照组的优良品系。下列叙述错误的是（ ） A. 为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射促性腺激素进行超数排卵处理 B. 为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致，需进行同期发情处理 C. 受精卵发育至桑葚胚阶段，细胞数量和胚胎总体积均增加 D. 对照组绵羊的选择需考虑年龄、性别等无关变量的影响 二、多选题 21. 与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。下列有关叙述不正确的是（ ） A. 与传统发酵技术相同，发酵工程也是利用微生物进行发酵 B. 通过发酵工程获得大量的单细胞蛋白可以制成微生物饲料 C. 生产谷氨酸的发酵过程中，pH的变化不影响谷氨酸的产量 D. 利用放线菌通过发酵工程产生的井冈霉素防治水稻枯纹病属于化学防治 22. 运用细胞工程技术获得单克隆抗体时，下列操作必要的是（ ） A. 对小动物注射抗原 B. 融合并筛选杂交瘤细胞 C. 培养杂交瘤细胞 D. 将胰蛋白酶注入小鼠腹腔 23. 桑黄是生物治癌效率最高的药用真菌，人工栽培难度较大，利用发酵罐进行发酵培养具有广阔前景。科研人员研究发现，发酵罐中蔗糖为70g/L、氯化铵为10g/L、搅拌转速为150r/min、28℃下发酵120h,产生的菌丝量最大。下列说法正确的是（ ） A. 蔗糖、氯化铵分别为桑黄生长提供碳源和氮源 B. 控制温度、营养等都可提高桑黄的种间竞争力 C. 适当提高搅拌转速可增加培养液溶氧量提高菌丝产量 D. 发酵120h后，因发酵环境改变可导致菌丝量下降 24. 枸杞酒果香浓郁、保留了原果实中特有的营养成分，其生产流程大致如下。下列相关叙述正确的是（ ） A. 利用酵母菌进行枸杞酒发酵的过程中温度应控制在18～30℃ B. 在枸杞酒发酵期间，为保持无氧条件不能打开发酵装置的排气阀 C. 若枸杞汁中初始糖浓度过高，则所得果酒的酒精浓度可能偏低 D. 果汁发酵产生的酒精可使溴麝香草酚蓝溶液变成黄色 25. 霉变的花生、玉米中含有黄曲霉素，黄曲霉素是由黄曲霉产生的，具有极强的毒性和致癌性，会导致肝癌等恶性肿瘤发生。研究人员利用黄曲霉素筛选出能高效降解黄曲霉素的菌株，部分实验过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 黄曲霉素是诱发肝癌的物理致癌因子 B. 将样品稀释液进行高压蒸汽灭菌，冷却后接种到1号培养基 C. 1号培养基与2号培养基的物理状态不同 D. 用2号培养基计数，计数结果一般比实际活菌数偏小 三、非选择题 26. 醪糟是以糯米为主要原料，利用微生物发酵制作的民间传统食品。在醪糟发酵过程中起主要作用的是甜酒曲中的好氧霉菌、酵母菌和乳酸菌。醪糟的生产流程如下：糯米的选择→淘洗→浸泡→蒸饭→冷却→拌甜酒曲→发酵→煮沸→保存。回答下列问题： （1）霉菌产生的______能将糯米中的淀粉分解为葡萄糖等，使醪糟具有甜味；酵母菌使醪糟产生酒味；乳酸菌是____（填“真核”或“原核”）生物，其发酵产物是醪糟酸味的主要来源。 （2）拌入甜酒曲之前，需将蒸熟的糯米进行冷却，目的是______。发酵前期应保证氧气的供应，使______大量繁殖；后期应减少空气进入或隔绝空气，有利于______。 （3）发酵好的醪糟煮沸后，可转移到灭菌玻璃瓶中密封保存，密封之前应对瓶口进行______灭菌，防止瓶口被污染。 27. 科学家利用基因工程和细胞核移植技术培育了绿色荧光蛋白转基因克隆猪。基本流程是：从荧光水母中获取目的基因，与有关载体重组，将其导入猪胎儿的成纤维细胞，经培养后再将成纤维细胞核植入去核的卵母细胞中，最后培养出转基因克隆猪。 （1）成纤维细胞贴壁生长分裂到表面相互接触时，就会停止分裂，这种现象叫做细胞的______。若将成纤维细胞进行传代培养，操作时首先用______处理成细胞悬液。 （2）作为核移植受体细胞的去核卵母细胞一般处在______期。目前核移植技术中普遍使用的去核方法是______。将供体细胞注入去核的卵母细胞，通过______法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重构胚。常通过______（物理方法）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。 （3）培养重组细胞时，将细胞所需的营养物质按其种类，数量严格配制而成的培养基称为______培养基，但通常在培养基中还需要加入适量的______等天然成分。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行，CO2的主要作用是______。为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量______。 28. 为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法。请根据图示信息回答下面的问题： （1）试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的生物工程技术有______等。 （2）用来促进B牛多排卵的激素是______激素。精子要具有受精能力，需对其进行______处理；卵母细胞要发育到______才能受精。为筛选出具有优良性状的母牛，胚胎移植前应取______鉴定胚胎的性别，并在胚胎发育到______期后进行胚胎移植。若要获得更多胚胎，可采用______技术，该技术属于______生殖。 （3）产生F牛的理论依据是______，其繁殖方式属于______。 29. 尼帕病毒是一种新型人兽共患病毒，能引起广泛的血管炎，感染者有发热、严重头痛、脑膜炎等症状，给人及动物带来严重危害。科研人员以猕猴为实验材料来生产抗尼帕病毒的单克隆抗体，实验流程如图所示，已知B淋巴细胞的基因型为AA、骨髓瘤细胞的基因型为BB，回答以下问题： （1）图中应向猕猴注射________。 （2）骨髓瘤细胞的生长特点是________。两两融合后的融合细胞可能存在的基因型是________，筛选1需要使用特定的培养基，在该培养基上________的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。 （3）筛选2的两个步骤是________。该过程中通常会使用有限稀释法，即将细胞悬液进行连续倍数稀释，最终调整密度为5个/mL；将稀释好的细胞悬液接种于96孔板，每孔加0.1mL；在显微镜下挑选含1个细胞的孔，补加培养液后继续培养获得细胞克隆。与植物组织培养相比，该培养液中需要添加的特殊成分是________。检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗尼帕病毒抗体，原因是________________________。 30. 二倍体豆科牧草沙打旺（2n=16）具有耐旱、耐贫瘠、抗风沙的特点，同源四倍体紫花苜蓿（4n=32）固氮能力较强.科研人员利用体细胞杂交技术获得兼具两者优点的杂种植株，实验流程如图所示，其中I~V表示相关过程，a~f表示相关细胞，组织或个体。回答下列问题： （1）已知红色荧光染料能使得植物细胞膜呈现红色，绿色荧光染料能使得细胞膜呈现绿色，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，当观察到________的现象时，可判断该原生质体是由沙打旺和紫花苜蓿的原生质体融合而成的。 （2）植物体细胞融合完成的标志是________.与过程Ⅲ密切相关的具有单层膜结构的细胞器为________。 （3）在植物体细胞杂交中，光照是重要的影响因素，一般情况下，从图中的过程________（填序号）开始需要进行光照培养，其作用是________。 （4）d细胞在有丝分裂后期含有________条染色体.杂种细胞培育成的植株为六倍体，此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________植株。 31. 微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药—敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。请据此回答以下问题： （1）已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、水等，驯化时逐步加入的物质X是__________。依照物理性质划分，驯化培养基属于__________培养基，其中蛋白胨可提供__________，氯化钠和磷酸二氢钾两种无机盐，在培养基中具有__________的作用（至少答两点） （2）用于筛选的样品应来自__________的土壤。将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为__________，该方法是否需要梯度稀释才能获得单菌落____________。 （3）将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的培养基C，培养24小时后，通过测定培养基中__________，可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。为统计培养基C中的微生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了4个平板培养基D，统计菌落数分别为250、247、312、253，测得培养基C中活菌数为1.25×107个/mL，则涂布的菌液Y为__________mL。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $