二轮专题(九) 生物技术与工程-【真题密卷】2026年高考生物二轮专题精准提升（湖北专用）

2025一2026学年度二轮专题精准提升（九） 生物学·生物技术与工程 本试卷总分100分，考试时间75分钟。 一、单项选择题：本题共18小题，每小题2分，共36分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合 题目要求的。 题号 2 3 4 5 6 7 8 9 10 111213 14 15 16 17 18 答案 1.果醋中含有多种有机酸和人体所需的氨基酸，下列叙述正确的是 A.利用酒精进行醋酸发酵，发酵液面会出现气泡 B.制作果醋的程序一定是先进行酒精发酵再进行醋酸发酵 C.在醋酸发酵液表面出现的白色菌膜是酵母菌繁殖的结果 D.制果醋不需要严格灭菌，发酵产物醋酸可以抑制杂菌繁殖 2.酸笋具有独特的酸味和香气，是乳酸菌、酵母菌、醋酸菌等多种微生物发酵而成的传统食品，主要流程 如图。下列叙述错误的是 () 菌种选择和优化 选材、清洗 竹笋切制，杀青、漂烫 →冷却→接种发酵 发酵监控 终止发酵 包装、贮藏 A.竹笋杀青、漂烫既能使酶失活保持竹笋天然色泽，又能有效杀灭竹笋表面的微生物 B.乳酸菌是酸笋发酵的主要菌群，其产酸既能抑制腐败菌生长，又能形成独特的酸香 C.酵母菌是酸笋发酵的次要菌群，其产酒精既能增加醇香，又能为醋酸菌发酵提供底物 D.发酵过程监控好条件使微生物同时发酵，既能缩短发酵时长，又能提高酸度 3.利用杨木生产二代燃料乙醇，需要预处理、酶解和发酵等阶段（预处理过程所需的果胶酶常来自于黑 曲霉等微生物)。如图为发酵阶段菌种接种量对发酵结果的影响。下列说法正确的是 () 9.6 女酒精含量·残糖含量书.5 9.4 9.2 9.0 2.5 8.8 8.6 15如 8.4 8.2 1.0 8.0 .5 180 51015.2025300 菌种接种量% A.培养黑曲霉时一般需将培养基调至酸性，果胶酶是黑曲霉分祕的一种单细胞蛋白 B.在伊红一亚甲蓝培养基上可筛选出高产纤维素酶的菌株用于酶解糖化过程 C.接种量超过15%时酒精产量反而有所降低的原因可能是菌种生长消耗大量的糖分 D.接种的菌种为酵母菌，当接种量为12%左右时，发酵后的酒精含量与残糖含量相等 4.影印接种法是一种用于研究微生物抗药性和筛选突变体的实验技术。为检测某种氨基酸缺陷型菌 株，实验人员的实验过程如图所示，其中基本培养基中缺乏某种氨基酸，而完全培养基中含有该种氨 二轮专题精准提升（九）生物学第1页（共8页） 真题名 勤奋辅就成功路，智慧点亮梦想灯 基酸。下列叙述正确的是 班级 灭菌的丝绒布 揭起丝绒布 →88 姓名 经诱变处待测 丝绒布 理的菌液培养基吸附菌体 菌落 28℃ 得分 基本培养基 8 28℃ 2d 菌落 完全培养基 A.影印接种法和稀释涂布平板法相似，每个菌落都由单个菌体发育而来 B.过程②培养时丝绒布先转印至完全培养基上再转印到基本培养基上 C.应从完全培养基上挑选出氨基酸缺陷型菌株用于后续的培养和研究 D.实验结束后对培养皿进行消毒处理后即可再次使用或者废弃 5.利用植物组织培养技术繁殖菊花的示意图如图。下列叙述正确的是 一昌 固体培养基 离体的组 愈伤组织根、芽试管苗 织或细胞 A.只有培养脱毒菊花试管苗才需要对分离的外植体进行消毒处理 B.再分化阶段提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根 C.再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 D.刚培育出的试管苗弱小，应携带培养基炼苗后再移栽至花盆 6.紫杉醇是一种具有抗癌活性的化合物，紫杉醇的工厂化生产流程为：红豆杉器官→愈伤组织→悬浮细 胞培养→筛选稳定高产紫杉醇的细胞群→利用搅拌式生物反应器进行培养→提取紫杉醇。下列叙述 正确的是 () A.红豆杉幼嫩器官易被诱导形成愈伤组织，该过程不会发生基因的选择性表达 B.一般用果胶酶和纤维素酶处理愈伤组织，获得原生质体后再进行悬浮细胞培养 C.生产次生代谢产物紫杉醇的过程中，利用了植物细胞具有全能性的原理 D.利用搅拌式生物反应器培养，有利于细胞进行有氧呼吸和充分利用营养物质 7.研究表明，一般能增加免疫器官重量的物质也具有一定增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免 疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组；实验处理如表。下列叙述正确 的是 ( 组别 甲组 乙组 丙组（空白对照组） 三白草细胞和鱼腥草细胞杂种愈伤 三白草细胞和鱼腥草细胞直接混合 实验 组织的蒸馏水提取物 后的蒸馏水提取物 处理 每天一次等量灌胃；连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 A.三白草和鱼腥草细胞杂交前需先用酶解法处理获得原生质层 B.诱导三白草和鱼腥草的细胞融合可以使用PEG或灭活的病毒 C.丙组处理为加入等量蒸馏水，甲组愈伤组织形成过程中不发生基因的选择性表达 D.若甲、乙组结果相同且大于丙组，说明杂交愈伤组织能产生两种植物的细胞产物 卷 二轮专题精准提升（九）生物学第2页（共8页） 6 8.科研人员将复苏128代含血清冻存的非洲绿猴肾(Vero)细胞传代至136代后，用无血清冻存液制备 成无血清Vero细胞库，随后从中取出1mL细胞补加9mL无血清培养基进行培养，结果如图。下列 叙述错误的是 () 24.0 平台期 对数增长期 20.0 ② 16.0 ◆ 12.0 衰 期 8.0 期 ① 4.0 0 12345678910111213141516 时间/d A.使用无血清培养可保证实验的连续性 B.②处细胞的生长速率较①处细胞慢 C.潜伏期的大部分细胞贴壁后开始分裂 D.更换培养基对衰退期细胞数量下降无影响 9.某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S(含有多个不同的抗原决定簇，每一个抗原决定簇能 够刺激机体产生一种抗体)。研究人员制备抗S单克隆抗体的过程如图所示，下列说法错误的是 () 筛选单 类型杂交 瘤细胞 →8 单克隆 装题餐遥冠 抗体M 免疫小鼠 细胞杂交瘤 89→6。/融谷 细胞 筛选单 →影 类型杂交 单克隆 培养骨髓分散骨髓 瘤细胞 抗体N 瘤细胞瘤细胞 A.多次注射S抗原免疫小鼠是为了获得大量的能产生抗S抗体的B淋巴细胞 B.培养用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞时，需要保证无菌无毒的环境 C.单克隆抗体M和单克隆抗体N都能够识别S蛋白，说明制备的抗体不具有特异性 D.可用灭活病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合 10.一种杂交瘤细胞只能产生一种抗体，抗体由两条相同的重链和两条相同的轻链构成。科研人员通过 动物细胞融合技术将两种不同的杂交瘤细胞(A和B)融合形成双杂交瘤细胞AB,双杂交瘤细胞能 够悬浮在液体培养基中生长繁殖，产生的双特异性抗体AB如图所示。下列叙述错误的是() (B 杂交瘤 细胞A 杂交瘤 细胞AB 轻链 杂交瘤 重链 细胞B 抗体A 抗体B 抗体AB 6 二轮专题精准提升（九）生物学第3页（共8页）】 真题 A.若双特异性抗体应用于肿瘤治疗，则α、β抗原中至少有一种为癌细胞表面抗原 B.诱导杂交瘤细胞A、B融合后利用选择培养基筛选出双杂交瘤细胞AB C.对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时，无需使用胰蛋白酶处理 D.将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔，腹水能为细胞提供所需的营养条件 11.科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测，该质粒的部分结构如图甲所示，其 中V5编码序列表达标签短肽V5;该重组质粒在受体细胞内正确表达后，用抗J蛋白抗体和抗V5 抗体分别检测相应蛋白是否表达以及表达水平，结果如图乙所示。下列分析错误的是 启动子J基因V5编码序列终止子 /F2 F1 .a链 条带1 条带1 -b链 条带2 RI R2 抗J蛋白抗体抗V5抗体 图甲 图乙 A.作为基因表达载体，图甲中的质粒还必须具有特殊标记基因、复制原点 B.为检测J基因是否插入到图甲所示的位置，需用引物F1和R1进行PCR C.若J基因转录的模板链位于b链，则引物F2与图甲中a链相应部分的序列相同 D.图乙中，条带1的出现证明重组质粒在受体细胞内表达了J-V5融合蛋白 12.蛋白质组指某个时刻，某个组织、器官或个体中所有蛋白质的集合。中国科学家率先倡导并领衔了 人类第一个器官（肝脏）国际蛋白质组计划(HLPP),构建了人类第一个器官（肝脏）蛋白质组图谱， 有利于揭示肝病的发病机制和病理过程，可发现新型诊断标志物、治疗和创新药物，全面提高疾病防 治水平。下列叙述正确的是 () A.肝细胞中的核糖体、线粒体均直接参与蛋白质的合成过程 B.特定时间、空间的蛋白质组能够表征人体是否处于某种疾病状态 C.肝脏与其他器官蛋白质组图谱有差异的原因是基因组图谱有差异 D.人体每个器官都拥有一张蛋白质组图谱，且保持终身不变 13.生物技术是一把双刃剑，它的发展既可以造福人类，同时也伴随着潜在的风险和挑战。下列关于生 物技术安全性及伦理问题的叙述，正确的是 () A.世界各国达成协议仅允许少数国家保存和使用生物武器 B.转基因生物会导致食品安全问题，应禁止使用转基因技术 C.生殖性克隆技术有悖伦理，我国严禁一切用于人的克隆技术 D.设计试管婴儿所引发的主要伦理问题是不适合的胚胎处理问题 14.我国劳动人民很早就发明了家庭制酱技术，即将长白毛的馒头、蒸煮软烂的黄豆置于干净的器皿中， 加入适量食盐、凉开水，搅拌成泥状，盖上纱布置于通风阴凉处，每日搅拌一次，发酵成熟后再暴晒、 过滤。下列叙述错误的是 () A.传统制酱是在以毛霉为主的多种微生物的共同参与下完成的 B.制酱过程中蛋白酶、脂肪酶可将大分子有机物分解为小分子 C.发酵过程中能从发酵液中分离出产淀粉酶的微生物 D.传统制酱属于半固体发酵，发挥作用的微生物大多进行有氧呼吸 15.人外周血淋巴细胞(N23)和小鼠骨髓瘤细胞融合后得到的人-鼠杂交瘤细胞(NJ84)可用于制备单克 隆抗体。N23和人纤维母细胞(CRL)均可释放白细胞介素6(IL-6)。为研究不同来源的IL6对 J84克隆化能力及抗体分泌的影响，科研人员进行了相关实验，部分结果如表所示。下列叙述错误 的是 () 密卷 二轮专题精准提升（九）生物学第4页（共8页） 培养细胞 条件培养液 细胞生长孔数/细胞培养孔数 抗体分泌量(pg/mL) NJ84 不含IL6 12/48 11 NJ84 含CRL-IL-6 21/48 48 NJ84 含N23-IL-6 25/48 45 注：CRL-IL-6、N23-IL-6分别来源于对CRL、N23培养72小时后的上清液。 A.N23和N叮84均具有既能体外大量增殖又能产生专一抗体的特点 B.IL6属于细胞因子，能参与细胞间的信号传导 C.在NJ84培养的不同阶段，可添加不同来源的IL6以提高生产效率 D.单克隆抗体既可用于癌症的靶向治疗，又可作为诊断试剂检测疾病 16.科学家通过培育小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞，成功获得了“1母亲0父亲”的雌性小鼠，且该雌性小 鼠能正常生殖产生后代，有关技术如图所示。下列叙述错误的是 ( 第1阶段： 相关酶等 刺激分裂 体外培养 体外构建 ③ 未减数分裂 处理过的 卵细胞 孤雌单倍 孤雌单倍 的卵母细胞 鼠卵母细胞 体囊胚 体胚胎干细胞 孤雌单倍体 胚胎干细胞 极体 第2阶段： 氯化锶 (④ 体外培养 母体内， 激活 显微注射 原核形成 胚胎发育 个体形成 A.用雌激素对母鼠进行超数排卵处理可以获得更多的卵母细胞 B.图中过程①②的分裂方式分别为减数分裂和有丝分裂 C.用于过程③的细胞取自孤雌单倍体囊胚中的内细胞团 D.第2阶段的卵子为次级卵母细胞，过程④为减数分裂Ⅱ的部分过程 17.如图表示花粉管通道法介导植物基因转移。下列说法错误的是 花粉落到 滴管蘸取 外源DNA 外源DNA DNA随机 柱头上刺 外源DNA 沿花粉管 进入受精卵 整合 激花粉管 溶液涂抹 通道进入 萌发并生 雌性柱头 胚囊 长至子房 A.花粉管通道法可适用获得转基因抗虫棉花 B.相比于农杆菌转化法，花粉管通道法避免了植物组织培养这一操作 C.必须在雌蕊成熟时才能进行图中所示的处理方法 D.外源DNA不需要构建基因表达载体，就能借助花粉管通道进入受体细胞并表达 l8.CRISPR/Cas9基因编辑技术根据靶基因序列设计向导sgRNA,精确引导核酸酶Cas9切割与 sgRNA配对的DNA,相关酶在修复断裂DNA的过程中会改变连接部位的碱基序列。科研人员通 二轮专题精准提升（九）生物学第5页（共8页） 真题空 过删除编码PD-1蛋白基因的2、3、4片段造成蛋白质的功能缺失，制作PD-1基因敲除鼠的流程如 图所示。已知P1和P2是PCR的引物，下列相关分析正确的是 () 1 234 野生型基因 “R”表示Cas9/sgRNA 连接P2 “☐”表示修饰区域 PD-1基因敲除 “←”表示引药位置 PI P2 A.核酸酶Cs9敲除2、3、4片段作用在磷酸二酯键，引起的变异属于基因重组 B.如果想让某个基因失去功能，不可以利用基因编辑来破坏目的基因 C.欲将基因的2、3、4共3个片段切除，敲除前需要设计2个向导sgRNA D.sgRNA会因错误结合而出现“脱靶”现象，一般sgRNA序列越短，脱靶率越低 二、非选择题：本题共4小题，共64分。 19.(16分)三环芳烃一菲(PHE)是一种典型的疏水性有机污染物，广泛存在于沉积物、水体、土壤和 大气中，因其具有潜在致癌性、致畸性及致突变性，受到人类广泛关注。实验人员从长期受污染的内 河河流采集表层沉积物，经富集筛选后得到一组PHE高效降解菌群，并测试其在不同环境条件下降 解PHE的能力。回答下列问题： (1)实验人员先制备富集培养基，然后采用 法灭菌，冷却后再接入沉积物样品。 富集培养基中除含微生物生长所必需的各种无机盐外，还需要加入氮源，并以 作为唯一碳源。 (2)经富集培养得到的菌液用 法进行分离后，实验人员通过比较 的大小 来判断不同菌种的降解能力。 (3)实验人员统计了三种不同种类菌群对PHE的降解效果，在实验条件下降解效果最好的菌群是 ,依据是 菌群种类 PHE浓度/(mg·L1) 降解率/% 降解时间/d B1 100 85.48 7.0 B2 100 95.78 2.5 B3 100 87.40 9.0 (4)实验人员进一步测定了不同培养温度下三种菌群的吸光值OD600(吸光值越大，菌体生物量越 多)，结果如图所示。在图中培养条件下，三种菌群中对温度耐受性最好的菌群是 。进一步研 究发现，B2在pH为5~11时都能够生长，若要测定B2的最适生长pH的范围，则实验的设计思路 是 2.5 2.0 □B1 0000 l.5 B2 1.0 田B3 ）.5 30 35 40 温度/℃ 卷 二轮专题精准提升（九）生物学第6页（共8页） 6 20.(16分)百合具有观赏、食用和药用等多种价值，科研人员对其进行了多种育种技术研究。回答下列 问题： ☐对照 丽尖孢镰刀菌 70 ☐厚垣镰刀菌■交链格孢 复制起点 工 60 Sma I 抗性基因 50 40 启动子pL 终止子 Ti质粒 终止子启动 30 XbaI BamH I SmaI Sac HindΠl 10 HindⅢ Xbal 04 Sac I Smal BamH I P 图a 图b 图c (1)体细胞杂交育种。进行不同种百合体细胞杂交前，先用 去除细胞壁获得原生 质体，使原生质体融合，得到杂种细胞后，继续培养，常用 (填植物激素名称)诱导 愈伤组织形成和分化，获得完整的杂种植株。 (2)单倍体育种。常用 的方法来获得单倍体植株，鉴定百合单倍体植株的方法是 0 (3)基因工程育种。研究人员从野生百合中获得一个抵抗尖孢镰刀菌侵染的基因L,该基因及其上 游的启动子pL和下游的终止子结构如图a。图b是一种Ti质粒的结构示意图，其中基因gus编码 GUS酶，GUS酶活性可反映启动子活性。 ①研究病原微生物对L的启动子pL活性的影响。从图a所示结构中获取pL,首先选用 酶切，将其与相同限制酶酶切的T质粒连接，再导入烟草。随机选取三组转基因成功的烟草 (P1、P2和P3)进行病原微生物胁迫，结果如图℃。由此可知：三种病原微生物都能诱导pL的活性增 强，其中 的诱导作用最强。 ②现发现栽培种百合B中也有L,但其上游的启动子与野生百合不同，且抗病性弱。若要提高该百 合中L的表达量，培育具有高抗病原微生物能力的百合新品种，简要写出实验思路 21.(16分)H1N1病毒是甲型流感病毒的一种，也是人类最常感染的流感病毒之一，该病毒危害性很 大，可利用细胞工程生产H1N1病毒抗体用于检测和治疗，生产流程图如图。请回答下列问题： 甲小鼠的年诱导基因诱导干细胞②，肝细胞，神经细胞 维母细胞 ① 上皮细胞等 →X细胞 〉③，乙细胞④，单克隆抗体 将H1N1病毒外壳 →Y细胞 蛋白注入乙小鼠 (1)图中X细胞和Y细胞分别代表 和 (2)经过①②过程获得的肝细胞与神经细胞的核基因 (填“相同”或“不相同”)，mRNA (填“相同”或“不相同”)。 (3)③过程先用选择培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，再将其接种到96孔板上进 行培养和 检测，经过多次筛选后选择出 在96孔板的每 个孔中尽量只接种1个细胞，原因是 (4)已知H1N1病毒表面同一抗原的不同位点可分别与抗体1和抗体2发生特异性结合。现将制备 好的H1N1抗体1和H1N1抗体2用于检测患者是否感染H1N1,原理如图，其中待测液体加到A 6 二轮专题精准提升（九）生物学第7页（共8页）》 真题密 处样本垫，B处含有过量游离的结合胶体金的抗体1，C处的垫子上固定有抗体2，D处垫子上固定 有与抗体1特异性结合的抗体。将待测液体加到A处，一段时间后，若 （填图中字母)处 会变为红色，则说明受检个体感染H1N1。 注：胶体金与抗体1结合后可显红色，胶体金和抗原与抗体1的结合位点不同，且不固定在垫子上。 吸水垫 BA 液流方向。一 22.(16分)科研人员制备双父源（遗传物质来自两个雄原核）小鼠，以期为濒危动物保护提供新思路。 在研究过程中，发现双父源小鼠胚胎过度生长、器官畸形，无法形成功能性胎盘，这与基因组印记有 关。已知印记基因是一类对生物个体发育具有重要调控作用的基因，这类基因表达与否取决于它们 所在染色体的来源（父源或母源），父源的印记基因能促进胚胎生长发育，母源的印记基因能抑制胚 胎过度生长并促进胎盘生长。我国科研人员利用相关工程技术成功培育出双父源小鼠，相关技术流 程如图所示。请回答： 雌原核 雌原核 66 代孕 6的 小鼠 精子甲 印记基因编辑的 单倍体 单倍体胚胎干细胞)卵母细胞2 胚胎干细胞a 卵母细胞1 胚胎干细胞 四倍体囊胚 精子乙 (1)培育单倍体胚胎干细胞(haESCs)。对雌鼠注射 使其超数排卵，选择 期的 卵母细胞去核，并与精子甲完成受精；进而将获得的单倍体胚胎干细胞置于95%空气和 气体条件下进行培养。 (2)编辑haESCs印记基因。研究人员运用CRISPR/Cas9编辑系统对相关印记基因进行编辑，该编 辑系统由一个具有剪切DNA链的蛋白质(Cas9)和一段将Cas9精确地引导到基因组中的特定位置 的RNA(gRNA)结合而成。为精确对印记基因进行编辑，应制备 的gRNA。 (3)培育胚胎干细胞a。将精子乙和编辑印记基因的haESCs共注射到去核卵母细胞2中，经诱导培 育得到二倍体的胚胎干细胞a。其中对haESCs进行印记基因编辑的目的是 (4)培育印记基因编辑小鼠。 ①从代孕小鼠中收集一个2细胞，经 处理获得四倍体胚胎，体外培养至囊胚阶段， 其作用一方面是四倍体囊胚无法正常发育成个体，从而保证培育出工程小鼠的细胞核遗传物质来自 ;另一方面为胚胎干细胞a提供 ②将胚胎干细胞a注入四倍体囊胚中，运用 技术送入代孕小鼠，进而培育出印记基因编 辑小鼠。 卷 二轮专题精准提升（九）生物学第8页（共8页）真题密卷 (4)雄萤发出荧光，作为信息吸引雌萤，有利于种 群的繁衍；萤火虫触网引起蛛网振动，作为信息 吸引蜘蛛，可以调节生物的种间关系，维持生态 系统的平衡与稳定 【解析】(1)蜘蛛通过结网捕获萤火虫等猎物，所 以蜘蛛和萤火虫之间是捕食关系。雌性萤火虫通 常静止不动闪烁发光，雄性萤火虫飞行中发光， 所以蜘蛛网上捕获的萤火虫通常为雄性。 (2)判断依据是组3（被困在有蜘蛛网中的雄萤） 的发光频率发生了相似于组2（未被捕获的雌萤） 的改变，说明雄萤被蜘蛛接触后发光特征向雌萤 靠拢，即发生了雌性化改变。 (3)在实验中，组a和组c萤火虫胸部被墨汁涂黑 的目的是排除墨汁气味等因素对实验结果的干 扰，确保变量仅为发光器是否发光。综合实验结 果，蜘蛛通过缠绕萤火虫并注射毒素，使其发光 频率雌性化，从而吸引更多雄性萤火虫，这种策 略称为通过诱导猎物发出吸引同类的信号来增 加捕获量。 (4)信息传递实例：雄性萤火虫通过发光吸引雌 性，促进种群繁衍；萤火虫触网引发蜘蛛振动，作 为信息提示蜘蛛捕食，调节种间关系，维持生态平 衡。这表明信息传递在生态系统中具有调节生物 行为、促进种群繁衍和维持生态稳定的作用。 22.（16分，除标注外，每空3分) (1)食物网(1分)改变群落演替的速度与方向 (2)一个途径利用了光合作用，另外一条没有 CO2厌氧 2025一2026学年度二 生物学·生节 一、单项选择题 1.D【解析】酷酸菌是好氧型细菌，当在有氧条件 下但缺少糖源时，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸，利 用酒精进行醋酸发酵，发酵液面不会出现气泡，A 错误；制作果醋在糖源和氧气充足的情况下，醋酸 菌可以利用葡萄糖直接进行醋酸发酵，B错误；醋 酸发酵后的发酵液颜色浑浊，发酵液表面有白色 菌膜，白色菌膜主要是醋酸菌在有氧条件下大量 繁殖生长而成的代谢产物，C错误；醋酸呈酸性， 可以抑制杂菌繁殖，因此制果醋不需要严格灭菌，D 正确。 2.D【解析】杀青和漂烫通过高温使酶失活，防止 褐变并杀灭表面微生物，确保发酵过程由目标菌 群主导，A正确；乳酸菌作为主要菌群，产酸抑制 腐败菌，同时赋予酸味和香气，符合实际发酵机 6 ·3 二轮专题精准提升 (3)禁止过度开发海岸线、禁止随意采摘海草和 捕捞鱼虾、加强海草床检测、建立海草床自然保 护区等 【解析】(1)某种生物的减少或消失，他在食物链 中的位置可能会由其他生物取代，因此错综复杂 的食物网是生态系统保持相对稳定的重要条件。 人为影响以及全球气候变化使全球海草床加速 退化，成为地球生物圈中退化速度最快的生态系 统之一，体现了人类活动可以改变群落演替的速 度与方向。 (2)根据题图分析可知海草生态系统具有极强的 碳储存能力，通过海草转变为沉积物有机碳的两 种途径：一条是利用海草的光合作用，另外一条 是依赖海草截获海水中的有机悬浮颗粒物，前者 属于生物途径，后者属于非生物途径。海草床沉 积物的周围的无氧环境，会抑制好氧型细菌的细 胞呼吸，进而减缓沉积物被分解成CO3,减少 CO2的释放，故海草床沉积物周围的无氧环境有 利于碳封存，而海草退化会导致沉积物有机碳转 变为CO2的作用增强，进而会首先导致厌氧微生 物增加，碳排放增加。 (3)海草床如同陆地上的森林，是健康海洋环境 的重要标志。海草床的功能有：固定沙滩、固堤 减灾；为海洋生物提供栖息地；为海洋生物提供 食物来源。所以，为保护海草床生态系统，应做 到禁止过度开发海岸线、禁止随意采摘海草和捕 捞鱼虾、加强海草床检测、建立海草床自然保护 区等。 轮专题精准提升（九） )技术与工程 制，B正确；酵母菌在无氧条件下产酒精，酒精可 为醋酸菌（需氧条件下）提供底物转化为醋酸，但 酸笋发酵以厌氧为主，若存在短暂有氧阶段，此过 程可行，C正确；乳酸菌（厌氧）与醋酸菌（需氧）对 氧气需求矛盾，无法同时高效活动。实际发酵分 阶段进行：初期酵母菌产酒精（微氧或无氧），后期 乳酸菌主导产酸（厌氧）。若强制同时发酵，需交 替条件，反而延长时长且降低效率。因此，“同时 发酵缩短时长并提高酸度”的表述不符合科学实 际，D错误。 3.C【解析】培养黑曲霉时一般需将培养基调至酸 性，单细胞蛋白指的是微生物菌体，而果胶酶不属 于单细胞蛋白，A错误；伊红一亚甲蓝培养基是鉴 定大肠杆菌的培养基，本实验应该用刚果红培养 基筛选高产纤维素酶菌株，B错误；由图可知，菌 ·生物学· 种接种量为15%时对应的酒精含量达到最大值， 接种量超过15%，菌种数量大，自身的生长会大量 消耗反应物，导致酒精产量降低，C正确；酒精发 酵的菌种为酵母菌，当接种量为12%左右时，发酵 后的酒精含量与残糖含量曲线有交点，但两者的 纵坐标数值及单位均不同，故发酵后二者含量不 同，D错误。 4.C【解析】影印接种法和稀释涂布平板法都是微 生物学实验中常用的接种方法，用于分离和纯化 微生物，菌落不都是由单个菌体发育而来，当两个 或多个细胞连在一起时，平板上形成的可能是一 个菌落，A错误；进行过程②培养时，为了防止将 完全培养基中特定营养成分带入基本培养基，应 先将丝绒布转印至基本培养基上再“复印”至完全 培养基上，B错误；在基本培养基中氨基酸缺陷型 菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，比较 基本培养基和完全培养基中的菌落可知氨基酸缺 陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上 对应位置有的菌落中挑选，然后用于后续的培养 和研究，C正确；培养皿在使用后通常需要进行灭 菌处理，而不是消毒处理。灭菌处理能够更彻底 地杀死所有微生物，包括芽孢和孢子等难以杀死 的微生物形态。而消毒处理只能杀死大部分微生 物，但无法确保完全无菌。因此，为了实验的安全 性和准确性，培养皿在使用后应该进行灭菌处理， D错误。 5.B【解析】植物组织培养过程均需无毒无菌，均 要对分离的外植体进行消毒处理，A错误；再分化 阶段提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值， 有利于诱导生根，B正确；再分化过程，愈伤组织 细胞分化时进行有丝分裂，可能会发生基因突变， 不会发生基因重组，C错误；刚培育出的试管苗弱 小，抗病能力差，携带培养基炼苗易被微生物污 染，需要用流水清洗掉根部的培养基，D错误。 6.D【解析】红豆杉幼嫩器官被诱导形成愈伤组织 的过程是脱分化，该过程有基因的选择性表达，细 胞从已分化状态转变为未分化状态，需要特定基 因表达来调控，A错误；用果胶酶和纤维素酶处理 念伤组织，目的是分解植物细胞之间的胞间层，获 得分散的植物细胞，再进行悬浮细胞培养，B错 误；生产次生代谢产物紫杉醇，只是利用植物细胞 增殖来生产代谢产物，不需要发育成完整植株，没 有利用植物细胞全能性原理，C错误；利用搅拌式 生物反应器进行培养，可使培养液中氧气分布更 均匀，有利于细胞有氧呼吸，同时能让细胞与营养 物质充分接触，充分利用营养物质，D正确。 7.D【解析】三白草和鱼腥草细胞杂交前需先用酶 解法处理获得原生质体，而不是原生质层，常使用 ·3 参考答案及解析 纤维素酶、果胶酶，A错误；诱导三白草和鱼腥草 的细胞融合可以使用PEG,不使用灭活的病毒，B 错误；甲组愈伤组织形成过程中存在基因的选择 性表达，C错误；甲组处理是三白草细胞和鱼腥草 细胞杂种愈伤组织的蒸馏水提取物，乙组处理是 三白草细胞和鱼腥草细胞直接混合后的蒸馏水提 取物，丙组是空白对照组，若甲、乙组结果相同且 大于丙组，说明杂交愈伤组织能同时产生两种植 物的细胞产物，D正确。 8.D【解析】将细胞所需的营养物质按照种类和所 需量严格配制而成的培养基是合成培养基，由于 人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚， 因此在使用合成培养基时通常需要加入血清等一 些天然成分，但是由于血清的批次差异使得合成 培养基的成分存在不确定性，故使用无血清培养 基可使成分相对明确，消除上述不确定性，更能保 证实验的连续性，A正确；Vero细胞在培养时会 出现贴壁现象，贴壁培养的细胞在增殖时会因密 度过大、有害代谢物质积累和培养液中营养物质 缺乏等因素而分裂受阻，细胞表面相互接触后会 出现接触抑制现象而停止生长进入平台期，②处 细胞即将进入平台期，说明其生长可能停止了，而 ①处正处于对数生长期的起始，其生长和增殖速 率均很快，B正确；在潜伏期Vero细胞刚进入新 的培养瓶中，由于贴附因子的存在大部分细胞会 贴附在瓶壁然后开始进行分裂，C正确；更换培养 基可清除有害的代谢物质进而延缓衰退期细胞数 量下降的速率，D错误。 9.C【解析】浆细胞分泌抗体具有特异性，多次注 射S抗原免疫小鼠是为了获得大量的能产生抗S 抗体的B淋巴细胞，A正确；培养用于生产单克隆 抗体的杂交瘤细胞时，需要保证无菌无毒的环境， 可对培养用具灭菌、通过定期更换培养液等实现， B正确；由题意可知，病毒颗粒表面有一特征性的 大分子结构蛋白S(含有多个不同的抗原决定簇， 每一个抗原决定簇能够刺激机体产生一种抗体)， 故单克隆抗体M和单克隆抗体N都能够识别S 蛋白，但该现象仍可说明抗体具有特异性，C错 误；灭活的病毒可用于对动物细胞进行融合，D 正确。 10.B【解析】若双功能抗体应用于肿瘤治疗，则a 和B抗原中至少有一种为癌细胞表面抗原，这样 才能保证药物定向作用于癌细胞，A正确；双杂 交瘤细胞AB本身就是由杂交瘤细胞A、B融合 而成，利用选择培养基无法筛选出双杂交瘤细胞 AB,B错误；杂交瘤细胞是悬浮培养的细胞，细胞 之间并未接触，若要传代培养，细胞培养液直接 离心，去除上清液，加入新鲜培养基即可，不用胰 6 真题密卷 蛋白酶处理，C正确；将杂交瘤细胞注射到小鼠 腹水中培养，腹水作为天然培养基，为细胞提供 各种生长条件，D正确。 11.B【解析】作为基因表达载体必须具备的条件： ①要具有限制酶的切割位，点；②要有标记基因 (如抗性基因)，以便于重组后重组子的筛选；③ 能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的， 对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出 来。图甲中有启动子和终止子等，因此质粒还需 具备的结构有限制酶的切割位点、标记基因、复 制原点等，A正确；据图甲可知，引物F1能与J 基因左端序列配对，引物R2能与终止子序列配 对，因此推测为检测J基因是否插入到图甲所示 的位置，需进行PCR检测，若仅用一对引物，应 选择图甲中的引物F1和R2,B错误；b链是模板 链，而根据图中启动子和终止子的位置可知转录 方向是从左向右，对应的模板链方向应该是3→5， 非模板链（也就是a链）是5'→3'；考虑到DNA 复制的方向是子链的5'→3'，引物基础上延伸的 方向肯定是5→3，所以引物结合的单链其方向 是3→5'；图中F2是后引物，在右侧，所以其配 对的单链是3'→5的b链，故其序列应该与a链 相应部分的序列相同，C正确；据图乙可知，用抗 J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测，均出现条带 1,说明条带1是J-V5融合蛋白。抗J蛋白抗体 检测出现条带2，抗V5抗体检测不出现条带2， 说明条带2所检出的蛋白不是由重组质粒上的 融合的J基因表达的，D正确。 12.B【解析】肝细胞中的线粒体为蛋白质的合成 过程提供能量，但不直接参与该过程，A错误；不 同的疾病状态下，人体特定时间、空间的蛋白质 组会发生变化，所以特定时间、空间的蛋白质组 能够表征人体是否处于某种疾病状态，B正确； 肝脏与其他器官蛋白质组图谱有差异的原因是 基因的选择性表达，其基因组图谱相同，C错误； 基因的表达具有时间和空间差异，大体的某个器 官的蛋白质组图谱在个体发育的不同时期存在 差异，因此不是保持终身不变，D错误。 13.D【解析】为了世界和平，各国共同努力达成协 议，不允许任何国家保存和使用生物武器，A错 误；应理性看待转基因生物，而不能一味地禁止， B错误；中国政府禁止生殖性克隆人实验，但不 反对治疗性克隆用于治疗疾病，C错误；设计试 管婴儿所引发的主要伦理问题是不适合的胚胎 处理问题，D正确。 14.B【解析】长白毛的馒头上主要生长着毛霉，因 此传统制酱是在以毛霉为主的多种微生物的共 同参与下完成的，A正确；脂肪酶分解脂肪，脂肪 6 。3 二轮专题精准提升 不是大分子有机物，B错误；发酵过程中存在能 产生淀粉酶的微生物，可将馒头中的淀粉水解为 二糖或单糖，再被微生物利用，C正确；传统制酱 属于半固体发酵，发酵过程中不进行密封，故发挥 作用的微生物大多进行有氧呼吸，D正确。 15.A【解析】人外周血淋巴细胞(N23)不能大量增 殖，A错误；白细胞介素6(IL-6)属于细胞因子， 能参与细胞间的信号传导，B正确；结合表格可 知，在NJ84培养的不同阶段，可添加不同来源的 L6以提高生产效率，C正确；单克隆抗体可以 与抗原特异性结合，既可用于癌症的靶向治疗， 又可作为诊断试剂检测疾病，D正确。 16.A【解析】促性腺激素可促进生殖细胞的形成， 因此应用促性腺激素处理雌鼠进行超数排卵，以 获得更多的卵母细胞，A错误；过程①是由处理 过的卵母细胞形成卵细胞，为减数分裂，过程② 是由卵细胞形成孤雌单倍体囊胚，为有丝分裂，B 正确；囊胚的内细胞团具有全能性，可形成胚胎 干细胞，因此用于过程③的细胞应取自孤雌单倍 体囊胚中的内细胞团，C正确；卵母细胞发育到 减数第二次分裂时才具有受精能力，将孤雌单倍 体胚胎干细胞注入卵子内，模拟的是受精过程， 因此第2阶段的卵子为次级卵母细胞，经过过程 ④可看到2个极体，说明过程④为减数分裂Ⅱ的 部分过程，D正确。 17.D【解析】花粉管通道法是一种常用的植物基 因转移方法，适用于多种植物，包括棉花，A正 确；花粉管通道法可以直接实现转基因植物的自 然生成，而农杆菌转化法还需要对成功导入目的 基因的受体细胞进行植物组织培养获得转基因 植物，故花粉管通道法避免了植物组织培养这一 操作，B正确；授粉过程需要在雌蕊成熟后，因 此，花粉管通道法也应该必须在雌蕊成熟时才能 进行图中所示的处理方法，C正确；要让目的基 因进入受体细胞后能稳定存在并得到复制和表 达，不管采用什么导入方法，都需要构建重组载 体才能实现，外源DNA也需要构建基因表达载 体，才能借助花粉管通道进入受体细胞并表达，D 错误。 18.C【解析】核酸酶Cas9敲除2、3、4片段作用在 磷酸二酯键，这种变异是由于基因中碱基对的缺 失导致的，属于基因突变，而不是基因重组，A错 误；因为基因编辑技术可以通过对基因进行切 割、修复等操作改变基因结构，所以如果想让某 个基因失去功能，利用基因编辑来破坏目的基因 是可行的，B错误；要将基因的2、3、4共3个片段 切除，需要在2片段的上游和4片段的下游分别 设计一个向导sgRNA,共2个向导sgRNA,这样 ·生物学· 才能精准定位并切割相应区域，C正确；SERNA 会因错误结合而出现“脱靶”现象，一般sgRNA 序列越长，与靶序列的特异性结合越强，脱靶率 越低；序列越短，特异性越差，脱靶率越高，D 错误。 二、非选择题 19.(16分，每空2分) (1)高压蒸汽灭菌PHE (2)稀释涂布平板降解圈 (3)B2B2对PHE的降解率最高，且降解时间 最短 (4)B2配制七组培养基，将培养基的pH分别 调整为5、6、7、8、9、10、11（或配制pH为5~11 内的一系列pH梯度的培养基)，在各组培养基 上分别接种等量的B2,在相同且适宜的条件下培 养一段时间，测定各组培养基中B2的吸光值 OD600,吸光值OD600最大的一组的相邻两组 对应的pH范围即为B2生长的最佳pH范围 【解析】(1)培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进 行灭菌，微生物生长所需要的营养物质包括各种 无机盐、碳源、氨源，为获得高效降解PHE的降 解菌，配制的培养基必须以PHE为唯一碳源。 (2)经富集培养得到的菌液用稀释涂布平板法进 行分离后，通过比较降解圈大小判断不同微生物 的降解能力，降解圈大的，降解能力强。 (3)根据表中数据可知，B2对PHE的降解率最 高，且降解时间最短，因此，在实验条件下降解效 果最好的菌群是B2。 (4)与B1和B3相比，B2在20~40℃内，各组生 物量相差不大，且都有较高的生物量，说明B2对 温度耐受性最好。要测定B2的最适生长pH的 范围，可以配制七组培养基，将培养基的DH分 别调整为5、6、7、8、9、10、11（或配制pH为5~11 内的一系列DH梯度的培养基)，在各组培养基 上分别接种等量的B2,在相同且适宜的条件下培 养一段时间，测定各组培养基中B2的吸光值 OD600,吸光值OD600最大的一组的相邻两组 对应的pH范围即为B2生长的最佳pH范围。 20.(16分，除标注外，每空2分) (1)纤维素酶和果胶酶生长素和细胞分裂素 (2)花药离体培养利用显微镜观察根尖有丝分 裂中期细胞中染色体的数目 (3)①HindⅢ、Bam H I交链格孢②设计引 物利用PCR扩增野生百合的基因L及其pL;插 入Tⅵ质粒构建基因表达载体，利用农杆菌转化 法导入百合B的体细胞，经植物组织培养获得转 基因植株；筛选L表达量提高的转基因百合；用 病原体微生物侵染转基因百合，检测其抗病能力 。3 参考答案及解析 (要体现基因工程的步骤和关键技术，最后要进 行个体生物学水平鉴定)(4分) 【解析】(1)因植物细胞细胞壁的成分主要是纤 维素和果胶，因此获得原生质体的方法是用纤维 素酶和果胶酶对植物细胞进行处理。得到原生 质体后使原生质体融合，形成杂种细胞，再用生 长素和细胞分裂素诱导愈伤组织形成和分化，从 而获得完整的杂种植株。 (2)获得单倍体植株的常用方法是花药（花粉）离 体培养；鉴定百合单倍体植株的方法是利用显微 镜观察根尖有丝分裂中期细胞中染色体的数目， 如果染色体数目减少一半，则获得的植株即为单 倍体植株。 (3)①根据目的片段以及质粒上限制酶的识别位 点，启动子两侧都有两种酶，若要获得L并连接 到质粒上，可选用限制酶HindⅢ、Bam H I进行 酶切，以替换Ti质粒中的启动子，从而达到根据 GUS酶活性反映启动子活性的目的。根据图c 的结果可知，交链格孢处理的每一组转基因烟草 中的GUS酶活性都最高，可确定其诱导作用最 强。②欲培育具有高抗病原微生物能力的百合 新品种，可利用转基因技术将百合B中L基因的 启动子替换为野生百合中L基因的启动子pL, 具体思路：设计引物利用PCR扩增野生百合的 基因L及其pL;插入Ti质粒构建基因表达载 体，利用农杆菌转化法导入百合B的体细胞，经 植物组织培养获得转基因植株；筛选L表达量提 高的转基因百合；用病原体微生物侵染转基因百 合，检测其抗病能力（要体现基因工程的步骤和 关键技术，最后要进行个体生物学水平鉴定)。 21.(16分，每空2分) (1)骨髓瘤细胞（已免疫的）B淋巴细胞 (2)相同不相同 (3)抗体能分泌抗H1N1病毒抗体的杂交瘤细 胞确保每个孔中的子细胞都来源于同1个亲 本细胞，便于筛选出能分泌抗H1N1病毒抗体的 杂交瘤细胞 (4)C和D 【解析】(1)图中X细胞为骨髓瘤细胞，Y细胞为 已免疫的B淋巴细胞，因此Z细胞为能产生特定 抗体的杂交瘤细胞，对该细胞进行体外或体内培 养可获得大量的抗体。 (2)经过①②过程获得的肝细胞与神经细胞的核 基因相同，因为它们都是由诱导千细胞经过有丝 分裂、分化形成的，但由于基因的选择性表达，两 种细胞中mRNA不相同。 (3)③过程先用选择培养基对融合后的细胞进行 筛选，获得杂交瘤细胞，再将其接种到96孔板上 6 真题密卷 二轮专题精准提升 进行培养和抗原一抗体检测，经过多次筛选后选 法或者灭活病毒)精子甲和精子乙发育所需 择出能分泌抗H1NI病毒抗体的杂交瘤细胞，该 的营养等条件②胚胎移植 操作过程体现了抗原一抗体特异性结合的原理。 【解析】(1)超数排卵是指应用外源促性腺激素， 在96孔板的每个孔中尽量只接种1个细胞，这 诱发卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵子；成 样可以确保每个孔中的子细胞都来源于同1个 熟的卵母细胞处于减数第二次分裂中期，可以选 亲本细胞，便于筛选出能分泌抗H1NI病毒抗体 用该时期的卵母细胞去核；体外培养动物细胞应 的杂交瘤细胞，进而获得由单一杂交瘤细胞克隆 置于含有95%空气和5%C02的混合气体的 出的细胞群分泌的抗体。 CO2培养箱中进行培养。 (4)将待测液体加到A处，若待测液体中含有 (2)研究人员运用CRISPR/Cas9编辑系统对相 H1N1,则其带有的抗原会与B处的游离的结合 关印记基因进行编辑，应制备与印记基因相应序 胶体金的抗体1结合，并向左移动，由于C处有 列碱基互补配对的gRNA,以准确确定基因组中 抗体2，因而病毒抗原在该处会与抗体2结合并 的特定位置的基因。 显色，多余的抗体1继续向左移动，会与固定在 (3)父源的印记基因能促进胚胎生长发育，母源 D处的抗体1特异性结合的抗体结合进而显色， 的印记基因能抑制胚胎过度生长并促进胎盘生 据此可推测，若C处和D处会变为红色，则说明 长，对haESCs进行印记基因编辑可使胚胎千细 受检个体感染H1N1。 胞a能正常发育。 22.(16分，除标注外，每空2分) (4)①2细胞融合能形成四倍体胚胎；母源的印记 (1)促性腺激素/外源促性腺激素(1分)MⅡ 基因能抑制胚胎过度生长并促进胎盘生长，培育 中/减Ⅱ中/减数分裂Ⅱ中5%C0,/5%二氧化 印记基因编辑小鼠，体外培养至囊胚阶段，其作 碳(1分) 用一方面是四倍体囊胚无法正常发育成个体，从 (2)与印记基因相应序列碱基互补配对/与印记 而保证培育出工程小鼠的细胞核遗传物质来自 基因一条链特异性结合 精子甲和精子乙；另一方面为胚胎千细胞a提供 (3)使胚胎干细胞a能正常发育/避免胚胎发育 发育所需的营养等条件。②胚胎移植可以将体 时过度生长、器官畸形，无法形成功能性胎盘 外发育的胚胎移植到子宫中。 (4)①诱导细胞融合（写具体的物理方法，化学方 2025一2026学年度二轮专题精准提升（十） 生物学·生物图形、图表、信息题 一、单项选择题 度增大，细胞的吸水能力就会逐渐增加，B正确；α 1.C【解析】分析图可知，Pb2+可以通过主动运输 点到b点的过程中，乙溶液中细胞的细胞膜与细 进入细胞，随后再通过主动运输进入液泡中，因此 胞壁之间的距离在减小，说明细胞在吸水。细胞吸 图示路径可增强金丝草对Pb2+的耐受性，A错 水时，细胞液浓度大于外界溶液浓度，C正确；丙 误；分析图可知，PcABC属于载体蛋白，转运Pb2+ 溶液中，细胞膜与细胞壁之间的距离基本不变，说 时需要与其结合，B错误；分析图可知，PcABC转 明细胞处于动态平衡状态。但动态平衡时，细胞液 运Pb2+过程中会发生ATP的水解，ATP分子的 与外界溶液之间仍有水分子的交换，只是水分子 末端磷酸基团脱离下来与PcABC结合，这一过程 进出达到平衡，D错误。 伴随着能量的转移，这就是PcABC载体蛋白的磷 3.C【解析】从图中可知，单独给肿瘤细胞加入果 酸化，C正确；磷脂分子的“尾部”具有疏水性，因 此PcABC跨膜区富含疏水基团，利于其嵌入磷脂 糖时肿瘤细胞数量增加有限，A错误；本实验没有 双分子层中间，D错误。 单独加入肝细胞的处理组，不能得出该结论，B错 2.D【解析】细胞膜与细胞壁之间的距离(L)越大， 误；单独给肿瘤细胞加入果糖时肿瘤细胞数量增 说明细胞失水越多，外界溶液浓度越高。从图中可 加有限，当同时加入肝细胞和果糖时，肿瘤细胞增 知，在相同时间内，甲溶液中细胞的L值最大，乙 殖显著增强，再加入抑制果糖分解的药物后，肿瘤 次之，丙最小，所以甲、乙、丙溶液浓度的大小关系 细胞增殖又受到明显抑制，由此推断，肝细胞能将 为甲>乙>丙，A正确；由t。到t1过程中，甲溶液 果糖转化为其他物质，从而促进肿瘤细胞的生长， 中细胞不断失水，细胞液浓度逐渐增大。细胞液浓 C正确；药物的作用是抑制果糖的分解，D错误。 6 ·38·