第2章 第2节 第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体-【创新大课堂系列】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程同步辅导与测试(人教版)

第2章细胞工程 A.人脐带间充质干细胞属于一种iPS细胞 予了胚胎干细胞制造这8种蛋白质的能力。这 B.通过离心除去上清液可以除去胰蛋白酶 些蛋白质表达以后，通过调控细胞的分化，将这 C.过程①通常用胰蛋白酶处理 些胚胎干细胞转化成了像卵子一样的细胞，它们 D.出现接触抑制前的一段时间内，培养瓶中的细 甚至还可以与精子受精，并且发育成一个早期胚 胞数量有可能呈“J”形增长 胎。下列相关叙述正确的是 () 3.成人体内的小肠干细胞可以分化为吸收细胞、杯： A.胚胎干细胞制造出这8种蛋白质是细胞全能 状细胞、内分泌细胞和潘氏细胞等类型的细胞， 性的体现 说明小肠干细胞属于 ( )· B.上述方法得到的早期胚胎能发育为正常个体 ①成体干细胞②胚胎干细胞③多能干细胞 C.胚胎干细胞转化成像卵子一样的细胞是通过 ④全能干细胞 细胞分化来实现的 A.①③B.①④C.②③ D.②④ D.胚胎干细胞能够不断分裂和分化，不会发生衰 4.科学家们从27种候选分子中，通过排列组合实 老和调亡 验，最终选取了8种在卵子发育早期十分关键的： 温馨提示 请做课时分层检测（七） 分子。通过基因工程的方法改造胚胎干细胞，赋： 第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体 【学习目标】 课程内容标准 核心素养对接 1.举例说出动物细胞融合技术的概念、原理及应用 1.科学思维—归纳动物细胞融合技术的原理及方法，构建单 2.阐明利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程。 克隆抗体制备的过程模型。 3.认同单克隆抗体在临床上有重要的应用价值。 2.社会责任一认同单克隆抗体在临床上有重要的应用价值。 必备知识·自主梳理 预习新知夯实基础 知识梳理 2.单克隆抗体的制备 注射特定的抗原 (一)动物细胞融合技术 @ (o) 概念 使 结合形成一个细胞的技术 B淋巴细胞 细胞 ⊙)杂交细胞—第1次筛选： 选出 原理 细胞膜的流动性 ⊙杂交瘤细胞 筛选—第2次筛选： 结果 形成杂交细胞 筛选出能 的杂交瘤细胞 体外培养入 体内培养 方法 法、电融合法和 法等 O 从培养Y从小鼠腹水中提取 意义 突破了 的局限，使 成为可能 液中 提取以Y以单克隆抗体 ①成为研究 、肿瘤和培育生物新 3.单克隆抗体的优点及应用 应用品种等的重要手段： ②用于制备 ①能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生 优 (二)单克隆抗体及其应用 结合： ②可以 制备 1.传统抗体的制备 ①广泛用作 试剂，在多种疾病的诊断和病 向动物体内反复注射某种 ,使动物产生抗 原体鉴定中发挥重要的作用： 方法 应 体，从动物 中分离所需抗体 ②运载 ,形成抗体一药物偶联物，实现对肿 用 瘤细胞的 杀伤： 缺点 产量低、纯度低、特异性差 ③用于 43 生物学选择性必修3 (三)动物细胞融合技术 (4)单克隆抗体的应用 使 或 动物细 ①作为 ,具有准确、高效、简易、快速的 原理 概念 胞结合形成一个细胞 优点。 的技术 ②用于治疗疾病和运载药物。 突破了 的局限 意 诱导融合 ①PEG融合法 自查自纠 使 义 的方法 -② 法 成为可能 ③灭活病毒诱导法 (1)灭活的病毒能促进动物细胞融合，也能促进 具有原来两个或多 诱导动物细 植物细胞融合 () 个细胞的质 胞融合特有“ 传信息 动物细胞融合技术 的方法 (2)动物细胞融合的结果是形成单核的杂交细胞， 形成杂 植物体细胞杂交的结果是得到杂种植株 () ·交细胞 结果 应用 (3)动物体细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体 (1)成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育 细胞 () 生物新品种等的重要手段 (4)单克隆抗体制备过程中的两次筛选目的相同 (2)用于制造 ( (四)单克隆抗体及其应用 (5)将抗原注入小鼠体内，是为了获得能产生相 1.传统抗体的获得 应抗体的B淋巴细胞 (6)单克隆抗体诊断试剂提高了诊断的准确性、 方 抗注动物形多种B淋 从 产多种 法 原射体内成巴细胞 中分离 灵敏性 抗体 教材边角 产量低 低 2.单克隆抗体及其应用 (教材P48~49“图2-16”拓展) (1)制备原理 观察制备单克隆抗体过程的示意图，将①一⑥名 称序号填写在下图对应的横线上。 B淋巴 一种B淋巴细胞只分泌一种特异 细胞 性抗体 我特导性强，只盘完一种川 细 众灵数度高，再也逃不掉 骨髓瘤 能在体外大量 点 细胞 杂交瘤 B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得 到的杂交瘤细胞，既能 细胞 又能产生大量 单克隆抗体 (2)制备过程 ①体内培养单克隆抗体 用特定的抗原对小鼠 注射特 进行免疫，从小鼠脾 培养骨髓 ②体外培养单克隆抗体 定抗原 中得到能产生 瘤细胞 ③注射特定抗原 的B淋巴细胞 多种B淋 骨髓瘤 ④抗体检测呈阳性 巴细胞 诱导融合，并用 的 细胞 ⑤诱导融合 进行筛选 ⑥用特定的选择培养基进行筛选 多种 细胞 @@ 0C B C0CO 抗体检测 多种B淋巴细胞 将骨髓瘤细胞与 B淋巴细胞融合 抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞 00o 体外培养 注射到小鼠 ©©OOg 内 @ 培养骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞 单克隆抗体 单克隆 (3)单克隆抗体的优点 抗体 讨上述选择培养 D. 能准确地识别 ,与特定抗原发生特异性 的杂交的桑交痛细跑进 瘤细胞（分泌的 结合，并且可以 抗体能与特定 行克隆化培养和 抗原结合) 抗体检测 44 第2章细胞工程 关键能力·合作探究 讲练设计探究重，点 提能点（一） 动物细胞融合技术 情景导引 诱导融合的手段只是促使细胞间的融合，不能 筛选 意义 保证所有的细胞都发生融合，形成的融合细胞 如图为动物细胞融合的过程图解，请思考 也有多种 回答： 融合细 具有两个细胞的遗传信息，通过动物细胞的培 胞特点 养，杂交细胞表现出两个亲本的特点 DNA不同活 两个完整 的两个细胞的 2.植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 有丝 分裂 项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 (1)什么是灭活？灭活病毒诱导细胞融合的原理 细胞膜的流动性和植物细胞 原理 细胞膜的流动性 是什么？ 的全能性 酶解法去掉细胞壁后，诱导原 分散成单个细胞 生质体融合，形成杂种体细 步骤 后诱导细胞融合， 胞，再经过植物组织培养形成 形成杂交细胞 杂种植株 (2)动物细胞融合的结构基础是什么？融合后的 细胞是否可以直接用于培养？为什么？ 诱导 物理法：电融合法、离心法等； PEG融合法、电 化学法：PEG融合法、高 融合法、灭活病毒 方法 Ca+一高pH融合法等 诱导法等 结果 形成杂种植株 形成杂交细胞 (3)比较动物细胞融合与植物体细胞杂交所用的 「典例] 关于动物细胞融合的说法，不正确的是 ( 促融方法的异同。 A.动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个 细胞结合形成一个细胞的过程 B.细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物 细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞 C.细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使 (4)若只考虑A、B两种细胞间的两两融合，诱导： 远缘杂交成为可能 形成的融合细胞有几种？ D.常用的诱导动物细胞融合的方法有：PEG融 合法、电融合法、灭活的病毒诱导法和紫外线 照射等 跟踪训练 下列有关植物体细胞杂交与动物细胞融合的比 较，叙述正确的是 ( 核心归纳 A.两者应用的原理都完全相同 B.两者都可用电融合法或聚乙二醇(PEG)融合 1.动物细胞融合过程解读 法诱导细胞融合 细胞膜融合细胞质融合→细胞核融合（实 操作过程 C.两者融合完成的标志都是形成融合细胞核 质) D.两者的目的都是用于大量生产分泌蛋白 45 生物学选择性必修3 提能点（二） 单克隆抗体的制备及其应用 情景导引 制备单细胞悬液 筛选1 筛选2 能产生抗病毒A B淋巴细胞H (1)为什么要对小鼠注射特定的抗原？ 融合 杂交 的单克隆抗体的 甲 骨髓瘤细胞 细胞 瘤细胞 杂交瘤细胞 回答下列问题： (2)试思考制备单克隆抗体时，不直接用经过免 (1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A,该处 疫的B淋巴细胞来获得单克隆抗体的原因是 理的目的是 什么？ (2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液 的主要实验步骤 (3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂 交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的 (3)单克隆抗体被广泛用作诊断试剂的原因是 培养基属于 ,使用该培养基进行细胞 什么？ 培养的结果是 。 图中筛选2 含多次筛选，筛选所依据的基本原理是 核心归纳 (4)若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交 瘤细胞大量增殖，可采用的方法有 1.血清抗体与单克隆抗体的比较 (答出2点即可)。 名称 产生 特点 跟踪训练 血清 般从血清中分离，产量 由B淋巴细胞分泌 抗体 低、纯度低、特异性差 1.下列是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X 抗体的具体操作步骤，下列对单克隆抗体制备的 单克隆 特异性强、灵敏度高，能 相关叙述不正确的是 ( ) 抗体 由杂交瘤细胞分泌 大量制备 ①将X抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体 2.制备单克隆抗体过程中细胞的比较 的B淋巴细胞②从患骨髓瘤的小鼠体内获取 骨髓瘤细胞③利用促细胞融合因子使两种细 细胞类型 来源 特点 胞发生融合④将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培 已免疫 由B淋巴细胞受抗 养⑤筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞 的B淋 能产生单一抗体，但不 原刺激后增殖分化 能无限增殖 ⑥从腹水中提取抗体 巴细胞 而来 A.实验顺序应当是①②③⑤④⑥ 骨髓瘤 能无限增殖，但不能产 B.④过程中产生的多个杂交瘤细胞也称为克隆 从骨髓肿瘤中提取 细胞 生抗体 C.③过程获得的细胞均可无限增殖 D.③到⑤的过程中通常要经过两次筛选 杂交瘤 B淋巴细胞与骨髓瘤 既能产生抗体，又能大 2.抗体一药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与单 细胞 细胞融合而成 量增殖 克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀 3.单克隆抗体制备过程的关键分析 伤，过程如图所示。下列表述正确的是 (1)对动物免疫的原因：B淋巴细胞要经过免疫 ADC被细胞吞噬 过程，即接触抗原，增殖分化为有特异性免疫功 能的B淋巴细胞，才能产生相应的抗体，所以可 DO 释放药 对动物免疫 细胞凋亡 (2)杂交瘤细胞具备骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的 容体裂 遗传物质，不仅具有B淋巴细胞产生特异性抗体 ADC的作用机制示意图 的能力，还具有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大： A.ADC可通过主动运输进入肿瘤细胞 量增殖的能力，从而可以克服B淋巴细胞不能无： B.抗体进入细胞后激活溶酶体酶，导致细胞调亡 限增殖的缺点，大量生产单克隆抗体。 C.单克隆抗体携带细胞毒素与肿瘤细胞特异性结合 [典例]为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以 D.肿瘤细胞调亡是细胞主动死亡的过程，所以不 小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。 会产生新的蛋白质 46 第2章细胞工程 能力提升·核心素养 提升技能素养提高 科学探究一单克隆抗体制备中两次筛选的目2.据制备抗X单克隆抗体的过程，根据图解回答 的和方法 问题： 项目 第一次筛选 第二次筛选 1① 8 带有抗x抗体的心 在正常培养基中 由于小鼠在生活中还受 细胞(B淋巴细 品：、无限增殖，在选 胞，培养条件下 择培养基中死亡 诱导融合后得到多种杂 到其他抗原的刺激，所以 只能存活儿天) 融合 筛选 交细胞，另外还有未融合 经选择性培养获得的杂 原因 四④在选择培养基中只 的细胞 交瘤细胞中有能产生其 ⑤检测上清液中抗X抗体并用私行有杂交裔细胞生长 他抗体的细胞 阳性细胞克隆，每孔一个细胞一广 用特定的选择培养基筛 用多孔培养皿培养，在每 ©让细胞繁殖，检测 上清液中的抗X抗体： 选：未融合的细胞和同种 阳性细胞连续培养 提供抗X抗体 个孔只有一个杂交瘤细 细胞融合后形成的细胞 筛选 胞的情况下开始克隆化 (B一B杂交细胞、瘤一瘤 方法 培养和专一抗体检测，经 杂交细胞)都会死亡，只 (1)给小鼠注射抗原的目的是 多次筛选得到能产生特 有杂交瘤细胞（瘤一B杂 (2)单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细 异性抗体的杂交瘤细胞 胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细 交细胞)才能生长 胞具有 和 的特性。 (3)制备单克隆抗体时，诱导B淋巴细胞和骨髓 筛选 得到能分泌所需抗体的 瘤细胞融合常用的诱导剂与植物原生质体融合 得到杂交瘤细胞 目的 杂交瘤细胞 不同的是可用 (4)动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨 基酸、无机盐、维生素等，与植物培养基有所不同 应用体验 的是，还含有 (5)图中有两次筛选过程，其中步骤④的目的是 1.如图所示，核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻 筛选出 ,步骤⑤⑥的目 的是筛选出 断其中的全合成途径。正常细胞内含有补救合成 途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选 课堂小结 用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。现用加入H、A、T 动物原理 细胞膜具有流动性 三种物质的“HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细； 细 胞。下列相关叙述正确的是 ( ) 融合方法物理法、化学法、生物法 技 思维 与 糖和 导图 获取已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤 全合成途径：氨基酸 A(阻断) 单克 制备细胞一融合、筛选一杂交瘤细胞一 核苷酸→DNA 隆抗 动物细胞培养→提取单克隆抗体 补救合成途径：H、T转化酶、激酶 体 应用诊断试剂：治疗疾病；运载药物 A.已免疫的B淋巴细胞及其自身融合细胞因含： 1.诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融 有转化酶可在HAT培养基上大量增殖 合法和灭活病毒诱导法等。 2.杂交瘤细胞既能迅速大量增殖，又能产生特定抗体。 B.杂交瘤细胞因为可以进行上述两个途径所以： 3.制备单克隆抗体过程中第一次筛选是为了获得杂交 能在HAT培养基上大量增殖 晨读 瘤细胞，第二次筛选是为了获得能产生特定抗体的杂 交瘤细胞 C.HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞都能分泌 必背 4.对经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和专 针对同一种抗原的抗体 抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌 所需抗体的细胞： D.利用杂交瘤细胞制备的单抗可作为特异性探 5.单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗 针研究相应抗原蛋白的结构 原发生特异性结合，并且可以大量制备。 47 生物学选择性必修3 随堂巩固·评价演练 循纲忆知素养培育 1.(2022·山东高考)如图所示，将由2种不同的抗： B淋巴细胞 体内培养 原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后 (o) ⊙魔送 单克隆 O 重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列 抗体X 瓷回细胞N缅胞 说法错误的是 骨髓瘤细胞 体外培养 (1)图中B淋巴细胞是取自 的动物或人。融合的M细胞先用选 择培养基进行筛选，再进行克隆化培养和 抗体1 抗体2 抗体3 以得到符合要求的N细胞，N细胞的名称 A.双抗可同时与2种抗原结合 是 B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞 (2)为了进一步研究H7N9病毒的单克隆抗体X C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用： (以下简称抗体X)的效果及作用机制，科学家开 的2种抗原 展了如下实验： D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双： 实验一：在体外将抗体X与HA蛋白(H7N9病 抗的浆细胞 毒表面的一种蛋白)混合，检测抗体X对HA蛋 2.对比动物细胞融合和植物体细胞杂交技术，下列 白的亲和力。实验结果如下表所示。（注：KD 论述合理的是 ( ) 值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高：抗体Y A.均可使用PEG、电融合或灭活病毒的方法诱： 为一种已知的H7N9病毒的抗体。) 导细胞融合 抗体种类 KD B.两者都可以跨越种属间的生殖隔离 抗体X 5.32×10-9M C.两者都需要用到纤维素酶和果胶酶 D.在适宜的条件下，均可发育成完整个体 抗体Y 1.95×10-9M 3.人绒毛膜促性腺激素(HCG)是怀孕后胎盘滋养： 实验二：以一定浓度的H7N9病毒感染小鼠； 层细胞分泌的一种糖蛋白，通过制备抗HCG单： 天后向小鼠腹腔分别注射一定剂量的抗体X、Y; 克隆抗体测试人体尿液中的HCG,可用于早孕 14天后观察小鼠存活情况并测定体重变化。实 的诊断。如图是抗HCG单克隆抗体制备示意： 验结果表明：抗体X的体内治疗效果优于抗 图，相关叙述正确的是 ( ) 体Y。 免疫小鼠女 ①实验一结果表明：对H7N9病毒HA蛋白亲和 今注射HcG 力更高的抗体是 B淋巴 ②分析实验一和实验二的结果差异，研究人员提 细胞 品一 ,→的 出假说：抗体除了中和病毒活性之外，还可以通 骨髓瘤 HAT培养基克隆化培养和大规模 过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬 中培养筛选 抗体检测 细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细 ② ③ ④ 胞。请以巨噬细胞、感染了H7N9病毒的肺上皮 A.①过程常用灭活的病毒，不可用聚乙二醇 细胞、细胞培养液、抗体X、抗体Y和无关抗体等 B.②过程筛选出的杂交瘤细胞都能产生抗HCG 为材料，设计实验验证上述假说，写出实验思路。 抗体 C.③过程以抗HCG单克隆抗体为抗体进行： 检测 D.④过程需要添加抗生素等物质，以防止病毒 污染 4.单克隆抗体在防治H7N9型禽流感上具有显著： 疗效。如图是科研人员制备H7N9病毒的单克 隆抗体X的过程。回答下列问题： 温馨提示 请做课时分层检测（八） 48减数分裂得到染色体减半的卵细胞，故通过上述方法得到的早期胚： 答案(1)诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞 胎不能发育为正常个体，B错误：据题千信息，通过基因工程赋予胚 (2)取小鼠甲脾脏剪碎，用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入 胎千细胞制造8种蛋白质的能力，在这些蛋白质表达以后，通过调！ 培养液制成单细胞悬液(3)选择培养基只有杂交瘤细胞能够生 控细胞的分化，将这些胚胎干细胞转化成了像卵子一样的细胞，C 长抗原与抗体的反应具有特异性(4)将杂交瘤细胞注射到小鼠 正确：胚胎千细胞也会发生衰老和调亡，D错误。] 腹腔内增殖：将杂交瘤细胞在体外培养 第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体 跟踪训练 必备知识·自主梳理 :1.C[单克隆抗体的制备过程为①②③⑤④⑥，其中③到⑤过程通常 知识梳理 要经过两次筛选，即先筛选出杂交璃细胞，再筛选出能产生特定抗 (一)两个或多个动物细胞PEG融合灭活病毒诱导有性杂交 体的杂交瘤细胞，A、D正确：④过程是杂交瘤细胞注入小鼠体内培 远缘杂交细胞遗传细胞免疫单克隆抗体 养，杂交璃细胞无限增殖，也称为克隆化培养，B正确：③过程获得 的细胞，如骨髓瘤细胞、杂交璃细胞、璃一璃融合细胞会无限增殖，B (二)1.抗原血清2.骨髓瘤杂交瘤细胞产生所需抗体 淋巴细胞、B一B融合细胞不能无限增殖，C错误。] 3.特异性大量诊断药物选择性治疗疾病 2.C[ADC可通过胞吞的方式进入肿瘤如胞，A错误：据图分析可 (三)细胞膜具有流动性有性杂交 远缘杂交两个多个 电融 知，抗体进入细胞后被溶酶体裂解，释放的药物导致细胞调亡，B错 合(2)克隆抗体 误：单克隆抗体携带细胞毒素与肿璃细胞膜上的特异性受体结合，C (四)1.抗体血清纯度特异性2.(1)增殖无限增殖特定抗 正确；肿璃细胞调亡是细胞主动死亡的过程，细胞调亡过程中基因 体(2)特定抗体特定选择培养基杂交瘤克隆化培养 进行选择性表达，因此会产生新的蛋白质，D错误。] 腹腔细胞培养液：腹水(3)抗原的细微差别大量制备 提升·核心素养 (4)①诊断试剂 应用体验 自查自纠 (1)×(2)/(3)×(4)×(5)/(6)/ !1.D:[已免疫的B淋巴细胞及其自身融合细胞均属于高度分化细胞， 教材边角 不能大量增殖，A错误；杂交璃细胞只能通过补救合成途径在HAT ③⑤⑥④②① 培养基上大量增殖，B错误：HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞既 能大量增殖，又能产生抗体，但不一定产生同一种抗体，C错误：利 关键能力·合作探究 用杂交瘤细胞制备的单抗可作为特异性探针研究相应抗原蛋白的 提能点（一） 结构，D正确。] 情景导引 2,解析(1)给小鼠注射抗原，目的是从小鼠的脾脏中取得已免疫的 (1)提示灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能 B淋巴细胞，该细胞能够产生抗体。(2)B淋巴细胞能产生特异性抗 力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合 体，在体外不能无限繁殖：骨髓瘤细胞不产生专一性抗体，在体外能 的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋 无限繁殖；杂交细胞既能无限增殖，又能产生特定抗体。(3)制备 白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子 单克隆抗体时，诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合常用的诱导剂与 重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 植物原生质体融合不同的是可用灭活的病毒进行诱导。(4)动物细 (2)提示细胞膜的流动性。不可以。因为诱导融合的手段只是促 胞培养液的配方通常为合成培养基，含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、 使细胞闻的融合，不能保证所有细胞都发生融合，形成的融合细胞 维生素等，还应该加入血清等。(5)图中有两次筛选过程：步骤④筛 也有多种，因此需要筛选。 选得到杂交璃细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）：步骤 (3)提示相同点是二者都可以采用PEG融合法、电融合法等促融 ⑤⑥筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。 方法。 答案(1)产生相应的B淋巴细胞(2)无限增殖产生特定抗体 不同点是动物细胞融合还可以采用灭活病毒诱导促融。 (3)灭活的病毒进行诱导(4)血清(5)杂交瘤细胞能产生特 (4)提示有三种，即同种细胞融合(AA,BB)和不同种细胞融合 定抗体的杂交瘤细胞 (AB)。 ·随堂·评价演练 核心归纳 :1.D「根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时与2 典例解析常用的诱导动物细胞融合的方法有：PEG融合法、电融！ 种抗原结合，A正确：根据抗原与抗体能够发生特异性结合的特性， 合法和灭活病毒诱导法等，紫外线照射不是诱导动物细胞融合的方！ 利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，从而使药物发挥相应的 法，D错误 作用，B正确：由于双抗是在两种不同的抗原刺激下，B细胞增殖、分 答案D 化产生不同的浆细胞分泌形成的，因此，筛选双抗时需使用制备单 跟踪训练 克隆抗体时所使用的2种抗原来进行抗原一抗体检测，从而实现对 B[植物体细胞杂交的原理是细胞膜具有流动性和植物细胞具有 双抗的筛选，C正确：同时注射2种抗原可刺激B细胞分化形成不 全能性，动物细胞融合的原理是细胞膜具有流动性：电融合法或聚 同的浆细胞，而不是分化成产双抗的浆细胞，D错误。] 乙二醇(PEG)融合法既可诱导动物细胞融合，也可诱导植物原生质！2，B[灭活的病毒是动物细胞融合特有的诱导方法，A错误：动物细 体融合：植物原生质体融合完成的标志是杂种细胞再生出细胞壁， 胞融合和植物体细胞杂交技术都可以打破生殖隔离，B正确：植物 动物细胞融合完成的标志是形成融合细胞核：桩物体细胞杂交的目： 体细胞杂交技术需要用纤雏素酶和果胶酶去除细胞壁，动物细胞融 的是产生杂种植株，动物细胞融合可用于大量生产分泌蛋白等。B: 合不需要，C错误：目前，动物细胞融合形成的杂交细胞不能发育成 正确。] 完整个体，D错误。] 提能点（二） !3.C[动物细胞融合可以用灭活的病毒诱导处理，也可以用聚乙二醇 情景导引 诱导融合，A错误：②过程筛选出的杂交璃细胞不一定全部能产生 (1)提示以获得能产生相应抗体的B淋巴细胞。 抗HCG抗体，还需要进行专一抗体检测，B错误：③过程以抗HCG (2)提示在体外培养条件下，B淋巴细胞不能进行无限增殖，难以· 单克隆抗体为抗体，再加入特定的HCG为抗原，利用抗原一抗体杂 获得足够数量的单克隆抗体。 交的原理进行检测，C正确：④过程需要添加抗生素等物质，目的是 (3)提示单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原： 防止杂萌污染，而不是防止病毒污染，D错误。] 发生特异性结合，并且可以大量制备。 !4.解析(1)图中B淋巴细胞是取自感染过H7N9病毒的动物或人。 核心归纳 B淋巴细胞与小鼠骨髓璃细胞融合形成的M细胞先用特定选择培 典例解析(1)实验前给小鼠甲注射病毒A,其目的是刺激小鼠机： 养基进行筛选，再进行克隆化培养和抗体检测以得到符合要求的N 体发生免疫反应，从而产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞。 细胞，N细胞的名称是杂交璃细胞。(2)①由表格数据分析可知，抗 (2)制备单细胞悬液的主要实验步骤：从健康动物体内取出组织块， 体Y的KD值低于抗体X,说明抗体Y和HA蛋白的亲和力高于抗 剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，这样组织就会分散！ 体X。②将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入 成单个细胞，然后用培养液将分散的细胞稀释制成单细胞悬液。} A,B、C三组细胞培养液中，并向这三组培养液中分别加入无关抗 (3)图中筛选1采用特定的选择培养基，在该培养基上，未融合的细 体、抗体X和抗体Y,一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百 胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才 分比。 能生长。图中筛选2含多次筛选，利用抗原与抗体特异性结合的原 答案(1)感染过H7N9病毒抗体检测杂交瘤细胞(2)①Y 理，就可获得能分泌所需抗体的杂交璃细胞。(4)要使能产生抗病 ②将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A,B、C 毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可将杂交璃细胞在体外 三组细胞培养液中，并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体 条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。 X和抗体Y,一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。 180