精品解析：山东济南第一中学2025-2026学年高二4月阶段测试生物试题

济南一中2024级高二4月学情检测生物试题 说明：本试题分为第Ⅰ卷和第Ⅱ卷两部分，第Ⅰ卷为第1页至第10页，共35题，第Ⅱ卷为第10页至第12页，共2题。请将答案按要求填写在答题纸相应位置，答在其它位置无效，考试结束后将答题卡上交。试题满分100分，考试时间90分钟。 第Ⅰ卷（共75分） 一、单项选择题：本题共30小题，每小题2分，共60分。 1. 下列关于传统发酵技术及其应用的说法正确的是（ ） A. 制作泡菜时亚硝酸盐的含量随着发酵时间的延长而不断升高 B. 制作果酒时需将新鲜水果用清水冲洗后灭菌 C. 发酵坛密封不严使酒变酸是因为乳酸含量增加 D. 制作腐乳利用了毛霉等产生的蛋白酶 【答案】D 【解析】 【详解】A、制作泡菜过程中，亚硝酸盐含量随发酵时间延长先升高后降低：发酵初期亚硝酸盐还原菌活跃使亚硝酸盐积累，后期乳酸积累抑制亚硝酸盐还原菌活动，亚硝酸盐被分解含量下降，并非不断升高，A错误； B、制作果酒利用的是新鲜水果表面附着的野生酵母菌，若对水果进行灭菌会杀死发酵所需的酵母菌，导致发酵无法进行，因此仅需清水冲洗，无需灭菌，B错误； C、发酵坛密封不严时，氧气进入，醋酸菌在有氧条件下将酒精转化为醋酸使酒变酸，该过程与乳酸菌产生的乳酸无关，C错误； D、制作腐乳时，毛霉等微生物产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，脂肪酶可分解脂肪为甘油和脂肪酸，提升腐乳的风味和营养，D正确。 2. 下列关于醋酸菌和乳酸菌的相关叙述，正确的是（ ） A. 适宜条件下，在醋酸菌与乳酸菌共存专用的培养基中添加乙醇，可筛选出醋酸菌 B. 若用于酿酒的葡萄果皮上有醋酸菌，酒酿好后可直接通入无菌空气制作葡萄醋 C. 家庭用乳酸菌和醋酸菌分别制作酸奶和果醋通常都是纯种发酵，属于传统发酵技术 D. 随着泡菜和果醋制作中发酵液pH逐渐降低，泡菜和果醋的口味、品质越来越好 【答案】A 【解析】 【分析】本题围绕醋酸菌和乳酸菌的代谢特性与发酵应用展开，考查微生物的筛选、发酵条件及传统发酵技术的特点，需结合两种菌的代谢类型（异养需氧型 / 异养厌氧型 ）和发酵原理辨析选项。 【详解】A、醋酸菌为好氧菌，乳酸菌为厌氧菌，有氧条件下，在醋酸菌与乳酸菌共存专用的培养基中添加乙醇，醋酸菌可把乙醇氧化为乙酸，从而获取能量，因此可筛选出醋酸菌，A正确； B、酿酒后的环境（高酒精浓度、低pH）及温度（18-25℃）不适宜醋酸菌直接发酵（需30-35℃），需调整条件，B错误； C、家庭传统发酵依赖自然菌种（如酸奶中的乳酸菌、环境中的醋酸菌），并非纯种培养，C错误； D、泡菜制作中乳酸菌产乳酸使pH下降，抑制杂菌且提升风味，酸性过强则可能腐败，不宜使用，D错误； 故选A。 3. 大豆发酵食品豆瓣酱是我国传统发酵美食，它能让麻婆豆腐热辣鲜香，也能让回锅肉滋味醇厚，好似舌尖上的时光胶囊，封存着先辈们代代相传的生活智慧。豆瓣酱的制作流程如下图所示，下列叙述错误的是（ ） A. 保温发酵过程中，酱豆中有机物的种类增加，有机物含量减少 B. 米曲霉发酵时需不断翻酱，由此推测米曲霉属于需氧型微生物 C. 米曲霉发酵过程中，添加面粉主要是为米曲霉的生长提供氮源 D. 后期发酵中乳酸菌产生乳酸，能抑制杂菌生长并赋予豆瓣酱独特酸味 【答案】C 【解析】 【分析】大豆中含有大量蛋白质，主要为微生物的生长提供碳源（提供碳元素）和氮源（提供氮元素）类营养物质；加入的大豆经蒸熟、冷却后使用，这样既可以对大豆进行消毒，消灭大豆表面的杂菌，又能防止大豆温度过高导致接种的微生物死亡。 【详解】A、在保温发酵过程中，米曲霉等微生物会分泌多种酶来分解有机物。在分解过程中，复杂的有机物会被逐步分解成小分子有机物，所以有机物的种类会增加。同时，微生物的呼吸作用会消耗有机物来获取能量，导致有机物含量减少，A正确； B、米曲霉发酵时需不断翻酱的目的是为了让米曲霉接触到充足的氧气,由此推断米曲霉是需氧型微生物，B正确； C、在米曲霉发酵过程中，添加面粉主要是为米曲霉的生长提供碳源，而不是氮源，C错误； D、后期发酵中乳酸菌会进行发酵产生乳酸，乳酸可以降低环境的pH值，很多杂菌在酸性环境中生长会受到抑制，同时乳酸也能赋予豆瓣酱独特的酸味，D正确。 故选C。 4. 在微生物学中使用选择培养基让特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的过程称为选择培养。在选择培养基中添加一些特殊物质，则可配制成鉴别培养基。下列说法错误的是（ ） A. 分离酵母菌、霉菌等真菌时，可在培养基中加入青霉素 B. 固氮菌能在不加氮源的培养基中生长，说明固氮菌为自养型生物 C. 大多数微生物能利用葡萄糖，但只有能够合成脲酶的微生物才能分解尿素 D. 配制伊红-亚甲蓝琼脂培养基，可用来鉴别大肠杆菌 【答案】B 【解析】 【分析】选择培养基的原理是：不同微生物在代谢过程中所需要的营养物质和环境不同。有的适于酸性环境，有的适于碱性环境；例如从土壤中分离放线菌时，可在培养基中加入10%的酚数滴，抑制细菌和真菌的生长；如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐。 【详解】A、青霉素抑制细菌细胞壁合成，而真菌（如酵母菌、霉菌）细胞壁成分为几丁质，不受影响，故可用含青霉素的培养基选择培养真菌，A正确； B、固氮菌能利用空气中的N₂合成自身所需氮源，但培养基中仍需提供碳源，因为其代谢类型为异养型而非自养型，B错误； C、大多数微生物是异养型的，能利用葡萄糖，而尿素分解需脲酶催化，只有能够合成脲酶的微生物才能分解尿素利用尿素作为氮源，据此可将分解尿素的微生物选择出来，C正确； D、伊红-亚甲蓝琼脂培养基可鉴定大肠杆菌，因为大肠杆菌的代谢产物可与染料结合呈紫色，据此可鉴别大肠杆菌，D正确。 故选B。 5. 我国科学家从北极分离、鉴定出了一种耐冷细菌，过程如下：①接种在人造海水中，15℃条件下振荡培养3h；②梯度稀释后将样品涂布在TYS培养基中，15℃条件下培养7d；③挑取生长菌落，进行划线，15℃条件下培养；④选择不同形态的菌落进行培养、鉴定和保藏。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①中的振荡培养可以提高培养液中的溶氧量 B. 过程②③使用的接种器具均需灼烧并冷却后接种 C. 过程②中的TYS培养基灭菌前需将pH调至酸性 D. 涂布后再次划线培养的目的是进一步纯化所得菌种 【答案】C 【解析】 【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐；在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。 【详解】A、过程①中的振荡培养，能使人造海水与氧气充分接触，提高溶解氧的供应量，A正确； B、过程②③使用的接种器具均需灼烧，是防止杂菌污染，冷却后操作是避免接种器具因温度太高杀死菌种，B正确； C、过程②中的TYS培养基灭菌前需将pH调至酸性，会破坏该细菌的细胞结构，应将pH调至中性或弱碱性，C错误； D、涂布平板法获得单菌落，但为避免杂菌污染，保证培养物的纯度，会在涂布后再次划线培养，以保证可以进一步得到纯化的菌种，D正确。 故选C。 6. 科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素（C22H23ClN2O8）能力强的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是（ ） A. 以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基 B. 逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株 C. 配制选择培养基时，需确保pH满足实验要求 D. 用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面 【答案】D 【解析】 【分析】在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 【详解】A、以金霉素为唯一碳源的选择培养基，仅允许能利用金霉素的微生物生长（其他无法利用金霉素的微生物被抑制），符合选择培养基的设计原理，A正确； B、逐步提高金霉素浓度可模拟环境胁迫，筛选出耐受性更强的菌株（类似“驯化”过程），B正确； C、培养基的pH需根据目标微生物的生长需求调整（如细菌通常中性偏碱，真菌偏酸性），是配制培养基的基本要求，C正确； D、稀释涂布平板法需用​​涂布器​​将菌液均匀涂布在培养基表面，而接种环用于平板划线法（分离单菌落）。用接种环涂布无法保证菌液均匀，D错误。 故选D。 7. 如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作流程，下列说法正确的是（　　） A. 实验中选择培养基含有无机盐、葡萄糖、尿素、蛋白胨、琼脂、水等物质 B. 培养基用高压蒸汽灭菌后，将pH调至中性或弱碱性 C. 平均每克土壤中分解尿素的细菌数约为个 D. 为判断培养基的选择作用，需设置未接种的培养基作对照 【答案】C 【解析】 【详解】A、培养基的营养成分应该包括碳源、氮源、水和无机盐等，实验目的是土壤中分解尿素的细菌的分离与计数，应该以尿素为唯一氮源，不应该含有其他氮源（蛋白胨），A错误； B、将培养基的pH调至中性或弱碱性后，再高压蒸汽灭菌，B错误； C、将10g土壤先稀释10倍，再进行梯度稀释10000倍，然后取0.1mL进行涂布平板，若步骤④平板上统计的菌落数平均为（212+230+218）÷3=220个，则每克土壤中分解尿素的细菌约为220÷0.1×10×10000=2.2×108个，C正确； D、为判断培养基的选择作用，需设置接种的完全培养基作对照，菌落数明显小于完全培养基上的菌落数，说明选择培养基起到了选择作用，D错误。 故选C。 8. 自然界中某些微生物可通过分泌多糖和蛋白质吸附水体中的微小颗粒并使其沉淀。如图表示从淤泥样品中筛选高效沉降微小颗粒的微生物的操作步骤。下列叙述正确的是（　　） A. 步骤III使用平板划线法接种需灼烧接种环5次 B. 平板培养皿1中需要以蛋白质为唯一氮源来进行筛选 C. 步骤I-V中需进行微生物培养的步骤是II、III、IV、V D. 设置步骤III的目的是获得单菌落 【答案】D 【解析】 【详解】A、平板划线法分离微生物中，每次划线前和划线后都需要灼烧接种环，步骤Ⅲ平板培养皿2中一共划线了5次，故一共需要灼烧接种环6次，A错误； B、步骤Ⅱ和Ⅲ的目的都是对菌种进行分离、纯化，故培养皿1和2使用通用培养基即可，此时还不需要使用选择培养基，B错误； C、根据B项分析可知，步骤Ⅱ、Ⅲ是对菌种进行分离、纯化，C错误； D、步骤Ⅲ是从涂布平板的培养基上挑取单菌落，进一步通过平板划线法进行分离、纯化，以获得单一菌落，D正确。 故选D。 9. 中医常说“百病从肝治，养肝如养命”。近年来，我国酒精性肝病的发病率逐年提升，危害仅次于病毒性肝炎。研究发现，雪莲次生代谢物对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用，利用植物细胞培养技术生产雪莲次生代谢物的大致流程如下。下列叙述错误的是（ ） A. 切取雪莲茎尖进行组织培养可以获得脱毒苗 B. 从雪莲中提取的次生代谢物是雪莲生长所必需的 C. 经射线处理①后可能获得雪莲培养物高产的细胞 D. 培养细胞获得次生代谢物时使用的是液体培养基 【答案】B 【解析】 【详解】A、茎尖中带毒少或无毒，因而切取一定大小的茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，A正确； B、次生代谢物是植物在长期进化中产生的，并非植物生长发育所必需的物质，仅对植物适应环境等有辅助作用，B错误； C、可用射线处理①愈伤组织，促使其发生突变，从中筛选雪莲培养物高产的细胞，C正确； D、细胞产物的工业化生产是从人工培养的愈伤组织细胞中提取某种成分，该过程使用的是液体培养基，D正确。 故选B。 10. 科研人员在植物组织培养的不同阶段施用化学诱变剂EMS，以获得性状优良的突变株，过程如图所示。下列说法正确的是（　　） A. 过程①需要对外植体进行灭菌处理后再接种 B. 过程②需要在培养基中添加有机碳源，这是EMS处理的最佳时期 C. 过程③④应持续处于无菌且无光的环境中，以诱导愈伤组织的再分化 D. 在不同阶段施用EMS处理的目的是提高突变率，有利于定向获得所需突变体 【答案】B 【解析】 【详解】A、过程①是获取外植体并接种，应该对外植体进行消毒处理，而不是灭菌，因为外植体本身是有活性的细胞组织，灭菌会杀死外植体，A错误； B、过程②是愈伤组织的培养阶段，愈伤组织细胞不能进行光合作用，需要在培养基中添加有机碳源；由于愈伤组织细胞分裂旺盛，DNA复制时容易发生基因突变，所以此时期是EMS处理的最佳时期，B正确； C、过程③④是愈伤组织再分化形成胚状体和幼苗的过程，需要光照，因为形成幼苗后要进行光合作用，C错误； D、EMS等化学诱变剂处理能提高突变率，但是基因突变具有不定向性，不能定向获得所需突变体，D错误。 故选B。 11. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄（二倍体）和马铃薯（二倍体）的原生质体质膜上的蛋白质，下列说法错误的是（　　） A. 过程①常用的酶是纤维素酶和果胶酶 B. 原生质体融合成功的标志是质膜表面既有红色荧光又有绿色荧光 C. 实验中需要对培养基、所用器械进行灭菌处理 D. 过程④培养得到的植物体理论上是可育的 【答案】B 【解析】 【分析】分析题图：图示为植物体细胞杂交过程，其中①是去除细胞壁获得原生质体的过程，该过程常用酶解法；②是再生形成新的细胞壁的过程；③是脱分化过程；④是再分化过程。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，在植物体细胞杂交过程中，去除细胞壁获得原生质体常用纤维素酶和果胶酶，A正确； B、原生质体融合成功的标志是再生出新的细胞壁，而不是质膜表面既有红色荧光又有绿色荧光，B错误； C、在植物组织培养等实验中，为了防止杂菌污染，需要对培养基、所用器械进行灭菌处理，C正确； D、番茄和马铃薯都是二倍体，经过体细胞杂交得到的杂种植株是四倍体，理论上含有同源染色体，是可育的，D正确。 故选B。 12. 在蓝莓组织培养过程中，外植体切口处细胞被破坏，多酚类化合物被氧化成褐色醌类化合物，这一过程称为褐变。褐变会引起细胞生长停滞甚至死亡，导致蓝莓组织培养失败。下列说法正确的是（ ） A. 宜选用蓝莓成熟叶片为材料制备外植体并用酒精消毒30s B. 增加培养基的更换频率或在培养基中添加适量的抗氧化剂可提高组培的成功率 C. 脱分化过程中光照有利于愈伤组织的形成，再分化过程中光照可诱导植物形态建成 D. 组培后获得的试管苗需移栽到含蔗糖和多种植物激素的基质上以适应外界环境 【答案】B 【解析】 【分析】蓝莓组织培养过程中，外植体切口处细胞被破坏，多酚类化合物被氧化成褐色醌类化合物，这一过程称为褐变。减少褐变的措施有：减少氧化剂的浓度，如勤换培养基，或添加抗氧化剂。在植物组织培养的过程中，一般选用代谢旺盛、再生能力强的器官或组织为材料制备外植体。 【详解】A、蓝莓成熟叶片细胞分化程度高，一般选用代谢旺盛、再生能力强的器官或组织为材料制备外植体，A错误； B、增加培养基更换频率可及时移除积累的褐化产物，减轻毒性；添加抗氧化剂抑制多酚氧化酶活性，减少褐变，有利于提高组培的成功率，B正确； C、脱分化过程需要避光，C错误； D、试管苗移栽时需过渡到不含蔗糖和激素的基质（避免依赖人工培养基），逐步适应自然环境，D错误。 故选B。 13. 细胞划痕实验(WHA)可用于研究癌细胞的迁移能力。在癌细胞长成单层状态时，人为制造一个空白区域(划痕)，然后观察、测量划痕边缘的细胞进入空白区域的速率，以此评估细胞的迁移能力。为探究姜黄素对癌细胞迁移的影响，研究人员进行了划痕实验，结果如图。下列叙述错误的是（　　） A. 细胞培养的气体环境为95%空气和5% B. 细胞贴壁生长时发生的接触抑制现象体现了细胞膜进行细胞间信息交流的功能 C. 姜黄素可通过降低癌细胞之间的黏着性来提高其迁移能力 D. 通过观察基因敲除或过表达癌细胞的迁移能力，可研究特定基因在细胞迁移中的作用 【答案】C 【解析】 【详解】A、动物细胞培养的气体环境通常为95% 空气（提供氧气用于细胞呼吸）和5% CO2（维持培养液pH），A正确； B、接触抑制是细胞相互接触时停止增殖的现象，体现了细胞膜 “进行细胞间信息交流” 的功能（细胞通过细胞膜传递信号），B正确； C、从题图曲线可知，姜黄素处理组的细胞迁移速率低于对照组，说明姜黄素降低了细胞的迁移能力，而非提高；且细胞迁移能力与细胞间黏着性负相关，若黏着性提高，迁移能力会下降，C错误； D、通过基因敲除（抑制基因表达）或过表达特定基因，观察细胞迁移能力的变化，是研究基因在细胞迁移中作用的常用方法，D正确。 故选C。 14. 特定信号分子与T细胞表面的CTLA-4和PD-1结合后，能引起T细胞凋亡，从而使机体失去清除癌细胞的能力。科研人员利用两种不同的杂交瘤细胞融合得到了能产生抗CTLA-4和PD-1的双特异性抗体的双杂交瘤细胞。下列说法正确的是（　　） A. 向小鼠体内注射CTLA-4和PD-1，可获得能同时产生两种抗体的B细胞 B. 需用特定的选择培养基筛选异种融合的双杂交瘤细胞 C. 双杂交瘤细胞需要用CTLA-4和PD-1刺激，才能产生双特异性抗体 D. 筛选能产生双特异性抗体的双杂交瘤细胞时，需使用CTLA-4和PD-1 【答案】D 【解析】 【详解】A、向小鼠体内同时注射两种抗原，会激活不同的B细胞分别产生针对两种抗原的抗体，但单个B细胞只能产生单一特异性抗体，A错误； B、选择培养基（如HAT培养基）用于筛选杂交瘤细胞（B细胞与骨髓瘤细胞融合），但无法直接筛选异种融合的双杂交瘤细胞（两种杂交瘤细胞的融合），需通过抗体检测进行克隆化培养和抗体检测才能获得双杂交瘤细胞，B错误； C、杂交瘤细胞已具备持续分泌抗体的能力，无需再次抗原刺激，C错误； D、筛选能产双特异性抗体的双杂交瘤细胞时，需用CTLA-4和PD-1，并通过抗原-抗体杂交检测，D正确。 故选D。 15. 种间体细胞核移植（iSCNT）将供体动物体细胞与来自不同种、科、目或纲的家畜（驯养动物）的去核卵母细胞融合并激活，以获得较多的重构胚，进而获得动物个体，是体细胞核移植（SCNT）中极具潜力的研究方向之一。下列叙述正确的是（ ） A. 同一动物体经iSCNT技术获得的多个重构胚中，遗传物质可能不完全相同 B. iSCNT技术的原理是动物细胞核具有全能性，操作过程中可用Ca2+激活重构胚 C. iSCNT技术必须将供体细胞的细胞核取出，然后注入去核的卵母细胞 D. 若从动物体内采集到的体细胞数目较少，可用添加动物血清的固体培养基进行培养 【答案】A 【解析】 【分析】1、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新的胚胎，继而发育成动物个体的技术，其原理是动物细胞核具有全能性。 2、重构胚是指人工重新构建的胚胎，具有发育成为完整个体的能力。可以用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。 【详解】A、同一动物体经iSCNT技术获得多个重构胚时，由于供体细胞的遗传物质相同，但去核卵母细胞的细胞质中也含有少量遗传物质，而不同的去核卵母细胞其细胞质遗传物质可能存在差异，所以多个重构胚的遗传物质可能不完全相同，A正确； B、种间体细胞核移植（iSCNT）技术的原理是动物细胞核具有全能性，操作过程中可用Ca2+载体激活重构胚，B错误； C、在iSCNT技术中，一般采用显微注射法将供体细胞直接注入去核的卵母细胞，而不是先将供体细胞的细胞核取出再注入，这样可以减少对细胞核的损伤，C错误； D、动物体细胞培养时，若细胞数目较少，应用添加动物血清的液体培养基进行培养，而不是固体培养基，因为动物细胞在液体环境中才能更好地生长和代谢，D错误。 故选A。 16. 为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，下列说法错误的是（　　） A. 试管牛和克隆牛都是通过无性繁殖获得的 B. 促进B牛多排卵的激素可能是促性腺激素 C. 产生F牛的理论依据是动物细胞核的全能性 D. E牛和F牛的培育过程中均用到动物细胞培养和胚胎移植技术 【答案】A 【解析】 【分析】分析题图：图示为加快优良种牛繁殖速度的两种方法，方法Ⅰ采用了体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术，产生的试管牛E属于有性生殖的产物；方法Ⅱ采用了体细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植技术，产生的克隆牛F属于无性生殖的产物。 【详解】A、试管牛是体外受精而来，属于有性生殖，A错误； B、用来促进B牛多排卵的激素可能是垂体分泌的促性腺激素，B正确； C、F牛是克隆牛，其产生主要采用了核移植技术，该技术的理论基础是细胞核的全能性，C正确； D、方法Ⅰ采用了体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术，产生的试管牛E属于有性生殖的产物；方法Ⅱ采用了体细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植技术，产生的克隆牛F属于无性生殖的产物，即E牛和F牛的培育过程中均用到动物细胞培养和胚胎移植技术，D正确。 故选A。 17. 我国科学家成功培育了体细胞克隆猴。在处理重构胚时，将组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA、组蛋白去甲基化酶KDM4D的mRNA 注入了重构胚，促进囊胚的发育，提高代孕母猴的妊娠率。下列叙述错误的是（　　） A. 除显微操作去核外，还可采用梯度离心、紫外线照射、化学物质处理法在没有穿透卵母细胞透明带的情况下使其中的DNA 变性 B. TSA 能够抑制组蛋白脱乙酰酶的作用从而降低组蛋白的乙酰化水平 C. 组蛋白去甲基化酶KDM4D能够降低组蛋白的甲基化水平 D. 培育克隆猴对研究人类疾病致病机制和研发新药有重要意义 【答案】B 【解析】 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】A、在核移植过程中，去除卵母细胞的细胞核时，除显微操作去核外，还可采用梯度离心、紫外线照射、化学物质处理等方法，这些方法可以在不穿透卵母细胞透明带的情况下使其中的DNA 变性，A正确； B、组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA可抑制组蛋白脱乙酰酶的活性，从而抑制组蛋白脱乙酰作用，提高组蛋白的乙酰化水平，B错误； C、组蛋白去甲基化酶KDM4D可促进组蛋白去甲基化，从而能够降低组蛋白的甲基化水平，C正确； D、猴属于灵长类动物，与人更接近，培育遗传背景相同的克隆猴对人类疾病致病机制的研究、新药研发等具有更重要的意义，D正确。 故选B。 18. 最新调查结果显示，我国野生大熊猫种群数量约1864只。由于环境变化和人类活动的影响，现有野生大熊猫栖息地碎片化，我国采取了多种措施对大熊猫实施保护。科研人员设计如图所示的繁殖过程繁育、保护大熊猫。下列相关说法错误的是（ ） A. 激素处理的目的是使供体超数排卵 B. 克隆熊猫是无性繁殖，试管熊猫是有性繁殖 C. 必须将M中细胞的细胞核取出后注入去核的卵细胞中完成核移植 D. 胚胎移植前可通过取样滋养层细胞来鉴定性别 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。 【详解】A、激素处理中的激素是外源促性腺激素，其作用是使供体超数排卵，A正确； B、克隆熊猫没有经过两性生殖细胞的融合，属于无性繁殖，试管熊猫经过了两性生殖细胞的融合，是有性繁殖，B正确； C、在核移植的过程中，不一定必须要将M中细胞的细胞核取出后注入去核的卵细胞中完成核移植，也可以将整个供体细胞注入去核的卵细胞中，以保证供体核不被破坏，C错误； D、胚胎移植前可通过取样滋养层细胞来鉴定性别，D正确。 故选C。 19. 培育肉是利用动物体内分离的成肌细胞或全能干细胞，采用动物细胞培养技术培养出类似于动物肌肉的肉丝，同时添加了人体所需的元素如铁、钙等，使之营养更加丰富。下列相关叙述正确的是（ ） A. 用胃蛋白酶处理肌肉组织，可以获得分裂能力强的肌肉母细胞 B. 生物反应器内应控制温度适宜，并充入一定量的O2，保证培养液pH相对稳定 C. 培养液中的支架提供了更大的细胞附着面积，有利于细胞贴壁生长 D. 人造牛肉的培养有利于牛肉的工厂化生产，培养液不需要更换 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块剪碎组织用胰蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液，转入培养液中(原代培养)放入二氧化碳培养箱培养，贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液转入培养液(传代培养)，放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理肌肉组织，可以获得分裂能力强的肌肉母细胞，胃蛋白酶的最适pH为2.0左右，而动物细胞培养的pH为7.2~7.4，此时胃蛋白酶失活，故不能用胃蛋白酶处理，A错误； B、生物反应器内应控制温度适宜（36.5±0.5℃），并充入一定量的CO2，以保证培养液pH相对稳定，B错误； C、培养液中的支架为细胞提供了更大的附着面积，有利于细胞贴壁生长，C正确； D、理论上，仅来自一只动物的干细胞，可制成的肉品数量非常多，有利于牛肉的工厂化生产，培养液需要定期更换，D错误。 故选C。 20. 治疗性克隆有望解决供体器官短缺和免疫排斥等问题。下图表示治疗性克隆的过程，下列说法错误的是（ ） A. 细胞A常采用去核卵母细胞作为移植的受体细胞 B. 通过电刺激等方法激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育 C. 胚胎干细胞分化为多种体细胞是基因选择性表达的结果 D. 该治疗性过程应用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图：图示表示治疗性克隆的过程，该过程利用了动物细胞核移植技术，该技术体现了动物细胞核的全能性；图中①表示细胞核移植，②过程表示胚胎干细胞的分裂和分化，由胚胎干细胞发育成组织。 【详解】A、细胞A常采用去核卵母细胞作为移植的受体细胞，因为去核卵母细胞有激活动物细胞全能性的物质，且细胞体积大，易操作，所含营养物质丰富，A正确； B、激活重构胚的方法有电刺激、钙离子载体等，B正确； C、细胞分化的实质是基因选择性表达的结果，因此，胚胎干细胞分化为多种体细胞是基因选择性表达的结果，C正确； D、①表示核移植，②表示胚胎干细胞的增殖分化，该治疗性过程应用了核移植、动物细胞培养技术，并未涉及胚胎移植技术，D错误。 故选D。 21. 体外培养发现绝大多数的克隆胚胎在囊胚阶段出现发育阻滞。Wnt信号通路抑制剂处理克隆囊胚后，供体的核移植胚胎出生率可大幅提高。下列叙述正确的是（　　） A. Wnt信号通路持续异常激活可促进克隆胚胎发育过程 B. 早期胚胎发育至原肠胚阶段，胚胎分化出现内细胞团和滋养层细胞 C. 动物细胞培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等 D. 动物克隆需用到动物细胞培养、动物细胞核移植、体外受精和胚胎移植等技术 【答案】C 【解析】 【详解】A、Wnt信号通路持续异常激活可能导致克隆胚胎在囊胚阶段发育阻滞，抑制剂处理提高出生率说明异常激活阻碍发育，而非促进，A错误； B、内细胞团和滋养层细胞是在囊胚阶段分化形成的，原肠胚阶段的主要特征是形成外胚层、中胚层和内胚层三个胚层，B错误； C、动物细胞培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等，由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，C正确； D、动物克隆的核心技术是动物细胞核移植，辅助技术包括动物细胞培养和胚胎移植，但不需要体外受精，体外受精是有性生殖相关的技术，克隆属于无性生殖，D错误。 故选C。 22. 科研人员从小鼠8细胞时期的胚胎中制备了一种干细胞系，称为潜能干细胞（EPSC）。将EPSC转变为上胚层样细胞和下胚层样细胞，再逐步分化形成类胚胎结构，高度还原了胚胎的发育过程。下列说法错误的是（ ） A. 与多能干细胞相比，EPSC的自我更新能力和分化潜能更大 B. EPSC培养需要定期更换培养液，清除代谢废物 C. EPSC转变出的上胚层和下胚层，类似于囊胚期的内、外胚层 D. EPSC产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用 【答案】C 【解析】 【分析】胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。胚胎干细胞的主要用途是：①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律。②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料。ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段。③可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合征、糖尿病、老年痴呆症、肝衰竭、新衰竭、成骨不良。④培育各种组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。 【详解】A、与多能干细胞相比只能分化为特定的几种细胞，EPSC是从小鼠8细胞时期的胚胎中制备了一种干细胞系，分化程度低，与多能干细胞相比，EPSC的自我更新能力和分化潜能更大，A正确； B、动物细胞培养过程的代谢废物会毒害细胞，故培养EPSC需要定期更换培养液，清除代谢废物，B正确； C、EPSC转变出的上胚层和下胚层，类似于原肠胚期的内、外胚层，C错误； D、EPSC能分化产生特定细胞，特定细胞可以在新药的测试中发挥重要作用，D正确。 故选C。 23. 关于“DNA的粗提取与鉴定”及“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验操作。下列叙述正确的是（　　） A. “DNA的粗提取与鉴定”中，用95%的酒精预冷后可以更好地溶解DNA，以利于获得DNA B. “DNA的粗提取与鉴定”中，提取DNA时，将研磨液加入切碎的洋葱，充分研磨后过滤，取上清液 C. “DNA片段的扩增及电泳鉴定”中，电泳一段时间后，离加样孔越近的DNA分子越小 D. “DNA片段的扩增及电泳鉴定”中，可通过观察指示剂在凝胶中迁移的位置来确定DNA分子的具体位置 【答案】B 【解析】 【详解】A、DNA不溶于酒精，用95%的酒精预冷后可以更好地析出DNA，A错误； B、“DNA的粗提取与鉴定”中，提取DNA时，将研磨液加入切碎的洋葱，充分研磨后过滤，收集上清液，因为DNA主要存在上清液中，B正确； C、“DNA片段的扩增及电泳鉴定”中，电泳一段时间后，离加样孔越近的DNA分子越大，离加样孔越远的DNA分子越小，C错误； D、“DNA片段的扩增及电泳鉴定”中，可通过观察指示剂在凝胶中迁移的位置来判断何时停止电泳，待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，停止电泳，DNA的具体位置需要通过染色与DNA结合后并在紫外灯下观察才能确定，D错误。 故选B。 24. 通过引物设计运用PCR技术可以实现目的基因的定点突变如图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2的5'端分别设计增加限制性内切酶a和限制性内切酶b的识别位点。有关叙述正确的是（　　） A. 两种引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因的定向插入 B. 在PCR反应体系中还需要加入4种游离核糖核苷酸、解旋酶、Taq酶、ATP等 C. 第2轮PCR,引物1与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因 D. 在第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/8 【答案】A 【解析】 【详解】A、引物中设计两种限制酶识别位点，可以配合载体的限制酶识别位点，帮助目的基因定向定点插入运载体，避免发生自身环化，A正确； B、在PCR反应体系中还需要加入4种游离脱氧核苷酸、Taq酶等，但不需要加入解旋酶和核糖核苷酸，B错误； C、在第3轮PCR中，引物1能与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因，C错误； D、在第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA有2个，总DNA分子共8个，所以比例为1/4，D错误。 故选A。 25. 利用生物技术培育新品种、制备生物产品时都需要进行筛选或检测。下列说法错误的是（ ） A. 单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞 B. 用 96 孔板筛选所需杂交瘤细胞时，每个孔中尽量只接种一个细胞 C. 为了快速繁殖无子西瓜，需筛选出特定染色体组数的体细胞才能进行组织培养 D. 用植物体细胞杂交培育作物新品种时，需对杂种细胞和杂种植株进行筛选 【答案】C 【解析】 【详解】A、单克隆抗体制备过程中，细胞融合后第一次使用选择培养基筛选，目的是去除未融合的亲本细胞和同种细胞融合的细胞，筛选出杂交瘤细胞，A正确； B、用96孔板筛选杂交瘤细胞时，进行的是克隆化培养，每个孔尽量只接种一个杂交瘤细胞，可保证获得的细胞群来自同一杂交瘤细胞，分泌的抗体单一，B正确； C、无子西瓜为三倍体植株，其所有体细胞均含有3个染色体组，进行组织培养时直接取其体细胞即可，无需筛选特定染色体组数的体细胞，C错误； D、植物体细胞杂交过程中，细胞融合后会出现同种细胞融合的产物、异种细胞融合的产物（即所需杂种细胞），因此首先要筛选出杂种细胞；由杂种细胞培育得到的杂种植株不一定能表达所需优良性状，还需进一步筛选符合要求的杂种植株，D正确。 26. 甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质，将甜蛋白基因导入黄瓜可提高黄瓜甜味。下图表示甜蛋白基因和Ti质粒上限制酶酶切位点。下列说法错误的是（ ） A. 基因表达载体的构建是培育转基因黄瓜的核心工作 B. 为保证甜蛋白基因正确插入，可用限制酶Xba I和EcoR I切割目的基因及质粒 C. T - DNA的作用是携带甜蛋白基因进入黄瓜细胞并整合到其染色体DNA上 D. 为确定甜蛋白基因是否导入黄瓜细胞，可用PCR技术进行检测 【答案】B 【解析】 【分析】基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤。基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。选择合适的限制酶对目的基因和质粒进行切制的原则：不能破坏目的基因；不能破坏抗性基因(至少保留一个)；最好选择两种限制酶分别切制质粒和目的基因，防止目的基因和质粒反向连接，同时防止目的基因和质粒的自身环化。 【详解】A、基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，即基因表达载体的构建是培育转基因黄瓜的核心工作，A正确； B、目的基因内有BamH I识别序列，因此不能选择BamH I切目的基因，目的基因左侧只能选择限制酶Xba I切制。由目的基因的转录方向可以推测，目的基因右侧应选择靠近终止子的限制酶Hind Ⅲ，若用Xba I和EcoR I处理切制甜蛋白基因，则目的基因与质粒会发生反向连接，不能正常按转录方向转录，B错误； C、T - DNA是可以转移的DNA，其作用能将目的基因整合到受体细胞的染色体DNA上，故能携带甜蛋白基因进入黄瓜细胞并整合到其染色体DNA上，C正确； D、目的基因的检测可以采用PCR技术或核酸分子杂交；为确定甜蛋白基因是否导入黄瓜细胞，可用PCR技术进行检测，D正确。 故选B。 27. 如图为某动物细胞核基因局部示意图，已知限制酶EcoRV和BclI的识别序列和切割位点分别为5'—GAT↓ATC—3'和5'—T↓GATCA—3'。下列相关叙述错误的是（ ） A. 限制酶EcoRV和BclI切割的都为磷酸二酯键 B. 限制酶EcoRV切割该基因后形成的是黏性末端 C. 该动物细胞内复制该基因时需要解旋酶打开④氢键 D. T4DNA连接酶能将BclI切割后的两个片段连接起来 【答案】B 【解析】 【分析】限制酶：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端。 【详解】A、限制酶EcoRV和限制酶BclI切割的化学键都是磷酸二酯键，A正确； B、限制酶EcoRV切割该基因后形成的是平末端，B错误； C、该动物细胞内复制该基因时需要解旋酶将④氢键打开，C正确； D、T4DNA连接酶能连接互补的黏性末端和平末端，D正确。 故选B。 28. 在基因工程的PCR扩增及产物鉴定实验中，科学家需通过优化实验条件获得高特异性产物，并通过琼脂糖凝胶电泳验证结果（如图所示）。已知实验以质粒DNA为模板，目标产物为含EcoRⅠ酶切位点的500bp基因片段，下列叙述正确的是（ ） A. 引物设计时5′端可添加EcoRⅠ识别序列，且使3′端与模板完全互补 B. 当模板DNA和脱氧核苷酸存在时，TaqDNA聚合酶即可催化反应 C. 电泳时设置合适的电压和时间主要是防止大分子DNA片段跑出凝胶 D. 若标准样中c为750bp，则500bp目标产物应出现在b处 【答案】A 【解析】 【详解】A、引物在5′端添加EcoRⅠ识别序列（GAATTC）以便构建表达载体，3′端需与模板完全互补以确保延伸特异性，A正确； B、Taq DNA聚合酶的催化需要适宜条件，还需Mg2+激活，B错误； C、电泳时需设置合适的电压和电泳时间，主要目的是控制DNA片段的迁移距离，使目标产物位于凝胶可视范围内，防止小分子跑出而非大分子DNA片段跑出，C错误； D、在琼脂糖凝胶电泳中，DNA片段迁移速率与分子大小呈负相关，500bp产物应位于750bp条带下方，所以若c为750bp，则产物500bp应出现在d处，D错误。 故选A。 29. 图甲表示限制酶切割某双链DNA分子的图示，其中Y为某种限制酶，X表示切割的DNA长度，限制酶对应切点一定能切开。图乙表示图甲用不同酶切后的产物电泳分离结果。下列相关叙述正确的是（　　） A. 若经电泳分离后图乙没有相应电泳条带，则是PCR中延伸温度太高所致 B. 由图可知，限制酶A、限制酶B分别酶切产生的黏性末端的碱基能互补配对 C. 根据图乙中酶切电泳分离结果可推测，Y为限制酶B，X长度为4500bp D. 限制酶A酶切电泳结果与图乙中的①相符，限制酶B酶切电泳结果与图乙中的②相符 【答案】D 【解析】 【详解】A、若PCR反应没有扩增出任何产物，则可能的原因是复性、延伸温度太高，也可能是引物设计出现问题等，A错误； B、酶具有专一性，不同的限制酶识别并切割不同的核苷酸序列，故限制酶A与限制酶B产生的黏性末端不一定能互补配对，B错误； C、从图乙的A+B酶一组结果可知，限制酶A和B切完后总共有4个片段，长度分别为500、1500、3500、4500，可得出X代表的碱基对数为4500，①电泳结果6000、3500、500，②电泳结果8000、2000，可推测①是限制酶A，Y为限制酶A，C错误； D、根据以上结论，图甲中有两个限制酶A的酶切位点，切割完后得到三个长度的片段：3500、（4500+1500）、500，正好与图乙中的①结果相符，故推测图乙中①是限制酶A处理得到的酶切产物，②是限制酶B酶切电泳结果，D正确。 故选D。 30. 戊型肝炎病毒是一种RNA病毒，ORF2基因编码的结构蛋白（pORF2）位于病毒表面，构成病毒的衣壳。我国科研人员利用基因工程技术，在大肠杆菌中表达pORF2，制备戊型肝炎疫苗，过程如图。下列关于该疫苗的叙述正确的是（ ） A. 过程①需要的酶是RNA聚合酶，原料是A、U、G、C B. 重组基因表达载体上的启动子需来源于戊型肝炎病毒 C. 过程⑤需要用聚乙二醇处理大肠杆菌使其处于感受态 D. 过程⑥大量制备pORF2蛋白前应做相应的检测与鉴定 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、戊型肝炎病毒是一种RNA病毒，过程①是以病毒RNA为模板合成DNA，获取目的基因的过程，需要的酶是逆转录酶，原料是四种脱氧核苷酸，A错误； B、启动子是一段有特殊结构的DNA片段，其作用是供RNA聚合酶的识别结合以驱动目的基因的转录，启动子具有物种或组织特异性，构建在大肠杆菌细胞内特异表达pORF2蛋白的载体时，需要选择大肠杆菌细胞的启动子，而不能选择其他物种和组织细胞的启动子，B错误； C、将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法，需要用Ca2+处理大肠杆菌，增大大肠杆菌细胞壁的透过性，使其处于感受态，C错误； D、过程⑥大量制备pORF2蛋白前应对受体大肠杆菌进行目的基因的检测与鉴定，筛选出能表达pORF2蛋白的大肠杆菌进行培养，大量制备pORF2蛋白，D正确。 【点睛】 二、不定项选择题：本题共5个小题，每小题3分，共15分，少选得1分，错选不得分。 31. 工业上常用谷氨酸棒状杆菌作为生产谷氨酸的菌种，如图1是工业生产流程图，图2是菌种数量和谷氨酸产量随生物素浓度的变化过程。相关叙述正确的是（ ） A. 可通过人工诱变、基因工程、自然界直接筛选等方式获得高产谷氨酸菌种 B. 菌种扩大培养时最好在生物素浓度为a的条件下进行 C. 发酵过程中pH需一直保持酸性，利于获得更多的谷氨酸 D. 在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法提取谷氨酸 【答案】A 【解析】 【详解】A、对菌种的选育可以从自然界中直接获取，也可以借助诱变育种和基因工程技术获得人们想要的菌种，只不过从自然界中直接筛选的概率较低，A正确； B、扩大培养的目的是获得大量菌体，应选择细菌数量最多的条件（生物素浓度更高的区间），而生物素浓度为 a 时谷氨酸产量较高，但细菌数量并非最高，B错误； C、发酵后期需调pH至酸性，使谷氨酸析出（图1中 “pH调至酸性，使谷氨酸晶体析出”），但发酵过程中在中性和弱碱性的条件下才会积累谷氨酸，C错误； D、谷氨酸是小分子有机物，发酵结束后可根据产物的性质适当的提取、分离和纯化来提取，D错误。 故选A。 32. 某团队利用植物体细胞杂交技术获得了三倍体无核柑橘，方法是：首先处理由二倍体柑橘的花粉离体培养得到的愈伤组织，获得原生质体；然后处理二倍体柑橘幼叶细胞获得原生质体；随后诱导两种原生质体融合，培养一段时间后检测再生愈伤组织细胞中的核DNA含量，结果如图所示（融合的原生质体仅发生两两融合）。下列说法错误的是（ ） A. 制备原生质体时需要用胰蛋白酶将植物组织分散成单个细胞 B. 诱导原生质体融合时可以在无菌水中采用PEG融合法或电融合法 C. 培养核DNA相对含量为75的细胞可获得三倍体无核柑橘 D. 核DNA相对含量为25、50的细胞来自未融合的原生质体 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、制备原生质体时需要用纤维素酶和果胶酶将植物细 胞的细胞壁分解获得原生质体，A错误; B、诱导原生质体融合时可以在一定浓度的溶液中（植 物细胞的等渗液或较高渗）采用PEG融合法或电融合 法，否则会导致原生质体吸水涨破，B错误； C、细胞中DNA含量为75，说明含有三个染色体组，应是花粉细胞和二倍体细胞融合形成的细胞，将该细胞进行培养可获得三倍体无核柑橘，C正确； D、由图分析可知，DNA相对含量为50的细胞，也可能是两个花粉细胞融合形成的细胞中的DNA含量，D错误。 故选ABD。 33. 小鼠细胞有两条合成DNA的途径。全合成途径是指由糖和氨基酸等小分子化合物合成核苷酸，进而合成DNA，氨基蝶呤（A）是该途径的拮抗剂；补救合成途径是指在次黄嘌呤（H）和胸腺嘧啶核苷（T）存在的情况下，经转化酶（HGPRT）和激酶（TK）两种酶的作用合成DNA。骨髓瘤细胞缺乏HGPRT和TK基因。基于以上原理，研究人员配制HAT培养基用于单克隆抗体制备过程中杂交瘤细胞的筛选。下列叙述正确的是（　　） A. HAT培养基中的成分应包括氨基蝶呤、次黄嘌呤、胸腺嘧啶核苷等 B. 在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡 C. 对经HAT培养基筛选得到的杂交瘤细胞进行细胞培养即可生产单克隆抗体 D. 若小鼠曾接触过多种抗原，并不会影响制备的单克隆抗体的纯度 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、HAT培养基为选择培养基，成分应包括氨基蝶呤、次黄嘌呤、胸腺嘧啶核苷等，从而用于杂交瘤细胞的筛选，A正确； B、未融合的亲本细胞（如未融合的骨髓瘤细胞或未融合的B淋巴细胞）因无法合成核酸而死亡；融合的具有同种核的细胞（如两个相同类型的细胞融合）因缺乏异种核的遗传物质互补性，也无法存活，B正确； C、对经HAT培养基筛选得到的杂交瘤细胞需要进行克隆化培养和抗体检测，抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞才可进行细胞培养生产单克隆抗体，C错误； D、单克隆抗体具有灵敏度高、特异性强的特点，小鼠曾接触过多种抗原不会影响单克隆抗体的纯度，D正确。 故选ABD。 34. Rag2基因缺陷导致大鼠无法产生B、T淋巴细胞。科研人员将正常大鼠的胚胎干细胞（ES细胞）注射到Rag2基因缺陷大鼠的桑葚胚中，使其产生具有正常ES细胞来源的淋巴细胞群的体细胞嵌合体，从而补充其缺失的淋巴细胞，其过程如图所示。下列分析正确的是（ ） A. 嵌合体大鼠产生的B、T细胞直接由ES细胞分化而来 B. 胚胎发育早期，会出现胚胎中细胞数目不断增加但胚胎总体积并不增加的现象 C. 注入桑葚胚的ES细胞在囊胚期主要存在于内细胞团 D. 该实验最终获得了嵌合体大鼠证明ES细胞具有全能性 【答案】BC 【解析】 【详解】A、嵌合体大鼠的 B、T 细胞并非直接由ES细胞分化而来而是ES细胞需先通过细胞增殖增加数量，再经过特定分化路径形成造血干细胞，最终由造血干细胞进一步分化为B淋巴细胞和T淋巴细胞，A错误； B、从受精卵开始的卵裂过程中，细胞进行有丝分裂，细胞数量持续增多，但分裂产生的子细胞体积逐渐变小，导致整个胚胎的总体积与受精卵相比基本不变，B正确； C、注入桑葚胚的ES细胞在囊胚期主要存在于内细胞团，内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，C正确； D、该实验获得的嵌合体大鼠是由大鼠胚胎发育而来，并不是ES细胞发育而来，不能体现其全能性，D错误。 故选BC。 35. 下表列出了几种限制酶的识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点，下列叙述错误的是（ ） 限制酶 BamHⅠ HindⅢ EcoRⅠ SmaⅠ 识别序列及切割位点 A. 一个图1所示的质粒分子经SmaI切割前后，分别含有0个和4个游离的磷酸基团 B. 若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越高 C. 用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，可以使用SmaⅠ切割 D. 使用EcoRⅠ限制酶同时处理质粒、外源DNA可防止质粒和外源DNA发生自身环化 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、质粒分子是环状的DNA分子，没有切割之前不含游离的磷酸基团，经SmaⅠ切割前后，形成2个黏性末端，含有2个游离的磷酸基团，A错误； B、C和G之间含有3个氢键，A和T之间含有2个氢键，所以C和G含量越多，DNA分子热稳定性越高；SmaⅠ酶的识别序列的C和G含量较高，所以对图中质粒进行改造时，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越高，B正确； C、因为质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因都含有SmaⅠ的切割位点，用SmaⅠ会破质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因，C错误； D、为防止酶切后单个含目的基因的DNA片段和质粒自身连接成环状，最好用BamHⅠ和HindⅢ同时切割质粒和外源DNA，不能使用EcoRⅠ，D错误。 故选ACD。 第II卷（共25分） 三、解答题 36. Ⅰ.我国科兴及北京生物两款新冠灭活疫苗均使用Vero细胞（非洲绿猴肾细胞的传代细胞系）进行病毒扩增培养（见下图）： （1）动物细胞工程常用的技术手段有多种，其中_________是其他动物细胞工程技术的基础。Vero细胞的培养应在培养箱中进行，箱内的气体环境条件为___________。 （2）Vero细胞的传代培养过程中需要使用______酶使细胞分散，并在合成培养基中加入______等天然成分。 （3）将已对新冠病毒发生免疫的B淋巴细胞和Vero细胞系获得杂交细胞，再经过______筛选、克隆化培养和______检测，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞，用以生产单克隆抗体。 II.为研究多种血糖调节因子的作用，我国科学家开发出胰岛素抵抗模型鼠。为扩增模型鼠数量，科学家通过诱导优良模型鼠体细胞转化获得iPS细胞，继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的克隆鼠，具体步骤如图所示。请回答下列问题： （4）图中黑鼠的体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的______过程类似。该过程结束后，细胞的全能性______（填“提高”或“降低”）。 （5）图中灰鼠形成的受精卵，经过一次有丝分裂后可得到双细胞胚。为获得更多的双细胞胚，可对灰鼠注射______激素，使其超数排卵。图中的重构胚在胚胎移植前需要对供体和受体进行同期发情处理，胚胎移植的实质是_________。 （6）进入代孕白鼠子宫内继续发育，X鼠的体色为______；上图中可以是雄鼠的有______（填图中相关鼠的名称）。 【答案】（1） ①. 动物细胞培养 ②. 95%空气和5%CO2混合气体 （2） ①. 胰蛋白酶、胶原蛋白酶 ②. 血清 （3） ①. （特定的）选择培养基 ②. 抗体 （4） ①. 脱分化 ②. 提高 （5） ①. 促性腺 ②. 早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 （6） ①. 黑色 ②. 黑鼠和X鼠 【解析】 【小问1详解】 动物细胞工程常用的技术包括动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。Vero细胞的培养应置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱进行培养。O2是细胞代谢所需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【小问2详解】 Vero细胞的传代培养过程中需要使用胰蛋白酶、胶原蛋白酶使细胞分散。将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。 【小问3详解】 将已对新冠病毒发生免疫的B淋巴细胞和Vero细胞系获得杂交细胞，再经过（特定的）选择培养基筛选出杂交瘤细胞，接着对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞，用以生产单克隆抗体。 【小问4详解】 黑鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的脱分化过程类似，是组织细胞恢复分裂分化能力的过程。iPS细胞与小鼠内细胞团一样，具有全能性，该过程结束后，细胞的全能性提高。 【小问5详解】 超数排卵是指应用外源促性腺激素，诱导卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵子。图中的重构胚在胚胎移植前需要对供体和受体进行同期发情处理，胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。 【小问6详解】 分析图中操作过程，内细胞团细胞被iPS细胞取代，最终形成的X鼠细胞核来源于黑鼠，其遗传特性与黑鼠相同。 克隆属于无性繁殖，iPS细胞来自黑鼠，所以X鼠的体色为黑色。图中提供胚胎的灰鼠和代孕白鼠都是雌鼠，可以是雄鼠的有黑鼠和X鼠。 37. 同源重组技术结合tet-sacB双重选择系统可对基因进行敲除与回补研究基因的功能。如图是科研人员利用该方法对大肠杆菌LacZ基因进行敲除与回补的相关过程，其中tet'是四环素抗性基因，sacB基因（2071bp）是蔗糖致死基因，LacZ基因表达产物能将无色化合物X-gal水解成蓝色化合物。回答下列问题。 （1）过程①PCR除需要加入模板DNA、dNTP、缓冲液、Mg2+、引物外，还需加入_______，其中引物的作用是__________。 （2）为保证sacB基因和质粒2定向连接，设计引物P1、P2时，需分别在引物_______端添加限制酶_________的识别序列；若sacB基因扩增5代，则需要引物P1_______个。 （3）过程③中，需先用Ca2+处理大肠杆菌细胞，使其处于一种__________的生理状态。筛选导入质粒3的大肠杆菌时需在培养基中添加________。 （4）如图是对质粒3转化菌落进行PCR验证时的产物电泳结果，根据已知Marker每个条带的位置和相应DNA片段长度可推测PCR产物的长度，因此可判断泳道_____对应的菌株可能转化成功。过程⑤PCR中设计引物P3、P4时，需在引物5'端分别添加_______基因两端的同源序列。 （5）过程⑦中，在含有四环素和X-gal的培养基中出现了_______色菌落，即为筛选出的敲除LacZ基因菌株。过程⑧通过同源重组技术结合tet'-sacB双重选择系统可对LacZ基因进行回补，筛选LacZ基因回补菌株时应在培养基中添加__________ 【答案】（1） ①. 耐高温的DNA聚合酶 ②. 使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 （2） ①. 5' ②. BamHI、EcoRI ③. 31 （3） ①. 能吸收周围环境中DNA分子 ②. 四环素 （4） ①. 4、5、7 ②. LacZ （5） ①. 白 ②. 蔗糖和X-gal 【解析】 【小问1详解】 PCR的条件包括：模板、dNTP、缓冲液、Mg2+、引物以及耐高温的DNA聚合酶，所以过程①PCR除需要加入模板DNA、dNTP、缓冲液、Mg2+、引物外，还需加入耐高温的DNA聚合酶，在PCR反应中，引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，从而引导DNA子链的合成。 【小问2详解】 Hind Ⅲ会破坏tetr基因，Xma Ⅰ会破坏复制原点，为保证sacB基因和质粒2定向连接，应用限制酶BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ切割目的基因和质粒，引物是根据目的基因两端的DNA序列设计的，因此设计引物P1、P2时，需在引物5'端添加限制酶BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ的识别序列，若sacB基因扩增5代，产生25个DNA，则需要引物P1的个数为：25-1=31。 【小问3详解】 过程③为将目的基因导入受体细胞，导入目的基因时，首先用Ca2+处理大肠杆菌使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。重组质粒的标记基因为tetr（四环素抗性基因），筛选导入质粒3的大肠杆菌时需在培养基中添加四环素。 【小问4详解】 sacB基因是目的基因，sacB基因中含有2071bp，4、5、7的电泳结果接近2071bp，说明4、5、7对应的菌株中含有目的基因，说明泳道4、5、7对应的菌株可能转化成功。引物是根据目的基因两端的DNA序列设计的，目的基因（tetr-sacB）两端为LacZ基因两端的同源序列，才能实现同源重组，因此需在引物5′端分别添加LacZ基因两端的同源序列。 【小问5详解】 LacZ基因表达产物能将无色化合物X-gal水解成蓝色化合物，过程⑦为筛选LacZ基因敲除菌株，因此，若LacZ基因被敲除，则在含有四环素和X-gal培养基中出现白色菌落。sacB基因是蔗糖致死基因，则添加蔗糖起到选择作用，LacZ基因表达产物能将X-gal水解成蓝色化合物，则添加X-gal起到筛选作用，所以在培养基中添加蔗糖和X-gal可筛选LacZ基因回补菌株。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 济南一中2024级高二4月学情检测生物试题 说明：本试题分为第Ⅰ卷和第Ⅱ卷两部分，第Ⅰ卷为第1页至第10页，共35题，第Ⅱ卷为第10页至第12页，共2题。请将答案按要求填写在答题纸相应位置，答在其它位置无效，考试结束后将答题卡上交。试题满分100分，考试时间90分钟。 第Ⅰ卷（共75分） 一、单项选择题：本题共30小题，每小题2分，共60分。 1. 下列关于传统发酵技术及其应用的说法正确的是（ ） A. 制作泡菜时亚硝酸盐的含量随着发酵时间的延长而不断升高 B. 制作果酒时需将新鲜水果用清水冲洗后灭菌 C. 发酵坛密封不严使酒变酸是因为乳酸含量增加 D. 制作腐乳利用了毛霉等产生的蛋白酶 2. 下列关于醋酸菌和乳酸菌的相关叙述，正确的是（ ） A. 适宜条件下，在醋酸菌与乳酸菌共存专用的培养基中添加乙醇，可筛选出醋酸菌 B. 若用于酿酒的葡萄果皮上有醋酸菌，酒酿好后可直接通入无菌空气制作葡萄醋 C. 家庭用乳酸菌和醋酸菌分别制作酸奶和果醋通常都是纯种发酵，属于传统发酵技术 D. 随着泡菜和果醋制作中发酵液pH逐渐降低，泡菜和果醋的口味、品质越来越好 3. 大豆发酵食品豆瓣酱是我国传统发酵美食，它能让麻婆豆腐热辣鲜香，也能让回锅肉滋味醇厚，好似舌尖上的时光胶囊，封存着先辈们代代相传的生活智慧。豆瓣酱的制作流程如下图所示，下列叙述错误的是（ ） A. 保温发酵过程中，酱豆中有机物的种类增加，有机物含量减少 B. 米曲霉发酵时需不断翻酱，由此推测米曲霉属于需氧型微生物 C. 米曲霉发酵过程中，添加面粉主要是为米曲霉的生长提供氮源 D. 后期发酵中乳酸菌产生乳酸，能抑制杂菌生长并赋予豆瓣酱独特酸味 4. 在微生物学中使用选择培养基让特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的过程称为选择培养。在选择培养基中添加一些特殊物质，则可配制成鉴别培养基。下列说法错误的是（ ） A. 分离酵母菌、霉菌等真菌时，可在培养基中加入青霉素 B. 固氮菌能在不加氮源的培养基中生长，说明固氮菌为自养型生物 C. 大多数微生物能利用葡萄糖，但只有能够合成脲酶的微生物才能分解尿素 D. 配制伊红-亚甲蓝琼脂培养基，可用来鉴别大肠杆菌 5. 我国科学家从北极分离、鉴定出了一种耐冷细菌，过程如下：①接种在人造海水中，15℃条件下振荡培养3h；②梯度稀释后将样品涂布在TYS培养基中，15℃条件下培养7d；③挑取生长菌落，进行划线，15℃条件下培养；④选择不同形态的菌落进行培养、鉴定和保藏。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①中的振荡培养可以提高培养液中的溶氧量 B. 过程②③使用的接种器具均需灼烧并冷却后接种 C. 过程②中的TYS培养基灭菌前需将pH调至酸性 D. 涂布后再次划线培养的目的是进一步纯化所得菌种 6. 科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素（C22H23ClN2O8）能力强的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是（ ） A. 以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基 B. 逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株 C. 配制选择培养基时，需确保pH满足实验要求 D. 用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面 7. 如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作流程，下列说法正确的是（　　） A. 实验中选择培养基含有无机盐、葡萄糖、尿素、蛋白胨、琼脂、水等物质 B. 培养基用高压蒸汽灭菌后，将pH调至中性或弱碱性 C. 平均每克土壤中分解尿素的细菌数约为个 D. 为判断培养基的选择作用，需设置未接种的培养基作对照 8. 自然界中某些微生物可通过分泌多糖和蛋白质吸附水体中的微小颗粒并使其沉淀。如图表示从淤泥样品中筛选高效沉降微小颗粒的微生物的操作步骤。下列叙述正确的是（　　） A. 步骤III使用平板划线法接种需灼烧接种环5次 B. 平板培养皿1中需要以蛋白质为唯一氮源来进行筛选 C. 步骤I-V中需进行微生物培养的步骤是II、III、IV、V D. 设置步骤III的目的是获得单菌落 9. 中医常说“百病从肝治，养肝如养命”。近年来，我国酒精性肝病的发病率逐年提升，危害仅次于病毒性肝炎。研究发现，雪莲次生代谢物对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用，利用植物细胞培养技术生产雪莲次生代谢物的大致流程如下。下列叙述错误的是（ ） A. 切取雪莲茎尖进行组织培养可以获得脱毒苗 B. 从雪莲中提取的次生代谢物是雪莲生长所必需的 C. 经射线处理①后可能获得雪莲培养物高产的细胞 D. 培养细胞获得次生代谢物时使用的是液体培养基 10. 科研人员在植物组织培养的不同阶段施用化学诱变剂EMS，以获得性状优良的突变株，过程如图所示。下列说法正确的是（　　） A. 过程①需要对外植体进行灭菌处理后再接种 B. 过程②需要在培养基中添加有机碳源，这是EMS处理的最佳时期 C. 过程③④应持续处于无菌且无光的环境中，以诱导愈伤组织的再分化 D. 在不同阶段施用EMS处理的目的是提高突变率，有利于定向获得所需突变体 11. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄（二倍体）和马铃薯（二倍体）的原生质体质膜上的蛋白质，下列说法错误的是（　　） A. 过程①常用的酶是纤维素酶和果胶酶 B. 原生质体融合成功的标志是质膜表面既有红色荧光又有绿色荧光 C. 实验中需要对培养基、所用器械进行灭菌处理 D. 过程④培养得到的植物体理论上是可育的 12. 在蓝莓组织培养过程中，外植体切口处细胞被破坏，多酚类化合物被氧化成褐色醌类化合物，这一过程称为褐变。褐变会引起细胞生长停滞甚至死亡，导致蓝莓组织培养失败。下列说法正确的是（ ） A. 宜选用蓝莓成熟叶片为材料制备外植体并用酒精消毒30s B. 增加培养基的更换频率或在培养基中添加适量的抗氧化剂可提高组培的成功率 C. 脱分化过程中光照有利于愈伤组织的形成，再分化过程中光照可诱导植物形态建成 D. 组培后获得的试管苗需移栽到含蔗糖和多种植物激素的基质上以适应外界环境 13. 细胞划痕实验(WHA)可用于研究癌细胞的迁移能力。在癌细胞长成单层状态时，人为制造一个空白区域(划痕)，然后观察、测量划痕边缘的细胞进入空白区域的速率，以此评估细胞的迁移能力。为探究姜黄素对癌细胞迁移的影响，研究人员进行了划痕实验，结果如图。下列叙述错误的是（　　） A. 细胞培养的气体环境为95%空气和5% B. 细胞贴壁生长时发生的接触抑制现象体现了细胞膜进行细胞间信息交流的功能 C. 姜黄素可通过降低癌细胞之间的黏着性来提高其迁移能力 D. 通过观察基因敲除或过表达癌细胞的迁移能力，可研究特定基因在细胞迁移中的作用 14. 特定信号分子与T细胞表面的CTLA-4和PD-1结合后，能引起T细胞凋亡，从而使机体失去清除癌细胞的能力。科研人员利用两种不同的杂交瘤细胞融合得到了能产生抗CTLA-4和PD-1的双特异性抗体的双杂交瘤细胞。下列说法正确的是（　　） A. 向小鼠体内注射CTLA-4和PD-1，可获得能同时产生两种抗体的B细胞 B. 需用特定的选择培养基筛选异种融合的双杂交瘤细胞 C. 双杂交瘤细胞需要用CTLA-4和PD-1刺激，才能产生双特异性抗体 D. 筛选能产生双特异性抗体的双杂交瘤细胞时，需使用CTLA-4和PD-1 15. 种间体细胞核移植（iSCNT）将供体动物体细胞与来自不同种、科、目或纲的家畜（驯养动物）的去核卵母细胞融合并激活，以获得较多的重构胚，进而获得动物个体，是体细胞核移植（SCNT）中极具潜力的研究方向之一。下列叙述正确的是（ ） A. 同一动物体经iSCNT技术获得的多个重构胚中，遗传物质可能不完全相同 B. iSCNT技术的原理是动物细胞核具有全能性，操作过程中可用Ca2+激活重构胚 C. iSCNT技术必须将供体细胞的细胞核取出，然后注入去核的卵母细胞 D. 若从动物体内采集到的体细胞数目较少，可用添加动物血清的固体培养基进行培养 16. 为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，下列说法错误的是（　　） A. 试管牛和克隆牛都是通过无性繁殖获得的 B. 促进B牛多排卵的激素可能是促性腺激素 C. 产生F牛的理论依据是动物细胞核的全能性 D. E牛和F牛的培育过程中均用到动物细胞培养和胚胎移植技术 17. 我国科学家成功培育了体细胞克隆猴。在处理重构胚时，将组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA、组蛋白去甲基化酶KDM4D的mRNA 注入了重构胚，促进囊胚的发育，提高代孕母猴的妊娠率。下列叙述错误的是（　　） A. 除显微操作去核外，还可采用梯度离心、紫外线照射、化学物质处理法在没有穿透卵母细胞透明带的情况下使其中的DNA 变性 B. TSA 能够抑制组蛋白脱乙酰酶的作用从而降低组蛋白的乙酰化水平 C. 组蛋白去甲基化酶KDM4D能够降低组蛋白的甲基化水平 D. 培育克隆猴对研究人类疾病致病机制和研发新药有重要意义 18. 最新调查结果显示，我国野生大熊猫种群数量约1864只。由于环境变化和人类活动的影响，现有野生大熊猫栖息地碎片化，我国采取了多种措施对大熊猫实施保护。科研人员设计如图所示的繁殖过程繁育、保护大熊猫。下列相关说法错误的是（ ） A. 激素处理的目的是使供体超数排卵 B. 克隆熊猫是无性繁殖，试管熊猫是有性繁殖 C. 必须将M中细胞的细胞核取出后注入去核的卵细胞中完成核移植 D. 胚胎移植前可通过取样滋养层细胞来鉴定性别 19. 培育肉是利用动物体内分离的成肌细胞或全能干细胞，采用动物细胞培养技术培养出类似于动物肌肉的肉丝，同时添加了人体所需的元素如铁、钙等，使之营养更加丰富。下列相关叙述正确的是（ ） A. 用胃蛋白酶处理肌肉组织，可以获得分裂能力强的肌肉母细胞 B. 生物反应器内应控制温度适宜，并充入一定量的O2，保证培养液pH相对稳定 C. 培养液中的支架提供了更大的细胞附着面积，有利于细胞贴壁生长 D. 人造牛肉的培养有利于牛肉的工厂化生产，培养液不需要更换 20. 治疗性克隆有望解决供体器官短缺和免疫排斥等问题。下图表示治疗性克隆的过程，下列说法错误的是（ ） A. 细胞A常采用去核卵母细胞作为移植的受体细胞 B. 通过电刺激等方法激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育 C. 胚胎干细胞分化为多种体细胞是基因选择性表达的结果 D. 该治疗性过程应用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术 21. 体外培养发现绝大多数的克隆胚胎在囊胚阶段出现发育阻滞。Wnt信号通路抑制剂处理克隆囊胚后，供体的核移植胚胎出生率可大幅提高。下列叙述正确的是（　　） A. Wnt信号通路持续异常激活可促进克隆胚胎发育过程 B. 早期胚胎发育至原肠胚阶段，胚胎分化出现内细胞团和滋养层细胞 C. 动物细胞培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等 D. 动物克隆需用到动物细胞培养、动物细胞核移植、体外受精和胚胎移植等技术 22. 科研人员从小鼠8细胞时期的胚胎中制备了一种干细胞系，称为潜能干细胞（EPSC）。将EPSC转变为上胚层样细胞和下胚层样细胞，再逐步分化形成类胚胎结构，高度还原了胚胎的发育过程。下列说法错误的是（ ） A. 与多能干细胞相比，EPSC的自我更新能力和分化潜能更大 B. EPSC培养需要定期更换培养液，清除代谢废物 C. EPSC转变出的上胚层和下胚层，类似于囊胚期的内、外胚层 D. EPSC产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用 23. 关于“DNA的粗提取与鉴定”及“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验操作。下列叙述正确的是（　　） A. “DNA的粗提取与鉴定”中，用95%的酒精预冷后可以更好地溶解DNA，以利于获得DNA B. “DNA的粗提取与鉴定”中，提取DNA时，将研磨液加入切碎的洋葱，充分研磨后过滤，取上清液 C. “DNA片段的扩增及电泳鉴定”中，电泳一段时间后，离加样孔越近的DNA分子越小 D. “DNA片段的扩增及电泳鉴定”中，可通过观察指示剂在凝胶中迁移的位置来确定DNA分子的具体位置 24. 通过引物设计运用PCR技术可以实现目的基因的定点突变如图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2的5'端分别设计增加限制性内切酶a和限制性内切酶b的识别位点。有关叙述正确的是（　　） A. 两种引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因的定向插入 B. 在PCR反应体系中还需要加入4种游离核糖核苷酸、解旋酶、Taq酶、ATP等 C. 第2轮PCR,引物1与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因 D. 在第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/8 25. 利用生物技术培育新品种、制备生物产品时都需要进行筛选或检测。下列说法错误的是（ ） A. 单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞 B. 用 96 孔板筛选所需杂交瘤细胞时，每个孔中尽量只接种一个细胞 C. 为了快速繁殖无子西瓜，需筛选出特定染色体组数的体细胞才能进行组织培养 D. 用植物体细胞杂交培育作物新品种时，需对杂种细胞和杂种植株进行筛选 26. 甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质，将甜蛋白基因导入黄瓜可提高黄瓜甜味。下图表示甜蛋白基因和Ti质粒上限制酶酶切位点。下列说法错误的是（ ） A. 基因表达载体的构建是培育转基因黄瓜的核心工作 B. 为保证甜蛋白基因正确插入，可用限制酶Xba I和EcoR I切割目的基因及质粒 C. T - DNA的作用是携带甜蛋白基因进入黄瓜细胞并整合到其染色体DNA上 D. 为确定甜蛋白基因是否导入黄瓜细胞，可用PCR技术进行检测 27. 如图为某动物细胞核基因局部示意图，已知限制酶EcoRV和BclI的识别序列和切割位点分别为5'—GAT↓ATC—3'和5'—T↓GATCA—3'。下列相关叙述错误的是（ ） A. 限制酶EcoRV和BclI切割的都为磷酸二酯键 B. 限制酶EcoRV切割该基因后形成的是黏性末端 C. 该动物细胞内复制该基因时需要解旋酶打开④氢键 D. T4DNA连接酶能将BclI切割后的两个片段连接起来 28. 在基因工程的PCR扩增及产物鉴定实验中，科学家需通过优化实验条件获得高特异性产物，并通过琼脂糖凝胶电泳验证结果（如图所示）。已知实验以质粒DNA为模板，目标产物为含EcoRⅠ酶切位点的500bp基因片段，下列叙述正确的是（ ） A. 引物设计时5′端可添加EcoRⅠ识别序列，且使3′端与模板完全互补 B. 当模板DNA和脱氧核苷酸存在时，TaqDNA聚合酶即可催化反应 C. 电泳时设置合适的电压和时间主要是防止大分子DNA片段跑出凝胶 D. 若标准样中c为750bp，则500bp目标产物应出现在b处 29. 图甲表示限制酶切割某双链DNA分子的图示，其中Y为某种限制酶，X表示切割的DNA长度，限制酶对应切点一定能切开。图乙表示图甲用不同酶切后的产物电泳分离结果。下列相关叙述正确的是（　　） A. 若经电泳分离后图乙没有相应电泳条带，则是PCR中延伸温度太高所致 B. 由图可知，限制酶A、限制酶B分别酶切产生的黏性末端的碱基能互补配对 C. 根据图乙中酶切电泳分离结果可推测，Y为限制酶B，X长度为4500bp D. 限制酶A酶切电泳结果与图乙中的①相符，限制酶B酶切电泳结果与图乙中的②相符 30. 戊型肝炎病毒是一种RNA病毒，ORF2基因编码的结构蛋白（pORF2）位于病毒表面，构成病毒的衣壳。我国科研人员利用基因工程技术，在大肠杆菌中表达pORF2，制备戊型肝炎疫苗，过程如图。下列关于该疫苗的叙述正确的是（ ） A. 过程①需要的酶是RNA聚合酶，原料是A、U、G、C B. 重组基因表达载体上的启动子需来源于戊型肝炎病毒 C. 过程⑤需要用聚乙二醇处理大肠杆菌使其处于感受态 D. 过程⑥大量制备pORF2蛋白前应做相应的检测与鉴定 二、不定项选择题：本题共5个小题，每小题3分，共15分，少选得1分，错选不得分。 31. 工业上常用谷氨酸棒状杆菌作为生产谷氨酸的菌种，如图1是工业生产流程图，图2是菌种数量和谷氨酸产量随生物素浓度的变化过程。相关叙述正确的是（ ） A. 可通过人工诱变、基因工程、自然界直接筛选等方式获得高产谷氨酸菌种 B. 菌种扩大培养时最好在生物素浓度为a的条件下进行 C. 发酵过程中pH需一直保持酸性，利于获得更多的谷氨酸 D. 在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法提取谷氨酸 32. 某团队利用植物体细胞杂交技术获得了三倍体无核柑橘，方法是：首先处理由二倍体柑橘的花粉离体培养得到的愈伤组织，获得原生质体；然后处理二倍体柑橘幼叶细胞获得原生质体；随后诱导两种原生质体融合，培养一段时间后检测再生愈伤组织细胞中的核DNA含量，结果如图所示（融合的原生质体仅发生两两融合）。下列说法错误的是（ ） A. 制备原生质体时需要用胰蛋白酶将植物组织分散成单个细胞 B. 诱导原生质体融合时可以在无菌水中采用PEG融合法或电融合法 C. 培养核DNA相对含量为75的细胞可获得三倍体无核柑橘 D. 核DNA相对含量为25、50的细胞来自未融合的原生质体 33. 小鼠细胞有两条合成DNA的途径。全合成途径是指由糖和氨基酸等小分子化合物合成核苷酸，进而合成DNA，氨基蝶呤（A）是该途径的拮抗剂；补救合成途径是指在次黄嘌呤（H）和胸腺嘧啶核苷（T）存在的情况下，经转化酶（HGPRT）和激酶（TK）两种酶的作用合成DNA。骨髓瘤细胞缺乏HGPRT和TK基因。基于以上原理，研究人员配制HAT培养基用于单克隆抗体制备过程中杂交瘤细胞的筛选。下列叙述正确的是（　　） A. HAT培养基中的成分应包括氨基蝶呤、次黄嘌呤、胸腺嘧啶核苷等 B. 在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡 C. 对经HAT培养基筛选得到的杂交瘤细胞进行细胞培养即可生产单克隆抗体 D. 若小鼠曾接触过多种抗原，并不会影响制备的单克隆抗体的纯度 34. Rag2基因缺陷导致大鼠无法产生B、T淋巴细胞。科研人员将正常大鼠的胚胎干细胞（ES细胞）注射到Rag2基因缺陷大鼠的桑葚胚中，使其产生具有正常ES细胞来源的淋巴细胞群的体细胞嵌合体，从而补充其缺失的淋巴细胞，其过程如图所示。下列分析正确的是（ ） A. 嵌合体大鼠产生的B、T细胞直接由ES细胞分化而来 B. 胚胎发育早期，会出现胚胎中细胞数目不断增加但胚胎总体积并不增加的现象 C. 注入桑葚胚的ES细胞在囊胚期主要存在于内细胞团 D. 该实验最终获得了嵌合体大鼠证明ES细胞具有全能性 35. 下表列出了几种限制酶的识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点，下列叙述错误的是（ ） 限制酶 BamHⅠ HindⅢ EcoRⅠ SmaⅠ 识别序列及切割位点 A. 一个图1所示的质粒分子经SmaI切割前后，分别含有0个和4个游离的磷酸基团 B. 若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越高 C. 用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，可以使用SmaⅠ切割 D. 使用EcoRⅠ限制酶同时处理质粒、外源DNA可防止质粒和外源DNA发生自身环化 第II卷（共25分） 三、解答题 36. Ⅰ.我国科兴及北京生物两款新冠灭活疫苗均使用Vero细胞（非洲绿猴肾细胞的传代细胞系）进行病毒扩增培养（见下图）： （1）动物细胞工程常用的技术手段有多种，其中_________是其他动物细胞工程技术的基础。Vero细胞的培养应在培养箱中进行，箱内的气体环境条件为___________。 （2）Vero细胞的传代培养过程中需要使用______酶使细胞分散，并在合成培养基中加入______等天然成分。 （3）将已对新冠病毒发生免疫的B淋巴细胞和Vero细胞系获得杂交细胞，再经过______筛选、克隆化培养和______检测，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞，用以生产单克隆抗体。 II.为研究多种血糖调节因子的作用，我国科学家开发出胰岛素抵抗模型鼠。为扩增模型鼠数量，科学家通过诱导优良模型鼠体细胞转化获得iPS细胞，继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的克隆鼠，具体步骤如图所示。请回答下列问题： （4）图中黑鼠的体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的______过程类似。该过程结束后，细胞的全能性______（填“提高”或“降低”）。 （5）图中灰鼠形成的受精卵，经过一次有丝分裂后可得到双细胞胚。为获得更多的双细胞胚，可对灰鼠注射______激素，使其超数排卵。图中的重构胚在胚胎移植前需要对供体和受体进行同期发情处理，胚胎移植的实质是_________。 （6）进入代孕白鼠子宫内继续发育，X鼠的体色为______；上图中可以是雄鼠的有______（填图中相关鼠的名称）。 37. 同源重组技术结合tet-sacB双重选择系统可对基因进行敲除与回补研究基因的功能。如图是科研人员利用该方法对大肠杆菌LacZ基因进行敲除与回补的相关过程，其中tet'是四环素抗性基因，sacB基因（2071bp）是蔗糖致死基因，LacZ基因表达产物能将无色化合物X-gal水解成蓝色化合物。回答下列问题。 （1）过程①PCR除需要加入模板DNA、dNTP、缓冲液、Mg2+、引物外，还需加入_______，其中引物的作用是__________。 （2）为保证sacB基因和质粒2定向连接，设计引物P1、P2时，需分别在引物_______端添加限制酶_________的识别序列；若sacB基因扩增5代，则需要引物P1_______个。 （3）过程③中，需先用Ca2+处理大肠杆菌细胞，使其处于一种__________的生理状态。筛选导入质粒3的大肠杆菌时需在培养基中添加________。 （4）如图是对质粒3转化菌落进行PCR验证时的产物电泳结果，根据已知Marker每个条带的位置和相应DNA片段长度可推测PCR产物的长度，因此可判断泳道_____对应的菌株可能转化成功。过程⑤PCR中设计引物P3、P4时，需在引物5'端分别添加_______基因两端的同源序列。 （5）过程⑦中，在含有四环素和X-gal的培养基中出现了_______色菌落，即为筛选出的敲除LacZ基因菌株。过程⑧通过同源重组技术结合tet'-sacB双重选择系统可对LacZ基因进行回补，筛选LacZ基因回补菌株时应在培养基中添加__________ 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $