专题卷12 基因工程和生物技术的安全性与伦理问题-【衡水金卷·先享题】2026年新高考生物二轮复习专题卷

高三二轮复习 ·生物学· 高三二轮复习专题卷十二 生物学 命题要素一览表 注： 1.能力要求： I.理解能力Ⅱ，实验探究能力Ⅲ，解决问题能力N.创新能力 2.学科素养： ①生命观念 ②科学思维 ③科学探究④社会责任 分 知识点 能力要求 学科素养 预估难度 题号 题型 值 (主题内容) I Ⅲ ① ②③④ 档次 系数 1 选择题 3 基因工程的概念 易 0.75 2 选择题 3 基因工程的操作工具 易 0.80 3 选择题 3 PCR技术 易 0.75 4 选择题 3 蛋白质工程 / 中 0.70 选择题 3 基因工程的基本操作程序 中 0.60 DNA的粗提取与鉴定、琼脂糖 选择题 中 0.70 凝胶电泳 7 选择题 3 DNA琼脂糖凝胶电泳 中 0.67 8 选择题 3 生物技术的安全性与伦理问题 中 0.65 9 选择题 3 大引物PCR 中 0.63 10 选择题 3 基因工程的基本操作程序 中 0.62 11 选择题 3 蛋白质工程 中 0.62 12 选择题 3 构建融合基因 务 0.50 13 选择题 3 PCR定点突变 中 0.60 14 选择题 3 基因工程操作程序 中 0.52 15 非选择题 13 反向PCR 中 0.60 16 非选择题 9 构建基因表达载体 中 0.58 叁考答案及解析 一、选择题 予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要 1.D【解析】基因工程是指按照人们的意愿，进行严格 的新的生物类型和生物产品，A正确；基因工程能定 的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋 向改造生物性状且改造后的性状可遗传给后代，B正 ·47· ·生物学· 参考答案及解析 确：与杂交育种相比，基因工程育种的优点之一是不 活，B错误：冠瘿碱合成基因在植物体内表达后，可诱 受生殖隔离限制，能克服远缘杂交不亲和的障碍，C 导植物产生瘤状结构，其产物可为农杆菌提供碳源和 正确；目前基因工程改造生物体存在一定的安全隐患 氮源，C正确；需要在T-DNA区域和T-DNA之外的 和伦理问题，D错误。 区域加上不同的标记基因，T-DNA区域加标记基因， 2.A【解析】限制酶主要来源于原核生物，能识别双链 筛选出T-DNA整合到植物染色体上的细胞，T-DNA DNA的特定序列并进行切割，A正确：限制酶识别位 之外的区域加上不同的标记基因，在重组T质粒构 点过多会导致质粒被切割成多个片段，不利于重组载 建时，筛选成功导入质粒的农杆菌，D正确。 体的构建，B错误；利用限制酶将质粒切成一个DNA 6.C【解析】猪是哺乳动物，其成熟红细胞无细胞核， 双链片段，会产生2个游离的磷酸基团，C错误；限制 DNA含量极少，而洋葱细胞含有细胞核和线粒体等， 酶的活性受温度影响，低温用于保存酶而非反应条 更适合作为提取材料，A错误；二苯胺试剂在沸水浴 件，D错误。 条件下与DNA反应显蓝色，B错误；PCR反应中一 3.B【解析】已知目的基因复制起始端序列，进而设计 般要添加Mg2+,Mg+能激活DNA聚合酶，确保 相应的引物，可以获取和扩增目的基因，A正确；变性 DNA链的延伸，C正确：DNA片段越短，在凝胶电泳 过程中破环的是DNA分子内的氢键，B错误；若设计 中迁移速率越快（因阻力小），D错误。 的引物短，则该引物能与目的基因结合，也可能和非 7.A【解析】凝胶中的DNA分子通过染色，可在波长 目的基因结合，从而扩增出非目的基因，PCR过程中 为300nm的紫外灯下被检测出来，A正确：在凝胶中 所用的引物片段越长，扩增出来的DNA片段的脱氧 DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大 核苷酸序列差别就越小，C正确；复性过程中引物与 小和构象等有关，B错误；实验中的微量离心管等用 DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成 具使用前需要灭菌处理，C错误：用电泳缓冲液配制 的，D正确。 0.8%~1.2%的琼脂糖溶液，D错误 4.C【解析】蛋白质工程是通过对基因进行改造或合 8.C【解析】研究转基因农作物时应采取多种方法防 成，来改造现有蛋白质或制造一种新的蛋白质。由题 止转基因花粉的传播，避免基因污染，符合生物技术 干可知，人工智能模型ESM3成功“设计”出了一种全 的安全与伦理规范，A正确；干细胞培养在临床医学 新的荧光蛋白，所以人工智能模型ESM3与蛋白质工 等领域前景广泛，但也可能面临一些问题，如存在导 程一样可以设计自然界没有的蛋白质，A正确：基因 致肿瘤发生的风险，B正确：生物武器是指利用致病 突变能产生新的基因，生物进化过程中产生的基因突 菌类、病毒类和生化毒剂类等作为战争武器，危害极 变可为基因工程改造生物提供更多的基因资源，基因 大，干扰素不是生物武器，C错误；为了防止有人滥用 工程可以利用这些基因资源实现对生物的定向改造， 设计试管婴儿技术选择性设计婴儿性别，我国反对设 B正确；基因工程是按照人们的意愿对生物的基因进 计试管婴儿，D正确。 行定向改造，但它不能阻止生物进化过程中有害基因 9.C【解析】PCR扩增的定点诱变产物通常是DNA 的出现，生物进化过程中基因突变具有不定向性，有 片段，需要连接到载体分子上才能表达出相应的性 害基因的产生是随机发生的，基因工程无法对其进行 状，需要具备启动子和终止子等结构才能进行转录和 阻止，C错误：自然界的生物体都有相同的遗传密码， 翻译，A正确；单核苷酸的定点诱变改变了基因的碱 这是生物界的共性之一，人工智能模型ESM3可解码 基序列，为基因突变，B正确；除第一轮产物作第二轮 生物语言，正是基于这种统一的遗传密码，D正确。 PCR扩增的大引物外，第二轮PCR仍需加入侧翼引 5.B【解析】农杆菌侵染植物时，仅Ti质粒中的 物，以便进行另一条链的延伸，C错误；该过程通过改 T-DNA区域转移并整合到植物染色体，并非整个质 造基因最终改造生物性状，属于蛋白质工程技术范 粒转移，A正确；Vir基因的激活需要植物受伤释放 畴，D正确 酚类物质，而非农杆菌附着在植物细胞表面就会激：10.D【解析】启动子位于DNA上，是RNA聚合酶识 ·48· 高三二轮复习 ·生物学· 别和结合的部位，A正确：逆转录是以mRNA为模 位到530位，故若酶切产物只能规察到460bp的 板，合成DNA的过程，故为使大肠杆菌表达出正确 DNA条带，则表明第226位碱基是T,该水稻品种 的胰岛素，可先提取胰岛B细胞中的mRNA,然后 为TT型，C正确；若Wx基因中第226位碱基是正 再通过逆转录得到胰岛素基因，B正确；为构建基因 常的G,则该位点会被AccI酶识别，DNA序列被切 表达载体，PCR扩增胰岛素基因时需要在引物5'端 成两段，若该位点变成T,则不能被酶切，故GT杂 分别添加限制酶EcoR I和XhoI的识别序列，C正 合型水稻品种的酶切电泳结果为3条条带，D正确。 确：将大肠杆菌接种到添加了氨苄青霉素和X-gl14.B【解析】作为基因表达载体必须具备的条件包 的培养基上，筛选出白色的菌落即为工程菌种，D错 括：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因 误。 (如抗性基因)，以便于重组后重组DNA分子的筛 11.D【解析】分析题图可知，物质a是多肽链，它是根 选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制：④是安全 据预期蛋白质结构推测出的氨基酸序列连接而成 的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出 的，物质b是mRNA,A正确：要对水蛭素的结构进 来，图1中有启动子和终止子等，因此质粒还需具备 行设计改造，最终必须通过改造或合成水蛭素基因 的结构有限制酶的切割位点、标记基因、复制原点 来完成，B正确；将新水蛭蛋白基因导入到大肠杆菌 等，A正确；用PCR扩增分析法确定重组质粒中目 体内直接指导合成的蛋白质可能不是预期的新水蛭 的基因插入方向是否正确时，常设计一对引物，一个 蛋白，C正确；基因突变具有不定向性，所以化学诱 引物与目的基因序列互补，另一个引物与质粒序列 变不能定向改造天然水蛭蛋白的基因序列，D错误。 互补，两引物延伸方向相反，以扩增出两引物间的序 12.B【解析】引物P2和引物P3存在碱基互补配对， 列，若插入方向正确，则可扩增出相应序列，反之，则 引物之间的结合会干扰引物和模板链的结合，从而 不能扩增出相应序列，故选用的引物应为F2、R或 影响PCR过程，因此不能在同一个反应体系中进行 F、R2,B错误：根据图1启动子和终止子的位置可 LTB基因和ST1基因的扩增，A错误；DNA子链是 知转录方向是从左向右，若b是模板链，则b链左侧 从5'端向3'端延伸的，为了使杂交链引物P2的碱 为3'端，a链左侧为5端，而引物的延伸方向为5'→ 基末端提供3'端，需要第二次循环，该次循环使用引 3',所以引物F2与b链结合，其序列应该与a链相 物P1,B正确；LTB基因和ST1基因能融合的关键 应部分的序列相同，C正确；据图2可知，用抗J蛋 是引物P2和引物P3部分碱基能互补配对，C错误； 白抗体和抗V5抗体分别检测，均出现条带1，说明 杂交链延伸生成LTB一ST1融合基因的过程中，不 条带1是J-V5融合蛋白，D正确： 需要加入引物，两条母链的起始位置的碱基序列即 二、非选择题 为引物，可以作为子链合成的引物，为DNA聚合酶 15.(13分，除标注外，每空1分) 提供3'端，D错误。 (1)使目的基因在受体细胞内稳定存在并且遗传给 13.A【解析】终止子位于基因的下游，若图示所给引 下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用(2 物1设计区碱基序列所在的DNA链为转录的模板 分)EcoR I、DNA连接晦 链，则终止子在其下游，A错误；引物的延伸方向为 (2)缓冲液2种引物、4种脱氧核苷酸和耐高温的 5'→3'，故图示所给引物1设计区碱基序列所在的 DNA聚合酶(2分)低 DNA链为非模板链，而引物2要以引物2设计区碱 (3)农杆菌转化（或“花粉管通道”）卡那霉素 基序列所在的DNA链为模板，故引物2的碱基序列 (4)抗原一抗体杂交生物共用一套遗传密码 应与所给序列碱基互补配对，即该实验中需设计的 (5)蛋白质工程DNA 引物2为5'-ATGATTTAACGAGAGTTGAA 【解析】(1)基因工程技术最关键的步骤是FTO基 3',B正确；根据题干信息，引物1设计区碱基序列 因表达载体的构建。将“启动子一FTO基因一终止 是从71位到90位，引物2设计区碱基序列是从511 子”连接到含NtI基因的质粒上时，需要DNA连 ·49. ·生物学· 参考答案及解析 接酶和限制酶HimdⅢ、EcoR I。 粒(2分) (2)若复性时温度偏低，引物与DNA模板非特异性 (4)甲和丙该菌落的质粒中没有插入目的基因 结合增多，引物脱靶率较高，则会导致FTO基因片 【解析】(I)EcoRV酶切位点在识别序列的中心轴线 段电泳的结果不止一条条带。 处，产生的是平末端。 (3)用农杆菌转化法（或花粉管通道法）将目的基因 (2)DNA连接酶对平末端的连接效率较低，因此通 转入植物细胞。成功导入FTO基因的水稻细胞含 常要将平末端改造成黏性末端后再进行连接。由于 有卡那霉素抗性基因，所以配制培养基时，除了营养 目的基因片段的两端各添加了一个腺嘌呤脱氧核苷 物质和植物激素外，还需要卡那霉素筛选成功导入 酸，根据碱基互补配对原则，处理后的质粒两端需要 目的基因的细胞。 各添加一个胸腺嘧啶脱氧核苷酸；要将处理后的质 (4)检测FTO基因是否在受体细胞中表达出FTO 粒与目的基因连接起来，需要用DNA连接酶， 蛋白时常用抗原一抗体杂交的方法。动物的FTO (3)根据题意，采用含有不同抗生素的平板对菌落进 基因能够在植物细胞中成功表达说明生物共用一套 行筛选，所以含有抗生素的情况分别是只含四环素、 遗传密码。 不含抗生素、只含氨苄青霉素和同时含有两种抗生 (5)对已获得的FTO蛋白进行改造和修饰通常属于 素。经过培养得到3类菌落，它们的质粒导入情况 蛋白质工程，而蛋白质工程的本质是通过定点突变 分别是含有质粒P0、未转入质粒、转入重组质粒。 等手段改变编码蛋白的DNA序列。 (4)据图3判断，甲和丙之间片段长度是450bp,所 16.(9分，除标注外，每空1分) 以扩增使用的引物是甲和丙，该同学使用同样的一 (1)平 对引物对另一个菌落的质粒进行PCR扩增，得到了 (2)胸腺嘧啶（或“T”)DNA连接 150bp片段，原因是该菌落的质粒中没有插入目的 (3)不含抗生素、只含氨苄青霉素、同时含有两种抗 基因。 生素(2分)含有质粒P0、未转入质粒、转入重组质 ·50·高三二轮复习专题卷十二/生物学 基因工程和生物技术的安全性与伦理问题 (考试时间40分钟，满分64分) 一、选择题：本题共14小题，每小题3分，共42分，每小题只有一个选项符合题目要求。 1.以下关于基因工程的叙述，错误的是 A.基因工程的原理是通过对DNA分子操作实现基因重组 B.能定向改造生物性状且改造后的性状可遗传给后代 C.与杂交育种相比，基因工程育种不受生殖隔离限制，能克服远缘杂交不亲和的障碍 D.基因工程改造生物体安全性高，且不会对生态环境造成威胁 2.限制酶是基因工程所需的工具之一，下列相关叙述正确的是 A.限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，能特异性识别并剪切双链DNA分子的特定核苷酸序列 B.限制酶的作用效率与识别位点数量呈正相关，因此需选择识别位点多的限制酶 C.利用限制酶将质粒切成一个DNA双链片段，会产生1个游离的磷酸基团 D.限制酶的活性受温度影响，因此需在低温条件下（如4℃）进行切割反应 3.聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定DNA片段的分子生物学技术，其最大特点是能 将微量的DNA大幅增加。下列相关叙述错误的是 A.PCR技术能放大扩增特定DNA片段，所以基因工程中常用该技术获取目的基因 B.变性过程中破坏的是DNA分子内的磷酸二酯键 C.PCR过程中用到的引物片段越长，扩增出来的DNA片段的脱氧核苷酸序列差别就越小 D.复性过程中引物与DNA模板链的结合遵循碱基互补配对原则 4.新一代人工智能模型ESM3首次实现了对蛋白质序列、结构和功能的统一推理，并成功“设计”出 了一种全新的荧光蛋白，新荧光蛋白的生成相当于模拟了5亿年的进化过程。下列叙述错误的是 A.人工智能模型ESM3与蛋白质工程一样可以设计自然界没有的蛋白质 B.生物进化中产生的基因突变可为基因工程改造生物提供更多的基因资源 C.基因工程可以精准编辑基因，所以能够阻止生物进化过程中有害基因的出现 D.人工智能模型ESM3可解码生物语言，因为自然界的生物体都有相同的遗传密码 5.土壤农杆菌天然Ti质粒的结构如图所示。植物受伤后释放的酚类物质可激活农杆菌Vr基因 (编码的蛋白质利于T-DNA转移及整合)；冠瘿碱为农杆菌提供碳源和氮源，可诱导植物产生瘤 状结构。Tⅱ质粒需经过改造才能被应用。下列叙述错误的是 T-DNA区域 细胞分裂 索基因 生长素基因 路合 左边界 右边界 冠瘿碱代谢基因 ir基因 复制起始位点 A.农杆菌中的Tⅰ质粒侵染植物细胞时并不是整个Tⅰ质粒进行转移 B.当农杆菌附着在植物细胞表面后，Ti质粒Vr基因便会被激活和表达，从而发挥作用 C.冠瘿碱合成基因只能在宿主植物体内表达，表达产物会被农杆菌利用 D.需要在T-DNA区域和T-DNA之外的区域加上不同的标记基因，以便于后续筛选 6.关于DNA的粗提取与鉴定、DNA片段的扩增及电泳鉴定实验，下列叙述正确的是 A.与洋葱相比，猪血更适合作为DNA的粗提取与鉴定实验的材料 B.提取的丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液，加人二苯胺，水浴加热后溶液变紫 生物学第1页（共4页）】 衡水金卷·先享题·下 C.PCR反应缓冲溶液中一般要添加Mg2+,其目的是激活DNA聚合酶 D.在同一电场作用下，DNA片段越短在凝胶中的迁移速度越慢 7.DNA琼脂糖凝胶电泳是一种分离、纯化或分析PCR扩增后的待检DNA片段的技术。下列关于 核酸片段的扩增及电泳鉴定的叙述，正确的是 A.凝胶中的DNA分子通过染色，可在波长为300nm的紫外灯下被检测出来 B.DNA迁移速率只与DNA本身的性质有关 C.实验中的微量离心管等用具使用前需要消毒处理 D.用生理盐水来配制0.8%一1.2%的琼脂糖溶液 8.生物技术就像一把“双刃剑”，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜在的危害。 下列叙述错误的是 A.研究转基因农作物时应采取多种方法防止转基因花粉的传播，避免基因污染 B.干细胞培养应用前景广泛，但也可能面临一些问题，如存在导致肿瘤发生的风险 C.生物武器是用病毒类、干扰素及生化毒剂类等来形成杀伤力 D.反对设计试管婴儿的原因之一是避免有人滥用此技术选择性设计婴儿 9.大引物PCR定点突变常用来研究蛋白质结构改变导致的功能变化。单核苷 诱变引物 酸的定点诱变仅需进行两轮P℃R反应即可获得，第一轮加诱变引物和侧翼 引物，第一轮产物作为第二轮PCR扩增的大引物，过程如图所示。下列有关 第一轮PCR 叙述错误的有 A.PCR扩增的定点诱变产物通常需要连接到载体分子上才能表达出相应的 PCR产物用作大引物 性状 B.单核苷酸的定点诱变所属变异类型为基因突变 第二轮PCR C.第二轮PCR所用的引物都是第一轮PCR产物的DNA的两条链 D.利用该技术将某功能蛋白的结构改变属于蛋白质工程 10.基因工程菌是指用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系。下图是利用大 肠杆菌生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。已知阝半乳糖苷酶可以分解无 色的X-gl产生蓝色物质使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。下列叙述错误的是 P:启动子 T:终止子 Xho I 限制酶识别序列及切割位点： EcoR I ori:复制原点 Mun AmpR.氨苄青霉素抗性基因 SalI Mun I CAATTG lacZ:B-半乳糖苷酶基因 Nhe I Xho I C'TCGAG ImpR EcoR I:G,AATTC SalI GTCGAC Mun I ori Nhe I G CTAGC Sal I Nhe I HO A ① 转录方同 B -ǒH 胰岛素基因 A.启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，图中胰岛素基因以A链为模板进行转录 B.为使大肠杆菌表达出正确的胰岛素，可先提取胰岛B细胞中的RNA再采用逆转录法获取 胰岛素基因 C.为构建基因表达载体，PCR扩增胰岛素基因时需要在引物5'端分别添加限制酶EcoR I和 XhoI的识别序列 D.将转化后的大肠杆菌接种到添加了氨苄青霉素的培养基上，就可根据菌落颜色来判断大肠杆 菌中是否导人了重组质粒 11.水蛭是我国传统中药材，其主要药理成分水蛭素（由65个氨基酸组成的单链多肽）为水蛭蛋白中 的重要成分，具有良好的抗凝血作用。研究人员拟通过蛋白质工程改造水蛭素，提高其抗凝血活 性，基本思路如图所示。下列叙述错误的是 基因 分了设计 蛋白质 ←-一预期功能 A.物质a是多肽链，物质b是mRNA DNA b 折登 三维结构 →生物功能 B.要对水蛭素的结构进行设计改造，最终必须 通过改造或合成水蛭素基因来完成 C.将新水蛭蛋白基因导人到大肠杆菌体内直接指导合成的蛋白质可能不是预期的新水蛭蛋白 D.采用基因定点突变技术或化学诱变技术均可以定向改造天然水蛭蛋白的基因序列 高三二轮复习专题卷十二 生物学第2页（共4页）】 12.重叠延伸PCR技术是采用具有互补末端的引物，使PCR产物形成重叠链，从而在随后的扩增反 应中通过重叠链的延伸，将不同来源的扩增片段重叠拼接起来的技术。某实验小组从猪源大肠 杆菌中扩增得到了LTB基因和ST1基因片段，并用重叠延伸PCR技术构建了LTB-ST1融合 基因（如图所示）。下列有关叙述正确的是 LTB基因 STI基因 引物P1 引物P3 引物P2 引物P4 PCR扩增产物回收 目的链红 日的链S 杂交链■ LTB基因 ST1基因 LTB-STI融合基因 A.可在同一个反应体系中进行LTB基因和ST1基因的扩增 B.PCR过程中，第2次循环获得目的链L时所用的引物为P1 C.图中的引物P2与引物P3的碱基序列均不能互补配对 D.杂交链延伸生成LTB-ST1融合基因时需要加入引物P1和P4 13.水稻蜡质基因(Wx)若第226位碱基是G,基因型记作GG,胚乳中直链淀粉含量高；若变成 T,基因型记作TT,胚乳中直链淀粉含量会低。为检测Wx该位点碱基是G还是T,以待测 水稻叶片总DNA为材料，对PCR扩增产物经AccI酶切割后电泳，如图所示。已知引物1为 5'一GCTTCACTTCTCTGCTTGTG-3',AccI酶的识别位点为5'一GTATAC一3'，两引物之 间无另外的AccI酶的识别位点。下列叙述错误的是 GCTICACTICICIGCTIGIG TICAACICICGTTAAATCAT 71 引物1设计区90 51)引物2设计[区30 GG5 GTATAC- 226231 -T- 高直链淀粉含量(GG)和中等直链淀粉含量(TT) 水稻品种中蜡质基因部分DNA序列 A.若图示所给引物1设计区碱基序列所在的DNA链为转录的模板链，则终止子在其上游 B.该实验中需设计的引物2为5'一ATGATTTAACGAGAGTTGAA一3 C.若电泳结果只能观察到460bp左右的DNA条带，则表明该水稻品种为TT型 D.GT杂合型水稻品种酶切电泳结果为3条条带 14.科研人员构建了可表达JV5融合蛋白的重组质粒并利用引物进行了PCR检测，该质粒的部分 结构如图1所示，其中V5编码序列标签短肽V5;该重组质粒在受体细胞内正确表达后，用抗J 蛋白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白是否表达以及表达水平，结果如图2所示。下列叙述 错误的是 启动子 J基因V5编码序列 终止了 F2 F a链 条带1 条带1 b链 条带2 R2 注：F1、F2、R1、R2表示引物。 抗J蛋白抗体抗V5抗体 图1 图2 A.作为基因表达载体，图1中的质粒还必须具有限制酶切割位点、特殊标记基因、复制原点 B.为检测J基因是否插入图1所示的位置，需用引物F1和R1进行PCR C.若J基因转录的模板链位于b链，则引物F2与图1中a链相应部分的序列相同 D.图2中，条带1的出现证明重组质粒在受体细胞内表达了JV5融合蛋白 生物学第3页（共4页）》 衡水金卷·先享题·高 二、非选择题：本题共2小题，共22分。 15.(13分)我国科学家将动物肥胖基因(FTO基因)转入水稻细胞中，单株产量提高了三倍。科研人 员构建含肥胖基因的重组质粒，主要流程如图所示，其中HindⅢ、BamH I、PstI、XhoI和 EcoR I表示限制酶，NptⅡ为卡那霉素抗性基因。回答下列问题： FTO基因 I① EcoR I Hindll BcomH I EcoR I B基因 GUS ② HidlⅢBamH I Pst I Xho I EcoR I F7O基因 →启动子 目终止子 (1)将FTO基因转入水稻细胞应用了基因工程技术，该技术的核心是构建基因表达载体，其目 的是 。过程②构建重组质粒选用的酶是 HindⅢ和 (2)利用PCR获取和扩增FTO基因时，PCR反应需要在一定的 中才能进行，需提 供模板、 。PCR的产物可通过电泳鉴定，如果待测FTO基因片段电泳的结 果不止一条条带，原因可能是复性时温度偏 (填“高”或“低”)。 (3)常用 法将FTO基因导入水稻细胞，转化后的细胞在培养基上培养。配制 培养基时，除了营养物质和植物激素外，还需要的物质是 (4)检测FTO基因是否在受体细胞中表达出FTO蛋白时常用 的方法，动 物的FTO基因能够在植物细胞中成功表达说明 (5)FTO基因表达的产物FTO蛋白本质是6A脱甲基酶，若要将其进行改造和修饰，利用的技 术属于 (填“基因工程”或“蛋白质工程”)，本质上设计改变的是 (填 “DNA”或“蛋白质”)分子。 16.(9分)图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒P0具有四环素抗性基因 (TetR)和氨苄青霉素抗性基因(AmpR)。回答下列问题： 、AmpR AmpR P2 TetR AmpR ...GAT'ATC.. P3 AEcoR EcoR V- PO …CTA TAG… 图2 目的基因片段 图1 (1)限制酶EcoRV识别的序列和切割位点如图2所示，则用其切割载体P1产生的为 (填“黏性”或“平”)末端。 (2)将酶切后的目的基因和载体P1做如下处理：日的基因两端各添加一 个腺嘌呤脱氧核苷酸，载体P1则需要在两端各添加一个碱基为 的脱氧核苷酸，形成P2,P2和目的基因片段在 酶作用下，形成重组质粒P3。 (3)将上述连接后的产物，导人大肠杆菌细胞。为筛选出含有重组质粒 P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，应该设计4组实验， 它们含有的抗生素情况分别是只含四环素、 经过培养得到3类菌落，它们的质粒导入情况分别 是 100bp 图3 (4)某同学对一菌落的质粒进行P℃R扩增，得到了450bp片段，根据图3判断该同学使用的一 对引物是 同学使用了同样的一对引物，对另一个菌落的质粒进行PCR 扩增，得到了150bp片段，原因是 三二轮复习专题卷十二 生物学第4页（共4页）