精品解析：山东临沂一中北校区2025—2026学年度高二年级下学期第一次教学检测生物试题

临沂一中高二年级下学期第一次教学检测 生物试题 2026年4月 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1. “千里归来不问酒，一碗浆水解乡愁”。浆水是我国西北地区的传统自然发酵食品，以芹菜、白菜等蔬菜为原料，经乳酸菌等微生物发酵制成，具体制作流程如下图所示。下列关于浆水发酵的叙述正确的是（　　） A. 蔬菜、器具“热烫处理”的目的是杀死表面所有的杂菌以降低腐败风险 B. “面汤”可以为乳酸菌发酵提供碳源，从而促进乳酸菌的无丝分裂 C. “盖上盖子”为发酵过程提供密封条件，主要目的是防止其他微生物的污染 D. “加浆水引子”可增加发酵菌种的含量，以缩短浆水制作时间 2. 酸笋是螺蛳粉的“灵魂”。在自然发酵过程中，酸笋中的乳酸菌作为主要微生物分解蛋白质产生硫化氢等物质，形成了螺蛳粉的特殊风味。酸笋的传统发酵工艺包括原材料处理、装坛、发酵等过程。下列叙述正确的是（　　） A. 乳酸菌代谢类型为异养厌氧型，所以不会分布在空气中 B. 原材料处理主要是对采摘后的竹笋进行剥壳、清洗和灭菌 C. 装坛时应保证竹笋被盐水全部浸没，才能保证发酵的正常进行 D. 随着发酵的进行，发酵液pH逐渐升高后保持稳定 3. 如图为将相同大小的含有不同抗生素的灭菌滤纸片 A~D放在培养基甲上，用于判断抗生素的杀菌能力，乙为甲培养一段时间后的结果。下列叙述错误的是（ ） A. 培养基甲中含有水、碳源、氮源、无机盐和琼脂 B. 用无菌水配制成细菌悬液，再均匀涂布于培养基甲 C. 根据抑菌圈直径大小可判断不同抗生素抑菌能力的强弱 D. 不同抗生素的抑菌能力大小为 D>C>A>B 4. 灭菌和无菌操作是获得微生物纯培养物的基础。下列操作正确的是（ ） A. 可以用浸泡在75%酒精中的涂布器直接涂布 B. 为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 C. 取出菌种后需马上塞上装菌种试管的棉塞，然后再划线 D. 接种环、培养皿等已灭菌，整个操作过程中还需要灭菌 5. 牛、羊等反刍动物的瘤胃中生活着多种微生物，实验小组通过如图所示的流程从瘤胃中分离出纤维素降解菌。下列叙述错误的是（ ） A. 可用高压蒸汽灭菌法对培养基灭菌 B. 丙培养基能增加纤维素降解菌的数量 C. ②过程所用的接种方法为平板划线法 D. 筛选的纤维素降解菌可能为厌氧型菌株 6. 某兴趣小组尝试进行“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验，下列有关该实验的叙述错误的是（　　） A. 原理：该细菌合成的脲酶可将尿素分解成氨，使培养基的碱性增强 B. 方法：以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，观察颜色变化 C. 分离：利用接种环在固体培养基表面连续划线，将聚集的菌种逐步分散 D. 计数：选取菌落数在30～300之间的平板统计，计数多个平板后求平均值 7. 美蓝染料区分酵母菌活细胞和死细胞的原理是活酵母菌细胞能将进入的氧化型美蓝染料（呈蓝色）还原成无色，而死细胞不能还原，因此保持蓝色。在“培养液中酵母菌种群数量的变化”实验中，用图1所示的血细胞计数板计数，图2是其中某结构的放大示意图，图3表示用美蓝染料染色酵母菌后的结果。下列说法正确的是（　　） A. 先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取静止培养瓶中层培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入 B. 多余的培养液用滤纸吸去，稍等片刻，待酵母菌全部沉降到计数室底部，将血细胞计数板放在载物台中央，观察 C. 美蓝染料不能进入活酵母菌中，所以活酵母菌呈无色 D. 由图3可知，染色后的10mL酵母菌液中活酵母菌的数量为个 8. 下列关于发酵工程应用的说法，正确的是（　　） A. 食品添加剂可以增加食品营养，改善食品的色、香、味，使用时应尽量多添加 B. 利用放线菌产生的井冈霉素防止水稻枯纹病是化学防治的有效手段 C. 在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，同时提高动物免疫力 D. 从微生物细胞中提取的单细胞蛋白可制成动物饲料 9. 植物利用硝酸盐需要硝酸还原酶，现有两种烟草硝酸还原酶缺失突变体，为探究两种突变体的突变是否在同一基因位点上，研究人员将两种突变体进行植物体细胞杂交。下列分析正确的是（　　） A. 两种突变体均不能在以硝酸盐作为唯一氮源的培养基上生长 B. 诱导两种突变体进行植物体细胞杂交时应先用胶原蛋白酶酶解得到原生质体 C. 细胞膜融合是细胞融合完成的标志 D. 若杂种细胞能在硝酸盐培养基上正常生长，说明两种突变体的突变位点相同 10. 研究者利用烟草外植体为材料，探究植物激素的影响，结果如图。下列说法错误的是（　　） A. 对外植体消毒处理可用酒精和次氯酸钠，需要用无菌水清洗 B. 步骤①通常需要无光的环境，形成的愈伤组织细胞具有全能性 C. 步骤④需要的植物激素的浓度比为1∶1 D. 培养烟草脱毒苗需要切取茎尖分生区组织 11. 病毒感染果蔬后，会借助胞间连丝等结构扩散，导致果蔬产量和品质退化。通过植物组织培养技术，利用茎尖可以快速培育出脱毒苗。下列有关叙述正确的是（　　） A. 配制MS固体培养基时，经高压蒸汽灭菌后再调pH B. 植株茎尖细胞中不含病毒的原因可能是该组织胞间连丝不发达 C. 切取的植株茎尖用75%的酒精消毒后，需放在清水中反复清洗 D. 脱毒苗培育是否成功，最终还需要通过接种病毒进行个体水平的检测 12. 单克隆抗体因具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等优点，有重大应用价值。下图为单克隆抗体制备过程，下列叙述正确的是（ ） A. 给小鼠注射某种病原体后，小鼠体内可能产生多种特异性的抗体 B. 注射病原体一段时间后，从小鼠脾中分离得到的是同一种B淋巴细胞 C. HAT选择培养基中融合的细胞是能存活的，未融合的细胞会死亡 D. 图中克隆化培养杂交瘤细胞时，每个培养孔中尽量接种多个细胞 13. 胚胎工程技术为现代畜牧业提供了快速繁育优良品种的途径。下列关于哺乳动物胚胎工程的叙述，正确的是（　　） A. 体外受精时，需将获能处理的精子与MI期的卵母细胞进行受精 B. 高等动物早期胚胎发育顺序为受精卵→囊胚→桑葚胚→原肠胚 C. 早期胚胎发育的卵裂期，细胞数量增加但胚胎总体积并不增加 D. 进行胚胎分割时，可选择发育正常的桑葚胚并将其内细胞团均等分割 14. 基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（　　） A. 导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞 B. 利用农杆菌转化法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上 C. 扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'-端进行子链合成 D. 构建基因表达载体是该过程的核心步骤 15. THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述错误的是（ ） EcoRI BamHI KpnI MfeI HindIII 5′−G↓AATTC−3′ 3′− CTTAA↑G−5′ 5′−G↓GATCC−3′ 3′− CCTAG↑G−5′ 5′−G↓GTACC−3′ 3′−CCATG↑G −5′ 5′−C↓AATTG−3′ 3′−GTTAA↑C −5′ 5′−A↓AGCTT−3′ 3′−TTCGA↑A −5′ A. THP9基因有2个游离的磷酸基团，而且游离的磷酸基团在5′端 B. 构建基因表达载体时，用MfeI、HindIII切割质粒，用EcoRI、HindIII切割目的基因 C. 利用PCR技术获取THP9基因时应选择引物1和引物4 D. 为了检测转基因玉米新品种的培育是否成功，需要在个体水平上检测其蛋白质含量 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 16. 葡萄酒中酒精度过高易引起消费者对健康风险的担忧。为检测不同非酿酒酵母在葡萄酒酿造中降低酒精度的应用潜力，研究人员以本土酵母（Hu）与酿酒酵母（Sc）为材料，检测不同接种方式下酒精度的变化情况，结果如下图所示。下列相关叙述正确的有（　　） A. 果酒制作的过程中酿酒酵母的最适生长温度约为35℃ B. 发酵过程中发酵液pH逐渐上升，可通过检测pH变化了解发酵情况 C. 接种Sc后发酵速率显著加快，说明Sc在酒精发酵过程中起主导作用 D. 根据曲线分析可知Hu能有效降低发酵过程中的酒精含量 17. 科研人员为获得高产乳糖酶的酵母菌，从牧区奶酪中进行菌种的分离和纯化，流程如图所示。其中X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。下列相关叙述错误的是（　　） A. 培养基甲和乙均属于液体培养基，其主要作用是扩大培养目的菌株 B. 将菌液接种到培养基乙所采用的方法是稀释涂布平板法 C. 菌落的蓝色深浅可反映酵母菌产生乳糖酶的量或活性，蓝色越深说明乳糖酶的产量或活性越高 D. 含 X-gal的培养基属于选择培养基，可筛选出能产生乳糖酶的酵母菌 18. “菘油1号”是将菘蓝与甘蓝型油菜的体细胞进行杂交培育而成的药食同源蔬菜，培育过程如图所示。其中紫外线照射能随机破坏细胞核中染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂，下列关于该培育过程的叙述，错误的是（ ） A. 需在低渗溶液中利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体 B. 经过上述体细胞杂交处理后，杂种植物主要保留菘蓝的核基因组，甘蓝型油菜的质基因组 C. 可采用灭活仙台病毒促进细胞膜上糖蛋白的相互识别，使得膜上脂质蛋白质重新排列，植物原生质体融合 D. 获得的“菘油1号”富含抗病毒成分，该类有效成分不是植物基本的生命活动所必需的产物 19. 中国科学院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 用雌激素对雌性小鼠进行超数排卵处理可得到大量卵母细胞 B. 卵细胞、精子分别转化为phESC、ahESC，它们类似于胚胎干细胞 C. 图2可用显微操作法对卵细胞进行去核处理 D. 不考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成为XX、YY 20. 英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”，其培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述不正确的是（ ） A. 该技术不能避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 B. 精子获能后才能与MⅡ期的卵母细胞完成受精作用 C. “三亲婴儿”的染色体全部来自母亲提供的细胞核 D. “三亲婴儿”的培育还需要动物细胞培养、早期胚胎培养和胚胎移植等技术 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 北京传统小吃“豆汁”是一种以绿豆为原料，经过一系列制作工艺流程（如下图）得到的一种以酸味为主、掺杂着些许臭味的糊状流体食品。混浆操作通常是将老浆直接倒入绿豆乳中，混合浆的沉淀与酸化过程实际属于乳酸发酵，其主要产酸微生物为乳酸菌。某研究小组测定了豆汁制作过程中部分化学成分含量变化的有关数据（如下表）。回答下列问题： 浆状样品 可溶性蛋白/（mg/mL） 游离氨基酸/（mg/mL） 蛋白酶/（U/mL） 混合浆 5.60 0.31 1.19 酸浆Ⅰ 1.4 0.51 0.16 （1）混合浆发酵时所需的乳酸菌主要来自________。乳酸发酵过程中，能为乳酸菌同时提供氮源的物质主要是绿豆乳中的_____________。 （2）欲测定混合浆中乳酸菌的含量多少，研究小组采用的稀释涂布平板法测得的结果通常比实际值更低，原因是____________。 （3）分析表中数据，酸浆Ⅰ中的可溶性蛋白含量比混合浆低得多，推测其原因是__________。 （4）为了筛选出产酸能力强的乳酸菌菌种，研究小组将不同稀释倍数的酸豆汁液接种到MRS固体培养基（添加了质量分数1.5%碳酸钙，遇酸发生反应会出现透明圈）上，在适宜条件下培养一段时间后，应挑取____________的菌落进一步培养筛选。 （5）为了评估经传统工艺制得的豆汁安全性，研究小组又将不同稀释倍数的豆汁接种到所需培养基上培养，待长出菌落后，可根据菌落的_____________特征判断是否含有致病菌。 22. 蓝莓酸甜宜人、细腻多汁，被誉为“水果皇后”，由蓝莓酿制的蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”和“口服化妆品”等。如图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图，回答下列问题： （1）清洗蓝莓时应注意不能反复冲洗，以防止____。蓝莓酒所需微生物的代谢类型是______（从同化作用和异化作用两个方面考虑）型。 （2）蓝莓醋可以在蓝莓酒的基础上进行发酵，此过程主要发挥作用的微生物是______，其与酵母菌在结构上的主要差异是______，它进行醋酸发酵过程的化学反应式为______。 （3）兴趣小组三位同学设计的酿蓝莓酒的装置如下图所示，其中最合理的是_____瓶。发酵过程中右侧排气管连接长而弯曲胶管的目的是____________。 注：各发酵瓶的左侧管为充气管，右侧管为排气管 23. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图分析并回答下列问题。 （1）图中产生小牛的几个途径中，属于无性繁殖途径的有应用_____（填数字）。 （2）应用1中，为了大量获取细胞B，需对供体2注射_____，获得小牛的过程中使用了_____技术，最终获得的良种小牛性别为_____。 （3）供体1完成体内受精的场所在_____。在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其_____，胚胎移植前需要对受体进行_____处理。 （4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：对囊胚阶段的胚胎通过_____技术获得二分胚①和②，操作时需要注意_____，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 24. 我国科研人员将兔毛角蛋白基因导入到棉花细胞中培育成新型品种“兔毛棉花”。它标志着纺织品已由天然纤维时代、化学纤维时代进入转基因时代。兔毛角蛋白基因片段和质粒的酶切位点如图所示。回答下列问题。 （1）可从兔毛囊细胞中提取总RNA，通过________合成cDNA，以此为模板设计特异性引物，通过PCR扩增得到兔毛角蛋白基因的完整编码区序列。 （2）为了使兔毛角蛋白基因能够正确地插入质粒中，PCR获取兔毛角蛋白基因时，需在引物a和引物b的______端分别添加酶切位点_____和________的识别序列。扩增缓冲液中Mg2+的作用是__________。 （3）采用农杆菌转化法将兔毛角蛋白基因导入棉花细胞中，其中Ti质粒所含T-DNA的作用是_______________。 （4）检测转基因棉花是否成功表达出兔毛角蛋白常用方法的原理是________。 25. 水体中的雌激素能使斑马鱼细胞产生E蛋白，激活卵黄蛋白原（vtg）基因（如图1所示）的表达，因此斑马鱼可用于监测环境雌激素污染程度。为了实现可视化监测，科学家将斑马鱼的vtg基因，与人工构建的含萤火虫荧光素酶基因（无启动子）的载体（如图2所示）连接，形成vtg-Luc基因重组载体，成功培育了转基因斑马鱼。图2中Luc表示萤火虫荧光素酶基因，可以催化荧光素氧化产生荧光；Ampr为氨苄青霉素抗性基因，TetR表示四环素抗性基因，BamHI、EcoRI、HindIII、BstGI为限制酶，→表示转录方向。 （1）基因vtg启动子的基本组成单位是_____。选用限制酶EcoRI、HindIII进行双酶切Luc基因载体，其优点是______________。 （2）为使vtg基因与Luc基因载体形成重组载体，通过PCR技术扩增vtg基因时，需设计合适的引物。依据图1、图2信息推测引物1包含的碱基序列为5′-__-3′。 （3）筛选导入vtg-Luc基因重组载体的大肠杆菌，为确定这两个基因是否在大肠杆菌体内转录，应检测________。 （4）利用_______方法将vtg-Luc基因重组载体导入斑马鱼。若要判断斑马鱼转基因是否成功，可在水体中添加_______进行检测。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 临沂一中高二年级下学期第一次教学检测 生物试题 2026年4月 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1. “千里归来不问酒，一碗浆水解乡愁”。浆水是我国西北地区的传统自然发酵食品，以芹菜、白菜等蔬菜为原料，经乳酸菌等微生物发酵制成，具体制作流程如下图所示。下列关于浆水发酵的叙述正确的是（　　） A. 蔬菜、器具“热烫处理”的目的是杀死表面所有的杂菌以降低腐败风险 B. “面汤”可以为乳酸菌发酵提供碳源，从而促进乳酸菌的无丝分裂 C. “盖上盖子”为发酵过程提供密封条件，主要目的是防止其他微生物的污染 D. “加浆水引子”可增加发酵菌种的含量，以缩短浆水制作时间 【答案】D 【解析】 【详解】A、蔬菜、器具的 “热烫处理” 目的是杀灭大部分杂菌，而非“所有”杂菌，A错误； B、面汤的主要成分是淀粉，可为乳酸菌提供碳源，但乳酸菌属于原核生物，繁殖方式为二分裂，无丝分裂是真核细胞的分裂方式，B错误； C、“盖上盖子”主要是为乳酸菌发酵提供无氧环境（乳酸菌是厌氧菌），C错误； D、“浆水引子”中含有大量发酵所需的乳酸菌等菌种，加入后可提高发酵菌种初始浓度，加快发酵进程，缩短制作时间，D正确。 2. 酸笋是螺蛳粉的“灵魂”。在自然发酵过程中，酸笋中的乳酸菌作为主要微生物分解蛋白质产生硫化氢等物质，形成了螺蛳粉的特殊风味。酸笋的传统发酵工艺包括原材料处理、装坛、发酵等过程。下列叙述正确的是（　　） A. 乳酸菌代谢类型为异养厌氧型，所以不会分布在空气中 B. 原材料处理主要是对采摘后的竹笋进行剥壳、清洗和灭菌 C. 装坛时应保证竹笋被盐水全部浸没，才能保证发酵的正常进行 D. 随着发酵的进行，发酵液pH逐渐升高后保持稳定 【答案】C 【解析】 【详解】A、在自然界中，乳酸菌分布广泛，空气、土壤、植物体表、人和动物的肠道内都分布有乳酸菌，A错误； B、竹笋中含有发酵的天然菌种，故不能对采摘后的竹笋进行灭菌，否则会杀死发酵的天然菌种，B错误； C、盐水浸没可以创造无氧环境，利于乳酸菌生存和繁殖，同时减少杂菌污染，C正确； D、乳酸逐渐积累导致发酵液pH逐渐降低后保持稳定，D错误。 3. 如图为将相同大小的含有不同抗生素的灭菌滤纸片 A~D放在培养基甲上，用于判断抗生素的杀菌能力，乙为甲培养一段时间后的结果。下列叙述错误的是（ ） A. 培养基甲中含有水、碳源、氮源、无机盐和琼脂 B. 用无菌水配制成细菌悬液，再均匀涂布于培养基甲 C. 根据抑菌圈直径大小可判断不同抗生素抑菌能力的强弱 D. 不同抗生素的抑菌能力大小为 D>C>A>B 【答案】D 【解析】 【详解】A、培养基甲是固体培养基，含有水、碳源、氮源、无机盐和琼脂，A正确； B、防止杂菌污染，需要用无菌水配制成细菌悬液，再均匀涂布于培养基甲，B正确； C、根据抑菌圈直径大小可判断不同抗生素抑菌能力的强弱，抑菌圈直径越大，说明抗生素的杀菌能力越强，C正确； D、由图乙可知，不同抗生素的抑菌能力大小为B>A>C>D，D错误。 4. 灭菌和无菌操作是获得微生物纯培养物的基础。下列操作正确的是（ ） A. 可以用浸泡在75%酒精中的涂布器直接涂布 B. 为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 C. 取出菌种后需马上塞上装菌种试管的棉塞，然后再划线 D. 接种环、培养皿等已灭菌，整个操作过程中还需要灭菌 【答案】D 【解析】 【分析】无菌技术操作的目的是防止外来杂菌的入侵。其具体操作如下： ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。 ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。 【详解】A、将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布，A错误； B、为了防止污染，接种环经火焰灼烧灭菌后需冷却才能挑取菌落，否则会烫死菌种，B错误； C、在火焰附近用接种环蘸取一环菌液，将试管口通过火焰，并塞上棉塞，然后再划线，C错误； D、每次划线前后，接种环都需要灼烧，接种完成后接种环还需要经过灼烧灭菌，D正确。 故选D。 5. 牛、羊等反刍动物的瘤胃中生活着多种微生物，实验小组通过如图所示的流程从瘤胃中分离出纤维素降解菌。下列叙述错误的是（ ） A. 可用高压蒸汽灭菌法对培养基灭菌 B. 丙培养基能增加纤维素降解菌的数量 C. ②过程所用的接种方法为平板划线法 D. 筛选的纤维素降解菌可能为厌氧型菌株 【答案】C 【解析】 【详解】A、培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法（121℃、100kPa、15~30分钟），可彻底杀灭微生物及其芽孢、孢子，A正确； B、丙为液体培养基，可进行扩大培养，增加纤维素降解菌数量，B正确； C、②过程是将液体培养的菌液接种到固体培养基，图中形成了单个菌落，可见是通过稀释涂布平板法得到的，C错误； D、瘤胃是厌氧环境，分离出的纤维素降解菌适应无氧环境，为厌氧型菌株，D正确。 故选C。 6. 某兴趣小组尝试进行“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验，下列有关该实验的叙述错误的是（　　） A. 原理：该细菌合成的脲酶可将尿素分解成氨，使培养基的碱性增强 B. 方法：以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，观察颜色变化 C. 分离：利用接种环在固体培养基表面连续划线，将聚集的菌种逐步分散 D. 计数：选取菌落数在30～300之间的平板统计，计数多个平板后求平均值 【答案】C 【解析】 【详解】A、分解尿素的细菌能合成脲酶，脲酶可将尿素分解为氨，氨为碱性物质，会使培养基的碱性增强，A正确； B、该实验用以尿素为唯一氮源的选择培养基筛选目标菌，加入酚红指示剂后，尿素分解产生的氨会使培养基pH升高，酚红指示剂变红，可据此鉴别目标菌，B正确； C、用接种环连续划线的方法是平板划线法，该方法仅能用于菌种的分离纯化，无法对细菌进行计数，本实验需要完成计数操作，应选择稀释涂布平板法接种，C错误； D、为减小计数误差，统计菌落数时需选取菌落数在30～300之间的平板，对多个符合要求的平板计数后取平均值，D正确。 7. 美蓝染料区分酵母菌活细胞和死细胞的原理是活酵母菌细胞能将进入的氧化型美蓝染料（呈蓝色）还原成无色，而死细胞不能还原，因此保持蓝色。在“培养液中酵母菌种群数量的变化”实验中，用图1所示的血细胞计数板计数，图2是其中某结构的放大示意图，图3表示用美蓝染料染色酵母菌后的结果。下列说法正确的是（　　） A. 先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取静止培养瓶中层培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入 B. 多余的培养液用滤纸吸去，稍等片刻，待酵母菌全部沉降到计数室底部，将血细胞计数板放在载物台中央，观察 C. 美蓝染料不能进入活酵母菌中，所以活酵母菌呈无色 D. 由图3可知，染色后的10mL酵母菌液中活酵母菌的数量为个 【答案】B 【解析】 【详解】A、使用血细胞计数板计数时，正确操作是先将盖玻片放在计数室上，再用吸管吸取培养液滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，而不是吸取“静止培养瓶中层培养液”，因为酵母菌在培养液中分布不均匀，应先摇匀再取样，A错误； B、多余的培养液用滤纸吸去后，需要稍等片刻，待酵母菌全部沉降到计数室底部，再将血细胞计数板放在载物台中央观察，B正确； C、美蓝染料是弱氧化剂，活酵母菌可将其还原为无色，而不是美蓝染料不能进入活酵母菌，C错误； D、图3中，计数原则是计无色菌体(活酵母)，一个中方格中活酵母是9个，25个中方格就是9×25=225个，计数室体积为0.1mm3=10-4mL，则10mL酵母菌液中活酵母数量为225÷10-4×10=2.25×107个，D错误。 故选B。 8. 下列关于发酵工程应用的说法，正确的是（　　） A. 食品添加剂可以增加食品营养，改善食品的色、香、味，使用时应尽量多添加 B. 利用放线菌产生的井冈霉素防止水稻枯纹病是化学防治的有效手段 C. 在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，同时提高动物免疫力 D. 从微生物细胞中提取的单细胞蛋白可制成动物饲料 【答案】C 【解析】 【分析】1、利用青贮原料上存在的乳酸菌等微生物，通过厌氧呼吸将青贮原料中的碳水化合物转化成有机酸，使pH值降到3.8~4.2，抑制有害菌的生长，从而实现长期保存饲料及其营养物质的目的。同时，微生物的活动使青贮饲料带有芳香酸甜的味道，提高了家畜的适口性。 2、微生物农药是非人工合成的、具有杀虫杀菌或抗病能力的生物活性物质的微生物制剂。微生物农药最大的优势在于能克服化学农药对生态环境的污染和减少在农副产品中的农药残留量，同时它的大面积应用可促进农副产品的品质和价格大幅上升，推动农村经济增长和农民增收。 【详解】A、食品添加剂过量使用会对人体健康造成影响，甚至危及生命，不能过量使用，A错误； B、利用放线菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病，这种治理不会对环境造成影响，属于生物防治，B错误； C、在青贮饲料中添加乳酸菌，通过乳酸菌的发酵，可以提高饲料品质，使饲料保鲜，同时提高动物免疫力，C正确； D、单细胞蛋白即微生物菌体，不需要从微生物细胞中提取，D错误。 故选C。 9. 植物利用硝酸盐需要硝酸还原酶，现有两种烟草硝酸还原酶缺失突变体，为探究两种突变体的突变是否在同一基因位点上，研究人员将两种突变体进行植物体细胞杂交。下列分析正确的是（　　） A. 两种突变体均不能在以硝酸盐作为唯一氮源的培养基上生长 B. 诱导两种突变体进行植物体细胞杂交时应先用胶原蛋白酶酶解得到原生质体 C. 细胞膜融合是细胞融合完成的标志 D. 若杂种细胞能在硝酸盐培养基上正常生长，说明两种突变体的突变位点相同 【答案】A 【解析】 【详解】A、两种突变体均为硝酸还原酶缺失突变体，无法利用硝酸盐，因此都不能在以硝酸盐作为唯一氮源的培养基上生长，A正确； B、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，获取原生质体需要用纤维素酶和果胶酶降解细胞壁，B错误； C、植物体细胞杂交中，杂种细胞再生出细胞壁才是细胞融合完成的标志，C错误； D、若两种突变体突变位点不同，两种突变体的正常功能基因可互补，杂种细胞能合成有活性的硝酸还原酶，可在硝酸盐培养基上生长；若突变位点相同，杂种细胞仍无正常功能基因，不能生长。因此杂种细胞能正常生长说明两种突变体的突变位点不同，D错误。 10. 研究者利用烟草外植体为材料，探究植物激素的影响，结果如图。下列说法错误的是（　　） A. 对外植体消毒处理可用酒精和次氯酸钠，需要用无菌水清洗 B. 步骤①通常需要无光的环境，形成的愈伤组织细胞具有全能性 C. 步骤④需要的植物激素的浓度比为1∶1 D. 培养烟草脱毒苗需要切取茎尖分生区组织 【答案】C 【解析】 【详解】A、植物组织培养中，对外植体消毒一般使用70%酒精和次氯酸钠，消毒后需要用无菌水冲洗残留消毒液，A正确； B、步骤①是脱分化，脱分化过程一般需要无光培养，形成的愈伤组织是未分化的薄壁细胞，仍具有全能性，B正确； C、根据题图和植物激素作用规律：生长素与细胞分裂素比值适中时促进愈伤组织形成，比值高促进生根，比值低促进生芽。步骤④是诱导丛芽，图中生长素浓度约为2.0mg/L，细胞分裂素浓度约为0.5mg/L，浓度比为4:1，C错误； D、植物茎尖分生组织几乎不含病毒，因此培养脱毒苗需要切取茎尖分生区组织，D正确。 11. 病毒感染果蔬后，会借助胞间连丝等结构扩散，导致果蔬产量和品质退化。通过植物组织培养技术，利用茎尖可以快速培育出脱毒苗。下列有关叙述正确的是（　　） A. 配制MS固体培养基时，经高压蒸汽灭菌后再调pH B. 植株茎尖细胞中不含病毒的原因可能是该组织胞间连丝不发达 C. 切取的植株茎尖用75%的酒精消毒后，需放在清水中反复清洗 D. 脱毒苗培育是否成功，最终还需要通过接种病毒进行个体水平的检测 【答案】B 【解析】 【详解】A、配制MS固体培养基时，需要先调节pH，再进行高压蒸汽灭菌，若灭菌后调pH会引入杂菌污染，A错误； B、题干说明病毒需要借助胞间连丝在植物体内扩散，茎尖分生组织分裂旺盛，胞间连丝不发达，病毒难以扩散至此，因此茎尖细胞一般不含病毒，表述合理，B正确； C、植物组织培养需要保证无菌环境，茎尖经70%酒精消毒30s后，然后立即用无菌水清洗2到3次，再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗2到3次，C错误； D、通过植物组织培养技术培育脱毒苗，是用茎尖等没有被病毒感染的组织培养植株，可以提高产量，其基因并没有改变，所以不可能有抗病毒的性状，脱毒苗培育是否成功，不需要通过接种病毒进行个体水平的检测，D错误。 12. 单克隆抗体因具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等优点，有重大应用价值。下图为单克隆抗体制备过程，下列叙述正确的是（ ） A. 给小鼠注射某种病原体后，小鼠体内可能产生多种特异性的抗体 B. 注射病原体一段时间后，从小鼠脾中分离得到的是同一种B淋巴细胞 C. HAT选择培养基中融合的细胞是能存活的，未融合的细胞会死亡 D. 图中克隆化培养杂交瘤细胞时，每个培养孔中尽量接种多个细胞 【答案】A 【解析】 【详解】A、给小鼠注射某种病原体后，由于病原体可能含有多种抗原，因此小鼠体内可能产生多种特异性的抗体，A正确； B、抗原注射一段时间后，从小鼠脾中分离到的B淋巴细胞不是同一种，而是多种B淋巴细胞，B错误； C、融合的细胞可能是同型融合的，只有异型融合的细胞才能在HAT选择培养基中存活，C错误； D、克隆化培养杂交瘤细胞时，要保证每个培养孔中尽量只接种1个细胞，这样才能保证是单克隆，D错误。 故选A。 13. 胚胎工程技术为现代畜牧业提供了快速繁育优良品种的途径。下列关于哺乳动物胚胎工程的叙述，正确的是（　　） A. 体外受精时，需将获能处理的精子与MI期的卵母细胞进行受精 B. 高等动物早期胚胎发育顺序为受精卵→囊胚→桑葚胚→原肠胚 C. 早期胚胎发育的卵裂期，细胞数量增加但胚胎总体积并不增加 D. 进行胚胎分割时，可选择发育正常的桑葚胚并将其内细胞团均等分割 【答案】C 【解析】 【详解】A、体外受精时，需要将获能处理的精子与处于MⅡ期的卵母细胞进行受精，A错误； B、高等动物早期胚胎发育的顺序为受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚，B错误； C、早期胚胎发育的卵裂期，细胞会进行有丝分裂，细胞数量增加，但胚胎的总体积并不增加，甚至略有缩小，C正确； D、进行胚胎分割时，应选择发育正常的桑葚胚或囊胚，对囊胚进行分割时需要将内细胞团均等分割，而桑葚胚没有内细胞团，D错误。 14. 基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（　　） A. 导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞 B. 利用农杆菌转化法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上 C. 扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'-端进行子链合成 D. 构建基因表达载体是该过程的核心步骤 【答案】A 【解析】 【分析】将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可整合到受体细胞的染色体DNA上。基因表达载体常包括目的基因、启动子、终止子、标记基因。标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 【详解】A、导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是乳腺细胞，而是受精卵或早期胚胎细胞，A错误； B、农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因的T-DNA整合到植物细胞中染色体的DNA上，B正确； C、引物的延伸方向为3'端，扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'－端进行子链合成，C正确； D、构建基因表达载体是基因工程的核心步骤，D正确。 故选A。 15. THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述错误的是（ ） EcoRI BamHI KpnI MfeI HindIII 5′−G↓AATTC−3′ 3′− CTTAA↑G−5′ 5′−G↓GATCC−3′ 3′− CCTAG↑G−5′ 5′−G↓GTACC−3′ 3′−CCATG↑G −5′ 5′−C↓AATTG−3′ 3′−GTTAA↑C −5′ 5′−A↓AGCTT−3′ 3′−TTCGA↑A −5′ A. THP9基因有2个游离的磷酸基团，而且游离的磷酸基团在5′端 B. 构建基因表达载体时，用MfeI、HindIII切割质粒，用EcoRI、HindIII切割目的基因 C. 利用PCR技术获取THP9基因时应选择引物1和引物4 D. 为了检测转基因玉米新品种的培育是否成功，需要在个体水平上检测其蛋白质含量 【答案】C 【解析】 【详解】A、THP9基因有2个游离的磷酸基团，而且游离的磷酸基团在每一条链的5′端，A正确； B、构建基因表达载体时，用MfeⅠ、HindⅢ切割质粒时，形成的黏性末端分别是AATT-3'和AGCT-3'，用EcoRⅠ、HindⅢ切割目的基因时，形成的黏性末端分别是AATT-3'和AGCT-3'，形成的黏性末端对应相同，可以成功将目的基因插入质粒，同时避免目的基因自身环化和反向连接，B正确； C、利用PCR技术扩增基因时，引物从5'端朝向3'端延伸，故应与模板链3'端配对，故应选择引物2和引物3，C错误； D、利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种，为了检测转基因玉米新品种的培育是否成功，需要在个体水平上检测玉米蛋白质含量，D正确。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 16. 葡萄酒中酒精度过高易引起消费者对健康风险的担忧。为检测不同非酿酒酵母在葡萄酒酿造中降低酒精度的应用潜力，研究人员以本土酵母（Hu）与酿酒酵母（Sc）为材料，检测不同接种方式下酒精度的变化情况，结果如下图所示。下列相关叙述正确的有（　　） A. 果酒制作的过程中酿酒酵母的最适生长温度约为35℃ B. 发酵过程中发酵液pH逐渐上升，可通过检测pH变化了解发酵情况 C. 接种Sc后发酵速率显著加快，说明Sc在酒精发酵过程中起主导作用 D. 根据曲线分析可知Hu能有效降低发酵过程中的酒精含量 【答案】CD 【解析】 【详解】A、果酒制作过程中，酿酒酵母的最适生长温度约为18-25℃，不是 35℃，A错误； B、发酵过程中，酵母菌会产生二氧化碳，二氧化碳溶于水会形成碳酸，使发酵液的 pH 逐渐下降，而不是上升，B错误； C、从曲线可以看出，单独接种 Sc（酿酒酵母）时，酒精度上升最快；而单独接种 Hu 时酒精度上升较慢。同时接种或先接种 Hu 再接种 Sc 时，酒精度也低于 Sc 单独接种的情况，说明 Sc 在酒精发酵过程中起主导作用，C正确； D、对比 Sc 单独接种和 “同时接种 Sc 和 Hu”“先接种 Hu 再接种 Sc” 的曲线，后者的酒精度均低于前者，说明 Hu 能有效降低发酵过程中的酒精含量，D正确。 故选CD。 17. 科研人员为获得高产乳糖酶的酵母菌，从牧区奶酪中进行菌种的分离和纯化，流程如图所示。其中X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。下列相关叙述错误的是（　　） A. 培养基甲和乙均属于液体培养基，其主要作用是扩大培养目的菌株 B. 将菌液接种到培养基乙所采用的方法是稀释涂布平板法 C. 菌落的蓝色深浅可反映酵母菌产生乳糖酶的量或活性，蓝色越深说明乳糖酶的产量或活性越高 D. 含 X-gal的培养基属于选择培养基，可筛选出能产生乳糖酶的酵母菌 【答案】AD 【解析】 【详解】A、培养基甲是液体培养基，将奶酪悬浮液接种到培养基甲中的目的是扩大培养，培养基乙是固体培养基，A 错误； B、将菌液接种到培养基乙所采用的方法是稀释涂布平板法，该方法可获得单菌落，B正确； C、X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色，菌落的蓝色深浅可反映酵母菌产生乳糖酶的量或活性，蓝色越深说明乳糖酶的产量或活性越高，C正确； D、X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色，含X-gal培养基从功能上划分，属于鉴别培养基，D错误。 18. “菘油1号”是将菘蓝与甘蓝型油菜的体细胞进行杂交培育而成的药食同源蔬菜，培育过程如图所示。其中紫外线照射能随机破坏细胞核中染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂，下列关于该培育过程的叙述，错误的是（ ） A. 需在低渗溶液中利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体 B. 经过上述体细胞杂交处理后，杂种植物主要保留菘蓝的核基因组，甘蓝型油菜的质基因组 C. 可采用灭活仙台病毒促进细胞膜上糖蛋白的相互识别，使得膜上脂质蛋白质重新排列，植物原生质体融合 D. 获得的“菘油1号”富含抗病毒成分，该类有效成分不是植物基本的生命活动所必需的产物 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、原生质体无细胞壁保护，若在低渗溶液中会大量吸水涨破。因此，去除细胞壁的操作应在等渗或高渗溶液中进行，以维持原生质体的形态和活性，A错误； B、题干中，紫外线照射菘蓝原生质体，破坏其细胞核中染色体结构，导致菘蓝的核基因组无法正常分裂和遗传；碘乙酰胺处理甘蓝型油菜原生质体，使细胞质中酶失活，抑制细胞分裂。因此，杂种细胞的核主要来自甘蓝型油菜，质主要来自菘蓝，B错误； C、灭活仙台病毒是动物细胞融合的诱导剂，植物原生质体融合常用的诱导方法是PEG（聚乙二醇）融合法、电融合法等，不使用灭活仙台病毒，C错误； D、抗病毒成分属于植物次生代谢产物，这类产物并非植物生长、发育、繁殖等基本生命活动所必需，而是植物适应环境、防御胁迫的特殊产物，D正确。 故选ABC。 19. 中国科学院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 用雌激素对雌性小鼠进行超数排卵处理可得到大量卵母细胞 B. 卵细胞、精子分别转化为phESC、ahESC，它们类似于胚胎干细胞 C. 图2可用显微操作法对卵细胞进行去核处理 D. 不考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成为XX、YY 【答案】BC 【解析】 【详解】A、超数排卵处理需要使用促性腺激素，而非雌激素，A错误； B、phESC（孤雌胚胎干细胞）和 ahESC（孤雄胚胎干细胞）分别由卵细胞、精子经激活、培养、转化得到，它们在功能和形态上类似于胚胎干细胞，具有发育的全能性，可经基因编辑后参与胚胎构建，B正确； C、图 2 中对卵细胞进行去核处理，常用的方法是显微操作法（在显微镜下用显微针吸出细胞核），这是核移植技术中的标准操作，C正确； D、不考虑致死，孤雄小鼠的染色体来源于两只雄鼠产生的精子，精子的性染色体为X或Y，所以其性染色体可能是XX、XY或YY，D错误。 故选BC。 20. 英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”，其培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述不正确的是（ ） A. 该技术不能避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 B. 精子获能后才能与MⅡ期的卵母细胞完成受精作用 C. “三亲婴儿”的染色体全部来自母亲提供的细胞核 D. “三亲婴儿”的培育还需要动物细胞培养、早期胚胎培养和胚胎移植等技术 【答案】AC 【解析】 【分析】分析题图：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。 【详解】A、根据图示可知，卵母细胞的细胞质来自于捐献者，母亲只取了细胞核，这可避免母亲的线粒体遗传基因传递给后代，A错误； B、获能（获得受精的能力）的精子和MⅡ中期卵母细胞可在专用的受精溶液中完成受精，B正确； C、三亲婴儿的染色体来自两个亲本，即父亲和母亲，C错误； D、三亲婴儿的培育运用了核移植技术，而且还需要采用动物细胞培养、早期培养培养技术、胚胎移植等技术，D正确。 故选AC。 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 北京传统小吃“豆汁”是一种以绿豆为原料，经过一系列制作工艺流程（如下图）得到的一种以酸味为主、掺杂着些许臭味的糊状流体食品。混浆操作通常是将老浆直接倒入绿豆乳中，混合浆的沉淀与酸化过程实际属于乳酸发酵，其主要产酸微生物为乳酸菌。某研究小组测定了豆汁制作过程中部分化学成分含量变化的有关数据（如下表）。回答下列问题： 浆状样品 可溶性蛋白/（mg/mL） 游离氨基酸/（mg/mL） 蛋白酶/（U/mL） 混合浆 5.60 0.31 1.19 酸浆Ⅰ 1.4 0.51 0.16 （1）混合浆发酵时所需的乳酸菌主要来自________。乳酸发酵过程中，能为乳酸菌同时提供氮源的物质主要是绿豆乳中的_____________。 （2）欲测定混合浆中乳酸菌的含量多少，研究小组采用的稀释涂布平板法测得的结果通常比实际值更低，原因是____________。 （3）分析表中数据，酸浆Ⅰ中的可溶性蛋白含量比混合浆低得多，推测其原因是__________。 （4）为了筛选出产酸能力强的乳酸菌菌种，研究小组将不同稀释倍数的酸豆汁液接种到MRS固体培养基（添加了质量分数1.5%碳酸钙，遇酸发生反应会出现透明圈）上，在适宜条件下培养一段时间后，应挑取____________的菌落进一步培养筛选。 （5）为了评估经传统工艺制得的豆汁安全性，研究小组又将不同稀释倍数的豆汁接种到所需培养基上培养，待长出菌落后，可根据菌落的_____________特征判断是否含有致病菌。 【答案】（1） ①. 老浆 ②. 蛋白质 （2）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 （3）乳酸菌发酵产生的乳酸使pH值下降，导致可溶性蛋白质变性沉淀；（乳酸菌分泌的）蛋白酶分解了部分可溶性蛋白质 （4）透明圈较大 （5）菌落的大小、形状、隆起程度和颜色等特征 【解析】 【分析】微生物发酵的原理是利用微生物（如细菌、真菌、酵母菌等）的生命活动，通过其代谢过程（包括分解代谢和合成代谢），将原料中的有机物转化为人类所需的产物。纯化微生物的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。 【小问1详解】 混浆操作通常是将老浆直接倒入绿豆乳中，混合浆发酵时所需的乳酸菌主要来自老浆，乳酸发酵过程中，能为乳酸菌同时提供氮源的物质主要是绿豆乳中的蛋白质。 【小问2详解】 测定混合浆中乳酸菌的含量多少时，采用稀释涂布平板法测得的结果通常比实际值要低，原因是当两个或多个乳酸菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，这样就会导致计数的菌落数少于实际存在的乳酸菌数量，从而使测量结果偏低。 【小问3详解】 分析表中数据，酸浆1中的可溶性蛋白含量比混合浆低得多，推测其原因是发酵过程中，乳酸菌发酵产生的乳酸使pH值下降，导致可溶性蛋白质变性沉淀；（乳酸菌分泌的）蛋白酶分解了部分可溶性蛋白质。 【小问4详解】 为了筛选出产酸能力强的乳酸菌菌种，将不同稀释倍数的酸豆汁液接种到MRS固体培养基（添加了质量分数1.5%的碳酸钙，遇酸发生反应会出现透明圈）上，在适宜条件下培养一段时间后，应挑取透明圈较大的菌落，因为透明圈大说明该乳酸菌产酸多，产酸能力强。 【小问5详解】 为了评估传统工艺制得的豆汁安全性，将不同稀释倍数的豆汁液接种到霉菌培养基上培养，待长出霉菌后，可根据菌落的大小、形状、隆起程度和颜色等特征判断，不同的霉菌具有不同的菌落形态等特征，可据此进行区分。 22. 蓝莓酸甜宜人、细腻多汁，被誉为“水果皇后”，由蓝莓酿制的蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”和“口服化妆品”等。如图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图，回答下列问题： （1）清洗蓝莓时应注意不能反复冲洗，以防止____。蓝莓酒所需微生物的代谢类型是______（从同化作用和异化作用两个方面考虑）型。 （2）蓝莓醋可以在蓝莓酒的基础上进行发酵，此过程主要发挥作用的微生物是______，其与酵母菌在结构上的主要差异是______，它进行醋酸发酵过程的化学反应式为______。 （3）兴趣小组三位同学设计的酿蓝莓酒的装置如下图所示，其中最合理的是_____瓶。发酵过程中右侧排气管连接长而弯曲胶管的目的是____________。 注：各发酵瓶的左侧管为充气管，右侧管为排气管 【答案】（1） ①. 菌种流失 ②. 异养、兼性厌氧 （2） ①. 醋酸菌 ②. 没有以核膜为界限的细胞核 ③. （3） ①. 乙 ②. 在排出气体的同时可以防止杂菌污染 【解析】 【小问1详解】 蓝莓酒制作过程中利用的是附着在蓝莓皮上的野生酵母菌，为防止酵母菌流失，不能对蓝莓进行反复冲洗；蓝莓酒所需微生物（酵母菌）的代谢类型为异养、兼性厌氧型。 【小问2详解】 醋酸菌以酒精为原料进行果醋发酵，蓝莓醋可以在蓝莓酒的基础上进行发酵，此过程主要发挥作用的微生物是醋酸菌。醋酸菌是原核生物，酵母菌是真核生物，醋酸菌与酵母菌在结构上的主要差异是醋酸菌没有以核膜为界限的细胞核。醋酸菌进行醋酸发酵过程的化学反应式为。 【小问3详解】 果酒发酵过程是无氧条件，且出气口不能没入发酵液，发酵液不能装太满，所以图中乙最合理。发酵过程中右侧排气管连接长而弯曲胶管的目的是在排出气体的同时，可以防止杂菌污染。 23. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图分析并回答下列问题。 （1）图中产生小牛的几个途径中，属于无性繁殖途径的有应用_____（填数字）。 （2）应用1中，为了大量获取细胞B，需对供体2注射_____，获得小牛的过程中使用了_____技术，最终获得的良种小牛性别为_____。 （3）供体1完成体内受精的场所在_____。在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其_____，胚胎移植前需要对受体进行_____处理。 （4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：对囊胚阶段的胚胎通过_____技术获得二分胚①和②，操作时需要注意_____，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 【答案】（1）1、3  （2） ①. 促性腺激素 ②. 体细胞核移植 ③. 雌性 （3） ①. 输卵管 ②. 获能 ③. 同期发情 （4） ①. 胚胎分割 ②. 将内细胞团均等分割 【解析】 【小问1详解】 应用1采用了核移植技术，形成克隆动物，属于无性生殖；应用2采用体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术，形成的是试管动物，属于有性生殖；应用4表示从早期胚胎中提取胚胎干细胞；应用3采用了胚胎分割技术，属于无性生殖，故图中产生小牛的几个途径中，属于无性繁殖途径的为应用1、3。 【小问2详解】 应用1中，为了大量获取细胞B，即卵母细胞，需要对供体2注射促性腺激素，使其超数排卵，使用动物体细胞核移植技术获得重组细胞，由于供体1是良种荷斯坦高产奶牛，其提供细胞核，所以最终获得的良种小牛为雌性。 【小问3详解】 供体1完成体内受精的场所是输卵管。在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行获能处理，因为获能后的精子才具备与卵细胞受精的能力，得到的胚胎应该移植到和供体同种的、生理状态相同的雌性动物体内，因此受体雌性动物需要经过同期发情处理。 【小问4详解】 应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：对囊胚阶段的胚胎通过胚胎分割技术获得二分胚①和②，对囊胚阶段的胚胎进行分割时需要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 24. 我国科研人员将兔毛角蛋白基因导入到棉花细胞中培育成新型品种“兔毛棉花”。它标志着纺织品已由天然纤维时代、化学纤维时代进入转基因时代。兔毛角蛋白基因片段和质粒的酶切位点如图所示。回答下列问题。 （1）可从兔毛囊细胞中提取总RNA，通过________合成cDNA，以此为模板设计特异性引物，通过PCR扩增得到兔毛角蛋白基因的完整编码区序列。 （2）为了使兔毛角蛋白基因能够正确地插入质粒中，PCR获取兔毛角蛋白基因时，需在引物a和引物b的______端分别添加酶切位点_____和________的识别序列。扩增缓冲液中Mg2+的作用是__________。 （3）采用农杆菌转化法将兔毛角蛋白基因导入棉花细胞中，其中Ti质粒所含T-DNA的作用是_______________。 （4）检测转基因棉花是否成功表达出兔毛角蛋白常用方法的原理是________。 【答案】（1）逆转录（反转录） （2） ①. 5′端 ②. EcoR I ③. Hind III ④. 激活DNA聚合酶的活性 （3）携带目的基因（兔毛角蛋白基因）整合到棉花细胞的染色体DNA上 （4）抗原-抗体特异性结合 【解析】 【小问1详解】 从兔毛囊细胞中提取总 RNA 后，通过逆转录（反转录）合成 cDNA，以此为模板设计特异性引物，通过 PCR 扩增得到兔毛角蛋白基因的完整编码区序列。 【小问2详解】 质粒上启动子和终止子之间有 Hind III、Xba I、EcoR I 位点。为了使目的基因正确插入并表达，应选择能将目的基因定向插入启动子和终止子之间的酶。根据转录方向和质粒图谱，Xba I有两个酶切位点不合适，则选择 Hind III 和 EcoR I 可保证目的基因的正确方向。 由于转录方向是由右向左，根据质粒中启动子的位置，则引物b的5'端添加HindIII酶切位点，引物a的5'端添加EcoRI酶切位点，扩增缓冲液中 Mg²⁺的作用是：作为DNA 聚合酶的辅因子，激活 DNA 聚合酶的活性，同时稳定引物与模板的结合。 【小问3详解】 采用农杆菌转化法将兔毛角蛋白基因导入棉花细胞中，其中 Ti 质粒所含 T-DNA 的作用是：携带目的基因（兔毛角蛋白基因）整合到棉花细胞的染色体 DNA 上，使目的基因能够稳定遗传给子代细胞。 【小问4详解】 检测转基因棉花是否成功表达出兔毛角蛋白常用方法的原理是：抗原-抗体特异性结合（即利用兔毛角蛋白作为抗原，制备特异性抗体，通过检测抗体与棉花提取物中蛋白质的结合情况，判断是否表达出目标蛋白）。 25. 水体中的雌激素能使斑马鱼细胞产生E蛋白，激活卵黄蛋白原（vtg）基因（如图1所示）的表达，因此斑马鱼可用于监测环境雌激素污染程度。为了实现可视化监测，科学家将斑马鱼的vtg基因，与人工构建的含萤火虫荧光素酶基因（无启动子）的载体（如图2所示）连接，形成vtg-Luc基因重组载体，成功培育了转基因斑马鱼。图2中Luc表示萤火虫荧光素酶基因，可以催化荧光素氧化产生荧光；Ampr为氨苄青霉素抗性基因，TetR表示四环素抗性基因，BamHI、EcoRI、HindIII、BstGI为限制酶，→表示转录方向。 （1）基因vtg启动子的基本组成单位是_____。选用限制酶EcoRI、HindIII进行双酶切Luc基因载体，其优点是______________。 （2）为使vtg基因与Luc基因载体形成重组载体，通过PCR技术扩增vtg基因时，需设计合适的引物。依据图1、图2信息推测引物1包含的碱基序列为5′-__-3′。 （3）筛选导入vtg-Luc基因重组载体的大肠杆菌，为确定这两个基因是否在大肠杆菌体内转录，应检测________。 （4）利用_______方法将vtg-Luc基因重组载体导入斑马鱼。若要判断斑马鱼转基因是否成功，可在水体中添加_______进行检测。 【答案】（1） ①. 脱氧核苷酸##脱氧核糖核苷酸 ②. 确保质粒与目的基因正向连接（防止目的基因、质粒自身环化或质粒与目的基因反向连接） （2）5′-GAATTCAACTAT-3′ （3）vtg基因和Luc基因的mRNA （4） ①. 显微注射技术 ②. 雌激素和荧光素 【解析】 【小问1详解】 基因vtg启动子是一段DNA序列，其基本组成单位是脱氧核苷酸（脱氧核糖核苷酸）。选用限制酶EcoRⅠ、HindⅢ进行双酶切Luc基因载体，可以防止目的基因、质粒自身环化或质粒与目的基因反向连接，从而实现质粒与目的基因正向连接。 【小问2详解】 转录的方向从启动子开始，且结合图1、图2可知，vtg基因的启动子端应与EcoRⅠ的识别位点端连接，含有EcoRⅠ的识别序列，且含有能与相应模板链碱基互补配对的碱基序列，故引物1包含的碱基序列为5′-GAATTCAACTAT-3′。 【小问3详解】 转录的产物是RNA，故为确定这两个基因是否在大肠杆菌体内转录，应检测vtg基因和Luc基因的mRNA。 【小问4详解】 将目的基因导入动物细胞最常用的方法是显微注射技术，故可利用显微注射技术将vtg-Luc基因重组载体导入斑马鱼。结合题意，水体中的雌激素能使斑马鱼细胞产生E蛋白，激活卵黄蛋白原（vtg）基因的表达，且Luc表示萤火虫荧光素酶基因，可以催化荧光素氧化产生荧光，故可在水体中添加雌激素和荧光素判断斑马鱼转基因是否成功。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $