选择性必修3 综合检测卷一-【金试卷】2025-2026学年高二生物选择性必修2&选择性必修3同步单元双测卷（人教版）

第三部分 综合检测卷 选择性必修3综合检测卷一 建议用时：75分钟满分：100分 一、单项选择题（本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题 给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的) 1.如图为利用装置进行传统果酒发酵的示 微生物 过滤膜 意图，下列叙述错误的是 通气口 一接种口 密 A.在酒精发酵的过程中，先通气后关 阀门 阀门 h B.可以通过观察烧杯中有无气泡来判断 封 是否有酒精生成 興 C.果酒和果醋发酵，分别利用微生物自身的无氧呼吸和有氧呼 吸来产生酒和醋 线 D.果酒发酵过程中，将阀门打开并接种醋酸菌便可能有醋酸 生成 2.下列有关微生物实验室培养的说法，不正确的有几项() 内 ①微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步 骤②扩大培养时用不加琼脂的液体培养基效果更好③稀释 涂布平板法是需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基 不 表面④灭菌是指杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子 ⑤用选择培养基筛选特定菌种时，需要设置一组用完全培养基培 养的实验作为对照，两者所接种的菌种不同⑥稀释涂布平板法 設 进行梯度稀释时，要用移液管吹吸试管中溶液几次，目的是达到 足够稀释倍数⑦平板划线在第二区域内划线时，接种环上的菌 答 种直接来自第一次划线末端 A.1项 B.2项 C.3项 D.4项 3.如图为从土壤中分离能降解对羟基苯甲酸的细菌的实验过程，有 颗 关叙述正确的是 () 将土壤样品接种到含 有对羟基苯甲酸的液 涂布到含有对羟 体富集培养基中 基苯甲酸的培养 平板表面 菌落在平 培养 培养 板上生长 ○培养 ① ② ③ ④ ⑤ 丝 A.上述用到的培养基先进行灭菌处理再调pH 邻 B.该实验中①→②→③的培养过程能够提高目的菌种的浓度 C,④的操作需借助移液枪和接种环，且在酒精灯火焰附近进行 D.⑤平板可以对筛选的菌落进行计数，从而统计土壤中含有多 少目的菌株 4.一定浓度的福尔马林（甲醛的水溶液）通过使蛋白质变性而起防 腐作用，可从活性污泥中分离出高效分解甲醛的细菌，以处理废 弃的福尔马林。如图是筛选和纯化甲醛分解菌的实验过程示意 图，其中LB培养基能使菌种成倍扩增。下列相关叙述错误的是 () 10 mL 10 mL 接种 ①制取菌②LB培养基， ③无机液体培养基+ 悬液 振荡培养 甲醛，振荡培养 取样测定 马门挑取不同菌 甲醛浓度 落分别接种 ④无机固体培养基+ 甲醛，恒温培养 ⑤无机液体培养基+ 甲醛，振荡培养 A.筛选甲醛分解菌的培养基中要添加甲醛作为唯一的碳源 B.③→④接种的目的是通过形成单个菌落分离出甲醛分解菌 C.步骤⑤中，各个培养瓶中的甲醛溶液要有一定的浓度梯度 D.测定并选出甲醛浓度最低的培养瓶后，筛选对应的菌株 5.如图表示用两种不同技术将草莓①培育得到草莓②和③。若不 考虑突变，下列叙述正确的是 ( ) 草莓③愈伤组织花粉丁 草莓①匍匐茎 A.两种技术培育得到子代草莓均体现了植物细胞的全能性 B.①→③的过程经过了脱分化和再分化 C.愈伤组织的形成过程需要适宜的营养、光照和激素 D.两种技术培育得到的草莓遗传信息相同 6.良种试管牛的繁殖过程是用激素促进甲牛多排卵，然后把卵子在 体外与人工采集的乙牛的精子进行受精，在特定培养基中培育成 胚胎，再把胚胎送入经过激素处理的丙牛的子宫内，孕育成试管 牛。下列相关叙述错误的是 () A.精、卵结合前都需要进行培养 B.“促进甲牛多排卵”的激素是孕激素 C.甲牛、乙牛对试管牛核遗传物质的贡献相同 D.该技术可应用于加快优良种畜的繁殖 7.CD47是一种跨膜糖蛋白。它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋 白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿 瘤细胞表面的cD47含量比正常细胞高1.6~5倍，导致巨噬细 胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗CD47的单克隆抗体 可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如图流程进 行了实验。 CD47兔疫BALB/c小鼠取出脾脏细胞 ① 、融合 杂交瘤细胞→单克隆抗体 骨髓瘤细胞 ③ ③加入 实验组：巨噬细胞十肿瘤细胞共培养体系 ④检测 巨噬细胞的吞噬指数 下列叙述不正确的是 ) A.多次进行步骤①的目的是获得更多分泌抗CD47抗体的浆 细胞 B.步骤②中可以利用聚乙二醇或灭活的病毒诱导完成细胞融合 C.经筛选可得到既能产生抗CD47抗体又能无限增殖的杂交瘤 细胞 D.对照组应在巨噬细胞十正常细胞共培养体系中加入单克隆 抗体 8.某女性的线粒体携带某种致病基因，她的前两个孩子因患该病天 亡。后来她接受了一个健康女性捐赠的卵母细胞，生育了一个 “三亲婴儿”，如图所示。下列叙述错误的是 () 卵母细胞A 微型吸管 ⊙ 卵母细胞B 移植入 →0 受精O胚膜 子宫继→个体 培养 续发育 A.卵母细胞A取自健康女性 B.取卵之前，两女性都要注射促性腺激素 C.“三亲婴儿”的性别与提供细胞核的患病女性相同 D.可用电刺激、Ca2+载体、乙醇等激活重构胚 9.如图表示培育转基因克隆羊和胚胎工程的部分操作流程，其中字 母代表有关结构或个体，数字代表过程、方法。下列有关说法错 误的是 () 含有目的 6 c g h ①细②单个 d e 基因的体 。厚⑤代孕后代 细胞 群 倒胞属二母厂小羊 构 采集卵母细胞/④图厨胚胎干细胞 胎 A.图中过程①~⑦所涉及的生物技术有重组DNA技术、动物细 胞培养、早期胚胎培养、胚胎移植、动物体细胞核移植等 B.通过过程①、②获取分散的细胞时，用到的酶是胰蛋白酶（或 胶原蛋白酶)，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞 通常会停止分裂增殖，这种现象称为接触抑制 C.图中动物细胞培养过程中应将细胞置于5%C02的气体环境 中，此培养过程中为防止杂菌感染，需要添加一定量的抗生素 D.通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、 易操作、营养物质丰富外，还因为它含有促进细胞核全能性表 达的物质 选择性必修355 10.新冠病毒是一种RNA病毒，极易产生变异，其通过表面刺突蛋 白(S蛋白)的受体结合域(RBD)与人体细胞表面的ACE2受体 相互作用而感染细胞。科学家设计了一种自然界中不存在的蛋 白质LCB1,可与S蛋白的RBD紧密结合，以干扰新冠病毒的 感染。下列有关说法错误的是 () A.LCB1的作用效应与抗S蛋白抗体类似 B.可用蛋白质工程进行LCB1的设计和生产 C.新冠病毒侵入人体后可在内环境中大量增殖 D.易感人群即使注射疫苗也仍然具有被感染的可能 11.在基因工程操作中，科研人员利用两种限 Marker R R2 R+R2 制酶(R,和R2)处理基因载体，并进行了负极bp而 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，结果如图所 示。以下相关叙述中，正确的是（) 正极 A.电泳时，可以不加入Marker 缓冲液 B.该载体最可能为环形DNA分子 C.限制酶R1与R2的切割位点最短相距400bp D.两种限制酶在载体上识别的序列可能相同 12.滁菊为菊科多年生草本植物，长期营养繁殖易造成病毒积累，导 致滁菊花色劣变。某科研小组比较了3种脱毒方法对滁菊体内 菊花B病毒(CVB)和菊花矮化类病毒(CSVd)脱除的效果，结 果见表；如图是对不同试管苗进行RT-PCR(逆转录PCR)后的 电泳示意图（引物根据CVB的基因序列设计）。下列叙述错误 的是 ( ) 不同脱毒方法对滁菊茎尖脱毒率的影响 样本存 脱除CSVd 脱除CVB 脱毒方法 活数 率(%) 率(%) 茎尖分生 77 20.78 44.16 组织培养 热处理结合 71 36.62 63.38 茎尖培养 利巴韦林结 71 46.48 49.30 合茎尖培养 M12345 M:阳性对照1：阴性对照 56 选择性必修3 A.PCR过程用到的DNA聚合酶的一个特性是要耐高温 B.热处理、利巴韦林处理后，试管苗存活率下降 C.试管苗2、5尚未脱毒成功，3、4已脱去CSVd和CVB D.只脱除CSVd时，可选择利巴韦林结合茎尖分生组织培养 13.如图1为某种质粒的简图，箭头所指分别为限制酶EcoR I、 BamH I的酶切位点，P为转录的启动部位。已知目的基因的 两端均有EcoR I、BamH I的酶切位点（如图2），受体细胞为 无任何抗药性的原核细胞。下列叙述正确的是 ) EcoR I BamH I 青霉素 抗性基因 四环素 EcoR I BamH I 抗性基因 ▣ BamH I EcoR I 图1 图2 A.将含有目的基因的DNA片段与质粒分别用EcoR I酶切， 在DNA连接酶作用下，由两个DNA片段连接形成的产物 有两种 B.DNA连接酶可将酶切后得到的质粒和含目的基因的DNA 片段连接起来，形成一个重组质粒时形成两个磷酸二酯键 C.为了防止目的基因和质粒自身环化，酶切时可选用的酶是 EcoR I和BamH I D.若受体细胞能在含青霉素的培养基中生长，则表明目的基因 已成功导入该细胞 14.3葡聚糖酶是一种在酒类、饲料等行业中具有重要用途的工业用 酶。为提高3葡聚糖酶的催化活性，科学家将其第20位、117位 和165位赖氨酸突变为丝氨酸。下列有关叙述正确的是（) A.对β葡聚糖酶结构的改造属于蛋白质工程 B.改造后的阝葡聚糖酶虽然氨基酸改变了，但是空间结构未变 C.蛋白质工程操作过程中，不需要酶和载体作为工具 D.蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异 15.生物技术就像“一把双刃剑”：它既可以造福人类，也可能在使用 不当时给人类带来潜在的危害。下列关于生物技术的叙述，错 误的是 ( A.目的基因转入植物中最好的结果是既能获得转基因目的植 株又能防止转基因花粉的传播 B.转基因产品具有优良的品质，实验室培育的转基因产品可直 接上市推广 C.生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等 D.消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重 要方面 二、不定项选择题（本题包括5小题，每小题3分，共15分。每小题 给出的四个选项中，有的只有一个选项正确，有的有多个选项正确， 全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分) 16.某生物小组在初步筛选产耐高温淀粉酶分解菌时，将土壤样液 接种在平板上，培养结果如图(D/d=透 明圈直径/菌落直径)。下列叙述错误的 D/d=1.8D/d=1.2 是 甲（○ A.土壤可取自高温热泉环境 D/d=2.2 D/d=1.1 B.接种方法为稀释涂布平板法 丙(O O丁 C.培养温度应控制在37℃左右 D.菌落乙的淀粉酶活性较高 17.为拓宽白菜育种的基因资源，改良白菜品质，研究人员以白菜和 甘蓝为材料进行植物体细胞杂交，得到杂种植物。对两种亲本 和某融合植株进行细胞DNA相对含量的检测，结果如图。下 列说法错误的是 ( ) 个细胞数目相对值 细胞数目相对值 600H 600 500 白菜 500 甘蓝 400 400 300 300 200 200 100H 100 50100150200250300 50100150200250300 DNA相对含量 DNA相对含量 ↑细胞数目相对值 600 500 待检测植株 400 300 200 100 50100150200250300350 DNA相对含量 A.若检测的白菜细胞均处于细胞周期中，则DNA相对含量为 50的白菜细胞可能为分裂期细胞 B.可以用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁 C.可以用PEG或灭活的病毒诱导原生质体融合 D.待检测植株可能为融合的甘蓝一甘蓝植株 18.如图是利用生物工程技术培育转荧光蛋白基因克隆猪的过程。 下列叙述正确的是 () 胚胎成纤 去核卵 维细胞核、 了母细胞 荧光蛋 ① 白基因②重组③重构④早期⑤受体转荧光蛋白 质粒质粒胚 胚胎雌猪基因克隆猪 A.①②过程都属于基因工程的范畴 B.③过程常用显微注射法，注射前需先用Ca+处理重构胚 C.④过程中胚胎须发育到囊胚或桑葚胚阶段 D.⑤过程为胚胎移植技术，可充分发挥雌性优良个体的繁殖 潜力 19.中国科学院动物研究所首席科学家、动物克隆与受精生物学学 科带头人陈大元，曾主持科研攻关项目—“攀登”，进行大熊猫 的异种克隆。他们将大熊猫的体细胞核放入兔子的去核卵母细 胞中，得到重构胚，并使其成功发育成囊胚.标志着异种核质相 容的问题得到解决，异种克隆大熊猫迈过了第一道“坎”；然后至 关重要的是选择一种合适的“代孕母体”。如图是该研究的理论 流程图。下列说法错误的是 对兔子 进行特 殊处理 超数排卵 步骤 重组 步骤 产下 胚胎 克隆 培养 幼崽 大熊猫 体细胞 A.步骤甲、乙分别指大熊猫体细胞核移植、胚胎收集 B.诱导超数排卵所注射的激素为促性腺激素释放激素 C.重构胚发育成早期胚胎所需营养主要来源于培养液 D.步骤甲中的大熊猫不需要进行同期发情处理 20.研究人员比较了不同储藏条件对棉叶DNA纯度及提取率（提 取率越高，获得的DNA越多)的影响，实验结果如图所示。下 列有关叙述正确的是 () 2.50 2.00 1.50 1.00 0s50 0.00 鲜叶冷鲜冷冻冷冻液氮硅胶 3d3d7d7d干燥7d 350 300 250 200 50 鲜叶冷鲜冷冻冷冻液氨硅胶 3d3d7d7d干燥7d A.提纯DNA时可加入酒精去除蛋白质等物质 B.新鲜棉叶提取的DNA纯度最高，提取DNA的量也最多 C.木瓜蛋白酶和不同浓度的NaCI溶液均可用于提纯DNA D.用二苯胺试剂鉴定，蓝色最深的是冷冻3d处理后提取 的DNA 三、非选择题（本题包括5小题，共55分） 21.(10分)“口嚼酒”因日本著名动画电影导演新海诚的新作《你的 名字》而引起人们的关注。世界上有些地方很早就有口嚼酒的 记载。请回答下列相关问题： (1)口嚼酒的做法：首先需要先将米煮熟，然后放入口中咀嚼一 段时间。直至米粒变为糊状，再将其吐出装入特制容器，令其发 酵。在口中咀嚼的作用可能是 (2)参与口嚼酒形成初期的微生物主要是来自空气中的 ,其产生酒精的场所是 末 期形成酸味，可能是因为密封不严产生了 等物质。 (3)口嚼酒是一种自酿酒，卫生条件难以把握，会有杂菌滋生的 危险。某生物兴趣小组想探究口嚼酒制作过程中会滋生哪些微 生物。进行了进一步的实验，请完善并分析实验步骤： ①制作口嚼酒 ②制作培养基 ③接种：每天同一时间将口嚼酒液体摇匀后，用稀释涂布平板法 进行接种。该方法使用到的工具有 (填字母，多选)。 接种后在培养皿的 注明培养日期，将所有培养基放在 相同且适宜的环境下培养。 (4)经过一段适宜时间后，观察不同培养基上 的数目和形态，并进行品种鉴定。 (5)上述实验在时间上已形成前后对照，但是还需要设置一个空 白对照，目的是 22.（12分)新冠疫情的快速控制，离不开政府的科学决策和我国对 新冠病毒(RNA病毒)的快速检测能力。荧光定量PCR技术可 定量检测样本中的DNA含量，其原理是在PCR反应体系中加 人引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针（被荧光标记 的核苷酸链)，当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处 会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次， 就有一个荧光分子生成（如图1）。随着PCR的进行，荧光信号 的强度也等比例增加，可通过荧光强度的变化监测产物量的变 化，从而得到一条荧光扩增曲线图（如图2）。Ct值（循环阈值） 的含义为每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循 环数。请回答下列问题： 荧光探针 L平台期 引物1 3 5' 5 引物2 指数扩 荧光 增阶段 3 值 3 背景信号阶段 Cycle(循环数) 图1 图2 (1)上海团队是利用体外培养的人肝癌细胞分离出新型冠状病 毒毒株的。体外培养人肝癌细胞时，应满足所需要的营养、 、温度、pH和渗透压、气体环境等条件。若使用 合成培养基还需要添加血清，是因为 (2)新冠病毒是一种单链RNA病毒，检测时取检测者的mR NA,在逆转录酶的作用下合成cDNA,再在反应体系中加入引 物、 、4种脱氧核苷酸(dNTP)、缓冲体 系、荧光标记的新冠病毒核酸探针。引物的作用是 PCR每个循环包括 3个阶段。 (3)图2中“平台期”出现的最可能的原因是 0 理论上，在检测过程中，有荧光标记的“杂交双链”出现，则说明 检测结果呈 (填“阴”或“阳”)性，但为了保证检测结果 的准确性，一般要达到或超过阈值时才确诊，C值越大表示被 检测样本中病毒数目越 23.(13分)体细胞胚发生是植物体细胞经体外培养再生成胚状体 并发育为完整植株的过程。研究发现L基因在棉花胚状体形 成过程中差异表达，研究者对其功能进行了研究。 (1)棉花体细胞胚发生通过 技术实现，外植体 需经过 形成非胚性愈伤组织，再分化成胚性 愈伤组织并进一步形成胚状体。 (2)研究者取L基因超表达和干扰L基因表达的转基因棉花的 下胚轴，接种在培养基上诱导胚状体的发生，结果如图1。 100 思 80 60 ◆L基因超表达 ▲对照组 40 一干扰L基因表达 0 40d 50d 60d80d时间 图1 ①培养基应含有 (有机物、无机物至 少各1种)等营养物质。接种前，下胚轴需进行 处理。 选择性必修357 ②据图1可知，L基因表达 胚性愈伤组织的提前分化。 (3)L基因表达产物可结合靶基因启动子并激活转录，研究发现 L基因超表达的棉花细胞中P蛋白含量增加。为探究P基因 是否为L基因调控的靶基因，研究者克隆出P基因的启动子， 经处理后连接荧光素酶(LUC)基因构建表达载体，导入烟草的 原生质体，结果如图2。 缺失a区的P ▣对照组 基因启动子 口实验组 a区突变的P 基因启动子 缺失b区的 基因启动子 P基因启 动子全长 00.00030.00060.00090.0012 LUC基因表达水平相对值 图2 ①实验组原生质体还应导入 ②结果说明： (4)P蛋白可抑制生长素极性运输。为探究生长素运输对胚状 体形成的影响，研究者将生长素运输抑制剂添加到培养基中，检 测胚性愈伤组织的分化率，结果如图3。 100 80 ◆ ◆L基因超表达 60 士对照组 40 ·干扰L基因表达 20 0 40d50d60d 80d时间 图3 ①比较图1、图3结果，表明生长素运输抑制剂处理可以 ②实验结果不能说明“L基因仅通过影响生长素的运输进而影 响胚状体的形成”，理由是 24.(10分)我国科学家在体细胞克隆猴的培育过程中，为了调节相 关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人员将组蛋白 去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，同时用组蛋白脱 乙酰酶抑制剂TSA处理了它。培育克隆猴的流程如图所示，回 答下列问题： 58选择性必修3 用灭活的仙台 胎猴取出体细胞 病毒短暂处理 母猴→ 卵母细胞 去核 去核卵母细胞 Kdm4d的 融培 mRNA 合养 注入 克隆生出 代孕 胚胎移植、 重构胚← 小猴 母猴 处理 TSA (1)体细胞克隆猴的培育过程中用到的动物细胞工程技术是 (答出2点即可)。 (2)卵母细胞通过 去核，去核的原因是 0 (3)在进行胚胎移植前，可通过胚胎分割增加克隆数量，应选择 期的胚胎进行分割。 (4)试分析组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA和组蛋白脱乙 酰酶抑制剂TSA发挥作用的机制： (5)体细胞克隆猴一出生就轰动了全世界，该项成果可以提供遗 传背景相同或相似的实验动物，克隆猴的培育大大促进了对人 类疾病的研究和治疗。但是科学家对此项技术有所担心，原因 是 25.(10分)科学家卡彭蒂娜和杜德娜发现，细菌中存在清除入侵病 毒DNA的功能系统，并发明了CRISPR/Cas9基因编辑技术， 因此获得2020年诺贝尔化学奖。该系统主要包含向导RNA (sgRNA)和Cas9蛋白两部分：sgRNA能特异性识别结合特定 的DNA序列，从而引导Cas9蛋白到相应位置剪切DNA,最终 实现对靶基因序列定点编辑，其工作原理如图1所示。科研人 员通过诱变得到丧失剪接功能的dCas9,并建构CRISPR/ dCas9系统，保留了sgRNA引导进入基因组的能力；dCas9与 VP64、P65等转录激活因子融合，形成的dCas9一SAM可用于 基因调控等研究。请据图回答下列问题： ,链 Cas9蛋白 目标DNA CC DD可 识别序列 向导RNA mt Trm匹-目标DNA 重新连接 TmT女 图1 sgRNA序列 acasVP6④E6⑤RAD dCas9-SAM质粒 动 sgRNA质粒 G418抗性基因 嘌呤霉素抗性基因 .o 图2 (1)CRISPR/Cas9系统能精准识别相关基因，依据的原理是 sgRNA与目标DNA发生 ;Cas9蛋白可催化 (填化学键名称)水解，剪切特定DNA片段。 CRISPR/Cas9系统广泛存在于细菌等原核生物中的生理意义 是 (2)将OCT4、KLF4、MYC及SOX2四个基因的sgRNA序列串 联成的SgRNA质粒和dCas9一SAM质粒与磷脂等混合，形成 包埋DNA脂质体，将脂质体加入到细胞系MCF7的细胞培养 皿中（如图2），即可将外源DNA导人细胞中，24h后通过添加 筛选并进行单细胞培养即可得到 基因编辑后的细胞。此过程须在37℃，气体环境为 的细胞培养箱中进行。该实验通过4种 sgRNA对MCF7细胞进行基因编辑，可实现多基因 的目的。 (3)实验发现，CRISPR/Cas9基因编辑技术有时存在编辑对象 出错而造成“脱靶”，sgRNA的序列长短影响成功率，序列越短， 脱靶率越高。分析脱靶最可能的原因是 (4)为了获得某水稻品种的不育系，研究人员利用Cas9蛋白对 该品种的TMS5基因进行编辑。首先从水稻组织中提取总 RNA,经逆转录获得总cDNA,然后通过PCR技术可准确扩增 出TMS5基因，原因是 在筛选出成功导入TMS5基因表达载体的水稻愈伤组织后，经 多代培养仍能提取出TMS5基因，你认为TMS5基因是否已成 功转化？说明你的观点及理由：14.答案：(1)三种目的基因间发生反接或自身环化现象EcoR I、EcoR V、T4DNA 连接酶(2)构建基因表达载体2(3)花粉管通道1：1(4)杂合植株做父本 产生两种花粉，携带串联基因的花粉中α一淀粉酶基因会造成花粉败育，不携带串 联基因的花粉虽然可以作为雄配子，但不会导致基因漂移串联基因中有红色荧 光蛋白基因且只能在种子中表达，故自交后代可通过种子的颜色进行分选 解析：(1)用图中不同的限制酶切割目的基因后进行串联可以有效防止三种目的基 因间发生反接或自身环化现象，将串联成功的基因插入载体，串联成的目的基因两 端有EcoR I、EcoR V两种限制酶的酶切序列，同时载体中也有这两种限制酶的酶 切序列，因此需要向反应体系中加入的酶有EcoR I、ECoR V、T4DNA连接酶，这 样可以保证相应的基因有效切割，并正确连接。(2)为保证串联的基因都能在转基 因水稻中成功表达，至少需要2种启动子，因为正常的OsNP1基因和α一淀粉酶基 因需要在花粉细胞中表达，而红色荧光蛋白基因只能在种子中表达，因此至少需要 2种启动子。(3)串联基因导入OsNP1突变的雄性不育植株后形成的杂合植株自 交，杂合植株恢复育性，但带有转基因的花粉表现为不育，即只能产生一种不带有 转基因的花粉，因此后代雄性不育植株与转基因植株的比例为1：1。 15.答案：(1)能吸收周围环境中DNA分子卡那霉素和X一gal白色 (2)EcoR I、SmaI和DNA连接RNA聚合酶四尾栅藻 (3)BD (4)添加对照组，即废水培养非转基因四尾栅藻11天后，检测总氨、总磷和氟化物 的含量 解析：(1)农杆菌转化法中用Ca2+处理大肠杆菌，可使细胞处于感受态，即能吸收 周围环境中DNA分子的生理状态。分析题图可知，目的基因插入LacZ基因中，使 该基因被破坏.由“LacZ基因编码产生的酶可以分解物质X一ga…白色”与质粒 中含有卡那霉素抗性基因可知，选择培养基应添加卡那霉素和X一gl物质。培养 基中导入了没有连接目的基因的质粒的大肠杆菌菌落呈蓝色，导入了重组质粒的 大肠杆菌菌落呈白色。(2)过程④为基因表达载体的构建。若将目的基因与质粒 采用同一种限制酶酶切，由于在进行连接反应时，目的基因和栽体是随机碰撞的， 因此目的基因既可以与质粒正向连接，又可以反向连接，还可以自身环化。而反向 连接的目的基因不能正常表达。为了防止出现反向连接和自身环化，实验中常用 双酶切的方法。由图可知，应选用EcoR I和SaI切割，切割后获得的目的基因 和载体需用DNA连接酶进行连接。启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的位 点，要达到让DGAT1基因在四尾栅藻细胞中表达的目的，应在DGAT1基因上游 添加四尾栅藻启动子。(3)根据碱基互补配对原则、DNA为反向平行双螺旋结构 及在Tag DNA聚合酶作用下脱氧核苷酸添加到引物的3'端可知，应选引物BD。 (4)要想证明转DGAT1基因显著提高了四尾栅藻的去污能力，应添加对照组：废 水培养非转基因四尾栅藻11天后，检测总氮、总磷和氟化物的含量。 第三部分综合检测卷 选择性必修3综合检测卷一 1.B酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸均可产生C02,故不能通过观察烧杯中有无气泡来 判断是否有酒精生成，B错误；果酒制作利用酵母菌无氧呼吸产生酒精，果醋制作利 用醋酸菌有氧呼吸产生醋酸，C正确；醋酸菌是好氧菌，可将酒精转变为醋酸，D 正确。 2.B用选择培养基筛选特定菌种时，需要设置一组用完全培养基培养的实验作为对 照，两者所接种的菌种相同，⑤错误；梯度稀释过程中，用移液管把菌液从一支试管 转移到下一支试管后，要用手指轻压移液管的橡皮头，吹吸三次的目的是使菌液与 水充分混匀，⑥错误。 3.B培养基需先调pH再灭菌，A错误；实验中①→②→③过程是扩大培养过程，可 增加目的菌种的浓度，B正确；由⑤可知，平板培养的接种方法是稀释涂布平板法， 需借助移液枪和涂布器，C错误；虽然稀释涂布平板法可以用于计数，但该实验进行 了富集培养，故⑤平板不能用于统计土壤中目的菌株数目，D错误。 4.C由题意可知，由于甲醛分解菌能利用甲醛作为碳源，而不能分解甲醛的微生物不 能利用甲醛作为碳源，所以筛选甲醛分解菌的培养基中要添加甲醛作为唯一的碳 源，在此培养基上不能分解甲醛的微生物因缺少碳源而不能生长，A正确；③过程可 以筛选出能分解甲醛的微生物，④过程可以获得单菌落，接种的目的是通过单个菌 落分离出甲醛分解菌，B正确；步骤⑤中，各个培养瓶中甲醛溶液的浓度要相同，将 不同的甲醛分解菌分别接种到各个培养瓶中，一段时间后检测培养瓶中甲醛的浓 度，选出甲醛浓度最低的培养瓶后，筛选对应的菌株可获得分解甲醛能力强的甲醛 分解菌，C错误、D正确。 5.B①通过匍匐茎最终形成草莓②的过程是营养生殖，在原来茎的基础上重新分化 形成了根，没有体现植物细胞的全能性，A错误；①→③的过程属于植物组织培养过 程，经过了脱分化和再分化，B正确；愈伤组织形成过程中不需要光照，再分化过程 中才需要光照，C错误；草莓③是经花药离体培养得到的，其遗传信息与草莓②不相 同，D错误。 6.B从大型动物体中采集的卵母细胞，要经体外人工培养成熟后才具备受精能力，精 子也需要进行获能培养，A正确；促进动物多排卵的激素是外源促性腺激素，B错 误；试管牛的核遗传物质一半来自甲牛的卵子，一半来自乙牛的精子，C正确；该技 术可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，D正确。 7.D多次进行步骤①的目的是加强免疫，获得更多分泌抗CD47抗体的浆细胞，A正 确；可以利用聚乙二醇或灭活的病毒诱导动物细胞融合，B正确；对照组应在巨噬细 胞十肿瘤细胞共培养体系中加入等量的生理盐水，D错误。 8.C卵母细胞A的细胞质基因是正常的，其来自健康女性，A正确；取卵之前，两女 性都要注射促性腺激素，进行超数排卵，B正确；“三亲婴儿”的形成有精卵结合过 程，为有性生殖，故“三亲婴儿”的性别与提供细胞核的患病女性的性别可能相同也 可能不同，C错误。 9.A据题图分析可知，图中过程①~⑦所涉及的生物技术有动物细胞培养、早期胚胎 培养、胚胎移植、动物体细胞核移植等，没有使用到重组DNA技术，A错误；图中动 物细胞培养过程中应将细胞置于5%CO2的气体环境中，以维持培养液的pH,此培 养过程中需要添加一定量的抗生素以防止杂菌感染，C正确；由于去核的卵母细胞 体积大、易操作、营养物质丰富以及含有促进细胞核全能性表达的物质，故通常用去 核的卵母细胞作为受体细胞，D正确。 10.CLCB1能与S蛋白结合，千扰新冠病毒对人体细胞的感染，说明其作用与抗体类 似，A正确；LCB1是自然界中不存在的蛋白质，可通过蛋白质工程进行设计和生 产，B正确；新冠病毒无细胞结构，必须寄生在人体活细胞中，C错误；新冠病毒是一 种RNA病毒，极易产生变异，易感人群注射疫苗后也具有被变异的新冠病毒感染 的可能，D正确。 11.B Marker的作用是作为DNA分子量的参照，电泳时必须加入，A错误；仅用一种 限制酶切割载体时，DNA片段等长，用两种限制酶切割时产生两种不同的DNA片 段，因此该载体最可能为环状DNA分子且两种限制酶识别的序列不相同，B正确、 D错误；两种限制酶同时切割时产生600bp和200bp两种长度的DNA片段，故这 两种限制酶的酶切位，点最短相距200bp,C错误。 12.CPCR中用到的DNA聚合酶是耐高温DNA聚合酶，A正确；热处理和利巴韦林 处理后，样本存活数减少，成活率下降，B正确；3、4没有与阳性对照一致的条带，说 明3、4成功脱去CVB,本实验没有设计CSVd的基因序列引物，不能确定是否脱去 CSVd,C错误；三种方法中，利巴韦林结合茎尖培养时，CSVd脱除率最高，故D正确。 13.C含有目的基因的DNA片段与质粒分别用EcoR I酶切后，产生的黏性末端相 同，在DNA连接酶的作用下。两个DNA片段连接时存在正反接及两个相同DNA 片段连接的情况，故其产物应多于2种，A错误；形成一个重组质粒时形成4个磷 酸二酯键，B错误；导入空质粒和导入重组质粒的受体细胞均能在含青霉素的培养 基中生长，故D错误。 14.A改造后的B-葡聚糖酶氨基酸序列发生了改变，空间结构也发生了改变，B错误； 蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，需要酶和载体作 为工具，C错误；蛋白质工程和基因工程的操作对象都是基因，D错误。 15.B防止转基因花粉的传播可以防止基因污染，故A正确；实验室培育的转基因产 品需确认安全后才能上市推广，B错误。 16.CD耐高温淀粉酶分解菌存在于高温环境的土壤中，土壤可取自高温热泉环境，A 正确；从图中看出，土壤样液的接种方法为稀释涂布平板法，B正确；培养温度应控 制在较高温度而不是37℃左右，C错误；D/代表微生物分解淀粉的能力大小，丙 菌落的D/d值最大，淀粉酶的活性较高，D错误。 17.AC DNA相对含量为50的白菜细胞的比例较大，说明此时的细胞最可能处于分裂 间期，A错误；灭活的病毒不能诱导原生质体融合，C错误；由图可知，白菜体细胞的 DNA相对含量最可能为50，甘蓝体细胞的DNA相对含量为50~100，待检测植株的 DNA相对含量为150一200，故待检测植株可能为融合的甘蓝一甘蓝植株，D正确。 18.CD①过程属于细胞工程的范畴，②过程属于基因工程的范畴，A错误；③过程表 示将基因表达载体导入动物细胞，常采用显微注射法，注射前不需用C2十处理重 构胚，B错误；④过程的重构胚经过早期胚胎培养到桑葚胚或囊胚期移植，C正确。 19.ABC步骤甲和步骤乙分别指体细胞核移植和胚胎移植，A错误；诱导超数排卵所 注射的激素是促性腺激素，B错误；重构胚发育成早期胚胎所需营养主要来源于去 核的卵母细胞，C错误。 20.ACD DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精，因此提纯DNA时可加入酒精去除 可溶的蛋白质等物质，A正确；新鲜棉叶提取的DNA纯度最高，但提取率不高，因 此新鲜棉叶提取DNA的量不是最多的，B错误；DNA在不同浓度NaCI溶液中溶 解度不同，酶具有专一性，因此木瓜蛋白酶和不同浓度的NC1溶液均可用于提纯 DNA,C正确；冷冻3d处理后提取的DNA量是最多的.因此用二苯胺试剂鉴定， 蓝色最深的是冷冻3d处理后提取的DNA,D正确。 21.(1)磨碎米粒并利用口腔唾液中的淀粉酶将米粒中的淀粉初步水解 (2)酵母菌细胞质基质乙酸(3)③BC皿底(4)菌落 (5)排除培养基本身被污染的可能性 22.答案：(1)无菌无毒的环境人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚 (2)耐高温的DNA聚合酶使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷 酸变性、复性、延伸 (3)反应体系中的原料（引物、探针等）数量一定，超出一定的循环数后，荧光标记的 “杂交双链”不再增加阳少 解析：(1)利用动物细胞培养技术体外培养人肝癌细胞时，应满足细胞生长和增殖 所需要的营养、温度、H、渗透压、气体环境和无菌无毒的环境等条件。由于人们对 细胞所需的营养物质还没有完全研究清楚，因此若使用合成培养基培养细胞时，还 需要添加血清。(2)检测时取检测者的mRNA逆转录为cDNA,再在反应体系中加 入引物、耐高温的DNA聚合酶(Tag DNA聚合酶)、荧光标记的新冠病毒核酸探 针、dNTP、缓冲体系。引物是一小段单链核酸，作为DNA复制的起始点，作用是使 耐高温的，DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。PCR技术中的每 个循环由变性、复性、延伸三个基本反应步骤构成。(3)分析荧光扩增曲线图，图中 曲线通过荧光强度变化反映产物量的变化，因此曲线中“平台期”出现的最可能原 因是反应体系中的原料（引物、探针等）数量一定，超出一定的循环数后，荧光标记 的“杂交双链”不再增加；理论上，在检测过程中，有荧光标记的“杂交双链”出现，则 说明检测结果呈阳性，但为了保证检测结果的准确性，一般要达到或超过阙值时才 确诊。由题可知，Ct值越大，反应体系中荧光信号到达设定阈值经历的循环数越 大，每次循环出现的荧光信号越少，代表被检测样本中的病毒数目越少。 23.答案：(1)植物组织培养脱分化(2)①水、无机盐、氨基酸、蔗糖消毒②促进 (3)①L基因表达载体②P基因是L基因调控的靶基因，且L基因表达产物通过 结合P基因启动子的a区激活P基因的表达 (4)①促进胚性愈伤组织的提前分化②抑制生长素极性运输后，L基因超表达组 仍可显著促进胚性愈伤组织的分化 解析：(2)②L基因超表达组产生胚性愈伤组织外植体的占比高于干扰L基因表达 组，说明L基因表达促进胚性愈伤组织的提前分化。(3)②a区突变的P基因启动 子、缺失a区的P基因启动子的实验组LUC基因表达水平均较低，而缺失b区的P 基因启动子实验组与P基因启动子全长实验组的LLUC基因表达水平相当，说明L 基因表达产物通过结合P基因启动子的a区激活P基因的表达。(4)①与图1相 比，图3中添加了生长素运输抑制剂，胚性愈伤组织的分化提前，说明生长素运输 抑制剂处理可以促进胚性愈伤组织的提前分化。②由于抑制生长素极性运输后，L 基因超表达组仍可显著促进胚性愈伤组织的分化，因此实验结果不能说明L基因 仅通过影响生长素的运输进而影响胚状体的形成 24.答案：(1)体细胞核移植技术、动物细胞培养 (2)显微操作法使核移植胚胎的核遗传物质全部来自提供体细胞的动物 (3)桑葚胚或囊胚 (4)Kdm4d的mRNA翻译的组蛋白去甲基化酶能降低组蛋白的甲基化水平；组蛋白脱 乙酰酶抑制剂TSA可以抑制组蛋白脱乙酰酶的作用，进而提高组蛋白的乙酰化水平 (5)担心该技术用于克隆人（或人类的生殖性克隆） 解析：(1)克隆猴制作过程中用到了体细胞核移植技术和动物细胞培养等。(2)卵母 细胞去核的常用方法是显微操作法，卵母细胞去核的目的是使核移植胚胎的核遗传 物质全部来自提供体细胞的动物。(3)胚胎分割时，常选用桑葚胚或囊胚时期的胚 胎。(4)Kdm4d的mRNA可翻译组蛋白去甲基化酶，该酶可降低组蛋白的甲基化水 平；组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA可抑制组蛋白脱乙酰酶的作用，进而提高组蛋白的 乙酰化水平。(5)科学家对此项技术的担心可能是担心该技术用于克隆人。 25.答案：(1)碱基互补配对磷酸二酯键防止外源基因插入和表达，保证原核生物 自身安全和遗传稳定 (2)抗生素G418和嘌呤霉素95%空气和5%C02的混合气体同时调控 (或表达) (3)非基因编辑对象也可能含有与sgRNA配对的碱基序列，造成SgRNA选错对象 与之错误结合而脱靶 (4)加入的特定引物能与总cDNA中TMS5基因特异性结合不一定，转化是指目 的基因成功导入受体细胞并稳定存在和表达，仅提取到TMS5基因不能说明它能 否正常表达 参考答案77 解析：(I)图1为CRISPR/Cas9系统作用示意图，向导RNA与DNA根据碱基互补 配对原则结合；转入的基因与原DNA片段之间要形成新的磷酸二酯键才能连接起 来。CRISPR/Cas9系统广泛存在于原核生物中，细菌这种清除入侵病毒DNA的 生理意义是防止外源基因插入并表达，保证了细菌遗传性状的稳定。(2)分析图2 可知：将OCT4、KLF4、MYC及SOX2四个基因的SgRNA序列串联成的sgRNA 质粒和dCas9一SAM质粒与磷脂等混合（形成包埋DNA脂质体结构），将脂质体加 入到细胞系MCF7的细胞培养皿中，若外源DNA导入细胞中，则细胞中有G418 抗性基因和嘌呤露素抗性基因，24h后通过添加抗生素G418和嘌呤霉素筛选并进 行单细胞培养即可得到基因编辑后细胞。动物细胞培养过程须在37℃，气体环境 为95%空气和5%的C○2的混合气体的细胞培养箱中进行。该实验通过4种 sgRNA对MCF7细胞进行编辑，可通过调控启动子序列等调控基因的表达，进而 可实现多基因同时调控的目的。(3)CRISPR/Cas9基因编辑技术中sgRNA能特 异性识别结合特定的DNA序列，从而引导Cas9蛋白到相应位置剪切DNA,最终 实现对靶基因序列定点编辑，非基因编辑对象也可能含有与SgRNA配对的碱基序 列，若SgRNA的序列越短，越容易造成sgRNA选错对象与之错误结合而脱靶 (4)从水稻组织中提取总RNA,经逆转录获得总cDNA,因为加入的特定引物与总 cDNA中TMS5基因特异性结合，可通过PCR技术可准确扩增出TMS5基因。转 化是指目的基因成功导入受体细胞并稳定存在和表达，仅提取到TMS5基因不能 说明它能否正常表达。在筛选出成功导入TMS5基因表达载体的水稻愈伤组织 后，经多代培养仍能提取出TMS5基因，不能说明TMS5基因一定成功转化。 选择性必修3综合检测卷二 1.C酵母菌发酵产生酒精时需要无氧的环境，所以制作果酒时瓶口应密闭，而醋酸菌 是好氧细菌，所以制作果醋时要适时通气，中断通氧会引起醋酸菌死亡，A正确；利 用传统发酵技术制作腐乳时利用的微生物有酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的 是毛霉，B正确；制作泡菜时需要控制严格的厌氧条件、发酵温度和发酵时间等，C错 误；果酒发酵的酵母菌可来自葡萄皮表面的野生酵母菌，泡菜发酵所需的乳酸菌可 来自莱表面，D正确。 2.D酿酒时将糯米蒸熟，可以通过高温将米粒上的微生物杀死，避免其他杂菌的污 染，A正确；酵母菌不耐高温，凉饭的目的是防止酿酒酵母被高温杀死，B正确；发酵 时，酵母菌先进行有氧呼吸，后进行无氧呼吸，有氧呼吸可以增加酵母菌量，无氧呼 吸可以产生酒精，这两种呼吸都会产生O2,所以容器中要适当留出一定空间，且酒 精发酵时要密闭发酵，C正确，D错误。 3.C植物体细胞杂交培育新品种时，应该采用植物体细胞作为实验材料，而不是花粉 粒，C错误。 4.D由题图分析可知，过程①是利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得细胞原生质 体的过程，因为植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，A正确；过程②是原生质体 融合的过程，可采用物理法（电融合法）和化学法（聚乙二醇融合法、高Ca+一高pH 融合法)，原生质体和b的融合过程依赖细胞膜的流动性，B正确；猕猴桃新品种的 培育利用了植物体细胞杂交技术和植物组织培养技术，该过程中运用了植物细胞全 能性的原理，C正确；由题干信息可知，毛花猕猴桃为二倍体，软枣猕猴桃为四倍体， 二者为不同的物种，不能通过杂交育种完成新品种的培育，图中运用的技术是植物 体细胞杂交技术，D错误。 5.D顶端分生组织的病毒极少，甚至无病毒，有利于获得脱毒苗，A正确；筛选过程 中，同种融合的细胞会因细胞核和细胞质只有一方有活力而死亡，只有细胞质和细 胞核均有活力的杂种细胞才能存活，C正确；杂种植株只具有甲的核遗传物质和乙 的细胞质遗传物质，D错误。 6.C体外培养的动物细胞可以分为两大类，一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖， 另一类则需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，A错误；5%的CO2的作用是维持 培养液的H,B错误；培养液中加入适量的抗生素可以防止培养过程中杂菌的污 染，C正确；肿瘤细胞能无限增殖，其细胞增殖周期应比肝细胞增殖周期短，D错误。 7.B卵母细胞中含有激发细胞核全能性表达的物质，核移植过程中选择MⅡ期的卵 母细胞有利于细胞核全能性的恢复，A正确；动物细胞培养时，不进行脱分化处理，B 错误；过程③是诱导分化过程，其关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表 达，C正确；过程④移植的神经元细胞由取自该小鼠的自身细胞诱导分化而来，受体 小鼠不会发生免疫排斥反应，D正确 8.AE牛的产生经过了受精过程，为有性生殖，F牛为克隆牛，是无性繁殖获得的，A 错误；题述两种方法的目的均是获得具有优良性状的牛，所以B正确，为了保证供体 雌性和受体雌性具有相同的生理状态，常用激素进行同期发情处理，以确保胚胎移 植后能正常发育，C正确；F牛是克隆牛，产生F牛的理论依据是动物细胞核的全能 性，D正确。 9.D胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，B正确；体 外受精之前，要对精子进行获能处理，采集的卵母细胞要在体外经人工培养成熟后， 才能与获能的精子结合，完成体外受精，C正确；在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细 胞膜外的透明带会迅速发生生理反应，阻止后来的精子进入透明带，D错误。 78参考答案 10.BDNA不溶于酒精，蛋白质可以溶于酒精，B错误；可用双缩脲试剂检测提取物 中是否含有蛋白质，若含有蛋白质，溶液将变成紫色，C正确。 11.A根据题干信息可知，荧光蛋白指示的应是脑神经元活动，但脑活动不能被离体 观察，为了防止其他体细胞的荧光信号对实验结果造成干扰，M应当是一种只在脑 组织中启动基因表达的启动子，A正确；据图分析可知，只有与启动子M相邻的荧 光蛋白基因会表达，在没有Cr酶存在的条件下，小鼠脑神经元活动时只会发出红 色荧光，B错误；Cre酶可以随机识别两个相同的loxP序列，并将两段序列之间的 DNA敲除，当酶识别的是loxP1序列时，小鼠脑神经元活动时发出黄色荧光，当识 别的是loxP2序列时，小鼠脑神经元活动时发出蓝色荧光，C错误；聚乙二醇 (PEG)多用于诱导细胞融合，动物细胞转基因时常用显微注射技术，显微注射技术 不需要用到PEG,D错误。 12.BPCR技术大量扩增目的基因时，缓冲液中需要加入的引物个数的计算公式为 2m+1-2(n为循环次数)，因此PC过程完成4轮循环，理论上至少需加入引物 24+1一2=30（个），A正确；由于DNA聚合酶只能从5'→3'延伸子链，因此扩增目 的基因时应选择引物1和4，B错误；①是基因表达载体的构建过程，该过程中应使 用限制酶BamH I切割质粒，以使目的基因插入质粒的启动子与终止子之间，C正 确；为了防止污染环境，对于转化失败的大肠杆菌及其培养基应进行灭菌处理，D 正确。 13.B据图分析，将四个关键基因转入高度分化的小鼠的成纤维细胞，再通过培养转 变成PS细胞，运用了转基因技术，原理是基因重组。同时培养小鼠的成纤维细胞 应用了动物细胞培养技术，A正确；PS细胞分化成各种组织细胞的过程中，细胞的 形态、结构和生理功能发生改变，细胞分化的实质是基因的选择性表达，使得细胞 内信使RNA和蛋白质改变，但DNA(遗传物质)不变，B错误、C正确；PS细胞可 定向分化成各种细胞，可见其分裂分化能力比成纤维细胞强，D正确。 14.B对蛋白质分子的设计和改造是通过蛋白质工程实现的，故对T4溶菌酶的改造 属于蛋白质工程的范畴，A正确；蛋白质工程直接改造的对象是基因，而不是R NA,B错误；改造后的T4溶菌酶的RNA所含密码子种类可能不变，故参与新的 T4溶菌酶合成的tRNA种类可能不变，C正确；组成改造后的T4溶菌酶的氨基酸 数和肽链数没变，所以肽键数不变，二硫键越多，T4溶菌酶的耐热性越强，DNA分 子中氢键越多，热稳定性越强，故二者作用类似，D正确。 15.C我国在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，A正确；基因编辑婴儿在 我国是被禁止的，C错误；利用炭疽杆菌制成的生物武器，具有传染性强、死亡率 高、攻击范围广、难以防治等特，点，D正确。 16.BD水果自带的酵母菌是果酒制作菌种的主要来源，因此只需要简单清洗水果即 可，且不能煮沸果汁，以免杀死菌种，A正确；泡莱的制作利用了乳酸菌的无氧呼 吸，故B错误；腐乳制作过程中，每加入一层豆腐，都要放入一层盐，目的是防止杂 菌污染及调味，D错误。 17.ACD PCR扩增一般需要30多次循环，B错误；PCR扩增后的产物常用琼脂糖凝 胶电泳来鉴定，在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和 构象等有关，D正确。 18.CD①过程是构建基因表达载体，需要的酶有限制酶和DNA连接酶，A正确；基 因表达载体导入到植物细胞中常用农杆菌转化法，B正确；③、④过程为脱分化和 再分化，该过程体现了植物细胞的全能性，C错误；检测DNA是否插入到生物体 内，常用PCR等技术检测，D错误。 19.BC三聚氰胺分子经“扩容”后可激活小鼠的免疫系统，A正确；三聚氰胺是小分子 有机物，自然条件下不会被小鼠的免疫细胞的受体所识别，B错误；经培养筛选得 到的杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生单一抗体，C错误；单克隆抗体制备过程中 需要经过两次目的不同的筛选，第一次筛选杂交瘤细胞，第二次筛选能产生特异性 抗体的杂交瘤细胞，D正确。 20.CD富集培养基是液体培养基，不含琼脂，A错误；稀释涂布后不一定仅最后一组 形成单菌落，B错误；待涂布的菌液被培养基吸收后，需将平板倒置，放入恒温培养 箱中培养，C正确；对白色污染进行传统填埋、焚烧容易造成二次污染，但黄粉虫肠 道微生物对白色污染的降解不会造成二次污染，D正确。 21.答案：(1)高压蒸汽灭菌琼脂选择(2)104 (3)S的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长 (4)取淤泥加入无菌水中，涂布（或稀释涂布）到乙培养基上，培养后计数 (5)水、碳源、氮源和无机盐 解析：(1)微生物培养过程中，培养基的灭菌通常采用高压蒸汽灭菌的方法。乙培 养基为固体培养基，因此培养基中加入的是可使液体培养基凝固的琼脂。甲、乙两 种培养基都是为了分离出可降解S的细菌，因此是选择培养基。(2)设稀释倍数为 l=1000L,套用计算式：AX20≤2X102个/mL,计算出A10 最小稀释倍数为10。(3)在筛选降解S物质的细菌的过程中，如果培养基中的S 浓度过高，会导致细菌培养基的渗透压增大，细菌失水而代谢活性降低，对S的降 解量反而下降（或者S改变了培养基的H,导致细菌代谢活性降低）。(4)测定淤 泥中能降解S的细菌细胞数的主要步骤是①淤泥取样，即取少量的淤泥加入无菌 水中；②用稀释涂布平板法涂布到乙培养基上；③微生物培养与观察计数。(5)培 养基中含有细菌生长所需要的4类基本营养物质，即水、碳源、氨源、无机盐。 22.答案：(1)骨髓瘤细胞含95%的空气和5%的C02的混合气体 (2)动物血清可补充人们尚不清楚的细胞所需的营养物质特异性强、灵敏度高、 可大量制备 (3)与抗原结合，并催化检测底物生成产物2 (4)接触抑制胰蛋白酶或胶原蛋白酶 解析：(1)分析可知，Y是骨髓瘤细胞；培养动物细胞需要含95%的空气和5%的 CO2的混合气体，其中5%的CO2的作用是维持培养液的pH。(2)动物血清可补 充人们尚不清楚的细胞所需的营养物质，因此体外培养杂交瘤细胞时，常向培养基 中加入动物血清。单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。(3)分 析可知，酶标抗体既可与抗原结合又可催化检测底物生成产物；该方法中抗原既要 与固相抗体结合，又要与酶标抗体结合，因此抗原至少需要含有2个抗体结合位 点。(4)当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止增殖，这种现象 称为接触抑制。传代培养需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，从而获得单细 胞悬液。 23.答案：(1)PCR(2)促性腺减数分裂Ⅱ中期(3)启动子(4)显微注射 (5)桑葚胚或囊胚内细胞团性别鉴定 解析：(1)从人体组织中提取EPO的mRNA,通过逆转录得到cDNA,再经PCR技 术扩增获取大量EPO基因（目的基因）。(2)为使供体母鼠超数排卵，需注射促性 腺激素。采集的卵母细胞需培养到减数分裂Ⅱ中期才具备受精能力。(3)基因表 达载体的组成部分中，能驱动基因转录的是启动子。(4)将重组表达载体导入仓鼠 受精卵中，通常采用显微注射技术。(5)胚胎移植时，一般选择发育到桑葚胚或囊 胚阶段的胚胎。借助胚胎分割技术可获得更多的转基因胚胎，进行胚胎分割时，需 要将囊胚的内细胞团进行均等切割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 依题意“采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物”可推知，在胚胎移植 前，需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定。 24.答案：(1)基因表达载体的构建B有标记基因，复制原点不会被限制酶切割 (2)PwuI引物(3)EcoR I1.25.5 (4)在含有氨苄青霉素和X一gl的培养基上培养，形成白色菌落的为导入重组质 粒的受体细胞 解析：(1)基因工程操作的核心步骤是基因表达载体的构建。图甲中三种质粒适宜 作为载体的为质粒B,因为质粒B含有EcoR I、PuI两种酶切位点、氨苄青霉素 抗性基因和蓝色显色基因，而且相应的限制酶切割后，可以保留氨苄青露素抗性基 因的完整性。与另外两种质粒相比，其作为载体的优点是有标记基因，复制原点不 会被限制酶切割。(3)由于EcoR I在目的基因和质粒上都有酶切位点，为选出正 向连接的重组质粒，使用EoRI对重组质粒完全酶切后，进行电泳分析。质粒B 中EcoR I酶切位，点与PuuI酶切位点距离为0.2kb,若是正向连接载体，重组质粒 中2个EcoR I酶切点之间的距离是0.2十1=1.2(kb),重组质粒长度为2.7十4= 6.7(kb),故EcoR I酶切后，正向连接载体的情况下，电泳图谱中出现长度为1.2 kb和5.5kb两条带。（4)要筛选出已转化的含重组质粒的受体细胞的方法是在含 有氨苄青霉素和X一gl培养基上培养，形成白色菌落的为导入重组质粒的受体 细胞。 25.答案：(1)脱分化将愈伤组织分散成单个细胞 (2)温度、pH、氧气、培养基的营养物质、植物生长调节剂配比、细胞遗传特性、振荡 速度等 (3)①限制酶、DNA连接酶（二者位置不可互换）②BA③乙和丙目的基因 进行了反向连接 解析：(1)外植体经脱分化可形成愈伤组织；用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织可 获得单个细胞。(2)见答案。(3)①酶1可切割质粒，酶3可连接P2与目的基因片 段形成重组质粒P3,所以酶1和酶3分别是限制酶、DNA连接酶。②重组质粒P3 中不含四环素抗性基因，含氨苄青霉素抗性基因，故含重组质粒P3的菌株能在无 抗生素的培养基和添加氨苄青霉素的培养基中生长，不能在添加四环素的培养基 中生长，其形成的菌落类型是B类。未转入质粒的菌株只能在无抗生素的培养基 中生长，形成的菌落类型是A类。③由图3可知，理论上可以选择的引物组合有甲 和丙、乙和丙两种，如果选择甲和丙这对引物，则无论目的基因是否正确插入，扩增 的片段的长度都是50bp十300bp十100bp=450bp,不符合要求；如果选择乙和丙这 对引物，正向连接和反向连接所得结果不同，所以应选择乙和丙这对引物进行PCR 鉴定。如果目的基因和质粒反向连接，则引物乙会出现在重组质粒的外侧，此时若选 择引物甲和乙进行扩增，则可以扩增出长度为300bp+100bp=400bp的片段。