山东省菏泽市鄄城县第一中学2025-2026学年高二下学期4月阶段检测生物试题

生物试题 一、选择题：本题共20小题，每小题2分，共40分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1．以四倍体（基因型为AAaa）植株的花药为外植体经植物组织培养获得植株的过程如图所示，相关叙述正确的是（ ） A．此过程为单倍体育种，②、③过程需要严格的无菌条件 B．将花药换成植物的茎尖可获得能抗病毒的脱毒苗 C．取愈伤组织进行细胞产物的工厂化生产，可提高单个细胞中次生代谢物的含量 D．②③过程培养基中的激素比例以及光照条件均不同 2．花椰菜（2n＝18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n＝14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果如图2所示。下列有关叙述正确的是（ ） A．过程①可用酶解法获得原生质体，需要在无菌水中进行 B．②过程可用电融合法或灭活病毒诱导细胞融合，杂种细胞再生出细胞壁是成功的标志 C．新品种的产生说明花椰菜和紫罗兰之间不存在生殖隔离 D．根据图2结果判定，最可能属于杂种植株的是4和5 3．两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如下图所示。下列说法错误的是（ ） A．过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理细胞 B．过程②的目的是使中间偃麦草的染色体断裂 C．过程③中常用灭活的病毒诱导原生质体融合 D．耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段 4．利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法正确的是（ ） A．利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物 B．植物细胞体积小，故不能通过该技术进行其产物的工厂化生产 C．次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选择产量高的细胞进行培养 D．该技术主要利用促进细胞生长的培养条件提高单个细胞中次生代谢物的含量 5．常规动物细胞培养是将细胞在平面条件下培养，培养出的单层细胞不同于人体内的组织结构，在药物研究中具有一定的局限性。三维细胞培养技术是在体外为细胞提供类似体内的生长环境，使细胞形成立体的三维结构，更有利于药理学的研究。下列叙述错误的是（ ） A．体外培养的细胞大部分需要贴附于基质表面才能生长繁殖 B．使用机械方法也可将组织分散成单个细胞 C．与常规细胞培养相比，三维细胞培养技术不存在接触抑制现象 D．三维细胞培养技术可以用于检测药物对组织内部细胞的作用 6．科学家在实验室中获得多能干细胞（iPS），其过程大致是：把四种转录因子基因引入小鼠的成纤维细胞，可诱导这种细胞发生转化，产生iPS细胞，用iPS细胞治疗某些人类疾病成为可能。下图是该设想的示意图，说法正确的是（ ） A．干细胞是从胚胎中分离提取的细胞 B．iPS细胞分化成各类细胞的实质是动物细胞核具有全能性 C．iPS细胞类似于成体干细胞，具有组织特异性 D．我国科学家用4种小分子化合物也制备出了iPS细胞，且安全性更高 7．一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是（ ） A．注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大 B．单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合 C．利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗 D．p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况 8．下列有关哺乳动物核移植技术的叙述，不正确的是（ ） A．受体细胞常用处于减数第二次分裂中期的卵母细胞 B．注入受体细胞的既可以是细胞核，也可以是细胞 C．用物理或化学方法激活受体细胞，使其完成减数分裂过程 D．核移植技术的成功率很低，仍有很多问题需要研究 9．胚胎工程技术的应用为优良牲畜的大量繁殖提供了有效的解决办法，如奶牛活体采卵—体外胚胎生产（OPU-IVP）技术，该技术流程如图。已知雄性奶牛Y染色体上有一段雄性特异的高度重复序列，依据该重复序列设计引物，建立了用于奶牛胚胎性别鉴定的PCR体系（SRY-PCR）．下列叙述错误的是（ ） A．体外受精后，在透明带和卵细胞膜间观察到两个极体说明受精成功 B．活体采卵前诱导母牛超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞 C．取滋养层细胞进行SRY-PCR，应选择结果为阴性的胚胎进行移植 D．为防止受体母牛发生免疫排斥反应，胚胎移植前需要进行免疫检查 10．经遗传改造的小鼠胚胎干细胞注入囊胚，通过胚胎工程的相关技术可以获得具有不同遗传特性的实验小鼠。下列说法错误的是（ ） A．用促性腺激素处理雌鼠可以获得更多的卵子 B．体外受精前要对小鼠的精子进行获能处理 C．胚胎移植前要检查胚胎质量并在囊胚或原肠胚阶段移植 D．遗传改造的小鼠胚胎干细胞可以通过转基因等技术获得 11．下列关于胚胎工程的说法，错误的是（ ） A．从不同动物中采集的精子可置于同一获能液中进行获能处理 B．胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从囊胚中获取 C．胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一 D．胚胎移植过程中可通过发情配种或人工授精对超数排卵的供体母牛进行体内受精 12．限制酶是基因工程中必需的工具之一，下图表示五种限制酶的识别序列及切割位点。下列关于限制酶的叙述，错误的是（ ） 限制酶 EcoR Ⅰ BamH Ⅰ Sau3A Ⅰ Mfe Ⅰ EcoR V 识别序列及酶切位点 5′-G↓AATTC-3′ 3′-CTTAA↑G-5′ 5′-G↓GATCC-3′ 3′-CCTAG↑G-5′ 5′-G↓ATC-3′ 3′-CTA↑G-5′ 5′-C↓AATTG-3′ 3′-GTTAA↑C-5′ 5′-GAT↓ATC-3′ 3′-CTA↑TAG-5′ A．EcoR Ⅰ和EcoRV切割DNA片段产生的末端分别为黏性末端和平末端 B．EcoR Ⅰ和Mfe Ⅰ切割产生的DNA片段能被E.coli DNA连接酶相连在一起 C．BamH Ⅰ和Sau3A Ⅰ切割产生的DNA片段，连接后一定能被BamH Ⅰ切割 D．以上五种限制酶均能识别双链DNA的特定序列，并切开特定部位的磷酸二酯键 13．图甲、乙中的箭头表示三种限制性内切核酸酶的酶切位点，AmpR表示氨苄青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。下列叙述错误的是（ ） A．在构建重组质粒时，可用PstⅠ和Hind Ⅲ切割质粒和外源DNA B．在酶切过程中，不能破坏质粒中全部的标记基因 C．若只用PstⅠ处理质粒和外源DNA分子片段，无法避免自身环化和反向连接 D．导入重组质粒的大肠杆菌可以在含氨苄青霉素的培养基中生长 14．科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测，该质粒的部分结构如图甲所示，其中V5编码序列表达标签短肽V5；该重组质粒在受体细胞内正确表达后，用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白是否表达以及表达水平，结果如图乙所示。下列分析错误的是（ ） A．作为基因表达载体，图甲中的质粒还必须具有特殊标记基因、复制原点 B．为检测J基因是否插入到图甲所示的位置，需用引物F1和R1进行PCR C．若J基因转录的模板链位于b链，则引物F2与图甲中a链相应部分的序列相同 D．图乙中，条带1的出现证明重组质粒在受体细胞内表达了J-V5融合蛋白 15．关于采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的实验，下列叙述正确的是（ ） A．琼脂糖凝胶浓度的选择需考虑待分离DNA片段的大小 B．凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置 C．在同一电场作用下，DNA片段越长，向负极迁移速率越快 D．琼脂糖凝胶中的DNA分子可在紫光灯下被检测出来 16．1997年，我国政府首次批准商业化种植转基因抗虫棉，下列关于用Bt基因培育转基因抗虫棉四个主要步骤的说法，正确的是（ ） A．这四个步骤中均可用到碱基互补配对的原则 B．基因表达载体中的终止密码子能够使基因停止转录 C．若利用PCR技术检测目的基因是否转录出mRNA，则不能根据目的基因的启动子和终止子序列设计引物 D．成功将两个Bt基因转入棉花的染色体DNA中，则自交后代一定具有抗虫特性 17．下列关于“DNA粗提取与鉴定”、“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验，说法正确的是（ ） A．DNA粗提取与鉴定过程中至少要用到一次离心 B．利用二苯胺试剂鉴定DNA时，需要在沸水加热过程中观察颜色变化 C．电泳结束后可直接观察DNA条带的分布和粗细程度来评价扩增效果 D．凝胶载样缓冲液中的指示剂无法用来观察PCR产物的位置 18．DNA探针是一段带有检测标记，且顺序已知的、与目的基因互补的DNA序列。为获得荧光标记的DNA探针，在反应体系中加入酶、缓冲液、H2O、4种脱氧核苷酸（dCTP、dTTP、dGTP和碱基被荧光标记的dATP）和适量序列为5′-TAGACCCAATTGGG-3′的单链DNA。下列说法正确的是（ ） A．该反应体系中加入ATP为子链的延伸提供能量 B．缓冲溶液中一般要添加Ca2+用于激活DNA聚合酶 C．该反应体系中因缺乏引物而无法扩增出产物 D．利用该反应体系可获得两种荧光标记的探针 19．利用下图质粒和目的基因构建基因表达载体，为高效连接和筛选，结合表格中质粒上限制酶识别位点，推测目的基因上游和下游含有的限制酶识别位点组合可以为（ ） 限制酶 识别序列和切割位点 限制酶 识别序列和切割位点 Xba Ⅰ 5′-T↓TCGAG-3′ Sac Ⅰ 5′-C↓TCGAG-3′ Sma Ⅰ 5′-CCC↓GGG-3′ Hind Ⅲ 5′-A↓AGCTT-3′ EcoR Ⅰ 5′-A↓AATTT-3′ Bcl Ⅰ 5′-G↓AATTC-3′ ①Xba Ⅰ和Sac Ⅰ ②Sac Ⅰ和Eco R Ⅰ ③Xba Ⅰ和Hind Ⅲ ④Sma Ⅰ和Sac Ⅰ ⑤Hind Ⅲ和Eco R Ⅰ ⑥Xba Ⅰ和Bcl Ⅰ A．③⑤ B．①③⑤ C．②③⑤⑥ D．①②③⑤⑥ 20．双脱氧链终止法主要用于DNA基因分析，是应用最多的核酸测序技术。该方法是利用PCR技术在酶、模板、引物、四种脱氧核苷酸存在的情况下，在四管反应系统中按比例分别加入四种双脱氧核苷三磷酸（ddATP、ddCTP、ddGTP、ddTTP），则当双脱氧核苷三磷酸被加入到链末端时，这一链就会停止伸长，而单脱氧核苷三磷酸链末端的片段还可以继续延伸。在结束反应后，用四个泳道进行电泳，结果如下图所示，下列说法错误的是（ ） A．每管反应系统中均需加入2种引物 B．待测模板链的碱基序列为3′-GATGGACACTA-5′ C．反应体系中加入的酶只有耐高温的DNA聚合酶 D．结束反应后需将产物进行变性再电泳 二、选择题：本题共10小题，每小题3分，共30分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 21．真菌细胞壁富含多种多糖类物质，已被证实具有诱导活性，可通过介导植物的防御反应来促进红豆杉合成紫杉醇。研究者在最佳诱导条件下对红豆杉进行细胞悬浮培养，结果如图所示，下列叙述正确的是（ ） A．悬浮培养的细胞通常来自红豆杉的愈伤组织，原因是愈伤组织细胞全能性高 B．悬浮培养中常用的碳源是蔗糖，原因是其形成的渗透压高于葡萄糖，可防止细胞脱水 C．真菌多糖处理后红豆杉细胞鲜质量、干质量、紫杉醇总产量均在培养约21天后达到最大值 D．真菌多糖处理后红豆杉细胞鲜质量、干质量、紫杉醇总产量中增长幅度最高的是紫杉醇总产量 22．关于动物细胞培养与植物组织培养的异同点，说法正确的是（ ） A．均为有丝分裂，但是原理不同 B．均为合成培养基，但是物理性质不同 C．均需加入激素，但是激素种类和比例不同 D．均需无菌操作，但是培养的结果不同 23．培育肉是利用动物体内分离的成肌细胞或全能干细胞，采用动物细胞培养技术培养出类似于动物肌肉的肉丝，同时添加了人体所需的元素如铁、钙等，使之营养更加丰富。下列相关叙述正确的是（ ） A．用胃蛋白酶处理肌肉组织，可以获得分裂能力强的肌肉母细胞 B．生物反应器内应控制温度适宜，并充入一定量的CO2保证培养液pH相对稳定 C．培养液中的支架提供了更多的细胞附着面积，有利于细胞贴壁生长 D．“人造牛肉”的培养体现了细胞的全能性 24．某些种类的癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA，能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。CD28是T细胞表面受体，其在癌细胞与T细胞结合部位聚集可有效激活T细胞。科研人员尝试利用单抗技术通过诱导两种杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞，构建既能结合PSMA，又能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28。下列说法正确的是（ ） A．临床上给癌症患者注射抗PSMA受体的抗体有一定的抗癌作用 B．双杂交瘤细胞产生多种抗体的原因是其能表达出可随机组合的L链和H链 C．同时将PSMA和CD28注射到小鼠体内，可获得同时产生两种抗体的杂交瘤细胞 D．PSMA×CD28可有效激活T细胞杀伤癌细胞 25．下图为我国科学家获得克隆猴“中中”和“华华”的具体过程。研究发现，重构胚中基因A的正常表达是克隆成功的关键；重构胚基因组中大量被甲基化的组蛋白H3会抑制核的全能性；组蛋白H3的乙酰化能使小鼠克隆成功率提高5倍以上。下列叙述正确的是（ ） 注：Kdm4d为组蛋白去甲基化酶；TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。 A．细胞a指的是培养到MⅡ期的卵母细胞，通过显微操作去掉的是DNA—蛋白质复合物 B．用灭活的病毒短暂处理的目的是促进两细胞融合，也可用电融合法促融 C．Kdm4d可使H3去甲基化，TSA可使H3保持乙酰化，进而促进了基因A的正常表达 D．“中中”和“华华”培育用到了动物细胞培养及体细胞核移植等技术 26．Rag2基因缺陷导致大鼠无法产生B、T淋巴细胞。将正常大鼠的胚胎干细胞（ES细胞）注射到Rag2基因缺陷大鼠的桑葚胚中，使其产生具有正常ES细胞来源的淋巴细胞群的体细胞嵌合体，从而补充其缺失的淋巴细胞，其过程如图所示。下列分析错误的是（ ） A．获得的嵌合大鼠的大部分细胞的Rag2基因没有缺陷 B．胚胎发育早期，会因胚胎中细胞数目不断增加而导致胚胎总体积不断增加 C．注入桑葚胚的ES细胞在囊胚期主要存在于内细胞团，可发育为胚胎的组织器官 D．该实验最终获得了嵌合体大鼠证明ES细胞具有全能性 27．下列有关基因工程的工具的叙述，错误的是（ ） A．DNA连接酶对“缝合”序列不进行特异性识别，无专一性催化特点 B．天然质粒均可以直接作为载体将目的基因送入受体细胞 C．噬菌体常作为动物基因工程的载体 D．获取一个目的基因需限制酶切割2次，共产生4个游离的磷酸基团 28．用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）四环素抗性基因（TetR）作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述错误的是（ ） A．若用Hind Ⅲ酶切，目的基因转录的产物可能不同 B．若用Pvu Ⅰ酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因 C．若用Sph Ⅰ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否 D．若用Sph Ⅰ酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落 29．粗提取DNA时，向鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水并搅拌，过滤后所得滤液进行下列处理后再进行过滤，在得到的滤液中加入特定试剂后容易提取出DNA相对含量较高的白色丝状物的处理方式是（ ） A．加入适量的木瓜蛋白酶 B．37～40°C的水浴箱中保温10～15分钟 C．加入与滤液体积相等的、体积分数为95%的冷却的酒精 D．加入NaCl调节浓度至2mol/L→过滤→调节滤液中NaCl浓度至0.14mol/L 30．融合PCR技术采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的PCR产物，通过PCR产物重叠链的延伸，从而将不同来源的任意DNA片段连接起来。其原理如图所示，据图分析正确的是（ ） A．上述过程中使用的引物P2和P3的碱基需要完全互补配对 B．设计引物的目的是为了能够从其端开始连接脱氧核苷酸 C．融合PCR的第一步两条链重叠部位可互为另一条链的引物 D．若融合PCR的第二步获得128个融合基因，理论上该过程消耗了254个引物 三、非选择题：本题共3小题，共30分。 31．（10分）人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）肌钙蛋白Ⅱ（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。 （1）动物细胞培养时，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的营养成分外，往往还需加入一定量的______，以满足动物细胞培养的营养需要，将培养的细胞置于含有______的混合气体的CO2培养箱中进行培养 （2）每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是______。 （3）将获得的B细胞与骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基进行第一次筛选，核酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径（如图）。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”作为选择培养基筛选出杂交瘤细胞。融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中______（填“有”或“无”）骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求。杂交瘤细胞可以在HAT培养基上大量增殖的原因是可以通过______（填“全合成途径”或“补救合成途径”）合成DNA。 （4）甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是______，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得______。单克隆抗体的优点是______（至少写出2项）。 32．（9分）下图是“三亲婴儿”产生的流程，该技术是为了避免母亲把生理缺陷遗传给孩子的一种技术手段，医生去除女性捐赠者的卵子中的细胞核，接着用母亲卵细胞中对应的遗传基因取而代之，最后再按照标准的试管婴儿技术进行培育，这样诞生的孩子将会继承一位父亲和两位母亲的遗传基因。 （1）图中“去核”和“取核”普遍使用______法，采集到的精子需要进行______处理，体外受精后还需将受精卵放入培养液中培养到一定阶段才能移植，胚胎移植的优势是______。 （2）胚胎发育到______时，细胞开始出现分化。早期胚胎的______细胞将发育成胎儿的各种组织。 （3）三亲婴儿培养过程中用到的胚胎工程技术是______，从遗传角度分析，“三亲婴儿”技术还可以避免“母亲”的______（填细胞结构）中的缺陷基因传递给孩子。 33．（11分）基因工程所用表达载体中的启动子，实际上包含增强子和基本启动子。基本启动子没有组织特异性，本身不足以启动基因表达。增强子是含有特定碱基序列的DNA片段，很多增强子具有组织特异的活性，作用机理如图1所示。 （1）由图可知，增强子位于基本启动子的______（填“上游”、“下游”或“上游或下游”）。根据启动子的作用推测，增强子是影响了______，从而激活基本启动子驱动基因转录。 （2）增强子、控制特定蛋白合成基因______（填“必须”、“非必须”）位于同一条染色体上，增强子在不同组织中的活性______（填“相同”、“不一定相同”或“不同”）。 （3）“增强子捕获”是筛选组织特异表达基因的一种有效方法。基于上述调控机理，研究者构建了由基本启动子和报告基因组成的“增强子捕获载体”（图2），并转入受精卵。捕获载体会随机插入基因组中，如果插入位点附近存在有活性的增强子，则会激活报告基因的表达（图3），若观察到报告基因只在某些特定器官特异表达，鉴定出捕获载体的插入位点后再检测即可确定是否为该器官特异表达的基因。 ①增强子捕获载体除了包含图2所述结构外，还必须有______。用______法将构建的“增强子捕获载体”导入斑马鱼受精卵，受体细胞选用受精卵的原因是______________________________（至少答出两点）。 ②若观察到报告基因在某幼体的心脏中特异表达。鉴定出捕获载体的插入位点后，发现位点附近有两个基因G和H，为了确定这两个基因是否为心脏特异表达的基因，应检测______。 学科网（北京）股份有限公司 $ 试题答案 1．D 2．D 3．C 4．A 5．C 6．D 7．D 8．C 9．D 10．C 11．A 12．C 13．D 14．B 15．A 16．C 17．D 18．C 19．C 20．A 21．CD 22．ABD 23．BC 24．ABD 25．BCD 26．ABD 27．ABC 28．D 29．A 30．BCD 31．（1）血清 95%空气和5%CO₂ （2）加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞 （3）无 补救合成途径 （4）乙和丙 能产生抗cTnl抗体的杂交瘤细胞 准确识别抗原的细微差异、与特定抗原发生特异性结合、可以大量制备 32．（1）显微操作 获能 可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 （2）囊胚期 内细胞团 （3）体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植等 线粒体 33．（1）上游或下游 RNA聚合酶与基本启动子的识别和结合 （2）非必须 不一定相同 （3）标记基因、复制原点 显微注射 体积大，易操作；全能性高，易培养成完整个体 其他器官细胞中，G和H两个基因是否转录出相应的mRNA或是否翻译出相应的蛋白质 学科网（北京）股份有限公司 $