精品解析：河南开封市禹王台区河南省开封高级中学2027届高二年级下学期学情调研生物学科

开封高中27届高二年级下学期学情调研 生物学科 一、选择题（本题共25小题，每小题2分，共50分） 1. 下列关于传统发酵技术及发酵工程的叙述，正确的是（　　） A. 以尿素为唯一氮源的培养基上只有分解尿素的细菌能生长和繁殖 B. 泡菜坛装至八成满可防止发酵液溢出，同时避免菜料因接触空气而变质腐烂 C. 啤酒生产过程中通常加入啤酒花以提供发酵的菌种 D. 为防止杂菌污染，菌液涂布均匀后需立即将平板倒置 【答案】B 【解析】 【详解】A、以尿素为唯一氮源的培养基可筛选尿素分解菌，但自生固氮微生物可利用空气中的氮气作为氮源，也能在该培养基上生长繁殖，A错误； B、泡菜发酵依靠乳酸菌的厌氧呼吸，泡菜坛装至八成满，既可以避免发酵过程中产生的气体导致发酵液溢出，也能减少液面上方氧气残留，避免菜料上浮接触空气被杂菌污染而变质腐烂，B正确； C、啤酒发酵的菌种是人工接种的酵母菌，加入啤酒花的作用是赋予啤酒特殊风味、抑制杂菌生长，C错误； D、菌液涂布均匀后需要等待菌液完全被培养基吸收后再倒置平板，若立即倒置会导致未吸收的菌液流动，影响菌落分离效果，D错误。 2. 《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺，“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列有关叙述错误的是（ ） A. “酒一斗，用水三斗，合瓮盛”是为避免酒精浓度过高抑制微生物的生长繁殖 B. “置日中曝之”可以提高发酵液温度，有利于醋酸发酵，缩短发酵时间 C. “衣（指菌膜）”位于变酸的酒表面，是由原酒中的酵母菌大量繁殖形成的 D. “挠搅”有利于酒精与微生物的充分接触，且可增加溶液中的溶解氧 【答案】C 【解析】 【详解】A、酒一斗，用水三斗，合瓮盛通过稀释降低酒精浓度，避免高浓度酒精抑制醋酸菌等微生物的生长繁殖（醋酸发酵需适宜酒精浓度），A正确； B、置日中曝之利用日光提高发酵液温度，因醋酸菌的最适生长温度为30~35℃，升温可促进其代谢，缩短发酵周期，B正确； C、衣（菌膜）是醋酸发酵过程中醋酸菌在液面大量繁殖形成的菌膜，而非酵母菌（酵母菌在酒精发酵阶段作用，且高酒精环境下活性受抑制），C错误； D、挠搅通过搅拌使微生物与营养物充分接触，同时增加发酵液中的溶解氧，满足醋酸菌（需氧型）的代谢需求，D正确。 故选C。 3. 从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是（　　） A. 制备的培养基可用紫外线照射进行灭菌 B. 鉴定致病菌时，可通过观察菌落的形态、大小、颜色等特征进行初步判断 C. 进行稀释涂布平板时，灼烧后的涂布器无需冷却，可直接蘸取菌液进行涂布 D. 纯化致病菌时，可直接用接种环蘸取土壤悬液在平板上划线分离 【答案】B 【解析】 【详解】A、培养基需采用高压蒸汽灭菌法（湿热灭菌法）进行彻底灭菌，紫外线仅能用于物体表面、空气的消毒，无法杀灭培养基内部的芽孢等抗性微生物，不能对培养基灭菌，A错误； B、不同种类微生物形成的菌落，其形态、大小、颜色、隆起程度等特征存在特异性差异，可通过这些菌落特征对致病菌进行初步鉴定，B正确； C、灼烧后的涂布器温度极高，若直接蘸取菌液会杀死菌种，因此需要冷却后再进行涂布操作，C错误； D、土壤悬液中菌种浓度极高，直接用接种环蘸取土壤悬液划线无法得到单菌落，需要先对土壤悬液进行梯度稀释后再开展纯化操作，D错误。 4. 某生物兴趣小组完成了“某果园土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”的实验，实验过程中，步骤④接种并设置三个重复平板，统计得到平均菌落数为160个，实验主要操作流程如图所示。下列有关叙述正确的是（　　） A. 步骤②充分振荡的目的是为了增加尿素分解菌的浓度 B. 步骤⑤使用的接种环至少灼烧3次 C. 由菌落计数结果可知10克土样中的菌株数约为个 D. ④⑤使用的接种工具不同，两种接种方法均可用于微生物的分离、纯化与计数 【答案】C 【解析】 【详解】A、步骤②充分振荡培养的目的是为了使土壤颗粒与无菌水充分混匀，A错误； B、步骤⑤采用平板划线法，共划了3个区域，因而灼烧接种环至少4次，B错误； C、图示平板中平均菌落数为160个，则每克土壤中的菌株数为160÷0.1×104×10=1.6×108，即10克土样中的菌株数约为1.6×108个，C正确； D、④是稀释涂布平板法，可用于微生物的分离、纯化与计数，所用的接种工具为涂布器；⑤是平板划线法，不能用于微生物的计数，所用接种工具为接种环，D错误。 5. 一定浓度的抗生素会杀死细菌，但变异的细菌可能产生耐药性。为探究某种抗生素对大肠杆菌的选择作用，将大肠杆菌培养液接种到培养基上后，继续放置含该抗生素的圆形滤纸片和不含抗生素的圆形滤纸片，一段时间后测量滤纸片周围抑菌圈的直径，第一代培养结果如图所示。然后再重复上述步骤培养三代。与上述实验相关的叙述不符的是（        ） A. 抑菌圈边缘的大肠杆菌可能发生了基因突变或染色体变异 B. 图中1处放入不含抗生素的滤纸片起到对照作用 C. 挑取抑菌圈边缘的菌落重复该实验，抑菌圈的直径变得越小，说明大肠杆菌的耐药性越强 D. 实验结束后，应将耐药大肠杆菌、培养基、纸片等进行高温灭菌处理 【答案】A 【解析】 【详解】A、细菌属于原核生物，没有染色体，所以不会发生染色体变异，A错误； B、图中1处放入不含抗生素的滤纸片，与含抗生素的滤纸片形成对照，便于观察抗生素的作用，B正确； C、挑取抑菌圈边缘的菌落重复该实验，抑菌圈的直径变得越小，说明细菌对抗生素的抵抗能力越强，即耐药性越强，C正确； D、实验结束后，将耐药菌、培养基、纸片等进行高温灭菌处理，以防止细菌扩散，造成污染，D正确。 6. 微生物的培养需要适宜的条件。下列相关叙述正确的是（　　） A. 培养基中必须添加水、碳源、氮源、无机盐和特殊营养物质等 B. 发酵液pH呈酸性时，谷氨酸棒状杆菌会积累谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺 C. 制备微生物培养基时，应先灭菌再调节pH，以避免杂菌污染 D. 为了便于接种和获取产物，培养基中都要添加琼脂或其他凝固剂 【答案】B 【解析】 【详解】A、培养基中一般添加水、碳源、氮源、无机盐和特殊营养物质等，但不是必须添加，培养基成分需根据培养对象调整，自养型微生物可利用无机碳源，培养基无需额外添加有机碳源；固氮微生物可利用空气中的氮气，无需额外添加氮源；部分微生物无需额外添加生长因子等特殊营养物质，并非所有培养基都必须包含题干所述全部成分，A错误； B、谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸时，发酵液为中性或弱碱性时会积累谷氨酸，若pH呈酸性，谷氨酸合成酶活性受抑制，而谷氨酰胺合成酶活性增强，导致积累谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，B正确； C、制备微生物培养基的正确流程为计算→称量→溶解→调pH→灭菌→倒平板，若先灭菌再调pH，调pH过程会引入杂菌造成培养基污染，C错误； D、只有固体、半固体培养基需要添加琼脂等凝固剂，工业发酵常用的液体培养基无需添加凝固剂，更利于微生物和营养物质充分接触，提高发酵效率，也便于产物收集，D错误。 7. 关于细胞工程应用的叙述，正确的是（　　） A. 将桑葚胚或囊胚分割后经移植获得的同卵双胎或多胎的表型完全相同 B. 将草莓茎尖脱毒培养可获得产量和品质提升的抗病毒草莓 C. 植物细胞培养的过程未体现植物细胞具有全能性 D. 将人参细胞接种在固体培养基上以利于工厂化生产人参皂苷 【答案】C 【解析】 【详解】A、胚胎分割得到的个体基因型一致，但表型由基因型和环境共同调控，且发育过程中可能发生变异，因此表型不一定完全相同，A错误； B、茎尖脱毒培养获得的是不带病毒的脱毒苗，不具备抗病毒的能力，抗病毒植株需要通过基因工程等技术导入抗病毒基因才能获得，B错误； C、细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性，植物细胞培养仅获取细胞或细胞代谢产物，未体现植物细胞的全能性，C正确； D、工厂化生产人参皂苷需要大量增殖人参细胞，需使用液体培养基进行悬浮培养，便于细胞充分接触营养物质、扩大培养规模，固体培养基不适用于工厂化大规模生产，D错误。 8. 微生物培养过程中所用的无菌技术，主要包括消毒和灭菌，下列有关叙述错误的是（　　） A. 无菌技术可防止杂菌污染，还可有效避免操作者被感染 B. 灭菌较消毒更为彻底，可杀死包括芽孢和孢子在内的所有微生物 C. 用灭菌技术处理某些物品会影响其活性或成分时，通常对这些物品进行消毒 D. 灭菌的常用方法包括湿热灭菌、干热灭菌以及化学药物灭菌 【答案】D 【解析】 【详解】A、无菌技术一方面可防止目标培养物被杂菌污染，另一方面可避免操作者被有害微生物感染，A正确； B、灭菌是用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物，包括抗性极强的芽孢和孢子，消毒仅能杀死部分微生物，不包含芽孢和孢子，因此灭菌比消毒更彻底，B正确； C、若灭菌处理会破坏物品的活性或成分（如牛奶、不耐高温的实验试剂），通常选择消毒处理，在减少杂菌的同时保留物品的功能，C正确； D、灭菌的常用方法包括灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌（高压蒸汽灭菌），化学药物处理大多属于消毒方法，D错误。 9. 为实现多肉植物的规模化生产，科研人员开展了如下研究，下列叙述正确的是（　　） A. 过程①宜选择成熟叶片，分别用次氯酸钠和体积分数为70%的酒精浸泡30s B. 过程②应避光培养，以利于愈伤组织的形成与生长 C. 过程③使用同一种培养基，就可以满足不同阶段试管苗对营养的需求 D. 过程④炼苗时需要在无菌条件下进行，以提高幼苗成活率 【答案】B 【解析】 【详解】A、过程①选取幼嫩叶片，应该在70%的酒精浸泡30s后，立即取出，用无菌水清洗2~3次，再用次氯酸钠溶液处理30min 后，立即用无菌水清洗2~3次，A错误； B、愈伤组织是高度液泡化，不定形的薄壁组织团块，过程②诱导愈伤组织期间一般不需要光照，为了防止愈伤组织分化成筛管、维管等，应避光培养，B正确； C、过程③应配制2种培养基，其主要目的是满足不同阶段试管苗对特定激素的需求，生长素/细胞分裂素比值高有利于根的分化、抑制芽的形成，生长素/细胞分裂素比值低有利于芽的分化、抑制根的形成，C错误； D、过程④将试管苗移植到消过毒的珍珠岩基质中，是为了试管苗适应外界环境，再移栽到土壤中。炼苗的目的就是让幼苗适应自然有菌环境，不需要严格无菌，D错误。 10. 研究人员用花椰菜（BB，2n=18）根与黑芥（CC，2n=16）叶片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有34条染色体。下列叙述正确的是（　　） A. 两个原生质体融合形成的细胞不一定是杂种细胞 B. 获得的原生质体需保存在无菌水中，防止被杂菌污染 C. 花椰菜和黑芥的原生质体能融合、证明两种植物间不存在生殖隔离 D. 植株N的B组和C组染色体不能正常联会配对，无法产生可育配子 【答案】A 【解析】 【详解】A、PEG诱导原生质体融合时，会出现同种原生质体融合（如花椰菜—花椰菜融合、黑芥—黑芥融合）和异种原生质体融合的情况，只有异种原生质体融合得到的才是杂种细胞，因此两个原生质体融合形成的细胞不一定是杂种细胞，A正确； B、原生质体没有细胞壁的保护，若置于无菌水中会通过渗透作用吸水涨破，应保存在等渗无菌溶液中，B错误； C、生殖隔离指自然状态下不同物种之间不能交配，或交配后不能产生可育后代的现象，原生质体融合是人工干预的技术手段，不能证明两种植物自然状态下不存在生殖隔离，C错误； D、植株N的34条染色体是花椰菜（18条，BB）和黑芥（16条，CC）的染色体总和，细胞内有2个B染色体组、2个C染色体组，减数分裂时B组的同源染色体、C组的同源染色体可分别正常联会配对，能够产生可育配子，D错误。 11. 云南昆明花卉产业基地、山东寿光果蔬基地广泛应用植物细胞工程技术，大幅提升经济效益，以下技术和相应优点的对应关系中，正确的是（　　） A. 微型繁殖技术——打破生殖隔离 B. 单倍体育种技术——利于获得突变体 C. 植物体细胞杂交技术——精准控制成体性状 D. 细胞产物的工厂化生产——不占用耕地，几乎不受季节限制 【答案】D 【解析】 【详解】A、微型繁殖技术属于无性繁殖，核心优势是保持亲本优良性状、繁殖效率高，不能打破生殖隔离，A错误； B、单倍体育种技术的优势是明显缩短育种年限，可快速获得纯合品系，突变体的筛选通常依托组织培养中分裂旺盛的细胞易发生变异的特点，和单倍体育种无直接关联，B错误； C、植物体细胞杂交技术的优势是克服远缘杂交不亲和的障碍，杂种植株同时含有两个亲本物种的遗传物质，基因表达调控复杂，无法精准控制成体性状，C错误； D、细胞产物的工厂化生产是在人工调控的发酵体系中培养愈伤组织等获得目标产物，无需在耕地种植，培养条件可人工控制，几乎不受季节限制，D正确。 12. 下列关于微生物培养与动物细胞培养操作的叙述，正确的是（　　） A. 动物细胞培养过程不需要考虑培养液的渗透压 B. 动物细胞培养过程分瓶传代培养时，可以不用胰蛋白酶处理 C. 纯培养的目的是为了获得纯净的微生物产物 D. 梯度稀释过程为了避免杂菌污染，需用蒸馏水进行稀释 【答案】B 【解析】 【详解】A、动物细胞没有细胞壁，培养液渗透压不适会导致细胞失水皱缩或吸水涨破，因此动物细胞培养过程必须考虑培养液的渗透压，A错误； B、贴壁生长的动物细胞传代时需要用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁脱落，但悬浮培养的动物细胞传代时可直接分瓶，无需胰蛋白酶处理，因此分瓶传代培养时可以不用胰蛋白酶处理，B正确； C、纯培养的目的是分离获得仅由单一微生物繁殖形成的纯净菌株，而非直接获得微生物产物，获得微生物产物是后续发酵培养的目的，C错误； D、梯度稀释为避免杂菌污染，需使用经灭菌的无菌水进行稀释，普通蒸馏水未经过灭菌含有杂菌，不能用于稀释操作，D错误。 13. 2024年3月，我国科研团队成功完成全球首例基因编辑猪肝脏移植人体的临床手术，《自然》杂志网站将这一成果评价为异种器官移植领域的重要里程碑。该技术的核心流程如下： ①从猪耳提取体细胞→②基因编辑→③构建胚胎→④移植至代孕母猪体内→培育出适宜供体 下列相关叙述错误的是（　　） A. 步骤①获得的体细胞培养时，为保证细胞正常增殖，一般使用液体培养基 B. 步骤②基因编辑的目标之一是消除猪细胞表面引发人免疫排斥的关键抗原 C. 步骤③获得的早期胚胎，通常培养至桑葚胚或囊胚阶段再进行移植 D. 步骤④应对代孕母猪进行同期发情处理并使用免疫抑制剂，提高步骤④成功率 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物体细胞培养使用液体合成培养基，可满足细胞增殖所需的营养等条件，A正确； B、异种器官移植的主要障碍是免疫排斥反应，基因编辑消除猪细胞表面引发人免疫排斥的关键抗原，可降低移植后人体的免疫排斥程度，B正确； C、早期胚胎培养至桑葚胚或囊胚阶段时分化程度低、发育活力强，是适宜进行胚胎移植的阶段，C正确； D、步骤④胚胎移植前需对代孕母猪进行同期发情处理，保证受体生理状态与胚胎发育适配，但受体子宫对外移入的胚胎基本不发生免疫排斥反应，无需使用免疫抑制剂，D错误。 14. 如图所示为早期胚胎发育过程。下列叙述错误的是（　　） A. 从a到e中，适宜于牛的胚胎移植的时期有d、e B. 可从图e的①中分离出胚胎干细胞 C. 图e的③将来可发育成胎膜和胎盘的一部分 D. 图中各阶段的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能 【答案】D 【解析】 【详解】A、从a到e中，适宜于牛的胚胎移植的时期有d桑葚胚、e囊胚， A正确； B、①内细胞团细胞具有发育的全能性，可从中分离获得胚胎干细胞，B正确； C、③滋养层细胞将来发育为胎膜和胎盘，为胚胎发育提供营养和保护，C正确； D、图中a、b、c、d阶段的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，e阶段的①内细胞团细胞也具有发育成完整胚胎的潜能，但e阶段的③滋养层细胞已分化，不具有发育成完整胚胎的潜能，D错误。 15. 近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家期望通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，其过程如下图： 以下说法错误的是（　　） A. 胚胎工程一般采用促性腺激素处理B使其超数排卵 B. 若过程①表示体外受精过程，从C获得的精子可直接受精 C. 过程②通过显微操作法去除供体卵母细胞的细胞核 D. 过程③表示早期胚胎培养，获得的F后代是克隆动物 【答案】B 【解析】 【详解】A、对B（卵母细胞供体）处理使其超数排卵，采用注射促性腺激素的方法，A正确； B、若过程①表示体外受精，C的精子不能直接受精，需要获能后，才能完成受精，B错误； C、过程②通过显微操作法去除供体卵母细胞的细胞核，目的是使重组细胞的核遗传物质完全来自供体A野化单峰骆驼，C正确； D、过程③表示早期胚胎培养，培养的是重构胚，最终获得的后代F是克隆动物，D正确。 故选B。 16. 用电融合法处理去核卵母细胞和体细胞，一段时间后检测不同电场强度下重构胚的融合率、激活率和卵裂率，结果如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 与150V/mm电场强度相比，140V/mm电场强度更有利于细胞融合 B. 相同电场强度对重构胚的融合率、激活率和卵裂率的影响结果相同 C. 去核的卵母细胞需要培养到MⅡ期才能与体细胞融合 D. 核移植的理论已经非常完善，该技术的成功率较高 【答案】A 【解析】 【详解】A、140V/mm电场强度下的融合率高于150V/mm 时的融合率，因此140 V/mm 更有利于细胞融合，A 正确； B、由图可知，相同电场强度下，融合率、激活率、卵裂率的数值不同（如140V/mm 时三者数值有差异），说明影响结果不同，B错误； C、卵母细胞需培养到MⅡ期（减数第二次分裂中期），去核后与体细胞融合，C错误； D、核移植技术目前成功率仍较低，理论和技术尚需完善，D错误。 17. 间歇浸没式生物反应器是植物组织培养中的一种新兴技术装备，通过将外植体在培养液中进行周期性浸泡培养，进行种苗繁殖和次生代谢产物的生产。下列说法错误的是（　　） A. 该培养过程需在无菌条件下进行，防止杂菌污染 B. 利用该反应器进行培养时，培养基中碳源只能选用葡萄糖 C. 周期性浸泡培养可让外植体细胞更有效地吸收营养物质并进行有氧呼吸 D. 间歇浸没式生物反应器中进行种苗繁殖和次生代谢产物生产的条件不同 【答案】B 【解析】 【详解】A、植物组织培养过程必须在无菌条件下进行，杂菌会与外植体竞争营养，还可能产生毒害物质抑制外植体生长，因此需防止杂菌污染，A正确； B、植物组织培养的培养基中碳源通常选用蔗糖，蔗糖既可提供碳源和能源，还可调节培养基渗透压，更适合植物细胞生长，B错误； C、周期性浸泡时，外植体可接触培养液吸收营养，浸泡间隙外植体可充分接触空气，保证细胞进行有氧呼吸，避免长期浸没导致无氧呼吸产生毒害，因此能更有效地吸收营养和进行有氧呼吸，C正确； D、种苗繁殖需要诱导外植体脱分化、再分化形成完整植株，需调整生长素和细胞分裂素的配比诱导分化，而次生代谢产物生产一般仅需要培养愈伤组织细胞，不需要诱导分化，二者培养条件不同，D正确。 18. 三维细胞培养技术，是一种在实验室中以三维结构培养和繁殖活细胞的方法。与传统的二维细胞培养相比，三维细胞培养更接近人体内细胞的自然环境，能够更好地模拟体内细胞的生长和相互作用（如下图所示）。下列叙述正确的是（ ） A. 三维细胞培养通常采用与二维相同的胃蛋白酶处理时间进行传代，以保证细胞充分分散 B. 三维细胞的培养不存在接触抑制现象，因此三维细胞培养增长速率比二维细胞培养更快 C. 三维细胞与培养基的接触面积更大，有利于营养物质的吸收和代谢废物的排出 D. 三维培养中细胞更容易维持正常的形态和分化功能，常用于构建器官模型进行疾病研究 【答案】D 【解析】 【详解】A、细胞在培养过程中会贴壁，还会粘连，导致细胞停止生长分裂，因此在传代培养过程中用酶处理，让细胞充分分散，以便恢复生长分裂的能力，常用的酶是胰蛋白酶，不能用胃蛋白酶，传代是在pH7.2-7.3的培养环境下操作，胃蛋白酶（最适pH是1.5-2.5）在弱碱性环境中完全失活，不能酶解，A错误； B、正常的细胞在相互接触时就会停止分裂增殖，即接触抑制，除非是癌细胞，只有癌细胞才会失去接触抑制，与培养的环境无关，与细胞种类有关，B错误； C、三维细胞是抱团生长，与培养基的接触面积更小，不利于营养物质吸收和代谢废物排出，C错误； D、三维培养模拟体内细胞生长环境，细胞更容易维持正常的形态和分化功能，常被用于器官模型来进行疾病研究，D正确。 故选D。 19. 质粒是基因工程中最常用的目的基因运载工具。下列有关叙述正确的是（　　） A. 用作运载体的质粒上应含有一个或多个限制酶切割位点 B. 质粒是只存在于细菌细胞质中能自主复制的小型环状双链DNA分子 C. 质粒上的抗生素合成基因常作为标记基因供重组DNA的鉴定和选择 D. 质粒只有整合到宿主细胞的染色体DNA上，才能进行复制 【答案】A 【解析】 【详解】A、用作运载体的质粒需含有一个或多个限制酶切割位点，方便目的基因插入到质粒中，A正确； B、质粒不是只存在于细菌细胞质中，部分真核生物如酵母菌的细胞质内也存在质粒，B错误； C、质粒上的抗生素抗性基因常作为标记基因，标记基因可用于重组DNA的鉴定和筛选，C错误； D、质粒是可自主复制的小型环状双链DNA分子，无需整合到宿主细胞的染色体DNA上也可以独立完成复制，D错误。 20. DNA连接酶是“分子缝合针”，可将切割后的DNA片段连接起来。实验室中常用的DNA连接酶有E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。下列关于两种DNA连接酶的叙述，错误的是（　　） A. 均可催化磷酸二酯键的形成 B. 催化反应的底物均为脱氧核苷酸 C. T4DNA连接酶可连接平末端和黏性末端 D. E.coliDNA连接酶能连接黏性末端 【答案】B 【解析】 【详解】A、DNA连接酶的功能都是催化脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键，连接DNA片段，两种酶都具备该功能，A正确； B、DNA连接酶催化的是DNA片段（双链DNA）之间的连接，底物为DNA片段而非游离的脱氧核苷酸（脱氧核苷酸是DNA合成的原料），B错误； C、T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，既可以连接DNA的黏性末端，也可以连接平末端（仅连接平末端效率较低），C正确； D、E.coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，能连接DNA的黏性末端，D正确。 21. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的分析，正确的是（　　） A. 可选择兔的成熟的红细胞作为提取细胞中DNA的材料 B. 研磨液在4℃下静置，主要目的是降低DNA分子的溶解度 C. 在上清液中加入预冷酒精后轻缓搅拌，可避免DNA分子的断裂 D. 用二苯胺试剂对粗提取的DNA进行鉴定时无需设置对照实验 【答案】C 【解析】 【详解】A、兔属于哺乳动物，哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和细胞器，几乎不含DNA，无法作为提取DNA的实验材料，A错误； B、研磨液在4℃下静置的主要目的是抑制DNA酶的活性，避免DNA被降解，同时促进杂质沉淀，并非降低DNA的溶解度，B错误； C、加入预冷酒精后轻缓搅拌，可减少对DNA分子的机械损伤，避免DNA分子断裂，便于收集完整的DNA丝状物，C正确； D、用二苯胺试剂鉴定DNA时需要设置对照实验（如含标准DNA的对照组），排除无关变量干扰，增强实验结果的说服力，D错误。 22. 限制酶、DNA连接酶等的发现为DNA分子的切割、连接及基因表达载体的构建创造了条件。下列关于重组DNA技术基本工具的叙述，正确的是（　　） A. 限制酶也可识别并切割RNA分子 B. 限制酶在原核细胞内的主要作用是切割修剪自身的DNA C. 基因工程中常用的载体除质粒外，还有大肠杆菌和动植物病毒 D. 天然质粒往往需要经过人工改造后才能作为基因工程载体 【答案】D 【解析】 【详解】A、限制酶即限制性核酸内切酶，只能识别并切割双链DNA分子的特定核苷酸序列，无法识别切割RNA分子，A错误； B、限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，其在原核细胞中的主要作用是切割外源DNA使之失效，从而达到保护自身的目的，B错误； C、基因工程中常用的载体包括质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等，大肠杆菌是基因工程常用的受体细胞，不属于载体，C错误； D、天然质粒通常不完全具备载体所需的条件（如适宜的限制酶切割位点、标记基因、稳定复制能力等），因此往往需要经过人工改造后才能作为基因工程载体，D正确。 23. 下列关于基因工程的叙述，错误的是（　　） A. 基因工程可以打破物种间的生殖隔离 B. 基因工程的原理是基因重组 C. 基因工程能定向改造生物的遗传特性 D. 基因工程属于细胞水平的范畴 【答案】D 【解析】 【详解】A、基因工程可将一种生物的特定基因转入另一种生物体内实现表达，克服了远缘杂交不亲和的障碍，打破了物种间的生殖隔离，A正确； B、基因工程的本质是将不同来源的基因进行拼接重组，导入受体细胞后稳定表达，原理是基因重组，B正确； C、基因工程可按照人类的意愿定向选择目的基因，定向改造生物的遗传特性，获得人类需要的性状，C正确； D、基因工程的操作对象是DNA分子，属于分子水平的操作范畴，不属于细胞水平，D错误。 24. 如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是（　　） A. DNA连接酶、限制性内切核酸酶、解旋酶 B. 解旋酶、限制性内切核酸酶、DNA聚合酶 C. 解旋酶、限制性内切核酸酶、DNA连接酶 D. 限制性内切核酸酶、DNA连接酶、解旋酶 【答案】C 【解析】 【详解】①处为氢键，是解旋酶的作用部位；②处为磷酸二酯键，是限制性内切核酸酶的作用部位；③处为两个DNA片段的缺口，是DNA连接酶的作用部位，C正确，ABD错误。 25. 限制性内切核酸酶可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。图为四种限制酶BamH I、EcoR I、Hind Ⅲ和Bgl Ⅱ的识别序列和切割位点，切割出来的黏性末端可以互补配对的是（ ） A. BamH I和EcoR I B. BamH I和Hind Ⅲ C. EcoR I和Hind Ⅲ D. BamH I和Bgl Ⅱ 【答案】D 【解析】 【详解】DNA黏性末端可以互补配对需具备互补的碱基序列，即相同的黏性末端，根据图示可知BamH Ⅰ和Bgl Ⅱ切割形成的黏性末端都是-GATC，可以互补配对，D正确，ABC错误。  故选D。 二、非选择题（本题共3小题，共50分） 26. 蓝莓酸甜宜人、细腻多汁、气味清香，口感脆爽，被誉作“水果皇后”，由蓝莓酿制的蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”和“口服化妆品”等。如下图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。结合图形和相关知识回答下列问题： （1）制作蓝莓酒的微生物是来自_______的酵母菌，因此①不要过度冲洗，防止菌种被冲洗掉；该酵母菌的代谢类型是_______型。 （2）在第④发酵阶段，发酵液虽然未经过严格的灭菌处理，但杂菌却不能正常生长繁殖，因为绝大多数微生物都无法适应_______的环境而受到抑制；第⑤发酵阶段生产蓝莓醋的原理是_______（用反应式表达）；此发酵阶段的适宜温度为_______。 （3）为测定果园土壤中酵母菌的数量，选用稀释获得的、、倍的土壤液，并依次分别吸取进行平板涂布操作。在适宜条件下培养，当菌落数目稳定时，对每组的三个平板进行菌落计数（如表）。则每克土壤样品中的酵母菌数量约为_______个。为使实验所得数据更加可靠，在各稀释度下，还应增加的一组对照是_______。 序号 I II III 稀释度倍 5 8 3 稀释度倍 178 191 156 稀释度倍 418 511 389 （4）蓝莓酒、蓝莓醋的发酵装置如图所示，排气口弯管设置的目的是_______。 【答案】（1） ①. 蓝莓果皮 ②. 异养兼性厌氧 （2） ①. 缺氧、酒精 ②. C2H5OH+O2 CH3COOH（乙酸）+H2O+能量 ③. 30-35℃ （3） ①. 1.75×106 ②. 未接种的空白培养基（接种等量无菌水的培养基） （4）在酒精发酵时用来排出 CO2，防止空气中微生物的污染 【解析】 【小问1详解】 蓝莓的果皮上就有野生酵母菌，可以利用其进行无氧呼吸产生酒精，因此①不要过度冲洗，保留菌种；该酵母菌的呼吸类型是兼性厌氧型，通过有氧呼吸增加酵母菌的数量，通过无氧呼吸进行发酵产生酒精。 【小问2详解】 第④发酵阶段是无氧发酵阶段产生酒精阶段，发酵液缺氧、酒精多，绝大多数微生物都无法适应该环境，因此发酵液虽然未经过 严格的灭菌处理，但杂菌却不能正常生长繁殖。蓝莓酒制作蓝莓醋的原理是 C2H5OH+O2 CH3COOH（乙酸）+H2O+能量，醋酸菌的适宜温度为 30-35℃。 【小问3详解】 选取菌落数在 30~300 之间的平板计数，符合条件的稀释倍数是 103 倍，0.1 mL 的稀释液中含有活 菌数为（178 +191 + 156）÷3=175 个，1mL 中有 1750 个，每克土壤样品中约含酵母菌 1750×103=1.75 ×106 个；要使该实验所得数据可靠，还应该设置对照实验，即同时在各稀释度组中，另加一个未接种的空白培养基（接种等量无菌水的培养基）作为对照，以确保培养基灭菌和培养条件合格。 【小问4详解】 排气口弯管是用于在酒精发酵时排出 CO2，防止空气中微生物的污染。 27. 甲植物（2n=20）具有由核基因控制的多种优良性状，远缘植物乙（4n=36）的线粒体中存在抗盐碱基因，科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗盐碱性状的优良品种丙，途径如图所示。已知X射线处理会使细胞分裂功能丧失但不影响线粒体功能，丙烯酸异辛酯（IOA）处理会使线粒体失活，但不影响细胞分裂。回答下列问题： （1）过程①常用酶解法去除细胞壁，利用的酶是_______。过程②常用物理法促进细胞融合，如_______（答出两点）。 （2）过程④表示_______过程；若要诱导愈伤组织分化形成芽，培养基中应适当提高_______（填“生长素”或“细胞分裂素”）的比例。过程④中，会在培养基中加入蔗糖，蔗糖的作用是_______。 （3）利用植物体细胞杂交技术获得杂种植株丙的生物学原理是_______。取植物的顶芽细胞进行培育，有利于获得脱毒苗，原因是_______。 （4）理论上杂种植株丙属于_______倍体植株；检测植株丙是否具有所需优良性状的方法是_______。 （5）在细胞融合体系中，未融合的细胞不能形成愈伤组织，原因是_______。 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 电融合法和离心法 （2） ①. 脱分化 ②. 细胞分裂素 ③. 维持渗透压，提供能源 （3） ①. 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 ②. 顶芽细胞附近的病毒极少，甚至无病毒 （4） ①. 六 ②. 用高浓度的盐溶液处理植株丙，一段时间后观察植株丙是否能正常生长 （5）未融合的细胞和同种细胞的融合细胞均不能正常分裂 【解析】 【小问1详解】 植物细胞的细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，去除植物细胞的细胞壁需要用纤维素酶和果胶酶。即过程①常用纤维素酶和果胶酶处理获得原生质体；促进细胞融合的物理方法有电融合法和离心法等，即过程②所用的物理法促进细胞融合有电融合法和离心法等。 【小问2详解】 流程中④表示脱分化过程，⑤表示再分化过程，若要诱导愈伤组织分化形成芽，培养基中应适当提高细胞分裂素的比例，若诱导生根，则需要提高生长素的比例。过程④中，会在培养基中加入蔗糖，蔗糖的作用是维持渗透压和提供组织培养的能量。 【小问3详解】 原生质体融合利用细胞膜的流动性，杂种细胞形成新植物体利用植物细胞的全能性。即利用植物体细胞杂交技术获得杂种植株丙的生物学原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性；植物顶端分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，因此，取顶芽细胞进行植物组织培养可获得脱毒苗。 【小问4详解】 甲植物（2n=20）具有由核基因控制的多种优良性状，远缘植物乙（4n=36）的线粒体中存在抗盐碱基因，因而推测，理论上获得的杂种植株丙属于六倍体植株。根据题意可知，利用植物体细胞杂交技术培育的品种丙具有抗盐碱性状，为了检测植株丙是否具有所需优良性状的简便方法是用高浓度的盐溶液处理植株丙，一段时间后观察植株丙是否能正常生长，能正常生长的是符合要求的植株。 【小问5详解】 题意显示，已知X射线处理会使细胞分裂功能丧失但不影响线粒体功能，丙烯酸异辛酯（IOA）处理会使线粒体失活，因此，在细胞融合体系中，未融合的细胞和同种细胞的融合细胞均不能正常分裂，都不能形成愈伤组织，只有杂种细胞由于生理互补能形成愈伤组织。 28. 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合。癌症的免疫疗法可通过使用双特异性抗体重新激活抗肿瘤的免疫细胞，进而克服肿瘤的免疫逃逸。PSMA是某些种类癌细胞表面高表达蛋白，CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。科研人员尝试构建双特异性抗体PSMA×CD28的生产流程，如图甲所示；双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理，如图乙所示。 （1）动物细胞培养时，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等明确的营养成分外，往往还需加入一定量的_______，以满足动物细胞培养的营养需要，并将其置于_______的气体环境的培养箱中进行培养。 （2）图甲中②表示用一定的方法促进细胞融合，动物细胞特有的融合方法是_______，③过程通常用HAT培养基，其中含有次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷3种关键成分，哺乳动物正常细胞的DNA合成有D和S两条途径，淋巴细胞中虽有D途径和S途径，但不能无限分裂增殖；骨髓瘤细胞只有D途径，但能不断分裂增殖；氨基蝶呤可阻断D途径。据此分析，HAT培养基上只有_______细胞能分裂增殖，该类细胞能分裂增殖的原因是_______。 （3）为选出能产生专一抗体的细胞，要将从HAT选择培养基上筛选出的细胞稀释到710个细胞·mL-1，将细胞稀释液滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中最多有_______个细胞，然后筛选出专一抗体检测呈_______（选填“阳性”或“阴性”）的细胞进行克隆化培养，该克隆化培养细胞具有的特点是_______。 （4）结合题干，据图乙分析，双特异性抗体PSMA×CD28协助杀伤癌细胞的机理是_______。 【答案】（1） ①. 动物血清 ②. 95%的空气和 5%CO2 （2） ①. 灭活病毒诱导融合法 ②. 杂交瘤细胞 ③. 杂交瘤细胞能利用正常细胞的S途径进行DNA的复制 （3） ①. 一##1 ②. 阳性 ③. 既能无限增殖，又能产生特异性抗体 （4）双特异性抗体PSMA×CD28既能结合PSMA，又能结合CD28，使CD28在癌细胞与T细胞结合部位聚集， 从而有效激活T细胞杀伤癌细胞 【解析】 【小问1详解】 人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，在使用合成培养基时，通常需加入动物血清等一些天然成分。动物细胞培养的气体环境：95%空气和5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【小问2详解】 图中①表示用一定的方法促进细胞融合，灭活病毒诱导细胞融合的方法是动物细胞特有的融合方法。 ③过程通常用HAT培养基，其中含有次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷3种关键成分。哺乳动物正常细胞的DNA合成有D和S两条途径，淋巴细胞中虽有D途径和S途径，但一般不分裂增殖；骨髓瘤细胞虽只有D途径，但能不断分裂增殖。氨基蝶呤可阻断D途径，S途径需要HGPRT和TK两种酶的参与，以催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷用于DNA合成。图中HAT培养基上长出的时杂交瘤细胞，杂交瘤细胞能利用正常细胞的S途径进行DNA复制，进而实现增殖，同时S途径需要HGPRT和TK两种酶的参与，以催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷用于DNA合成，据此推测在该培养基上还应该添加的物质有HGPRT和TK两种酶，即在该培养基上只有杂交瘤细胞能生长。杂交瘤细胞能利用正常细胞的S途径进行DNA的复制，因而可以实现DNA增殖过程。 【小问3详解】 筛选出专一抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞进行克隆化培养时，每孔中最多有一个细胞， 从而达到单克隆培养的目的。此后还要经过专一抗体检测，选出阳性的细胞进行克隆化培养。该克隆化培养细胞具有的特点为既能无限增殖，又能产生特异性抗体。 【小问4详解】 双特异性抗体PSMA×CD28协助杀伤癌细胞的机理是：双特异性抗体PSMA×CD28既能结合PSMA，又能结合CD28，使CD28在癌细胞与T细胞结合部位聚集， 从而有效激活T细胞杀伤癌细胞。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 开封高中27届高二年级下学期学情调研 生物学科 一、选择题（本题共25小题，每小题2分，共50分） 1. 下列关于传统发酵技术及发酵工程的叙述，正确的是（　　） A. 以尿素为唯一氮源的培养基上只有分解尿素的细菌能生长和繁殖 B. 泡菜坛装至八成满可防止发酵液溢出，同时避免菜料因接触空气而变质腐烂 C. 啤酒生产过程中通常加入啤酒花以提供发酵的菌种 D. 为防止杂菌污染，菌液涂布均匀后需立即将平板倒置 2. 《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺，“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列有关叙述错误的是（ ） A. “酒一斗，用水三斗，合瓮盛”是为避免酒精浓度过高抑制微生物的生长繁殖 B. “置日中曝之”可以提高发酵液温度，有利于醋酸发酵，缩短发酵时间 C. “衣（指菌膜）”位于变酸的酒表面，是由原酒中的酵母菌大量繁殖形成的 D. “挠搅”有利于酒精与微生物的充分接触，且可增加溶液中的溶解氧 3. 从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是（　　） A. 制备的培养基可用紫外线照射进行灭菌 B. 鉴定致病菌时，可通过观察菌落的形态、大小、颜色等特征进行初步判断 C. 进行稀释涂布平板时，灼烧后的涂布器无需冷却，可直接蘸取菌液进行涂布 D. 纯化致病菌时，可直接用接种环蘸取土壤悬液在平板上划线分离 4. 某生物兴趣小组完成了“某果园土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”的实验，实验过程中，步骤④接种并设置三个重复平板，统计得到平均菌落数为160个，实验主要操作流程如图所示。下列有关叙述正确的是（　　） A. 步骤②充分振荡的目的是为了增加尿素分解菌的浓度 B. 步骤⑤使用的接种环至少灼烧3次 C. 由菌落计数结果可知10克土样中的菌株数约为个 D. ④⑤使用的接种工具不同，两种接种方法均可用于微生物的分离、纯化与计数 5. 一定浓度的抗生素会杀死细菌，但变异的细菌可能产生耐药性。为探究某种抗生素对大肠杆菌的选择作用，将大肠杆菌培养液接种到培养基上后，继续放置含该抗生素的圆形滤纸片和不含抗生素的圆形滤纸片，一段时间后测量滤纸片周围抑菌圈的直径，第一代培养结果如图所示。然后再重复上述步骤培养三代。与上述实验相关的叙述不符的是（        ） A. 抑菌圈边缘的大肠杆菌可能发生了基因突变或染色体变异 B. 图中1处放入不含抗生素的滤纸片起到对照作用 C. 挑取抑菌圈边缘的菌落重复该实验，抑菌圈的直径变得越小，说明大肠杆菌的耐药性越强 D. 实验结束后，应将耐药大肠杆菌、培养基、纸片等进行高温灭菌处理 6. 微生物的培养需要适宜的条件。下列相关叙述正确的是（　　） A. 培养基中必须添加水、碳源、氮源、无机盐和特殊营养物质等 B. 发酵液pH呈酸性时，谷氨酸棒状杆菌会积累谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺 C. 制备微生物培养基时，应先灭菌再调节pH，以避免杂菌污染 D. 为了便于接种和获取产物，培养基中都要添加琼脂或其他凝固剂 7. 关于细胞工程应用的叙述，正确的是（　　） A. 将桑葚胚或囊胚分割后经移植获得的同卵双胎或多胎的表型完全相同 B. 将草莓茎尖脱毒培养可获得产量和品质提升的抗病毒草莓 C. 植物细胞培养的过程未体现植物细胞具有全能性 D. 将人参细胞接种在固体培养基上以利于工厂化生产人参皂苷 8. 微生物培养过程中所用的无菌技术，主要包括消毒和灭菌，下列有关叙述错误的是（　　） A. 无菌技术可防止杂菌污染，还可有效避免操作者被感染 B. 灭菌较消毒更为彻底，可杀死包括芽孢和孢子在内的所有微生物 C. 用灭菌技术处理某些物品会影响其活性或成分时，通常对这些物品进行消毒 D. 灭菌的常用方法包括湿热灭菌、干热灭菌以及化学药物灭菌 9. 为实现多肉植物的规模化生产，科研人员开展了如下研究，下列叙述正确的是（　　） A. 过程①宜选择成熟叶片，分别用次氯酸钠和体积分数为70%的酒精浸泡30s B. 过程②应避光培养，以利于愈伤组织的形成与生长 C. 过程③使用同一种培养基，就可以满足不同阶段试管苗对营养的需求 D. 过程④炼苗时需要在无菌条件下进行，以提高幼苗成活率 10. 研究人员用花椰菜（BB，2n=18）根与黑芥（CC，2n=16）叶片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有34条染色体。下列叙述正确的是（　　） A. 两个原生质体融合形成的细胞不一定是杂种细胞 B. 获得的原生质体需保存在无菌水中，防止被杂菌污染 C. 花椰菜和黑芥的原生质体能融合、证明两种植物间不存在生殖隔离 D. 植株N的B组和C组染色体不能正常联会配对，无法产生可育配子 11. 云南昆明花卉产业基地、山东寿光果蔬基地广泛应用植物细胞工程技术，大幅提升经济效益，以下技术和相应优点的对应关系中，正确的是（　　） A. 微型繁殖技术——打破生殖隔离 B. 单倍体育种技术——利于获得突变体 C. 植物体细胞杂交技术——精准控制成体性状 D. 细胞产物的工厂化生产——不占用耕地，几乎不受季节限制 12. 下列关于微生物培养与动物细胞培养操作的叙述，正确的是（　　） A. 动物细胞培养过程不需要考虑培养液的渗透压 B. 动物细胞培养过程分瓶传代培养时，可以不用胰蛋白酶处理 C. 纯培养的目的是为了获得纯净的微生物产物 D. 梯度稀释过程为了避免杂菌污染，需用蒸馏水进行稀释 13. 2024年3月，我国科研团队成功完成全球首例基因编辑猪肝脏移植人体的临床手术，《自然》杂志网站将这一成果评价为异种器官移植领域的重要里程碑。该技术的核心流程如下： ①从猪耳提取体细胞→②基因编辑→③构建胚胎→④移植至代孕母猪体内→培育出适宜供体 下列相关叙述错误的是（　　） A. 步骤①获得的体细胞培养时，为保证细胞正常增殖，一般使用液体培养基 B. 步骤②基因编辑的目标之一是消除猪细胞表面引发人免疫排斥的关键抗原 C. 步骤③获得的早期胚胎，通常培养至桑葚胚或囊胚阶段再进行移植 D. 步骤④应对代孕母猪进行同期发情处理并使用免疫抑制剂，提高步骤④成功率 14. 如图所示为早期胚胎发育过程。下列叙述错误的是（　　） A. 从a到e中，适宜于牛的胚胎移植的时期有d、e B. 可从图e的①中分离出胚胎干细胞 C. 图e的③将来可发育成胎膜和胎盘的一部分 D. 图中各阶段的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能 15. 近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家期望通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，其过程如下图： 以下说法错误的是（　　） A. 胚胎工程一般采用促性腺激素处理B使其超数排卵 B. 若过程①表示体外受精过程，从C获得的精子可直接受精 C. 过程②通过显微操作法去除供体卵母细胞的细胞核 D. 过程③表示早期胚胎培养，获得的F后代是克隆动物 16. 用电融合法处理去核卵母细胞和体细胞，一段时间后检测不同电场强度下重构胚的融合率、激活率和卵裂率，结果如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 与150V/mm电场强度相比，140V/mm电场强度更有利于细胞融合 B. 相同电场强度对重构胚的融合率、激活率和卵裂率的影响结果相同 C. 去核的卵母细胞需要培养到MⅡ期才能与体细胞融合 D. 核移植的理论已经非常完善，该技术的成功率较高 17. 间歇浸没式生物反应器是植物组织培养中的一种新兴技术装备，通过将外植体在培养液中进行周期性浸泡培养，进行种苗繁殖和次生代谢产物的生产。下列说法错误的是（　　） A. 该培养过程需在无菌条件下进行，防止杂菌污染 B. 利用该反应器进行培养时，培养基中碳源只能选用葡萄糖 C. 周期性浸泡培养可让外植体细胞更有效地吸收营养物质并进行有氧呼吸 D. 间歇浸没式生物反应器中进行种苗繁殖和次生代谢产物生产的条件不同 18. 三维细胞培养技术，是一种在实验室中以三维结构培养和繁殖活细胞的方法。与传统的二维细胞培养相比，三维细胞培养更接近人体内细胞的自然环境，能够更好地模拟体内细胞的生长和相互作用（如下图所示）。下列叙述正确的是（ ） A. 三维细胞培养通常采用与二维相同的胃蛋白酶处理时间进行传代，以保证细胞充分分散 B. 三维细胞的培养不存在接触抑制现象，因此三维细胞培养增长速率比二维细胞培养更快 C. 三维细胞与培养基的接触面积更大，有利于营养物质的吸收和代谢废物的排出 D. 三维培养中细胞更容易维持正常的形态和分化功能，常用于构建器官模型进行疾病研究 19. 质粒是基因工程中最常用的目的基因运载工具。下列有关叙述正确的是（　　） A. 用作运载体的质粒上应含有一个或多个限制酶切割位点 B. 质粒是只存在于细菌细胞质中能自主复制的小型环状双链DNA分子 C. 质粒上的抗生素合成基因常作为标记基因供重组DNA的鉴定和选择 D. 质粒只有整合到宿主细胞的染色体DNA上，才能进行复制 20. DNA连接酶是“分子缝合针”，可将切割后的DNA片段连接起来。实验室中常用的DNA连接酶有E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。下列关于两种DNA连接酶的叙述，错误的是（　　） A. 均可催化磷酸二酯键的形成 B. 催化反应的底物均为脱氧核苷酸 C. T4DNA连接酶可连接平末端和黏性末端 D. E.coliDNA连接酶能连接黏性末端 21. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的分析，正确的是（　　） A. 可选择兔的成熟的红细胞作为提取细胞中DNA的材料 B. 研磨液在4℃下静置，主要目的是降低DNA分子的溶解度 C. 在上清液中加入预冷酒精后轻缓搅拌，可避免DNA分子的断裂 D. 用二苯胺试剂对粗提取的DNA进行鉴定时无需设置对照实验 22. 限制酶、DNA连接酶等的发现为DNA分子的切割、连接及基因表达载体的构建创造了条件。下列关于重组DNA技术基本工具的叙述，正确的是（　　） A. 限制酶也可识别并切割RNA分子 B. 限制酶在原核细胞内的主要作用是切割修剪自身的DNA C. 基因工程中常用的载体除质粒外，还有大肠杆菌和动植物病毒 D. 天然质粒往往需要经过人工改造后才能作为基因工程载体 23. 下列关于基因工程的叙述，错误的是（　　） A. 基因工程可以打破物种间的生殖隔离 B. 基因工程的原理是基因重组 C. 基因工程能定向改造生物的遗传特性 D. 基因工程属于细胞水平的范畴 24. 如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是（　　） A. DNA连接酶、限制性内切核酸酶、解旋酶 B. 解旋酶、限制性内切核酸酶、DNA聚合酶 C. 解旋酶、限制性内切核酸酶、DNA连接酶 D. 限制性内切核酸酶、DNA连接酶、解旋酶 25. 限制性内切核酸酶可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。图为四种限制酶BamH I、EcoR I、Hind Ⅲ和Bgl Ⅱ的识别序列和切割位点，切割出来的黏性末端可以互补配对的是（ ） A. BamH I和EcoR I B. BamH I和Hind Ⅲ C. EcoR I和Hind Ⅲ D. BamH I和Bgl Ⅱ 二、非选择题（本题共3小题，共50分） 26. 蓝莓酸甜宜人、细腻多汁、气味清香，口感脆爽，被誉作“水果皇后”，由蓝莓酿制的蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”和“口服化妆品”等。如下图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。结合图形和相关知识回答下列问题： （1）制作蓝莓酒的微生物是来自_______的酵母菌，因此①不要过度冲洗，防止菌种被冲洗掉；该酵母菌的代谢类型是_______型。 （2）在第④发酵阶段，发酵液虽然未经过严格的灭菌处理，但杂菌却不能正常生长繁殖，因为绝大多数微生物都无法适应_______的环境而受到抑制；第⑤发酵阶段生产蓝莓醋的原理是_______（用反应式表达）；此发酵阶段的适宜温度为_______。 （3）为测定果园土壤中酵母菌的数量，选用稀释获得的、、倍的土壤液，并依次分别吸取进行平板涂布操作。在适宜条件下培养，当菌落数目稳定时，对每组的三个平板进行菌落计数（如表）。则每克土壤样品中的酵母菌数量约为_______个。为使实验所得数据更加可靠，在各稀释度下，还应增加的一组对照是_______。 序号 I II III 稀释度倍 5 8 3 稀释度倍 178 191 156 稀释度倍 418 511 389 （4）蓝莓酒、蓝莓醋的发酵装置如图所示，排气口弯管设置的目的是_______。 27. 甲植物（2n=20）具有由核基因控制的多种优良性状，远缘植物乙（4n=36）的线粒体中存在抗盐碱基因，科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗盐碱性状的优良品种丙，途径如图所示。已知X射线处理会使细胞分裂功能丧失但不影响线粒体功能，丙烯酸异辛酯（IOA）处理会使线粒体失活，但不影响细胞分裂。回答下列问题： （1）过程①常用酶解法去除细胞壁，利用的酶是_______。过程②常用物理法促进细胞融合，如_______（答出两点）。 （2）过程④表示_______过程；若要诱导愈伤组织分化形成芽，培养基中应适当提高_______（填“生长素”或“细胞分裂素”）的比例。过程④中，会在培养基中加入蔗糖，蔗糖的作用是_______。 （3）利用植物体细胞杂交技术获得杂种植株丙的生物学原理是_______。取植物的顶芽细胞进行培育，有利于获得脱毒苗，原因是_______。 （4）理论上杂种植株丙属于_______倍体植株；检测植株丙是否具有所需优良性状的方法是_______。 （5）在细胞融合体系中，未融合的细胞不能形成愈伤组织，原因是_______。 28. 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合。癌症的免疫疗法可通过使用双特异性抗体重新激活抗肿瘤的免疫细胞，进而克服肿瘤的免疫逃逸。PSMA是某些种类癌细胞表面高表达蛋白，CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。科研人员尝试构建双特异性抗体PSMA×CD28的生产流程，如图甲所示；双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理，如图乙所示。 （1）动物细胞培养时，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等明确的营养成分外，往往还需加入一定量的_______，以满足动物细胞培养的营养需要，并将其置于_______的气体环境的培养箱中进行培养。 （2）图甲中②表示用一定的方法促进细胞融合，动物细胞特有的融合方法是_______，③过程通常用HAT培养基，其中含有次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷3种关键成分，哺乳动物正常细胞的DNA合成有D和S两条途径，淋巴细胞中虽有D途径和S途径，但不能无限分裂增殖；骨髓瘤细胞只有D途径，但能不断分裂增殖；氨基蝶呤可阻断D途径。据此分析，HAT培养基上只有_______细胞能分裂增殖，该类细胞能分裂增殖的原因是_______。 （3）为选出能产生专一抗体的细胞，要将从HAT选择培养基上筛选出的细胞稀释到710个细胞·mL-1，将细胞稀释液滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中最多有_______个细胞，然后筛选出专一抗体检测呈_______（选填“阳性”或“阴性”）的细胞进行克隆化培养，该克隆化培养细胞具有的特点是_______。 （4）结合题干，据图乙分析，双特异性抗体PSMA×CD28协助杀伤癌细胞的机理是_______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $