3.1DNA的粗提取和鉴定课件-2025-2026学年高二下学期生物人教版选择性必修3

该高中生物学课件聚焦“DNA的粗提取与鉴定”，涵盖DNA理化特性、提取鉴定原理及操作技能。通过“从细胞提取DNA的困难与方法”等思考问题导入，引导学生基于细胞成分差异建立知识脉络，搭建学习支架。 其亮点在于以问题链驱动科学思维，如选材讨论（哺乳动物红细胞无核等）培养分析能力，实验步骤（香蕉研磨、酒精析出）强化探究实践，结合DNA与其他成分差异渗透结构与功能观（生命观念）。学生能提升实验操作与结果分析能力，教师可借助清晰流程与问题设计优化教学。

DNA 的粗提取与鉴定 学习目标 1、说出DNA的理化特性 2、阐明DNA粗提取与坚定的基本原理 3、掌握破碎细胞、去除杂质、析出DNA的操作技能，提升实验设计、操作实施、现象描述与结果分析能力 思考： 1、从哪里提取DNA？ 2、从细胞中提取DNA有哪些困难？如何提取？ DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面存在差异，可以利用这些差异，选用适当的物理或化学方法去除其他成分，对DNA进行提取。 细胞内成分复杂，且真核生物的DNA和蛋白质结合形成染色体，难以分离提纯。 细胞 一、实验原理 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。 DNA不溶于酒精， 但某些蛋白质溶于酒精 DNA能溶于物质的量浓度为 2 mol/L的NaCl溶液 在一定温度下， DNA被二苯胺试剂染成蓝色 初步分离 DNA和蛋白质 溶解DNA 鉴定DNA 3 （1）了解DNA的物理和化学性质，理解DNA粗提取和鉴定的原理。 （2）学会DNA粗提取的方法以及用二苯胺试剂对DNA进行鉴定。 二、实验目的 4 三、材料用具 【思考1】能否选用牛、羊、马、猪等哺乳动物成熟的红细胞做实验材料？ 不能， 哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核和线粒体，几乎不含DNA。 【思考2】能否选用鸡血细胞做实验材料？ 能，鸡是鸟类动物，需加入3 g柠檬酸钠（抗凝剂），防止血液凝固 DNA含量相对较高的生物组织，如新鲜洋葱、香蕉、菜花和猪肝等。 1、选材： 【思考3】动物细胞是否需要研磨破碎细胞？ 动物细胞无细胞壁,可直接吸水涨破(省去研磨步骤)，释放DNA。 2、试剂： ①研磨液 ②体积分数为95%的酒精 ③2mol/L 的NaCl溶液 ④二苯胺试剂 ⑤蒸馏水 ——溶解并提取DNA ——析出DNA ——溶解DNA ——鉴定DNA，要现配现用 研磨液成分 作用 SDS 使蛋白质变性 EDTA 抑制DNA酶活性 Tris-HCl缓冲液 稳定DNA 三、材料用具 洗洁精（可以溶解脂质和蛋白质，破坏细胞膜、核膜） 这里研磨液我们用洗洁精代替 6 1、取材研磨 取半根去皮香蕉，放入保鲜袋捏碎。 取20ml蒸馏水，5ml洗洁精（可以溶解脂质和蛋白质，破坏细胞膜、核膜），2g食盐（中和DNA中的负电，使其溶解）混匀加入保鲜袋，轻轻搅拌均匀，静置3—5min。 2、过滤取上清液 多层纱布过滤研磨液，弃去残渣，收集滤液 3、无水乙醇析出DNA 沿杯壁缓慢靠日等体积的预冷的酒精溶液，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA 四、实验步骤——DNA的粗提取 展示学生成果，讨论结果差异 7 四、实验步骤——DNA的溶解与鉴定 注：DNA越多，溶液蓝色越深 DNA + 二苯胺 蓝色 沸水浴 思考回答下列问题 1. 过滤能否用滤纸代替纱布？ 不可以。因为DNA会被吸附到滤纸上而大量损失，影响最终提取的DNA量。 2.本次离心或者过滤选择的是上清液还是沉淀物？ 3. 提取出来的DNA可能含有哪些杂质呢？ 选择上清液，因为在研磨液体系中DNA可溶解，过滤或者离心DNA都位于上清液 核蛋白、多糖等杂质 思考回答下列问题 4.预冷酒精的目的？ ①低温可抑制核酸水解酶的活性，防止DNA降解。 ②低温可减缓分子的运动，使DNA易于形成沉淀析出。 ③低温有利于增加 DNA分子的柔韧性，减少断裂。 ④因DNA不溶于冷酒精，而其他物质可以溶解在酒精中，使含杂质较少的DNA丝状物可以析出，悬浮于溶液中。 本实验只是对DNA进行了粗提取，有没有其它方法可以提取纯度较高的DNA呢？ 【进一步探究】 1.如图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图，请据图分析，回答下列问题： (1)右述图示中，该实验的正确操作顺序是__________________________ (用序号与箭头表示)。 (2)步骤④中使用2 mol/L NaCl溶液的目的是 。 ③→②→①→④→⑤ 溶解DNA 课堂小练 (3)步骤①的目的是 ， 其依据的原理是 。 析出并获得DNA DNA不溶于酒精 (4)步骤①中所得到的丝状物为 色，若要鉴定其主要成分为DNA，可滴加 ________试剂， 后，如果出现 则证明该丝状物的主要成分为DNA。 白 二苯胺 沸水浴加热 蓝色 (5)由于鸡血较难找到，某学生试图用猪血代替，结果没有成功，其原因最可能是_______________________________________________________。 猪是哺乳动物，哺乳动物血液中成熟的红细胞没有细胞核 $