江苏扬州市新华中学2026届高三下学期3月考前适应性练习二生物学试卷

扬州市新华中学2026届高三3月考前适应性练习二 生物学参考答案 一、单项选择题（共15题，每题2分，共30分） 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 答案 B C A C D B C C D D C B B C B 部分难题解析： 第5题： 根据电泳条带分析，乙型血友病（b基因）位于常染色体。若3号患病且为乙型，则其基因型为bb。图2中条带2对应A基因（正常），条带1对应a基因（甲型致病）。5号个体（正常男性）基因型为BbX^A Y，产生bY精子的概率为1/2，而非1/3。 第10题： NO属于气体信号分子。途径III中NO作用于突触前膜，促进递质释放，但途径II是NO在突触后神经元内产生的，作用于自身或前膜。选项D表述“神经递质...促进NO合成”与图示中Ca2+内流激活NOS酶合成NO的机制不符，或存在因果倒置/描述不清。 第15题： 样方大小为20×20m（400m²），林地面积1km²（1,000,000m²）。麻栎数量计算：(14+20+16+18+15) = 83株 / 5个样方。估算总数 = (83/5) × (1,000,000/400) = 41,500株，接近A选项。B选项错误在于种群密度大不代表总生物量一定高（受个体大小、环境承载力限制）。 二、多项选择题（共4题，每题3分，共12分） 题号 16 17 18 19 答案 AC CD AB ABC 解析： 16题： 滨蟹（捕食者）增多 → 玉黍螺（被捕食者）减少 → 墨角藻（被食者）增多。符合捕食者-猎物数量波动的逻辑模型应为AC。 17题： 图1为有丝分裂（根尖），图2为减数分裂（花粉母细胞）。C错误，有丝分裂不发生基因重组；D错误，低渗处理（如蒸馏水或低浓度KCl）是为了分散染色体，但通常用于动物细胞，植物细胞制片多用酶解或压片，且“低浓度KCl”在此语境下不准确。 18题： A错误，土样通常取表层肥沃土壤；B错误，自生固氮菌虽能固氮，但通常是异养型，血细胞计数板可计数死活菌总数；D错误，选择培养基不加氮源是正确的，但题目问“不正确”的。 19题： A错误，80℃处理不是为了杀死所有微生物（那是灭菌），且可能破坏营养；B错误，酸奶发酵是乳酸菌厌氧发酵，不需要放气；C错误，图中显示5%糖度时酸度并非最高，且需结合口感综合判断。 三、非选择题（共5题，共58分） 20. (12分) (1) 吸收、传递光能（1分）；镁是叶绿素的组成元素，缺镁导致叶绿素合成受阻，光反应减弱（1分）。 (2) 3（或多个）（1分）；减少实验误差，避免偶然性（1分）；剪碎（1分）；无水乙醇（或丙酮）（1分）。 (3) RNA（或mRNA）（1分）；AggltQ（1分）；叶绿素降解速率大于合成速率（或净降解增加）（1分）。 (4) a、b、c、e（2分，少选得1分，错选不得分）； 实验设计填空： 不同浓度的API（或API溶液）（1分） Bax/bc1-2比值（或线粒体跨膜电位、细胞色素C释放量、Caspase-9活性）（1分） 细胞凋亡率（或癌细胞存活率）（1分） 21. (12分) (1) hwa⁺/hwa⁻（1分）；hwa⁻/hwa⁻（1分）。 (2) B（母本）（1分）。 (3) 基因型为hwa⁻/hwa⁻的个体，若母本提供了正常的hwa⁺ mRNA或蛋白质，胚胎发育可正常（母体效应）（2分）。 (4) hwa⁺/hwa⁺ : hwa⁺/hwa⁻ : hwa⁻/hwa⁻ = 1:2:1（1分）；正常 : 葫芦型 = 3:1（错误，应为全正常或取决于母本基因型。正确答案应为：基因型1:2:1，表型全正常，因为母本是hwa⁺/hwa⁻，提供了正常物质）（1分）。 (5) 母本基因型为hwa⁻/hwa⁻时，无法向卵细胞提供正常的hwa⁺基因产物（mRNA/蛋白），导致受精卵无法正常启动体轴发育程序，导致严重背侧化（葫芦型）（2分）。 (6) 实验设计： a: ①（不注射）（1分） b: ②（注射hwa⁺基因编码的mRNA）（1分） c: ⑥（细胞核内β-cat蛋白含量基本不变）（1分） d: ④（细胞核内β-cat蛋白含量增加）（1分） 22. (11分) (1) 含碳有机物（1分）；(120.5 - 70.0) = 50.5（1分）；负值（1分）。 (2) ① 适应性强，易于成活；维持当地生态系统的稳定性（2分）；协调（1分）。 ② 分解者（1分）；食物链（和食物网）（1分）；抗生素（1分）。 (3) ①②④（2分，少选得1分，错选不得分）。 23. (12分) (1) 脑干（1分）；脊髓（1分）；交感（1分）。 (2) 神经递质（乙酰胆碱）（1分）；特异性受体（1分）。 (3) 辅助性T细胞（1分）；分泌细胞因子，激活B细胞和细胞毒性T细胞（2分）。 (4) 记忆细胞（1分）；抗体（1分）。 (5) ① tVNS刺激能显著降低DOX引起的心肌损伤（降低血清中CK-MB和LDH含量）；tVNS与DOX联合使用能更有效地抑制肿瘤生长（2分）。 ② 增加INF-γ分泌，上调MHC-I分子（1分）。 24. (11分) (1) 一（1分）；非特异性（1分）。 (2) 核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜（或核糖体 → 内质网 → 高尔基体 → 细胞膜）（2分，答全得2分，少答得1分）。 (3) a: ⑨（X-gal）（1分）（注：利用蓝白斑筛选，重组质粒破坏lacZ，菌落为白色，需加X-gal显色）。 b: ①③（BamH I 和 Bgl II）（1分）（注：需利用同尾酶或兼容末端连接，且避开Kan抗性基因内部的酶切位点，具体需看图2，此处推测为利用不同酶避免自连）。 c: ⑧（氯霉素）（1分）（注：第二轮筛选需用Cm抗性，保留Kan抗性）。 (4) A（1分）；基因表达载体的构建（1分）。 (5) ①②③（2分，少选得1分，错选不得分）。 学科网（北京）股份有限公司 $ 扬州市新华中学2026届高三3月考前适应性练习二 生物学试卷 一、单项选择题：共15题,每题2分,共30分。每题只有一个选项最符合题意。 1. 我国科研团队在人造细胞内实现了“葡萄糖→丙酮酸→丙氨酸”的转化。人造细胞内ATP 能驱动肌动蛋白聚合，使细胞形态改变。下列叙述错误的是 A. 葡萄糖、肌动蛋白都含有C、H、O元素 B. 丙氨酸是对人造细胞生命活动有重要作用的必需氨基酸 C. ATP水解释放的磷酸基团可与肌动蛋白结合使其发生磷酸化 D. 肌动蛋白形成细丝，是细胞骨架的必需元件，与人造细胞形态转变相关 2. 下列有关病毒、原核细胞和真核细胞的叙述，正确的是 A. 病毒结构简单，仅有蛋白质外壳和内部的DNA或RNA构成 B. 青霉菌、醋酸菌、乳酸菌都属于原核生物，它们的遗传物质都是DNA C. 原核细胞内遗传物质是拟核区域的闭合环状DNA D. 有些原核细胞可以进行光合作用，真核细胞不一定含有核糖体 3. 关于生物学实验，下列叙述正确的是 A. 检测生物组织中的脂肪时，滴加1~2滴体积分数为50%的酒精，洗去浮色 B. 制作根尖有丝分裂装片时，剪取洋葱根尖的长度在2~3cm左右 C. 植物细胞处于质壁分离状态时，光学显微镜下能清晰观察到细胞膜结构 D. 黑藻叶片不能用于观察植物细胞的质壁分离和复原 4. 图甲表示在最适温度下，H₂O₂酶促反应速率受pH影响的曲线，图乙表示某一温度下， pH=b时H₂O₂酶促分解产生的O₂量随时间的变化。下列说法正确的是 A. 可用H₂O₂和H₂O₂酶探究温度对酶活性的影响 B. 在图甲中C点对应的条件下，向该反应体系中加入双缩脲试剂，溶液仍变紫 C. 其他条件保持相同且适宜，则pH由b变为a时，e点不变 D. 其他条件保持相同且适宜，温度上升时，d点左移 5. 甲型血友病的致病基因为a，位于X染色体上；乙型血友病的致病基因为b，位于常染 色体上。图1示某家庭中血友病的遗传系谱，图2示该家系部分成员与血友病相关基因 的电泳结果（A、B、a、b基因均只电泳出一个条带）。下列相关叙述不正确的是 A. 血友病的甲型和乙型是两对相对性状 B. 3号个体所患的血友病类型为乙型 C. 图2中条带2处的基因为A D. 5号产生bY精子的概率为1/3 6. 荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是在PCR体系中每加入 一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探 针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分 子生成。下列有关叙述正确的是 A. 引物是单链DNA或单链RNA，引物1、2的碱基序列相同 B. Taq酶催化DNA的合成方向总是从子链的5'端向3'端延伸 C. 达到设定荧光强度所经过的循环次数与其起始模板量呈正相关 D. 该项技术可用于检测某种细胞中不同基因表达的翻译水平 7. DNA甲基化是表观遗传中常见机制。下列关于DNA甲基化的叙述，不正确的是 A. DNA甲基化是指甲基基团结合到DNA上，可以抑制基因的转录 B. 基因转录水平与DNA甲基化水平呈负相关性 C. DNA甲基化不会对生物遗传信息和表型产生影响 D. DNA甲基化使肿瘤细胞中抑癌基因表达水平异常降低或沉默 8. 下图是通过显微注射技术将目的基因导入动物受精卵的示意图，相关叙述错误的是 A. 过程1当卵细胞膜和透明带间隙看到两个极体时说明卵子已经受精 B. 过程2注入雄原核的外源基因会整合进入胚胎部分细胞的基因组中 C. 过程3胚胎移植一般选择囊胚或原肠胚，囊胚期进行内细胞分割 D. 过程4获得转基因鼠的前提条件是嵌合体鼠产生的配子中带有目的基因 9. 光滑裸趾虎身体背面光滑无疣，与其它壁虎物种存在明显不同，经线粒体基因组差异分 析后确定其为新物种。下列叙述错误的是 A. 自然选择直接作用于光滑裸趾虎个体的表型 B. 光滑裸趾虎身体背面光滑无疣的性状是可遗传变异和自然选择共同作用的结果 C. 线粒体基因组差异分析可以为进化提供分子水平的证据 D. 光滑裸趾虎与其它壁虎种群可以进行基因交流 10. 图示大脑内某个突触中NO对前后两个神经元的调节途径，调控着生物体的学习和记 忆。下列相关叙述错误的是 A. 图示突触可在大脑中的多个脑区存在，能影响机体的条件反射 B. NO经过途径I的调节，会促进线粒体和细胞核中的生理活动 C. 途径II和III中的NO属于信息分子，能促进突触前膜释放递质 D. 神经递质与突触后膜上的特异性受体结合，引起突触后膜去极化，促进NO合成 11. 科学家在实验中观察到：阻断实验动物垂体与下丘脑之间的血液联系，可导致生殖器官 萎缩；若恢复两者之间正常的血液联系，生殖器官的功能也恢复正常。下列叙述错误的 是 A. 该实验表明垂体的活动受下丘脑控制 B. 该实验动物生殖器官的发育受下丘脑分泌的物质影响 C. 阻断垂体与下丘脑之间的血液联系，依据了实验变量控制中的“加法原理” D. 下丘脑可能分泌了某种化学物质通过体液运输至垂体 12. 人体胃酸性环境是通过H⁺-K⁺泵维持的。人进食后，胃壁细胞质中含有H⁺-K⁺泵的囊泡 会转移到细胞膜上。胃壁细胞通过H⁺-K⁺泵催化ATP水解释放能量，向胃液中分泌H⁺ 同时吸收K⁺，细胞内K⁺又可经通道蛋白顺浓度进入胃腔。下列分析正确的是 A. H⁺-K⁺泵属于通道蛋白，K⁺进入胃腔的方式是协助扩散 B. H⁺-K⁺泵的独特功能与细胞中内质网、高尔基体密切相关 C. H⁺、K⁺在胃壁细胞中的跨膜运输过程均需消耗能量 D. 促进H⁺-K⁺泵功能的药物可有效减少胃酸的分泌 13. 关于植物激素及其调节，下列叙述错误的是 A. 植物激素通过在细胞间传递信息来影响基因的表达 B. 生长素主要促进细胞质分裂，细胞分裂素主要促进细胞核分裂 C. 赤霉素和细胞分裂素在调节种子萌发过程中的作用效果相同 D. 乙烯与脱落酸在器官脱落过程中主要表现为协同作用 14. 下列关于免疫细胞和免疫活性物质的叙述，不正确的是 A. 树突状细胞、巨噬细胞和B细胞都能摄取、加工处理和呈递抗原 B. 细胞因子能促进B淋巴细胞和细胞毒性T细胞的分裂和分化 C. B细胞接受相应抗原和细胞因子双信号的直接刺激后会分泌特异性抗体 D. 靶细胞和辅助性T细胞均可参与细胞免疫过程中细胞毒性T细胞的活化 15. 科研团队在某林地（面积：1km²）选取5个样方（样方面积：20×20m）进行植物多样 性调查，下表为3种乔木的部分调查结果。下列相关叙述不正确的是 样方 编号 马尾松(株) 麻栎(株) 枫香(株) 幼年 成年 老年 幼年 成年 老年 幼年 成年 老年 1 0 1 9 14 2 0 7 1 0 2 0 0 6 20 4 0 11 2 1 3 0 2 6 16 2 2 10 0 0 4 0 0 7 18 2 2 9 1 2 5 0 0 9 15 3 0 6 0 0 A. 估算该林地麻栎种群的个体数量是50000株 B. 林木的种群密度越大，林木的总生物量越高 C. 该林地马尾松、麻栎种群的年龄结构分别为衰退型、增长型 D. 该林地处于森林演替中，采伐部分马尾松能加速演替进程 二、多项选择题：共4题,每题3分,共12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分,选对但不全的得1分,错选或不答的得0分。 16. 滨蟹在海岸潮间带中是玉黍螺的捕食者，玉黍螺取食墨角藻（一种海藻）。四位同学尝试对海岸潮间带滨蟹、玉黍螺两种生物种群的数量变化进行数学建模，得出以下四个模型，其中正确的有 17. 图1、图2是以同一品种芹菜根尖和花粉母细胞为材料进行染色体核型分析的两个典型 图像。相关叙述不正确的是 A. 图1、图2所用材料分别是芹菜根尖和花粉母细胞 B. 提高根尖细胞有丝分裂后期的细胞比例，便于染色体的观察和计数 C. 图1和图2细胞中都会发生基因突变、基因重组和染色体变异 D. 实验中用低浓度KCl溶液适当处理，便于染色体更好地分散 18. 自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N₂的细菌，将玉米种子用自生固氮菌拌种后播 种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和 固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。以下叙述不正确的是 A. 步骤1土样应取自当地深层土壤；步骤3将土壤悬浮液稀释了1000倍 B. 自生固氮菌是自养型生物，不可用血细胞计数板来计数土壤悬浮液中的菌体数 C. 步骤2需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中 D. 步骤4所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源 19. 藜麦蛋白酸奶为植物酸奶，不含胆固醇，具有热量低、易吸收等优点，更适合乳糖不耐 受的人群食用。科学家研究了酸奶发酵过程中白砂糖添加量对酸奶口感和酸度的影响， 酸奶制作过程及实验结果见下图，相关叙述不正确的是 A. 加糖溶解后需将温度升至80℃处理15s，确保杀死所有微生物 B. 接种菌种后需要定时对发酵罐进行放气处理 C. 白砂糖添加量为5%时，乳酸菌发酵最旺盛、口感最佳 D. 白砂糖添加量过大会导致乳酸菌失水过多而死亡，从而影响发酵 三、非选择题：共5题,共58分。除特殊说明外,每空1分。 20. (12分)芹菜是常见的绿叶类蔬菜，具有丰富的营养和药用价值。为研究叶面喷施不同浓度氮肥对叶绿素含量的影响，研究人员进行了相关实验，结果如图1。请回答下列问题。 (1) 类胡萝卜素在光合作用中的主要功能是________；镁元素含量会影响植物光合作用的主要原因有________。 (2) 实验开始后，每隔5d使用不同浓度尿素进行叶面喷施，每个处理组设置________个重复，其主要目的是________；将去除叶脉后的新鲜叶片________（填具体操作）、研磨后获得叶片干粉，然后加入________（填试剂名称）提取叶绿素。 (3) 为进一步研究不同浓度氮素对叶绿素含量影响的分子机制，研究人员提取芹菜叶片________，经逆转录得到cDNA，测定与叶绿素合成、降解有关基因的相对表达量，结果如图2、3。据图1~3推测，与叶绿素合成相关的基因最可能是AggltX和________；与对照组相比，50g·L⁻¹尿素组叶绿素含量下降可能与上述基因表达量变化产生的综合效应导致________有关。 (4) 芹菜中的芹菜素(API)具有抗肿瘤作用，其作用机制可能有________（2分，填序号）。 a.诱导癌细胞凋亡 b.阻滞细胞周期 c.促进癌细胞分化 d.诱导原癌基因表达 e.干扰肿瘤细胞信号传导 进一步研究发现，API通过活化线粒体信号转导诱导胃癌细胞凋亡，具体机制如下：API→Bax/bc1-2比值增加→线粒体跨膜电位降低→（促进）细胞色素C释放→（激活）Caspase-9→（诱导）细胞凋亡。为验证上述机制具有API浓度依赖性，研究人员在分别加入了________的细胞培养液中培养人胃癌细胞株，然后分别测定________。测定各组的实验指标有________。 21. (12分)斑马鱼胚胎发育过程中，能用显微镜直接观察到沿体轴（是身体左右对称的基准线）依序分化形成各种组织器官。我国科学家发现一种无体轴品系，由于hwa基因突变导致其胚胎发育畸形，严重背侧化，形似葫芦。研究者用hwa⁺表示正常基因，hwa⁻表示突变基因，具有2个突变基因的个体基因型表示为hwa⁻/⁻。研究发现，基因型为hwa⁻/⁻的个体表现型也可能正常。为进一步研究hwa的作用机理，研究者进行下图1所示的杂交实验。 (1) 据图1分析，实验一和实验二中F₁的基因型分别是________、________。 (2) 根据两组杂交实验结果可知________（A父本/B母本）的hwa基因对子代胚胎发育起作用。 (3) 综合上述研究结果，对基因型hwa⁻/hwa⁻个体表型正常的解释是________。 (4) 用表型均正常的亲本组合hwa⁺/hwa⁻和hwa⁺/hwa⁻进行杂交，其后代的基因型及比例为________；表型及比例为________。 研究者将hwa⁺基因编码的RNA导入母本基因型为hwa⁻/hwa⁻的胚胎中，以研究hwa⁺基因在胚胎发育中对体轴形成的影响，结果如图2所示。 (5) 综合上述研究，解释葫芦型胚胎形成的原因：________。 (6) 研究表明β-cat蛋白进入细胞核能够促进体轴正常发育，科研人员推测hwa⁺基因编码的mRNA能够促进β-cat蛋白进入细胞核。为验证上述推测，请以母本基因型为hwa⁻/hwa⁻的胚胎为实验材料，在表格中的横线上选填编号，完成实验设计，并预期实验结果。 组别 实验对象 处理方式 预期结果 对照组 基因型为hwa⁻/⁻的胚胎 a________ 细胞核内β-cat蛋白含量不变，细胞中总β-cat蛋白含量无明显差异 c________ 实验组 b________ d________，细胞中总β-cat蛋白含量无明显差异 体轴发育正常个体较多 （供选编号：①不注射hwa⁺基因编码的mRNA ②注射hwa⁺基因编码的mRNA ③注射无关mRNA ④细胞核内β-cat蛋白含量增加 ⑤细胞核内β-cat蛋白含量减少 ⑥细胞核内β-cat蛋白含量基本不变 ⑦体轴发育正常个体较少 ⑧体轴发育正常个体较多 ⑨均发育为葫芦形个体） 22. (11分)下图为某一陆地生态系统的碳循环示意图，括号内的数字表示年变化量，单位为10⁴tC/a，未加括号的数字表示库存量，单位为10⁸tC。在不考虑砍伐、火灾、病虫害等情况下，净生态系统生产力(NEP)可以近似看作是陆地生态系统与大气间的净碳交换量（碳收入和碳支出的差值），NEP是衡量陆地生态系统碳源分布的重要指标。请回答下列问题： (1) 碳在生物群落内部主要以________的形式传递。据图分析，植物一年内用于生长、发育和繁殖等生命活动的能量为________×10⁴tC/a。如果考虑人类生产活动影响等因素，则该生态系统的NEP是________（填“正值”或“负值”）。 (2) 我国已将碳达峰、碳中和纳入生态文明建设整体布局，确定了2030年前实现碳达峰、2060年前实现碳中和的目标。北京冬奥会打造了首个真正实现“碳中和”目标的奥运会。 ① 冬奥核心区绿化造林成活率达99%以上，森林覆盖率达到80%以上。冬奥核心区造林的树种多以本地树种为主，宜乔则乔，宜灌则灌，实现森林树种的多样化。核心区多选择本地物种的原因有________（2分）；“宜乔则乔，宜灌则灌”涉及生态工程的________原理。 ② 北京冬奥会严格做好垃圾分类和处理，专用餐具加入微生物后直接变成水和气体，参与此过程的微生物在生态系统成分中属于________。废旧电池中的重金属离子等物质进入土壤后会被植物吸收，沿________逐级积累，最后可能进入人体；________类的药物进入土壤后会杀死土壤中的部分细菌，破坏土壤生态平衡。 (3) 下列对“碳循环”“碳达峰”“碳中和”的叙述，正确的有________（2分，填序号）。 ①碳循环过程中，无机环境中的碳可以被生物群落反复利用 ②碳中和是指采取植树、节能减排等方式达到CO₂相对“零排放” ③碳达峰是CO₂排放量达历史最高后经平台期保持稳定的过程 ④植物可通过呼吸作用和光合作用参与生态系统的碳循环 23. (12分)阿霉素(DOX)为常用抗肿瘤药物，但可引发心脏过度兴奋导致心脏损伤，甚至可致心力衰竭。研究发现神经电刺激装置(tVNS)刺激耳迷走神经能显著改善心脏损伤，同时对肿瘤还有一定的影响，相关机制见图1。请回答下列问题： (1) 调节心脏功能的基本活动中枢位于________，它是连接________和脑其他部分的重要通路。DOX可能刺激心跳加快，________神经活动占优势。 (2) tVNS刺激耳迷走神经会使得副交感神经末梢释放________，其与心肌细胞膜上的________结合后引发信号转导，引起K⁺外流，心跳减慢，从而改善DOX引发的心脏过度兴奋。 (3) 图中细胞2是________，功能是________。 (4) 细胞3除了增殖分化为细胞4外还增殖分化为________，物质A是________。 (5) 科研人员将荷瘤小鼠分为四组，分别为对照组、tVNS组（仅刺激耳迷走神经）、DOX处理组（仅阿霉素处理）、tVNS+DOX处理组（刺激耳迷走神经和阿霉素联合处理），实验结果见图2、3，已知INF-γ是一种蛋白质，能上调细胞2上MHC-I类分子数量，同时能抑制肿瘤中血管的生成。 ① 根据图2可以得出的结论是________（2分）。 ② 据题意推测，tVNS+DOX处理组通过________使机体免疫系统能更好地识别肿瘤细胞，并切断肿瘤的营养供应，从而抑制肿瘤生长。 24. (11分)HT1是一种因FAH酶缺陷引起的酪氨酸代谢异常产生有毒物质引发肝损伤的疾病。研究团队试图基于益生大肠杆菌(EcN)设计一种能高效代谢酪氨酸的肠道工程益生菌(EcN-HT)用于治疗HT1模型小鼠，如图1所示。其中，酪氨酸转运蛋白TyrP的基因TyrP和酪氨酸高效代谢重要酶HpaBC的基因HpaBC均为目的基因。 (1) EcN的H1型鞭毛通过单个菌之间的相互作用在肠道上皮形成紧密的网络结构，像一层防护网，可以抑制病原菌对肠道上皮细胞的侵袭，这种防御属于机体的第________道防线，属于________免疫（填特异性免疫或非特异性免疫）。 (2) 图1中，TyrP需要表达在EcN-HT的质膜上，以促进对酪氨酸的吸收。则EcN-HT中参与TyrP的合成到定位的结构分别是________。 研究人员以质粒pUC57-pfnr为载体，构建pUC57-pfnr-T和pUC57-pfnr-H两种重组质粒。图2表示了质粒pUC57-pfnr及相关限制性内切核酸酶的识别序列和切割位点。 （注：pfnr：厌氧启动子；ter：终止子；ori：复制原点；Kan：卡那霉素抗性基因；Cm：氯霉素抗性基因；lacZ：表达的蛋白可将无色的X-gal水解成蓝色产物） (3) 采用“2种重组质粒分别构建→pUC57-pfnr-T导入EcN并筛选得EcN-T→pUC57-pfnr-H导入EcN-T并筛选得EcN-HT”的方法时，为实现高效构建和筛选，从①~⑩中合理选择编号填入表。 （供选编号：①BamH Ⅰ ②Hind Ⅲ ③Bgl Ⅱ ④EcoR Ⅰ ⑤Mbo Ⅰ ⑥Sma Ⅰ ⑦卡那霉素 ⑧氯霉素 ⑨X-gal ⑩琼脂） 目的基因 选择限制性内切核酸酶 构建的重组质粒 重组质粒导入情况 筛选时培养基应加物质 筛选得 受体细胞 TyrP ④⑥ pUC57-pfnr-T 导入EcN a________ EcN-T HpaBC b________ pUC57-pfnr-H 导入EcN-T c________ EcN-HT (4) 目的基因TyrP存在于E.coli K12菌株中。根据表方案，需在该目的基因两侧添加相应的限制性内切核酸酶识别序列后才能与质粒成功连接。图3显示了该目的基因两端的序列，PCR时设计的引物应是________（单选），基因工程的核心步骤是________。 A. 5' – GAATTC AAGGCA -3' 和 5' - CCCGGG CATTGT -3' B. 5' – AAGGCA CCCGGG -3' 和 5' - CATTGT GAATTC -3' C. 5' – AAGGCA CCCGGG -3' 和 5' - TGTTAC GAATTC -3' D. 5' – CCCGGG AAGGCA -3' 和 5' - GAATTC TGTTAC -3' (5) 下列属于分子水平检测EcN-HT是否构建成功的有________。（2分，编号选填） ①PCR后利用凝胶电泳鉴定HpaBC和TyrP是否存在于EcN-HT工程菌中 ②检测EcN-HT工程菌中是否存在HpaBC和TyrP转录出的mRNA ③检测EcN-HT工程菌中是否存在HpaBC和TyrP蛋白 ④检测EcN-HT工程菌是否同时具有抗氨苄青霉素和氯霉素的能力 ⑤检测EcN-HT工程菌是否有更强的代谢酪氨酸的能力 1 / 2 学科网（北京）股份有限公司 $